RU2643335C1 - Инактивированная бивалентная гидроокись алюминиевая вакцина против кампилобактериоза собак - Google Patents
Инактивированная бивалентная гидроокись алюминиевая вакцина против кампилобактериоза собак Download PDFInfo
- Publication number
- RU2643335C1 RU2643335C1 RU2016144582A RU2016144582A RU2643335C1 RU 2643335 C1 RU2643335 C1 RU 2643335C1 RU 2016144582 A RU2016144582 A RU 2016144582A RU 2016144582 A RU2016144582 A RU 2016144582A RU 2643335 C1 RU2643335 C1 RU 2643335C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- fetus
- strain
- campylobacter
- subspecies
- jejuni
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии и может быть использовано для профилактики и лечения кампилобактериоза собак. Бивалентная вакцина против кампилобактериоза собак содержит формализированный антиген из штамма Campylobacter fetus subspecies fetus и адьюванта 2% гидроокиси алюминия на фосфатно-буферном растворе, а также формалинизированный антиген из штамма Campylobacter jejuni sudspecies jejuni с концентрацией смеси антигенов 2 млрд микробных клеток в 1 мл вакцины при соотношении 1,5:0,5 (полторы части штамма Campylobacter fetus subspecies fetus и 0,5 части штамма Campylobacter jejuni subspecies jeuni). Использование изобретения позволяет расширить арсенал средств для лечения и профилактики кампилобактериоза. 3 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии, иммунологии, ветеринарии, микробиологии и может быть использовано в биотехнологии при производстве инактивированной вакцины против кампилобактериоза домашних животных.
Известно применение гидроокиси алюминия в качестве адъюванта и формалина в качестве инактиватора и при производстве ГОА - (гидроокись алюминевой формол-вакцины) против возбудителя Campylobacter fetus subspecies fetus «Современные проблемы профилактики и терапии заразных болезней сельскохозяйственных животных и птиц», Огородникова, Гришина. Горовенко, Кисилёва, Иванова. Опыт сравнительного изучения иммуногенности противокампилобактериозных вакцин на морских свинках, Ленинград, 1984, МСХ СССР ЛВИ (Ленинградский ветеринарный институт), сборник научных трудов, стр. 58-59. Данная вакцина выбрана в качестве прототитпа.
Применение формалина для инактивации является то, что он убивает микробную клетку не разрушая ее, сохраняя антигены на поверхности оболочки. Усиливается антигенность и иммуногенность.
Недостатком известного (гидроокись алюминиевая-формолвакцина) является недостаточная антигенная активность препарата, повышенная реактогенность инактиватора(формалина), используемого при производстве вакцины. Кроме того, формалин требует защиты дыхательных путей и кожных покровов специалиста при работе с ним.
Техническим результатом изобретения является создание инактивированной вакцины против кампилобактериоза собак с использованием ГОА (гидроокись алюминия) 2% гидроокиси алюминия на фосфатно-буферном растворе.
Технический результат достигается тем, что она дополнительно содержит формалинизированные антигены из штаммов Campylobacter: fetus subspecies fetus и jejuni subspecies jejuni при концентрации смеси антигенов 2 млрд микробных клеток в 1 мл вакцины при соотношении 1,5:0,5 (полторы части штамма Campylobacter fetus subspecies fetus и 0,5 части Campylobacter jejuni subspecies jejuni).
Технологический процесс включает стадии выделения и накопления возбудителей Campylobacter fetus subspecies fetus и Campylobacter jejuni subspecies jejuni соединения накопленной культуры с инактивирующим агентом в оптимальном соотношении и внесения получившейся биомассы.
Концентрацию микробных клеток определяют при помощи стандарта мутности ГИСК им. Л.А. Тарасевича), выделяют, поддерживают и культивируют на среде ПЖА (полужидкий агар) в микроаэробных условиях в термостате 37°C в течение 2 суток. После проверяют принадлежность возбудителей по их культурально-морфологическим и биохимическим свойствам.
Накопление колоний возбудителей осуществляется путем пересева с ПЖА (полужидкий агар) на плотную среду по рецепту проблемной бруцеллезной лаборатории СПбГАВМ (Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины).
