RU2636029C2 - Человеческие антитела и конъюгаты антитело-препарат против cd74 - Google Patents
Человеческие антитела и конъюгаты антитело-препарат против cd74 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2636029C2 RU2636029C2 RU2013140433A RU2013140433A RU2636029C2 RU 2636029 C2 RU2636029 C2 RU 2636029C2 RU 2013140433 A RU2013140433 A RU 2013140433A RU 2013140433 A RU2013140433 A RU 2013140433A RU 2636029 C2 RU2636029 C2 RU 2636029C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- cancer
- antibodies
- cells
- region
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 12
- 101001082627 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen gamma chain Proteins 0.000 claims abstract description 404
- 102100030595 HLA class II histocompatibility antigen gamma chain Human genes 0.000 claims abstract description 403
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 319
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 178
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 101
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 62
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 135
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 111
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 85
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 83
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 83
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 69
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 61
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 47
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 47
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 42
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 42
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 42
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 42
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 claims description 41
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 41
- -1 thioep Chemical compound 0.000 claims description 38
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 36
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 34
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 34
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 34
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 33
- 101000737793 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related antigen 1 Proteins 0.000 claims description 32
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 32
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 30
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 28
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 28
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 27
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 25
- 239000012636 effector Substances 0.000 claims description 25
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 claims description 25
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 claims description 25
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 21
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 20
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 20
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 claims description 20
- 230000030833 cell death Effects 0.000 claims description 20
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 19
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 16
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 claims description 16
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 13
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 12
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 12
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 12
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 11
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 claims description 11
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims description 11
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims description 11
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 claims description 11
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 claims description 11
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 claims description 10
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 10
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims description 10
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 10
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 10
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 10
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 10
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 10
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 claims description 10
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 claims description 9
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 claims description 9
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 claims description 9
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 8
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 claims description 8
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 8
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 claims description 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 8
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 7
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 claims description 7
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 claims description 7
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 7
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 7
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N duocarmycin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 claims description 7
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 claims description 7
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 claims description 6
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 claims description 6
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 claims description 6
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 claims description 6
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims description 6
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 claims description 6
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 claims description 6
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 claims description 6
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 6
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 6
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 claims description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 claims description 6
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 claims description 6
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 claims description 6
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 claims description 6
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 claims description 6
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 6
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- MSNVESLISHTIRS-UHFFFAOYSA-N 9h-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepine Chemical class N1=C2C=CC=CC2=CN2CC=CC2=C1 MSNVESLISHTIRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- OFDNQWIFNXBECV-UHFFFAOYSA-N Dolastatin 10 Natural products CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)CC)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 OFDNQWIFNXBECV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- LQKSHSFQQRCAFW-UHFFFAOYSA-N Dolastatin 15 Natural products COC1=CC(=O)N(C(=O)C(OC(=O)C2N(CCC2)C(=O)C2N(CCC2)C(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)C(NC(=O)C(C(C)C)N(C)C)C(C)C)C(C)C)C1CC1=CC=CC=C1 LQKSHSFQQRCAFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 5
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 claims description 5
- 101000874179 Homo sapiens Syndecan-1 Proteins 0.000 claims description 5
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims description 5
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims description 5
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 claims description 5
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims description 5
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 claims description 5
- 102100035721 Syndecan-1 Human genes 0.000 claims description 5
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 5
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 5
- LQKSHSFQQRCAFW-CCVNJFHASA-N [(2s)-1-[(2s)-2-benzyl-3-methoxy-5-oxo-2h-pyrrol-1-yl]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl] (2s)-1-[(2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]-methylamino]-3-methylbutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carboxyl Chemical compound C([C@@H]1N(C(=O)C=C1OC)C(=O)[C@@H](OC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C)C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 LQKSHSFQQRCAFW-CCVNJFHASA-N 0.000 claims description 5
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 claims description 5
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 claims description 5
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 claims description 5
- OFDNQWIFNXBECV-VFSYNPLYSA-N dolastatin 10 Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 OFDNQWIFNXBECV-VFSYNPLYSA-N 0.000 claims description 5
- 108010045524 dolastatin 10 Proteins 0.000 claims description 5
- 108010045552 dolastatin 15 Proteins 0.000 claims description 5
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 claims description 5
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims description 5
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 claims description 5
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 claims description 5
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 claims description 5
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 claims description 5
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 claims description 5
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 claims description 5
- IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N (S)-colchicine Chemical compound C1([C@@H](NC(C)=O)CC2)=CC(=O)C(OC)=CC=C1C1=C2C=C(OC)C(OC)=C1OC IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N 0.000 claims description 4
- VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethylchromen-6-yl)propan-1-one Chemical compound OC1=C2C=CC(C)(C)OC2=CC=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 claims description 4
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 claims description 4
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 claims description 4
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims description 4
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 4
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 claims description 4
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims description 4
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 claims description 4
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 claims description 4
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims description 4
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 claims description 4
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 4
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 claims description 4
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 4
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 claims description 4
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 4
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 claims description 4
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 claims description 4
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 claims description 4
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 claims description 4
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 claims description 4
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 claims description 4
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 claims description 4
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 claims description 4
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 claims description 4
- 229960005501 duocarmycin Drugs 0.000 claims description 4
- 229930184221 duocarmycin Natural products 0.000 claims description 4
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 4
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 claims description 4
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 4
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 claims description 4
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 claims description 4
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 claims description 4
- 150000003057 platinum Chemical class 0.000 claims description 4
- AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N propranolol Chemical compound C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102000015790 Asparaginase Human genes 0.000 claims description 3
- 108010024976 Asparaginase Proteins 0.000 claims description 3
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N Cladribine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(Cl)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims description 3
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 claims description 3
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 claims description 3
- 102100020715 Fms-related tyrosine kinase 3 ligand protein Human genes 0.000 claims description 3
- 101710162577 Fms-related tyrosine kinase 3 ligand protein Proteins 0.000 claims description 3
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 claims description 3
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 claims description 3
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 claims description 3
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 claims description 3
- 208000007913 Pituitary Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 201000005746 Pituitary adenoma Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061538 Pituitary tumour benign Diseases 0.000 claims description 3
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 claims description 3
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 208000000728 Thymus Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 claims description 3
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 claims description 3
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 claims description 3
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 claims description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 3
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 claims description 3
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 claims description 3
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 claims description 3
- 229960003272 asparaginase Drugs 0.000 claims description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M asparaginate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 claims description 3
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 claims description 3
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 claims description 3
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 claims description 3
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002436 cladribine Drugs 0.000 claims description 3
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 claims description 3
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 claims description 3
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 claims description 3
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 claims description 3
- 229960000390 fludarabine Drugs 0.000 claims description 3
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 claims description 3
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000029824 high grade glioma Diseases 0.000 claims description 3
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 claims description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 201000011614 malignant glioma Diseases 0.000 claims description 3
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 claims description 3
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical compound ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 claims description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000021310 pituitary gland adenoma Diseases 0.000 claims description 3
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 claims description 3
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 claims description 3
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 claims description 3
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 claims description 3
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 claims description 3
- 201000009377 thymus cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 claims description 3
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 claims description 3
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 claims description 3
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 claims description 3
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 1-oxidanylurea Chemical compound N[14C](=O)NO VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 0.000 claims description 2
- FBUTXZSKZCQABC-UHFFFAOYSA-N 2-amino-1-methyl-7h-purine-6-thione Chemical compound S=C1N(C)C(N)=NC2=C1NC=N2 FBUTXZSKZCQABC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 claims description 2
- 208000003200 Adenoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010001233 Adenoma benign Diseases 0.000 claims description 2
- 208000004860 Blast Crisis Diseases 0.000 claims description 2
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 claims description 2
- 101710158575 Cap-specific mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase Proteins 0.000 claims description 2
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 claims description 2
- 108700032819 Croton tiglium crotin II Proteins 0.000 claims description 2
- AZVARJHZBXHUSO-UHFFFAOYSA-N Duocarmycin A Natural products COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3CC4CC44C5=C(C(C=C43)=O)NC(C5=O)(C)C(=O)OC)=CC2=C1 AZVARJHZBXHUSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VQNATVDKACXKTF-UHFFFAOYSA-N Duocarmycin SA Natural products COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C(C64CC6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108700004714 Gelonium multiflorum GEL Proteins 0.000 claims description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 2
- 108010026389 Gramicidin Proteins 0.000 claims description 2
- 101000581408 Homo sapiens Melanin-concentrating hormone receptor 2 Proteins 0.000 claims description 2
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 claims description 2
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N Mitobronitol Chemical compound BrC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 2
- 244000302512 Momordica charantia Species 0.000 claims description 2
- 235000009811 Momordica charantia Nutrition 0.000 claims description 2
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 claims description 2
- 240000007643 Phytolacca americana Species 0.000 claims description 2
- 235000009074 Phytolacca americana Nutrition 0.000 claims description 2
- 101100413173 Phytolacca americana PAP2 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 101000762949 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) Exotoxin A Proteins 0.000 claims description 2
- 108010084592 Saporins Proteins 0.000 claims description 2
- 108010079723 Shiga Toxin Proteins 0.000 claims description 2
- 108010091769 Shiga Toxin 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 108010090763 Shiga Toxin 2 Proteins 0.000 claims description 2
- 108010017898 Shiga Toxins Proteins 0.000 claims description 2
- 102100028644 Tenascin-R Human genes 0.000 claims description 2
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 claims description 2
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 claims description 2
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 claims description 2
- VGQOVCHZGQWAOI-UHFFFAOYSA-N UNPD55612 Natural products N1C(O)C2CC(C=CC(N)=O)=CN2C(=O)C2=CC=C(C)C(O)=C12 VGQOVCHZGQWAOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 240000001866 Vernicia fordii Species 0.000 claims description 2
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 108010001818 alpha-sarcin Proteins 0.000 claims description 2
- VGQOVCHZGQWAOI-HYUHUPJXSA-N anthramycin Chemical compound N1[C@@H](O)[C@@H]2CC(\C=C\C(N)=O)=CN2C(=O)C2=CC=C(C)C(O)=C12 VGQOVCHZGQWAOI-HYUHUPJXSA-N 0.000 claims description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 claims description 2
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 claims description 2
- RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N boldenone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N 0.000 claims description 2
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 claims description 2
- NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N chembl557217 Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC=O)C(C)C)CC(C)C)C(=O)NCCO)=CNC2=C1 NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N 0.000 claims description 2
- 229960001338 colchicine Drugs 0.000 claims description 2
- RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N dehydrotestosterone Natural products O=C1C=CC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)O)C4C3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 2
- 229960005519 duocarmycin A Drugs 0.000 claims description 2
- 229960005510 duocarmycin SA Drugs 0.000 claims description 2
- 108010028531 enomycin Proteins 0.000 claims description 2
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 claims description 2
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 claims description 2
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 claims description 2
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 claims description 2
- 102000003898 interleukin-24 Human genes 0.000 claims description 2
- 229960004942 lenalidomide Drugs 0.000 claims description 2
- GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N lenalidomide Chemical compound C1C=2C(N)=CC=CC=2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O GOTYRUGSSMKFNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 claims description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- AZVARJHZBXHUSO-DZQVEHCYSA-N methyl (1R,4R,12S)-4-methyl-3,7-dioxo-10-(5,6,7-trimethoxy-1H-indole-2-carbonyl)-5,10-diazatetracyclo[7.4.0.01,12.02,6]trideca-2(6),8-diene-4-carboxylate Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C[C@H]4C[C@]44C5=C(C(C=C43)=O)N[C@@](C5=O)(C)C(=O)OC)=CC2=C1 AZVARJHZBXHUSO-DZQVEHCYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960005485 mitobronitol Drugs 0.000 claims description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 108010076042 phenomycin Proteins 0.000 claims description 2
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 claims description 2
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 claims description 2
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003712 propranolol Drugs 0.000 claims description 2
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 claims description 2
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 claims description 2
- 108010020387 tenascin R Proteins 0.000 claims description 2
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 claims description 2
- 229960002372 tetracaine Drugs 0.000 claims description 2
- GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N tetracaine Chemical compound CCCCNC1=CC=C(C(=O)OCCN(C)C)C=C1 GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 206010029461 Nodal marginal zone B-cell lymphomas Diseases 0.000 claims 2
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 claims 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims 1
- 208000004064 acoustic neuroma Diseases 0.000 claims 1
- 230000000947 anti-immunosuppressive effect Effects 0.000 claims 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 claims 1
- 190000008236 carboplatin Chemical compound 0.000 claims 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 42
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 21
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 abstract description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 11
- 230000006378 damage Effects 0.000 abstract description 3
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 64
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 54
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 50
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 49
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 33
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 33
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 32
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 30
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 27
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 25
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 24
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 23
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 22
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 22
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 21
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 20
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 20
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 20
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 20
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 19
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 17
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 17
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 16
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 15
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 14
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 14
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 13
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 13
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 13
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 12
- 230000034994 death Effects 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 12
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 12
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 12
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 12
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 10
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 10
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 10
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 10
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 10
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 10
- 108010028930 invariant chain Proteins 0.000 description 10
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 description 9
- 102100035361 Cerebellar degeneration-related protein 2 Human genes 0.000 description 9
- 101000737796 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related protein 2 Proteins 0.000 description 9
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 9
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 9
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 9
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 9
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 238000003325 tomography Methods 0.000 description 9
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 8
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 8
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 8
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 8
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 8
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 8
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 8
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 8
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 8
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 8
- 241000894007 species Species 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 8
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 7
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 7
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 7
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 7
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 7
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 7
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 7
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 7
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 7
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 7
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 7
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 7
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 7
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 6
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 6
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 6
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 6
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 6
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 6
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 6
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 6
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 description 6
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 6
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 6
- 244000309466 calf Species 0.000 description 6
- JJWKPURADFRFRB-UHFFFAOYSA-N carbonyl sulfide Chemical compound O=C=S JJWKPURADFRFRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 6
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 6
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 6
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 6
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 6
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 6
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 6
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 5
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 5
- 208000004736 B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 5
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 5
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 5
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 5
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 5
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 5
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 5
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 5
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 5
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 5
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 5
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 5
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 5
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 229940127084 other anti-cancer agent Drugs 0.000 description 5
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 5
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 5
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 5
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 5
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 4
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 description 4
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102100031940 Epithelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 4
- 101001008333 Homo sapiens Immunoglobulin kappa variable 1D-16 Proteins 0.000 description 4
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 4
- 238000012450 HuMAb Mouse Methods 0.000 description 4
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 4
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 4
- 102100027462 Immunoglobulin kappa variable 1D-16 Human genes 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 description 4
- 108010008707 Mucin-1 Proteins 0.000 description 4
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 4
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 4
- PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N Resazurin Chemical compound C1=CC(=O)C=C2OC3=CC(O)=CC=C3[N+]([O-])=C21 PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 4
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 4
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 4
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 4
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 4
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 4
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 4
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 4
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 4
- HKSZLNNOFSGOKW-UHFFFAOYSA-N ent-staurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(C)O1 HKSZLNNOFSGOKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 4
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 4
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 4
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 4
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 4
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 4
- 229960002450 ofatumumab Drugs 0.000 description 4
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 4
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 4
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 4
- HKSZLNNOFSGOKW-FYTWVXJKSA-N staurosporine Chemical compound C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1[C@H]1C[C@@H](NC)[C@@H](OC)[C@]4(C)O1 HKSZLNNOFSGOKW-FYTWVXJKSA-N 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 4
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 4
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 4
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 4
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 4
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 3
- ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecyl 16-methylheptadecanoate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC(C)C ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 description 3
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 3
