RU2687007C2 - Способ биотехнологического восстановления кожного покрова аллогенными стволовыми клетками человека - Google Patents
Способ биотехнологического восстановления кожного покрова аллогенными стволовыми клетками человека Download PDFInfo
- Publication number
- RU2687007C2 RU2687007C2 RU2017131907A RU2017131907A RU2687007C2 RU 2687007 C2 RU2687007 C2 RU 2687007C2 RU 2017131907 A RU2017131907 A RU 2017131907A RU 2017131907 A RU2017131907 A RU 2017131907A RU 2687007 C2 RU2687007 C2 RU 2687007C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- stem cells
- skin
- mesenchymal stem
- allogenic
- treatment
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 47
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 title abstract description 18
- 238000011084 recovery Methods 0.000 title description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims abstract description 48
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 claims abstract description 39
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 29
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 10
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 230000002293 adipogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims abstract 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 claims description 16
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 abstract description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 27
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 18
- 239000000463 material Substances 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 9
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 description 8
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 8
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 8
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 8
- 231100000075 skin burn Toxicity 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 7
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 206010053615 Thermal burn Diseases 0.000 description 6
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 6
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 206010072170 Skin wound Diseases 0.000 description 4
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 206010063562 Radiation skin injury Diseases 0.000 description 3
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 3
- 229920000704 biodegradable plastic Polymers 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 3
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 3
- 230000004768 organ dysfunction Effects 0.000 description 3
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 3
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 3
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 3
- 230000036575 thermal burns Effects 0.000 description 3
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 3
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 2
- 206010000370 Accident at home Diseases 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 2
- 102000003706 Complement factor D Human genes 0.000 description 2
- 108090000059 Complement factor D Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 108010080379 Fibrin Tissue Adhesive Proteins 0.000 description 2
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 2
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 2
- 230000001262 anti-secretory effect Effects 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 2
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 2
- 238000002695 general anesthesia Methods 0.000 description 2
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 2
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 2
- 238000002690 local anesthesia Methods 0.000 description 2
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 2
- 210000000229 preadipocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000002278 reconstructive surgery Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 2
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 2
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 2
- 102000009088 Angiopoietin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010048154 Angiopoietin-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920000298 Cellophane Polymers 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 1
- 206010056340 Diabetic ulcer Diseases 0.000 description 1
- ZNZYKNKBJPZETN-WELNAUFTSA-N Dialdehyde 11678 Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1[C@H](C[C@H](/C(=C/O)C(=O)OC)[C@@H](C=C)C=O)NCC2 ZNZYKNKBJPZETN-WELNAUFTSA-N 0.000 description 1
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037487 Endotoxemia Diseases 0.000 description 1
- 206010053172 Fatal outcomes Diseases 0.000 description 1
- 208000001034 Frostbite Diseases 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000958041 Homo sapiens Musculin Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000034486 Multi-organ failure Diseases 0.000 description 1
- 208000010718 Multiple Organ Failure Diseases 0.000 description 1
- 208000008636 Neoplastic Processes Diseases 0.000 description 1
- 206010050502 Neuropathic ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 102000003728 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000029 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000004642 Polyimide Substances 0.000 description 1
- 208000004210 Pressure Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000000558 Varicose Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N alpha-D-glucuronic acid Chemical compound O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000703 anti-shock Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010352 biotechnological method Methods 0.000 description 1
- 210000004271 bone marrow stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 208000006111 contracture Diseases 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 description 1
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L dermatan sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](OS([O-])(=O)=O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C([O-])=O)O1 AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004880 explosion Methods 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036074 healthy skin Effects 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 102000046949 human MSC Human genes 0.000 description 1
- 239000000416 hydrocolloid Substances 0.000 description 1
- 230000002631 hypothermal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 1
- 210000003692 ilium Anatomy 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005965 immune activity Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 231100000225 lethality Toxicity 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 208000029744 multiple organ dysfunction syndrome Diseases 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 210000002640 perineum Anatomy 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- -1 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 1
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 description 1
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 1
- 229920001721 polyimide Polymers 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000011301 standard therapy Methods 0.000 description 1
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Surgery (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Virology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии и комбустиологии. Выполняют раннюю хирургическую некрэктомию и одномоментную кожную пластику с пересадкой трансплантата. При этом вводят аллогенные адипогенные мезенхимальные стволовые клетки по периметру ожоговой раны и субфасциально под пересаженный трансплантат. В частном случае дополнительно проводят внутримышечное введение аллогенных адипогенных мезенхимальных стволовых клеток. Аллогенные адипогенные мезенхимальные стволовые клетки вводят вначале на 2-3 сутки после травмы, затем при первой перевязке. 2 з.п. ф-лы, 3 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно, к военно-полевой хирургии и комбустиологии, и может быть использовано для восстановления кожного покрова при обширных глубоких ожогах кожи, т.е. у тяжелообожженных.
