RU2663571C1 - Способ определения ароматических микробных метаболитов в форме фенилкарбоновых кислот в сыворотке крови - Google Patents
Способ определения ароматических микробных метаболитов в форме фенилкарбоновых кислот в сыворотке крови Download PDFInfo
- Publication number
- RU2663571C1 RU2663571C1 RU2017128745A RU2017128745A RU2663571C1 RU 2663571 C1 RU2663571 C1 RU 2663571C1 RU 2017128745 A RU2017128745 A RU 2017128745A RU 2017128745 A RU2017128745 A RU 2017128745A RU 2663571 C1 RU2663571 C1 RU 2663571C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- blood serum
- pca
- analysis
- determination
- trimethylsilyl
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 34
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 15
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 10
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 title abstract description 3
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 title abstract description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 title abstract 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims abstract description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 3
- 238000006884 silylation reaction Methods 0.000 claims description 2
- XCOBLONWWXQEBS-KPKJPENVSA-N N,O-bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide Chemical compound C[Si](C)(C)O\C(C(F)(F)F)=N\[Si](C)(C)C XCOBLONWWXQEBS-KPKJPENVSA-N 0.000 abstract description 3
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 abstract description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 6
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 4
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 159000000032 aromatic acids Chemical class 0.000 description 3
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XQXPVVBIMDBYFF-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxyphenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XQXPVVBIMDBYFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KKADPXVIOXHVKN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxyphenylpyruvic acid Chemical compound OC(=O)C(=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KKADPXVIOXHVKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000723347 Cinnamomum Species 0.000 description 2
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000037358 bacterial metabolism Effects 0.000 description 2
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- QRMZSPFSDQBLIX-UHFFFAOYSA-N homovanillic acid Chemical compound COC1=CC(CC(O)=O)=CC=C1O QRMZSPFSDQBLIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVGVDSSUAVXRDY-UHFFFAOYSA-M 3-(4-hydroxyphenyl)lactate Chemical compound [O-]C(=O)C(O)CC1=CC=C(O)C=C1 JVGVDSSUAVXRDY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XMIIGOLPHOKFCH-UHFFFAOYSA-N 3-phenylpropionic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=CC=C1 XMIIGOLPHOKFCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005274 4-hydroxybenzoic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical class Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRKUHYFDBWGLHJ-UHFFFAOYSA-N N-(tert-butyldimethylsilyl)-N-methyltrifluoroacetamide Chemical compound FC(F)(F)C(=O)N(C)[Si](C)(C)C(C)(C)C QRKUHYFDBWGLHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 210000004271 bone marrow stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 125000004177 diethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 description 1
- 235000013870 dimethyl polysiloxane Nutrition 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 235000011167 hydrochloric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003771 laboratory diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000000622 liquid--liquid extraction Methods 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
- G01N33/491—Blood by separating the blood components
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно способу анализа сыворотки крови (СК) пациентов и может быть использовано в клинической лабораторной диагностике для определения продуктов метаболизма бактерий. Для этого проводят определение ароматических микробных метаболитов в форме фенилкарбоновых кислот (ФКК) в образцах СК пациентов. Способ включает извлечение ФКК из подкисленного раствора сыворотки крови путем микросорбционного концентрирования в шприце, заполненном силикагелем с привитой фазой С18, их элюирования диэтиловым эфиром, упаривания элюата досуха, дериватизации с использованием N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамида и анализа полученных триметилсилильных производных методом газовой хроматомасс-спектрометрии. Заявленное изобретение позволяет определить содержание ФКК в сыворотке пациента для определения степени тяжести больных с наличием инфекции бактериальной этиологии или сепсиса. 1 табл., 1 пр.
Description
Изобретение относится к способам анализа биологических материалов, а именно сыворотки крови (СК). Предлагаемый способ может быть использован в клинической лабораторной диагностике для определения продуктов метаболизма бактерий в форме фенилкарбоновых кислот (ФКК): бензойной (БК), фенилпропановой (ФПК), фенилмолочной (ФМК), 4-гидроксибензойной (n-ГБК), 4-гидроксифенилуксусной (n-ГФУК), фенилпропеновой (коричной), 3-метокси-4-гидроксифенилуксусной (гомованилиновой, ГВК), 4-гидроксифенилпропановой (n-ГФПК) и 4-гидроксифенилмолочной (n-ГФМК) кислот в образцах СК здоровых доноров и пациентов.