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 3
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 3
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 3
- 102100032768 Complement receptor type 2 Human genes 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 3
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 description 3
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 3
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 description 3
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 3
- 101000941929 Homo sapiens Complement receptor type 2 Proteins 0.000 description 3
- 101000989005 Homo sapiens Immunoglobulin heavy variable 3-30-3 Proteins 0.000 description 3
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 3
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 3
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 3
- 101000961414 Homo sapiens Membrane cofactor protein Proteins 0.000 description 3
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 3
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 3
- 102100029428 Immunoglobulin heavy variable 3-30-3 Human genes 0.000 description 3
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 3
- 241000764238 Isis Species 0.000 description 3
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 239000005517 L01XE01 - Imatinib Substances 0.000 description 3
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 3
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 3
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 3
- 102100039373 Membrane cofactor protein Human genes 0.000 description 3
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 3
- 102100038358 Prostate-specific antigen Human genes 0.000 description 3
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 3
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 3
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 3
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 3
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100039037 Vascular endothelial growth factor A Human genes 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 3
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 3
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 3
- 238000002725 brachytherapy Methods 0.000 description 3
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 3
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 3
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 3
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 3
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000005417 image-selected in vivo spectroscopy Methods 0.000 description 3
- KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N imatinib Chemical compound C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 3
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 3
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000012739 integrated shape imaging system Methods 0.000 description 3
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 201000003445 large cell neuroendocrine carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 3
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 3
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 3
- 235000021190 leftovers Nutrition 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 3
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 3
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 238000012552 review Methods 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 3
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 3
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 description 3
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 3
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 3
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 3
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 3
- AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]-5-(carbamoylamino)pentanoic acid Chemical group CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=O AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- ALBODLTZUXKBGZ-JUUVMNCLSA-N (2s)-2-amino-3-phenylpropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ALBODLTZUXKBGZ-JUUVMNCLSA-N 0.000 description 2
- DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N (4r,7s,10s,13r,16s,19r)-10-(4-aminobutyl)-19-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-16-benzyl-n-[(2r,3r)-1,3-dihydroxybutan-2-yl]-7-[(1r)-1-hydroxyethyl]-13-(1h-indol-3-ylmethyl)-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carboxa Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H](NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC1=O)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 DEQANNDTNATYII-OULOTJBUSA-N 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HWTAKVLMACWHLD-UHFFFAOYSA-N 2-(9h-carbazol-1-yl)ethanamine Chemical compound C12=CC=CC=C2NC2=C1C=CC=C2CCN HWTAKVLMACWHLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3-(octadecanoyloxy)propyl octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LGZKGOGODCLQHG-CYBMUJFWSA-N 5-[(2r)-2-hydroxy-2-(3,4,5-trimethoxyphenyl)ethyl]-2-methoxyphenol Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1C[C@@H](O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 LGZKGOGODCLQHG-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 2
- PBCZSGKMGDDXIJ-HQCWYSJUSA-N 7-hydroxystaurosporine Chemical compound N([C@H](O)C1=C2C3=CC=CC=C3N3C2=C24)C(=O)C1=C2C1=CC=CC=C1N4[C@H]1C[C@@H](NC)[C@@H](OC)[C@]3(C)O1 PBCZSGKMGDDXIJ-HQCWYSJUSA-N 0.000 description 2
- PBCZSGKMGDDXIJ-UHFFFAOYSA-N 7beta-hydroxystaurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3C(O)NC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(C)O1 PBCZSGKMGDDXIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 2
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 2
- 206010073478 Anaplastic large-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 102400000068 Angiostatin Human genes 0.000 description 2
- 108010079709 Angiostatins Proteins 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 206010003908 B-cell small lymphocytic lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 206010055113 Breast cancer metastatic Diseases 0.000 description 2
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000208199 Buxus sempervirens Species 0.000 description 2
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 2
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 2
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 2
- 108010051109 Cell-Penetrating Peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000020313 Cell-Penetrating Peptides Human genes 0.000 description 2
- 102000008130 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108010049894 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Proteins 0.000 description 2
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 2
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 2
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 102100030012 Deoxyribonuclease-1 Human genes 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical group NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical class OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101001057156 Homo sapiens Melanoma-associated antigen C2 Proteins 0.000 description 2
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 2
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 102000012355 Integrin beta1 Human genes 0.000 description 2
- 108010022222 Integrin beta1 Proteins 0.000 description 2
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 2
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 239000012480 LAL reagent Substances 0.000 description 2
- 208000032004 Large-Cell Anaplastic Lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 108010010995 MART-1 Antigen Proteins 0.000 description 2
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 description 2
- 102100027252 Melanoma-associated antigen C2 Human genes 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 102100025725 Mothers against decapentaplegic homolog 4 Human genes 0.000 description 2
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700019961 Neoplasm Genes Proteins 0.000 description 2
- 102000048850 Neoplasm Genes Human genes 0.000 description 2
- 108010016076 Octreotide Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 241000721454 Pemphigus Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N Propyl gallate Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 2
- VYGQUTWHTHXGQB-FFHKNEKCSA-N Retinol Palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C VYGQUTWHTHXGQB-FFHKNEKCSA-N 0.000 description 2
- YJDYDFNKCBANTM-QCWCSKBGSA-N SDZ PSC 833 Chemical compound C\C=C\C[C@@H](C)C(=O)[C@@H]1N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC1=O YJDYDFNKCBANTM-QCWCSKBGSA-N 0.000 description 2
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 2
- 208000024799 Thyroid disease Diseases 0.000 description 2
- 101150063325 ab gene Proteins 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical class OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 2
- 229950010817 alvocidib Drugs 0.000 description 2
- BIIVYFLTOXDAOV-YVEFUNNKSA-N alvocidib Chemical compound O[C@@H]1CN(C)CC[C@@H]1C1=C(O)C=C(O)C2=C1OC(C=1C(=CC=CC=1)Cl)=CC2=O BIIVYFLTOXDAOV-YVEFUNNKSA-N 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 2
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 2
- 230000009831 antigen interaction Effects 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003080 antimitotic agent Substances 0.000 description 2
- NMYKBZSMOUFOJV-FJSWQEPZSA-N aprinocarsen Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)CO)[C@@H](OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)C1 NMYKBZSMOUFOJV-FJSWQEPZSA-N 0.000 description 2
- FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N aspergillomarasmine B Natural products OC(=O)CNC(C(O)=O)CNC(C(O)=O)CC(O)=O FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 2
- 229940120638 avastin Drugs 0.000 description 2
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 2
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 2
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- WNRZHQBJSXRYJK-UHFFFAOYSA-N carboxyamidotriazole Chemical compound NC1=C(C(=O)N)N=NN1CC(C=C1Cl)=CC(Cl)=C1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 WNRZHQBJSXRYJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 2
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- LGZKGOGODCLQHG-UHFFFAOYSA-N combretastatin Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1CC(O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 LGZKGOGODCLQHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 2
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- 239000003255 cyclooxygenase 2 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 2
- 230000002074 deregulated effect Effects 0.000 description 2
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 2
- 239000003118 drug derivative Substances 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 229940082789 erbitux Drugs 0.000 description 2
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 2
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 2
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 2
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 2
- 238000013537 high throughput screening Methods 0.000 description 2
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 229960002411 imatinib Drugs 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002647 laser therapy Methods 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 2
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 2
- 108010059074 monomethylauristatin F Proteins 0.000 description 2
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 2
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 2
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 2
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 2
- 229960000435 oblimersen Drugs 0.000 description 2
- MIMNFCVQODTQDP-NDLVEFNKSA-N oblimersen Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(S)(=O)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)CO)[C@@H](O)C1 MIMNFCVQODTQDP-NDLVEFNKSA-N 0.000 description 2
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 2
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 2
- 230000000174 oncolytic effect Effects 0.000 description 2
- 244000309459 oncolytic virus Species 0.000 description 2
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 2
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 2
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 2
- 229960001972 panitumumab Drugs 0.000 description 2
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 description 2
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 2
- 239000000941 radioactive substance Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 238000002702 ribosome display Methods 0.000 description 2
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- CGPUWJWCVCFERF-UHFFFAOYSA-N staurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(OC)O1 CGPUWJWCVCFERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 2
- 208000008732 thymoma Diseases 0.000 description 2
- 208000021510 thyroid gland disease Diseases 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 2
- 229950010938 valspodar Drugs 0.000 description 2
- 108010082372 valspodar Proteins 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 229950000815 veltuzumab Drugs 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIJRTFXNRTXDIP-UHFFFAOYSA-N (1-carboxy-2-sulfanylethyl)azanium;chloride;hydrate Chemical compound O.Cl.SCC(N)C(O)=O QIJRTFXNRTXDIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-n-[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-n,3-dimethylbutanamide Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N 0.000 description 1
- BEJKOYIMCGMNRB-GRHHLOCNSA-N (2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid;(2s)-2-amino-3-phenylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 BEJKOYIMCGMNRB-GRHHLOCNSA-N 0.000 description 1
- GTXSRFUZSLTDFX-HRCADAONSA-N (2s)-n-[(2s)-3,3-dimethyl-1-(methylamino)-1-oxobutan-2-yl]-4-methyl-2-[[(2s)-2-sulfanyl-4-(3,4,4-trimethyl-2,5-dioxoimidazolidin-1-yl)butanoyl]amino]pentanamide Chemical compound CNC(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](S)CCN1C(=O)N(C)C(C)(C)C1=O GTXSRFUZSLTDFX-HRCADAONSA-N 0.000 description 1
- LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-5-amino-2-(aminomethyl)-6-[(2r,3s,4r,5s)-5-[(1r,2r,3s,5r,6s)-3,5-diamino-2-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-amino-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-hydroxycyclohexyl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl]oxyoxane-3,4-diol;sulfuric ac Chemical compound OS(O)(=O)=O.N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N 0.000 description 1
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- BQQGAGGSEMLWRS-UHFFFAOYSA-N (4-aminophenyl)methyl carbamate Chemical compound NC(=O)OCC1=CC=C(N)C=C1 BQQGAGGSEMLWRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N (7r)-7-[[(2z)-2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)-2-(2,2-dimethylpropanoyloxymethoxyimino)acetyl]amino]-3-ethenyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound N([C@@H]1C(N2C(=C(C=C)CSC21)C(O)=O)=O)C(=O)\C(=N/OCOC(=O)C(C)(C)C)C1=CSC(N)=N1 HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N (R)-alpha-Tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 10043-66-0 Chemical compound [131I][131I] PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 0.000 description 1
- BFPYWIDHMRZLRN-UHFFFAOYSA-N 17alpha-ethynyl estradiol Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)(O)C#C)C4C3CCC2=C1 BFPYWIDHMRZLRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CQYYGCVORGQMEQ-UHFFFAOYSA-N 2,5-dioxopyrrolidine-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)N1C(=O)CCC1=O CQYYGCVORGQMEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCC(O)=O IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DJQYYYCQOZMCRC-UHFFFAOYSA-N 2-aminopropane-1,3-dithiol Chemical group SCC(N)CS DJQYYYCQOZMCRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PBSPQZHJEDTHTL-UHFFFAOYSA-N 2-benzoylpentanoic acid Chemical compound CCCC(C(O)=O)C(=O)C1=CC=CC=C1 PBSPQZHJEDTHTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CQOQDQWUFQDJMK-SSTWWWIQSA-N 2-methoxy-17beta-estradiol Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H](O)CC[C@H]3[C@@H]1CCC1=C2C=C(OC)C(O)=C1 CQOQDQWUFQDJMK-SSTWWWIQSA-N 0.000 description 1
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OBKXEAXTFZPCHS-UHFFFAOYSA-N 4-phenylbutyric acid Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=CC=C1 OBKXEAXTFZPCHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMKPVDQDJQWBPD-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-7-[2-(4-morpholinyl)ethylamino]quinoline-5,8-dione Chemical compound O=C1C2=NC=CC=C2C(=O)C(Cl)=C1NCCN1CCOCC1 BMKPVDQDJQWBPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CJIJXIFQYOPWTF-UHFFFAOYSA-N 7-hydroxycoumarin Natural products O1C(=O)C=CC2=CC(O)=CC=C21 CJIJXIFQYOPWTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000005020 Acaciella glauca Species 0.000 description 1
- 102000012440 Acetylcholinesterase Human genes 0.000 description 1
- 108010022752 Acetylcholinesterase Proteins 0.000 description 1
- 208000026872 Addison Disease Diseases 0.000 description 1
- 108010025188 Alcohol oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 102100035248 Alpha-(1,3)-fucosyltransferase 4 Human genes 0.000 description 1
- 206010001889 Alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 206010002412 Angiocentric lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 102100022987 Angiogenin Human genes 0.000 description 1
- 108010048154 Angiopoietin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100034594 Angiopoietin-1 Human genes 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 1
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- BFYIZQONLCFLEV-DAELLWKTSA-N Aromasine Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC(=C)C2=C1 BFYIZQONLCFLEV-DAELLWKTSA-N 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003571 Astrocytoma Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 102100035526 B melanoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000028564 B-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000032800 BCR-ABL1 positive blast phase chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- PGFQXGLPJUCTOI-WYMLVPIESA-N BIBR-1532 Chemical compound C=1C=C2C=CC=CC2=CC=1C(/C)=C/C(=O)NC1=CC=CC=C1C(O)=O PGFQXGLPJUCTOI-WYMLVPIESA-N 0.000 description 1
- 102000036365 BRCA1 Human genes 0.000 description 1
- 108700020463 BRCA1 Proteins 0.000 description 1
- 101150072950 BRCA1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000052609 BRCA2 Human genes 0.000 description 1
- 108700020462 BRCA2 Proteins 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100037086 Bone marrow stromal antigen 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101150008921 Brca2 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000033386 Buerger disease Diseases 0.000 description 1
- 108010037003 Buserelin Proteins 0.000 description 1
- 102100032366 C-C motif chemokine 7 Human genes 0.000 description 1
- 101710155834 C-C motif chemokine 7 Proteins 0.000 description 1
- 102100028989 C-X-C chemokine receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 description 1
- 101710098275 C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 1
- 102100036170 C-X-C motif chemokine 9 Human genes 0.000 description 1
- 101710085500 C-X-C motif chemokine 9 Proteins 0.000 description 1
- 102100024217 CAMPATH-1 antigen Human genes 0.000 description 1
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010065524 CD52 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 108091007914 CDKs Proteins 0.000 description 1
- WBLQOEONNIZSFM-UHFFFAOYSA-N CS(=N)=O Chemical compound CS(=N)=O WBLQOEONNIZSFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 101001082567 Caenorhabditis elegans Hypoxia-inducible factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101100191768 Caenorhabditis elegans pbs-4 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 101800000626 Canstatin Proteins 0.000 description 1
- 102400000730 Canstatin Human genes 0.000 description 1
- 241001214176 Capros Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 1
- 102000004225 Cathepsin B Human genes 0.000 description 1
- 102000003908 Cathepsin D Human genes 0.000 description 1
- 108090000258 Cathepsin D Proteins 0.000 description 1
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 description 1
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 description 1
- ZEOWTGPWHLSLOG-UHFFFAOYSA-N Cc1ccc(cc1-c1ccc2c(n[nH]c2c1)-c1cnn(c1)C1CC1)C(=O)Nc1cccc(c1)C(F)(F)F Chemical compound Cc1ccc(cc1-c1ccc2c(n[nH]c2c1)-c1cnn(c1)C1CC1)C(=O)Nc1cccc(c1)C(F)(F)F ZEOWTGPWHLSLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108050004290 Cecropin Proteins 0.000 description 1
- 229940123587 Cell cycle inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010008951 Chemokine CXCL12 Proteins 0.000 description 1
- 102000006573 Chemokine CXCL12 Human genes 0.000 description 1
- 241000256135 Chironomus thummi Species 0.000 description 1
- 102100034229 Citramalyl-CoA lyase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102100032887 Clusterin Human genes 0.000 description 1
- 108090000197 Clusterin Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 206010052360 Colorectal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010069112 Complement System Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000000989 Complement System Proteins Human genes 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 241000724252 Cucumber mosaic virus Species 0.000 description 1
- 108010058546 Cyclin D1 Proteins 0.000 description 1
- 102000003903 Cyclin-dependent kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000266 Cyclin-dependent kinases Proteins 0.000 description 1
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 1
- KSMSFCBQBQPFAD-GUBZILKMSA-N Cys-Pro-Pro Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 KSMSFCBQBQPFAD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 108010076525 DNA Repair Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000011724 DNA Repair Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 102100034157 DNA mismatch repair protein Msh2 Human genes 0.000 description 1
- 230000033616 DNA repair Effects 0.000 description 1
- 101100481408 Danio rerio tie2 gene Proteins 0.000 description 1
- XPDXVDYUQZHFPV-UHFFFAOYSA-N Dansyl Chloride Chemical compound C1=CC=C2C(N(C)C)=CC=CC2=C1S(Cl)(=O)=O XPDXVDYUQZHFPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- ZQZFYGIXNQKOAV-OCEACIFDSA-N Droloxifene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=C(O)C=CC=1)\C1=CC=C(OCCN(C)C)C=C1 ZQZFYGIXNQKOAV-OCEACIFDSA-N 0.000 description 1
- 101100012887 Drosophila melanogaster btl gene Proteins 0.000 description 1
- 101100012878 Drosophila melanogaster htl gene Proteins 0.000 description 1
- 208000005171 Dysmenorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 101150084967 EPCAM gene Proteins 0.000 description 1
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000005431 Endometrioid Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102400001047 Endostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010079505 Endostatins Proteins 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N Epirubicin Natural products COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4CC(O)(CC(OC5CC(N)C(=O)C(C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000018651 Epithelial Cell Adhesion Molecule Human genes 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 206010015226 Erythema nodosum Diseases 0.000 description 1
- 101001056496 Escherichia coli (strain K12) Enterobactin exporter EntS Proteins 0.000 description 1
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 1
- BFPYWIDHMRZLRN-SLHNCBLASA-N Ethinyl estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BFPYWIDHMRZLRN-SLHNCBLASA-N 0.000 description 1
- HKVAMNSJSFKALM-GKUWKFKPSA-N Everolimus Chemical compound C1C[C@@H](OCCO)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 HKVAMNSJSFKALM-GKUWKFKPSA-N 0.000 description 1
- 101150009958 FLT4 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010008177 Fd immunoglobulins Proteins 0.000 description 1
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100023593 Fibroblast growth factor receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710182386 Fibroblast growth factor receptor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100023600 Fibroblast growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710182389 Fibroblast growth factor receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100027842 Fibroblast growth factor receptor 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710182396 Fibroblast growth factor receptor 3 Proteins 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- VWUXBMIQPBEWFH-WCCTWKNTSA-N Fulvestrant Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3[C@H](CCCCCCCCCS(=O)CCCC(F)(F)C(F)(F)F)CC2=C1 VWUXBMIQPBEWFH-WCCTWKNTSA-N 0.000 description 1
- 102100024165 G1/S-specific cyclin-D1 Human genes 0.000 description 1
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 description 1
- 208000007465 Giant cell arteritis Diseases 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 201000010915 Glioblastoma multiforme Diseases 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 206010018372 Glomerulonephritis membranous Diseases 0.000 description 1
- VSRCAOIHMGCIJK-SRVKXCTJSA-N Glu-Leu-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O VSRCAOIHMGCIJK-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 1
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 108010069236 Goserelin Proteins 0.000 description 1
- BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N Goserelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](COC(C)(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NNC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 206010072579 Granulomatosis with polyangiitis Diseases 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010091938 HLA-B7 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102100029100 Hematopoietic prostaglandin D synthase Human genes 0.000 description 1
- 201000004331 Henoch-Schoenlein purpura Diseases 0.000 description 1
- 206010019617 Henoch-Schonlein purpura Diseases 0.000 description 1
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 101001022185 Homo sapiens Alpha-(1,3)-fucosyltransferase 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000874316 Homo sapiens B melanoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000740785 Homo sapiens Bone marrow stromal antigen 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 101001134036 Homo sapiens DNA mismatch repair protein Msh2 Proteins 0.000 description 1
- 101000913074 Homo sapiens High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 description 1
- 101000878602 Homo sapiens Immunoglobulin alpha Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001037143 Homo sapiens Immunoglobulin heavy variable 3-33 Proteins 0.000 description 1
- 101000606465 Homo sapiens Inactive tyrosine-protein kinase 7 Proteins 0.000 description 1
- 101000599852 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000959820 Homo sapiens Interferon alpha-1/13 Proteins 0.000 description 1
- 101000599048 Homo sapiens Interleukin-6 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101000777628 Homo sapiens Leukocyte antigen CD37 Proteins 0.000 description 1
- 101000917826 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Proteins 0.000 description 1
- 101000917824 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Proteins 0.000 description 1
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 1
- 101001063392 Homo sapiens Lymphocyte function-associated antigen 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000578784 Homo sapiens Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001036689 Homo sapiens Melanoma-associated antigen B5 Proteins 0.000 description 1
- 101001036675 Homo sapiens Melanoma-associated antigen B6 Proteins 0.000 description 1
- 101001057159 Homo sapiens Melanoma-associated antigen C3 Proteins 0.000 description 1
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 1
- 101000835893 Homo sapiens Mothers against decapentaplegic homolog 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 1
- 101000904173 Homo sapiens Progonadoliberin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001051777 Homo sapiens Protein kinase C alpha type Proteins 0.000 description 1
- 101001062222 Homo sapiens Receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells Proteins 0.000 description 1
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 1
- 101000742859 Homo sapiens Retinoblastoma-associated protein Proteins 0.000 description 1
- 101000821981 Homo sapiens Sarcoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000980827 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD1a Proteins 0.000 description 1
- 101000716149 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD1b Proteins 0.000 description 1
- 101000716124 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD1c Proteins 0.000 description 1
- 101000934341 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD5 Proteins 0.000 description 1
- 101000648075 Homo sapiens Trafficking protein particle complex subunit 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 1
- 206010020631 Hypergammaglobulinaemia benign monoclonal Diseases 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJKOTMDDZAJTGQ-DQSJHHFOSA-N Idoxifene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN2CCCC2)=CC=1)/C1=CC=C(I)C=C1 JJKOTMDDZAJTGQ-DQSJHHFOSA-N 0.000 description 1
- 208000031814 IgA Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 108010073816 IgE Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009438 IgE Receptors Human genes 0.000 description 1
- 101150106555 Il24 gene Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102100038005 Immunoglobulin alpha Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 102100040236 Immunoglobulin heavy variable 3-33 Human genes 0.000 description 1
- 102100039813 Inactive tyrosine-protein kinase 7 Human genes 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 102000003746 Insulin Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010001127 Insulin Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102100022337 Integrin alpha-V Human genes 0.000 description 1
- 108010041012 Integrin alpha4 Proteins 0.000 description 1
- 108010040765 Integrin alphaV Proteins 0.000 description 1
- 102000008607 Integrin beta3 Human genes 0.000 description 1
- 108010020950 Integrin beta3 Proteins 0.000 description 1
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 102000051628 Interleukin-1 receptor antagonist Human genes 0.000 description 1
- 108700021006 Interleukin-1 receptor antagonist Proteins 0.000 description 1
- 102000004556 Interleukin-15 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010017535 Interleukin-15 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100036671 Interleukin-24 Human genes 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108010018951 Interleukin-8B Receptors Proteins 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N Iodine-123 Chemical compound [123I] ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N Jacareubin Natural products CC1(C)OC2=CC3Oc4c(O)c(O)ccc4C(=O)C3C(=C2C=C1)O UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N L-ascorbyl-6-palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N 0.000 description 1
- 239000011786 L-ascorbyl-6-palmitate Substances 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000005411 L01XE02 - Gefitinib Substances 0.000 description 1
- 239000005551 L01XE03 - Erlotinib Substances 0.000 description 1
- 239000002136 L01XE07 - Lapatinib Substances 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- 235000003228 Lactuca sativa Nutrition 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031586 Leukocyte antigen CD37 Human genes 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 208000022435 Light chain deposition disease Diseases 0.000 description 1
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 description 1
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 1
- 102100030984 Lymphocyte function-associated antigen 3 Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 102000016200 MART-1 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 229910015837 MSH2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 101800004761 Magainin-2 Proteins 0.000 description 1
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102100022430 Melanocyte protein PMEL Human genes 0.000 description 1
- 108050008953 Melanoma-associated antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000000440 Melanoma-associated antigen Human genes 0.000 description 1
- 102100039475 Melanoma-associated antigen B5 Human genes 0.000 description 1
- 102100039483 Melanoma-associated antigen B6 Human genes 0.000 description 1
- 102100027248 Melanoma-associated antigen C3 Human genes 0.000 description 1
- 108010036176 Melitten Proteins 0.000 description 1
- 241001436793 Meru Species 0.000 description 1
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000004909 Moisturizer Substances 0.000 description 1
- 241000237852 Mollusca Species 0.000 description 1
- 206010060880 Monoclonal gammopathy Diseases 0.000 description 1
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 1
- 101710143112 Mothers against decapentaplegic homolog 4 Proteins 0.000 description 1
- 241000713333 Mouse mammary tumor virus Species 0.000 description 1
- 102100023123 Mucin-16 Human genes 0.000 description 1
- 108010063954 Mucins Proteins 0.000 description 1
- 102000015728 Mucins Human genes 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 101100335081 Mus musculus Flt3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100481410 Mus musculus Tek gene Proteins 0.000 description 1
