RU2693518C1 - Способ количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах методом газожидкостной хроматографии - Google Patents
Способ количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах методом газожидкостной хроматографии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2693518C1 RU2693518C1 RU2018141443A RU2018141443A RU2693518C1 RU 2693518 C1 RU2693518 C1 RU 2693518C1 RU 2018141443 A RU2018141443 A RU 2018141443A RU 2018141443 A RU2018141443 A RU 2018141443A RU 2693518 C1 RU2693518 C1 RU 2693518C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- phenol
- quantitative determination
- temperature
- medicinal preparations
- determination
- Prior art date
Links
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 98
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 75
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 238000001030 gas--liquid chromatography Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims description 15
- QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 2-phenoxyethanol Chemical compound OCCOC1=CC=CC=C1 QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229960005323 phenoxyethanol Drugs 0.000 claims description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 6
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 claims description 5
- 239000001307 helium Substances 0.000 claims description 5
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 claims description 5
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 claims description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 10
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 abstract description 4
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 abstract 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 abstract 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 abstract 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 8
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N Aminoantipyrine Natural products CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 5
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 5
- 239000012898 sample dilution Substances 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 4
- 229940031937 polysaccharide vaccine Drugs 0.000 description 4
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 4
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000037386 Typhoid Diseases 0.000 description 3
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 201000008297 typhoid fever Diseases 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- VEQOALNAAJBPNY-UHFFFAOYSA-N antipyrine Chemical compound CN1C(C)=CC(=O)N1C1=CC=CC=C1 VEQOALNAAJBPNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 229940042743 immune sera Drugs 0.000 description 1
- 210000004201 immune sera Anatomy 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 229960005222 phenazone Drugs 0.000 description 1
- -1 potassium ferricyanide Chemical compound 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области здравоохранения, в частности к контролю качества биологических лекарственных препаратов, и может быть использовано для количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах, содержащих фенол в качестве консерванта. Изобретение представляет собой способ количественного определения фенола с помощью газожидкостной хроматографии. Способ предполагает использование исходного препарата без предварительного разведения, автоматический отбор проб, хроматографическое разделение веществ, входящих в состав препарата, и использование внутреннего стандарта, что исключает возможность неспецифического влияния состава образца на количественное определение фенола и снижает вероятность случайной и/или систематической ошибки определения. Предлагаемый способ является более специфичным и точным по сравнению со способами, применяемыми в настоящее время для количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах. 2 з.п. ф-лы, 8 ил., 4 табл.
Description
Изобретение относится к области фармации, в частности к лабораторной экспертизе биологических лекарственных препаратов (далее - БЛП), а именно к количественному определению примесей и вспомогательных веществ, содержащихся в БЛП.
Известен способ определения фенола в аллергенах [1], состоящий в определении фенола при помощи спектрофотометрии. Способ основан на способности фенола поглощать ультрафиолетовое излучение при длине волны 269 нм.
К недостаткам этого способа следует отнести необходимость пробоподготовки (разведение образца), относительную точность и специфичность, поскольку все органические соединения, имеющие в своей структуре ароматическое бензольное кольцо, обладают способностью поглощать излучение в ультрафиолетовой области, в частности, при длине волны 269 нм. Данный способ можно считать специфичным, только допуская, что испытуемый образец не содержит подобных веществ.
Также известен способ количественного определения фенола в крови [2], заключающийся в экстракции фенола из крови и последующем определении его с помощью метода газожидкостной хроматографии (далее - ГЖХ).
К недостаткам этого способа следует отнести необходимость пробоподготовки (экстракция фенола и разведение образца), а также ограниченную область применения: способ разработан для определения содержания фенола в крови и не пригоден для определения содержания фенола в БЛП ввиду различий состава образцов и диапазона концентраций фенола.
Также известен способ, применяемый для определения фенола в иммунных сыворотках и вакцинах [3], состоящий в определении фенола колориметрически. Способ основан на образовании антипиринового красителя при реакции 4-аминоантипирина с фенолами в щелочной среде в присутствии окислителя (феррицианида калия) и последующем измерении интенсивности окраски в анализируемом образце.
К недостаткам этого способа следует отнести необходимость пробоподготовки (разведение образца), длительность, необходимость использования дополнительных реагентов, а также относительную точность и специфичность способа: реакцию с 4-аминоантипирином дают все вещества, относящиеся к классу фенолов.
В качестве прототипа выбран способ количественного определения фенола спектрофотометрическим методом в иммунобиологических лекарственных препаратах [4].