Уровень техники
В настоящее время одним из самых распространенных способов извлечения ФКК при анализе СК является способ жидкость-жидкостной экстракции (ЖЖЭ). К числу известных способов анализа СК с использованием ЖЖЭ относится способ лабораторной диагностики сепсиса, который предусматривает оценку уровня содержания метаболитов, т.е. продуктов жизнедеятельности живых микроорганизмов в сыворотке крови, а именно низкомолекулярных химических соединений - ФКК (RU 2423704).
Способ включает количественное определение n-ГФМК, ФМК, n-ГФУК и ГВК кислот в образцах СК с помощью хроматомасс-спектрального анализа (ГХ/МС) после пробоподготовки путем ЖЖЭ. Однако использование указанного способа пробоподготовки предусматривает использование большого объема органических растворителей, что требует специально оборудованного помещения, а также значительных временных затрат, связанных с необходимостью двукратной экстракции и упаривания органического элюата. Известный способ не может быть автоматизирован из-за необходимости использования центрифуги.
Наиболее близким к заявляемому по совокупности существенных признаков является способ определения n-ГФМК, 4-гидроксифенилпировиноградной кислоты и тирозина в плазме крови здоровых людей методом изотопного разбавления с детектированием ГХ/МС, представленный в работе J.C. Deutsch (Deutsh J.C. Determination of p-hydroxyphenylpyruvate, p-hydroxyphenyllactate and tyrosine in normal human plasma by gas chromatography-mass spectrometry isotope-dilution assay. // J. Chromatogr. B. 1997. V. 690. P. 1-6). Выбран в качестве прототипа.
При использовании способа-прототипа для извлечения указанных соединений из плазмы крови применяли сорбционное концентрирование на патронах с анионообменным сорбентом (50 мг). При этом необходимый объем анализируемой плазмы крови составляет 500 мкл. Элюирование проводили растворами уксусной и соляной кислот, а в качестве дериватизирующего (силилирующего) агента использовали N-метил-N-(трет-бутилдиметилсилил)трифторацетамид. Известная методика позволяет проводить определение указанных соединений на уровне 10-200 нг/мл и используется при диагностике заболеваний печени и нарушений метаболизма тирозина.
К числу причин, по которым при использовании способа-прототипа не могут быть достигнуты технические результаты заявляемого способа, относятся следующие.
- Использование плазмы крови вместо сыворотки может привести к потере целевых компонентов.
- Необходимость использования для анализа значительного количества (500 мкл) плазмы.
- Использование патронов с сорбентом массой порядка десятков мг уменьшает степень концентрирования и приводит к увеличению объемов органических элюентов, что, в свою очередь, приводит к увеличению продолжительности пробоподготовки из-за необходимости упаривания элюата перед дериватизацией.
- Автоматизация известного способа более трудоемкая, чем заявляемого.
Заявляемое изобретение направлено на решение задачи определения продуктов метаболизма бактерий в форме ФКК в СК.
Заявляемый способ является экспрессным, полуавтоматическим, чувствительным, воспроизводимым; для его выполнения нужны малые объемы пробы сыворотки (80 мкл) и органических растворителей.
Использование микросорбционного концентрирования (МСК) в шприце, при котором сорбцию проводят многократно через патрон с сорбентом, позволяет увеличить степень концентрирования, а также уменьшить объем органических элюентов и продолжительность пробоподготовки.
Указанные технические результаты при осуществлении изобретения достигаются за счет того, что так же как в известном способе определение ФКК осуществляют путем сорбционного концентрирования образца крови с последующим силилированием и анализом полученных производных методом ГХ/МС.
Особенность заявляемого способа заключается в том, что извлечение ФКК из подкисленного раствора СК осуществляют путем МСК в шприце, заполненном силикагелем с привитой фазой С18, их элюирования диэтиловым эфиром, упаривания элюата досуха, дериватизации с использованием N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамида и анализа полученных триметилсилильных производных на газовом хроматомасс-спектрометре.
Раскрытие сущности изобретения
Метаболомные исследования с использованием СК являются важным и актуальным направлением, поскольку СК представляет собой сложный набор высоко- и низкомолекулярных компонентов в разных концентрациях, отражающих состояние организма. Для работы с такой сложной матрицей необходимо использование высокотехнологичных методов разделения, концентрирования и детектирования с целью определения содержания определенного набора химических или биологических соединений. Решение указанной проблемы заключается в расширении арсенала аналитических средств.