Для осуществления данного способа проводится некрэктомия раны субфасциально, внутримышечно и по периметру ожога в зону глубокого ожога кожи вводится суспензия мезенхимальных стволовых клеток и проводится аутодермопластика раны. Инъекции осуществляют по периметру раны и субфасциально под пересаженный трансплантант.
Одно из интенсивно развивающихся направлений современной медицины связано с использованием мезенхимальных стволовых клеток для частичного или полного восстановления морфологической и функциональной целостности тканей организма, поврежденных вследствие травмы или развития патологического процесса (например, ожога).
В настоящее время все большее развитие для целей клеточной терапии приобретает введение в поврежденную область мезенхимальных клеток жировой ткани.
Клеточный материал, используемый в регенеративной медицине для введения в пораженную область, должен удовлетворять ряду требований:
1. Легкая приживаемость, отсутствие реакции отторжения.
2. Способность к миграции в поврежденную область и пролиферация.
3. Способность к дифференцировке в клетки, аналогичные клеточной популяции поврежденной ткани.
4. Способность к секреции факторов, способствующих ранозаживлению, в т.ч. ангиогенных факторов.
Наличие или отсутствие отторжения организмом хозяина во многом определяется иммуномодулирующими свойствами мезенхимальных клеток. В настоящее время известно, что мезенхимальные клетки имеют ряд механизмов, позволяющих им, по крайней мере, локально подавлять функцию иммунных и иммунокомпетентных клеток (Shi et al., Mesenchymal stem cells: a new strategy for immunosuppression and tissue repair. Cell Res. 2010; 20(5): 510-518).
Описание
Целью хирургического лечения при обширных глубоких ожогах кожи является хирургическое восстановление кожного покрова в максимально короткие сроки, предпочтительно в первые 1,5-2 месяца после травмы, т.е. до того, как успеют развиться тяжелые осложнения и необратимые изменения в организме обожженного. Известны многочисленные способы хирургического восстановления кожного покрова, включающие свободную пересадку сплошных или перфорированных аутотрансплантантов, представляющих собой полнослойные или расщепленные лоскуты кожи пациента (Братусь В.Д. Хирургическое лечение термических ожогов. - Киев: МедГиз УССР, 1963. - 382 с; Атясов Н.И. Система активного хирургического лечения тяжелообожженных. - Горький, 1972. - 385 с; Вихрев Б.С., Бурмистров В.М. Ожоги: руководство для врачей. - Л.: Медицина, 1986. - 272 с.; Крылов К.М. Хирургическое лечение глубоких ожогов: Автореф. Дис. … д-ра мед. Наук. - СПб, 2000. - 42 с; Парамонов Б.А. Порембский Я.О., Яблонский В.Г. Ожоги: рук. Для врачей. - СПб.: Спецлит, 2000. - 488 с.)
Перспективными являются биотехнологические методики восстановления кожного покрова, предусматривающие использование клеточных культур (кератоцитов, фибропластов, стволовых клеток), а также биотехнологических продуктов на их основе (Рахматуллин P.P. Биопластический материал на основе гидроколлоида гиалуроновой кислоты и пептидного комплекса для восстановительной и реконструктивной хирургии. Автореф. Дисс. д.б.н. - М., 2014. - 39 с.), одним из наиболее эффективных направлений признается использование биопластических материалов, разработка 2D и 3D матриксов искусственных органов в качестве структурной основы для тканеинженерных конструкций, в т.ч. на основе клеточных продуктов, в т.ч. на основе стволовых клеток (Рахматуллин P.P. Биопластический материал на основе гидроколоида гиалуроновой кислоты и пептидного комплекса для восстановительной и реконструктивной хирургии. Дисс. на соискание ученой степени д.б.н. - М., 2014. - 324 с.)).
Известен способ лечения ожогов кожи, предусматривающий на первом этапе при поступлении пациента проведение первичной хирургической обработки раны и декомпрессионные разрезы с целью предотвращения ишемии в связи с нарастающим отеком. Второй этап включает раннюю некрэктомию, как правило, с одномоментной аутодермопластикой. В случае глубокого поражения тканей и невозможности полного хирургического удаления выполняются частые, вплоть до ежедневных, перевязки с антисептическими растворами, ферментами. На третьем этапе лечения раневую поверхность закрывают аутодермотрансплантантом (Алексеев А.А. Современные методы лечения ожогов и ожоговой болезни // Комбустиология (эл. версия). - 1999. - №1 //http://combustiolog.ru/joumal/sovremenny-e-metody-lecheniya-ozhogov-i-ozhogovoj-bolezni/).
Недостатками этого способа являются:
1. Высокая летальность в случае обширного глубокого термического ожога.
2. Дефицит донорского ресурса для закрытия ожоговой раны.
3. Высокая частота лизиса аутодермотрансплантантов, в связи с антибиотикоустойчивыми штаммами микроорганизмов.
4. Необходимость длительного поэтапного лечения.
5. Необходимость частых перевязок под наркозом.