К недостаткам этого способа следует отнести необходимость пробоподготовки (предварительного разведения препаратов в 100 раз), в результате которой концентрация фенола в испытуемом образце соответствует диапазону аналитической области способа. А также относительную точность и специфичность, поскольку все органические соединения, имеющие в своей структуре ароматическое бензольное кольцо, обладают способностью поглощать излучение в ультрафиолетовой области, в частности, при длине волны 269 нм. Данный способ можно считать специфичным, только допуская, что испытуемый образец не содержит подобных веществ.
Техническим результатом изобретения является повышение специфичности и точности количественного определения фенола в БЛП методом ГЖХ.
В данном тексте под терминами специфичность и точность [5, 6] подразумевается следующее.
Специфичность - это способность аналитической методики однозначно оценивать определяемое вещество в присутствии сопутствующих компонентов.
Для описания точности метода измерений используют два термина: «правильность» и «прецизионность». Термин «правильность» характеризует степень близости среднего арифметического значения результатов измерений к истинному или принятому опорному значению, термин «прецизионность» -степень близости результатов измерений друг к другу.
Определение правильности методики непосредственно связано с оценкой линейности. Линейность методики - это наличие линейной зависимости аналитического сигнала от концентрации или количества определяемого вещества в анализируемой пробе в пределах аналитической области. Аналитическая область - это интервал между верхним и нижним значениями аналитических характеристик определяемого компонента в объекте анализа. Для представления прецизионности используют результаты, полученные в условиях «повторяемости (сходимости)» и в условиях «воспроизводимости».
Поставленная задача решается благодаря:
- расширению спектра аналитического оборудования;
- подбору хроматографической колонки, позволяющей обеспечить эффективное отделение фенола от веществ, входящих в состав образца;
- подбору условий ГЖХ: режима подачи несущего газа (гелия); скорости потока несущего газа (гелия); условий деления потока несущего газа (гелия), температуры инжектора, температуры термостата хроматографической колонки; температуры детектора, позволяющих обеспечить эффективное отделение фенола от веществ, входящих в состав образца;
- подбору линейной области концентраций фенола, соответствующей содержанию фенола в БЛП;
- исключению этапа пробоподготовки (разведения образца);
- выбору внутреннего стандарта, позволяющего контролировать эффективность хроматографического разделения.
В заявляемом изобретении способ количественного определения фенола в БЛП осуществляется методом ГЖХ.
Способ количественного определения фенола в БЛП методом ГЖХ реализуется следующим образом.
В качестве внутреннего стандарта используют раствор 2-феноксиэтанола в абсолютном этаноле, концентрацией 5 мг/мл.
В качестве рабочего раствора фенола используют раствор фенола в этаноле концентрацией 5 мг/мл.
Приготовление стандартных растворов с концентрацией фенола 1-5 мг/мл:
0,2 мл рабочего раствора фенола помещают в виалу №1, объемом 1,5 мл для хроматографирования, добавляют воду 0,8 мл, добавляют 0,5 мл внутреннего стандарта, перемешивают. Полученный раствор представляет собой стандартный раствор с концентрацией фенола 1 мг/мл, содержащий внутренний стандарт.
0,6 мл рабочего раствора фенола помещают в виалу №2, объемом 1,5 мл для хроматографирования, добавляют воду 0,4 мл, добавляют 0,5 мл внутреннего стандарта, перемешивают. Полученный раствор представляет собой стандартный раствор с концентрацией фенола 3 мг/мл, содержащий внутренний стандарт.
1,0 мл рабочего раствора фенола помещают в виалу №3, объемом 1,5 мл для хроматографирования, добавляют 0,5 мл внутреннего стандарта, перемешивают. Полученный раствор представляет собой стандартный раствор с концентрацией фенола 5 мг/мл, содержащий внутренний стандарт.
Исследуемый образец: 1,0 мл образца БЛП, содержащий фенол в концентрации 1,5-4 мг/мл, без предварительного разведения, вносят в виалу №4 для хроматографирования объемом 1,5 мл. В ту же виалу добавляют 0,5 мл внутреннего стандарта, перемешивают.
Последовательность ввода образцов соответствует номеру виалы.
