RU2687487C1

RU2687487C1 - Method for disinvasion against oocysts of coccidia of foxes and polar foxes

Info

Publication number: RU2687487C1
Application number: RU2018119923A
Authority: RU
Inventors: Ринат Туктарович Сафиуллин
Priority date: 2018-05-30
Filing date: 2018-05-30
Publication date: 2019-05-14

Abstract

FIELD: veterinary medicine.

SUBSTANCE: invention relates to the field of veterinary and represents a method of disinvasion of environmental objects against oocysts of coccidia of foxes and polar foxes, including treatment, characterized by that as a disinfectant there used is an agent containing benzalkonium chloride, formaldehyde, auxiliary components: surface active substances and water, wherein components in the agent are in a certain ratio, wt%, treatment of the environmental objects is carried out in dose of 0.5 l per 1 m² with exposure for 2 hours.

EFFECT: invention provides effective disinfection of environmental objects against oocysts of coccidia of foxes and polar foxes.

1 cl, 3 ex, 2 tbl

Description

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно протозоологии, и может быть использовано в звероводческих хозяйствах для профилактики кокцидиозов лисиц и песцов.The invention relates to the field of veterinary medicine, namely, protozoology, and can be used in animal farms for the prevention of coccidioses of foxes and foxes.

Кокцидиозы - протозойные заболевания лисиц, песцов, рысей, нутрий и других плотоядных, вызываемые простейшими семейства Eimeriidae подсемейства Eimeriinae и Isosporinae с родами Eimeria, Isospora и другими. Возбудители данного заболевания локализуются в эпителиальных клетках слизистой оболочки тонкого отдела кишечника. Цикл биологического развития кокцидий характеризуется тремя стадиями: спорогония, шизогония и гаметогония. Экзогенная стадия развития кокцидий происходит во внешней среде и называется спорогония. Эндогенные стадии развития кокцидий, которые совершаются в эпителиальных клетках кишечника, называются шизогония и гаметогония. Животные, зараженные кокцидиями, выделяют во внешнюю среду с фекалиями ооцисты этих паразитических простейших, которые покрыты плотной защитной оболочкой. После выделения во внешнюю среду ооцисты сразу не могут заразить других животных, поскольку им необходимо пройти процесс созревания или спорогонию при оптимальной температуре, необходимой влажности и доступе кислорода [1,2]. За время споруляции в ооцисте рода Eimeria формируется 4 спороцисты и в каждой из них по 2 спорозоита, а у представителей рода Isospora образуются 2 спороцисты, каждая из которых содержит 4 спорозоита. Прошедшие споруляцию ооцисты становятся инвазионными и они способны заражать восприимчивых животных, в организме которых происходит развитие эндогенных стадий. У лисиц паразитируют 8 видов кокцидий: Isospora vulpina, I. canivelocis, I. bigemina, I. buriatica, I. pavlodarica, I. rivolta, I. triffitti и Eimeria vulpes. А у песцов 6 видов: I. vulpina, I. canivelocis, I. buriatica, I. pavlodarica, I. triffitti и Eimeria imantonica [5]. В зависимости от вида ооцисты имеют овальную, яйцевидную, круглую или эллипсовидную форму, величиной от 8 до 45 мкм. Оболочка у них двухслойная, гладкая серого или желто-зеленого цвета, которая истончается на одном из полюсов и образует микропиле.Coccidioses are protozoal diseases of foxes, arctic foxes, lynx, coypu and other carnivores, caused by the protozoans of the family Eimeriidae of the subfamily Eimeriinae and Isosporinae with the genera Eimeria, Isospora and others. The causative agents of this disease are localized in the epithelial cells of the mucous membrane of the small intestine. The cycle of biological development of coccidia is characterized by three stages: sporogony, schizogony and gametogony. The exogenous stage of development of coccidia occurs in the environment and is called sporogony. The endogenous stages of development of coccidia that occur in intestinal epithelial cells are called schizogony and gametogony. Animals infected with coccidia release into the environment with feces the oocysts of these parasitic protozoa, which are covered with a dense protective sheath. After excretion into the external environment, oocysts cannot immediately infect other animals, since they need to undergo a process of maturation or sporogony at the optimum temperature, necessary humidity and access of oxygen [1, 2]. During the sporulation in the oocysts of the genus Eimeria, 4 sporocysts form in each of them 2 sporozoites, and in the representatives of the genus Isospora 2 sporocysts form, each of which contains 4 sporozoites. Sporulation oocysts become invasive and they are able to infect susceptible animals in whose body the development of endogenous stages occurs. In foxes, 8 species of coccidia parasitize: Isospora vulpina, I. canivelocis, I. bigemina, I. buriatica, I. pavlodarica, I. rivolta, I. triffitti and Eimeria vulpes. And in foxes there are 6 species: I. vulpina, I. canivelocis, I. buriatica, I. pavlodarica, I. triffitti and Eimeria imantonica [5]. Depending on the species, oocysts are oval, ovoid, round or elliptical in shape, ranging in size from 8 to 45 microns. Their shell is a two-layer, smooth gray or yellow-green color, which becomes thinner at one of the poles and forms micropyle.

Основным источником инвазии являются больные и переболевшие кокцидиозом животные, а факторами передачи инвазии служат загрязненные ооцистами объекты внешней среды - шеды, клетки для животных, территория, инструменты по уходу за животными, обслуживающий персонал и др. передача инвазии в неблагополучных фермах происходит путем прямого и непрямого контакта с зараженными животными. Среди молодняка пушных зверей вспышки кокцидиозов частот отмечают в подсосный период в силу различных стрессов, при нарушении нормальной физиологии и общей резистентности [2, 5].The main source of invasion is sick and recovered from coccidiosis animals, and the factors of transmission of invasion are contaminated with oocysts objects of the external environment - sheds, animal cages, territory, animal care tools, staff and others. The transfer of invasion in dysfunctional farms occurs through direct and indirect contact with infected animals. Among young fur animals, outbreaks of coccidiosis frequencies are noted during the nursing period due to various stresses, in violation of normal physiology and general resistance [2, 5].