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 1
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 1
- 102100029166 NT-3 growth factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 101150117329 NTRK3 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091061960 Naked DNA Proteins 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003788 Neoplasm Micrometastasis Diseases 0.000 description 1
- 108700001237 Nucleic Acid-Based Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 101710149892 Nucleoside diphosphate kinase B Proteins 0.000 description 1
- MSHZHSPISPJWHW-UHFFFAOYSA-N O-(chloroacetylcarbamoyl)fumagillol Chemical compound O1C(CC=C(C)C)C1(C)C1C(OC)C(OC(=O)NC(=O)CCl)CCC21CO2 MSHZHSPISPJWHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000702244 Orthoreovirus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102100034640 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Human genes 0.000 description 1
- 108050007154 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Proteins 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 208000002774 Paraproteinemias Diseases 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000000447 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Human genes 0.000 description 1
- 108010055817 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 208000027190 Peripheral T-cell lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 229940049937 Pgp inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 1
- 102000001393 Platelet-Derived Growth Factor alpha Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010068588 Platelet-Derived Growth Factor alpha Receptor Proteins 0.000 description 1
- 208000000474 Poliomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 102100025067 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710163352 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 4 Proteins 0.000 description 1
- 206010065857 Primary Effusion Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 102100024028 Progonadoliberin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100024924 Protein kinase C alpha type Human genes 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 108010029869 Proto-Oncogene Proteins c-raf Proteins 0.000 description 1
- 108700033844 Pseudomonas aeruginosa toxA Proteins 0.000 description 1
- 102100033479 RAF proto-oncogene serine/threonine-protein kinase Human genes 0.000 description 1
- 108091034057 RNA (poly(A)) Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102100029165 Receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells Human genes 0.000 description 1
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 1
- 108090000103 Relaxin Proteins 0.000 description 1
- 102000003743 Relaxin Human genes 0.000 description 1
- 241001068295 Replication defective viruses Species 0.000 description 1
- 102100038042 Retinoblastoma-associated protein Human genes 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 102100021466 Sarcoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000239226 Scorpiones Species 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- UIRKNQLZZXALBI-MSVGPLKSSA-N Squalamine Chemical compound C([C@@H]1C[C@H]2O)[C@@H](NCCCNCCCCN)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CC[C@H](C(C)C)OS(O)(=O)=O)[C@@]2(C)CC1 UIRKNQLZZXALBI-MSVGPLKSSA-N 0.000 description 1
- UIRKNQLZZXALBI-UHFFFAOYSA-N Squalamine Natural products OC1CC2CC(NCCCNCCCCN)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(C(C)C)OS(O)(=O)=O)C1(C)CC2 UIRKNQLZZXALBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 1
- 101000996723 Sus scrofa Gonadotropin-releasing hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000031672 T-Cell Peripheral Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102100027208 T-cell antigen CD7 Human genes 0.000 description 1
- 102100024219 T-cell surface glycoprotein CD1a Human genes 0.000 description 1
- 102100025244 T-cell surface glycoprotein CD5 Human genes 0.000 description 1
- 101150057140 TACSTD1 gene Proteins 0.000 description 1
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010000449 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000002259 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Receptors Human genes 0.000 description 1
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 description 1
- 208000001106 Takayasu Arteritis Diseases 0.000 description 1
- JXAGDPXECXQWBC-LJQANCHMSA-N Tanomastat Chemical compound C([C@H](C(=O)O)CC(=O)C=1C=CC(=CC=1)C=1C=CC(Cl)=CC=1)SC1=CC=CC=C1 JXAGDPXECXQWBC-LJQANCHMSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 1
- GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N Technetium-99 Chemical compound [99Tc] GKLVYJBZJHMRIY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 108010017842 Telomerase Proteins 0.000 description 1
- BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N Temozolomide Chemical compound O=C1N(C)N=NC2=C(C(N)=O)N=CN21 BPEGJWRSRHCHSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100038126 Tenascin Human genes 0.000 description 1
- 108010008125 Tenascin Proteins 0.000 description 1
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 206010043540 Thromboangiitis obliterans Diseases 0.000 description 1
- 108060008245 Thrombospondin Proteins 0.000 description 1
- 102000002938 Thrombospondin Human genes 0.000 description 1
- 201000009365 Thymic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 101800001703 Thymopentin Proteins 0.000 description 1
- 102400000160 Thymopentin Human genes 0.000 description 1
- 101800001530 Thymosin alpha Proteins 0.000 description 1
- 102100025256 Trafficking protein particle complex subunit 1 Human genes 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 102100022153 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710165473 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- 102400000731 Tumstatin Human genes 0.000 description 1
- 102100039094 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010053099 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000016663 Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-3 Human genes 0.000 description 1
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N WHWLQLKPGQPMY Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N 0.000 description 1
- 208000016025 Waldenstroem macroglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- 208000033559 Waldenström macroglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- OUUYBRCCFUEMLH-YDALLXLXSA-N [(1s)-2-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]-1-carboxyethyl]azanium;chloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 OUUYBRCCFUEMLH-YDALLXLXSA-N 0.000 description 1
- NLMBVBUNULOTNS-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2s)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2s)-2-[6-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl n-[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-o Chemical compound C1([C@H](O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)[C@@H](OC)[C@@H]2CCCN2C(=O)C[C@H]([C@H]([C@@H](C)CC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCC=2C=CC(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN3C(C=CC3=O)=O)C(C)C)=CC=2)C(C)C)OC)=CC=CC=C1 NLMBVBUNULOTNS-HOKPPMCLSA-N 0.000 description 1
- 150000007960 acetonitrile Chemical class 0.000 description 1
- 229940022698 acetylcholinesterase Drugs 0.000 description 1
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002160 alpha blocker Substances 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229940124308 alpha-adrenoreceptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- LXQXZNRPTYVCNG-YPZZEJLDSA-N americium-241 Chemical compound [241Am] LXQXZNRPTYVCNG-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 229960003437 aminoglutethimide Drugs 0.000 description 1
- ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N aminoglutethimide Chemical compound C=1C=C(N)C=CC=1C1(CC)CCC(=O)NC1=O ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012197 amplification kit Methods 0.000 description 1
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229960004238 anakinra Drugs 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 206010002224 anaplastic astrocytoma Diseases 0.000 description 1
- YBBLVLTVTVSKRW-UHFFFAOYSA-N anastrozole Chemical compound N#CC(C)(C)C1=CC(C(C)(C#N)C)=CC(CN2N=CN=C2)=C1 YBBLVLTVTVSKRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002616 ancestim Drugs 0.000 description 1
- 108700024685 ancestim Proteins 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 1
- 229940121369 angiogenesis inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010072788 angiogenin Proteins 0.000 description 1
- 206010002449 angioimmunoblastic T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 235000020244 animal milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003356 anti-rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 229940030495 antiandrogen sex hormone and modulator of the genital system Drugs 0.000 description 1
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003430 antimalarial agent Substances 0.000 description 1
- 239000003435 antirheumatic agent Substances 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 210000000702 aorta abdominal Anatomy 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005775 apoptotic pathway Effects 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 229940078010 arimidex Drugs 0.000 description 1
- 239000003886 aromatase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940046844 aromatase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010385 ascorbyl palmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000305 astragalus gummifer gum Substances 0.000 description 1
- MOTJMGVDPWRKOC-QPVYNBJUSA-N atrasentan Chemical compound C1([C@H]2[C@@H]([C@H](CN2CC(=O)N(CCCC)CCCC)C=2C=C3OCOC3=CC=2)C(O)=O)=CC=C(OC)C=C1 MOTJMGVDPWRKOC-QPVYNBJUSA-N 0.000 description 1
- 229940037642 autologous vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 1
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003139 biocide Substances 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000003181 biological factor Substances 0.000 description 1
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 1
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 1
- 229950010231 brequinar Drugs 0.000 description 1
- PHEZJEYUWHETKO-UHFFFAOYSA-N brequinar Chemical compound N1=C2C=CC(F)=CC2=C(C(O)=O)C(C)=C1C(C=C1)=CC=C1C1=CC=CC=C1F PHEZJEYUWHETKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CUWODFFVMXJOKD-UVLQAERKSA-N buserelin Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](COC(C)(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 CUWODFFVMXJOKD-UVLQAERKSA-N 0.000 description 1
- 229960002719 buserelin Drugs 0.000 description 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229940046731 calcineurin inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N captopril Chemical compound SC[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N 0.000 description 1
- 229960000830 captopril Drugs 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 229960000590 celecoxib Drugs 0.000 description 1
- RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N celecoxib Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=CC(C(F)(F)F)=NN1C1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-RNFDNDRNSA-N cesium-137 Chemical compound [137Cs] TVFDJXOCXUVLDH-RNFDNDRNSA-N 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000025302 chronic primary adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- 208000009060 clear cell adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012761 co-transfection Methods 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-YPZZEJLDSA-N cobalt-57 Chemical compound [57Co] GUTLYIVDDKVIGB-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002967 competitive immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002247 constant time method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-AKLPVKDBSA-N copper-67 Chemical compound [67Cu] RYGMFSIKBFXOCR-AKLPVKDBSA-N 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 229940111134 coxibs Drugs 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 1
- 150000003983 crown ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000000392 cycloalkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001305 cysteine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 1
- 210000005220 cytoplasmic tail Anatomy 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 229960004969 dalteparin Drugs 0.000 description 1
- 229960002204 daratumumab Drugs 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- CEJLBZWIKQJOAT-UHFFFAOYSA-N dichloroisocyanuric acid Chemical compound ClN1C(=O)NC(=O)N(Cl)C1=O CEJLBZWIKQJOAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001259 diclofenac Drugs 0.000 description 1
- DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N diclofenac Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGLYKWWBQGJZGM-ISLYRVAYSA-N diethylstilbestrol Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(/CC)=C(\CC)C1=CC=C(O)C=C1 RGLYKWWBQGJZGM-ISLYRVAYSA-N 0.000 description 1
- 229960000452 diethylstilbestrol Drugs 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- 229950004203 droloxifene Drugs 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 229960000284 efalizumab Drugs 0.000 description 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 1
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 201000003908 endometrial adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000028730 endometrioid adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000010595 endothelial cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 208000037902 enteropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 description 1
- AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N erlotinib Chemical compound C=12C=C(OCCOC)C(OCCOC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=CC(C#C)=C1 AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960001842 estramustine Drugs 0.000 description 1
- FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N estramustine Chemical compound ClCCN(CCCl)C(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N 0.000 description 1
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- 229960002568 ethinylestradiol Drugs 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229960005167 everolimus Drugs 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 229960000255 exemestane Drugs 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011347 external beam therapy Methods 0.000 description 1
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 description 1
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 229960000556 fingolimod Drugs 0.000 description 1
- KKGQTZUTZRNORY-UHFFFAOYSA-N fingolimod Chemical compound CCCCCCCCC1=CC=C(CCC(N)(CO)CO)C=C1 KKGQTZUTZRNORY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004992 fission Effects 0.000 description 1
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 1
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229960002258 fulvestrant Drugs 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 229940084434 fungoid Drugs 0.000 description 1
- 230000005251 gamma ray Effects 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N gefitinib Chemical compound C=12C=C(OCCCN3CCOCC3)C(OC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=C(F)C(Cl)=C1 XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 1
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001280 germinal center Anatomy 0.000 description 1
- 229940080856 gleevec Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229940074045 glyceryl distearate Drugs 0.000 description 1
- 229940075507 glyceryl monostearate Drugs 0.000 description 1
- 239000002748 glycoprotein P inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical group 0.000 description 1
- 150000002343 gold Chemical class 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-OUBTZVSYSA-N gold-198 Chemical compound [198Au] PCHJSUWPFVWCPO-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N gonadorelin Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002913 goserelin Drugs 0.000 description 1
- 239000003966 growth inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003481 heat shock protein 90 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 208000025750 heavy chain disease Diseases 0.000 description 1
- 208000019691 hematopoietic and lymphoid cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000002628 heparin derivative Substances 0.000 description 1
- 108010083213 heparitinsulfate lyase Proteins 0.000 description 1
- 206010066957 hepatosplenic T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 229940121372 histone deacetylase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000003276 histone deacetylase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 239000003652 hormone inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940048921 humira Drugs 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004171 hydroxychloroquine Drugs 0.000 description 1
- XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N hydroxychloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CCO)CC)=CC=NC2=C1 XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022098 hypersensitivity pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 229950002248 idoxifene Drugs 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- YLMAHDNUQAMNNX-UHFFFAOYSA-N imatinib methanesulfonate Chemical compound CS(O)(=O)=O.C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 YLMAHDNUQAMNNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 208000015446 immunoglobulin a vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 1
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 102000028416 insulin-like growth factor binding Human genes 0.000 description 1
- 108091022911 insulin-like growth factor binding Proteins 0.000 description 1
- 108040006870 interleukin-10 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 108040002039 interleukin-15 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008616 interleukin-15 receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007916 intrasternal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 229940084651 iressa Drugs 0.000 description 1
- GKOZUEZYRPOHIO-IGMARMGPSA-N iridium-192 Chemical compound [192Ir] GKOZUEZYRPOHIO-IGMARMGPSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 229960005280 isotretinoin Drugs 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-XFYACQKRSA-N isotretinoin Chemical compound OC(=O)/C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-XFYACQKRSA-N 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000991 ketoprofen Drugs 0.000 description 1
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N lapatinib Chemical compound O1C(CNCCS(=O)(=O)C)=CC=C1C1=CC=C(N=CN=C2NC=3C=C(Cl)C(OCC=4C=C(F)C=CC=4)=CC=3)C2=C1 BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004891 lapatinib Drugs 0.000 description 1
- 229960000681 leflunomide Drugs 0.000 description 1
- VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N leflunomide Chemical compound O1N=CC(C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)C(F)(F)F)=C1C VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- DHMTURDWPRKSOA-RUZDIDTESA-N lonafarnib Chemical compound C1CN(C(=O)N)CCC1CC(=O)N1CCC([C@@H]2C3=C(Br)C=C(Cl)C=C3CCC3=CC(Br)=CN=C32)CC1 DHMTURDWPRKSOA-RUZDIDTESA-N 0.000 description 1
- 229940076783 lucentis Drugs 0.000 description 1
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 208000006116 lymphomatoid granulomatosis Diseases 0.000 description 1
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 1
- MGIUUAHJVPPFEV-ABXDCCGRSA-N magainin ii Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MGIUUAHJVPPFEV-ABXDCCGRSA-N 0.000 description 1
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 229950008959 marimastat Drugs 0.000 description 1
- OCSMOTCMPXTDND-OUAUKWLOSA-N marimastat Chemical compound CNC(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)[C@H](O)C(=O)NO OCSMOTCMPXTDND-OUAUKWLOSA-N 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 208000020968 mature T-cell and NK-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- VDXZNPDIRNWWCW-UHFFFAOYSA-N melitten Chemical compound NCC(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NCC(=O)NC(C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NCC(=O)NC(CC(C)C)C(=O)N1CCCC1C(=O)NC(C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(N)=O)CC1=CNC2=CC=CC=C12 VDXZNPDIRNWWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002514 melphalan hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 201000008350 membranous glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 231100000855 membranous nephropathy Toxicity 0.000 description 1
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 description 1
- 239000003475 metalloproteinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000012737 microarray-based gene expression Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000008880 microtubule cytoskeleton organization Effects 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 229950003734 milatuzumab Drugs 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000026326 mitochondrial transport Effects 0.000 description 1
- 229950003063 mitumomab Drugs 0.000 description 1
- 230000001333 moisturizer Effects 0.000 description 1
- 201000005328 monoclonal gammopathy of uncertain significance Diseases 0.000 description 1
- DASWEROEPLKSEI-UIJRFTGLSA-N monomethyl auristatin e Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 DASWEROEPLKSEI-UIJRFTGLSA-N 0.000 description 1
- MFRNYXJJRJQHNW-NARUGQRUSA-N monomethyl auristatin f Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)C([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-NARUGQRUSA-N 0.000 description 1
- 238000012243 multiplex automated genomic engineering Methods 0.000 description 1
- 229960004866 mycophenolate mofetil Drugs 0.000 description 1
- RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N mycophenolate mofetil Chemical compound COC1=C(C)C=2COC(=O)C=2C(O)=C1C\C=C(/C)CCC(=O)OCCN1CCOCC1 RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N 0.000 description 1
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 1
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940022007 naked DNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229960005027 natalizumab Drugs 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004848 nephelometry Methods 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 208000007538 neurilemmoma Diseases 0.000 description 1
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 1
- 229950010203 nimotuzumab Drugs 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002687 nonaqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 238000011330 nucleic acid test Methods 0.000 description 1
- 229940023146 nucleic acid vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000030648 nucleus localization Effects 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 229960002700 octreotide Drugs 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- 229960002739 oxaprozin Drugs 0.000 description 1
- OFPXSFXSNFPTHF-UHFFFAOYSA-N oxaprozin Chemical compound O1C(CCC(=O)O)=NC(C=2C=CC=CC=2)=C1C1=CC=CC=C1 OFPXSFXSNFPTHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229960002566 papillomavirus vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 229960001639 penicillamine Drugs 0.000 description 1
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940043138 pentosan polysulfate Drugs 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- RLZZZVKAURTHCP-UHFFFAOYSA-N phenanthrene-3,4-diol Chemical compound C1=CC=C2C3=C(O)C(O)=CC=C3C=CC2=C1 RLZZZVKAURTHCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950009215 phenylbutanoic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229960002702 piroxicam Drugs 0.000 description 1
- QYSPLQLAKJAUJT-UHFFFAOYSA-N piroxicam Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 QYSPLQLAKJAUJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 239000002797 plasminogen activator inhibitor Substances 0.000 description 1
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Substances [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 201000006292 polyarteritis nodosa Diseases 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 229950003608 prinomastat Drugs 0.000 description 1
- YKPYIPVDTNNYCN-INIZCTEOSA-N prinomastat Chemical compound ONC(=O)[C@H]1C(C)(C)SCCN1S(=O)(=O)C(C=C1)=CC=C1OC1=CC=NC=C1 YKPYIPVDTNNYCN-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- 239000000583 progesterone congener Substances 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000473 propyl gallate Substances 0.000 description 1
- 235000010388 propyl gallate Nutrition 0.000 description 1
- 229940075579 propyl gallate Drugs 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 230000006824 pyrimidine synthesis Effects 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 229910052705 radium Inorganic materials 0.000 description 1
- HCWPIIXVSYCSAN-UHFFFAOYSA-N radium atom Chemical compound [Ra] HCWPIIXVSYCSAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N raloxifene Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(C(=O)C=2C=CC(OCCN3CCCCC3)=CC=2)C2=CC=C(O)C=C2S1 GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004622 raloxifene Drugs 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 229960003876 ranibizumab Drugs 0.000 description 1
- 201000008158 rapidly progressive glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 235000003499 redwood Nutrition 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 229940116176 remicade Drugs 0.000 description 1
- 239000012508 resin bead Substances 0.000 description 1
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 1
- 239000011769 retinyl palmitate Substances 0.000 description 1
- 235000019172 retinyl palmitate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- RZJQGNCSTQAWON-UHFFFAOYSA-N rofecoxib Chemical compound C1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1C1=C(C=2C=CC=CC=2)C(=O)OC1 RZJQGNCSTQAWON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000371 rofecoxib Drugs 0.000 description 1
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 1
- 150000003902 salicylic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 229940072272 sandostatin Drugs 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 206010039667 schwannoma Diseases 0.000 description 1
- 238000010845 search algorithm Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- BTIHMVBBUGXLCJ-OAHLLOKOSA-N seliciclib Chemical compound C=12N=CN(C(C)C)C2=NC(N[C@@H](CO)CC)=NC=1NCC1=CC=CC=C1 BTIHMVBBUGXLCJ-OAHLLOKOSA-N 0.000 description 1
- WUWDLXZGHZSWQZ-WQLSENKSSA-N semaxanib Chemical compound N1C(C)=CC(C)=C1\C=C/1C2=CC=CC=C2NC\1=O WUWDLXZGHZSWQZ-WQLSENKSSA-N 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- LVLLALCJVJNGQQ-ZCPUWASBSA-N seocalcitol Chemical compound C1(/[C@H]2CC[C@@H]([C@@]2(CCC1)C)[C@H](C)/C=C/C=C/C(O)(CC)CC)=C/C=C1/C[C@H](O)C[C@@H](O)C1=C LVLLALCJVJNGQQ-ZCPUWASBSA-N 0.000 description 1
- 229950009921 seocalcitol Drugs 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 208000019694 serous adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000004548 serous cystadenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940115586 simulect Drugs 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229940083542 sodium Drugs 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M sodium bisulfate Chemical compound [Na+].OS([O-])(=O)=O WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000342 sodium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940100996 sodium bisulfate Drugs 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- 229940001482 sodium sulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- IGHGOYDCVRUTSU-UHFFFAOYSA-M sodium;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O IGHGOYDCVRUTSU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical class C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229940075620 somatostatin analogue Drugs 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 229950001248 squalamine Drugs 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- XXUZFRDUEGQHOV-UHFFFAOYSA-J strontium ranelate Chemical compound [Sr+2].[Sr+2].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)C=1SC(C([O-])=O)=C(CC([O-])=O)C=1C#N XXUZFRDUEGQHOV-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N sulfasalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N 0.000 description 1
- 229960001940 sulfasalazine Drugs 0.000 description 1
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N sulfasalazine Natural products C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MLKXDPUZXIRXEP-MFOYZWKCSA-N sulindac Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(F)=CC=C2\C1=C/C1=CC=C(S(C)=O)C=C1 MLKXDPUZXIRXEP-MFOYZWKCSA-N 0.000 description 1
- 229960000894 sulindac Drugs 0.000 description 1
- FIAFUQMPZJWCLV-UHFFFAOYSA-N suramin Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(S(O)(=O)=O)=C2C(NC(=O)C3=CC=C(C(=C3)NC(=O)C=3C=C(NC(=O)NC=4C=C(C=CC=4)C(=O)NC=4C(=CC=C(C=4)C(=O)NC=4C5=C(C=C(C=C5C(=CC=4)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O)S(O)(=O)=O)C)C=CC=3)C)=CC=C(S(O)(=O)=O)C2=C1 FIAFUQMPZJWCLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005314 suramin Drugs 0.000 description 1
- 230000007755 survival signaling Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 101150047061 tag-72 gene Proteins 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- AYUNIORJHRXIBJ-TXHRRWQRSA-N tanespimycin Chemical compound N1C(=O)\C(C)=C\C=C/[C@H](OC)[C@@H](OC(N)=O)\C(C)=C\[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](OC)C[C@H](C)CC2=C(NCC=C)C(=O)C=C1C2=O AYUNIORJHRXIBJ-TXHRRWQRSA-N 0.000 description 1
- 229940120982 tarceva Drugs 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960004964 temozolomide Drugs 0.000 description 1
- 206010043207 temporal arteritis Diseases 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 230000002992 thymic effect Effects 0.000 description 1
- PSWFFKRAVBDQEG-YGQNSOCVSA-N thymopentin Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PSWFFKRAVBDQEG-YGQNSOCVSA-N 0.000 description 1
- 229960004517 thymopentin Drugs 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000001196 time-of-flight mass spectrum Methods 0.000 description 1
- AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N tocofersolan Chemical compound OCCOC(=O)CCC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N topotecan Chemical compound C1=C(O)C(CN(C)C)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- 229960000303 topotecan Drugs 0.000 description 1
- XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N toremifene Chemical compound C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C(\C=1C=CC=CC=1)=C(\CCCl)C1=CC=CC=C1 XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- 229960005026 toremifene Drugs 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- 239000003744 tubulin modulator Substances 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 108010012374 type IV collagen alpha3 chain Proteins 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229940079023 tysabri Drugs 0.000 description 1
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- ORHBXUUXSCNDEV-UHFFFAOYSA-N umbelliferone Chemical compound C1=CC(=O)OC2=CC(O)=CC=C21 ORHBXUUXSCNDEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFTAFOQKODTIJY-UHFFFAOYSA-N umbelliferone Natural products Cc1cc2C=CC(=O)Oc2cc1OCC=CC(C)(C)O HFTAFOQKODTIJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- LLDWLPRYLVPDTG-UHFFFAOYSA-N vatalanib succinate Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O.C1=CC(Cl)=CC=C1NC(C1=CC=CC=C11)=NN=C1CC1=CC=NC=C1 LLDWLPRYLVPDTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 description 1
- UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N vindesine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1N=C1[C]2C=CC=C1 UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N 0.000 description 1
- GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N 0.000 description 1
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 1
- 229960004854 viral vaccine Drugs 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 229940099073 xolair Drugs 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940055760 yervoy Drugs 0.000 description 1
- 229950008250 zalutumumab Drugs 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39541—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against normal tissues, cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/162—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39566—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against immunoglobulins, e.g. anti-idiotypic antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1027—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against receptors, cell-surface antigens or cell-surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2833—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against MHC-molecules, e.g. HLA-molecules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/77—Internalization into the cell
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Oncology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к области биотехнологии. Представлены варианты антител, которые связываются с вариантами 1 и 2 CD74 человека. Представлена рекомбинантная клетка-хозяин, которая вырабатывает указанный вариант антитела. Представлены композиции для лечения и профилактики рака, содержащие указанный вариант антитела. Группа изобретений позволяет эффективно и избирательно вызывать гибель опухолевых клеток, экспрессирующих CD74, что может быть использовано при лечении раковых заболеваний. 12 н. и 43 з. п. ф-лы., 15 ил., 14 табл., 25 пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение касается специфичных к CD74 антител и их конъюгатов с лекарственными препаратами (ADCs), фармацевтических композиций таких антител или ADCs и их лечебного применения.
