RU2650760C1 - Method for determining sensitivity of microorganisms to disinfectants - Google Patents
Method for determining sensitivity of microorganisms to disinfectants Download PDFInfo
- Publication number
- RU2650760C1 RU2650760C1 RU2016143760A RU2016143760A RU2650760C1 RU 2650760 C1 RU2650760 C1 RU 2650760C1 RU 2016143760 A RU2016143760 A RU 2016143760A RU 2016143760 A RU2016143760 A RU 2016143760A RU 2650760 C1 RU2650760 C1 RU 2650760C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- microorganisms
- disinfectant
- sensitivity
- cup
- petri dish
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 41
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 title claims abstract description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000007654 immersion Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000008399 tap water Substances 0.000 claims abstract description 5
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 11
- 230000032683 aging Effects 0.000 abstract 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 8
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 5
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 5
- 241000588626 Acinetobacter baumannii Species 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 2
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 150000003856 quaternary ammonium compounds Chemical class 0.000 description 2
- RVEZZJVBDQCTEF-UHFFFAOYSA-N sulfenic acid Chemical compound SO RVEZZJVBDQCTEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGDJCYRXKJVXKD-UHFFFAOYSA-N Saponin 3 Natural products COC(=O)C1(C)CCC2(CCC3(C)C(=CCC4C5(C)CCC(OC6OC(CO)C(O)C(O)C6OC7OC(CO)C(O)C(O)C7O)C(C)(C)C5CCC34C)C2C1)C(=O)O RGDJCYRXKJVXKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940127554 medical product Drugs 0.000 description 1
- NYNKJVPRTLBJNQ-UHFFFAOYSA-N n'-(3-aminopropyl)-n'-dodecylpropane-1,3-diamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCN(CCCN)CCCN NYNKJVPRTLBJNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- -1 polyhexamethylene hydrochloride Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
- A61L2/16—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using chemical substances
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области эпидемиологии, микробиологии и дезинфектологии и может быть использовано для оценки чувствительности микроорганизмов к дезинфицирующим средствам при проведении в медицинских организациях соответствующего мониторинга.The invention relates to the field of epidemiology, microbiology and disinfectology and can be used to assess the sensitivity of microorganisms to disinfectants when conducting appropriate monitoring in medical organizations.
Известен ускоренный способ оценки чувствительности микроорганизмов к дезинфектантам («Методические рекомендации по ускоренному определению устойчивости бактерий к дезинфекционным средствам» Утверждены руководителем департамента Госсанэпиднадзора Минздрава РФ 2000 г.). Способ основан на применении цветной питательной среды, изменяющей цвет под влиянием жизнедеятельности размножающихся бактерий. Эффективные концентрации дезинфектанта предотвращают накопление бактерий и сохраняют цвет среды. Известный способ характеризуется относительно низкой степенью достоверности результатов исследований, связанной с наличием бактериостатического эффекта, т.к. в нем не предусмотрено применение нейтрализатора, что не исключает бактериостатический эффект. Кроме того, не учитывается рекомендованное время воздействия дезинфицирующего средства для достижения гибели микроорганизма, что приводит к получению неправильных результатов.There is an accelerated method for assessing the sensitivity of microorganisms to disinfectants ("Guidelines for the accelerated determination of bacterial resistance to disinfectants" Approved by the head of the Department of State Sanitary and Epidemiological Supervision of the Ministry of Health of the Russian Federation in 2000). The method is based on the use of a colored nutrient medium that changes color under the influence of the vital activity of propagating bacteria. Effective disinfectant concentrations prevent the accumulation of bacteria and preserve the color of the medium. The known method is characterized by a relatively low degree of reliability of the research results associated with the presence of a bacteriostatic effect, because it does not provide for the use of a neutralizer, which does not exclude the bacteriostatic effect. In addition, the recommended exposure time of the disinfectant to achieve the death of the microorganism is not taken into account, which leads to incorrect results.
