RU2669349C1 - Method for producing lysozyme-containing biologically active additive - Google Patents
Method for producing lysozyme-containing biologically active additive Download PDFInfo
- Publication number
- RU2669349C1 RU2669349C1 RU2018113463A RU2018113463A RU2669349C1 RU 2669349 C1 RU2669349 C1 RU 2669349C1 RU 2018113463 A RU2018113463 A RU 2018113463A RU 2018113463 A RU2018113463 A RU 2018113463A RU 2669349 C1 RU2669349 C1 RU 2669349C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lysozyme
- protein
- concentration
- eggs
- biologically active
- Prior art date
Links
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 title claims abstract description 46
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 title claims abstract description 46
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 title claims abstract description 46
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 title claims abstract description 46
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 title claims abstract description 46
- 239000000654 additive Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 title claims abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 29
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 29
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 22
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 6
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 13
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 abstract description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 238000012856 packing Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 12
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 9
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 9
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 8
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical group CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 6
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 5
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 5
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 5
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 5
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 4
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 235000007983 food acid Nutrition 0.000 description 2
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 2
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229910001514 alkali metal chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- -1 cation salt Chemical class 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940072033 potash Drugs 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Substances [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000015320 potassium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002277 temperature effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/08—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from eggs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к способу получения лизоцима, широко применяемого в разных областях народного хозяйства, в частности в пищевой промышленности, медицине, микробиологии.The invention relates to a method for producing lysozyme, widely used in various fields of the national economy, in particular in the food industry, medicine, microbiology.
Лизоцим используется как лекарственный препарат в качестве пищевой добавки и в молочной промышленности для обогащения защитными факторами продуктов детского и лечебного питания.Lysozyme is used as a medicine as a food additive and in the dairy industry for the enrichment of protective products of baby and medical nutrition with protective factors.
Известны различные способы получения лизоцима из животного и микробиологического сырья. Наиболее доступным сырьем животного происхождения для выделения лизоцима является яичный белок. Согласно известному способу [Авторское свидетельство СССР № 9247703, 1968 г.] получения лизоцима из яичного белка исходное сырье обрабатывают раствором хлористого натрия и едкого натра, осуществляют кристаллизацию фермента из раствора и отделяют кристаллы из стабилизированного раствора фильтрацией, при этом кристаллизацию фермента осуществляют трехкратной перекристаллизацией. Выход лизоцима от общего его количества в яичном белке – 80-95, температура хранения 3–4°С. Various methods are known for producing lysozyme from animal and microbiological raw materials. The most accessible raw material of animal origin for the isolation of lysozyme is egg white. According to the known method [USSR Author's Certificate No. 9247703, 1968] of producing lysozyme from egg white, the feedstock is treated with a solution of sodium chloride and caustic soda, the enzyme is crystallized from the solution, and the crystals are separated from the stabilized solution by filtration, while the enzyme is crystallized by three recrystallization. The output of lysozyme from its total amount in egg white is 80-95, storage temperature 3-4 ° C.
Недостатками известного способа являются сложность и длительность процесса, что ведет к тому же к потерям ферментного препарата. Препарат малоустойчив при температуре 18-23°С, поэтому его необходимо хранить при низкой температуре.The disadvantages of this method are the complexity and duration of the process, which leads to the same to the loss of the enzyme preparation. The drug is unstable at a temperature of 18-23 ° C, so it must be stored at a low temperature.
Также известен способ получения лизоцима, сущность которого заключается в том, что яичный белок обрабатывают растворами хлористого натрия и едкого натра с последующим отделением кристаллов лизоцима из раствора фильтрацией, перекристаллизацией и стабилизацией ферментного препарата солью одновалентного катиона, например, натрием хлористым или альбумином. В качестве стабилизатора используют комплекс натрия хлористого и альбумина. При этом натрий хлористый вводят в суспензию лизоцима, содержащую альбумин, сразу же после первой перекристаллизации, не выделяя целевой продукт из раствора, при одновременном установлении значения, рН 3,5-5,0; соотношение натрия хлористого и альбумина 1-15: 1, соотношение лизоцима и натрия хлористого 1-1,25:1,0-5,0 [Авторское свидетельство СССР № 712438, 1980 г.].A method for producing lysozyme is also known, the essence of which is that the egg white is treated with solutions of sodium chloride and sodium hydroxide, followed by separation of the lysozyme crystals from the solution by filtration, recrystallization and stabilization of the enzyme preparation with a monovalent cation salt, for example, sodium chloride or albumin. As a stabilizer, a complex of sodium chloride and albumin is used. In this case, sodium chloride is introduced into the suspension of lysozyme containing albumin, immediately after the first recrystallization, without isolating the target product from the solution, while setting the value, pH 3.5-5.0; the ratio of sodium chloride and albumin is 1-15: 1, the ratio of lysozyme and sodium chloride is 1-1.25: 1.0-5.0 [USSR Author's Certificate No. 712438, 1980].