При кокцидиозах пушных зверей весьма часто имеет место снижение их продуктивности, которое диктует необходимость совершенствования мер борьбы с инвазией, поэтому разработка способов дезинвазии против ооцист кокцидий лисиц и песцов является актуальной проблемой [3, 6].When coccidioses of fur animals very often there is a decrease in their productivity, which dictates the need to improve measures to combat invasion, therefore the development of methods of disinvasion against coccidia of foxes and Arctic foxes against oocysts is a pressing problem [3, 6].

Среди известных средств, которые используют для дезинвазии против эндогенных стадий кокцидий пушных зверей необходимо отметить 2%-ную эмульсию ортохлорфенола, 7%-ный раствор аммиака, 10%-ный раствор однохлористого йода, 4%-ный раствор едкого натрия, который должен иметь температуру не ниже 80°С [3]. Тем не менее по эффективности отмеченные средства дезинвазии не устраивают запросы ветеринарной практики.Among the known agents that are used for disinfection against the endogenous stages of coccidia of fur animals, it is necessary to note a 2% orthochlorophenol emulsion, 7% ammonia solution, 10% iodine monochlorine solution, 4% sodium hydroxide solution, which should have a temperature not below 80 ° C [3]. However, the effectiveness of the marked means of disinvasion are not satisfied with the requests of veterinary practice.

Исходя из отмеченного и особой устойчивости ооцист кокцидий во внешней среде, эффективное средство против них возможно создать, применяя несколько активных компонентов и вспомогательных веществ -синергистовBased on the marked and special stability of coccidia oocysts in the environment, it is possible to create an effective remedy against them using several active components and auxiliary substances of synergists

Определенный интерес для борьбы с экзогенной стадией кокцидий представляют бензалкония хлорид и формальдегид. Первый из отмеченных является высокоэффективным дезинфицирующим средством для наружного применения, эффективен в отношении хламидий, трихомонад и других паразитических простейших. Второй из упомянутых - формальдегид, известен как высокоэффективный антисептик, данное средство вызывает денатурацию белков, в том числе и содержащихся в ооцистах кокцидий. При их совместном применения против ооцист кокцидий пушных зверей они оказывают синергетическое действие на объект, а используемые вспомогательные компоненты - поверхностно активные вещества, обеспечивают очитку клеток для зверей, пола, шедов, технологического оборудования от биозагрязнений, образуют тонкую пленку на поверхности ооцист, облегчая доступ и равномерно распределяют ДВ по поверхности.Of particular interest to control the exogenous stage of coccidia are benzalkonium chloride and formaldehyde. The first noted is a highly effective disinfectant for external use, effective against chlamydia, Trichomonas and other parasitic protozoa. The second of the above - formaldehyde, known as a highly effective antiseptic, this tool causes the denaturation of proteins, including those contained in coccidia oocysts. When used together against coccidia oocysts of fur-bearing animals, they have a synergistic effect on the object, and the auxiliary components used are surface-active substances, provide cell clearing for animals, sex, sheds, process equipment from biofouling, form a thin film on the oocyst surface, facilitating access and evenly distribute DV on the surface.

В задачу наших исследований входило разработать эффективный способ дезинвазии против ооцист кокцидий лисиц и песцов доступными средствами, пригодными для применения ручным способом, а также используя для обработки средства малой механизации, при этом не повреждая обрабатываемое технологическое оборудование.The goal of our research was to develop an effective method of disinfecting against the oocysts of coccidia of foxes and arctic foxes using available means suitable for manual application, as well as using means of small-scale mechanization for processing without damaging the process equipment being processed.

Решение поставленной задачи достигается тем, что в качестве средства дезинвазии против ооцист кокцидий лисиц и песцов был использован составленный нами комплексный препарат «Изодез», имеющий следующий состав: действующие вещества - бензалкония хлорид 6%, формальдегид 7%, вспомогательные компоненты - неионовые поверхностно-активные вещества 20%, вода до 100%.The solution of the task is achieved by the use of the complex preparation “Izodez” composed by us, which has the following composition as a means of desinvasion against the oocysts of coccidia of foxes and arctic foxes: active ingredients - benzalkonium chloride 6%, formaldehyde 7%, auxiliary components - nonionic surface-active substances 20%, water up to 100%.

Из доступных заявителю источников информации не известна указанная совокупность существующих признаков, позволяющих получать указанный технический результат, поэтому заявляемое изобретение соответствует условию патентоспособности «новизна».From the sources of information available to the applicant, this set of existing features that enable one to obtain the indicated technical result is not known; therefore, the claimed invention meets the condition of patentability "novelty."

Заявителю не известны средства аналогичного назначения, в которых были раскрыты отличительные признаки заявляемого изобретения с получением от использования его в какой-либо совокупности признаков указанного технического результата. Следовательно, заявляемое изобретение соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень».The applicant is not aware of the means for a similar purpose, in which the distinctive features of the claimed invention have been disclosed with obtaining the specified technical result from using it in any combination of features. Therefore, the claimed invention meets the condition of patentability "inventive step".

Доказательства промышленной применимости приводятся в следующих примерах.Evidence of industrial applicability is given in the following examples.