Наиболее близким к изобретению является способ оценки чувствительности микроорганизмов к дезинфектантам (RU 2378363 С1 С 12N1/00, 2008 г.). Способ заключается в том, что тестируемую взвесь микроорганизмов наносят на поверхность, которую после подсушивания обрабатывают дезинфицирующим раствором. После этого через временную выдержку, необходимую для проявления дезинфицирующего эффекта, на поверхность наносят нейтрализатор дезинфицирующего средства (ДС) и через определенное время берут смыв с поверхности сухим стерильным тампоном, с помощью которого делают посев на питательную среду. Оценку чувствительности микроорганизмов к ДС судят по росту их колоний на питательной среде. Недостатком известного способа является относительно низкая степень достоверности результатов исследований, которая объясняется тем, что с помощью тампона невозможно обеспечить достаточную точность количественного посева смеси на твердую питательную среду, т.к. часть микроорганизмов остается на тестируемой поверхности, а часть - на тампоне. Кроме того, в известном способе необходимо использовать несколько открытых тест-объектов, контаминированных возбудителями инфекций, что приводит к риску биологического загрязнения окружающей среды и заражения медицинского персонала. Известная методика трудоемка, т.к. требует наличия и специальной подготовки тест-объектов к проведению исследований (мытье, упаковка, стерилизация).Closest to the invention is a method for assessing the sensitivity of microorganisms to disinfectants (RU 2378363 C1 12N1 / 00, 2008). The method consists in the fact that the test suspension of microorganisms is applied to the surface, which, after drying, is treated with a disinfectant solution. After that, through the temporary exposure necessary for the manifestation of a disinfecting effect, a disinfectant (DS) neutralizer is applied to the surface and after a certain time, the flush is taken from the surface with a dry sterile swab, with which it is inoculated onto a nutrient medium. The assessment of the sensitivity of microorganisms to DS is judged by the growth of their colonies on a nutrient medium. The disadvantage of this method is the relatively low degree of reliability of the research results, which is explained by the fact that using a tampon it is impossible to ensure sufficient accuracy of the quantitative inoculation of the mixture on a solid nutrient medium, because some microorganisms remain on the test surface, and some on the swab. In addition, in the known method, it is necessary to use several open test objects contaminated with pathogens of infections, which leads to the risk of biological pollution of the environment and infection of medical personnel. The known technique is laborious, because requires the availability and special preparation of test objects for research (washing, packaging, sterilization).
Техническим результатом, которого можно достичь при осуществлении данного изобретения, является упрощение хода исследований, повышение уровня их безопасности и точности результатов исследований.The technical result that can be achieved with the implementation of this invention is to simplify the course of research, increase their safety and accuracy of research results.
Технический результат достигается тем, что согласно способу определения чувствительности микроорганизмов к дезинфицирующим средствам, заключающемуся в том, что на внутреннюю поверхность чашки Петри дозатором наносят взвесь тестируемых микроорганизмов, после подсушивания взвеси проводят обработку зараженной поверхности чашки соответствующим дезинфицирующим средством путем ее орошения, протирания или погружения, после окончания дезинфекционной выдержки в чашку Петри вносят раствор нейтрализатора, соответствующего химическому составу используемого дезинфицирующего средства, и через определенную временную выдержку добавляют растопленный и остуженный до 45°С агар, затем чашку помещают в термостат при оптимальных для роста тестируемого микроорганизма температуре и времени, после чего осуществляют учет количества выросших на чашке Петри колоний и сравнивают результаты с данными, полученными с аналогично контамированной чашкой, обработанной так же, как опытная, но не раствором дезинфицирующего средства, а стерильной водопроводной водой, по результатам сравнения выносят суждение о чувствительности тестируемых микроорганизмов к дезинфицирующему средству при снижении количества микроорганизмов от воздействия раствора дезинфицирующего средства на 99,00-100%, а при менее 99,99% - об их резистенции.The technical result is achieved by the fact that according to the method for determining the sensitivity of microorganisms to disinfectants, which consists in the fact that a suspension of the tested microorganisms is applied to the inner surface of the Petri dish, after drying the suspension, the infected surface of the cup is treated with an appropriate disinfectant by irrigation, rubbing or immersion, after the end of the disinfection exposure, a neutralizer solution corresponding to the chemical tavu of the used disinfectant, and after a certain time exposure, agar melted and cooled to 45 ° C is added, then the cup is placed in a thermostat at the temperature and time optimal for the growth of the tested microorganism, after which the number of colonies grown on the Petri dish is monitored and the results are compared with the data obtained with a similarly contoured cup, treated in the same way as an experimental one, but not with a disinfectant solution, but with sterile tap water, according to the comparison results ynosyat judgment of sensitivity of microorganisms to the test disinfectant by reducing the amount of microorganisms by exposure to a disinfectant solution 99,00-100% and at least 99.99% - about their Resistance.