Недостатками способа также являются сложность и длительность процесса, что ведет к тому же к потерям ферментного препарата. The disadvantages of the method are the complexity and duration of the process, which leads to the same to the loss of the enzyme preparation.
Также известен способ выделения лизоцима [Авторское свидетельство SU 1239147, 1986 г.] , согласно которому проводят экстракцию лизоцима водой при рН 3,0-4,0 и содержании хлорида щелочного металла в реакционной среде 0,5-4,0 мас.% с одновременным нагреванием реакционной среды до 80-95°С и последующим отделение балластных белков.Also known is a method of isolating lysozyme [Copyright certificate SU 1239147, 1986], according to which lysozyme is extracted with water at pH 3.0-4.0 and an alkali metal chloride content in the reaction medium of 0.5-4.0 wt.% S simultaneous heating of the reaction medium to 80-95 ° C and the subsequent separation of ballast proteins.
Недостатком данного способа также является сложность осуществления и низкий выход лизоцима.The disadvantage of this method is the complexity of the implementation and low yield of lysozyme.
Известен способ получения лизоцима из яичного белка путем прямой кристаллизации при добавлении 5% по массе NaCl и доведения pH до 9,8 щелочным агентом с последующей очисткой лизоцима двукратной перекристаллизацией, причем на стадиях кристаллизации и перекристаллизации добавляют затравочные кристаллы, в качестве щелочного агента используют NaHCO3 и к яичному белку, освобожденному от лизоцима, добавляют HCl, что позволяет его использовать в пищевой промышленности, например, для получения яичного порошка [Патент RU №94025573, 1996 г.].A known method of producing lysozyme from egg protein by direct crystallization by adding 5% by weight of NaCl and adjusting the pH to 9.8 with an alkaline agent followed by purification of lysozyme by double recrystallization, seed crystals are added at the stages of crystallization and recrystallization, NaHCO 3 is used as alkaline agent and HCl is added to the egg protein freed from lysozyme, which allows it to be used in the food industry, for example, to obtain egg powder [RU Patent No. 94025573, 1996].
Также известен способ получения лизоцима [Авторское свидетельство СССР № 7123438, 1977 г. ], Сущность которого состоит в том, что в качестве щелочного раствора используют 0,6-1,4-ный раствора аммиака, а выделение проводят путем сорбции, осуществляемой последовательным пропусканием через силохром "СХ-3В", предварительно уравновешенный стартовым растворителем, в качестве которого используют 0.6-1,4-ный раствор аммиака раствора белка и снова стартового растворителя. Also known is a method of producing lysozyme [USSR Author's Certificate No. 7123438, 1977], the essence of which is that a 0.6-1.4-ammonia solution is used as an alkaline solution, and the isolation is carried out by sorption by sequential transmission through a CX-3B silochrom, previously balanced with a starting solvent, which is used as a 0.6-1.4-ammonia solution of a protein solution and again a starting solvent.