Уровень техники
Гамма-цепь лейкоцитарных антигенов человека (HLA) из комплекса гистосовместимости II класса, также известная как связанная с антигеном HLA-DR инвариантная цепь, связанная с антигеном Ia инвариантная цепь, Ii или CD74, представляет собой трансмембранный белок с коротким цитоплазматическим хвостом. Главной функцией CD74 является регулирование посадки пептидов на гетеродимеры главного комплекса гистосовместимости (МНС) II класса во внутриклеточных компартментах.
Лишь небольшая часть от общего содержания CD74 в клетках экспрессируется на клеточной поверхности. Находящийся на клеточной поверхности CD74 очень быстро интернализируется как с антителами к CD74, так и без них (Roche PA et al., PNAS 1993, 90:8581-8585; Hansen HJ et al., Biochem J 1996, 320:293-300; Ong GL et al., Immunology 1999, 98:296-302). Стационарный уровень CD74 на клеточной поверхности является довольно низким и колеблется у моноцитов от нескольких сотен до нескольких тысяч молекул на клетку.
Точная функция экспрессированного на клеточной поверхности CD74 не известна, но исследования показали, что CD74 является мембранным рецептором для провоспалительного цитокина - фактора, ингибирующего миграцию макрофагов (MIF). Связывание MIF с CD74 активирует нижележащую передачу сигнала через пути МАРК и Akt и способствует пролиферации и выживанию клеток. Это взаимодействие, вероятно, также регулируется наличием CD44, CXCR2 или CXCR4 в качестве корецепторов.
Усиление экспрессии CD74 наблюдалось при многих видах рака, а также при некоторых инфекциях и воспалительных заболеваниях. Для лечения положительных на CD74 опухолей предлагались различные форматы гуманизированного специфичного к CD74 моноклонального антитела - hLL1 (Chang CH et al., Blood 2005, 106:4308-4314; Sapra P et al., Clin Can Res 2005, 11:5257-5264; Stein R et al., Blood 2004, 104:3705-11; Govindan SV et al., J Nucl Med 2000, 41:2089-2097; Hertlein E et al., Blood 2010; 116:2554-2558; Stein R et al., Clin Cancer Res 2009, 15:2808-2817; Sharkey RM et al., J Nucl Med 2009, 50:444-453; Lundberg BB et al., Drug Deliv 2007, 14:171-175; Griffiths GL et al., Int J Cancer 1999, 81:985-992; Griffiths GL et al., Cancer Res 2003, 9:6567-6571; Ochakovskaya R et al., Clin Cancer Res 2001, 7:1505-1510; Shin L et al., Cancer Immunol Immunother; Burton JD et al., Clin Cancer Res 2004, 10:6606-6611; Lundberg BB et al., J Control Release 2004, 94:155-161).
Несмотря на то что уже достигнут значительный прогресс, все еще остается потребность в улучшении способов лечения серьезных заболеваний, например, улучшении лечения рака, на основе терапевтических антител и ADCs.
Сущность изобретения
Целью настоящего изобретения является получение новых высокоспецифичных и эффективных моноклональных специфичных к CD74 антител и ADCs из таких специфичных к CD74 антител. Антитела или ADCs по изобретению проявляют характеристики связывания CD74 или другие эффекты на экспрессирующие CD74 клетки, отличные от антител, описанных в данной области. В частности, антитела характеризуются быстрой интернализацией после связывания с антигеном CD74, что делает их пригодными для терапевтического применения в виде ADCs и для других применений, в которых быстрая интернализация является преимуществом. Новые ADCs характеризуются высокой эффективностью при уничтожении экспрессирующих CD74 опухолевых клеток.
Антитела и соответствующие ADCs могут быть представлены в различных форматах, включая, без ограничения, форматы фрагментов антител и биспецифических антител. В предпочтительных воплощениях антитела представляют собой человеческие антитела.
Также целью настоящего изобретения является получение ADCs на основе таких специфичных к CD74 антител для медицинского применения, обеспечивающих эффективный и избирательный способ причинения гибели опухолевых клеток.
Эти и другие аспекты настоящего изобретения описаны более подробно ниже.
Краткое описание фигур
Фиг.1. Аминокислотные последовательности рекомбинантных белков CD74, использовавшихся в примерах. CD74v1 и -v2, CD74de12-36v1 и -v2, HisCD74v1 и -v2 соответствуют SEQ ID NOs:1-6 соответственно.
Фиг.2. Совмещение последовательностей вариабельной области тяжелой (VH) и легкой (VL) цепи антител настоящего изобретения. SEQ ID NO:каждой последовательности VH/VL приведен в круглых скобках справа от последовательности. Участки, определяющие комплементарность (CDRs) по номенклатуре IMGT, выделены следующим образом: последовательности CDR1 выделены курсивом, последовательности CDR2 подчеркнуты, а последовательности CDR3 выделены жирным шрифтом.
Фиг.3. Связывание специфичных к CD74 антител с рекомбинантным белком, представляющим внеклеточный домен изоформ варианта 1 и 2 (CD74v1 и CD74v2), при определении методом ELISA. Все человеческие антитела были получены путем кратковременной котрансфекции клеток HEK-293F векторами, экспрессирующими соответствующие тяжелые и легкие цепи.
Фиг.4. Связывание специфичных к CD74 антител с клеточным CD74 на клетках Raji при определении методом FACS. Все человеческие антитела были получены путем кратковременной котрансфекции клеток HEK-293F векторами, экспрессирующими соответствующие тяжелые и легкие цепи.
Фиг.5. Перекрестная реактивность специфичных к CD74 антител с CD74 макаки яванской. Лимфатические узлы миндалин человека (верхняя панель) и яванской макаки (нижняя панель) окрашивали с помощью специфичных к CD74 антител. Зародышевый центр; Mf - макрофаги; # В-клетки области мантии.
Фиг.6. Дозозависимая индукция уничтожения клеток специфичными к CD74 антителами, предварительно проинкубированными с анти-каппа-ЕТА'. Представлен репрезентативный эксперимент. Данные представлены в виде среднего процента жизнеспособности по двойным лункам клеток, обработанных предварительно проинкубированными с анти-каппа-ЕТА' антителами HuMab к CD74. Процент жизнеспособности рассчитывали так, как описано в примере 14.
Фиг.7. Связывание антител HuMab к CD74 №005 и 006 (А) и 011 (В) и соответствующих ADCs с рекомбинантным белком внеклеточного домена CD74v1 при определении методом ELISA. Представлен один репрезентативный эксперимент.
Фиг.8. Связывание антител HuMab к CD74 №005 и 006 (А) и 011 (В) и соответствующих ADCs с экспрессированным на поверхности. CD74 при определении методом FACS на клетках Daudi. Данные представлены в виде средней интенсивности флуоресценции (MFI), рассчитанной из трех независимых экспериментов.
Фиг.9. Дозозависимая индукция уничтожения клеток специфичными к CD74 ADCs. Представлен один репрезентативный эксперимент для каждой из следующих клеточных линий: Daudi (А), Raji (В), М4А4 (С) и клетки NCI-H747 (D). Данные представлены в виде процента выживаемости по двойным лункам клеток, обработанных специфичными к CD74 ADCs.
Фиг.10. Эффективность in vivo специфичных к CD74 ADCs при терапевтическом лечении ксенотрансплантатов Daudi-luc у мышей SCID. Мышей с привитыми опухолями Daudi-luc обрабатывали специфичными к CD74 ADCs. Данные представлены в виде средних значений биолюминесценции на снимках (BLI)±S.E.M. на группу (n=7 мышей в группе).
Фиг.11. Эффективность in vivo специфичных к CD74 ADCs при терапевтическом лечении ксенотрансплантатов Raji-luc у мышей SCID. Мышей с привитыми опухолями Raji-luc обрабатывали специфичными к CD74 ADCs. Данные представлены в виде средних значений BLI±S.E.M. на группу (n=7 мышей в группе).
Фиг.12. Эффективность in vivo специфичных к CD74 ADCs при терапевтическом лечении ксенотрансплантатов Raji у мышей SCID. Мышей с привитыми s.c. опухолями Raji обрабатывали специфичными к CD74 ADCs. Данные представлены в виде среднего объема опухолей ± S.E.M. на группу (n=6 мышей в группе).
Фиг.13. Эффективность in vivo ADCs против CD74 при терапевтическом лечении ксенотрансплантатов М4А4 у мышей SCID. Мышей с привитыми опухолями М4А4 обрабатывали ADCs против CD74. Данные представлены в виде среднего объема опухолей ± S.E.M. на группу (n=7 мышей в группе).
Фиг.14. Определение значений koff у специфичных к CD74 антител HuMab. Представлен один репрезентативный эксперимент. Данные представлены в виде средней интенсивности флуоресценции (MFI) по тройным лункам клеток, инкубированных с меченными красителем Alexa Fluor 488® антителами HuMab к CD74, с последующей инкубацией с немечеными антителами HuMab к CD74 в течение указанных промежутков времени.
Фиг.15. Временная зависимость интернализации и накопления антител HuMab против CD74. Представлен один репрезентативный эксперимент для каждой линии клеток. Данные представлены в виде средней интенсивности флуоресценции (MFI) по двойным лункам клеток, инкубированных с меченными Alexa-488 антителами HuMab против CD74. Клетки Daudi инкубировали с меченными Alexa-488 антителами HuMab против CD74 при 4°С (А) или 37°С (В). Клетки Raji (С) и клетки М4А4 (D) инкубировали при 37°С.
Фиг.16. Эффективность in vivo антител HuMab против CD74 при профилактическом лечении ксенотрансплантатов Daudi-luc у мышей SCID. Мышей обрабатывали антителами HuMab против CD74 в пределах одного часа после внутривенной инокуляции опухолей Daudi-luc. Данные представлены в виде средних значений BLI±S.E.M. на группу (n=7 мышей в группе).
Раскрытие сущности изобретения Определения
Термины "CD74" и "антиген CD74" используются здесь взаимозаменяемо. Если не указано иначе, эти термины охватывают любые варианты, изоформы и видовые гомологи CD74 человека, которые экспрессируются клетками в природе или экспрессируются на клетках, трансфецированных геном CD74. Как известно, у человека существует по меньшей мере четыре изоформы: р43, р41, р35 и рр33 (Borghese F et al., Expert Opin Ther Targets 2011, 15(3):237-251). Они образуются в результате альтернативного сплайсинга транскриптов и двух сайтов начала трансляции. Белок р43 (также известный как изоформа 1, изоформа а или "длинная" изоформа CD74; см. запись Р04233-1 в UniProt и эталонную последовательность NP 001020330 в NCBI) содержит 296 аминокислот, при этом остатки 73-296 образуют внеклеточную часть. Белковые конструкции CD74, содержащие внеклеточную часть изоформы 1, обозначаются здесь как "вариант 1" или "CD74v1". Белок р35 (также известный как изоформа 2, изоформа b или "короткая" изоформа CD74; см. запись Р04233-2 в Uniprot и эталонную последовательность NP 004346 в NCBI) не содержит остатков 209-272 из внеклеточной части вследствие альтернативного сплайсинга. Белковые конструкции CD74, содержащие внеклеточную часть изоформы 2, обозначаются здесь как "вариант 2" или "CD74v2". Белки р41 и p33 возникают из альтернативного сайта начала трансляции (на 48 п.о. ниже; белок становится короче на 16 аминокислот), что приводит к вариантам, у которых отсутствует сигнал удержания в эндоплазматическом ретикулуме (ER), который находится в пределах этих 16 аминокислот, но имеется такая же внеклеточная часть, как у р43 и р35, соответственно. Последовательность еще одной изоформы (известной как изоформа 3 и изоформа с), в которой остатки 148-160 заменены, а остатки 161-296 отсутствуют, представлена в NP 001020329. Последовательности гомологов CD74 яванской макаки представлены, например, в NCBI: эталонная последовательность ХР_001099491.2 и эталонная последовательность ХР_002804б24.1.
Термином "иммуноглобулин" обозначается класс структурно родственных гликопротеинов, состоящих из двух пар полипептидных цепей: одной пары легких (L) низкомолекулярных цепей и одной пары тяжелых (Н) цепей, причем все четыре соединяются между собой дисульфидными связями. Структура иммуноглобулинов хорошо изучена. Например, см. Fundamental Immunology Ch. 7 (Paul W., ed., 2nd ed. Raven Press, N.Y. (1989)). Вкратце, каждая тяжелая цепь обычно состоит из вариабельной области тяжелой цепи (сокращенно VH или VH) и константной области тяжелой цепи (CH или СН). Константная область тяжелой цепи обычно состоит из трех доменов: CH1, CH2 и CH3. Каждая легкая цепь обычно состоит из вариабельной области легкой цепи (сокращенно VL или VL) и константной области легкой цепи. Константная области легкой цепи обычно состоит из одного домена, CL или CL. Как правило, нумерация аминокислотных остатков в константной области производится в соответствии с индексом EU, как описано в Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991). Области VH и VL дополнительно подразделяются на участки гипервариабельности (или гипервариабельные участки, которые могут быть гипервариабельными по последовательности и/или образовывать структурно определенные петли), именуемые определяющими комплементарность участками (CDRs), которые чередуются с более консервативными участками, называемыми каркасными участками (FRs). Каждый VH и VL, как правило, состоит из трех CDRs и четырех FRs, которые располагаются с N-конца к С-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4 (см. также Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196, 901-917 (1987)).
Термин "антитело" или "Ab" в контексте настоящего изобретения относится к молекуле иммуноглобулина, фрагменту молекулы иммуноглобулина или производному того или другого, которые, обладают способностью к специфическому связыванию с антигеном при обычных физиологических условиях со временем полужизни, составляющим значительный промежуток времени, как то: по меньшей мере около 30 мин, по меньшей мере 45 мин, по меньшей мере 1 час, по меньшей мере 2 часа, по меньшей мере 4 часа, по меньшей мере 8 часов, по меньшей мере 12 часов, 24 часа или больше, 48 часов или больше, около 3, 4, 5, 6, 7 или больше дней и т.д., или любой другой соответствующий функционально определенный период (к примеру, время, достаточное, чтобы индуцировать, способствовать, усиливать и/или модулировать физиологическую реакцию, связанную со связыванием антитела с антигеном, и/или время, достаточное, чтобы антитело приобрело эффекторную активность). Вариабельные области тяжелых и легких цепей молекулы иммуноглобулина содержат связывающий домен, который взаимодействует с антигеном. Константные области антител (Abs) могут опосредовать связывание иммуноглобулина с тканями или факторами хозяина, включая различные клетки иммунной системы (как то эффекторные клетки) и такие компоненты системы комплемента, как C1q, первый компонент классического пути активации комплемента. Антитело также может быть мультиспецифическим, обладающим специфичностью к двум или нескольким разным эпитопам, обычно не перекрывающимся. Примеры мультиспецифических антител включают биспецифические антитела, диатела и подобные молекулы антител. Как указано выше, термин антитело, если здесь не оговорено иначе или четко не противоречит контексту, включает фрагменты антител, которые сохраняют способность к специфическому связыванию с антигеном. Было показано, что антигенсвязывающая функция антител может осуществляться фрагментами полноразмерных антител, например. Fab- и F(ab')2-фрагментами. Также следует иметь в виду, что термин антитело, если не указано иначе, также охватывает поликлональные антитела, моноклональные антитела (mAbs), антителоподобные полипептиды типа химерных антител и гуманизированных антител. Полученные антитела могут обладать любым изотипом.
Термины "человеческое антитело", "человеческое Ab" или "HuMab" в настоящем изобретении охватывают антитела, содержащие вариабельные и константные области, происходящие из гаметных последовательностей иммуноглобулинов человека. Человеческие антитела по изобретению могут включать аминокислотные остатки, которые не кодируются гаметными последовательностями иммуноглобулинов человека (например, мутации, введенные при случайном или сайт-специфичном мутагенезе in vitro либо при соматической мутации in vivo). Однако термин "человеческое антитело" в настоящем изобретении не должен включать такие антитела, у которых в каркасные последовательности человека были пересажены последовательности CDR, происходящие из зародышевой линии других видов млекопитающих, как то мыши.
В настоящем изобретении человеческое антитело "происходит из" определенной гаметной последовательности, если антитело получено из системы, в которой используются последовательности иммуноглобулинов человека, например, при иммунизации трансгенных мышей, несущих гены иммуноглобулинов человека, или при скрининге библиотеки генов иммуноглобулинов человека, причем выбранное человеческое антитело по меньшей мере на 90%, как то: по меньшей мере на 95%, например, по меньшей мере на 96%, как то: по меньшей мере на 97%, например, по меньшей мере на 98% или же 99% идентично аминокислотной последовательности, кодируемой гаметным геном иммуноглобулина. Как правило, за пределами CDR3 тяжелой цепи человеческое антитело, происходящее из определенной гаметной последовательности, должно отличаться не более чем по 20 аминокислотам, например, не более чем 10 аминокислотам, к примеру, не более чем по 9, 8, 7, 6 или 5, к примеру, не более чем по 4, 3, 2, или 1 аминокислоте от аминокислотой последовательности, кодируемой гаметным геном иммуноглобулина.