Оптимальные условия ГЖХ были подобраны для колонки DB-WAX (размер 30 м × 0,25 мм × 0,25 мкм) фирмы Agilent Technologies; температура инжектора 250°С; деление потока 40:1; объем пробы 0,5 мкл; газ-носитель гелий; режим постоянное давление; скорость потока 1,4 мл/мин; температурный профиль печи: начальная температура 160°С, выдержка 3 мин, градиент 40°С/мин до температуры 200°С выдержка 0,6 мин, градиент 40°С/мин до температуры 220°С; время анализа 7,133 мин; пламенно-ионизационный детектор, температура детектора 250°С.
Критерии пригодности хроматографической системы, установленные в процессе валидации способа:
- число теоретических тарелок не менее 180000;
- разрешение пиков фенола и внутреннего стандарта не менее 15;
- коэффициент асимметрии пика фенола от 0,8 до 1,2;
- время удерживания пика фенола около 5,0 мин;
- время удерживания внутреннего стандарта около 6,0 мин.
Расчет производят относительно внутреннего стандарта, переводя величину полученного аналитического сигнала в относительные единицы.
Оценку результатов производят, используя график регрессионной зависимости относительных площадей пика фенола от концентрации фенола в стандартных растворах.
Существенные отличительные признаки заявляемого изобретения:
1. Повышение специфичности способа за счет подбора хроматографической колонки и условий газохроматографического разделения, позволяющих обеспечить эффективное отделение фенола от веществ, входящих в состав образца.
2. Повышение точности (правильности и прецизионности) способа за счет:
- исключения этапа пробоподготовки;
- проведения анализа с использованием линейной области способа, соответствующей концентрации фенола в БЛП;
- использования внутреннего стандарта, позволяющего контролировать эффективность газохроматографического разделения и проводить расчет в относительных единицах.
3. Расширение спектра аналитического оборудования пригодного для количественного определения фенола в БЛП.
Краткое описание чертежей и иных материалов (Приложения 1-5):
Фиг. 1. Хроматограмма образца препарата «Аллерген Н-ал весенняя смесь ранняя». На хроматограмме обозначены пики фенола (время удерживания 5,202 мин и площадь пика 142,213) и 2-феноксиэтанола (время удерживания 6,304 мин и площадь пика 187,318).
Фиг. 2. Хроматограмма образца вакцины брюшнотифозной полисахаридной «Вианвак». На хроматограмме обозначены пики фенола (время удерживания 5,202 мин и площадь пика 95,2378) и 2-феноксиэтанола (время удерживания 6,302 мин и площадь пика 190,774).
Фиг. 3. Хроматограмма образца вакцины пневмококковой поливалентной полисахаридной «Пневмо 23». На хроматограмме обозначены пики фенола (время удерживания 5,200 мин и площадь пика 156,108) и 2-феноксиэтанола (время удерживания 6,304 мин и площадь пика 176,932).
Фиг. 4. Хроматограмма стандартного раствора фенола с концентрацией 1 мг/мл. На хроматограмме обозначены пики фенола (время удерживания 5,202 мин и площадь пика 124,811) и 2-феноксиэтанола (время удерживания 6,305 мин и площадь пика 181,925).
Фиг. 5. Хроматограмма стандартного раствора фенола с концентрацией 3 мг/мл. На хроматограмме обозначены пики фенола (время удерживания 5,200 мин и площадь пика 259,401) и 2-феноксиэтанола (время удерживания 6,302 мин и площадь пика 170,32).
Фиг. 6. Хроматограмма стандартного раствора фенола с концентрацией 5 мг/мл. На хроматограмме обозначены пики фенола (время удерживания 5,200 мин и площадь пика 367,874) и 2-феноксиэтанола (время удерживания 6,300 мин и площадь пика 196,225).
Фиг. 7. График регрессионной зависимости относительных площадей пиков от концентрации фенола в стандартных растворах. На рисунке представлен калибровочный график, полученный при воспроизведении заявляемого способа и отражающий зависимость отношения площади пика фенола к площади пика внутреннего стандарта от концентрации фенола в стандартном растворе.
Фиг. 8. График регрессионной зависимости оптических плотностей от концентрации фенола в стандартных растворах. На рисунке представлен калибровочный график, полученный при воспроизведении способа прототипа и отражающий зависимость оптической плотности от концентрации фенола в стандартном растворе.
Таблица 1. Оценка прецизионности (повторяемости и воспроизводимости) способа количественного определения фенола заявляемым способом. Исследование проводили с применением метода добавок.
Таблица 2. Оценка прецизионности (повторяемости и воспроизводимости) способа количественного определения фенола способом прототипа. Исследование проводили с применением метода добавок.
Таблица 3. Оценка правильности способа количественного определения фенола заявляемым способом. Исследование проводили с применением метода добавок.