Кроме того, известен способ [Патент РФ № 2074732, 1997 г.], заключающийся в получении лизоцима из неразбавленного яичного белка путем колоночного хроматографического процесса на катионите, обеспечивающего обработку за 1 цикл большого количества белка малым количеством катионита, получение элюата высокой чистоты с высокой концентрацией лизоцима. Для этого яичный белок пропускают через колонку с сильнокислотными макропористым катионитом, затем катионит промывают водой или раствором натрия хлорида с концентрацией не выше 0,2 М, после чего элюируют лизоцим, пропуская щелочные растворы неорганических солей с рН 8,5-13,2. В состав элюента могут входить сода Na2CO3 или поташ K2CO3, хлориды, сульфаты или фосфаты натрия или калия в концентрации 0,05-2 М, а также этиловый спирт в концентрации 10-40%.In addition, there is a known method [RF Patent No. 2074732, 1997], which consists in obtaining lysozyme from undiluted egg protein by a column chromatographic process on cation exchange resin, which provides for the treatment of a large amount of protein with a small amount of cation exchange resin per 1 cycle, obtaining a high purity eluate with a high concentration lysozyme. To do this, egg white is passed through a column of strongly acidic macroporous cation exchange resin, then the cation exchange resin is washed with water or sodium chloride solution with a concentration of no higher than 0.2 M, after which lysozyme is eluted, passing alkaline solutions of inorganic salts with pH 8.5-13.2. The composition of the eluent may include soda Na 2 CO 3 or potash K 2 CO 3 , chlorides, sulfates or phosphates of sodium or potassium at a concentration of 0.05-2 M, as well as ethyl alcohol at a concentration of 10-40%.
Существенным недостатком приведенных выше способов выделения являются сложность, многоступенчатость и длительность процесса, что приводит к удорожанию полученного лизоцима.A significant drawback of the above methods of isolation are the complexity, multi-stage and duration of the process, which leads to an increase in the cost of the resulting lysozyme.
Технической задачей изобретения является упрощение технологии получения лизоцимсодержащих продуктов, и повышение выхода лизоцима и стабилизация его активности.An object of the invention is to simplify the technology for producing lysozyme-containing products, and increase the yield of lysozyme and stabilize its activity.
Техническая задача решается тем, что предложен способ получения лизоцимсодержащей биологически активной добавки, включающий приемку и подготовку яиц, разделение содержимого яиц на белок и желток, внесение в белок соли поваренной концентраций 0,4% к массе белка и кислоты аскорбиновой концентрацией 7% к массе белка, нагревание до температуры 65-70°С в течение 15-20 мин, фильтрацию, сушку фильтрата в виброкипящем слое и последующую фасовку.The technical problem is solved by the fact that a method for producing a lysozyme-containing biologically active additive is proposed, which includes receiving and preparing eggs, separating the contents of the eggs into protein and yolk, adding salt to the protein at a concentration of 0.4% by weight of protein and acid with an ascorbic concentration of 7% by weight of protein , heating to a temperature of 65-70 ° C for 15-20 minutes, filtering, drying the filtrate in a vibratory boiling layer and subsequent packaging.
Технический результат изобретения заключается в упрощении технологии получения лизоцимсодержащих продуктов, повышение выхода лизоцима и его активности.The technical result of the invention is to simplify the technology of obtaining lysozyme-containing products, increasing the yield of lysozyme and its activity.
Способ получения лизоцимсодержащей биологически активной добавки осуществляется следующим образом.The method of obtaining lysozyme-containing biologically active additives is as follows.
Осуществляют приемку и подготовку яиц, для выявления недоброкачественных яиц используют овоскоп.Eggs are accepted and prepared; an ovoscope is used to identify poor-quality eggs.
С целью устранения бактериальной обсемененности сырья, проводят дезинфекцию яиц раствором кальцинированной соды с концентрацией 0,2 % при t=30°С, по окончании обработки яйца промывают с целью удаления дезинфицирующего средства с поверхности.In order to eliminate the bacterial contamination of raw materials, eggs are disinfected with a solution of soda ash with a concentration of 0.2% at t = 30 ° C; after processing, the eggs are washed to remove the disinfectant from the surface.
Затем яйца разбивают и разделяют на белок и желток. Для удаления примесей проводят фильтрацию сырья.Then the eggs are broken and divided into protein and yolk. To remove impurities, filter the raw materials.
В белок вносят соль поваренную концентрацией 0,4% к массе белка и кислоту аскорбиновую концентрацией 7% к массе белка, полученную смесь нагревают до температуры 65-70°С в течение 15-20 минут.Cooking salt is added to the protein with a concentration of 0.4% by weight of the protein and ascorbic acid with a concentration of 7% by weight of the protein, the resulting mixture is heated to a temperature of 65-70 ° C for 15-20 minutes.