Для извлечения ряда низкомолекулярных ароматических метаболитов из СК авторами выбран наиболее перспективный полуавтоматический метод пробоподготовки, включающей в себя МСК в шприце, заполненном сорбентом.
Способ заключается в проведении МСК в шприце, заполненном силикагелем с привитой фазой С18, для извлечения 9 ФКК из подкисленного раствора СК, их элюировании диэтиловым эфиром, упаривании элюата досуха, дериватизации с использованием N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамида (БСТФА) и анализом полученных триметилсилильных производных (ТМС) на газовом хроматомасс-спектрометре.
Далее получают хроматограммы, из которых строят масс-хроматограммы по характеристичным значениям m/z, определяют площади пиков ТМС производных ФКК по их временам удерживания, делят на площадь стандарта 2,3,4,5,6-D5-бензойной кислоты (D5-БK), которую вводят в сыворотку до проведения процедуры пробоподготовки. Полученные относительные сигналы используют для количественного определения ФКК с использованием градуировочных коэффициентов, полученных предварительно по методу добавок ФКК в известных концентрациях в сыворотку здорового добровольца. Продолжительность пробоподготовки составляет 21 мин, продолжительность ГХ/МС анализа - 25 мин. Степени извлечения ароматических кислот из сыворотки здорового добровольца с добавками кислот составили: БК - 50±10%; ФПК - 70±10%; Коричной - 40±10%; ФМК - 60±10%; n-ГБК - 30±5%; n-ГФУК - 40±10%; n-ГФПК - 50±10%; ГВК - 60±10%; n-ГФМК - 40±5%. Для всех ФКК выявлены области линейной зависимости в диапазоне 90-2200 мкг/л, что для большинства ФКК составляет 0.5-18 мкМ.
Применение разработанной методики позволяет сократить продолжительность и соответственно повысить производительность процедуры анализа. Кроме того, использование заявляемого способа в лабораторной практике позволяет снизить объем анализируемого образца крови, а также объем органических растворителей, применяемых на стадии пробоподготовки.
Способ осуществляют следующим образом.
До начала МСК к 75 мкл размороженной до комнатной температуры СК добавляют водный раствор внутреннего стандарта D5-БК, подкисляют до pH<2 и разбавляют водой в 2 раза. Патрон с сорбентом (силикагель с привитой фазой С18) предварительно кондиционируют метанолом, водой, 0.1-1% раствором муравьиной кислоты (3×50 мкл, скорость загрузки для каждого растворителя 100-1000 мкл/мин). Затем проводят сорбцию целевых компонентов (10-25 раз по 50 мкл, 100-1000 мкл/мин), высушивание сорбента путем пропускания воздуха (5-20 раз по 50 мкл, 100-1000 мкл/мин), промывание сорбента 0.05-0.1% водным раствором кислоты (2-5 раз по 20 мкл, 100-1000 мкл/мин), десорбцию подходящим органическим растворителем, например диэтиловым или метил-трет-бутиловым эфиром. Полученный элюат высушивают досуха, дериватизируют с добавлением силилирующего реагента, например БСТФА, аликвоту полученного раствора (или разбавленного инертным растворителем) силильных производных анализируют методом ГХ/МС.
Анализ методом ГХ/МС проводят с использованием кварцевой капиллярной колонки типа TR-5ms (95% диметилполисилоксан + 5% фенилполисилоксан, толщина неподвижной фазы 0.25 мкм, длина 30 м, внутренний диаметр 0.25 мм). Условия газохроматографического разделения: температура инжектора 200°C, расход газа-носителя 1.5 мл/мин. Режим программирования температуры термостата колонок: начальная температура 80°C в течение 4 мин; далее нагревание со скоростью 10°C/мин до 250°C, выдержка при этой температуре в течение 4 мин. Условия масс-спектрометрического анализа: электронная ионизация, энергия электронов 70 эВ, температура интерфейса 250°C, температура ионизационной камеры 200°C, диапазон сканирования m/z 50-450 а.е.м., скорость сканирования 3 скана/с.
Площади пиков силильных производных ФКК, зарегистрированные на масс-хроматограммах по фрагментным характеристичным ионам, деленные на площадь пика производного стандарта D5-BK (представлены в табл.1), используют в количественном анализе. Значения m/z характеристичных ионов выбраны исходя из информативности (отражения структуры вещества) и их отсутствия в фоновом масс-спектре. Масс-спектры исследуемых компонентов совпадают с соответствующими масс-спектрами из библиотеки NIST. Степень извлечения ароматических кислот рассчитывают путем деления относительного сигнала каждой кислоты после проведения МСК из СК здорового добровольца с добавкой ароматических кислот на относительный сигнал соответствующей кислоты из модельного раствора без пробоподготовки. Статистическую обработку данных проводят по результатам трех параллельных опытов с применением программы Microsoft Excel 2010.