Таблица 4. Оценка правильности способа количественного определения фенола способом прототипа. Исследование проводили с применением метода добавок.
Возможность применения заявляемого изобретения показана следующими примерами:
Пример 1. Определение фенола в препарате «Аллерген Н-ал весенняя смесь ранняя», производство «Севафарма» а.о., Чешская республика (Фиг. 1) заявляемым способом.
Приготовление стандартных растворов с концентрацией фенола 1-5 мг/мл проводят в соответствии с описанием изобретения.
Исследуемый образец: 1,0 мл препарата «Аллерген Н-ал весенняя смесь ранняя», без предварительного разведения, вносят в виалу №4 для хроматографирования объемом 1,5 мл. В ту же виалу добавляют 0,5 мл внутреннего стандарта, перемешивают.
Последовательность ввода образцов соответствует номеру виалы.
Подтверждение критериев пригодности хроматографической системы:
- коэффициент асимметрии пика 0,96;
- число теоретических тарелок 205260;
- разрешение пика 21,3.
Результат: содержание фенола в препарате 1,87 мг/мл. Данный пример показывает возможность использования заявляемого способа для определения фенола в указанном препарате.
Пример 2. Определение фенола в вакцине брюшнотифозной полисахаридной «Вианвак», производства «Гритвак», Россия (Фиг. 2) заявляемым способом.
Приготовление стандартных растворов с концентрацией фенола 1-5 мг/мл проводят в соответствии с описанием изобретения.
Исследуемый образец: 1,0 мл вакцины брюшнотифозной полисахаридной «Вианвак» без предварительного разведения вносят в виалу №4 для хроматографирования объемом 1,5 мл. В ту же виалу добавляют 0,5 мл внутреннего стандарта, перемешивают.
Подтверждение критериев пригодности хроматографической системы:
- коэффициент асимметрии пика 0,98;
- число теоретических тарелок 232452;
- разрешение пика 22,26.
Результат: содержание фенола в препарате 1,29 мг/мл. Данный пример показывает возможность использования заявляемого способа для определения фенола в указанной вакцине.
Пример 3. Определение фенола в вакцине пневмококковой поливалентной полисахаридной «Пневмо 23», производства «Санофи Пастер», Франция. (Фиг. 3) заявляемым способом.
Приготовление стандартных растворов с концентрацией фенола 1-5 мг/мл проводят в соответствии с описанием изобретения.
Исследуемый образец: 1,0 мл вакцины пневмококковой поливалентной полисахаридной «Пневмо 23» без предварительного разведения вносят в виалу №4 для хроматографирования объемом 1,5 мл. В ту же виалу добавляют 0,5 мл внутреннего стандарта, перемешивают.
Подтверждение критериев пригодности хроматографической системы:
- коэффициент асимметрии пика 0,95;
- число теоретических тарелок 232233;
- разрешение пика 21,95.
Результат: содержание фенола в препарате 2,06 мг/мл. Данный пример показывает возможность использования заявляемого способа для определения фенола в указанной вакцине.
Пример 4. Сравнение специфичности способов определения фенола.
В качестве образцов использованы препараты, отличные по составу (Примеры 1-3).
Данный пример показывает, что определение фенола заявляемым способом обладает большей специфичностью за счет возможности разделения компонентов исследуемого образца с последующей идентификацией пика фенола и его количественного определения.
Пример 5. Сравнение линейности способов определения фенола.
Данный пример показывает, что:
1. Аналитическая область заявляемого способа, охватывающая диапазон концентраций допустимого содержания фенола в препаратах БЛП, позволяет исключить стадию пробоподготовки (предварительное разведение образца), что повышает точность количественного определения за счет отсутствия дополнительного источника систематической и/или случайной ошибки определения.
2. Коэффициент детерминации, характеризующий линейность заявляемого способа, ближе к 1, что позволяет сделать вывод о большей точности значений, вычисленных с применением уравнения регрессионной зависимости заявляемого способа.
Пример 6. Сравнение прецизионности (повторяемости и воспроизводимости) способов определения фенола.
Для подтверждения прецизионности (повторяемости и воспроизводимости) заявляемого способа были проведены три независимых серии испытаний исходного образца вакцины пневмококковой поливалентной полисахаридной «Пневмо 23» с исходным содержанием фенола 2,59 мг/мл и 2,23 мг/мл и образцов с добавлением известного количества фенола. Каждый образец готовился в шести повторностях. Результаты определения повторяемости и воспроизводимости способа приведены в Таблице 1 (Приложение 4).