В патентных источниках информации не обнаружено сведений о данном способе определения чувствительности, что позволяет сделать вывод о соответствии данного способа критериям охраноспособности.No information about this sensitivity determination method was found in patent information sources, which allows us to conclude that this method meets the eligibility criteria.
В качестве тест-объекта используют чашку Петри, а в качестве тест-организма - культуры микроорганизмов, выделенные из клинического материала и объектов внешней среды - грамотрицательные и грамоположительные бактерии, включая микробактерии туберкулеза, грибы рода Кандида.A Petri dish is used as a test object, and microorganism cultures isolated from clinical material and environmental objects as gram-negative and gram-positive bacteria, including tuberculosis microbes and Candida genus, are used as a test organism.
Для нейтрализации антимикробного действия ДС для различных химических групп применяют следующие:To neutralize the antimicrobial action of DS for various chemical groups, the following are used:
- для средства из группы окислителей - 0,5-1% растворы тиосульфата натрия;- for funds from the group of oxidizing agents - 0.5-1% sodium thiosulfate solutions;
- для альдегид- и фенолсодержащих средств - воду, универсальный нейтрализатор, содержащий твин - 80-3%, сапонин - 3%, гистидин - 0,1% и цистеин - 0,1%;- for aldehyde and phenol-containing agents - water, a universal neutralizer containing tween - 80-3%, saponin - 3%, histidine - 0.1% and cysteine - 0.1%;
- для катионных поверхностно-активных веществ - 0,1-1,0% растворы сульфонола или 0,5-1,0% растворы сольфонола с 10% обезжиренного молока.- for cationic surfactants - 0.1-1.0% solutions of sulfonol or 0.5-1.0% solutions of solfonol with 10% skim milk.
Способ осуществляют следующим образом.The method is as follows.
Оценку чувствительности выделенных (с объектов внутрибольничной среды или от больного) и идентифицированных микроорганизмов проводят к дезинфицирующему средству, применяемому в медицинской организации или предлагаемому на его замену.The sensitivity assessment of isolated (from objects of a nosocomial environment or from a patient) and identified microorganisms is carried out to a disinfectant used in a medical organization or proposed for its replacement.
Если средство предназначено для дезинфекции поверхностей или посуды на внутреннюю поверхность чашки Петри площадью, например, 80 см2 дозатором (пипеткой) наносят 0,4 мл 2 млрд суспензии микроорганизмов и равномерно распределяют ее по поверхности стерильным стеклянным шпателем. Если ДС предназначено для дезинфекции медицинских изделий, на поверхность чашки наносят 0,1 мл суспензии микроорганизмов с добавлением 40% инактивированной лошадиной сыворотки.If the product is intended for the disinfection of surfaces or dishes, on the inner surface of a Petri dish with an area of, for example, 80 cm 2, apply a dropper (pipette) of 0.4 ml of a 2 billion suspension of microorganisms and evenly distribute it on the surface with a sterile glass spatula. If DS is intended for the disinfection of medical devices, 0.1 ml of a suspension of microorganisms with the addition of 40% inactivated horse serum is applied to the surface of the cup.