Примеры конкретного исполнения Пример 1. Приготовление рабочих растворов, разведений культуры кокцидий лисиц и песцов и осуществление лизис-теста с разной концентрацией препарата «Изодез»Examples of specific performance Example 1. Preparation of working solutions, dilutions of the culture of coccidia of foxes and foxes and the implementation of the lysis test with different concentrations of the drug "Izodez"

Отмеченные исследования по обозначенной проблеме проводили в лаборатории ФГБНУ «Всероссийский НИИ фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им. К.И. Скрябина» (г. Москва).The noted studies on the indicated problem were carried out in the laboratory of the All-Russian Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants. K.I. Scriabin ”(Moscow).

Рабочий раствор с разными концентрациями комбинированного препарата «Изодез» готовили в условиях лаборатории следующим образом. Использовали чистые четыре стеклянные колбы на 1 л и наливали по 500 мл дистиллированной воды и в первые три из них добавляли по 50; 60 и 70 г бензалкония хлорида, размешивали стеклянной палочкой и через 10 минут добавляли по 70 мл формальдегида, размешивали и оставляли на 20 минут. Затем во все колбы добавляли по 200 мл поверхностно активного вещества, размешивали и объем доводили до 1 литра путем добавления дистиллированной воды, тщательно размешивали в течение 10 минут и оставляли на 20 минут. Раствор был готов к применению по истечении отмеченного времени. В четвертую колбу к 500 мл воды добавляли 50 г фенола, размешивали, объем доводили до 1 литра, снова размешивали и раствор был готов к применению.The working solution with different concentrations of the combined drug "Izodez" was prepared in the laboratory as follows. They used pure four glass flasks per 1 liter and poured 500 ml of distilled water, and 50 were added to the first three of them; 60 and 70 g of benzalkonium chloride, stirred with a glass rod and after 10 minutes, 70 ml of formaldehyde was added, stirred and left to stand for 20 minutes. Then, 200 ml of surfactant was added to all flasks, stirred and the volume was made up to 1 liter by adding distilled water, thoroughly stirred for 10 minutes, and left for 20 minutes. The solution was ready for use after the indicated time. In the fourth flask, 50 g of phenol was added to 500 ml of water, stirred, the volume was made up to 1 liter, stirred again, and the solution was ready for use.

Для сбора ооцист кокцидий использовали свежие фекалии от зараженных лисиц и песцов, которые исследовали в условиях лаборатории флотационным методом Фюллеборна. Поверхностную пленку из стаканов с пробой снимали паразитологической петлей и собирали в чашки Петри с дистиллированной водой. Собранный материал трижды промывали дистиллированной водой, концентрировали путем центрифугирования, культивировали в термостате при 26°С в течение 7 дней и хранили отдельно от лисиц и песцов. При разведении культуры ооцист кокцидий использовали дистиллированную воду, их количество в 1 мл подсчитывали под микроскопом.To collect the oocysts of coccidia, fresh feces from infected foxes and arctic foxes were used, which were investigated in the laboratory using the Fulleborn flotation method. The surface film from the glasses with the sample was removed by a parasitological loop and collected in Petri dishes with distilled water. The collected material was washed three times with distilled water, concentrated by centrifugation, cultured in a thermostat at 26 ° C for 7 days, and stored separately from foxes and Arctic foxes. When breeding cultures of oocysts of coccidia, distilled water was used, their number in 1 ml was counted under a microscope.

При проведении лизис-теста использовали ранее приготовленные растворы дезинфектантов и дистиллированную воду (контроль) по отдельности, при этом их поместили по 50 мл в 100 мл колбы и добавили по 20 мл раствора с ооцистами кокцидий лисиц и песцов в концентрации 1000 ооцист/мл. После чего эти колбы ставили на вибростолик со скоростью вращения 100 об/мин на 2 часа. Затем содержимое из колбы выливали в пластиковую бутылку с завинчивающейся крышкой объемом 1 литр. Колбу с остатком раствора ополаскивали несколько раз и сливали в пластиковую бутылку и объем доводили до 1000 мл. Бутылку переворачивали три раза для лучшего смешивания и оставляли при комнатной температуре (23±2°С) на 24 часа. По истечении времени раствор из бутылки сливали до отметки 30 мл, осадок переливали в новую емкость объемом 100 мл, бутылку ополаскивали несколько раз с использованием дистиллированной воды, доведя объем до 50 мл.When carrying out the lysis test, previously prepared solutions of disinfectants and distilled water (control) were used separately; they were placed in 50 ml each in a 100 ml flask and 20 ml of foxes and foxes coccidia oocysts were added at a concentration of 1000 oocysts / ml. After that, these flasks were placed on a vibration table with a rotation speed of 100 rpm for 2 hours. Then the contents of the flask were poured into a plastic bottle with a screw cap of 1 liter. The flask with the rest of the solution was rinsed several times and poured into a plastic bottle and the volume was made up to 1000 ml. The bottle was inverted three times for better mixing and left at room temperature (23 ± 2 ° C) for 24 hours. After the time, the solution from the bottle was poured to the 30 ml mark, the precipitate was poured into a new container with a volume of 100 ml, the bottle was rinsed several times with distilled water, bringing the volume to 50 ml.