Для сравнительной оценки прецизионности соответствующее количество образцов и измерений было сделано с применением спектрофотометрического способа. Результаты приведены в Таблице 2 (Приложение 4).
Данный пример показывает, что прецизионность заявляемого способа, характеристикой которой являются величины коэффициентов вариации значений, полученных в условиях повторяемости и воспроизводимости, выше, чем прецизионность способа-прототипа.
Пример 7. Сравнение правильности способов определения фенола.
Правильность способа подтверждают с помощью метода добавок. Вычисляют процент выявления фенола в образце относительно теоретического (истинного) значения. За теоретическое значение принимают сумму исходного количества фенола в препарате и количества фенола внесенного в препарат (добавленного). В качестве образцов использовали вакцину пневмококковую поливалентную полисахаридную «Пневмо 23» с исходным содержанием фенола 2,59 мг/мл и 2,23 мг/мл. Рассчитывали диапазоны значений процентов выявления для каждой из взятых концентраций. Максимальный диапазон значений процентов выявления определяли с учетом наименьшего и наибольшего из всех полученных значений. Результаты приведены в Таблицах 3 и 4 (Приложение 5).
Данный пример показывает, что правильность заявляемого способа определения фенола выше, чем правильность способа прототипа, поскольку максимальное значение отклонения процента выявления определяемого количества фенола от теоретического (истинного) более чем в 3 раза меньше максимального значения отклонения процента выявления способа прототипа.
Источники информации
1. Способ определения фенола в аллергенах (SU, патент 989410, 1983).
2. Способ количественного определения фенола в крови (RU, патент 2188416,2002).
3. European Pharmacopoeia 9.2. Phenol in immunosera and vaccines 01/2008:20515 [Электронный ресурс] http://online6.edqm.eu/ep902/
4. Государственная фармакопея РФ. ГФ XIV. ОФС.1.7.2.0028.15 Количественное определение фенола спектрофотометрическим методом в иммунобиологических лекарственных препаратах [Электронный ресурс] http://femb.ru/femb/pharmacopea.php
5. ГОСТ ИСО 5725-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений.
6. Государственная фармакопея РФ. ГФ XIV. ОФС.1.1.0012.15 Валидация аналитических методик [Электронный ресурс] http://femb.ru/femb/pharmacopea.php
Приложение 4 к заявке на изобретение «Способ количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах методом газожидкостной хроматографии»
Приложение 5 к заявке на изобретение
«Способ количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах методом газожидкостной хроматографии»
Claims (3)
1. Способ количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах с использованием метода газожидкостной хроматографии, характеризующийся тем, что используют хроматографическую колонку, заполненную полиэтиленгликолем, газ-носитель гелий, при температуре инжектора 250°С, в режиме постоянного давления, со скоростью потока 1,4 мл/мин и при температурном профиле печи, в котором начальная температура 160°С, выдержка 3 мин, градиент 40°С/мин до температуры 200°С, выдержка 0,6 мин, градиент 40°С/мин до температуры 220°С, с использованием пламенно-ионизационного детектора при температуре детектора 250°С, в качестве внутреннего стандарта используют 2-феноксиэтанол, далее производят расчет относительно внутреннего стандарта, переводя величину полученного аналитического сигнала в относительные единицы, затем производят оценку результатов с использованием графика регрессионной зависимости относительных площадей пика фенола от концентрации фенола в стандартных растворах.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что исходный образец биологического лекарственного препарата используют без предварительного разведения.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что размер хроматографической колонки, заполненной полиэтиленгликолем, 30 м × 0,25 мм × 0,25 мкм.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018141443A RU2693518C1 (ru) | 2018-11-26 | 2018-11-26 | Способ количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах методом газожидкостной хроматографии |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018141443A RU2693518C1 (ru) | 2018-11-26 | 2018-11-26 | Способ количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах методом газожидкостной хроматографии |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2693518C1 true RU2693518C1 (ru) | 2019-07-03 |
Family
ID=67252257
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018141443A RU2693518C1 (ru) | 2018-11-26 | 2018-11-26 | Способ количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах методом газожидкостной хроматографии |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2693518C1 (ru) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU989410A1 (ru) * | 1981-03-20 | 1983-01-15 | Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им.Л.А.Тарасевича | Способ определени фенола в аллергенах |
