RU2644347C2 - Universal nutrient medium for microbacterial microorganisms isolation - Google Patents

Universal nutrient medium for microbacterial microorganisms isolation Download PDF

Info

Publication number
RU2644347C2
RU2644347C2 RU2016121960A RU2016121960A RU2644347C2 RU 2644347 C2 RU2644347 C2 RU 2644347C2 RU 2016121960 A RU2016121960 A RU 2016121960A RU 2016121960 A RU2016121960 A RU 2016121960A RU 2644347 C2 RU2644347 C2 RU 2644347C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
medium
agar
nutrient medium
growth
microorganisms
Prior art date
Application number
RU2016121960A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2016121960A (en
Inventor
Магомед Омарович Баратов
Али Хусинович Найманов
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт" filed Critical Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт"
Priority to RU2016121960A priority Critical patent/RU2644347C2/en
Publication of RU2016121960A publication Critical patent/RU2016121960A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2644347C2 publication Critical patent/RU2644347C2/en

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: universal nutrient medium for the cultivation of corynebacteria, nocardia and rhodococcus contains pancreatic hydrolyzate of sprat, D-glucose, KH2PO4, MgSO4, aquatic blue, sodium carbonate, microbiological agar, geothermal water, sterile defibrinated blood of animals and paraffin at a predetermined ratio of components.
EFFECT: invention allows to increase differentiating and inhibitory properties of the nutrient medium.
2 tbl

Description

Изобретение рекомендуется использовать в бактериологических лабораториях для культивирования микобактериоподобных микроорганизмов, в частности коринебактерий, нокардий и родококов, сенсибилизирующих по многочисленным данным организм животных к туберкулину.The invention is recommended to be used in bacteriological laboratories for the cultivation of mycobacterium-like microorganisms, in particular Corynebacterium, Nocardia and Rhodococcus, which, according to numerous data, sensitize the animal organism to tuberculin.

Накопленные на сегодняшний день данные по лабораторному выявлению указанных микроорганизмов не позволяют определить универсальную, простую в изготовлении, доступную и эффективную питательную среду для культивирования, поэтому для повышения результативности приходиться пользоваться несколькими средами. Нередко при выборе сред исходят из лабораторных возможностей, доступности сред, пренебрегая при этом диагностическими свойствами [1, 5, 7].The currently accumulated data on laboratory detection of these microorganisms do not allow us to determine a universal, easy to manufacture, affordable and effective nutrient medium for cultivation, therefore, to increase the effectiveness, you have to use several media. When choosing media, it is often based on laboratory capabilities, media availability, neglecting the diagnostic properties [1, 5, 7].

Для изолирования коринебактерий используют питательные среды: нитритный агар по Виноградскому, среда Сотона, кровяной агар, кровяно-теллуритовый агар, среда Клауберг II, среда Бучина [1, 7], для нокардий и родококков, среда Мюнца, УМ-агар, среда с овсяной мукой, декстрозный агар, питательный бульон [5, 6].Nutrient media are used to isolate corynebacteria: Vinogradsky’s nitrite agar, Soton’s medium, blood agar, blood-tellurite agar, Klauberg II medium, Buchina medium [1, 7], for nocardia and Rhodococcus, Münz medium, UM agar, oatmeal medium flour, dextrose agar, nutrient broth [5, 6].

Нитритный агар по Виноградскому [2] с н-алканами (гексодекан C16H34) в количестве 2% и синтетическая среда Сотона с добавлением 2%-ой смеси углеводородов имеют существенные недостатки. Углеводороды имеют разные температурные параметры кипения, в связи с чем стерилизовать в термостате их приходиться по отдельности при разных температурных режимах, что создает определенные трудности при их подготовке. Кроме того, среды отличаются слабыми ростовыми свойствами.According to Vinogradsky [2] nitrite agar with n-alkanes (C 16 H 34 hexodecane) in an amount of 2% and Soton’s synthetic medium with the addition of a 2% mixture of hydrocarbons have significant drawbacks. Hydrocarbons have different boiling temperature parameters, and therefore they have to be individually sterilized in a thermostat at different temperature conditions, which creates certain difficulties in their preparation. In addition, the media are characterized by weak growth properties.