После подсушивания обработку зараженной поверхности чашки проводят по режиму и способу, рекомендованному в Инструкции по применению средства (орошение, протирание или погружение), соблюдая режим и рекомендованные нормы расхода соответственно выбранному способу.After drying, the treatment of the infected surface of the cup is carried out according to the regime and method recommended in the Instructions for use of the product (irrigation, rubbing or immersion), observing the regime and the recommended flow rates according to the chosen method.
После окончания дезинфекционной выдержки чашку заливают 8 мл раствора нейтрализатора, соответствующего данному ДС, и делают несколько круговых движений чашкой для лучшего смачивания ее поверхности. Через определенную временную выдержку, необходимую для действия нейтрализатора, например 10 мин, жидкость заливают растопленным и остуженным до 45°С агаром. Посевы выдерживают в термостате при температуре и времени, оптимальных для роста тестируемого микроорганизма, после чего проводят учет результатов, вынося суждение о его чувствительности либо резистенции.After disinfection is completed, the cup is poured with 8 ml of the neutralizer solution corresponding to this DS, and several circular movements are made with the cup for better wetting of its surface. After a certain time delay necessary for the action of the neutralizer, for example 10 minutes, the liquid is poured with agar melted and cooled to 45 ° C. Crops are kept in a thermostat at a temperature and time optimal for the growth of the tested microorganism, after which they record the results, making a judgment on its sensitivity or resistance.
При анализе результатов подсчитывают количество выросших на чашке Петри колоний и сравнивают полученные данные с аналогично контаминированной чашкой, обработанной так же, как опытная, но не раствором ДС, а стерильной водопроводной водой. Если гибель микроорганизма составляет 99,99% для средств, предназначенных для дезинфекции поверхностей, и 100% для средств, предназначенных для дезинфекции медицинских изделий (отсутствие роста во всех пробах), выделенный штамм микроорганизма считают чувствительным к действию ДС, если менее 99,99 и 100% (наличие роста в одной или более проб) - устойчивым.When analyzing the results, the number of colonies grown on the Petri dish is calculated and the obtained data are compared with a similarly contaminated dish, treated in the same way as an experimental one, but not with a DS solution, but with sterile tap water. If the death of a microorganism is 99.99% for products intended for the disinfection of surfaces and 100% for products intended for the disinfection of medical devices (lack of growth in all samples), the selected microorganism strain is considered sensitive to the action of DS if less than 99.99 and 100% (the presence of growth in one or more samples) is stable.
В клинике выделен и идентифицирован микроорганизм A.baumanii. Для дезинфекции в этой организации применяли средство, содержащее в своем составе 18% алкилдиметилбензиламмоний хлорида - четвертичного аммониевого соединения (ЧАС). В Инструкции по применению этого средства рекомендован режим для обеззараживания поверхностей: концентрация - 0,2%, время действия - 60 мин, способ обработки - протирание, норма расхода - 150-200 мл/м2. Оценка чувствительности выделенного микроорганизма A.baumanii произведена по способу согласно изобретению. Одновременно оценена чувствительность микроорганизма P.aeruginosa - штамм из коллекции микроорганизмов ФБУН НИИ Дезинфектологии Роспотребнадзора к тому же дезинфицирующему средству и в том же режиме применения. Результат представлен в таблице.The microorganism A.baumanii was isolated and identified in the clinic. For disinfection, this organization used a product containing 18% alkyldimethylbenzylammonium chloride - a quaternary ammonium compound (HOUR). In the Instructions for use of this tool, a regimen for disinfecting surfaces is recommended: concentration - 0.2%, action time - 60 min, treatment method - wiping, flow rate - 150-200 ml / m 2 . Assessment of the sensitivity of the isolated microorganism A.baumanii produced by the method according to the invention. At the same time, the sensitivity of the P.aeruginosa microorganism, a strain from the collection of microorganisms of the Federal State Institution of Scientific Research Institute of Disinfectology of Rospotrebnadzor, to the same disinfectant and in the same mode of application, was evaluated. The result is presented in the table.