Пример 2. Биопроба по экспериментальному заражению щенят лисиц и песцов для установления эффективности препарата «Изодез»Example 2. Bioassay on experimental infection of puppies of foxes and foxes to establish the effectiveness of the drug "Izodez"

Испытание проводили в условиях звероводческого хозяйства «Салтыковское» Московской области в июле-августе 2017 г. на 30 щенятах лисиц и 30 щенятах песцов 2-месячного возраста, свободных от кокцидий и корма их не содержали препараты против паразитических простейших. Для контроля концентрации ооцист кокцидий лисиц и песцов (1000 ооцист/мл) в совей работе использовали камеру Мак Мастера и микроскоп МБС. Культуры ооцист кокцидий разбавляли дистиллированной водой с таким расчетом, чтобы было возможно ввести 2 мл суспензии каждому щенку лисиц и песцов с общим количеством ооцист кокцидий 2000 экз./голову. Перед назначение инвазионного материала всех щенят подвергали клиническому обследованию, индивидуальному взвешиванию и по принципу аналогов разделили как песцов, так и лисиц на шесть групп по 5 животных в каждой.The test was carried out in the Saltykovskoye farming area of the Moscow region in July-August 2017 on 30 puppies of foxes and 30 puppies of foxes of 2 months of age, free of coccidia and feed, they did not contain preparations against parasitic protozoa. To control the concentration of oocysts in coccidia of foxes and arctic foxes (1000 oocysts / ml), we used the Poppy Masters camera and an MBS microscope in our work. Coccidian oocysts were diluted with distilled water so that it was possible to inject 2 ml of the suspension to each puppy of foxes and arctic foxes with a total of 2000 coccidia oocysts / head. Prior to the appointment of invasive material, all puppies were subjected to clinical examination, individual weighing and, according to the principle of analogs, were divided both foxes and foxes into six groups of 5 animals each.

Щенятам первой, второй и третьей групп задавали по 2 мл суспензии ооцист кокцидий, обработанной 5; 6 и 7%-ми растворами препарата «Изодез», внутрь при помощи мини-зонда. Четвертой группе щенят задавали по 2 мл суспензии ооцист кокцидий, обработанной 5%-м раствором фенола (базовый препарат). Щенята пятой группы получали по 2 мл суспензии, содержащей ооцист в количестве 1000 экз./мл, и служили зараженным контролем. Щенята шестой группы получали по 2 мл дистиллированной воды и служили «чистым контролем».The puppies of the first, second and third groups were given 2 ml of cococidia oocysts suspension, treated with 5; 6 and 7% solution of the drug "Izodez", inside using a mini-probe. The fourth group of puppies were asked to take 2 ml of a suspension of oocysts of coccidia treated with 5% phenol solution (basic preparation). Puppies of the fifth group received 2 ml of a suspension containing oocysts in an amount of 1000 specimens / ml, and served as infected controls. Puppies of the sixth group received 2 ml of distilled water and served as “pure control”.

Щенята всех шести групп лисиц и шести групп песцов за время опыта находились в аналогичных условиях содержания и имели одинаковый рацион. Вели ежедневные клинические наблюдения за щенятами в течение всего периода опыта: за общим состоянием, их поведением, приемом корма и воды, водимыми физиологическими изменениями.The puppies of all six groups of foxes and six groups of arctic foxes during the experiment were under similar conditions of detention and had the same diet. Daily clinical observations of puppies were conducted throughout the entire period of experience: general condition, their behavior, feed and water intake, and physiological changes.

Для установления ооцист кокцидий в фекалиях от щенят каждой группы отдельно с 6-е по 12-е сутки ежедневно собирали все фекалии путем размещения клеенчатой пленки под клеткой опытных и контрольных животных. Собранный биоматериал взвешивали, добавляли воду до объема 500 г, смешивали смесителем в течение 5-7 минут. Для дальнейших исследований пробы отбирали из каждой группы в количестве 50 г, которые консервировали путем добавления 4%-ного раствора бихромата калия и доводили до однородной массы путем размешивания миксером, затем переносили в пластиковые емкости с завинчивающейся крышкой и хранили в холодильнике при+4°С.To establish the oocysts of coccidia in the feces from puppies of each group, from the 6th to the 12th day, all the faeces were collected daily by placing an oilcloth film under the cage of experimental and control animals. The collected biomaterial was weighed, water was added to a volume of 500 g, mixed by a mixer for 5-7 minutes. For further studies, samples were taken from each group in an amount of 50 g, which were preserved by adding a 4% potassium dichromate solution and brought to a homogeneous mass by stirring with a mixer, then transferred to plastic containers with a screw cap and stored in a refrigerator at + 4 ° C .

Ооцист кокцидий в фекалиях щенят лисиц и песцов определяли комбинированным методом Дарлинга, а их количество подсчитывали с использованием камеры Мак Мастера.Oocysts of coccidia in the faeces of puppies of foxes and arctic foxes were determined by the combined Darling method, and their number was calculated using a MacMaster camera.

Эффективность проведенной дезинвазии при назначении разных концентраций препарата «Изодез», а также 5%-ной концентрации базового препарата фенола определяли, исходя из процента снижения выделения ооцист кокцидий после воздействия на них отмеченных выше препаратов и концентраций по сравнению с щенятами зараженного контроля, которым давали по 2000 ооцист/голову.The effectiveness of the disinfection with the appointment of different concentrations of the drug "Izodez", as well as 5% concentration of the basic drug phenol was determined based on the percentage reduction in the release of coccidia oocysts after exposure to the above-mentioned drugs and concentrations compared to puppies infected controls, which were given 2000 oocysts / head.

Следует отметить, что кормление и условия содержания опытных и контрольных щенят всех групп за время испытания были одинаковые. Содержали щенят в клетках по 5 голов с табличкой с указанием начала и окончания опыта, которые размешались в шедах на высоте 90 см от земли.It should be noted that the feeding and housing conditions of the experimental and control puppies of all groups during the test were the same. Contained puppies in cages of 5 heads with a plate indicating the beginning and end of the experiment, which were placed in sheds at a height of 90 cm from the ground.