Кровяной агар, состоящий из расплавленного и охлажденного до 45-50°С питательного агара и 5-10% дефибринированной или цельной свежи взятой крови животного, имеет низкие ингибирующие свойства по отношению к сопутствующей микрофлоре.Blood agar, consisting of nutrient agar melted and cooled to 45-50 ° C and 5-10% defibrinated or whole freshly taken animal blood, has low inhibitory properties with respect to the accompanying microflora.

Указанные недостатки относятся и к кровяно-теллуритовому агару, отличающемуся от кровяного агара наличием 2 мл 2% раствора теллурита калия (K2TeO3).These disadvantages apply to blood-tellurite agar, which differs from blood agar by the presence of 2 ml of a 2% potassium tellurite solution (K 2 T e O 3 ).

Среда Клауберг II, отличается сложностью в изготовлении. Химически чистый глицерин, требуемый для приготовления глицериновой смеси, необходимо стерилизовать при 110°С в течение 30 минут. Изготовление среды осложняется еще и тем, что нужно предварительно приготовить лаковую кровь из дистиллированной воды и дефибринированной крови животного, что сопряжено с дополнительными расходами и временем. Видимые колонии на данной среде появляются не раньше 48 ч.Wednesday Klauberg II, is difficult to manufacture. The chemically pure glycerin required to prepare the glycerin mixture must be sterilized at 110 ° C for 30 minutes. The manufacture of the medium is further complicated by the fact that it is necessary to pre-prepare lacquered blood from distilled water and defibrinated blood of the animal, which is associated with additional costs and time. Visible colonies in this medium appear no earlier than 48 hours.

Сывороточный агар, состоящий из питательной среды с 10-15% лошадиной или бычьей стерильной сывороткой, имеет низкие дифференцирующие свойства на фоне обильного роста сопутствующей микрофлоры.Serum agar, consisting of a nutrient medium with 10-15% horse or bovine sterile serum, has low differentiating properties against the background of the abundant growth of concomitant microflora.

Сухая хинозольная среда Бучина [4], характеризуется низкой высеваемостью. Среда содержит 2 вида минеральных солей, что по нашему мнению недостаточно для качественного обеспечения углеводородокисляющих микроорганизмов необходимыми факторами роста а также микро- и макроэлементами [1, 6].Buchina’s dry chinosol medium [4] is characterized by low seeding. The medium contains 2 types of mineral salts, which, in our opinion, is insufficient for the quality supply of hydrocarbon-oxidizing microorganisms with the necessary growth factors as well as micro and macro elements [1, 6].

Среда Мюнца для выделения и выращивания нокардий и родококков, с добавлением парафиновой приманки, обладает слабыми ростовыми свойствами.The Münz medium for isolation and cultivation of nocardia and rhodococcus, with the addition of a paraffin bait, has weak growth properties.

Низкими ингибирующими свойствами характеризуются среды УМ-агар и питательный бульон.Low inhibitory properties are characteristic of the environment UM-agar and nutrient broth.

Среда с овсяной мукой и декстрозный агар не отличаются диагностической ценностью из-за низкой высеваемости, а также обильным ростом посторонней микрофлоры.The environment with oatmeal and dextrose agar does not differ in diagnostic value due to low seeding, as well as the abundant growth of extraneous microflora.

С учетом вышесказанного, при конструировании универсальной питательной среды мы исходили из содержания в среде пластического материала (азот, углерод, водород, кислород) для построения тела микробных клеток, источника энергий (Д-глюкоза), а также минимального количество микроэлементов, участвующих в образовании коферментов. Кроме основных компонентов (пластических и энергетических) для нормального развития микроорганизмам необходим «фактор роста», которыми являются парафин, агар микробиологический и дефибринированная кровь животных.In view of the above, when designing a universal nutrient medium, we proceeded from the content in the medium of plastic material (nitrogen, carbon, hydrogen, oxygen) to build the body of microbial cells, an energy source (D-glucose), and the minimum number of trace elements involved in the formation of coenzymes . In addition to the main components (plastic and energy) for normal development, microorganisms need a “growth factor”, which is paraffin, microbiological agar and defibrinated animal blood.

