RU2698199C1 - Средство для подавления экспрессии генов, связанных с накоплением холестерина макрофагами человека - Google Patents
Средство для подавления экспрессии генов, связанных с накоплением холестерина макрофагами человека Download PDFInfo
- Publication number
- RU2698199C1 RU2698199C1 RU2018118376A RU2018118376A RU2698199C1 RU 2698199 C1 RU2698199 C1 RU 2698199C1 RU 2018118376 A RU2018118376 A RU 2018118376A RU 2018118376 A RU2018118376 A RU 2018118376A RU 2698199 C1 RU2698199 C1 RU 2698199C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- expression
- genes
- composition
- cholesterol
- accumulation
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
Abstract
Изобретение относится к области медицины, кардиологии и генной терапии. Предложено средство для лечения атеросклероза, представляющее собой композицию для подавления экспрессии генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15, тесно связанных с накоплением холестерина макрофагами человека. Композиция состоит из наночастиц Curdlan, выступающих в качестве носителя, и siRNA, специфичных по отношению к указанным генам. Изобретение обеспечивает создание малотоксичной композиции, подавляющей экспрессию генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15.
Description
Изобретение относится к области медицины, кардиологии и генной терапии и может быть использовано для лечения атеросклероза путем регуляции генной экспрессии. Изобретение представляет собой композицию для подавления экспрессии генов посредством механизма интерференции РНК,- состоящую из наночастиц Curdlan для адресной доставки siRNA в макрофаги человека и собственно siRNA. Изобретение обеспечивает создание малотоксичной композиции, подавляющей экспрессию генов, тесно связанных с накоплением холестерина макрофагами человека.
Атеросклероз представляет собой патологическое ремоделирование артерий, которое является основной причиной заболеваемости и смертности в развитых странах; эта патология лежит в основе инфаркта миокарда, инсульта и заболевания периферических артерий. На сегодняшний день терапия атеросклероза включает применение лекарственных и хирургических воздействий, имеющих многочисленные недостатки и требующих дальнейшего совершенствования (Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза. Российские рекомендации, IV пересмотр. / Москва, 2009 г. - 80 с.; Blumenthal R.S., Kapur N.K. Can a potent statin actually regress coronary atherosclerosis? // JAMA. - 2006. - Vol. 295. - P. 1583-1584; Blumenthal R.S., Michos E.D. The HALTS Trial - Halting Atherosclerosis or Halted Too Early? // N. Engl J. Med. 2009. - Vol. 361. - P. 2178-2180; Ibanez В., Badimon J.J., Garcia M.J. Diagnosis of Atherosclerosis by Imaging. // Am. J. Med. - 2009. - Vol. 22, Issue 1. - Supplement: S15-S25.; Klein L.W. Atherosclerosis Regression, Vascular Remodeling, and Plaque Stabilization. // J. Am. Coll. Cardiol. - 2007. - Vol. 49. - P. 271-273; Gustafsen C. et al. The Hypercholesterolemia-Risk Gene SORT1 Facilitates PCSK9 Secretion. // Cell Metabolism. - 2014 - Vol. 19, Issue 2, p. 310-318.).
Многие антиатеросклеротические препараты (например, статины) снижают проявления симптомов атеросклероза и являются достаточными для лечения некоторой части пациентов, но они не воздействуют на первопричины патогенетических звеньев заболевания. Таким образом, разработка новых подходов к лечению и профилактике атеросклероза остается актуальной задачей.
Недавнее открытие явления интерференции РНК (РНК-и) как одного из основных механизмов посттранскрипционной регуляции генов дало возможность использовать этот феномен для создания новых лекарственных средств, способных эффективно и безопасно подавлять экспрессию генов-мишеней. РНК-и позволяет специфически «выключать» экспрессию генов-мишеней с помощью молекул siRNA (small interfering RNA). Для эффективной доставки siRNA в клетки-мишени применяют специальные молекулы-носители, формирующие комплексы с siRNA. Комплексование приводит к компактизации молекул РНК, их защите от деградации клеточными РНКазами, что позволяет им эффективно проникать внутрь клетки и достигать нужной мишени.
Главными преимуществами использования препаратов на основе РНК-и являются высокая специфичность подавления экспрессии генов, вовлеченных в патогенез, а также высокая эффективность их подавления (до 90%), т.к. вводимые siRNA способны действовать в крайне низких концентрациях. Кроме того, привлекательной является сравнительная дешевизна методики. Синтез олигонуклеотидов в настоящее время вполне доступен и прост в масштабировании. Этот факт дает препаратам, созданным на базе siRNA, важное конкурентное преимущество, например, по сравнению с моноклональными антителами. Открытие РНК-интерференции дало новые возможности для регуляции экспрессии патогенетически значимых генов, в том числе и генов, вовлеченных в инициацию и развитие атеросклероза. РНК-и активируется молекулами siRNA, которые имеют нуклеотидную последовательность, комплементарную гену-мишени. Несмотря на сравнительно недавнее открытие РНК-и, уже имеются изобретения по применению данного подхода к терапии болезни Хантингтона, онкологических заболеваний, начались клинические исследования метода лечения дистрофии желтого пятна сетчатки с помощью siRNA.