Общее состояние опытных щенят лисиц и песцов после назначения суспензии ооцист кокцидий, обработанной разными концентрациями препарата «Изодез», рекомендованной дозой фенола, а также чистой культурой ооцист кокцидий, оценивали по данным клинических наблюдений и они показали наличие определенного угнетенного состояния, щенята были малоактивны, забивались в кучу в закрытой части клетки, что, скорее всего, было обусловлено стрессом при их отлове и даче внутрь инвазионного материала. Осложнений при назначении внутрь суспензии с ооцистами кокцидий и после него не отмечено. По данным общеклинических наблюдений со второго дня после начала опыта щенята, получавшие суспензию ооцист кокцидий, обработанную разными препаратами и их концентрациями, чистой культурой ооцист и контрольные не отличались друг от друга.The general condition of the experienced puppies of foxes and foxes after prescribing a suspension of oocysts of coccidia, treated with different concentrations of the drug "Izodez", the recommended dose of phenol, as well as a pure culture of oocysts of coccidia, was evaluated according to clinical observations and they showed a certain depression, the puppies were inactive, slaughtered in a heap in a closed part of the cage, which was most likely caused by stress when they were caught and given inside the invasive material. Complications in the appointment inside the suspension with coccidian oocysts and after it is not marked. According to general clinical observations, from the second day after the start of the experiment, puppies who received coccidia oocysts suspension treated with different preparations and their concentrations, pure cultures of oocysts and control did not differ from each other.

Проведенные по определению ооцист кокцидий в фекалиях опытных щенят, собранных с 6-е по 12-е сутки после дачи обработанной дезинфектантами суспензии, исследования показали их наличие в определенном количестве, но не во всех группах. В первой опытной группе лисицы, которые получали суспензию ооцист кокцидий, обработанную 5%-ной концентрацией препарата «Изодез», в фекалиях ооцист кокцидий находили через 2; 3 и 5 суток в количестве 3; 5 и 7 экз., что составляет 0,5; 0,83 и 1,2 на камеру и средний показатель в одной камере за период исследований составил 0,36. Количество ооцист в 1 г фекалий составило 72, что в проценте от контроля - 7,06. Отсюда, интенсэффективность «Изодеза» в 5%-ной концентрации или процент снижения количества ооцист после воздействия на них препаратом составила 92,6% (табл.1).Conducted by definition oocysts of coccidia in the feces of experimental puppies collected from the 6th to the 12th day after giving the suspension treated with disinfectants, studies have shown their presence in a certain amount, but not in all groups. In the first experimental group, foxes that received a coccidian oocysts suspension treated with a 5% concentration of the “Izodez” preparation, were found in 2 coccidia oocysts in the feces; 3 and 5 days in the amount of 3; 5 and 7 copies, which is 0.5; 0.83 and 1.2 per camera and the average in the same chamber over the study period was 0.36. The number of oocysts in 1 g of feces was 72, which is 7.06 as a percentage of the control. Hence, the intensity of the "Izodez" in 5% concentration or the percentage reduction in the number of oocysts after exposure to the drug was 92.6% (Table 1).

У щенят лисиц второй и третьей групп, которым давали суспензию ооцист кокцидий, обработанную 6 и 7%-ной концентрацией «Изодеза», при исследовании проб фекалий ни в одном случае ооцист не находили, что дает нам основание отметить 100%-ную эффективность «Изодеза» в отмеченных концентрациях против ооцист кокцидий щенят лисиц.In puppies of foxes of the second and third groups, which were given a suspension of cococidia oocysts treated with 6 and 7% concentration of Izodes, we did not find any oocysts in the examination of feces samples, which gives us reason to note the 100% efficiency of Izodesa "In marked concentrations against coccidia oocysts, fox pups.

У щенят четвертой группы после дачи суспензии ооцист кокцидий, обработанной 5%-ной концентрацией фенола (базовый препарат), ооцист в фекалиях находили во все сроки исследований в количестве от 1,2 до 3,0 в камере, а средний показатель в 1-й камере за период исследований составил 1,8. Количество ооцист в 1 г фекалий по этой группе равнялось 360, что составляет 35,3% от контроля. Отсюда, интенсэффективность фенола в 5%-ной концентрации против ооцист кокцидий щенят составила 64,7%.In puppies of the fourth group, after giving a suspension of oocysts of coccidia, treated with 5% concentration of phenol (basic preparation), oocysts in feces were found in all periods of research in an amount from 1.2 to 3.0 in the chamber, and the average in the 1st the chamber over the study period was 1.8. The number of oocysts in 1 g of faeces in this group was 360, which is 35.3% of the control. Hence, the intensity of phenol in a 5% concentration against coccidia oocysts of puppies was 64.7%.

Щенята лисиц пятой контрольной группы, получавшие 2000 ооцист на голову, во все сроки исследований с фекалиями выделяли ооцист кокцидий в количестве от 3,8 до 6,5 в камере и средний показатель в 1-й камере за период исследований составил 5,1. Количество ооцист в 1 г фекалий по этой группе составило 1020 и данный показатель нами использовался как исходный при расчете процента снижения количества ооцист или интенсэффективность испытанных в опыте препаратов.Puppies of foxes of the fifth control group that received 2000 oocysts per head, in all periods of studies with feces, isolated oocysts of coccidia in an amount of from 3.8 to 6.5 in the chamber and the average in the 1st chamber for the period of studies was 5.1. The number of oocysts in 1 g of faeces in this group was 1020 and we used this indicator as a baseline when calculating the percentage reduction in the number of oocysts or the intensification of the drugs tested in the experiment.