Воду (дистиллированную), как основной растворитель питательных веществ, мы заменили на геотермальную (с минерализацией 5,02 г/л), в том числе и в целях расширения солевого состава среды, что позволить качественно обеспечить среду минеральными солями, анионами, катионами и тд.We replaced the water (distilled), as the main solvent of nutrients, with geothermal (with a mineralization of 5.02 g / l), including in order to expand the salt composition of the medium, which allows us to qualitatively provide the medium with mineral salts, anions, cations, etc. .

Расширенный лабораторный анализ геотермальной воды (фотометрия, потенциометрия, атомно-абсорбционная спектрометрия, комплексометрия и тд.) показал качественное и количественное отличие данной воды от дистиллированной по микро- и макроэлементам. Суммарное значение составляло: анионов - 1,6771 г/л (NH4, Na, K, Mg, Са, Sr, Fe, Mn, Zn, Cu, Ni), катионов - 3,4732 г/л (Cl, Br, I, SO4, HCO3, HPO4, NO3). Кроме того, в геотермальной воде содержится нейтральные и кислые битумы (2,5 мг/л), гумусовые вещества (7,1 мг/л) как источник углеводородов. Для углеводородокисляющих микроорганизмов, к которым относятся коринебактерий, нокардий и родококки, такой источник является стимулом повышения ростовых свойств, предлагаемой среды [3, 5, 6, 7].Advanced laboratory analysis of geothermal water (photometry, potentiometry, atomic absorption spectrometry, complexometry, etc.) showed a qualitative and quantitative difference between this water and distilled micro- and macroelements. The total value was: anions - 1.6771 g / l (NH 4 , Na, K, Mg, Ca, Sr, Fe, Mn, Zn, Cu, Ni), cations - 3.4732 g / l (Cl, Br, I, SO 4 , HCO 3 , HPO 4 , NO 3 ). In addition, neutral and acidic bitumen (2.5 mg / l), humic substances (7.1 mg / l) as a source of hydrocarbons are contained in geothermal water. For hydrocarbon-oxidizing microorganisms, which include corynebacteria, nocardia and rhodococcus, this source is an incentive to increase the growth properties of the proposed environment [3, 5, 6, 7].

Наиболее близким к заявляемой среде являются:Closest to the claimed environment are:

- для выделения коринебактериии, сухая хинозольная среда Бучина (панкреатический гидролизат кильки - 30,6 г; натрия хлорид - 5,0±0,05 г; д-глюкоза - 15,0 г; водный голубой - 0,25 г; натрий углекислый - 0,4±0,05 г; агар микробиологический - 8,0±1,0 г (PH 7,4±0,2); дистиллированная вода - до 1 литра; 5% стерильная дефибринированая кровь человека или животных).- to isolate corynebacterium, Buchina’s dry chinosol medium (sprat pancreatic hydrolyzate - 30.6 g; sodium chloride - 5.0 ± 0.05 g; d-glucose - 15.0 g; aqueous blue - 0.25 g; sodium carbonate - 0.4 ± 0.05 g; microbiological agar - 8.0 ± 1.0 g (P H 7.4 ± 0.2); distilled water - up to 1 liter; 5% sterile defibrated blood of humans or animals).

- для нокардий и родококков, среда Мюнца (KNO3 - 1 г, MgSO4 - 0,1 г, Na2HPO4 - 0,6 г, KH2PO4 - 0,14 г, NaCl - 1,0 г, водопроводная вода - 0,5 л, вода дистиллированная - 0,5 л, рН - (6,8-7) - подводят кислотой.- for nocardia and Rhodococcus, Münz medium (KNO 3 - 1 g, MgSO 4 - 0.1 g, Na 2 HPO 4 - 0.6 g, KH 2 PO 4 - 0.14 g, NaCl - 1.0 g, tap water - 0.5 l, distilled water - 0.5 l, pH - (6.8-7) - let down with acid.