Термины "моноклональное антитело", "моноклинальное Ab", "композиция моноклонального антитела", "mAb" и т.п. в настоящем изобретении относятся к препаратам молекул антител, состоящим из одинаковых молекул. Композиция моноклонального антитела проявляет одинарную специфичность связывания и сродства к определенному эпитопу. Соответственно, термин "человеческое моноклональное антитело" относится к таким антителам, проявляющим одинарную специфичность связывания, у которых вариабельные и константные области происходят из гаметных последовательностей иммуноглобулинов человека. Человеческие моноклональные антитела могут вырабатываться гибридомой, включающей В-клетки, полученные из трансгенного или трансхромосомного животного, но не человека, к примеру, трансгенной мыши, геном которой содержит трансген тяжелой цепи и трансген легкой цепи человека, слитые с иммортализованными клетками.
В настоящем изобретении термин "изотип" относится к классу иммуноглобулина (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgD, IgA, IgE или IgM), который кодируется генами константной области тяжелой цепи.
Термин "полноразмерное антитело" в настоящем изобретении относится к таким антителам, которые содержат все константные и вариабельные домены тяжелой и легкой цепи, которые обычно встречаются в антителах данного изотипа.
В настоящем изобретении, если это не противоречит контексту, термин "Fab-плечо" или "плечо" относится к одной паре тяжелая цепь - легкая цепь.
В настоящем изобретении, если это не противоречит контексту, термин "Fc-участок" относится к участку антитела, содержащему по меньшей мере один шарнирный участок, домен CH2 и домен CH3.
"Антитело, дефектное по эффекторной функции" или "антитело с дефектом эффекторной функции" относится к таким антителам, у которых существенно понижена или отсутствует способность к активации одного или нескольких эффекторных механизмов, таких как активация комплемента или связывание с Fc-рецептором. Таким образом, антитела, дефектные по эффекторной функции, обладают значительно меньшей или не обладают способностью опосредовать зависимую от антител опосредованную клетками цитотоксичность (ADCC) и/или зависимую от комплемента цитотоксичность (CDC). Примером таких антител являются антитела изотипа IgG4 или их шарнирно-стабилизированные формы. Другим примером является введение мутаций в Fc-область, способных сильно уменьшить взаимодействие с белками комплемента и Fc-рецепторами. К примеру, см. Bolt S et al., Eur J Immunol 1993, 23:403-411; Oganesyan, Acta Crys. 2008, D64, 700-704; и Shields et al., JBC 2001, 276:6591-6604.
В настоящем изобретении термин "эффекторная клетка" относится к таким иммунным клеткам, которые вовлечены в эффекторную фазу иммунного ответа, в отличие от распознающей и активационной фаз иммунного ответа. Примеры иммунных клеток включают клетки миелоидного или лимфоидного происхождения, например лимфоциты (как то В-клетки и Т-клетки, в том числе цитолитические Т-клетки (CTLs)), клетки-киллеры, нормальные клетки-киллеры, макрофаги, моноциты, тучные клетки и гранулоциты, как то нейтрофилы, эозинофилы и базофилы. Некоторые эффекторные клетки экспрессируют специфические Fc-рецепторы (FcRs) и выполняют специфические иммунные функции. В некоторых воплощениях эффекторные клетки способны индуцировать ADCC, типа нормальных клеток-киллеров. Например, моноциты, макрофаги, экспрессирующие FcRs, участвуют в специфическом уничтожении клеток-мишеней и презентации антигенов другим компонентам иммунной системы. В некоторых воплощениях эффекторные клетки могут подвергать фагоцитозу антиген мишени или клетки мишени. Экспрессия определенных FcR на эффекторных клетках может регулироваться такими гуморальными факторами, как цитокины. Эффекторные клетки могут подвергать фагоцитозу антиген мишени либо подвергать фагоцитозу или лизису клетки мишени.
В контексте настоящего изобретения "ADC" означает конъюгат антитело-препарат, что в контексте настоящего изобретения обычно означает специфичное к CD74 антитело, которое соединено с другой молекулой, как описано в настоящей заявке.
"Антитело к CD74", "антитело против CD74", "Ab к CD74", "специфичное к CD74 антитело" или "Ab против CD74" означает такое антитело, описанное выше, которое специфически связывается с антигеном CD74.
В предпочтительном воплощении антитело по изобретению является выделенным. "Выделенное Ab" в настоящем изобретении служит для обозначения таких антител, которые практически не содержат других антител, имеющих другие антигенные специфичности (например, выделенное антитело, которое специфически связывается с CD74, практически не содержит антител, специфически связывающихся с другими антигенами, чем CD74). Однако выделенное антитело, которое специфически связывается с эпитопом, изоформой или вариантом CD74 человека, может обладать перекрестной реактивностью к другим родственным антигенам, к примеру, из других видов (типа видовых гомологов CD74). Более того, выделенное антитело может практически не содержать и других клеточных материалов и/или химических веществ. В одном воплощении настоящего изобретения в одной четко определенной композиции комбинируются два или несколько "выделенных" моноклональных антител с различными специфичностями связывания антигенов.
В применении к двум или нескольким антителам термин "конкурирует с" или "перекрестно конкурирует с" означает, что два или несколько антител конкурируют за связывание с CD74, например, с вариантом 1 или 2 CD74 или с обоими. Например, при таком анализе могут использоваться конструкции, описанные в примере 1. В одном типичном варианте анализа на планшет наносят CD74 и дают ему связаться с первым антителом, после чего добавляют второе, меченое антитело. Если в присутствии первого антитела снижается связывание второго антитела, это означает, что антитела конкурируют. Термин "конкурирует с" в настоящем изобретении охватывает и такие комбинации антител, в которых одно антитело снижает связывание другого антитела, но при добавлении их в обратном порядке конкуренция не наблюдается.
Термин "эпитоп" обозначает детерминанту белка, способную специфически связываться с антителом. Эпитопы обычно состоят из поверхностных группировок таких молекул, как аминокислоты или боковые цепи Сахаров, и обычно имеют специфические трехмерные структурные характеристики, а также специфические характеристики заряда. Конформационные и не конформационные эпитопы отличаются тем, что связывание первых, но не последних, теряется в присутствии денатурирующих растворителей. Эпитоп может включать аминокислотные остатки, которые непосредственно участвуют в связывании, и другие аминокислотные остатки, которые прямо не участвуют в связывании, например, аминокислотные остатки, которые эффективно блокируются или покрываются пептидом, специфически связывающимся с антигеном (то есть те аминокислотные остатки, которые составляют "отпечаток" пептида, специфически связывающегося с антигеном).
В настоящем изобретении термин "связывание" в контексте связывания антитела с заданным антигеном или эпитопом обычно означает связывание со сродством, соответствующим KD примерно 10-7 М или меньше, как то 10-8 М или меньше, как то 10-9 М или меньше, 10-10 М или меньше или же 10-11 М и даже меньше при определении, к примеру, методом поверхностного плазменного резонанса (SPR) на приборе BIAcore 3000 с использованием растворимой формы антигена в качестве лиганда и антитела в качестве аналита. Как правило, антитело связывается с заданным антигеном со сродством, соответствующим значению KD, которое по меньшей мере в 10 раз меньше, как то по меньшей мере в 100 раз меньше, например, по меньшей мере в 1000 раз меньше, как то по меньшей мере в 10000 раз меньше, например, по меньшей мере в 100000 раз меньше, чем значение KD для связывания, с таким неспецифическим антигеном (например, BSA, казеином), который не является идентичным или близкородственным заданному антигену. Если значение KD у антитела очень низкое (т.е. антитело обладает высоким сродством), то значение KD, с которым оно связывается с антигеном, обычно по меньшей мере в 10000 раз меньше, чем значение KD для неспецифического антигена.
Термин "kd" (сек-1) в настоящем изобретении обозначает константу скорости диссоциации определенного взаимодействия Ab-антиген. Данная величина также известна как значение koff.
Термин "ka" (M-1×сек-1) в настоящем изобретении обозначает константу скорости ассоциации определенного взаимодействия Ab-антиген.
Термин "KD" (М) в настоящем изобретении обозначает равновесную константу диссоциации определенного взаимодействия Ab-антиген.
Термин "KA" (M-1) в настоящем изобретении обозначает равновесную константу ассоциации определенного взаимодействия Ab-антиген, которую получают делением ka на kd.
"Интернализация" в применении к антителам к CD74 означает любой механизм, посредством которого антитело подвергается интернализации из поверхности клетки в экспрессирующую CD74 клетку. Интернализацию антитела можно оценить косвенным методом путем измерения эффекта интернализованного конъюгата Ab-токсин или токсина, специфически связавшегося с антителом при предварительной инкубации (таким, например, как метод с анти-каппа-ЕТА' из примера 14).
В настоящем изобретении термин "ингибирует рост".(например, в отношении клеток, как то опухолевых клеток) охватывает любое измеримое снижение роста клеток при контакте с антителом к CD74 или ADC по сравнению с ростом тех же самых клеток, не находящихся в контакте с антителом к CD74 или ADC, например, ингибирование роста клеточной культуры по меньшей мере на 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 99% или 100%. Такое снижение роста клеток может происходить по различным механизмам, например, интернализации, зависимого от антител клеточного фагоцитоза (ADCP), зависимой от антител опосредованной клетками цитотоксичности (ADCC), зависимой от комплемента цитотоксичности (CDC), опосредованной лекарственными препаратами гибели клеток и/или апоптоза.
Настоящим изобретением также предусмотрены антитела, содержащие функциональные варианты области VL, области VH либо одного или нескольких CDRs из антител из примеров. Функциональный вариант VL, VH или CDR в применении к антителам к CD74 означает, что у антитела все-таки сохраняется по крайней мере значительная часть (по меньшей мере 50, 60, 70, 80, 90, 95% или больше) сродства/авидности и/или специфичности/избирательности исходного антитела, а в некоторых случаях, такое антитело к CD74 может обладать большим сродством, избирательностью и/или специфичностью, чем исходное Ab.
Такие функциональные варианты, как правило, сохраняют значительную степень идентичности с последовательностью исходного Ab. Степень идентичности между двумя последовательностями является функцией от числа идентичных положений, общих для этих последовательностей (т.е. процент гомологии = число идентичных положений/общее число положений × 100), с учетом количества пробелов и длины каждого пробела, которые нужно ввести для оптимального совмещения двух последовательностей. Сравнение последовательностей и определение степени идентичности между двумя последовательностями может осуществляться с помощью математического алгоритма, как описано ниже в неограничивающих примерах.
Степень идентичности между двумя нуклеотидными последовательностями можно определить с помощью программы GAP в пакете программного обеспечения GCG (доступен на http://www.gcg.com), используя матрицу NWSgapdna.CMP, вес пробела = 40, 50, 60, 70 или 80 и вес длины = 1, 2, 3, 4, 5 или 6. Степень идентичности между двумя нуклеотидными последовательностями также можно определить с помощью алгоритма, описанного Е. Meyers and W. Miller (Comput. Appl. Biosci 4, 11-17 (1988)), который встроен в программу ALIGN (версия 2.0), используя таблицу весов остатков РАМ 120, пеню за длину пробела = 12 и пеню за пробел = 4. Кроме того, степень идентичности между двумя аминокислотными последовательностями можно определить при помощи алгоритма Needleman и Wunsch (Needleman and Wunsch, J. Mol. Biol. 48, 444-453 (1970)), который встроен в программу GAP в пакете программного обеспечения GCG (доступен на http://www.gcg.com), используя либо матрицу Blossum 62, либо матрицу РАМ250, вес пробела = 16, 14, 12, 10, 8, 6 или 4 и вес длины = 1, 2, 3, 4, 5 или 6.
Последовательности вариантов CDR могут отличаться от последовательностей CDR исходных антител в основном консервативными заменами; например, по меньшей мере 35%, 50% или больше, 60% или больше, 70% или больше, 75% или больше, 80% или больше, 85% или больше, 90% или больше (например, 65-95%, как то 92%, 93% или 94%) замен у варианта представлены консервативными заменами аминокислотных остатков.
Последовательности вариантов CDR могут отличаться от последовательностей CDR исходных антител в основном консервативными заменами; например, по меньшей мере 10, как то по меньшей мере 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 замена у варианта представлены консервативными заменами аминокислотных остатков.
Термин "стабилизированное антитело типа IgG4" относится к таким антителам типа IgG4, которые были модифицированы для уменьшения обмена полумолекул (например, см. Международную патентную публикацию WO2008145142 или van der Neut Kolfschoten M et al. (2007) Science 14, 317(5844) и приведенные там ссылки.
В контексте настоящего изобретения консервативные замены можно определить как замены в пределах классов аминокислот, приведенных в одной или нескольких из трех следующих таблиц.
Классы аминокислотных остатков для консервативных замен | |||||
Кислые остатки | Asp (D) и Glu (E) | ||||
Основные остатки | Lys (K), Arg (R) и His (Н) | ||||
Гидрофильные незаряженные остатки | Ser (S), Thr (Т), Asn (N) и Gln (Q) | ||||
Алифатические незаряженные остатки | Gly (G), Ala (A), Val (V), Leu (L) и Ile (I) | ||||
Неполярные незаряженные остатки | Cys (C), Met (M) и Pro (P) | ||||
Ароматические остатки | Phe (F), Tyr (Y) и Trp (W) | ||||
Альтернативные классы консервативных замен аминокислотных остатков | |||||
1 | А | S | Т | ||
2 | D | E | |||
3 | N | Q | |||
4 | R | K | |||
5 | I | L | M | ||
6 | F | Y | W | ||
Альтернативная физическая и функциональная классификация аминокислотных остатков | |||||
Остатки, содержащие спиртовую группу | S и Т | ||||
Алифатические остатки | I, L, V и М | ||||
Остатки, связанные с циклоалкенилами | F, Н, W и Y | ||||
Гидрофобные остатки | А, С, F, G, Н, I, L, М, R, Т, V, W и Y | ||||
Отрицательно заряженные остатки | D и Е | ||||
Полярные остатки | С, D, E, Н, K, N, Q, R, S и Т | ||||
Положительно заряженные остатки | Н, K и R | ||||
Небольшие остатки | А, С, D, G, N, P, S, Т и V | ||||
Очень маленькие остатки | А, G и S | ||||
Остатки, участвующие в образовании складок | А, С, D, E, G, Н, K, N, Q, R, S, Р и Т | ||||
Гибкие остатки | Q, Т, K, S, G, Р, D, Е и R |
Другая разбивка консервативных замен на группы включает: валин-лейцин-изолейцин, фенилаланин-тирозин, лизин-аргинин, аланин-валин и аспарагин-глутамин.
Можно составить и другие группы аминокислот по принципам, изложенным, например, в Creighton (1984) Proteins: Structure and Molecular Properties (2nd Ed. 1993), W.H. Freeman and Company.
У вариантов CDR также в значительной степени сохраняется консервативность по гидрофобности/гидрофильности и весу/размеру остатков по сравнению с CDR у антител из примеров (например, весовая категория, индекс гидрофобности или то и другое у последовательностей сохраняется по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или больше (например, на 65-99%)). Например, консервативные замены остатков могут основываться и на заменах из сильно или слабо консервативных по весу групп, которые известны в этой области.
Консервативность аналогичных остатков можно измерить и по степени сходства, которая определяется при помощи программы BLAST (например, BLAST 2.2.8, доступной через NCBI), используя стандартные настройки: BLOSUM62, Open Gap=11 и Extended Gap=1. Подходящие варианты обычно проявляют сходство с исходным пептидом по меньшей мере на 45%, например, по меньшей мере на 55%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или больше (например, на 70-99%).
Термин "вектор" в настоящем изобретении служит для обозначения молекулы нуклеиновой кислоты, способной транспортировать другую нуклеиновую кислоту, с которой она связана. Одним из типов вектора является "плазмида", что означает кольцевую петлю двухцепочечной ДНК, в которую могут быть вставлены дополнительные сегменты ДНК. Другим типом вектора является вирусный вектор, при этом в вирусный геномом могут быть вставлены дополнительные сегменты ДНК. Некоторые векторы способны автономно реплицироваться в клетках хозяина, в которые они введены (к примеру, бактериальные векторы, содержащие бактериальное начало репликации, и эписомные векторы млекопитающих). Другие векторы (например, неэписомные векторы млекопитающих) могут встраиваться в геном клетки хозяина при введении в клетки хозяина и при этом реплицируются вместе с геномом хозяина. Кроме того, некоторые векторы способны направлять экспрессию тех генов, с которыми они функционально связаны. Такие векторы именуются здесь как "рекомбинантные экспрессирующие векторы" (или просто "экспрессирующие векторы"). Вообще экспрессирующие векторы, используемые в технологии рекомбинантной ДНК, часто находятся в виде плазмид. В настоящем описании "плазмида" и "вектор" могут использоваться взаимозаменяемо, так как плазмида является наиболее распространенной формой вектора. Тем не менее, настоящее изобретение охватывает и другие формы экспрессирующих векторов типа вирусных векторов (как то дефектные по репликации ретровирусы, аденовирусы и аденоассоциированные вирусы), которые выполняют эквивалентные функции.
Термин "рекомбинантные клетки хозяина" (или просто "клетки хозяина") в настоящем изобретении служит для обозначения таких клеток, в которые был введен экспрессирующий вектор. Следует иметь в виду, что такие термины служат для обозначения не только каких-то конкретных клеток, но также и потомства таких клеток. Поскольку в последующих поколениях могут иметь место некоторые модификации вследствие мутации или же влияния окружающей среды, то такое потомство может оказаться не совсем идентичным родительским клеткам, тем не менее оно охватывается используемым здесь термином "клетки хозяина". Рекомбинантными клетками хозяина являются, к примеру, трансфектомы, как то клетки СНО, клетки HEK-293, PER.C6, клетки NS0, лимфоцитарные клетки и такие прокариотические клетки, как Е.coli.
Термин "трансфектома" в настоящем изобретении охватывает рекомбинантные эукариотические клетки хозяина, экспрессирующие Ab, как то клетки СНО, PER.C6, клетки NSO, клетки HEK-293, клетки растений или грибов, включая дрожжевые клетки.
Термин "трансгенное животное" относится к таким животным, у которых геном содержит один или несколько трансгенов тяжелых и/или легких цепей человека или трансхромосом (встроенных или не встроенных в природную геномную ДНК животного) и способен экспрессировать полностью человеческие Abs. Например, трансгенная мышь может содержать трансген легкой цепи человека и либо трансген тяжелой цепи человека, либо трансхромосому тяжелой цепи человека, так что эта мышь будет вырабатывать человеческие антитела к CD74 при иммунизации антигеном CD74 и/или клетками, экспрессирующими CD74. Трангсген тяжелой цепи человека может быть встроенным в хромосомную ДНК мыши, как в случае с такими трансгенными мышами, к примеру, мышами HuMAb®, как мыши НСо7 или НСо12, или же трансген тяжелой цепи человека может быть находиться вне хромосом, как в случае трансхромосомных мышей КМ, описанных в WO02/43478. Такие трансгенные и трансхромосомные мыши (которые собирательно именуются здесь как "трансгенные мыши") способны вырабатывать несколько изотипов моноклональных антител человека к данному антигену (как то IgG, IgA, IgM, IgD и/или IgE), подвергаясь рекомбинации V-D-J и переключению изотипа. Трансгенные животные также могут использоваться для вырабатывания антител против определенного антигена при введении генов, кодирующих данное Ab, к примеру, путем функционального связывания генов с таким геном, который экспрессируется в молоке животного.
"Лечение" означает введение эффективного количества терапевтически активного соединения настоящего изобретения с целью ослабления, уменьшения, прекращения или устранения (излечения) симптомов или заболеваний.
Термин "эффективное количество" означает количество, эффективное, в дозах и в течение необходимого времени, для достижения требуемого терапевтического результата. Терапевтически эффективное количество антитела к CD74 может варьировать в зависимости от таких факторов, как заболевание, возраст, пол и вес индивида и способности антитела к CD74 вызвать требуемую реакцию у индивида. Терапевтически эффективное количество также означает такое, при котором любые токсические или вредные эффекты антитела или части антитела перевешиваются положительными терапевтическими эффектами.
"Антиидиотипическое" (Id) антитело представляет собой такое антитело, которое распознает уникальные детерминанты, обычно связанные с антигенсвязывающим сайтом какого-либо Ab.
Другие аспекты и воплощения изобретения
Изобретением предусмотрены выделенные антитела, например, моноклональные антитела человека, которые связывается с изоформами 1 и 2 CD74 человека. Антитело может дополнительно связываться с другими изоформами CD74 или такими видовыми гомологами, как гомолог макаки. В частности, антитело по изобретению эффективно интернализируется после связывания с CD74, экспрессированным на поверхности клетки, что выгодно для терапевтического применения метода ADC. Как показано в примерах 19-22, конъюгаты ADCs антител к CD74 и комбинации линкер-препарат vcMMAE или mcMMAF эффективно уменьшают размер опухолей в нескольких моделях опухолей in vivo. ADCs к CD74 оказались очень эффективными, несмотря на низкую экспрессию мишени - CD74 на поверхности раковых клеток (пример 22). Кроме того, оказалось, что антитела к CD74 эффективно предотвращают разрастание опухолей на модели профилактики рака in vivo (пример 25).