JP2000304665A (ja) * | 1999-04-26 | 2000-11-02 | Mitsubishi Chemicals Corp | 塩酸中のフェノール類の分析方法 |
RU2234083C2 (ru) * | 2003-04-25 | 2004-08-10 | Архангельский государственный технологический университет | Способ хроматографического определения фенолов в сточных водах |
-
2018
- 2018-11-26 RU RU2018141443A patent/RU2693518C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU989410A1 (ru) * | 1981-03-20 | 1983-01-15 | Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им.Л.А.Тарасевича | Способ определени фенола в аллергенах |
JP2000304665A (ja) * | 1999-04-26 | 2000-11-02 | Mitsubishi Chemicals Corp | 塩酸中のフェノール類の分析方法 |
RU2234083C2 (ru) * | 2003-04-25 | 2004-08-10 | Архангельский государственный технологический университет | Способ хроматографического определения фенолов в сточных водах |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ОФС.1.7.2.0028.15 ФАРМОКОПЕЯ, изд. XIV, т.2, стр. 2984-2988. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Usui et al. | Rapid drug extraction from human whole blood using a modified QuEChERS extraction method | |
Maes et al. | Qualitative and quantitative control of carbonated cola beverages using 1H NMR spectroscopy | |
Garry et al. | Plasma vitamin A assay by fluorometry and use of a silicic acid column technique | |
Cerceau et al. | 1H‐NMR and GC for detection of adulteration in commercial essential oils of Cymbopogon ssp | |
Tobias et al. | Detection of Synthetic Testosterone Use by Novel Comprehensive Two-Dimensional Gas Chromatography Combustion–Isotope Ratio Mass Spectrometry | |
Gunnar et al. | Fast gas chromatography–negative‐ion chemical ionization mass spectrometry with microscale volume sample preparation for the determination of benzodiazepines and α‐hydroxy metabolites, zaleplon and zopiclone in whole blood | |
Ingelse et al. | European Bioanalysis Forum: recommendation on dealing with hemolyzed and hyperlipidemic matrices | |
Kudo et al. | Construction of calibration-locking databases for rapid and reliable drug screening by gas chromatography-mass spectrometry | |
Fernández et al. | Chromatographic determination of drugs of abuse in vitreous humor using solid‐phase extraction | |
Cirillo et al. | BPA, BPB, BPF, BADGE and BFDGE in canned beers from the Italian market | |
Jeong et al. | Simultaneous determination of sildenafil, tadalafil, and vardenafil in pharmaceutical preparations by high-temperature gas chromatography/mass spectrometry | |
El-Gindy et al. | Stability-Indicating HPLC method for simultaneous determination of captopril, indapamide, and their related compounds | |
Liu et al. | Non-targeted identification of unknown chemical hazardous substances in infant teether toys by gas chromatography-Orbitrap high resolution mass spectrometry | |
Sisco et al. | Comparing two seized drug workflows for the analysis of synthetic cannabinoids, cathinones, and opioids | |
Bertaso et al. | Use of finger‐prick dried blood spots (fpDBS) and capillary electrophoresis for carbohydrate deficient transferrin (CDT) screening in forensic toxicology | |
RU2693518C1 (ru) | Способ количественного определения фенола в биологических лекарственных препаратах методом газожидкостной хроматографии | |
Vuppala et al. | Second-Year Undergraduates Learn Advanced Quantification and Standardization Methods—Internal Standards and Standard Additions—for GC Analysis Techniques with Real World Applications | |
CN113484430A (zh) | 一种采用高效液相色谱法测定l-丙氨酸异丙酯盐酸盐有关物质的方法 | |
CN110780002B (zh) | 一种对精油成分定量的高效低成本检测方法 | |
Hasan et al. | Dual Wavelength RP‐HPLC Method for Simultaneous Determination of Two Antispasmodic Drugs: An Application in Pharmaceutical and Human Serum | |
De Jesús et al. | Novel methods for the analysis of toxicants in bronchoalveolar lavage fluid samples from e‐cigarette, or vaping, product use‐associated lung injury cases: Selected petroleum distillates | |
Quadri et al. | Review on stability indicating assay methods (SIAMs) | |
Indelicato et al. | Halogenated anesthetics determination in urine by SPME/GC/MS and urine levels relationship evaluation with surgical theatres contamination | |
Flasch et al. | Comparing the sensitivity of a low-and a high-resolution mass spectrometry approach for xenobiotic trace analysis: An exposome-type case study | |
Ross et al. | An international collaborative study on a method for determination of formaldehyde in veterinary vaccines |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20201127 |