К недостаткам данных сред относятся слабые ростовые и низкие ингибирующие постороннюю микрофлору свойства.The disadvantages of these media include weak growth and low properties inhibiting extraneous microflora.

Цель изобретения: разработка универсальной питательной среды для культивирования коринебактерий, нокардии и родококов, характеризующейся диагностической ценностью и практической значимостью.The purpose of the invention: the development of a universal nutrient medium for the cultivation of corynebacteria, nocardia and Rhodococcus, characterized by diagnostic value and practical significance.

Для достижения поставленной цели взяли панкреатический гидролизат кильки - 31,7 г, д-глюкозу - 16,0 г, KH2PO4 - 0,17 г, MgSO4 - 0,2 г, водный голубой - 0,28 г, натрий углекислый - 0,3 г ± 0,05, агар микробиологический - 8,1 г ± 1,0 (рН 7,4±0,2), добавили геотермальную воду до 1 л и стерильную дефибринированную кровь животных - 5%. В процессе размешивания, не допуская образования пены, вносили 4-5 капель парафина, разлили в чашки Петри. После застывания среду слегка подсушили в термостате при температуре 37±1°С в течение 40-60 мин. Цвет готовой среды темно-синий. Хранили в холодильнике, использовали в течение 3-4 сут.To achieve this goal they took sprat pancreatic hydrolyzate - 31.7 g, d-glucose - 16.0 g, KH 2 PO 4 - 0.17 g, MgSO 4 - 0.2 g, water blue - 0.28 g, sodium carbon dioxide - 0.3 g ± 0.05, microbiological agar - 8.1 g ± 1.0 (pH 7.4 ± 0.2), geothermal water was added up to 1 l and sterile defibrated animal blood - 5%. In the process of stirring, preventing the formation of foam, 4-5 drops of paraffin were added, poured into Petri dishes. After solidification, the medium was slightly dried in a thermostat at a temperature of 37 ± 1 ° C for 40-60 minutes. The color of the finished medium is dark blue. Stored in the refrigerator, used for 3-4 days.

Сопоставительный анализ с прототипами позволяет сделать вывод, что заявляемый состав среды отличается от известных, подбором минимального количество компонентов для построения тела углеводородокисляющими микроорганизмами (азот, углерод, водород, кислород) - пластический материал, парафин - фактор роста, (д-глюкоза) - источник энергий, кроме того, заменой дистиллированной воды геотермальной и расширением солевого состава за счет большего содержания микро- и макроэлементов в геотермальной воде. Таким образом, заявляемое техническое решение соответствует критерию «новизна».Comparative analysis with prototypes allows us to conclude that the claimed composition of the medium differs from the known ones by the selection of the minimum number of components for building the body with hydrocarbon-oxidizing microorganisms (nitrogen, carbon, hydrogen, oxygen) - plastic material, paraffin - growth factor, (d-glucose) - source energies, in addition, the replacement of distilled water with geothermal and the expansion of salt composition due to the greater content of micro and macro elements in geothermal water. Thus, the claimed technical solution meets the criterion of "novelty."

При экспериментальной проверке были испытаны среды, наиболее часто используемые для культивирования коринебактерий, нокардий и родококков. Среды готовили по прописи авторов [2].During experimental verification, the media most commonly used for the cultivation of corynebacteria, nocardia and rhodococci were tested. The media were prepared according to the writings of the authors [2].

Оценку сред проводили посевом тест-штаммов и свежевыделенных культур коринебактерий, нокардий и родококков. В качестве музейного штамма использовали Corynebacterium xerosis N1911, N. asteroides ВКМ Ac 1077 и R. bronchialis ИМВ Ac 737. а нативным материалом служили лабораторные штаммы, выделенные из объектов внешней среды (почва, корма, навоз и кровь крупного рогатого скота).Evaluation of the media was carried out by sowing test strains and freshly isolated cultures of corynebacteria, nocardia and rhodococcus. Corynebacterium xerosis N1911, N. asteroides VKM Ac 1077 and R. bronchialis IMV Ac 737 were used as a museum strain. Laboratory strains isolated from environmental objects (soil, feed, cattle manure and blood) were used as native material.