Полученные данные свидетельствуют, что к воздействию алкилдиметилбензиламмоний хлорида тест-микроорганизм P.aeruginosa чувствительный (после воздействия ДС жизнеспособные микроорганизмы не выявлены), a A.baumanii - резистентный, т.к. после воздействия ДС микроорганизм выживает).The data obtained indicate that the test microorganism P.aeruginosa is sensitive to the effects of alkyldimethylbenzylammonium chloride (no viable microorganisms were detected after exposure to DS), and A.baumanii is resistant, because after exposure to DS, the microorganism survives).
Пример 1.Example 1
В медицинской организации (ФГАУ «Лечебно-реабилитационный центр» МЗ РФ) выделили циркулирующий во внутрибольничной среде и вызывающий заболевания штамм Klebsiella pneumoniae. Чтобы оценить эффективность проводимых дезинфекционных мероприятий, необходимо оценить чувствительность этого микроорганизма к применяемому дезинфицирующему средству.In the medical organization (FSAI “Treatment and rehabilitation center” of the Ministry of Health of the Russian Federation), the strain Klebsiella pneumoniae circulating in the nosocomial environment and causing the disease was isolated. To assess the effectiveness of disinfection measures, it is necessary to assess the sensitivity of this microorganism to the used disinfectant.
Применяемое в медицинской организации средство («ЭКОН-ДЕЗ») содержит в своем составе: четвертичные аммониевые соединения - 14,7%, N,N-бис-(3-аминопропил)додециламин - 6%, полигексаметиленгидрохлорид - 4% и применяется для дезинфекции поверхностей в помещении способом протирания в концентрации 0,5% при дезинфекционной выдержке 10 мин.The agent used in the medical organization (ECON-DEZ) contains: quaternary ammonium compounds - 14.7%, N, N-bis- (3-aminopropyl) dodecylamine - 6%, polyhexamethylene hydrochloride - 4% and is used for disinfection surfaces in the room by wiping at a concentration of 0.5% with a disinfection exposure of 10 minutes
Постановка эксперимента.The setting of the experiment.
Две стерильные чашки Петри (одна - опытная, вторая - контрольная) на поддоне располагают на лабораторном столе. На дно обеих чашек Петри (площадь 80 см2) дозатором наносят по 0,4 мл 2-млрд. суспензии суточной культуры микроорганизма и подсушивают в течение 60 мин. Затем дно опытной чашки протирают салфеткой, смоченной 0,5% раствором средства, а дно контрольной чашки - салфеткой, смоченной стерильной водопроводной водой. Через 10 мин в чашки вносят по 5 мл раствора нейтрализатора, содержащего 0,5% сульфонола, выдерживают 10 мин, затем заливают растопленным и остуженным до 45°С агаром. После застывания агара чашки помещают в термостат и культивируют в течение 48 часов.Two sterile Petri dishes (one experimental, one control) on a tray are placed on a laboratory bench. At the bottom of both Petri dishes (area 80 cm 2 ), 0.4 ml of 2 billion is applied with a dispenser. suspension of the daily culture of the microorganism and dried for 60 minutes Then the bottom of the test cup is wiped with a cloth moistened with a 0.5% solution of the product, and the bottom of the control cup with a cloth moistened with sterile tap water. After 10 min, 5 ml of a neutralizer solution containing 0.5% sulfonol are introduced into the plates, incubated for 10 minutes, then the agar is melted and cooled to 45 ° C. After the agar solidified, the plates were placed in a thermostat and cultured for 48 hours.
В опытной чашке Петри выросло 39 КОЕ, в контрольной чашке - 2×105 КОЕ.39 CFU grew in the experimental Petri dish, 2 × 10 5 CFU in the control cup.
Заключение. Выделенная в медицинской организации культура Klebsiella pneumoniae резистентна к воздействию применяемого средства, так как снижение количества микроорганизмов составило 99,96%, что менее существующего критерия эффективности для дезинфицирующих средств - 99,99%.Conclusion The culture of Klebsiella pneumoniae isolated in the medical organization is resistant to the effect of the agent used, since the reduction in the number of microorganisms was 99.96%, which is less than the existing efficiency criterion for disinfectants - 99.99%.