Антитело может дополнительно характеризоваться одним или несколькими функциональными свойствами, как то тем, что оно связывается с одним или несколькими вариантами CD74 человека с высоким сродством, ингибирует связывание МЕР с CD74, или любым сочетанием указанных свойств.
В одном аспекте антитело по изобретению связывается с высоким сродством с вариантами 1 и/или 2 CD74 человека или с клетками человека, естественным образом экспрессирующими CD74. Например, в одном воплощении антитело (а) связывается с внеклеточным доменом варианта 1 CD74 со значением EC50 (кажущееся сродство) менее 500 нг/мл, менее 400 нг/мл, менее 350 нг/мл или менее 330 нг/мл; b) связывается со внеклеточным доменом варианта 2 CD74 со значением ЕС50 (кажущееся сродство) менее 400 нг/мл, менее 300 нг/мл, менее 250 нг/мл или менее 220 нг/мл; либо (с) и (а), и (b) при определении так, как описано в примере 11. С другой стороны, антитело может связываться с CD74 на клетках Raji со значением ЕС50 менее 400 нг/мл, менее 300 нг/мл, менее 250 нг/мл или менее 200 нг/мл при определении так, как описано в примере 12. С другой стороны, антитело может связываться с вариантом 1 или 2 CD74 или с обоими со значением KD в 10-8 М или меньше, как то 10-9 М или меньше или даже 10-10 M или меньше.
В одном аспекте антитело интернализируется после связывания с CD74, экспрессированным на поверхности клетки. Это можно определить в соответствии с методом, описанным в примере 24, используя флуоресцентно меченые антитела, или методом, описанным в примере 14, используя метод ADC, отражающий интернализацию антитела, или же методом, описанным в Ong GL et al., Immunology 1999, 98:296-302; Hansen HJ et al., Biochem J 1996, 320:293-300; Koch NG et al., J hnmunol 1991, 147:2643-2651; Roche PA et al., PNAS 1993, 90:8581-8585). Клетки могут происходить из линии В-клеток типа клеток Raji или из линии раковых клеток другого типа, экспрессирующих высокие уровни CD74 при обработке IFNγ (к примеру, клеток рака толстой кишки НТ-29 или клеток меланомы SK-MEL-37). В одном воплощении клетки представляют собой клетки Raji. В другом воплощении антитело имеет значение ЕС50 менее 60 нг/мл, менее 40 нг/мл, менее 30 нг/мл или же 25 нг/мл или меньше при индуцировании гибели клеток Raji методом анти-каппа-ЕТА', при определении так, как описано в примере 14. В другом варианте антитело имеет значение ЕС50 от 25 до 60 нг/мл, от 25 до 40 нг/мл или от 25 до 30 нг/мл при таком определении.
В одном аспекте антитело по изобретению имеет значение ЕС50 менее 30 нг/мл или же 25 нг/мл или меньше при определении так, как описано в примере 14.
В одном аспекте антитело характеризуется скоростью диссоциации (off-rate) из антигена CD74, необязательно экспрессированного на поверхности клетки. Скорость диссоциации можно определить, к примеру, клеточным методом типа приведенного в примере 23, как правило, с использованием флуоресцентно (или иным образом) меченых антител и с определением скорости диссоциации при 0°С. Клетки могут происходить из линии В-клеток, такой, например, как клетки Daudi или Raji, или из подходящей линии раковых клеток другого типа (например, клеток М4А4 или клеток NCI-H747). В одном воплощении клетки представляют собой клетки Daudi. В одном воплощении антитело проявляет скорость диссоциации (off-rate) в пределах от 0,02 до 1,0 мин-1, как то от 0,03 до 0,30 мин-1 либо от 0,04 до 0,10 или от 0,15 до 0,30 мин-1. В одном воплощении антитело проявляет скорость диссоциации примерно 0,07 мин-1. В одном воплощении антитело проявляет скорость диссоциации примерно 0,20 или 0,24 мин-1.
Антитело по изобретению также может характеризоваться конкуренцией за связывание или связыванием с тем же самым эпитопом, что и контрольное антитело к варианту 1 или варианту 2 или к обоим вариантам 1 и 2 CD74 человека.
В методе тестирования антитела на конкурентное связывание с контрольным антителом может использоваться, например, внеклеточный домен варианта CD74 (например, конструкции, описанные в примере 1), экспрессирующие CD74 клетки и/или клеточные мембраны, полученные из экспрессирующих CD74 клеток. В типичном методе клетки, экспрессирующие CD74, предварительно инкубируют с тестируемым антителом при различных концентрациях в пределах от 1 до 100 мкг/мл, а затем инкубируют с помеченным флуорофором контрольным антителом при концентрации в 10 мкг/мл. Связывание контрольного антитела определяется методом FACS.
В одном аспекте антитело конкурирует за связывание с вариантами 1 и 2 CD74 человека по меньшей мере с одним антителом, выбранным из:
(a) антител, содержащих область VH, включающую последовательность SEQ ID NO:7, и область VL, включающую последовательность SEQ ID NO:23 [005];
(b) антител, содержащих область VH, включающую последовательность SEQ ID NO:11, и область VL, включающую последовательность SEQ ID NO:26 [006];
(c) антител, содержащих область VH, включающую последовательность SEQ ID NO:15, и область VL, включающую последовательность SEQ ID NO:26 [008]; и
(d) антител, содержащих область VH, включающую последовательность SEQ ID NO:19, и область VL, включающую последовательность SEQ ID NO:26 [011].
В отдельных и особых воплощениях антитело конкурирует с антителом из (а) и (b), (а) и (с), (а) и (d), (b) и (с), (b) и (d), (с) и (d), из по меньшей мере трех от (а) до (d) или же всех (а), (b), (с) и (d).
В одном воплощении антитело связывается с тем же самым эпитопом на CD74 человека, что и по меньшей мере одно из контрольных антител, определенных в (а), (b), (с) и (d). Это можно определить с помощью известных методов определения эпитопов, таких, например, как тестирование связывания антител с вариантами CD74 с различными точечными мутациями, или'методами фагового дисплея (например, см. Binder et al., Cancer Res 2007, 67:3518-3523; Carter JM et al., Curr Protocols hnmunol 2004, Ch 9: Unit 9.4; Hjelm В et al., N Biotechnol 2010, 27:129-137; Rockberg J et al., Curr Protocols hnmunol 2010, Ch 9: Unit 9.9; Benjamin DC et al., Methods 1996, 9:508-515).
Антитело или иммуноглобулин по изобретению также может характеризоваться наличием определенных последовательностей VH, VL или CDR либо определенных из них комбинаций.
В одном аспекте антитело или иммуноглобулин содержит участок CDR3 области VH из любого из числа HuMab-CD 74-005, -006, -008, и -011. Таким образом, изобретением предусмотрено антитело или иммуноглобулин, содержащие участок CDR3 области VH, включающий или состоящий из последовательности, выбранной из SEQ ID NOs:10, 14, 18 и 22. В одном воплощении антитело или иммуноглобулин включает SEQ ID NO:22.
В одном аспекте антитело или иммуноглобулин содержит область VL, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 по SEQ ID NO:24, AAS и SEQ ID NO:26, и
a) область VH, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 по SEQ ID NOS:8, 9 и 10 [005];
b) область VH, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 по SEQ ID NO:12, 13 и 14 [006];
c) область VH, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 по SEQ ID NO:16, 17 и 18 [008];
d) область VH, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 по SEQ ID NO:20, 21 и 22 [011], или
e) вариант любого из данных антител или иммуноглобулинов, причем данный вариант предпочтительно содержит не более 1, 2 или 3 модификаций аминокислот, более предпочтительно замен аминокислот, как то консервативных замен аминокислот в любой из указанных последовательностей.
В одном аспекте антитело содержит область VH, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 по SEQ ID NO:20, 21 и 22, и область VL, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 по SEQ ID NO:24, AAS и 25, при этом не более 3 модификаций аминокислот по сравнению с исходными последовательностями. В одном воплощении антитело содержит область VH, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 по SEQ ID NO:20, 21 и 22, и область VL, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 по SEQ ID NO:24, AAS и 25, при этом не более 1 модификации аминокислот. В предпочтительном воплощении (е) вариант включает замену остатка аминокислоты 7 в CDR2 области VH из (d) типа консервативной замены аминокислоты.
В одном аспекте антитело или иммуноглобулин содержит область VH, которая:
a) по меньшей мере на 80% идентична, как то по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 98% либо на 100% идентична последовательности области VH, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:7, 11, 15 и 19, или
b) содержит не более 20, как то 15 или 10 или 5, 4, 3, 2 или 1 модификации аминокислот, более предпочтительно замены аминокислот, как то консервативной замены аминокислот по сравнению, с последовательностью области VH, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:7, 11, 15 и 19.
В одном аспекте антитело или иммуноглобулин содержит область VL, которая:
a) по меньшей мере на 80% идентична, как то по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 98% либо на 100% идентична последовательности области VL, выбранной из группы, состоящей из: SEQ ID NO:23 и 26, или
b) содержит не более 20, как то 15 или 10, или 5, 4, 3, 2 или 1 модификации аминокислот, более предпочтительно замены аминокислот, как то консервативной замены аминокислот по сравнению с последовательностью области VL, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:23 и 26.
В одном воплощении (b) область VL содержит аминокислотную замену в положении, соответствующем остатку 36 по SEQ ID NO:23 и 26. В SEQ ID NOs:23 и 26 в этом положении аминокислота представлена F и Y, соответственно.
В отдельных и особых аспектах антитело или иммуноглобулин содержит области VH и VL, выбранные из числа следующих комбинаций:
a) область VH, включающая последовательность SEQ ID NO:7, и область VL, включающая последовательность SEQ ID NO:23 [005];
b) область VH, включающая последовательность SEQ ID NO:11, и область VL, включающая последовательность SEQ ID NO:26 [006];
c) область VH, включающая последовательность SEQ ID NO:15, и область VL, включающая последовательность SEQ ID NO:26 [008];
d) область VH, включающая последовательность SEQ ID NO:19, и область VL, включающая последовательность SEQ ID NO:26 [011];
e) область VH, включающая последовательность SEQ ID NO:7, и область VL, включающая последовательность SEQ ID NO:26 [005/011]; и
f) вариант любого из данных антител или иммуноглобулинов, причем данный вариант предпочтительно содержит не более 1, 2 или 3 модификаций аминокислот, более предпочтительно замен аминокислот, как то консервативных замен аминокислот в любой из указанных последовательностей области VH и/или VL.
В одном аспекте изобретения предусмотрено антитело или иммуноглобулин, содержащий область VL, включающую последовательность SEQ ID NO:26. В одном воплощении антитело или иммуноглобулин содержит CDR3 области VH по SEQ ID NO:22. В другом воплощении антитело содержит последовательности CDR1, 2 и 3 области VH по SEQ ID NO:20, 21 и 22, соответственно.
Антитело по изобретению может характеризоваться одним или несколькими функциональными или структурными признаками вышеописанных аспектов или любой комбинацией выбранных функциональных и структурных признаков. Например, в одном воплощении антитело или иммуноглобулин по изобретению характеризуется любым из следующих признаков:
a) ЕС50 менее 30 нг/мл или же ЕС50 примерно 25 нг/мл или меньше в методе анти-каппа-ЕТА' при определении так, как описано в примере 14;
b) конкурирует с или связывается с тем же самым эпитопом, что и антитело с последовательностями VH и VL по SEQ ID NOs:19 и 26, соответственно;
c) скорость диссоциации (off-rate) в пределах от 0,03 до 0,30 мин-1 при определении в соответствии с примером 23;
d) CDR3 области VH включает SEQ ID NO:22;
e) комбинация из (а) и (b);
f) комбинация из (а) и (с);
g) комбинация из (а) и (d);
h) комбинация из (b) и (с);
i) комбинация из (b) и (d);
j) комбинация из (с) и (d); или
k) комбинация из (а), (b), (с) и (d).
Антитела по изобретению предпочтительно являются моноклональными. Моноклональные антитела настоящего изобретения могут быть получены, например, гибридомным способом, впервые описанным в Kohler et al. (Nature 256, 495 (1975)), или же методами рекомбинантной ДНК. Моноклональные антитела также могут быть выделены из фаговых библиотек антител по методикам, описанным, к примеру, в Clackson et al., Nature 352, 624-628 (1991) и Marks et al., J. Mol. Biol. 222, 581-597 (1991). Моноклональные антитела могут быть получены из любого подходящего источника. Так, например, Моноклональные антитела могут быть получены из гибридом, полученных из В-клеток селезенки и лимфатических узлов, выделенных из мышей, иммунизированных данным антигеном, например, в виде клеток, экспрессирующих данный антиген на поверхности, или нуклеиновой кислоты, кодирующей данный антиген. Моноклональные антитела также могут быть получены из гибридом, полученных из экспрессирущих антитела клеток от иммунизированных людей или других млекопитающих, как то крыс, собак, приматов и т.п.
В одном воплощении антитело по изобретению является человеческим антителом. Человеческие моноклональные антитела против CD74 могут быть получены при помощи трансгенных или трансхромосомных мышей, несущих части иммунной системы человека, а не мыши. Такие трансгенные и трансхромосомные мыши включают мышей, именуемых здесь мышами HuMAb и мышами KM, соответственно, которые собирательно именуются здесь "трансгенными мышами".
У мышей HuMAb содержится минилокус генов иммуноглобулинов человека, которые кодируют не подвергавшиеся перестройке последовательности тяжелой (μ и γ) и легкой κ-цепи иммуноглобулина человека, а также направленные мутации, которые инактивируют эндогенные локусы μ- и κ-цепи (Lonberg N. et al., Nature 368, 856-859 (1994)). Соответственно, мыши проявляют пониженную экспрессию мышиных IgM или κ-цепи мыши и, в ответ на иммунизацию, введенные трансгены тяжелой и легкой цепи человека подвергаются переключению изотипа и соматической мутации с образованием человеческих моноклональных антител IgG,κ с высоким сродством (Lonberg N. et al. (1994), supra; см. обзоры в Lonberg N. Handbook of Experimental Pharmacology 113, 49-101 (1994); Lonberg N. and Huszar D., Intern. Rev. Immunol. 13, 65-93 (1995); и Harding F. and Lonberg N., Ann. N.Y. Acad. Sci. 764, 536-546 (1995)). Получение мышей HuMAb описано подробно в Taylor L. et al., Nucleic Acids Research 20, 6287-6295 (1992); Chen J. et al., International Immunology 5, 647-656 (1993); Tuaillon et al., J. Immunol. 152, 2912-2920 (1994); Taylor L. et al., International Immunology 6, 579-591 (1994); Fishwild D. et al., Nature Biotechnology 14, 845-851 (1996). См. также US 5545806, US 5569825, US 5625126, US 5633425, US 5789650, US 5877397, US 5661016, US 5814318, US 5874299, US 5,770,429, US 5545807, WO 98/24884, WO 94/25585, WO 93/1227, WO 92/22645, WO 92/03918 и WO 01/09187.
У мышей НСо7, НСо12, НСо17 и НСо20 имеется разрыв JKD в эндогенных генах легкой цепи (каппа; κ) (как описано в Chen et al., EMBO J. 12, 821-830 (1993)), разрыв CMD в эндогенных генах тяжелой цепи (как описано в примере 1 из WO 01/14424), и трансген KCo5 легкой κ-цепи человека (как описано в Fishwild et al., Nature Biotechnology 14, 845-851 (1996)). Кроме того, у мышей Нсо7 имеется трансген НСо7 тяжелой цепи человека (как описано в US 5770429), у мышей НСо12 имеется трансген НСо12 тяжелой цепи человека (как описано в примере 2 из WO 01/14424), у мышей НСо17 имеется трансген НСо17 тяжелой цепи человека (как описано в примере 2 из WO 01/09187) и у мышей НСо20 имеется трансген НСо20 тяжелой цепи человека. Полученные при этом мыши экспрессируют трансгены тяжелой и легкой κ-цепи иммуноглобулина человека на фоне гомозиготности по разрывам эндогенных локусов тяжелой и легкой κ-цепи мыши.
У мышей линии КМ эндогенный ген легкой κ-цепи мыши был гомозиготно разорван, как описано в Chen et al., EMBO J. 12, 811-820 (1993), а эндогенный ген тяжелой цепи мыши был гомозиготно разорван, как описано в примере 1 из WO 01/09187. Эта линия мышей несет трансген KCo5 легкой κ-цепи человека, как описано в Fishwild et al., Nature Biotechnology 14, 845-851 (1996). Эта линия мышей также несет трансхромосому тяжелой цепи человека, состоящую из фрагмента hCF (SC20) хромосомы 14, как описано в WO 02/43478. Мыши НСо12-Balb/С могут быть получены путем скрещивания НСо12 с KCo5[J/K]-Balb/C, как описано в WO 097006.
Спленоциты и клетки лимфатических узлов из этих трансгенных мышей можно использовать для получения гибридом, секретирующих человеческие моноклональные антитела, по хорошо известным методикам.
Человеческие моноклональные или поликлональные антитела настоящего изобретения или антитела по настоящему изобретению, происходящие из других видов, также могут быть получены трансгенным способом путем создания другого млекопитающего или растения, трансгенного по данным последовательностям тяжелой и легкой цепи иммуноглобулина, и вырабатывания в них антител в поддающемся выделению виде. Что касается трансгенного получения у млекопитающих, то антитела можно вырабатывать и выделять из молока коз, коров и других млекопитающих. Например, см. US 5827690, US 5756687, US 5750172 и US 5741957.
Кроме того, человеческие антитела настоящего изобретения или антитела по настоящему изобретению из других видов могут быть получены дисплейными методами, включая, без ограничения, фаговый дисплей, ретровирусный дисплей, рибосомный дисплей и другие, используя методики, хорошо известные в данной области, а полученные молекулы можно подвергнуть дополнительному созреванию типа созревания сродства, поскольку такие методы хорошо известны в данной области (например, см. Hoogenboom et al., J. Mol. Biol. 227, 381 (1991) (фаговый дисплей), Vaughan et al., Nature Biotech 14, 309 (1996) (фаговый дисплей), Hanes and Plucthau, PNAS USA 94, 4937-4942 (1997) (рибосомный дисплей), Parmley and Smith, Gene 73, 305-318 (1988) (фаговый дисплей), Scott, TIBS 17, 241-245 (1992), Cwirla et al., PNAS USA 87, 6378-6382 (1990), Russel et al., Nucl. Acids Research 21, 1081-1085 (1993), Hogenboom et al., Immunol. Reviews 130, 43-68 (1992), Chiswell and McCafferty, TIBTECH 10, 80-84 (1992), и US 5,733,743)). Если дисплейные методы используются для получения антител, которые не являются человеческими, то такие антитела можно гуманизировать.
Антитела по изобретению могут быть любого изотипа. При выборе изотипа обычно руководствуются желательными эффекторными функциями, такими как индукция ADCC. Примерами изотипов являются IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. Можно использовать любые константные области легкой цепи человека - каппа или лямбда. При желании можно переключить изотип CD74-специфичных антител настоящего изобретения известными способами. Например, антитело по настоящему изобретению, которое изначально было IgM, можно переключить на антитело класса IgG настоящего изобретения. Кроме того, методы переключения изотипа можно использовать для преобразования одного подкласса IgG на другой, например, с IgG1 на IgG2. Таким образом, можно изменять эффекторную функцию антител настоящего изобретения путем переключения изотипа, например, на антитела типа IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgD, IgA, IgE или IgM для различных терапевтических применений. В одном воплощении антитело по настоящему изобретению представлено антителом типа IgG1, к примеру, IgG1,κ.
В одном воплощении антитело по изобретению представлено полноразмерным антителом.
В одном воплощении полноразмерное антитело представлено антителом типа IgG1, как то антителом типа IgG1,κ.
В другом воплощении полноразмерное антитело представлено антителом типа IgG4.
В предпочтительном воплощении специфичное к CD74 антитело IgG4 является стабилизированным антителом типа IgG4. Примерами подходящих стабилизированных антител IgG4 являются антитела, в которых аргинин в положении 409 в константной области тяжелой цепи IgG4 человека, который приведен в индексе EU по Kabat et al., supra, заменен на лизин, треонин, метионин или лейцин, предпочтительно на лизин (как описано в WO 2006033386), и/или в которых шарнирный участок содержит последовательность Cys-Pro-Pro-Cys. Другие подходящие стабилизированные антитела типа IgG4 приведены в WO 2008145142, включенной сюда путем ссылки во всей полноте.