Культуру каждого штамма высевали в 8 чашках Петри каждой среды. Коринебактерии на нитритный агар по Виноградскому, среду Сотона, кровяной агар, кровяно-теллуритовый агар, среду Клауберг II, среду Бучина и на универсальную среду. Нокардии и родококки - среду Мюнца, УМ-агар, среду с овсяной мукой, дакстрозный агар, питательный бульон, универсальная среда.The culture of each strain was seeded in 8 Petri dishes of each medium. Corynebacteria on nitrite agar according to Vinogradsky, Soton’s medium, blood agar, blood-tellurite agar, Klauberg II medium, Buchin’s medium and universal medium. Nocardia and Rhodococcus - Münz medium, UM-agar, medium with oatmeal, dacstrous agar, nutrient broth, universal medium.

Для соблюдения равнозначности опыта материал высевали равными дозами (500 клеток в 0,1 мл). При учете результатов провели сравнительный анализ эффективности сред изучаемых образцов с предлагаемым по скорости и интенсивности роста, по величине колоний и ингибирующим к сопутствующей микрофлоре свойствам. Результаты учитывали через 24 и 48 ч. Опыты повторялись двукратно.To maintain the equivalence of the experiment, the material was seeded in equal doses (500 cells in 0.1 ml). When taking into account the results, we conducted a comparative analysis of the effectiveness of the media of the studied samples with the proposed growth rate and intensity, the size of the colonies and the properties inhibiting to the accompanying microflora. The results were taken into account after 24 and 48 hours. The experiments were repeated twice.

Figure 00000001
Figure 00000001

По результатам проведенных исследований, среда Мюнца и декстрозный агар показали низкие ростовые свойства 1-2 колонии. Низкие ингибирующие постороннюю микрофлору свойства обнаружили на среде с овсяной мукой, аналогичная картина на УМ-агаре, на фоне слабых ростовых свойств (Табл. 1)According to the results of the studies, Münz medium and dextrose agar showed low growth properties of 1-2 colonies. Low inhibitory extraneous microflora properties were found on a medium with oatmeal, a similar pattern on UM agar, against the background of weak growth properties (Table 1)

На питательном бульоне колонии не поддаются подсчету из-за обильного роста посторонней микрофлоры.Colonies cannot be counted on the nutrient broth due to the abundant growth of extraneous microflora.

На универсальной среде обнаружили умеренный рост на первые сутки с тест-штаммами и с нативным материалом - до 12 колонии, на вторые сутки - до 23 колонии в чашках с нативным материалом, но фоне хороших ингибирующих постороннюю микрофлору свойств.On a universal medium, moderate growth was found on the first day with test strains and with native material - up to 12 colonies, on the second day - up to 23 colonies in cups with native material, but against the background of good properties inhibiting extraneous microflora.

Figure 00000002
Figure 00000002

Рост колоний на среде Бучина формировался на первые сутки от 1 до 3 колоний с тест-штаммами и умеренным ростом с нативным материалом от 4 до 12 колоний (Табл. 2). На вторые сутки количество колоний в чашках с тест-штаммами увеличилось до 12 колоний.Colony growth on Buchin's medium was formed on the first day from 1 to 3 colonies with test strains and moderate growth with native material from 4 to 12 colonies (Table 2). On the second day, the number of colonies in dishes with test strains increased to 12 colonies.

По ростовым свойствам кровяной и кровяно-теллуритовые агары не уступают среде Бучина, но рост колоний формировался на фоне низких ингибирующих свойств по отношению к сопутствующей микрофлоре.By the growth properties, blood and blood-tellurite agars are not inferior to Buchin's medium, but the growth of the colonies was formed against the background of low inhibitory properties with respect to the concomitant microflora.