6. Большое количество инфекционных осложнений.
7. Тяжесть состояния пациента, обусловленная пулом поступающих из раны эндогенных воспалительных агентов.
8. Длительность реабилитационного периода.
9. Обширные косметические дефекты в исходе заживления, вследствие рубцовых деформаций и контрактур.
Известен способ кожной пластики, предусматривающий закрытие ран свободным расщепленным дермальным лоскутом с последующим закрытием операционной и донорской ран антисептическими повязками, в качестве антисептических повязок используют салфетки из диальдегидцеллюлозы, содержащие медь и антиоксидант растительного происхождения «Тыквеол» (патент РФ №2158112 от 2000.10.27)
Известен способ оперативного лечения ожоговых ран, при осуществлении которого для закрытия пораженного участка используют аутодермотрансплантант. На донорское место предварительно наносят эмульсию 30% раствора димексида и 10% масляного раствора токоферола ацетата в соотношении 5:1 (патент РФ 2176911 от 2001.12.20).
Для оперативного восстановления кожного покрова при ожогах предложен аллотрансплантант, представляющий собой клетки диплоидного штамма фибробластов легкого эмбриона человека Л-68, нанесенного на целлофановую пленку. Пленку обрабатывают детергентом, обмывают, обезжиривают и наносят клетки фибробластов легкого эмбриона человека. Данный способ восстановления кожного покрова оказывается эффективным при лечении кожных ран различной этиологии: ожоговых, донорских, образующихся после забора кожного лоскута при выполнении операции аутодермопластики, полученных в результате отморожения, флегмонозного воспаления. Трансплантируемые на подложке фибропласты стимулируют краевую и островковую эпителизацию собственных тканей, ускоряют процесс заживления кожного покрова и при инфицировании ран способствуют очищению раневой поверхности от гноя (патент РФ №2142820 от 1999.12.20).
Известен способ восстановления кожного покрова, предусматривающий выделение и последующее культивирование кератиноцитов на полимерной пористой подложке из оптического прозрачного полимера со сквозными порами диаметром D - 0.01-3,0 мкм и плотностью пор N = (103-109) 1/см2 до формирования монослоя кератиноцитов. Кератиноциты могут культивировать в присутствии фибропластов линии 3ТЗ на противоположной стороне подложки. Подложка может быть выполнена из полиэтилентетрафталата, полиимида или карбоксиметилцеллюлозы. В качестве кератиноцитов могут культивироваться аллогенные кератиноциты. Способ повышает эффективность лечения и позволяет осуществить визуальный контроль за регенерацией кожного покрова на раневой поверхности (патент РФ №2148970 от 1999.02.26).
Недостатки всех указанных выше способов состоят в их низкой эффективности при обширных глубоких ожоговых поражениях, большей трудоемкости и высокой стоимости проводимого лечения, относительно низкой эффективности и высокой стоимости проводимого лечения, относительно низкой эффективности и высокой частоте осложнений при лечении тежелообожженных. Из-за развития анемии, эндотоксикоза, ДВС-синдрома, инфекционных осложнений, выполнение обширных травматичных хирургических вмешательств может значительно утяжелить состояние тяжелообожженного и спровоцировать осложнения (полиорганная недостаточность, сепсис).
Известен способ лечения глубоких ожогов кожи, в том числе и III-Б степени. Способ включает в себя нанесение на раневую поверхность биодеградируемого материала, содержащего аллогенные культивированные фибропласты фетусов животного и губчатую композицию, приготовленную из 2% раствора ацетата коллагена и 2% раствора ацетата хитозана молекулярной массы 100-700 кДа и степенью дезацетилирования свыше 95%. При этом в 2% раствор ацетата хитозана добавлены: аскорбиновая кислота 1,8 г, хондроитинсерная кислота 5-100 мг, D-глюкуроновая кислота - 10-100 мг, гепарин - 2,5-5 мг и сывороточный фактор роста крупного рогатого скота "адгелон" - 11-220 мкг.(патент РФ №2372922 от 2008.06.18).
Недостатками указанного выше способа являются:
1. Полученные в результате экспериментального исследования данные не могут быть использованы для дальнейшего развития исследования и применения методики лечения у человека, так как в нашей стране законодательно запрещено в качестве субстрата для выделения фибропластов использовать эмбриональные ткани.
2. В экспериментальном исследовании животным производили отсроченное лечение, на 2й день после снятия ожогового струпа. Отсроченное лечение может стать причиной дополнительной контаминации ожоговой раны, также в условиях лечения пациентов с обширными ожогами дополнительная операция под наркозом может сыграть злую роль.
3. В эксперименте в качестве носителя фибропластов используют раневое покрытие, аппликацию проводят на второй день после моделирования ожога. Возникает вопрос о том насколько жизнеспособными будут клетки в условиях экссудации из раны, наличия контаминации бактериальными агентами. Возможно ли полностью реализовать весь потенциал фибропластов их поверхностной аппликацией.