Примеры выполнения
Проведен анализ образцов СК здорового донора и четырех реанимационных больных разной степени тяжести с наличием инфекции бактериальной этиологии или сепсисом. Приведено сравнение полученных результатов с аттестованной методикой, включающей в себя ЖЖЭ и дающей достоверные данные о концентрациях ФКК в образцах СК. Таким образом, подтверждено, что результаты, получаемые методом МСК, сопоставимы с результатами, получаемыми методом ЖЖЭ, и могут быть использованы в практике.
Claims (1)
- Способ определения фенилкарбоновых кислот (ФКК) в сыворотке крови, включающий сорбционное концентрирование из образца крови с последующим силилированием и анализом полученных производных методом газовой хроматомасс-спектрометрии, отличающийся тем, что извлечение ФКК из подкисленного раствора сыворотки крови осуществляют путем микросорбционного концентрирования в шприце, заполненном силикагелем с привитой фазой С18, их элюирования диэтиловым эфиром, упаривания элюата досуха, дериватизации с использованием N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамида и анализа полученных триметилсилильных производных на газовом хроматомасс-спектрометре.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017128745A RU2663571C1 (ru) | 2017-08-11 | 2017-08-11 | Способ определения ароматических микробных метаболитов в форме фенилкарбоновых кислот в сыворотке крови |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017128745A RU2663571C1 (ru) | 2017-08-11 | 2017-08-11 | Способ определения ароматических микробных метаболитов в форме фенилкарбоновых кислот в сыворотке крови |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2663571C1 true RU2663571C1 (ru) | 2018-08-07 |
Family
ID=63142726
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017128745A RU2663571C1 (ru) | 2017-08-11 | 2017-08-11 | Способ определения ароматических микробных метаболитов в форме фенилкарбоновых кислот в сыворотке крови |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2663571C1 (ru) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2423704C1 (ru) * | 2009-11-30 | 2011-07-10 | Наталья Владимировна Белобородова | Способ лабораторной диагностики сепсиса |
| RU2543335C2 (ru) * | 2012-09-27 | 2015-02-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт общей реаниматологии имени В.А. Неговского" Российской академии медицинских наук | Способ лабораторной оценки эффективности антибактериальной терапии |
-
2017
- 2017-08-11 RU RU2017128745A patent/RU2663571C1/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2423704C1 (ru) * | 2009-11-30 | 2011-07-10 | Наталья Владимировна Белобородова | Способ лабораторной диагностики сепсиса |
| RU2543335C2 (ru) * | 2012-09-27 | 2015-02-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт общей реаниматологии имени В.А. Неговского" Российской академии медицинских наук | Способ лабораторной оценки эффективности антибактериальной терапии |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| DEUTSCH J.C. Determination of p-hydroxyphenylpyruvate, p-hydroxyphenyllactate and tyrosine in normal human plasma by gas chromatography-mass spectrometry isotope-dilution assay, J. of Chromatography B, 1997, 690, рр. 1-6, найдено 24.04.2018 в Интернете [on line] на сайте https://documents.tips/documents/determination-of-p-hydroxyphenylpyruvate-p-hydroxyphenyllactate-and-tyrosine.html. * |
| DEUTSCH J.C. Determination of p-hydroxyphenylpyruvate, p-hydroxyphenyllactate and tyrosine in normal human plasma by gas chromatography-mass spectrometry isotope-dilution assay, J. of Chromatography B, 1997, 690, рр. 1-6, найдено 24.04.2018 в Интернете [on line] на сайте https://documents.tips/documents/determination-of-p-hydroxyphenylpyruvate-p-hydroxyphenyllactate-and-tyrosine.html. ВАХРУШЕВ М.К. и др. Разработка условий дериватизации фенилкарбоновых кислот, выделенных из сыворотки крови, с использованием метода газовой хроматографии/масс-спектрометрии, Масс-спектрометрия, 2012, 9, 1, стр.36-42, найдено 24.04.2018 в Интернете [on line] на сайте elib.sfu-kras.ru›handle/2311/841. БЕДОВА А.Ю. Фенилкарбоновые кислоты при бактериальных воспалительных процессах, дис. кбн, 2015, стр. 41-43, найдено 24.04.2018 в Интернете [on line] на сайте http://niiorramn.ru/docs/dissertatsii/bedova/%D0%94%D0%B8%D1%81%D1%81%D0%B5%D1%80%D1%82%D0%B0%D1%86%D0%B8%D1%8F%20%D0%91%D0%B5%D0%B4%D0%BE%D0%B2%D0%BE%D0 * |