Авторами настоящего изобретения обнаружено (неопубликованные данные), что атерогенез приводит к изменению параметров (активности, экспрессии) генов, которые могут быть определены в образцах крови человека. При проведении транскриптомного анализа макрофагов (одного из важнейших клеточных типов, участвующих в атерогенезе) были выявлены гены, активность которых существенно изменяется при взаимодействии клеток с модифицированными липопротеидами низкой плотности. С помощью методов биоинформатики эти гены, тесно связанные с накоплением холестерина макрофагами человека, идентифицированы как IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1,DUSP1 и IL15.
Таким образом, идентифицированные гены (маркеры, мастер-регуляторы), ответственные за накопление холестерина макрофагами человека, представляют значительный интерес для генотерапии атеросклероза с помощью РНК-интерференции.
Аналогом заявляемого изобретения является патент на изобретение №: 2563989 «Композиция для подавления экспрессии гена цитокина интерлейкина-4» (сентябрь 27, 2015), представляющая собой композицию, состоящую из катионного дендримерного пептида - LTP и двух молекул siRNA против гена IL-4 для подавления аллергического воспаления путем блокировки экспрессии гена провоспалительного цитокина IL-4.
Задачей предлагаемого изобретения является создание средства для лечения атеросклероза..
Техническим результатом предлагаемого изобретения является создание малотоксичной композиции, подавляющей экспрессию генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15.
Указанная задача решается, а технический результат достигается за счет того, что композиция для подавления экспрессии указанных генов посредством механизма интерференции РНК состоит из носителя (наночастиц Curdlan) и siRNA, поставляемых компанией Ambion (ThermoFisher). Выбор оптимальных молекул siRNA для композиции соответствует методу, описанному в статье (Lu Z.J. and Mathews D.H., 2008).
В свою очередь, получение наночастиц Curdlan осуществляли следующим образом (Ganbold Т, Baigude Н. Design of Mannose-Functionalized Curdlan Nanoparticles for Macrophage-Targeted siRNA Delivery. ACS Appl Mater Interfaces. 2018 May 2;10(17):14463-14474; Han J, Caia J, Borjihan W, Ganbolda T, Rana TM, Baigude H. Preparation of Novel Curdlan Nanoparticles for Intracellular siRNA Delivery. Carbohydrate polymers. 2015; 117:324-330). 6-Амино-6-дехсоид-кундлан (80 мг, 6AC-100) растворяли в 3 мл натрий-фосфатного буфера (PBS) (рН=9;0) и добавляли 1 мл раствора диэтилсульфоксида 4-изотиоцианатофенил. Добавляли альфа-Д-маннопиранозид (18,7 мг) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли смесь гидрохлорид имидазол-4-уксусной кислоты (31,5 мг) и гидрохлорид 1-этил-3-карбодиимида (22,1 мг) в 0,1 М буфере MES (рН=6,0). Перемешивание продолжалось при комнатной температуре в течение 6 часов. После продукт чистили путем диализа (размер пор 3500) против деионизированной воды в течение 2 дней, обессоливающая колонка PD-10 (GE Healthcare) использовалась для дальнейшей очистки конечного продукта, который был получен при помощи сублимационной сушки.
Полученный конечный продукт (1 мкг) смешивается с siRNA (25 мкМ), готовая композиция вводится в кровь пациентов из расчета 25 мг/кг. В предварительных экспериментах на лабораторных животных и пациентах-добровольцах показано, что заявляемое изобретение - малотоксичная композиция, подавляющая экспрессию генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15, может применяться как отдельно, так и в составе лекарственных препаратов для лечения атеросклероза. Средство для лечения атеросклероза, представляющее собой композицию для подавления экспрессии генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15, тесно связанных с накоплением холестерина макрофагами человека, за счет интерференции РНК, состоящую из наночастиц Curdlan, выступающих в качестве носителя, и siRNA, специфичных по отношению к указанным генам.