Известна группа изобретений для лечения ожогов и ран. Средство для лечения ран получают следующим способом, включающим культивирование мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани (МСК ЖТ) человека 2-5 пассажа в среде роста до момента достижения концентрации общего белка в среде 3-4 мг/мл. Проводят отбор и очистку среды культивирования и ее концентрирование до уменьшения исходного объема очищенной среды культивирования в 9-11 раз с получением стерильного концентрата, с последующей его лиофилизацией. Средство содержит продукты секреции МСК человека, включающие ключевые факторы роста: FGF basic в концентрации от 2 до 4 пкг/мл, HGF в концентрации от 40 до 80 пкг/мл, VEGF в концентрации от 200 до 800 пкг/мл, ангиопоэтин-1 в концентрации от 0,5 до 10,0 пкг/мл, определяемого методом иммуноферментного анализа при восстановлении лиофилизата в 100 мл стерильного физиологического раствора. При этом среда роста содержит раствор AdvanceSTEM Cell Culture Media, раствор антибиотиков Penicillin-Streptomycin и добавки AdvanceSTEM Stem Cell Growth Supplement при следующем соотношении компонентов, об %: AdvanceSTEM Cell Culture Vedia - 85-95, раствор антибиотиков Penicillin-Streptomycin - 0,95-1,05, добавки к среде роста AdvanceSTEM Stem Cell Growth Supplement - 9,5-10,5 (патент РФ №2574017 от 2014.09.30).
Для оценки потенциала данного средства необходимо оценить его в условиях обширного глубокого ожога кожи, в эксперименте, проведенном авторами средство было испытано на крысах линии Wistar на ожогах кожи паром I-III А степени (экспозицию паром выполняли в течение 2 сек.).
Известен способ лечения открытых кожных ран, включающих ожоговые раны, невропатические язвы, пролежни, язвы при венозном застое и диабетические язвы. Авторы описывают применение средства, выбранного из адипоцитов, преадипоцитов для приготовления фармацевтической композиции, адаптированной для имплантации в кожную рану для индукции или ускорения процесса заживления кожной раны, где указанные адипоциты или предадипоциты предварительно подвергали действию модулятора адипоцитов, причем указанный модулятор адипоцитов является антагонистом PPAR-γ, предпочтительно GW9662 (патент РФ №2419441 от 2004.05.08).
Недостаток данного метода состоит в том, что в процессе эксперимента авторы проводили наблюдение за лабораторными животными в течение 6 дней, также их методика требует ежедневного лечения, они говорят о лечении различными средствами, но не указывают какими именно. В результатах говорится об активной миграции кератиноцитов и как следствие уменьшение раны связанных с влиянием адипсина. Но встает вопрос, так как в эксперименте использовали мелких лабораторных животных, не связано ли раннее закрытие раны, со слабо развитой подкожно-жировой клетчаткой у мелких лабораторных животных и как следствие закрытие раны первичным натяжением. Не раскрытым остается также вопрос о том стимулирует ли адипсин миграцию эпителиоцитов в область поражения.
Известен способ лечения с применением композиции для регенерации клеток кожи и слизистых оболочек. Кондиционированную продуктами жизнедеятельности и ростовыми факторами мезенхимальных стволовых клеток, на стадиях логарифмической фазы и стационарной фазы роста стабильной клеточной культуры мезенхимальных стволовых клеток, содержащую биологически активные соединения на основе низкомолекулярных пептидов с молекулярной массой 6-8 кДа и низкомолекулярных веществ с молекулярной массой 2-3 кДа, соответствующих активным цитокинам, в количестве по меньшей мере n×10, где n - количество названных биологически активных соединений в исходной культуральной питательной среде. В состав композиции также входят костномозговые мезенхимальные стволовые клетки (МСК) человека в количестве по меньшей мере 105 клеток/мл. Композиция включает культуральную питательную среду (патент РФ №2455354 от 2010.12.29).
Недостаток данного способа состоит в применение в качестве источника стволовых клеток красного костного мозга человека, так как процедура получения является болезненной и дорогостоящей.
Наиболее близким по совокупности существенных признаков следует признать способ лечения радиационных ожогов с использованием клеточных препаратов на основе мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток в рамках клинического исследования (К.В. Котенко, И.И. Еремин, Б.Б. Еремин, Б.Б. Мороз, А.Ю. Бушманов, Н.М. Надежина, И.А. Галстян, О.С. Гринаковская, А.В. Аксененко, Ю.Б. Дешевой, В.Г. Лебедев, Т.С. Слободина, Ю.А. Жгутов, С.Е. Лаук-Дубицкий, П.С. Еремин, Клеточные технологии в лечении радиационных ожогов: опыт ФМБЦ им. А.И. Бурназяна. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. Том VII, №2, 2012. Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И. Бурназяна ФМБА России, Москва). Исследование направлено на стимуляцию регенерации незаживляющих и устойчивых к стандартной терапии трофических язв. В работе авторами использовано местное введение мезенхимальных стволовых клеток красного костного мозга. Клеточных материал был получен путем пункции подвздошной кости под местным обезболиванием. Объем аспирированного костного мозга составлял от 50 до 100 мл. Протокол лечения радиационных ожогов с использованием аутогенных ММСК, наносимых на поверхность раны аппликационного в фибрированном клее Тиссукол Кит (рег. №П №014732/01) и путем обкалывания зоны поражения.