Фасуют по колбам-матрам и простерилизовывают в автоклаве при 115° 30 минут. РН - 7,2-7,3, возбудители кампилобактериоза на указанной среде культивируют в микроаэробных условях в термостате при 37-38°C в течение 2 суток. Смыв бакмассы со среды проводится стерильно 0,9% раствором натрия хлорида с добавлением 0,3% формалина в стерильные флаконы по 100 мл.
На инактивацию биомассы с формалином ставят в термостат. Инактивация проходит в бескислородных условиях при 37°C в течение 2 суток.
Контроль инактивации осуществляется путем посева полученной инактивированной биомассы на ПЖА, а также микроскопии инактивированных клеток.
После контроля на инактивацию биомассу центрифугируют при 3000 оборотов в мин в течение 30 минут. Сливают надосадочную жидкость и разводят стерильным 0,9% раствором хлорида натрия.
Образец бивалентной вакцины производят следующим образом:
1. В 100 мл инактивированной бакмассы вносится 2% суспензия гидроокиси алюминия AL(OH) в количестве 11 мл, доведя концентрацию действующего вещества до 0,2% относительно общей массы препарата ГОА (гидроокись алюминиевая - вакцина).
2. Перемешивают и ставят в термостат на 24-48 часов при 37°C.
3. Перемешивают полученную эмульсию при 14 тысяч оборотах в минуту в течение 5 минут.
В дальнейшем опытный образец вакцины прошел контроль на стабильность, безвредность, реактогенность, иммуногенность и антигенную активность. Испытания проводились на лабораторных животных (морские свинки 350-400 г. По результатам серологического исследования не имеющие антител к возбудителю кампилобактериоза), поделенных на группы по 10 голов: 3 опытные и 4 контрольная.
Иммуногенность вакцины оценивалась путем заражения подопытных животных культурой возбудителя. Для определения заражающей дозы проведено пассажирование патогенного штамма Campylobacter fetus subspecies fetus на 3-x беременных морских свинках. Выделенная культура 2 пассажа в концентрации 20 тыс. микробных клеток использована в качестве зараженной дозы. Заражение вакцинированных морских свинок проводилось подкожно в дозе 1 мл через 30 дней после вакцинации. Через 30 дней после заражения морские свинки опытных и контрольных групп убиты для бактериологического исследования органов и тканей на кампилобактериоз.
Результаты исследований представлены в таблице 1 на 40 морских свинках и свидетельствуют о высокой защитной эффективности бивалентной противокампилобактериозной ГОА (гидроокись алюминия) - формол-вакцины на морских свинках, привитых более высокими дозами, защитная эффективность составила 80-90%, в это же время в контрольной группе (не вакцинированной) установлено 100% заражение.
Длительность прививочного иммунитета испытанной вакцины достигает 150 дней (срок наблюдения). Стабильность вакцины более 8 месяцев (срок наблюдения).
Для определения безвредности (безопасности) вакцины осуществлялся ежедневный контроль состояния подопытных животных. Все животные из групп 1-3 активно принимали корм и воду, клинических признаков заболеваемости не выявлено, животные активны, аборты у беременных свинок отсутствовали. Признаков токсичности, аллергенности, мутагенности препарата не выявлено. Таким образом, установлена безвредность этой вакцины.
При контроле реактогенности бивалентной вакцины у морских свинок местные и побочные действия не выявлены.
Антигенная активность вакцины устанавливалась путем определения титров антител в сыворотке животных через 3-6 недель после вакцинации.