Затем смесь фильтруют и подвергают сушке в виброкипящем слое при t=64-70°С в течение 15-20 минут. Выход готового продукта составляет 97 %.Then the mixture is filtered and subjected to drying in a vibratory boiling layer at t = 64-70 ° C for 15-20 minutes. The yield of the finished product is 97%.
Готовую лизоцимсодержащую биологически активную добавку упаковывают.The finished lysozyme-containing dietary supplement is packaged.
Технологическая схема производства лизоцимсодержащей биологически активной добавки представлена на фиг. 1.The production flow chart of the lysozyme-containing dietary supplement is shown in FIG. one.
Наиболее простым и доступным способом получения лизоцимсодержащих препаратов является способ ступенчатой денатурации. Для этого в технологии получения яичного белка после операции фильтрации предусмотрено введение кристаллических волокон: пищевых кислот (лимонной) и поваренной соли к массе белка с последующей тепловой обработкой.The simplest and most affordable way to obtain lysozyme-containing drugs is the method of stepwise denaturation. To do this, the technology for producing egg white after the filtration operation provides for the introduction of crystalline fibers: food acids (citric) and sodium chloride to the mass of protein, followed by heat treatment.
Для расширения способов получения высокоактивной пищевой добавки в качестве альтернативного способа, были проведены исследования по применению растворов пищевых кислот различных видов: лимонной, аскорбиновой, молочной, концентрацией от 2 до 10%.. Результаты представлены на фиг. 2. To expand the methods for producing a highly active food additive as an alternative method, studies have been carried out on the use of solutions of various types of food acids: citric, ascorbic, lactic, with a concentration of 2 to 10%. The results are presented in FIG. 2.
Наибольшую активность лизоцим проявляет при использовании аскорбиновой кислоты. Пик активности наблюдается при применении раствора с массовой долей 7% и равен 11033 ЕД/см3. Минимальное значение при с=3% (8919 ЕД/см3). Lysozyme is most active when using ascorbic acid. The peak activity is observed when using a solution with a mass fraction of 7% and equal to 11033 IU / cm 3 . The minimum value at c = 3% (8919 U / cm 3 ).
Зависимость лизоцимной активности от рН белка и концентрации поваренной соли представлена на фиг. 3. The dependence of lysozyme activity on the pH of the protein and the concentration of sodium chloride is shown in FIG. 3.
Исходя из представленных данных, можно сделать вывод, что наибольшую активность лизоцим проявляет при концентрации поваренной соли 0,4% и рН белка 5. Based on the presented data, it can be concluded that lysozyme exhibits the greatest activity at a concentration of sodium chloride of 0.4% and a pH of
Дальнейшее увеличение как концентрации соли, так и рН белка является практически нецелесообразным.A further increase in both the salt concentration and the pH of the protein is practically impractical.
Одним из важнейших факторов, влияющих на активность фермента, является температура.One of the most important factors affecting the activity of an enzyme is temperature.
Результаты исследования влияния температурной обработки на активность лизоцима представлено на фиг. 4. The results of a study of the effect of heat treatment on lysozyme activity are presented in FIG. four.
Наибольшую активность (10760 ЕД/см3) имеет образец, полученный при температуре 70°С и продолжительности воздействия 20 мин. А наименую активность имеет лизоцим, выработанный при температуре 60°С и времени выдержки 10 мин- 9300 ЕД/см3 (фиг. 4). The highest activity (10760 U / cm 3 ) has a sample obtained at a temperature of 70 ° C and a duration of exposure of 20 minutes. And the least activity is lysozyme produced at a temperature of 60 ° C and a holding time of 10 min - 9300 IU / cm 3 (Fig. 4).
Как при низкой, так и при более высокой (больше 70°С) температурах лизоцимная активность снижается.Both at low and at higher (more than 70 ° C) temperatures, lysozyme activity decreases.