Недостатки способа, выбранного в качестве прототипа состоят в:
1. Материал выдвигаемый в качестве источника стволовых клеток не оптимальный, так как в красном костном мозге лишь 0,01-0,001% ядерных клеток могут быть отнесены к МСК, что ограничивает исходное количество клеток и повышает техническую сложность метода.
2. В клиническом исследовании авторы использовали аутологичный клеточный материал, что значительно сокращает область его применения в случае ургентного лечения термических поражений, так как процесс выделения и культивирования стволовых клеток является длительным, не менее 2-3 недель.
3. В клиническом исследовании материал был получен путем пункции подвздошной кости под местным обезболиванием, объем аспирированного костного мозга составлял от 5 до 100 мл. В случае обширного ожога данный факт является недостатком в условиях постоянных кровопотерь, связанных с перевязками, а также активно проходящими неопластическими процессами в поврежденной области, дополнительная потеря части кроветворной ткани может неблагоприятно сказаться на организме.
4. В клиническом исследовании аутогенные мезенхимальные стволовые клетки наносили на поверхность раны аппликационно в фибриновом клее ТиссуколКит (рег. №П №014732/01) и путем обкалывания зоны поражения. По нашему мнению, активная экссудация и контаминация раневой поверхности делают малоэффективной аппликацию стволовых клеток в фибриновом клее.
5. В исследовании мезенхимальные стволовые клетки применяли у пациентов с длительным анамнезом болезни, мы считаем, что при отсроченном введении стволовых клеток снижается потенциал паракринного противовоспалительного воздействия, что снижает эффективность метода.
Цель предлагаемого изобретения состоит в повышении эффективности классических методик лечения, сокращении сроков восстановления кожного покрова в зоне глубоких термических ожогов кожи, ускорение процессов закрытия ожоговой раны, улучшение и совершенствование традиционных методов лечения глубоких ожогов кожи.
Паракринный эффект, оказываемый мезенхимальными стволовыми клетками, способствует миграции собственных клеток организма, а также оказывает противовоспалительное действие.
Введение аллогенных стволовых клеток позволяет решить проблему дефицита донорских ресурсов пациента, ограниченных тяжестью состояния и площадью поражения.
Технический результат поставленной задачи достигнут посредством того, что в способе лечения термических ожогов кожи III степени (по МКБ 10 пересмотра) применяемом в клиническом исследовании в качестве субстрата для выделения мезенхимальных стволовых клеток используют жировую клетчатку. Пациентам после письменного соглашения, вводится местно суспензия аллогенных мезенхимальных стволовых клеток. Введение осуществляли в острый период ожоговой болезни методом инфильтрации подлежащих тканей в области ожога.
Подкожная жировая ткань содержит большое количество целевых клеток (стромально-васкулярная фракция жировой ткани содержит от 5 до 10% мезенхимальных стволовых клеток в числе ядерных клеток) (Zuk et al., 2001). Так многими исследователями показано, что аллогенные мезенхимальные стволовые клетки могут пролиферировать на протяжении более чем 25-50 пассажей, не теряя своей генетической стабильности. В предлагаемом способе объем изымаемого материала может составить от 100 мл до 3000 мл. Локальное введение клеточной суспензии с инфильтрацией раневой поверхности позволяет создать высокую концентрацию клеток в области повреждения. Противовоспалительный эффект стволовых клеток выражается в их паракринном действии на окружающие ткани.
При использовании данного способа исключена возможность имунного отторжения трансплантированных клеток вследствие их низкой иммунной активности. Предлагаемый способ воспроизводится в клиническом исследовании с применением сертифицированного в России продукта - суспензии мезенхимальных стволовых клеток, полученной из жировой ткани, что позволяет избежать проблем этического характера связанных с использованием эмбрионального материала в качестве источника стволовых клеток. Внедрение указанного метода в клиническую практику позволит значительно снизить продолжительность лечения и реабилитации пациентов, снизить экономические затраты.
Способ позволяет воспроизводить данную методику в рамках клинических исследований, при этом его воспроизведение не требует дополнительной травматизации и забора донорского материала у пациента с ожогом, широкое применением метода не требует дорогостоящего оборудования, и, возможно, в стандартных условиях ожоговых отделений и стационаров.