В одном воплощении стабилизированное специфичное к CD74 антитело IgG4 представлено антителом IgG4, содержащим тяжелую цепь и легкую цепь, причем тяжелая цепь содержит константную область IgG4 человека, содержащую остаток, выбранный из группы, состоящей из Lys, Ala, Thr, Met и Leu, в положении, соответствующем 409, и/или остаток, выбранный из группы, состоящей из Ala, Val, Gly, Ile и Leu, в положении, соответствующем 405, и при этом антитело необязательно содержит одну или несколько дополнительных замен, делеций и/или вставок, но не содержит последовательность Cys-Pro-Pro-Cys в шарнирной области. Предпочтительно данное антитело содержит остаток Lys или Ala в положении, соответствующем 409, или же область CH3 антитела была заменена на область CH3 IgG1 человека, IgG2 человека или IgG3 человека.
В другом воплощении стабилизированное специфичное к CD74 антитело IgG4 представлено антителом IgG4, содержащим тяжелую цепь и легкую цепь, причем тяжелая цепь содержит константную область IgG4 человека, содержащую остаток, выбранный из группы, состоящей из Lys, Ala, Thr, Met и Leu, в положении, соответствующем 409, и/или остаток, выбранный из группы, состоящей из Ala, Val, Gly, Ile и Leu, в положении, соответствующем 405, и при этом антитело необязательно содержит одну или несколько дополнительных замен, делеций и/или вставок, а также содержит последовательность Cys-Pro-Pro-Cys в шарнирной области. Предпочтительно данное антитело содержит остаток Lys или Ala в положении, соответствующем 409, или же область CH3 антитела была заменена на область CH3 IgG1 человека, IgG2 человека или IgG3 человека.
В другом воплощении специфичное к CD74 антитело представлено антителом другого типа, чем IgG4, например, IgG1, IgG2 или IgG3, которое было подвергнуто мутации с тем, чтобы уменьшить или даже устранить способность к выполнению эффекторных функций типа ADCC. Такие мутации описаны, например, в Dall'Acqua WF et al., J Immunol. 177(2):1129-1138 (2006); и Hezareh M, J Virol. 75(24):12161-12168 (2001).
В одном воплощении соответствующие изотипы и/или последовательности константных (Fc) областей двух тяжелых цепей одинаковы. В другом воплощении соответствующие изотипы и/или последовательности константных (Fc) областей двух тяжелых цепей одного и того же специфичного к CD74 антитела отличаются. Это особенно применимо к мультиспецифическим, например, биспецифическим, специфичным к CD74 антителам, которые описаны более подробно ниже.
В другом аспекте антитело представлено антигенсвязывающим фрагментом. Фрагменты антител могут быть получены стандартными методами, как то путем фрагментирования полноразмерных антител или экспрессирования нуклеиновых кислот, кодирующих фрагменты антитела в рекомбинантных клетках (например, см. Evans et al., J. Immunol. Meth. 184, 123-38 (1995)). Затем эти фрагменты можно протестировать или подвергнуть скринингу на их свойства таким же образом, как описано здесь для полноразмерных антител. Далее описаны типичные форматы для специфичных к CD74 антигенсвязывающих фрагментов по изобретению:
F(ab')2-фрагменты, которые являются бивалентными фрагментами, содержащими два Fab-фрагмента, соединенные дисульфидным мостиком в шарнирном участке. Они могут быть получены, например, при обработке полноразмерных антител пепсином.
Fab'- или Fab-фрагменты являются моновалентными фрагментами, состоящими из доменов VL, VH, CL и CH1. Fab-фрагменты могут быть получены, например, при обработке антител типа IgG папаином. Fab'-фрагменты могут быть получены, например, при восстановлении дисульфидных мостиков F(ab')2-фрагмента с помощью восстанавливающего реагента типа дитиотреитола.
Моновалентные антитела или "половинки молекул антител", которые существуют в водных растворах в виде гетеродимера одной легкой и одной тяжелой цепи, описаны в WO 2007059782 (Genmab A/S).
Fd-фрагменты, которые в основном состоят из доменов VH и CH1.
Fv-фрагменты, которые в основном состоят из доменов VL и VH одного плеча антитела, и состоящие из них одноцепочечные антитела. Одноцепочечные антитела (также известны как одноцепочечные Fv-антитела (scFv)) представляют собой такие конструкции, в которых домены VL и VH Fv-фрагмента соединены рекомбинантными методами с помощью синтетического линкера, что позволяет им экспрессироваться в виде единой белковой цепи, в которой области VL и VH подвергаются спариванию с образованием моновалентных молекул (например, см. Bird et al., Science 242, 423-426 (1988); и Huston et al., PNAS USA 85, 5879-5883 (1988)).
Доменные антитела (их также называют фрагментами dAb), которые состоят в основном из домена VH (например, см. Ward et al., Nature 341, 544-546 (1989); Holt et al., Trends Biotechnol. 2003, 21(11):484-90).
Другие примеры форматов включают камелиды или нанотела (например, см. Revets et al., Expert Opin Biol Ther. 2005, 5(1):111-24).
Мультиспецифические форматы антител
В следующем воплощении изобретения предусмотрены мультиспецифические антитела, содержащие первый антигенсвязывающий сайт из молекулы специфичного к CD74 антитела, описанного выше, и по меньшей мере один второй антигенсвязывающий сайт.
В предпочтительном воплощении второй антигенсвязывающий сайт используется для мобилизации механизма уничтожения, такого, к примеру, как связывание антигена на эффекторных клетках человека или связывание цитотоксического средства или второго терапевтического средства. Примеры эффекторных клеток включают Т-клетки, как то, к примеру, цитолитические Т-клетки (CTL), нормальные клетки-киллеры (NK), макрофаги, моноциты, тучные клетки и гранулоциты, как то, к примеру, нейтрофилы, эозинофилы и базофилы. Примеры антигенов эффекторных клеток включают, без ограничения, CD1, CD3, CD4, CD8, CD16, CD25, CD28, CD32, CD40, CD64, CD89, FcεRI и HLA-DR. Подходящие цитотоксические средства и вторые терапевтические средства представлены ниже и включают токсины (типа радиоактивно меченых пептидов), химиотерапевтические средства и пролекарства.
В другом предпочтительном воплощении второй антигенсвязывающий сайт связывается с антигеном на В-клетках человека, таким, например, как CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD46, CD80, CD138 и HLA-DR.
В другом предпочтительном воплощении второй антигенсвязывающий сайт связывается с тканеспецифическим антигеном, способствуя локализации биспецифического антитела в определенной ткани.
В другом предпочтительном воплощении второй антигенсвязывающий сайт связывается с антигеном, расположенным на клетках того же типа, что и экспрессирующие CD74 клетки, как правило, со связанным с опухолью антигеном (ТАА), но обладает другой специфичностью связывания, чем у первого антигенсвязывающего сайта. Такие мульти- или биспецифические антитела могут повысить специфичность связывания опухолевых клеток и/или задействовать несколько эффекторных путей. Примеры TAAs включают карциноэмбриональный антиген (СЕА), специфический антиген предстательной железы (PSA), RAGE (почечный антиген), α-фетопротеин, CAMEL (распознаваемый CTL антиген на меланоме), антигены СТ (как то MAGE-B5, -В6, -С2, -С3 и D; Mage-12; CT10; NY-ESO-1, SSX-2, GAGE, BAGE, MAGE и SAGE), антигены муцинов (например, MUC1, муцин-СА125 и др.), антигены ганглиозидов, тирозиназу, gp75, c-Met, C-myc, Mart1, MelanA, MUM-1, MUM-2, MUM-3, HLA-B7, Ep-CAM или связанный с раком интегрин, как то интегрин α5β3. С другой стороны, второй антигенсвязывающий сайт может связываться с другим эпитопом CD74. Второй антигенсвязывающий сайт также может связываться с ангиогенным фактором или другим связанным с раком фактором роста, таким как фактор роста сосудистого эндотелия, фактор роста фибробластов, фактор роста эпидермиса, ангиогенин, или с рецептором любого их них, предпочтительно с рецептором, связанным с прогрессированием рака.
В другом предпочтительном воплощении второй антигенсвязывающий сайт происходит из второго специфичного к CD74 антитела, как то специфичного к CD74 антитела по изобретению.
Типичные форматы для молекул мультиспецифических антител включают, без ограничения, (i) два антитела, перекрестно связанные посредством химической гетероконъюгации, причем одно обладает специфичностью к CD74, а другое - ко второму антигену; (ii) одно антитело, которое содержит два различных антигенсвязывающих участка; (iii) одноцепочечное антитело, которое содержит два различных антигенсвязывающих участка, например, два scFvs соединяются в виде тандема дополнительным пептидным линкером; (iv) антитело с двойным вариабельным доменом (DVD-Ig), в котором каждая легкая цепь и тяжелая цепь содержит по два вариабельных домена в тандеме через короткую пептидную связь (Wu et al., Generation and characterization of a dual variable domain immunoglobulin (DVD-Ig™) molecule, In: Antibody Engineering, Springer Berlin Heidelberg (2010)); (v) химически связанный биспецифический (Fab')2-фрагмент; (vi) Tandab, которое представляет собой слияние двух одноцепочечных диател с образованием тетравалентного биспецифического антитела, содержащего по два сайта связывания для каждого из антигенов-мишеней; (vii) флекситело, которое представляет собой сочетание scFvs с диателом с образованием поливалентной молекулы; (viii) так называемая молекула "dock and lock" на основе "домена димеризации и посадки" в протеинкиназе А, которая, в применении к Fabs, может образовать трехвалентный биспецифичный связывающий белок, состоящий из двух идентичных Fab-фрагментов, соединенных с другим Fab-фрагментом; (ix) так называемая молекула-скорпион, содержащая, например, два scFvs, слитые с обоими концами Fab-плеча человека; и (х) диатело.
Другим типичным форматом для биспецифических антител являются IgG-подобные молекулы с комплементарными доменами CH3, что вызывает образование гетеродимеров. Такие молекулы могут быть получены известными методами, такими, например, как технологии Triomab/Quadromab (Trion Pharma/Fresenius Biotech), Knob-into-Hole (Genentech), CrossMAb (Roche), электростатическое совмещение (Amgen), LUZ-Y (Genentech), Strand Exchange Engineered Domain body (SEEDbody) (EMD Serono), Biclonic (Merus) и DuoBody (Genmab A/S).
В одном воплощении биспецифические антитела получают путем контролируемого обмена Fab-плечами, обычно по технологии DuoBody. Методы получения биспецифических антител in vitro посредством контролируемого обмена Fab-плечами были описаны в WO 2008119353 и WO 2011131746 (оба на Genmab A/S). В одном типичном методе, описанном в WO 2008119353, биспецифическое антитело образуется при обмене "Fab-плечами" или "половинками молекул" (обменивается тяжелая цепь и соединенная с ней легкая цепь) между двумя моноспецифическими антителами, которые оба содержат IgG4-подобные участки CH3, при инкубации в восстановительных условиях. Полученный продукт представляет собой биспецифическое антитело, содержащее два Fab-плеча, которые могут иметь различные последовательности. В другом типичном методе, описанном в WO 2011131746, биспецифические антитела настоящего изобретения получают способом, включающим следующие этапы, причем по меньшей мере одно из первого и второго антител является антителом к CD74 по настоящему изобретению:
a) получение первого антитела, содержащего область Fc иммуноглобулина, причем данная область Fc содержит первый участок CH3;
b) получение второго антитела, содержащего область Fc иммуноглобулина, причем данная область Fc содержит второй участок CH3;
при этом последовательности первого и второго участка CH3 отличаются и таковы, что гетеродимерное взаимодействие между первым и вторым участками CH3 будет сильнее, чем каждое из гомодимерных взаимодействий первого и второго участков CH3;
c) инкубирование первого антитела вместе со вторым антителом в восстановительных условиях; и
d) получение биспецифического антитела,
при этом первое антитело представляет собой антитело к CD74 по настоящему изобретению, а второе антитело обладает другой специфичностью связывания, либо наоборот.
Восстановительные условия могут быть обеспечены, к примеру, добавлением восстановительного реагента, например, из числа 2-меркаптоэтиламина, дитиотреитола и трис-(2-карбоксиэтил)фосфина. Стадия d) может дополнительно включать возврат к невосстановительным или менее восстановительным условиям, например, посредством удаления восстановительного реагента, например, обессоливанием.
Предпочтительно последовательности первого и второго участка CH3 отличаются, включая лишь несколько довольно консервативных, асимметрических мутаций с тем, чтобы гетеродимерное взаимодействие между первым и вторым участками CH3 было сильнее, чем каждое из гомодимерных взаимодействий первого и второго участков CH3. Более подробно об этих взаимодействиях и как они могут осуществляться изложено в WO 2011131746, включенной сюда путем ссылки во всей полноте. Далее приведены типичные воплощения сочетаний таких асимметрических мутаций, при этом необязательно одна или обе области Fc относятся к изотипу IgG1.
В одном воплощении первая область Fc содержит аминокислотную замену в положении, выбранном из группы, состоящей из 366, 368, 370, 399, 405, 407 и 409, а вторая область Fc содержит аминокислотную замену в положении, выбранном из группы, состоящей из 366, 368, 370, 399, 405, 407 и 409, причем первая и вторая области Fc не содержат замен в одинаковых положениях.
В одном воплощении первая область Fc содержит аминокислотную замену в положении 405, а вторая область Fc содержит аминокислотную замену в положении, выбранном из группы, состоящей из 366, 368,370, 399,407 и 409, необязательно 409.
В одном воплощении первая область Fc содержит аминокислотную замену в положении 409, а вторая область Fc содержит аминокислотную замену в положении, выбранном из группы, состоящей из 366, 368, 370, 399, 405 и 407, необязательно 405 или 368.
В предпочтительном воплощении первая и вторая области Fc относятся к изотипу IgG1, при этом первая область Fc содержит Leu в положении 405, а вторая область Fc содержит Arg в положении 409.
Конъюгаты
Настоящим изобретением предусмотрены специфичные к CD74 антитела, конъюгированные с терапевтической молекулой, т.е. лекарственным препаратом. Терапевтической молекулой может быть, например, цитотоксин, химиотерапевтическое средство, цитокин, иммунодепрессант, иммуностимулятор, литический пептид или радиоизотоп. Такие конъюгаты именуются здесь "конъюгатами антитело-препарат" или "ADCs".
Соответственно, в одном аспекте антитело по любому из вышеприведенных аспектов или воплощений конъюгировано с терапевтической молекулой. Примеры терапевтических молекул включают цитотоксические молекулы, радиоизотопы, цитокины и литические пептиды.
В одном воплощении антитело способно индуцировать цитотоксичность на клетках Raji при интернализации антитела, конъюгированного или связанного с терапевтической молекулой, в клетках Raji, например, как описано в примере 14 или при аналогичном типе определения. В одном воплощении антитело индуцирует цитотоксичность при интернализации, как описано в примере 14, со значением ЕС50 от 25 нг/мл до 60 нг/мл, как то от 25 нг/мл до 30 нг/мл, или со значением ЕС50 менее 60 нг/мл, как то менее 40 нг/мл или менее 30 нг/мл, при индуцировании гибели клеток Raji при определении методом анти-каппа-ЕТА'. В другом воплощении ADC по настоящему изобретению вызывает цитотоксичность со значением ЕС50 менее 10 нг/мл, как то менее 5 нг/мл, менее 1 нг/мл, менее 0,5 нг/мл или менее 0,1 нг/мл при индуцировании гибели клеток Raji или других экспрессирующих CD74 клеток.
В одном воплощении антитело конъюгировано с цитотоксической молекулой. Цитотоксическая молекула может быть выбрана, к примеру, из группы, состоящей из таксола; цитохалазина В; грамицидина D; бромистого этидия; эметина; митомицина; этопозида; тенопозида; винкристина; винбластина; колхицина; доксорубицина; даунорубицина; дигидроксиантрациндиона; ингибиторов тубулина типа майтансина либо его аналогов или производных; антимитотических средств типа монометилауристатина Е или F либо их аналогов или производных; доластатина-10 или -15 либо их аналогов; иринотекана либо его аналогов; митоксантрона; митрамицина; актиномицина D; 1-дегидротестостерона; глюкокортикоидов; прокаина; тетракаина; лидокаина; пропранолола; пуромицина; калихеамицина либо его аналогов или производных; антиметаболитов типа метотрексата, 6-меркаптопурина, 6-тиогуанина, цитарабина, флударабина, 5-фторурацила, декарбазина, гидроксимочевины, аспарагиназы, гемцитабина или кладрибина; алкилирующих агентов типа мехлорэтамина, тиоэпа, хлорамбуцила, мелфалана, кармустина (BSNU), ломустина (CCNU), циклофосфамида, бусульфана, дибромманнитола, стрептозотоцина, дакарбазина (DTIC), прокарбазина, митомицина С; производных платины типа цисплатина или карбоплатина; дуокармицина А, дуокармицина SA, рахелмицина (СС-1065) либо их аналогов или производных; антибиотиков типа дактиномицина, блеомицина, даунорубицина, доксорубицина, идарубицина, митрамицина, митомицина, митоксантрона, пликамицина, антрамицина (АМС)); пирроло[2,1-с][1,4]-бензодиазепинов (PDB); дифтерийного токсина и родственных молекул типа цепи А дифтерийного токсина и ее активных фрагментов и гибридных молекул, рицинового токсина типа рицина А или дегликозилированной цепи А рицинового токсина, холерного токсина, Шига-подобных токсинов типа SLT I, SLT II, SLT IIV, токсина LT, токсина С3, Шига-токсина, коклюшного токсина, столбнячного токсина, соевого ингибитора протеаз Боуман-Бирка, экзотоксина Pseudomonas, алорина, сапорина, модекцина, геланина, цепи А абрина, цепи А модекцина, альфа-сарцина, белков Aleurites fordii, белков диантина, белков Phytolacca americana типа PAPI, PAPII и PAP-S, ингибитора из Momordica charantia, курцина, кротина, ингибитора из Sapaonaria officinalis, токсинов гелонина, митогеллина, рестриктоцина, феномицина и еномицина; рибонуклеазы (РНКазы); ДНКазы I, стафилококкового энтеротоксина А; противовирусного белка лаконоса; дифтерийного токсина; и эндотоксина Pseudomonas.
В одном воплощении антитело конъюгировано с ауристатином или его пептидным аналогом, производным или пролекарством. Было показано, что ауристатины влияют на динамику микротрубочек, гидролиз ГТФ и деление ядер и клеток (Woyke et al. (2001) Antimicrob. Agents and Chemother. 45(12):3580-3584) и обладают противораковой (US 5663149) и противогрибковой активностью (Pettit et al. (1998) Antimicrob. Agents and Chemother. 42:2961-2965). Например, ауристатин Е может реагировать с пара-ацетилбензойной кислотой или бензоилвалериановой кислотой с образованием АЕВ и AEVB, соответственно. Другие типичные производные ауристатинов включают AFP, MMAF (монометилауристатин F) и ММАЕ (монометилауристатин Е). Подходящие ауристатины и аналоги, производные и пролекарства ауристатинов, а также подходящие линкеры для конъюгирования ауристатонов с Abs описаны, например, в U.S. Patent Nos. 5,635,483, 5,780,588 и 6,214,345 и в International patent application publications WO 02088172, WO 2004010957, WO 2005081711, WO 2005084390, WO 2006132670, WO 03026577, WO 200700860, WO 207011968 и WO 205082023.
В одном воплощении антитело конъюгировано с пирроло[2,1-с][1,4]-бензодиазепином (PDB) либо его аналогом, производным или пролекарством. Подходящие PDBs и производные PDB и связанные с ними методы описаны, например, в Hartley J.A. et al., Cancer Res 2010, 70(17):6849-6858; Antonow D. et al., Cancer J 2008, 14(3):154-169; Howard P.W. et al., Bioorg Med Chem Lett 2009, 19:6463-6466; и Sagnou et al., Bioorg Med Chem Lett 2000, 10(18):2083-2086.
В одном воплощении антитело конъюгировано с цитотоксической молекулой, выбранной из группы, состоящей из антрациклина, майтансина, калихеамицина, дуокармицина, рахелмицина (СС-1065), доластатина-10, доластатина-15, иринотекана, монометилауристатина Е, монометилауристатина F, PDB либо их аналогов, производных или пролекарств.
В предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с антрациклином либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с майтансином либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с калихеамицином либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с дуокармицином либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с рахелмицином (СС-1065) либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с дуокармицином либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с доластатином-10 либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с доластатином-15 либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с монометилауристатином Е либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с монометилауристатином F либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с пирроло[2,1-с][1,4]-бензодиазепином либо его аналогом, производным или пролекарством. В другом предпочтительном воплощении антитело конъюгировано с иринотеканом либо его аналогом, производным или пролекарством.
В одном воплощении специфичное к CD74 антитело настоящего изобретения конъюгировано с нуклеиновой кислотой или с молекулой, связанной с нуклеиновой кислотой. В одном таком воплощении конъюгируемая нуклеиновая кислота представлена цитотоксической рибонуклеазой (РНКазой) или дезоксирибонуклеазой (например, ДНКазой I), антисмысловой нуклеиновой кислотой, ингибиторной молекулой РНК (например, молекулой siPHK) или иммуностимулирующей нуклеиновой кислотой (например, иммуностимулирующей молекулой ДНК, содержащей мотив CpG). В другом воплощении специфичное к CD74 антитело настоящего изобретения конъюгировано с аптамером или рибозимом.