Щенята шестой группы, которые получали дистиллированную воду без ооцист, служили незараженным контролем и вовсе сроки исследований оставались свободными от инвазии.Puppies of the sixth group, which received distilled water without oocysts, served as an uninfected control, and the study period remained free from invasion.

По щенятам песцов следует отметить, что в первой группе, которые получали суспензию ооцист кокцидий, обработанную 5%-ной концентрацией препарата «Изодез» ооцист кокцидий в фекалиях находили через 1 и 4 суток в количестве 3 и 5 экз., что составляет 0,5 и 0,83 на камеру и средний показатель в одной камере за период исследований составил 0,19. Количество ооцист в 1 г фекалий составило 38, что в проценте от контроля -3,3. Отсюда, ИЭ «Изодеза» в 5%-ной концентрации против ооцист кокцидий у щенят песцов или процент снижения количество ооцист после воздействия на них препаратом составила 96,7%.According to Arctic fox puppies, it should be noted that in the first group that received cococidia oocysts suspension treated with 5% concentration of the “Izodez” preparation, coccidia oocysts in feces were found after 1 and 4 days in an amount of 3 and 5 copies, which is 0.5 and 0.83 per camera and the average in one chamber over the study period was 0.19. The number of oocysts in 1 g of feces was 38, which is -3.3 as a percentage of the control. From here, IE “Isodez” in 5% concentration against coccidia oocysts in Arctic fox puppies or the percentage decrease in the number of oocysts after exposure to them with the preparation was 96.7%.

У щенят песцов второй и третьей групп, получавших суспензию ооцист кокцидий, обработанную 6 и 7%-ной концентрацией «Изодеза», при исследовании проб фекалий во все сроки ооцист кокцидий не находили и делаем заключение о 100%-ной ИЭ препарата против ооцист кокцидий.In puppies of arctic foxes of the second and third groups that received a suspension of cococidia oocysts treated with 6 and 7% Isodesis, didn’t find coccidia during the examination of feces samples in all periods of oocysts, and we conclude that the 100% IE of the drug against coccidia oocysts.

У щенят песцов четвертой группы базовый препарат фенол 5%-ный обеспечил 84,5%-ную ИЭ.In the foxes of the fourth group, the base drug phenol 5% provided 84.5% IE.

У щенят песцов пятой контрольной группы средний показатель в одной камере составил 5,8, а количество ооцист в 1 г фекалий - 1160 экз.In puppies of foxes of the fifth control group, the average in one chamber was 5.8, and the number of oocysts in 1 g of feces was 1160 individuals.

Интенсэффективность использованных в своей работе дезинфектантов или процент снижения количества ооцист устанавливали по следующей формуле:The intensity of the disinfectants used in their work or the percentage reduction in the number of oocysts was determined by the following formula:

где

Where

ИЭ - интенсэффективность препарата, %;IE - the intensity of the drug,%;

Кок - количество ооцист у щенят лисиц и песцов контрольной группы;Cock - the number of oocysts in puppies of foxes and foxes of the control group;

Код - количество ооцист у щенят лисиц и песцов, получавших обработанные дезинфектантом ооцисты.Code - the number of oocysts in puppies of foxes and arctic foxes who received disinfectant-treated oocysts.

Используя полученные в опыте нами данные, определяли интенсэффективность (ИЭ) «Изодеза» в 5%-ной концентрации против ооцист кокцидий щенят лисиц.Using the data obtained in the experiment, we determined the intensity of the (Isodez) intensity in a 5% concentration against coccidia oocysts of foxes puppies.

Против ооцист кокцидий щенят песцов ИЭ «Изодеза» в 5%-ной концентрации составила:Against the oocysts of coccidia puppies foxes IE "Isodez" in 5% concentration was:

В концентрациях 6 и 7% «Изодез» против ооцист кокцидий щенят лисиц и песцов показал 100%-ную ИЭ.At concentrations of 6 and 7%, Izodez, against oocysts of coccidia, puppies of foxes and foxes showed 100% IE.

Взятый нами в качестве базового препарата фенол 5%-ный показал против ооцист кокцидий щенят лисиц 64,7%-ную ИЭ, против ооцист кокцидий щенят песцов 84,5%-ную ИЭ.Taken as a basic drug, phenol 5% showed 64.7% IE against foxococcidia oocysts, and fox foxes 84.5% against coccidia oocysts.

Пример 3. Производственное испытание эффективности «Изодеза» против ооцист кокцидий лисиц и песцовExample 3. Production test of the effectiveness of "Izodez" against oocysts coccidia foxes and foxes

Эффективность «Изодеза» 6%-ного против ооцист кокцидий лисиц и песцов в производственном испытании устанавливали опытным путем с искусственной закладкой ооцист кокцидий на контрольные площадки по сравнению с базовым препаратом фенолом 5%-ным при экспозиции 2 часа.The effectiveness of "Izodez" 6% against oocysts of coccidia of foxes and arctic foxes in the production test was established empirically with artificial laying of oocysts of coccidia on control sites compared to the basic preparation with phenol 5% at 2 hours exposure.