| БЕДОВА А.Ю. Фенилкарбоновые кислоты при бактериальных воспалительных процессах, дис. кбн, 2015, стр. 41-43, найдено 24.04.2018 в Интернете [on line] на сайте http://niiorramn.ru/docs/dissertatsii/bedova/%D0%94%D0%B8%D1%81%D1%81%D0%B5%D1%80%D1%82%D0%B0%D1%86%D0%B8%D1%8F%20%D0%91%D0%B5%D0%B4%D0%BE%D0%B2%D0%BE%D0%B9%20%D0%90.%D0%AE.pdf. * |
| ВАХРУШЕВ М.К. и др. Разработка условий дериватизации фенилкарбоновых кислот, выделенных из сыворотки крови, с использованием метода газовой хроматографии/масс-спектрометрии, Масс-спектрометрия, 2012, 9, 1, стр.36-42, найдено 24.04.2018 в Интернете [on line] на сайте elib.sfu-kras.ru›handle/2311/841. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zeki et al. | Integration of GC–MS and LC–MS for untargeted metabolomics profiling | |
| Montesano et al. | Determination of illicit drugs and metabolites in oral fluid by microextraction on packed sorbent coupled with LC-MS/MS | |
| Villas‐Bôas et al. | Mass spectrometry in metabolome analysis | |
| Helfer et al. | Direct analysis of the mushroom poisons α-and β-amanitin in human urine using a novel on-line turbulent flow chromatography mode coupled to liquid chromatography–high resolution-mass spectrometry/mass spectrometry | |
| JP6462020B2 (ja) | 質量分析による逆トリヨードサイロニンの検出法 | |
| Zheng et al. | UPLC-ESI-MS-MS determination of three β 2-agonists in pork | |
| EP3749952A2 (en) | A method of processing a biological sample | |
| US9146219B2 (en) | Sensitive method for measuring cis-diol containing compounds in plasma using 2D-LC-MS/MS | |
| Versace et al. | Automated DBS extraction prior to Hilic/RP LC–MS/MS target screening of drugs | |
| CN110988193B (zh) | 一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法 | |
| Li et al. | Hollow fiber–stir bar sorptive extraction and microwave assisted derivatization of amino acids in biological matrices | |
| Trivedi et al. | Do not just do it, do it right: urinary metabolomics–establishing clinically relevant baselines | |
| Pautova et al. | Microextraction of aromatic microbial metabolites by packed hypercrosslinked polystyrene from blood serum | |
| Yao et al. | Development, validation, and application of a liquid chromatography–tandem mass spectrometry method for the determination of 4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanol in human hair | |
| Jin et al. | High‐performance liquid chromatography coupled with electrospray ionization tandem mass spectrometry for the determination of flocoumafen and brodifacoum in whole blood | |
| EP2435832A1 (en) | Methods and reagents for the quantitative determination of metabolites in biological samples | |
| Koryagina et al. | Chromatography–mass spectrometry determination of alkyl methylphosphonic acids in urine | |
| Páleníková et al. | Microextraction in packed syringe: solvent-minimized sample preparation technique | |
| Sobolev et al. | Microextraction of aromatic microbial metabolites by packed sorbent (MEPS) from model solutions followed by gas chromatography/mass spectrometry analysis of their silyl derivatives | |
| RU2663571C1 (ru) | Способ определения ароматических микробных метаболитов в форме фенилкарбоновых кислот в сыворотке крови | |
| RU2302632C2 (ru) | Способ определения гистамина в плазме крови | |
| RU2687887C1 (ru) | Способ определения 1-гидроксипирена в моче методом хромато-масс-спектрометрического анализа | |
| RU2688184C1 (ru) | Способ определения производных катехоламинов в моче | |
| CN115078554A (zh) | 一种同时检测多种鞘磷脂代谢物的方法 | |
| Li et al. | Rapid and inexpensive nylon-66-filter solid-phase extraction followed by gas chromatography tandem mass spectrometry for analyzing perfluorinated carboxylic acids in milk |