Таким образом, проведение всех этапов исследований в одной чашке Петри, моделирующей любой тест-объект (посуду, поверхности, медицинские изделия), который можно обработать любым способом (орошением, протиранием, погружением), и возможность введения нейтрализатора с последующим контролем обеззараживания (заливанием питательной среды в ту же чашку Петри, в которой не теряется ни одного микроорганизма, в отличие от контроля обеззараживания методом смыва салфеткой либо тампоном), позволяет получить более точный результат эксперимента, улучшить экологию окружающей среды (контаминированная чашка все время накрыта крышкой) и снизить трудоемкость проведения исследований.Thus, carrying out all stages of research in one Petri dish simulating any test object (dishes, surfaces, medical products) that can be processed in any way (irrigation, rubbing, immersion), and the possibility of introducing a neutralizer with subsequent control of disinfection (pouring nutrient medium in the same Petri dish, in which not a single microorganism is lost, in contrast to the control of disinfection by rinsing with a napkin or swab), allows to obtain a more accurate experimental result, improving it ambient environment (contaminated cup all the time covered with a lid) and reduce the complexity of the research.
Применение данной методики позволит более эффективно вести мониторинг устойчивости к дезинфицирующим средствам микроорганизмов, циркулирующих в медицинских организациях.The application of this technique will allow more efficient monitoring of the resistance to disinfectants of microorganisms circulating in medical organizations.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016143760A RU2650760C1 (en) | 2016-11-08 | 2016-11-08 | Method for determining sensitivity of microorganisms to disinfectants |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016143760A RU2650760C1 (en) | 2016-11-08 | 2016-11-08 | Method for determining sensitivity of microorganisms to disinfectants |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2650760C1 true RU2650760C1 (en) | 2018-04-17 |
Family
ID=61976741
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016143760A RU2650760C1 (en) | 2016-11-08 | 2016-11-08 | Method for determining sensitivity of microorganisms to disinfectants |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2650760C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2709625C1 (en) * | 2018-07-02 | 2019-12-19 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии" | Method of determining sensitivity of non-fermenting bacteria to disinfectants using mass spectrometry |
| RU2802231C1 (en) * | 2022-10-28 | 2023-08-23 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" | Method for express analysis of yeast sensitivity to inhibitors |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2378363C1 (en) * | 2008-06-10 | 2010-01-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная медицинская академия Росздрава" (ГОУ ВПО "НИЖГМА РОСЗДРАВА") | Method for determining microorganism sensitivity to disinfectant (versions) |
| RU2409679C1 (en) * | 2009-04-17 | 2011-01-20 | Учреждение образования "Белорусский государственный медицинский университет" | Method of bacterial disinfectant resistance test |
-
2016
- 2016-11-08 RU RU2016143760A patent/RU2650760C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2378363C1 (en) * | 2008-06-10 | 2010-01-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная медицинская академия Росздрава" (ГОУ ВПО "НИЖГМА РОСЗДРАВА") | Method for determining microorganism sensitivity to disinfectant (versions) |
| RU2409679C1 (en) * | 2009-04-17 | 2011-01-20 | Учреждение образования "Белорусский государственный медицинский университет" | Method of bacterial disinfectant resistance test |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| МУ 35. Методические указания. Дезинфектология. Методы оценки чувствительности микроорганизмов, циркулирующих в лечебно-профилактических организациях к дезинфицирущим средствам. М., 2011, с. 5-14. * |