Низкими дифференцирующими свойствами обладает и сывороточный агар, где обнаружили обильный рост сопутствующей микрофлоры на вторые сутки.Serum agar also possesses low differentiating properties, where they found an abundant growth of concomitant microflora on the second day.

Эффективность нитритного агара и Клауберг II была самой низкой. Слегка заметный рост обнаружили на средах через 48 ч.The efficacy of nitrite agar and Klauberg II was the lowest. Slightly noticeable growth was found on media after 48 hours.

Слегка заметное помутнение обнаружили на среде Сатона, на вторые сутки картина практически не изменилось.Slightly noticeable turbidity was found on the Saton medium; on the second day, the picture practically did not change.

Предлагаемая среда показала высокие дифференцирующие и ингибирующие свойства. Колонии появились на первые сутки в количестве от 4 до 12 в чашках с тест-штаммами и с нативным материалом. На вторые сутки обнаружили обильный рост в обеих чашках до 23 колонии, без сопутствующей микрофлоры, что является показателем высокой ингибирующей активности. Рост отличался не только числом, но и характером и размером колонии.The proposed medium showed high differentiating and inhibitory properties. Colonies appeared on the first day in an amount of 4 to 12 in cups with test strains and with native material. On the second day, abundant growth was found in both cups to 23 colonies, without concomitant microflora, which is an indicator of high inhibitory activity. Growth differed not only in number, but also in the nature and size of the colony.

Выводы. Таким образом, проведенные исследования показали, что универсальная среда (М-10), для микобактериоподобных микроорганизмов обладает хорошими ростовыми свойствами на фоне высокой активности ингибирующей постороннюю микрофлору свойств. Кроме того, среда отличается от остальных вариантов по массивности выросших колоний, что в конечном итоге является показателем диагностической ценности и практической значимости универсальной среды.Findings. Thus, the studies showed that the universal medium (M-10), for mycobacterium-like microorganisms, has good growth properties against the background of high activity of properties inhibiting extraneous microflora. In addition, the environment differs from other options in terms of massiveness of the grown colonies, which ultimately is an indicator of the diagnostic value and practical significance of the universal environment.

ЛитератураLiterature

1. Баратов М.О. Сравнительное изучение наиболее часто используемых сред для выделения коринебактерий / М.О. Баратов, М.М. Ахмедов О.П. Сакидибиров // Материалы Всероссийской науч.-практ. конф. « Повышение продуктивности с/х. животных и птицы на основе инновационных достижений». - 2009 г. - Новочеркасск – С. 64-67.1. Baratov M.O. A comparative study of the most commonly used media for the isolation of corynebacteria / M.O. Baratov, M.M. Akhmedov O.P. Sakidibirov // Materials of the All-Russian scientific-practical. conf. “Improving agricultural productivity. animals and birds based on innovative achievements. ” - 2009 - Novocherkassk - S. 64-67.

2. Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / М.О. Биргер, Е.А. Ведьмина, В.В. Влодавец // - М: Медицина, 1985. - 261 с.2. Birger M.O. Handbook of microbiological and virological research methods / M.O. Birger, E.A. Witch, V.V. The Lord // // M: Medicine, 1985 .-- 261 p.

3. Высоцкий В.В. Сравнительное электронно-микроскопическое изучение 8 представителей рода Corynebacterium, выращенных на твердой питательной среде в стационарной фазе развития / В.В. Высоцкий, И.К. Мазурова, Е.А. Шмелева // Микробиология. - 1976. - №7. - С. 121-125.3. Vysotsky VV Comparative electron microscopic study of 8 representatives of the genus Corynebacterium grown on solid nutrient medium in a stationary phase of development / V.V. Vysotsky, I.K. Mazurova, E.A. Shmeleva // Microbiology. - 1976. - No. 7. - S. 121-125.

4. Меджидов М.М. Сухие микробиологические питательные среды / Меджидов М.М. и др. // - Каталог. - Махачкала, 1998, 78 с.4. Mejidov M.M. Dry microbiological culture media / Medzhidov M.M. et al. // - Catalog. - Makhachkala, 1998, 78 p.