Антигенная активность инактивированной бивалентной ГОА (гидроокись алюминия) - вакцины против кампилобактериоза устанавливалась определением и титров антител в сыворотке крови животных в реакции РА через 3-6 недель после вакцинации. Через 3 недели титр антител в первых группах с антигеном Campylobacter fetus subspecies fetus составлял 1:100-1:200. С антигеном Campylobacter jejuni subspecies jejuni составлял 1:50-1:100. Через 6 недель титры антител в сыворотке крови с антигеном Campylobacter fetus subspecies fetus были 1:200-1:400 во всех группах. С антигеном Campylobacter jejuni subspecies jejuni титры антител соответствовали 1:100-1:200 во всех 3 группах. В контрольной группе, которая не прививалась вакциной, с антигенами Campylobacter была отрицательной. Таким образом, испытуемая серия бивалентной инактивированной ГОА-вакцины против кампилобактериоза собак в остром опыте на морских свинках показала 80-90%-ную эффективность в группах животных, привитых дозами 4 и 5 миллиардов микробных клеток при 100% заражении в контроле. Иммуногенность вакцины была испытана на 500 собаках различных пород с лечебной и профилактической целью. Разработан способ применения вакцины в зависимости от живого веса 0,1 мл на кг подкожно через день 3х кратно, повторная ревакцинация проводится через 3 месяца. После применения вакцины в течение года отсутствовало бесплодие у самок, у самцов исчезали орхиты после 3х кратных введений вакцины. У собак с симптомами артритов и положительно реагирующих на кампилобактериоз сокращался послеоперационный период реабилитации.
Вакцина может применяться в ветеринарии для лечения и профилактики домашних и сельскохозяйственных животных.
Результаты применения бивалентной ГОА инактивированной вакцины против кампилобактериоза собак представлены в таблице 3. Из таблицы следует, что вакцина обладает высокой защитной эффективностью против кампилобактериоза собак.
Claims (1)
- Бивалентная вакцина против кампилобактериоза собак, содержащая формализированный антиген из штамма Campylobacter fetus subspecies fetus и адъювант 2% гидроокиси алюминия на фосфатно-буферном растворе гидроокиси алюминия, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит формализированный антиген из штамма Campylobacter jejuni subspecies jejuni с концентрацией смеси антигенов 2 млрд микробных клеток в 1 мл вакцины при соотношении 1,5:0,5 (полторы части штамма Campylobacter fetus subspecies fetus и 0,5 части штамма Campylobacter jejuni subspecies jejuni).
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016144582A RU2643335C1 (ru) | 2016-11-14 | 2016-11-14 | Инактивированная бивалентная гидроокись алюминиевая вакцина против кампилобактериоза собак |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016144582A RU2643335C1 (ru) | 2016-11-14 | 2016-11-14 | Инактивированная бивалентная гидроокись алюминиевая вакцина против кампилобактериоза собак |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2643335C1 true RU2643335C1 (ru) | 2018-01-31 |
Family
ID=61173568
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016144582A RU2643335C1 (ru) | 2016-11-14 | 2016-11-14 | Инактивированная бивалентная гидроокись алюминиевая вакцина против кампилобактериоза собак |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2643335C1 (ru) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2021818C1 (ru) * | 1992-06-05 | 1994-10-30 | Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов | Ассоциированная вакцина против лептоспироза и кампилобактериоза крупного рогатого скота |
WO2004017990A1 (en) * | 2002-08-26 | 2004-03-04 | Pfizer Products Inc. | Vaccine for respiratory and reproductive system infections in cattle |
RU2592543C2 (ru) * | 2009-12-21 | 2016-07-20 | Евоник Корпорейшн | Способ изготовления циклических сложных эфиров, содержащих ненасыщенные функциональные группы, и получаемых из них полиэфиров |
-
2016
- 2016-11-14 RU RU2016144582A patent/RU2643335C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2021818C1 (ru) * | 1992-06-05 | 1994-10-30 | Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов | Ассоциированная вакцина против лептоспироза и кампилобактериоза крупного рогатого скота |
WO2004017990A1 (en) * | 2002-08-26 | 2004-03-04 | Pfizer Products Inc. | Vaccine for respiratory and reproductive system infections in cattle |