По результатам исследования разработаны технологические режимы по получению лизоцима. Оптимальными условиями является:According to the results of the study, technological modes for producing lysozyme were developed. Optimal conditions are:
- использование раствора аскорбиновой кислоты с концентрацией 7%;- the use of a solution of ascorbic acid with a concentration of 7%;
- температурный режим 65-70°С;- temperature conditions 65-70 ° C;
- рН белка 5 и концентрация соли 0,4%;- pH of
- продолжительность температурного воздействия – 15-20 мин.- the duration of the temperature effect is 15-20 minutes.
Способ получения лизоцимсодержащей биологически активной добавки иллюстрируется следующими примерами.The method of obtaining lysozyme-containing biologically active additives is illustrated by the following examples.
Пример 1.Example 1
Осуществляют приемку и подготовку яиц, для выявления недоброкачественных яиц используют овоскоп.Eggs are accepted and prepared; an ovoscope is used to identify poor-quality eggs.
С целью устранения бактериальной обсемененности сырья, проводят дезинфекцию яиц раствором кальцинированной соды с концентрацией 0,2 % при t=30°С, по окончании обработки яйца промывают с целью удаления дезинфицирующего средства с поверхности.In order to eliminate the bacterial contamination of raw materials, eggs are disinfected with a solution of soda ash with a concentration of 0.2% at t = 30 ° C; after processing, the eggs are washed to remove the disinfectant from the surface.
Затем яйца разбивают и разделяют на белок и желток. Для удаления примесей проводят фильтрацию сырья.Then the eggs are broken and divided into protein and yolk. To remove impurities, filter the raw materials.
В белок вносят соль поваренную концентрацией 0,4% к массе белка и кислоту аскорбиновую концентрацией 7% к массе белка, полученную смесь нагревают до температуры 65°С в течение 25 минут.Cooking salt is added to the protein with a concentration of 0.4% by weight of the protein and ascorbic acid with a concentration of 7% by weight of the protein, the resulting mixture is heated to a temperature of 65 ° C for 25 minutes.
Затем смесь фильтруют и подвергают сушке в виброкипящем слое при t=64°С в течение 20 минут. Then the mixture is filtered and subjected to drying in a vibro-boiling layer at t = 64 ° C for 20 minutes.
Готовую лизоцимсодержащую биологически активную добавку упаковывают.The finished lysozyme-containing dietary supplement is packaged.
Пример 2.Example 2
Осуществляют приемку и подготовку яиц, для выявления недоброкачественных яиц используют овоскоп.Eggs are accepted and prepared; an ovoscope is used to identify poor-quality eggs.
С целью устранения бактериальной обсемененности сырья, проводят дезинфекцию яиц раствором кальцинированной соды с концентрацией 0,2 % при t=30°С, по окончании обработки яйца промывают с целью удаления дезинфицирующего средства с поверхности.In order to eliminate the bacterial contamination of raw materials, eggs are disinfected with a solution of soda ash with a concentration of 0.2% at t = 30 ° C; after processing, the eggs are washed to remove the disinfectant from the surface.
Затем яйца разбивают и разделяют на белок и желток. Для удаления примесей проводят фильтрацию сырья.Then the eggs are broken and divided into protein and yolk. To remove impurities, filter the raw materials.
В белок вносят соль поваренную концентрацией 0,4% к массе белка и кислоту аскорбиновую концентрацией 7% к массе белка, полученную смесь нагревают до температуры 70°С в течение 15 минут.Cooking salt is added to the protein with a concentration of 0.4% by weight of the protein and ascorbic acid with a concentration of 7% by weight of the protein, the resulting mixture is heated to a temperature of 70 ° C for 15 minutes.
Затем смесь фильтруют и подвергают сушке в виброкипящем слое при t=70°С в течение 20 минут. Then the mixture is filtered and subjected to drying in a vibratory boiling layer at t = 70 ° C for 20 minutes.
Готовую лизоцимсодержащую биологически активную добавку упаковывают.The finished lysozyme-containing dietary supplement is packaged.