5. Нуратинов Р.А. Кислотоустойчивые микроорганизмы - микобактерии, нокардии, родококки: химический состав, биологические свойства, антигенная структура / Р.А. Нуратинов и др. // Проблемы туберкулеза. - 2001. - №5. - С. 54-58.5. Nuratinov R.A. Acid-resistant microorganisms - mycobacteria, nocardia, rhodococcus: chemical composition, biological properties, antigenic structure / R.A. Nuratinov et al. // Problems of Tuberculosis. - 2001. - No. 5. - S. 54-58.

6. Нестеренко O.A. Нокардиоподобные и коринеподобные бактерии / О.А. Нестеренко // - Киев: Наукова Думка, 1985. С. 320-333.6. Nesterenko O.A. Nocardium-like and coryne-like bacteria / O.A. Nesterenko // - Kiev: Naukova Dumka, 1985.S. 320-333.

7. Шапелева Р.Г. Сравнительное изучение питательных сред для выделения коринебактерий / Р.Г. Шапелева, З.Г. Андреева, Г.П. Сокольникова // Журнал микробиология. - 1989. - №5. – С. 62-64.7. Shapeleva R.G. Comparative study of culture media for the isolation of corynebacteria / R.G. Shapeleva, Z.G. Andreeva, G.P. Sokolnikov // Journal of Microbiology. - 1989. - No. 5. - S. 62-64.

Claims (4)

Универсальная питательная среда для культивирования коринебактерий, нокардий и родококков, содержащая панкреатический гидролизат кильки, Д-глюкозу, KH2PO4, MgSO4; водный голубой, натрий углекислый, агар микробиологический, геотермальную воду, стерильную дефибринированую кровь животных и парафин, при следующем соотношении компонентов:Universal nutrient medium for the cultivation of corynebacteria, nocardia and rhodococci, containing sprat pancreatic hydrolyzate, D-glucose, KH 2 PO 4 , MgSO 4; aqueous blue, sodium carbonate, microbiological agar, geothermal water, sterile defibrinated animal blood and paraffin, in the following ratio of components: Панкреатический гидролизат килькиSprat pancreatic hydrolyzate 31,7 г 31.7 g Д-глюкозаD-glucose 16,0 г 16.0 g KH2PO4 KH 2 PO 4 0,17 г 0.17 g MgSO4 MgSO 4 0,2 г 0.2 g Водный голубойWater blue 0,28 г 0.28 g Натрий углекислыйSodium carbonate 0,3 г ± 0,05 0.3 g ± 0.05 Агар микробиологическийMicrobiological agar 8,1 г ± 1,0 (рН 7,4±0,2) 8.1 g ± 1.0 (pH 7.4 ± 0.2) Геотермальная водаGeothermal water до 1 литра up to 1 liter
стерильная дефибринированная кровь животныхsterile defibrinated animal blood 5% 5%
ПарафинParaffin 4-5 капель 4-5 drops
RU2016121960A 2016-06-02 2016-06-02 Universal nutrient medium for microbacterial microorganisms isolation RU2644347C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2016121960A RU2644347C2 (en) 2016-06-02 2016-06-02 Universal nutrient medium for microbacterial microorganisms isolation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2016121960A RU2644347C2 (en) 2016-06-02 2016-06-02 Universal nutrient medium for microbacterial microorganisms isolation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2016121960A RU2016121960A (en) 2017-12-07
RU2644347C2 true RU2644347C2 (en) 2018-02-08

Family

ID=60580709

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016121960A RU2644347C2 (en) 2016-06-02 2016-06-02 Universal nutrient medium for microbacterial microorganisms isolation

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2644347C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2701504C1 (en) * 2018-03-26 2019-09-26 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный аграрный научный центр Республики Дагестан" Nutrient medium for cultivation of brucellous microbe

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110885775B (en) * 2019-12-25 2021-06-29 广州科力生物科技有限公司 Nocardia culture method