Испытание проводили в условиях ранее отмеченного звероводческого хозяйства Московской области в августе-сентябре 2017 года. В шеде №2 по договоренности с ветслужбой хозяйства предварительно проводили чистку и дезинфекцию участка пола и были выбраны три площадки по 1 м². Площадки имели ровную поверхность для исключения подтека раствора после дезинвазии и были отделены друг от друга пластиковыми рейками. Проводили копроскопическое исследование молодняка лисиц и песцов, устанавливали их зараженность кокцидиями, от зараженных животных брали повторные пробы фекалий, собирали ооцист, культивировали, готовили культуру и необходимое для опыта разведение. На первом этапе испытания на каждую площадку равномерно наносили с помощью малого пульверизатора по 10000 ооцист кокцидий в разведении с 50 мл дистиллированной водой и оставили на 20 минут для пропитывания площадки. Затем на первую опытную площадку наносили «Изодез» 6%-ный при норме 0,5 л на 1 м² и экспозиции 2 часа. На вторую опытную площадку наносили раствор фенола 5%-ного при норме 0,5 л на 1 м² и экспозиции 2 часа. Третья площадка была контрольная и препарат для дезинвазии не наносили.The test was carried out under the conditions of the previously noted fur farm of the Moscow region in August-September 2017. In Schedule 2, by agreement with the veterinary service of the farm, the area of the floor was preliminarily cleaned and disinfected and three sites of 1 m ² were selected. The sites had a flat surface to eliminate the solution leakage after disinvasion and were separated from each other with plastic slats. A koproskopichesky study was conducted on young foxes and arctic foxes, they were determined to be infected with coccidia, repeated samples of feces were collected from infected animals, oocysts were harvested, cultivated, and the culture and dilution required for the experiment was prepared. At the first stage of the test, 10,000 oocysts of coccidia were diluted in 50 ml with distilled water and were left on each pad evenly for 20 minutes to soak the pad. Then, a 6% “Izodez” was applied to the first experimental site at a rate of 0.5 l per 1 m ² and exposure for 2 hours. A solution of phenol 5% was applied to the second experimental site at a rate of 0.5 l per 1 m ² and exposure 2 hours. The third site was the control and the drug for disinvasion was not applied.

Соблюдая отмеченную экспозицию, из всей поверхности каждой площадки брали смывы, используя кисточку и дистиллированную воду. Собранный смыв переносили в пластиковую бутылку, объем доводили до 1000 мл, перемешивали 3 раза и оставляли при комнатной температуре (+23°С) на 24 часа. Затем сливали до отметки, оставляя 30 мл раствора с ооцистами кокцидий и дезинфектантом «Изодез», который использовали для биопробы на щенятах лисиц и песцов 2,5-3-месячного возраста. Щенятам первой группы (5 лисиц и 5 песцов) давали по 2 мл суспензии ооцист кокцидий, обработанной на первой площадке 6%-ным раствором «Изодеза». Щенятам второй группы (5 лисиц и 5 песцов) назначали суспензию кокцидий, обработанную базовым препаратом фенолом. Щенята третьей группы получали ооцисты кокцидий без воздействия на них каким-либо дезинфектантом.Observing the marked exposure, washings were taken from the entire surface of each pad using a brush and distilled water. The collected wash was transferred to a plastic bottle, the volume was brought to 1000 ml, stirred 3 times and left at room temperature (+ 23 ° C) for 24 hours. Then it was drained to the mark, leaving 30 ml of the solution with coccidian oocysts and the izodez disinfectant, which was used for biosamples on foxes and foxes of 2.5-3 months old. The puppies of the first group (5 foxes and 5 foxes) were given 2 ml of coccidia oocysts suspension, treated on the first site with a 6% solution of Izodes. Puppies of the second group (5 foxes and 5 foxes) were prescribed a coccidia suspension, treated with the basic preparation with phenol. Puppies of the third group received coccidian oocysts without affecting them with any disinfectant.

Оценку общего состояния опытных щенят после дачи им суспензии ооцист кокцидий, обработанной растворами «Изодеза» и фенола, а также чистой культурой ооцист кокцидий, проводили совместно с ветслужбой хозяйства по данным ежедневных клинических наблюдений в течение 10 дней.Assessment of the general condition of the experimental puppies after giving them a suspension of coccidian oocysts treated with Izodez and phenol solutions, as well as a pure culture of coccidia oocysts, was performed together with the veterinary service of the farm according to daily clinical observations for 10 days.

Как показали проведенные наблюдения, в течение 24 часов после назначения у щенят первой и второй групп было угнетенной состояние, они были малоактивны, забивались в угол закрытой части клетки, редко подходили к кормушке. Видимо, все это было вызвано стрессом, обусловленным отловом и заражением путем назначения ооцист кокцидий. При назначении суспензии ооцист и после него осложнений не было. Через 24 часа после назначения суспензии ооцист кокцидий, обработанной «Изодезом», фенолом и «чистой» культурой ооцист, щенята разных групп практически не отличались друг от друга.As the observations showed, within 24 hours after the appointment, the puppies of the first and second groups had an oppressed state, they were inactive, were clogged in a corner of the closed part of the cage, rarely approached the feeding trough. Apparently, all this was caused by the stress caused by catching and infection by administering oocysts to coccidia. When prescribing a suspension of oocysts and after it there were no complications. 24 hours after the administration of the oocysts of coccidia treated with Izodez, phenol and the “pure” culture of oocysts, puppies of different groups practically did not differ from each other.

После назначения ооцист кокцидий фекалии от разных групп щенят собирали с 6-е по 12-е сутки и при их исследовании были выделены ооцисты, но их количество заметно отличалось.After the assignment of oocysts of coccidia, the feces from different groups of puppies were collected from the 6th to the 12th day and when they were examined, the oocysts were isolated, but their number differed markedly.