Осуществление предлагаемого способа позволяет:The implementation of the proposed method allows you to:
– упростить технологию получения лизоцимсодержащих продуктов;- to simplify the technology of obtaining lysozyme-containing products;
– повысить выход лизоцима и его активность.- increase the yield of lysozyme and its activity.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018113463A RU2669349C1 (en) | 2018-04-13 | 2018-04-13 | Method for producing lysozyme-containing biologically active additive |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018113463A RU2669349C1 (en) | 2018-04-13 | 2018-04-13 | Method for producing lysozyme-containing biologically active additive |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2669349C1 true RU2669349C1 (en) | 2018-10-10 |
Family
ID=63798526
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018113463A RU2669349C1 (en) | 2018-04-13 | 2018-04-13 | Method for producing lysozyme-containing biologically active additive |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2669349C1 (en) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU712438A1 (en) * | 1977-03-10 | 1980-01-30 | Предприятие П/Я Г-4740 | Method of preparing lysozyme |
| SU1028334A1 (en) * | 1981-03-20 | 1983-07-15 | Ордена Трудового Красного Знамени Научно-Исследовательский Институт Эпидемиологии И Микробиологии Им.Н.Ф.Гамалеи | Method of producing lysozyme |
| RU2000005C1 (en) * | 1991-08-01 | 1993-02-15 | Центральный институт усовершенствования врачей | Method of lysozyme preparing |
| RU94025573A (en) * | 1994-07-04 | 1996-06-27 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Ноосфера-Саратов" | Method of lysozyme preparing from egg protein |
| RU2366294C1 (en) * | 2008-03-12 | 2009-09-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет прикладной биотехнологии" | Dietary supplement "mobelis" and its production method |
-
2018
- 2018-04-13 RU RU2018113463A patent/RU2669349C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU712438A1 (en) * | 1977-03-10 | 1980-01-30 | Предприятие П/Я Г-4740 | Method of preparing lysozyme |
| SU1028334A1 (en) * | 1981-03-20 | 1983-07-15 | Ордена Трудового Красного Знамени Научно-Исследовательский Институт Эпидемиологии И Микробиологии Им.Н.Ф.Гамалеи | Method of producing lysozyme |
| RU2000005C1 (en) * | 1991-08-01 | 1993-02-15 | Центральный институт усовершенствования врачей | Method of lysozyme preparing |
| RU94025573A (en) * | 1994-07-04 | 1996-06-27 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Ноосфера-Саратов" | Method of lysozyme preparing from egg protein |
| RU2366294C1 (en) * | 2008-03-12 | 2009-09-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет прикладной биотехнологии" | Dietary supplement "mobelis" and its production method |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107836723B (en) | Prebiotics additive and preparation method and application thereof | |
| US1992462A (en) | Manufacture of flavoring materials | |
| CN103167872B (en) | For the production of the method for VBT tartrate | |
| RU2669349C1 (en) | Method for producing lysozyme-containing biologically active additive | |
| US20070202213A1 (en) | Method for producing transglutaminase composition | |
| US2683739A (en) | Process for the crystallization of l-glutamic acid | |
| US3083194A (en) | Montmorillonite adsorption of fibrin from bovine blood plasma | |
| RU2734782C1 (en) | Lactulose production method | |
| CN109198573A (en) | A kind of raw oyster deep working method | |
| CN108635369A (en) | A kind of efficient liver, intestinal regeneration agent and bait | |
| US2214115A (en) | Process of making mono-sodium glutamate from gluten | |
| SU712438A1 (en) | Method of preparing lysozyme | |
| RU2457229C1 (en) | Method of producing gelatin | |
| EP3762503A1 (en) | Separation of basic amino acids | |
| US2098923A (en) | Process of preparing aminoacetic acid | |
| EP1921135A1 (en) | Method for preparation of transglutaminase-containing matter having reduced protease activity | |
| JPH0145353B2 (en) | ||
| RU2700444C1 (en) | Method for production of iodized milk whey proteins for producing a biologically active substance | |
| RU2723044C2 (en) | Natural taste-and-flavor base and method for its preparation | |
| RU2017496C1 (en) | Method of dna sodium salt isolation | |
| JPH0556764A (en) | Production of potassium-containing salting agent | |
| KR820001701B1 (en) | Method for manufacturing of beverage from bean and egg | |
| JPH03259063A (en) | Production of seasoning, chitin and glucosamine | |
| JPS6212727A (en) | Decomposed albumen and production thereof | |
| JPS6248358A (en) | Production of egg white hydrolyzate |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20190213 Effective date: 20190213 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200414 |