RU2592543C2 (ru) * | 2009-12-21 | 2016-07-20 | Евоник Корпорейшн | Способ изготовления циклических сложных эфиров, содержащих ненасыщенные функциональные группы, и получаемых из них полиэфиров |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
BURNENS A. et al. Idetification and characterization of an immunogenic outer membrane protein of Campylobacter jejuni//J Clin Microbiol. 1995 Nov; 33(11):2826-32, PMID: 8576327. * |
КАРАВАЙЧИК А.Л. Кампилобактериоз собак в Санкт-Петербурге (эпизоотология, биологические свойства возбудителя, клиника, диагностика и профилактика) Автореф. дис. к.в.н., СПб, 2003 - 247С он лайн, найдено в Интернет на (http://www.dissercat.com/content/kampilobakterioz-sobak-v-sankt-peterburge-epizootologiya-biologicheskie-svoistva-vozbuditel-0), 01.11.2017. * |
КАРАВАЙЧИК А.Л. Кампилобактериоз собак в Санкт-Петербурге (эпизоотология, биологические свойства возбудителя, клиника, диагностика и профилактика) Автореф. дис. к.в.н., СПб, 2003 - 247С он лайн, найдено в Интернет на (http://www.dissercat.com/content/kampilobakterioz-sobak-v-sankt-peterburge-epizootologiya-biologicheskie-svoistva-vozbuditel-0), 01.11.2017. BURNENS A. et al. Idetification and characterization of an immunogenic outer membrane protein of Campylobacter jejuni//J Clin Microbiol. 1995 Nov; 33(11):2826-32, реферат PMID: 8576327. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
UA121193C2 (uk) | Спосіб одержання імуногенної композиції проти мікоплазми | |
Srivastav et al. | To study the production and standardization of veterinary vaccines | |
RU2699671C1 (ru) | Вакцина для ранней защиты против ящура типа О инактивированная эмульсионная | |
RU2643335C1 (ru) | Инактивированная бивалентная гидроокись алюминиевая вакцина против кампилобактериоза собак | |
RU2432174C1 (ru) | Способ получения эшерихиозного анатоксина | |
RU2549434C2 (ru) | Способ изготовления бруцеллезной диагностической сыворотки | |
RU2644654C2 (ru) | Способ получения гидроокись алюминиевой масляной тео-вакцины против кампилобактериоза | |
IQBAL et al. | Immune response of rabbits to hemorrhagic septicemia vaccine formulations adjuvanted with montanide ISA-206, paraffin oil and alum | |
RU2798283C1 (ru) | Штамм Chlamydia abortus "Chlamydia VNITIBP-21" для производства иммунобиологических лекарственных препаратов | |
RU2806810C1 (ru) | Вакцина гидроокись алюминиевая масляная против эшерихиоза телят и поросят | |
RU2802251C1 (ru) | Вакцинная композиция для профилактики энзоотического аборта у овец | |
RU2813752C1 (ru) | Способ получения гидроокись алюминиевой масляной вакцины против эшерихиоза телят и поросят | |
Belyaeva et al. | Development and testing of a vaccine against infectious atrophic rhinitis and pasteurellosis in pigs | |
RU2727258C1 (ru) | Способ повышения иммуногенности вакционного штамма чумного микроба | |
CN103937752B (zh) | 一种h3n2亚型犬流感病毒灭活疫苗及其制备方法和应用 | |
Cameron | The significance of the endotoxin and pyogenic factor of Corynebacterium pseudotuberculosis in immunity | |
Moustafa et al. | Trial for Preparation of Combined Equine Influenza virus, Equine Herpesvirus-1 and Tetanus Toxoid Vaccine | |
RU2764600C1 (ru) | Вакцина против эшерихиоза телят и поросят | |
CN103690951B (zh) | 一种抗水貂绿脓杆菌性肺炎兽药的制备方法 | |
RU2553555C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Pseudomonas aeruginosa ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ПСЕВДОМОНОЗА СВИНЕЙ | |
RU2652889C1 (ru) | Способ изготовления вакцины инактивированной эмульсионной против ящура и вакцина инактивированная эмульсионная против ящура | |
RU2247577C2 (ru) | Вакцина для специфической профилактики хламидиоза свиней | |
RU2553554C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Pseudomonas aeruginosa ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ПСЕВДОМОНОЗА СВИНЕЙ | |
RU2553631C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИИ Pseudomonas aeruginosa № 9 ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ПСЕВДОМОНОЗА СВИНЕЙ | |
RU2553558C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Pseudomonas aeruginosa ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ПСЕВДОМОНОЗА СВИНЕЙ |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20181115 |