| МУ 35. Методические указания. Дезинфектология. Методы оценки чувствительности микроорганизмов, циркулирующих в лечебно-профилактических организациях к дезинфицирущим средствам. М., 2011, с. 5-14. Способ определения чувствительности микроорганизмов к дезинфицирующим средствам. Методические рекомендации. Нижний Новгород, 2010, с. 8-24. Способ определения чувствительности бактерий к дезинфицирующим средствам при мониторинге устойчивости к антимикробным препаратам в медицинских организациях. Федеральные клинические рекомендации. М., 2015, с. 11-25. * |
| Способ определения чувствительности бактерий к дезинфицирующим средствам при мониторинге устойчивости к антимикробным препаратам в медицинских организациях. Федеральные клинические рекомендации. М., 2015, с. 11-25. * |
| Способ определения чувствительности микроорганизмов к дезинфицирующим средствам. Методические рекомендации. Нижний Новгород, 2010, с. 8-24. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2709625C1 (en) * | 2018-07-02 | 2019-12-19 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии" | Method of determining sensitivity of non-fermenting bacteria to disinfectants using mass spectrometry |
| RU2802231C1 (en) * | 2022-10-28 | 2023-08-23 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" | Method for express analysis of yeast sensitivity to inhibitors |
| RU2808691C1 (en) * | 2023-05-15 | 2023-12-01 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека" (ФБУН ГНЦ ПМБ) | Device for laboratory experimental selection of disinfectants for disinvasion of water environment and water waste |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Rentzia et al. | Disinfection procedures: their efficacy and effect on dimensional accuracy and surface quality of an irreversible hydrocolloid impression material | |
| RU2378363C1 (en) | Method for determining microorganism sensitivity to disinfectant (versions) | |
| Okore et al. | Antimicrobial efficacy of selected disinfectants | |
| CN | Antibacterial activities of some medicated soaps on selected human pathogens | |
| RU2650760C1 (en) | Method for determining sensitivity of microorganisms to disinfectants | |
| Chinedu et al. | Comparative studies of the efficacy of some disinfectants on human pathogens | |
| Schumann-Muck et al. | Effectiveness of nanoscale silicon dioxide-coated picker fingers on Salmonella Enteritidis and Escherichia coli | |
| Adetunji et al. | Biofilms formed by Mycobacterium tuberculosis on cement, ceramic, and stainless steel surfaces and their controls | |
| RU2781985C1 (en) | Method for determining the sensitivity of bacteria to antiseptics in solution | |
| Gallão et al. | Microbiological analysis of dental casts stored long-term | |
| RU2415945C2 (en) | Method for detecting of mycobacteria from surfaces | |
| Sadaf et al. | Prevalence of sub-clinical mastitis, identification of causative agents and sensitivity profile of isolates in Northern Pakistan | |
| Ali et al. | Evaluating the Efficacy of Some Disinfectants, Sterilizers and Detergents Against Streptococcus Pyogenes Isolates from Tonsillitis Patient in Kirkuk City. | |
| RU2807338C1 (en) | Method for evaluating antimicrobial prolonged-action of polymer-based disinfectants | |
| Shevchenko et al. | Mastitis prevention and control: Integration of microbiological and management approaches | |
| RU2733747C1 (en) | Method of predicting persistent properties of staphylococcus aureus circulating in hospital environment | |
| Ulrich | Technics of skin sampling for microbial contaminants | |
| UA124348U (en) | METHOD OF DETERMINATION OF BACTERICIDAL ACTION OF DISINFECTANTS IN CAMPILOBACTERIOSIS | |
| Frances et al. | Antimicrobial efficiency of commonly used disinfectants against Escherichia coli and Staphylococcus aureus | |
| RU150146U1 (en) | METHOD FOR DETERMINING ANTIMICROBIC ACTIVITY OF DISINFECTANTS | |
| Muhammad et al. | Invitro assessment of antibacterial and antifungal agents efficacy of some isolates from hands surface | |
| THONGDONMUEAN et al. | The Study of Bacillus cereusContamination in Virus Laboratory Faculty of Veterinary | |
| Khan et al. | Prevalence and Characterization of Antibiotic Resistant Micro-Organisms Isolated from Laboratories of different Universities | |
| Borgo et al. | Avaliação da contaminação bacteriana em impressões hidrocolóides irreversíveis antes e depois da desinfecção | |
| UA26856U (en) | Method for determination of disinfection effectiveness at tuberculosis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20201109 |