Полученные результаты показали, что у щенят первой группы, которым давали суспензию ооцист, обработанную 6%-ным раствором «Изодеза», ооцист кокцидий в фекалиях находили во все сроки исследований в количестве от 2 до 5 экз., а среднее количество в одной камере за все исследования составило 0,57. Количество ооцист в 1 г исследуемой пробы фекалий составило 114 экз., что в проценте от зараженного контроля 5,04% (табл.2). Затем устанавливали интенсэффективность «Изодеза» 6%-ного или процент снижения ооцист кокцидий лисиц и песцов после воздействия на них препаратом, которая составила 94,9%.The results showed that in puppies of the first group, which were given a suspension of oocysts treated with a 6% solution of "Isodez", oocysts of coccidia in feces were found in all periods of research in an amount from 2 to 5 copies, and the average number in one chamber per all studies amounted to 0.57. The number of oocysts in 1 g of the feces sample being examined was 114 copies, which is 5.04% as a percentage of the infected control (Table 2). Then, the intensity of the "Izodez" of 6% or the percentage reduction in the oocysts of coccidia of foxes and Arctic foxes after exposure to them with the preparation was established, which was 94.9%.

У щенят второй группы, которым назначали суспензию, обработанную 5%-ным раствором фенола (базовый препарат), ооцист в камере находили во все сроки исследований в количестве от 10 до 21 экз., а среднее количество в одной камере за все исследования составило2,8. Количество ооцист в 1 г фекалий 560 экз., что в проценте от зараженного контроля 24,8%. Отсюда, интенсэффективность фенола в 5%-ной концентрации или процент снижения количество ооцист кокцидий после воздействия на них препаратом и она составила 75,2%.In puppies of the second group, who were prescribed a suspension treated with 5% phenol solution (basic preparation), oocysts in the chamber were found in all periods of research in an amount from 10 to 21 copies, and the average number in one chamber for all studies was 2.8 . The number of oocysts in 1 g of feces is 560 copies, which is 24.8% as a percentage of the infected control. Hence, the intensification of phenol in a 5% concentration or the percentage reduction in the number of oocysts of coccidia after exposure to the drug and it was 75.2%.

Щенята третьей контрольной группы, которым задавали по 2000 ооцист/голову во все сроки исследований с фекалиями выделяли ооцисты кокцидий в количестве от 41 до 73 экз., а средний показатель в одной камере за период исследований составил 11,3 экз. Количество ооцист кокцидий в 1 г фекалий по контрольной группе животных составило 2260 и данный показатель мы использовали как исходный при расчете снижения количества ооцист или интенсэффективность использованных в производственном испытании препаратов «Изодез» и фенол.Puppies of the third control group, who were asked to have 2000 oocysts / head during all periods of studies with feces, isolated coccidia oocysts in an amount of 41 to 73 copies, and the average in one chamber during the study period was 11.3 copies. The number of coccidia oocysts in 1 g of faeces in the control group of animals was 2260, and we used this indicator as a baseline to calculate the decrease in the number of oocysts or the intensity of the Izodes and phenol preparations used in the production testing.

Результаты, полученные при производственном испытании «Изодеза» 6%-ного в дозе из расчета 0,5 л на 1 м², при экспозиции 2 часа, свидетельствуют о высокой эффективности испытанного средства для дезинвазии против ооцист кокцидий лисиц и песцов, интенсэффективность составила 94,9%, а эффективность базового препарата фенола 5%-ного равнялась 75,2%.The results obtained during the production test of "Isodez" 6% per dose at the rate of 0.5 l per 1 m ² , with an exposure time of 2 hours, testify to the high effectiveness of the tested agent for disinvasion against the oocysts of coccidia of foxes and foxes, the intensity was 94, 9%, and the effectiveness of the basic preparation of phenol 5% was 75.2%.

Источники информации:Information sources:

1. Акбаев М.Ш., Василевич Ф.И., Водянов А.А. и др. Паразитология и инвазионные болезни животных. - М., 2008. - 776 с.1. Akbaev M.Sh., Vasilevich F.I., Vodyanov A.A. Parasitology and invasive animal diseases. - M., 2008. - 776 p.

2. Вершинин И.И. Кокцидиозы животных и их дифференциальная диагностика. - Екатеринбург, 1996. - 264 с.2. Vershinin I.I. Coccidioses of animals and their differential diagnosis. - Ekaterinburg, 1996. - 264 p.

3. Методические рекомендации по борьбе с эймериозами и изоспорозами животных. - М., 1994, РАСХН. - 30 с.3. Guidelines for the control of animal ameriosis and isosporosis. - M., 1994, Russian Academy of Agricultural Sciences. - 30 s.

4. Сафиулин Р.Т., Шаповалов А.В. Рекомендации по борьбе с кокцидиозами (эймериоз, изоспороз) пушных зверей // Труды ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина. - М., 2005. - Т. 41. - С. 463-478.4. Safiulin RT, Shapovalov A.V. Recommendations for the fight against coccidiosis (eymerioz, isosporosis) fur-bearing animals // Proceedings of the Institute of Helminthology. K.I. Scriabin. - M., 2005. - T. 41. - p. 463-478.

5. Сафиуллин Р.Т., Мусатов М.А. Паразитарные болезни пушных зверей, средства и методы их лечения. - М., 2009. - 152 с.5. Safiullin RT, Musatov MA Parasitic diseases of fur animals, means and methods of their treatment. - M., 2009. - 152 p.

6. Черепанов А.А. Методические рекомендации по испытанию средств дезинвазии в ветеринарии. - М., 1999. - 16 с.6. Cherepanov A.A. Guidelines for the testing of veterinary disinfectants. - M., 1999. - 16 p.

Claims

The method of disinvasion of environmental objects against oocysts of coccidia of foxes and arctic foxes, including processing, characterized in that an agent containing in wt. %: benzalkonium chloride - 6, formaldehyde - 7, auxiliary components: surface-active substances - 20 and the rest is water, the processing of environmental objects is carried out in a dose of 0.5 l per 1 m ² at an exposure time of 2 hours.