Способ реализуют следующим образом: пациенту проводят первичную обработку раны (ожога), назначается плановая терапия, включавшая, но не ограничивающаяся, проведением инфузионно-трансфузионной, антибактериальной, десенсибилизирующей терапии. В ближайшее возможное время, насколько позволяет состояние пациента, проводится некрэктомия раны с одновременным забором отрезка здоровой кожи пациента нужного размера. Субфасциально, внутримышечно и по периметру ожога в зону глубокого ожога кожи вводится суспензия мезенхимальных стволовых клеток и проводится аутодермопластика раны. Суспензия (1 млн клеток в 1 мл) используется для внутрикожных и внутримышечных инъекций, ее вводят после выполнения ранней некрэктомии и одномоментной аутодермопластики (на 2-3 сутки после травмы), дозировка - до 0,5 мл на 1 см2, инъекции осуществляют по периметру раны и субфасциально под пересаженный трансплантант.
Возможность достижения цели и решение задач изобретения подтверждена следующими примерами.
Пример 1. Пострадавший Г., 49 лет, поступив в ожоговое отделение №1 НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе 28.05.17 в 15 часов 20 минут спустя 24 ч после травмы, полученной в быту. Диагноз при поступлении: ожог пламенем 6% III-Б правой нижней конечности. Общее состояние пострадавшего средней степени тяжести. Пострадавшему выполнен первичный туалет ожоговых ран, наложены повязки с растворами антисептиков. Назначена плановая терапия, включавшая проведение инфузионно-трансфузионной, антибактериальной, десенсибилизирующей терапии. Пострадавший получал витамины, антикоагулянты, метаболические корректоры дезагреганты, симптоматическую терапию. На 2-е сутки выполнена ранняя радикальная фасциальная некректомия на площади 6% поверхности тела (п.т.) с одномоментной аутодерморпластикой на той же площади с коэффициентом перфорации 1:2-1:3, субфасциальным введением суспензии аллогенных мезенхимальных стволовых клеток (20 млн в 20 мл), повторное введением той же дозы аллогенных мезенхимальных стволовых клеток в зону первичной трансплантации при первой перевязке, на 6-е сутки после травмы. Приживление трансплантантов 95-100%. В ранах - активная эпителизация. Окончательное заживление ран на 4-5 неделе, после второй аутодермопластики гранулирующих ран до 5-10 кв.см. Выписан из клиники в удовлетворительном состоянии на 38 сутки после поступления.
Пример 2. Пострадавший А. 34 лет, поступил в отделение анестизиологии и реанимации №8 НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе 20.05.17 в 14 часов 09 минут спустя 2 ч после травмы, полученной на производстве (взрыв склада с горючими материалами). Диагноз при поступлении: Многофакторное поражение. Ожог пламенем 78% (67%) IIIa-б головы, туловища, конечностей, промежности. Ингаляционная травма 2 ст., отравление СО, шок 3 ст. Общее состояние пострадавшего с момента поступления крайне тяжелое. Раны представлены обнаженной болезненной дермой, беловато-серым, местами коричневым струпом, без чувствительности. Выполнена декомпрессионная некротомия на груди, конечностях. В условиях отделения пациенту выполнена катетеризация центральных сосудов, проводилась интенсивная инфузионно-трансфузионная терапия, коррекция водно-электролитного баланса, антибактериальная, антисекреторная, антикоагулянтная, метаболическая, симптоматическая терапия, нутриционная подержка, перевязки с растворами антисептиков, больной помещен в флюидизирующую установку. На 3-й сутки выполнена ранняя обширная фасциальная некрэкотомия в области нижней конечности на площади 15% поверхности тела с одномоментной аутодермопластикой на площади 5% п.т. с коэффициентом перфорации 1:3-1:4, субфасциальным введением суспензии аллогенных мезенхимальных стволовых клеток (20 млн в 20 мл), повторное введение той же дозы аллогенных мезинхимальных стволовых клеток в зону первичной трансплантации при первой перевязке, на 6-е сутки после травмы. В послеоперационном периоде констатировано развитие тяжелого сепсиса, тяжелые расстройства гомеостаза, рефрактерная гипотермия - 32-33 градуса Цельсия. Несмотря на столь неблагоприятные условия, констатировано отсутствие лизиса и 100% приживление аутотрансплантанта. Летальный исход пострадавшего обусловлен прогрессированием органной дисфункции, развитием септического шока, вне связи с успешным восстановлением кожного покрова.