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2182171C2 (en) * 2000-05-26 2002-05-10 Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Nutrient medium for rhodococcus culturing
RU2233876C2 (en) * 2002-05-18 2004-08-10 Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Nutrient medium for isolation and culturing mycobacteria
RU2484130C1 (en) * 2012-04-16 2013-06-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем нефти и газа Сибирского отделения Российской академии наук STRAIN OF BACTERIA Pseudomonas panipatensis VKPM V-10593 - DESTRUCTOR OF OIL AND OIL PRODUCTS

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2182171C2 (en) * 2000-05-26 2002-05-10 Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Nutrient medium for rhodococcus culturing
RU2233876C2 (en) * 2002-05-18 2004-08-10 Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Nutrient medium for isolation and culturing mycobacteria
RU2484130C1 (en) * 2012-04-16 2013-06-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем нефти и газа Сибирского отделения Российской академии наук STRAIN OF BACTERIA Pseudomonas panipatensis VKPM V-10593 - DESTRUCTOR OF OIL AND OIL PRODUCTS

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Под ред. Меджидова М.М. Справочник по микробиологическим питательным средам, 1989, Махачкала, с. 52-53. *
ХАЛДУН А.О., НУРАТИНОВ Р.А. Испытание новой питательной среды при изучении экологии микроорганизмов Nocardia и Rhodococcus, Юг России: Экология, развитие, 2008, N4, с. 146-152. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2701504C1 (en) * 2018-03-26 2019-09-26 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный аграрный научный центр Республики Дагестан" Nutrient medium for cultivation of brucellous microbe

Also Published As

Publication number Publication date
RU2016121960A (en) 2017-12-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
片瀬雅彦 et al. Nematicidal activity of volatile fatty acids generated from wheat bran in reductive soil disinfestation
RU2644347C2 (en) Universal nutrient medium for microbacterial microorganisms isolation
CN108277163B (en) Method for separating and purifying euglena species
Iyer et al. Uptake of potassium by algae and potential use as biofertilizer
KR20100138160A (en) Process for the preparation of natural mineral bio liquid fertilizer using excretion of domestic animal and natural mineral bio liquid fertilizer prepared therefrom
Tarigan et al. Exploration and morphological characterization of phosphate-solubilizing and nitrogen-fixing bacteria in saline soil.
CN103710284B (en) There is bacterium mixture and the application thereof of ammonia nitrogen degradation ability
Venkatesan et al. Effects of nitrate and phosphate on total lipid content and pigment production in Botryococcus braunii Kutzing KM-104
CN102850103A (en) Fertilizer-water composite preparation for culturing purple pearls
RU2687023C1 (en) Pediococcus pentosaceus strain for processing organic wastes and a preparation based thereon
RU2522523C1 (en) Method of microbiological treatment of poultry droppings
RU2233876C2 (en) Nutrient medium for isolation and culturing mycobacteria
RU2672325C1 (en) Environment for the distribution and cultivation of micro-bacteria
RU2588670C2 (en) Nutrient medium for cultivation of corynebacteria
CN102870818A (en) Disinfectant used for aquiculture and preparation method of same
DE1922843C (en)
RU2701504C1 (en) Nutrient medium for cultivation of brucellous microbe
US2230130A (en) Method of obtaining microbian enzymes
RU2704434C1 (en) Method for microbiological processing of poultry manure
RU2586521C1 (en) Sinorhizobium fredii NODULE BACTERIAL STRAIN FOR PRODUCTION OF BACTERIAL FERTILISER FOR SOY
Tahir et al. Biosynthesis of Zn bacitracin by Bacillus licheniformis under submerged fermentation using wheat bran
SU1703682A1 (en) Method of growing microalgae
CN113040075B (en) Method for culturing seawater rotifer by shrimp head fermentation liquor
Pratiwi et al. The potential of modified karst water as a substitute for microalgae culture media
Vraná et al. Influence of soluble humic substances on the growth of algae and blue-green algae

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20190603