Claims (1)
- Средство для лечения атеросклероза, представляющее собой композицию для подавления экспрессии генов IL7R, IL7, TIGIT, CXCL8, F2RL1, EIF2AK3, TSPYL2, ANXA1, DUSP1 и IL15, тесно связанных с накоплением холестерина макрофагами человека, за счет интерференции РНК, состоящую из наночастиц Curdlan, выступающих в качестве носителя, и siRNA, специфичных по отношению к указанным генам.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018118376A RU2698199C1 (ru) | 2018-05-18 | 2018-05-18 | Средство для подавления экспрессии генов, связанных с накоплением холестерина макрофагами человека |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018118376A RU2698199C1 (ru) | 2018-05-18 | 2018-05-18 | Средство для подавления экспрессии генов, связанных с накоплением холестерина макрофагами человека |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2698199C1 true RU2698199C1 (ru) | 2019-08-23 |
Family
ID=67733840
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018118376A RU2698199C1 (ru) | 2018-05-18 | 2018-05-18 | Средство для подавления экспрессии генов, связанных с накоплением холестерина макрофагами человека |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2698199C1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2553561C2 (ru) * | 2006-07-21 | 2015-06-20 | Сайленс Терапьютикс Аг | Средства ингибирования экспрессии протеинкиназы 3 |
| RU2563989C1 (ru) * | 2014-11-20 | 2015-09-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научный центр "Институт иммунологии" Федерального медико-биологического агентства России (ФГБУ "ГНЦ Институт иммунологии" ФМБА России) | Композиция для подавления экспрессии гена цитокина интерлейкина-4 |
| RU2624048C2 (ru) * | 2010-10-06 | 2017-06-30 | Курна, Инк. | Лечение заболеваний, связанных с геном сиалидазы 4 (neu4), путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта гена neu4 |
-
2018
- 2018-05-18 RU RU2018118376A patent/RU2698199C1/ru active IP Right Revival
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2553561C2 (ru) * | 2006-07-21 | 2015-06-20 | Сайленс Терапьютикс Аг | Средства ингибирования экспрессии протеинкиназы 3 |
| RU2624048C2 (ru) * | 2010-10-06 | 2017-06-30 | Курна, Инк. | Лечение заболеваний, связанных с геном сиалидазы 4 (neu4), путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта гена neu4 |
| RU2563989C1 (ru) * | 2014-11-20 | 2015-09-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научный центр "Институт иммунологии" Федерального медико-биологического агентства России (ФГБУ "ГНЦ Институт иммунологии" ФМБА России) | Композиция для подавления экспрессии гена цитокина интерлейкина-4 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| PRADHAN-NABZDYK L. et al. Current siRNA targets in atherosclerosis and aortic aneurysm. Discov Med. 2014 May; 17(95): 233-46. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sharma et al. | Targeting PI3K-AKT/mTOR signaling in the prevention of autism | |
| Yin et al. | Biomimetic anti-inflammatory nano-capsule serves as a cytokine blocker and M2 polarization inducer for bone tissue repair | |
| EP3641819B1 (en) | Use of cannabidiol in the treatment of tuberous sclerosis complex | |
| Wang et al. | miR-126 regulation of angiogenesis in age-related macular degeneration in CNV mouse model | |
| Chen et al. | Anti-inflammatory effect of geniposide on osteoarthritis by suppressing the activation of p38 MAPK signaling pathway | |
| JP2021508434A (ja) | Ｖｅｇｆ−ａポリペプチドをコードする改変ｒｎａを送達するための脂質ナノ粒子 | |
| Pollreisz et al. | Retinal pigment epithelium cells produce VEGF in response to oxidized phospholipids through mechanisms involving ATF4 and protein kinase CK2 | |
| CA2802414C (en) | Agent for treating renal fibrosis | |
| CN102459587A (zh) | 结合海帕西啶的核酸 | |
| Tuo et al. | Anti-inflammatory recombinant TSG-6 stabilizes the progression of focal retinal degeneration in a murine model | |
| CN113194752A (zh) | Pi3k相关疾病或病症的组合疗法 | |
| CN105025928A (zh) | 用于递送治疗剂的可生物蚀解的硅基组合物 | |
| Wang et al. | MicroRNA-21 silencing prolongs islet allograft survival by inhibiting Th17 cells | |
| Yin et al. | Zinc oxide nanoparticles ameliorate collagen lattice contraction in human tenon fibroblasts | |
| Traves et al. | Anti-inflammatory actions of acanthoic acid-related diterpenes involve activation of the PI3K p110γ/δ subunits and inhibition of NF-κB | |
| Vincenzi et al. | Pharmacology of adenosine receptors: Recent advancements | |
| RU2698199C1 (ru) | Средство для подавления экспрессии генов, связанных с накоплением холестерина макрофагами человека | |
| CN106714821A (zh) | Jnk信号转导途径的细胞穿透肽抑制剂用于治疗多种疾病的新用途 | |
| Zhang et al. | Protective roles of xijiao dihuang Tang on coronary artery injury in Kawasaki disease | |
| WO2020180534A1 (en) | Methods and compositions for protein delivery | |
| US20230277559A1 (en) | Compositions and Methods for the Treatment of Inflammation in Urological Pathology | |
| JP6562906B2 (ja) | 転移を阻害し、線維症を処置し、かつ創傷の治癒を向上させる方法および組成物 | |
| Shui et al. | Jieduquyuziyin prescription suppresses IL-17 production and Th17 activity in MRL/lpr mice by inhibiting expression of Ca 2+/calmodulin-dependent protein kinase-4 | |
| JP2014511392A (ja) | 創傷を治癒または治療するための分子標的 | |
| Tran et al. | Degradation of MK2 with natural compound andrographolide: A new modality for anti-inflammatory therapy |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20210519 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20220203 |