Пример 3. Пострадавший М. 46 лет, поступил в отделение анестизиологии и реанимации №8 НИИ скорой помощи им. И.И. Джанелидзе 13.06.17 в 00 часов 25 минут спустя 12 ч после травмы, полученной в быту. Диагноз при поступлении: Ожог пламенем 36% (16%) IIIa-б головы, шеи, туловища, верхних конечностей, шок 3 ст. Клиническая смерть 13.06.2017. Общее состояние пострадавшего с момента поступления крайне тяжелое, обусловлено особенностями медицинской помощи на догоспитальном этапе, постреанимационной болезнью, отсрочной проведения противошоковой терапии, ранним развитием органной дисфункции. Раны представлены обнаженной болезненной дермой, беловато-серым местами коричневым струпом, без чувствительности. Выполнена декомпрессионная некротомия в области верхних конечностей. В условиях отделения пациенту выполнена катетеризация центральных сосудов, проводилась интенсивная инфузионно-трансфузионная терапия, коррекция водно-электролитного баланса, антибактериальная, антисекреторная, антикоагулянтная, метаболическая, симптоматическая терапия, нутриционная подержка, перевязки с растворами антисептиков, больной помещен в флюидизирующую установку. На 2-й сутки выполнена ранняя фасциальная некрэкотомия в области правой верхней конечности на площади 8% поверхности тела с одномоментной аутодермопластикой на площади 5% п.т. с коэффициентом перфорации 1:3, субфасциальным введением суспензии аллогенных мезенхиальных стволовых клеток (20 млн. в 20 мл), повторное введение той же дозы аллогенных мезенхиальных стволовых клеток в зону первичной трансплантации при первой перевязке, на 5-е сутки после травмы. В послеоперационном периоде констатировано отсутствие лизиса и 100% приживление аутотрансплантанта. Летальный исход пострадавшего обусловлен прогрессированием органной дисфункции, развитием септического шока, в не связи с успешным восстановлением участка кожного покрова.
Новизна предложенного способа состоит в применении мезенхимальных стволовых клеток, полученных из жировой клетчатки. Для лечения ожогов допустимо применение как аутологичных, так и аллогенных клеток, что позволяет расширить возможности применения метода.
Возможность практической реализации и пригодность к применению доказана возможностью клинического применения мезенхимальных адипогенных стволовых клеток, доступностью сертифицированного продукта «Суспензия мезенхимальных стволовых клеток».
Изобретательский уровень определяется тем, что из применения аутологичных стволовых клеток однозначно не следует возможность применения аллогенных клеток, полученных не из крови согласно способу-пробнику, а из подкожной жировой клетчатки. Задачи изобретения решены в полном объеме.
Claims (3)
1. Способ биотехнологического восстановления кожи при глубоких ожогах III степени, включающий раннюю хирургическую некрэктомию и одномоментную кожную пластику с пересадкой трансплантата, отличающийся тем, что вводят аллогенные адипогенные мезенхимальные стволовые клетки по периметру ожоговой раны и субфасциально под пересаженный трансплантат.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дополнительно проводят внутримышечное введение аллогенных адипогенных мезенхимальных стволовых клеток.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что аллогенные адипогенные мезенхимальные стволовые клетки вводят вначале на 2-3 сутки после травмы и затем при первой перевязке.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017131907A RU2687007C2 (ru) | 2017-09-12 | 2017-09-12 | Способ биотехнологического восстановления кожного покрова аллогенными стволовыми клетками человека |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017131907A RU2687007C2 (ru) | 2017-09-12 | 2017-09-12 | Способ биотехнологического восстановления кожного покрова аллогенными стволовыми клетками человека |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017131907A RU2017131907A (ru) | 2019-03-12 |
| RU2017131907A3 RU2017131907A3 (ru) | 2019-03-12 |
| RU2687007C2 true RU2687007C2 (ru) | 2019-05-06 |
Family
ID=65759361
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017131907A RU2687007C2 (ru) | 2017-09-12 | 2017-09-12 | Способ биотехнологического восстановления кожного покрова аллогенными стволовыми клетками человека |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2687007C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2811662C1 (ru) * | 2023-04-26 | 2024-01-15 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт сильноточной электроники Сибирского отделения Российской академии наук (ИСЭ СО РАН) | Способ стимуляции заживления ожоговых травм в эксперименте |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009121503A2 (de) * | 2008-03-31 | 2009-10-08 | Augustinus Bader | Verfahren und zusammensetzung zur regeneration von gewebe mit hilfe von stamm- oder knochenmarkzellen |
| RU2419441C2 (ru) * | 2003-08-07 | 2011-05-27 | Хилор Лтд. | Применение адипоцитов, преадипоцитов и стволовых клеток для индукции или ускорения заживления раны и фармацевтическая композиция, содержащая их |
| RU106528U1 (ru) * | 2010-12-29 | 2011-07-20 | Закрытое акционерное общество "Биннофарм" | Клеточный имплантат для восстановления дефектов кожного покрова |
-
2017
- 2017-09-12 RU RU2017131907A patent/RU2687007C2/ru active IP Right Revival
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2419441C2 (ru) * | 2003-08-07 | 2011-05-27 | Хилор Лтд. | Применение адипоцитов, преадипоцитов и стволовых клеток для индукции или ускорения заживления раны и фармацевтическая композиция, содержащая их |
| WO2009121503A2 (de) * | 2008-03-31 | 2009-10-08 | Augustinus Bader | Verfahren und zusammensetzung zur regeneration von gewebe mit hilfe von stamm- oder knochenmarkzellen |
| RU106528U1 (ru) * | 2010-12-29 | 2011-07-20 | Закрытое акционерное общество "Биннофарм" | Клеточный имплантат для восстановления дефектов кожного покрова |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Жуков М.И. и др. Возможности коррекции * |
| Жуков М.И. и др. Возможности коррекции посттравматических и постожоговых рубцов с помощью липофилинга// Современные аспекты лечения термической травмы, мат. науч.-практ.конф. с межд.участ., СПб, 23-24 июня 2016 г, с.39-40. Зиновьев Е.В. и др. Экспериментальная оценка эффективности применения адипогенных мезенхимальных стволовых клеток для лечения ожогов кожи III степени// Вестник Российской Военно-мед.академии, 2017, 1(57), с.137-141, см. 138, 140-141. Каргин В.Д. и др. Эффективность применения аутологичной трансплантации стволовых клеток периферической крови при хронической ишемии нижних конечностей// MedLine.ru, Российский биомедицинский журнал, Гематология, 2014, т.15, 2, с.501-510, найдено [18.02.2019] www.medline.ru, см. с.505-506. Foubert P. et al. Uncultured adipose-derived regenerative cells (ADRCs) seeded in collagen scaffold improves dermal regeneration, enhancing early vascularization and structural organization following thermal burns// Burns. 2015 Nov;41(7):1504-16, реф. P * |
| КОРОЛЕВА Т.А. и др. Оценка эффективности применения современных эквивалентов кожи в лечении детей с глубокими ожогами// Рос. вестник детской хирургии, анестезиологии и реаниматологии, 2014, т.IV, 3, с. 77-84. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2811662C1 (ru) * | 2023-04-26 | 2024-01-15 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт сильноточной электроники Сибирского отделения Российской академии наук (ИСЭ СО РАН) | Способ стимуляции заживления ожоговых травм в эксперименте |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2017131907A (ru) | 2019-03-12 |
| RU2017131907A3 (ru) | 2019-03-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Abo-Elkheir et al. | Role of cord blood and bone marrow mesenchymal stem cells in recent deep burn: a case-control prospective study | |
| US9078903B2 (en) | Compositions for the treatment of skin conditions, disorders or diseases and methods of making and using the same | |
| KR101495281B1 (ko) | 피부 재생 또는 상처 치유를 위한 중간엽 줄기세포-하이드로겔-생분해성 또는 중간엽 줄기세포-하이드로겔-비분해성 지지체 조성물 | |
| EP3111974B1 (en) | Cell preparations for extemporaneous use, useful for healing and rejuvenation in vivo | |
| Akita et al. | Early experiences with stem cells in treating chronic wounds | |
| KR20130067247A (ko) | 상처 치유 조성물의 제조를 위한 방법, 튜브 및 장치 | |
| CN108265023B (zh) | 一种增殖促进剂及其应用 | |
| Momeni et al. | A randomized, double-blind, phase I clinical trial of fetal cell-based skin substitutes on healing of donor sites in burn patients | |
| CN107126556B (zh) | 一种干细胞提取物及其制备方法与在制备皮肤创面修复制剂中的应用 | |
| Abdel-Sayed et al. | Cell therapies for skin regeneration: An overview of 40 years of experience in burn units | |
| US20210198626A1 (en) | Compositions and methods for cell culture | |
| Yang et al. | Platelet poor plasma gel combined with amnion improves the therapeutic effects of human umbilical cord‑derived mesenchymal stem cells on wound healing in rats | |
| RU2574017C1 (ru) | Средство для лечения ожогов и ран на основе цитокинов и факторов роста, секретируемых мезенхимными клетками человека, способ получения средства и способ лечения ожогов и ран | |
| US20010006813A1 (en) | Methods and compositions for the preparation of cell transplants | |
| Fimiani et al. | Other uses of homologous skin grafts and skin bank bioproducts | |
| WO2019035925A1 (en) | COMPOSITION AND METHOD FOR TREATING SKIN AFFECTION | |
| RU2687007C2 (ru) | Способ биотехнологического восстановления кожного покрова аллогенными стволовыми клетками человека | |
| CN102552323A (zh) | 加速皮肤修复与再生的药物及其制备方法和应用 | |
| Sabetkam et al. | Impact of Mummy Substance on Proliferation and Migration of Human Wharton's Jelly-Derived Stem Cells and Fibroblasts in an In Vitro Culture System. | |
| CN113116970A (zh) | 一种含黄栀子提取物的干细胞皮肤修复液及制备方法 | |
| Woodroof et al. | Path to ‘One and Done’ | |
| RU2825747C1 (ru) | Способ восстановления целостности кожного покрова при обширных глубоких ожогах | |
| Venter et al. | The use of adipose tissue and its derivates to stimulate and support wound healing processes-An updated review | |
| Segreto | The use of the" stem graft" in chronic wounds: in vitro analysis, clinical and comparative study | |
| Francesco | The use of the" stem graft" in chronic wounds: in vitro analysis, clinical and comparative study |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200913 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20220401 |