В одном воплощении специфичное к CD74 антитело настоящего изобретения конъюгировано, например, в виде слитого белка, с таким литическим пептидом, как CLIP, магайнин 2, меллитин, цекропин или Р18.
В одном воплощении антитело конъюгировано с цитокином, таким, например, как IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-10, IL-12, IL-13, IL-15, IL-18, IL-23, IL-24, IL-27, IL-28a, IL-28b, IL-29, KGF, IFNα, IFNβ, IFNγ, GM-CSF, CD40L, лиганд Flt3, фактор стволовых клеток, анцестим или TNFα.
В одном воплощении антитело конъюгировано с радиоизотопом или содержащим радиоизотоп хелатом. Например, антитело может быть конъюгировано с хелаторным линкером, например, DOTA, DTPA или тиуксетаном, что позволяет образование комплекса антитела с радиоизотопом. Антитело также может содержать или же быть конъюгированным с одной или несколькими радиоактивно мечеными аминокислотами или другими радиоактивно мечеными молекулами. Радиоактивно меченое специфичное к CD74 антитело может использоваться для диагностических и терапевтических целей. Неограничивающие примеры радиоизотопов включают 3H, 14C, 15N, 35S, 90Y, 99Tc, 125I, 111In, 131I, 186Re, 213Bi, 225Ac и 227Th. Для терапевтических целей можно использовать радиоизотопы, излучающие бета- или альфа-частицы, например, 131I, 90Y, 211At, 212Bi, 67Cu, 186Re, 188Re и 212Pb.
В качестве терапевтических молекул, применимых для конъюгации с антителом настоящего изобретения, могут служить и такие терапевтические средства, которые могут вводиться в комбинации со специфичным к CD74 антителом настоящего изобретения, как описано здесь, например, химиотерапевтические средства, противораковые цитокины или хемокины.
Специфичное к CD74 антитело настоящего изобретения также может быть подвергнуто химической модификации путем ковалентной конъюгацией с полимером, например, для увеличения времени полу жизни в кровотоке. Типичные полимеры и способы присоединения их к полипептидам представлены, к примеру, в US 4,766,106, US 4,179,337, US 4,495,285 и US 4,609,546. Дополнительные полимеры включают полиоксиэтилированные полиоли и полиэтиленгликоли (ПЭГ) (например, ПЭГ с молекулярным весом от 1000 до 40000, как то от 2000 до 20000).
Терапевтическое или другое средство можно конъюгировать со специфичным к CD74 антителом настоящего изобретения прямо или косвенно, в соответствии с известными методами. Одним из примеров косвенной конъюгации второго средства является конъюгация через молекулу спейсера с остатком цистеина или лизина у антитела. Терапевтическая или иная молекула также может быть конъюгирована с N-(амино-)концевым или С-(карбокси-)концевым остатком полипептида специфичного к CD74 антитела или его фрагмента (например, тяжелой или легкой цепи специфичного к CD74 антитела) (например, см. Antibody Engineering Handbook, edited by Osamu Kanemitsu, published by Chijin Shokan (1994)). Конъюгированные производные антител также могут быть получены путем конъюгирования по внутренним остаткам или сахарам, где это уместно. Типичные методы также описаны, например, в Hunter et al., Nature 144, 945 (1962); David et al., Biochemistry 13, 1014 (1974); Pain et al., J. Immunol. Meth. 40, 219 (1981); и Nygren J. Histochem. and Cytochem. 30, 407 (1982).
В одном воплощении специфичное к CD74 антитело конъюгировано через спейсер или линкер с молекулой пролекарства, которое может активироваться in vivo до терапевтического препарата. Например, молекула пролекарства может присоединяться к антителу посредством линкера через N- или С-конец пептидной или непептидной молекулы препарата. После введения спейсер или линкер расщепляется связанными с раковыми клетками ферментами или другими специфическими для опухоли условиями, при которых образуется активный препарат. Примеры таких технологий пролекарств и линкеров описаны в WO 02083180, WO 2004043493, WO 2007018431, WO 2007089149, WO 2009017394 и WO 201062171 от Syntarga BV et al. (все они включены сюда путем ссылки). Подходящие технологии антитела-пролекарства и аналоги дуокармицина также приведены в U.S. Patent No. 6,989,452 (Medarex) (включенном сюда путем ссылки). Подходящие технологии пролекарств для ауристатинов описаны в WO 03026577 (Seattle Genetics) и в других ссылках по ауристатинам, приведенным выше.
В одном воплощении специфичное к CD74 антитело конъюгируют с терапевтической молекулой или пролекарством через линкер, чувствительный к изменениям рН или восстановительным условиям. Подходящие технологии линкеров известны в данной области и включают те, что описаны, например, в Ducry L and Stump, Bioconjugate Chem. 2010, 21:5-13; Senter P.D., Current Opinion in Chemical Biology 2009, 13:235-244; и Carter P.J. and Senter P.D., The Cancer Journal 2010, 14:154-169.
В некоторых воплощениях линкер расщепляется при внутриклеточных условиях таким образом, что при расщеплении линкера лекарственный препарат высвобождается из антитела во внутриклеточную среду. В некоторых воплощениях линкер расщепляется расщепляющим агентом, находящимся во внутриклеточной среде (например, внутри лизосом или эндосом или кавеол). Линкером может быть, например, пептидильный линкер, который расщепляется внутриклеточным ферментом пептидазой или протеазой, включая, без ограничения, лизосомные или эндосомные протеазы. В некоторых воплощениях длина пептидильного линкера составляет по меньшей мере две аминокислоты или по меньшей мере три аминокислоты. Расщепляющие агенты могут включать катепсины В и D и плазмин, которые все, как известно, гидролизуют дипептидные производные лекарств с высвобождением активного препарата внутри клеток мишени (например, см. Dubowchik and Walker, 1999, Pharm. Therapeutics 83:67-123). В конкретном воплощении пептидильный линкер, расщепляемый внутриклеточной протеазой, представлен линкером Val-Cit (валин-цитруллин) или линкером Phe-Lys (фенилаланин-лизин) (например, см. US6214345, в котором описан синтез доксорубицина с линкером Val-Cit и различные примеры линкеров Phe-Lys). Примеры структур линкеров Val-Cit и Phe-Lys включают, без ограничения, MC-vc-PAB, описанный ниже, MC-vc-GABA, MC-Phe-Lys-PAB или MC-Phe-Lys-GABA, при этом сокращение МС или те означает малеимидокапроил, vc означает Val-Cit, РАВ - п-аминобензилкарбамат, a GABA - γ-аминомасляная кислота. Преимущество внутриклеточного протеолитического высвобождения терапевтического средства состоит в том, что такое средство обычно ослабляется при конъюгации, а стабильность конъюгатов в сыворотке обычно высока.
В следующем воплощении звено линкера не расщепляется, а препарат высвобождается при деградации антитела (например, см. US 2005/0238649). Как правило, такой линкер практически не чувствителен к внеклеточной среде. "Практически не чувствителен к внеклеточной среде" в применении к линкеру означает то, что в образце конъюгата антитело-препарат при нахождении конъюгата во внеклеточной среде (например, в плазме) расщепляется не более 20%, обычно не более 15%, предпочтительно не более 10% и еще более предпочтительно не более 5%, не более 3% или не более 1% линкеров. Будет ли линкер практически не чувствительным к внеклеточной среде, можно определить, к примеру, путем инкубации конъюгата антитело-препарат с плазмой в течение заданного промежутка времени (например, 2, 4, 8, 16 или 24 ч) с последующим количественным определением свободного препарата, присутствующего в плазме.
В одном конкретном воплощении специфичное к CD74 антитело конъюгировано с ММАЕ (формула I):
где волнистой линией обозначено место ковалентного присоединения линкера.
В одном конкретном воплощении специфичное к CD74 антитело конъюгировано с MMAF (формула II):
где волнистой линией обозначено место ковалентного присоединения линкера.
В предпочтительном воплощении линкер присоединяется к ММАЕ или MMAF по сульфгидрильным группам (свободным остаткам цистеина) специфичного к CD74 антитела, полученным при (частичном) восстановлении специфичного к CD74 антитела.
В другом предпочтительном воплощении линкер-ауристатин представлен MC-vc-PAB-MMAF (также обозначается как vcMMAF) или MC-vc-PAB-MMAE (также обозначается как vcMMAE (формула III и IV, соответственно):
где p означает число от 1 до 8, S означает свободный тиол остатка цистеина специфичного к CD74 антитела, a Ab - специфичное к CD74 антитело.
В одном воплощении линкер-ауристатин представлен vcMMAE. Молекула препарата-линкера vcMMAE и способы конъюгации изложены в WO 2004010957, US 7659241, US 7829531, US 7851437 и US 11/833028 (Seattle Genetics, Inc.), которые включены сюда путем ссылки, причем молекулы препарата-линкера vcMMAE можно присоединять к специфичным к CD74 антителам по цистеинам с помощью способа, аналогичного тому, что приведен в них.
В другом предпочтительном воплощении линкер-конъюгат представлен mcMMAF (формула V):
где p означает число от 1 до 8, S означает свободный тиол остатка цистеина специфичного к CD74 антитела, a Ab - специфичное к CD74 антитело.
Молекула препарата-линкера vcMMAF и способы конъюгации изложены в US 7498298, US 11/833954 и WO 2005081711 (Seattle Genetics, Inc.), которые включены сюда путем ссылки, причем молекулы препарата-линкера vcMMAF можно присоединять к специфичным к CD74 антителам по цистеинам с помощью способа, аналогичного тому, что приведен в них.
В одном аспекте изобретения предусмотрены специфичные к CD74 ADCs, включающие антитело, связывающееся с тем же эпитопом, что и антитело из числа 005, 006, 008 и 011, и препарат, который представлен ауристатином либо его аналогом, производным или пролекарством. В одном воплощении значение ЕС50 У ADC при связывании с внеклеточным доменом CD47v1 составляет менее 0,2 мкг/мл, как то менее 0,1 мкг/мл или менее 0,05 мкг/мл, и необязательно более 0,01 мкг/мл, как то более 0,02 мкг/мл при определении способом, описанным в примере 16. В одном воплощении специфичные к CD74 ADCs индуцируют гибель более 70%, 80% или 90% клеток при измерении на клетках Raji, Daudi или М4А4 способом, описанным в примере 18. В одном воплощении у специфичных к CD74 ADCs значение IC50 при индукции гибели клеток Raji, Daudi или М4А4 составляет менее 0,5 мкг/мл, менее 0,3 мкг/мл, менее 0,2 мкг/мл или менее 0,1 мкг/мл и необязательно более 0,005 мкг/мл или около 0,01 мкг/мл при определении способом, описанным в примере 18. В одном воплощении антитело содержит по меньшей мере CDR3 VH, как то CDR1 или 2 и 3 VH, необязательно CDR1, 2 и 3 VH, и CDR1, 2 и 3 VL антитела 005, описанные в таблице 3. В одном воплощении антитело содержит по меньшей мере CDR3 VH, как то CDR1 или 2 и 3 VH, необязательно CDR1, 2 и 3 VH, и CDR1, 2 и 3 VL антитела 006, описанные в таблице 3. В одном воплощении антитело содержит по меньшей мере CDR3 VH, как то CDR1 или 2 и 3 VH, необязательно CDR1, 2 и 3 VH, и CDR1, 2 и 3 VL антитела 011, описанные в таблице 3. В одном воплощении лекарственный препарат представлен производным монометилауристатина, необязательно выбранным из ММАЕ и MMAF.
В одном аспекте изобретения предусмотрены специфичные к CD74 ADCs, включающие антитело, содержащее последовательности CDR, VH и/или VL антитела, выбранного из группы, состоящей из 005, 006 и 011, и препарат, выбранный из ММАЕ и MMAF. В одном воплощении антитело представлено 005. В одном воплощении антитело представлено 006. В одном предпочтительном воплощении антитело представлено 011. В одном предпочтительном воплощении антитело представлено 005, а препарат - ММАЕ, необязательно vcMMAE. В одном предпочтительном воплощении антитело представлено 005, а препарат - MMAF, необязательно mcMMAF. В одном предпочтительном воплощении антитело представлено 006, а препарат - ММАЕ, необязательно vcMMAE. В одном предпочтительном воплощении антитело представлено 006, а препарат - MMAF, необязательно mcMMAF. В одном предпочтительном воплощении антитело представлено 011, а препарат - ММАЕ, необязательно vcMMAE. В одном предпочтительном воплощении антитело представлено 011, а препарат - MMAF, необязательно mcMMAF.
В конкретных и отдельных воплощениях изобретения предусмотрены следующие специфичные к CD74 ADCs: 011-vcMMAE, 006-vcMMAE, 005-vcMMAE, 011-mcMMAF, 006-mcMMAF и 005-mcMMAF.
Нагруженность цитостатическим препаратом представлена p, что означает среднее число молекул цитостатического препарата на антитело в молекуле (также обозначается как соотношение препарата к антителу, DAR). Нагруженность цитостатическим препаратом может составлять от 1 до 20 молекул препарата на антитело и может приходиться на аминокислоты с полезными функциональными группами, такими, без ограничения, как амино- или сульфгидрильные группы, как у лизина или цистеина.
В зависимости от способа конъюгации, p может быть ограничено числом мест прикрепления на антителе, например, при присоединении по тиоловым группам цистеина, т.е. по сульфгидрильным группам. Обычно антитела содержат не много свободных и реактивных тиоловых групп цистеина, т.е. сульфгидрильных групп, по которым могут присоединяться молекулы препарата, так как большинство тиоловых групп цистеина в антителах находится в виде дисульфидных мостиков. Поэтому в некоторых воплощениях антитело можно подвергнуть восстановлению с помощью таких восстановителей, как дитиотреитол (DTT) или трикарбонилэтилфосфин (ТСЕР), при частично или полностью восстановительных условиях, чтобы получить реактивные сульфгидрильные группы. В некоторых воплощениях нагруженность препаратом у ADC по изобретению составляет от 1 до 8, как то от 2 до 5 или от 3 до 5, как то 4. После (частичного) восстановления антитела становятся доступными максимум 8 свободных сульфгидрильных групп (именно 8 цистеинов задействовано в образовании межцепочечных дисульфидных связей).
Экспрессирующие конструкции
В следующих отдельных аспектах изобретение касается нуклеиновых кислот, кодирующих последовательности антител по изобретению, экспрессирующих векторов, кодирующих последовательности антител по изобретению, клеток хозяина, содержащих такие экспрессирующие векторы, гибридом, продуцирующих антитела по изобретению, и способов получения антител по изобретению путем культивирования таких клеток хозяина или гибридом в соответствующих условиях, при этом вырабатываются антитела, которые необязательно извлекаются.
В одном воплощении изобретения предусмотрен экспрессирующий вектор, содержащий последовательность нуклеотидов, кодирующую одну или несколько аминокислотных последовательностей, выбранных из SEQ ID NOs:7-26. В одном воплощении экспрессирующий вектор содержит одну или несколько последовательностей нуклеотидов, кодирующих одну или несколько аминокислотных последовательностей, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NOs:7, 11, 15, 19, 23 и 26, или любые комбинации из них. В другом воплощении экспрессирующий вектор содержит последовательность нуклеотидов, кодирующую одну или несколько аминокислотных последовательностей CDR3 VH по SEQ ID NOs:10, 14, 18 или 22. В другом воплощении экспрессирующий вектор содержит последовательность нуклеотидов, кодирующую аминокислотную последовательность VH, выбранную из SEQ ID NOs:7, 11, 15 и 19. В другом воплощении экспрессирующий вектор содержит последовательность нуклеотидов, кодирующую аминокислотную последовательность VL, выбранную из SEQ ID NOs:23 и 26. В другом воплощении экспрессирующий вектор дополнительно содержит последовательность нуклеотидов, кодирующую константную область легкой цепи антител человека, тяжелой цепи антител человека или обеих цепей.
В предпочтительном воплощении экспрессирующий вектор изобретения содержит последовательность нуклеотидов, кодирующую варианты одной или нескольких вышеприведенных аминокислотных последовательностей, причем эти варианты содержат не более 25 модификаций аминокислот, как то не более 20, как то не более 15, 14, 13, 12 или 11 модификаций аминокислот, как то 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 модификацию аминокислот типа делеций или вставок, предпочтительно замен, как то консервативных замен, или они по меньшей мере на 80% идентичны любой из этих последовательностей, как то по меньшей мере на 85% или на 90% или на 95% идентичны, как то на 96% или на 97% или на 98% или на 99% идентичны любой из вышеприведенных аминокислотных последовательностей.
Экспрессирующим вектором в контексте настоящего изобретения может быть любой подходящий вектор, включая векторы из хромосомной, нехромосомной и синтетической нуклеиновой кислоты (последовательности нуклеиновой кислоты, содержащей подходящий набор контролирующих экспрессию элементов). Примеры таких векторов включают производные SV40, бактериальные плазмиды, фаговые ДНК, бакуловирусы, дрожжевые плазмиды, векторы, происходящие из комбинации плазмид и фаговой ДНК, и векторы из вирусной нуклеиновой кислоты (РНК или ДНК). В одном воплощении нуклеиновая кислота, кодирующая специфичное к CD74 антитело, содержится в векторе из "голой" ДНК или РНК, включая, к примеру, линейные экспрессирующие элементы (как описано, к примеру, в Sykes and Johnston, Nat Biotech 17, 355-59 (1997)), векторы из сжатой нуклеиновой кислоты (как описано, к примеру, в US 6,077, 835 и/или WO 00/70087), плазмидные векторы типа pBR322, pUC 19/18 или pUC 118/119, векторы из нуклеиновой кислоты минимального размера "midge" (как описано, к примеру, в Schakowski et al., Mol Ther 3, 793-800 (2001)), или в виде осажденной векторной конструкции из нуклеиновой кислоты, например, осажденной CaPO4 - конструкции (как описано, к примеру, в WO 00/46147; Benvenisty and Reshef, PNAS USA 83, 9551-55 (1986); Wigler et al., Cell 14, 725 (1978); и Coraro and Pearson, Somatic Cell Genetics 7, 603 (1981)). Такие векторы из нуклеиновой кислоты и их применение хорошо известны (например, см. US 5589466 и US 5973972).
В одном воплощении вектор подходит для экспрессии специфичных к CD74 антител в бактериальных клетках. Примеры таких векторов включают экспрессирующие векторы типа BlueScript (Stratagene), вектора pIN (Van Heeke & Schuster, J Biol Chem 264, 5503-5509 (1989)), векторы рЕТ (Novagen, Madison WI) и др.
Экспрессирующим вектором также или альтернативно может быть вектор, подходящий для экспрессии в дрожжевой системе. Можно использовать любой вектор, подходящий для экспрессии в дрожжевой системе. Подходящими векторами являются, к примеру, векторы, содержащие конститутивные или индуцибельные промоторы типа альфа-фактора, алкогольоксидазы и PGH (см. обзоры в F. Ausubel et al., ed. Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley InterScience, New York (1987); и Grant et al., Methods in Enzymol. 153, 516-544 (1987)).
Нуклеиновая кислота и/или вектор также может содержать последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую последовательность секреции/локализации, которая может направить полипептид, как то возникающую полипептидную цепь, в периплазматическое пространство или в среду клеточной культуры. Такие последовательности известны и включают лидера секреции или сигнальные пептиды, последовательности, направляющие в органеллы (например, последовательности ядерной локализации, сигналы удержания в ER, последовательности транспорта в митохондрии, последовательности транспорта в хлоропласты), последовательности мембранной локализации/ якорные последовательности (например, последовательности остановки переноса, якорные последовательности GPI) и др.
В экспрессирующем векторе изобретения нуклеиновая кислота, кодирующая специфичное к CD74 антитело, может содержать или быть связана с любым подходящим промотором, энхансером и другими способствующими экспрессии элементами. Примеры таких элементов включают сильные промоторы экспрессии (например, промотор/энхансер IE вируса CMV человека, а также промоторы RSV, SV40, SL3-3, MMTV и LTR вируса HIV), эффективные последовательности терминации поли(А), начало репликации для получения плазмид в Е.coli, гены устойчивости к антибиотикам в качестве селектируемых маркеров и/или удобные сайты клонирования (например, полилинкеры). Нуклеиновые кислоты также могут содержать индуцибельный промотор в отличие от конститутивного промотора типа IE CMV (специалистам должно быть известно, что такие термины фактически служат для описания степени экспрессии генов при определенных условиях).
В одном воплощении экспрессирующий вектор, кодирующий специфичное к CD74 антитело, может располагаться и/или доставляться в клетки хозяина или в организм животного при помощи вирусного вектора.
Такие экспрессирующие векторы могут использоваться для получения рекомбинантных антител по изобретению.
В одном аспекте изобретения предусмотрены рекомбинантные эукариотические или прокариотические клетки хозяина, которые вырабатывают антитела из любых описанных здесь аспектов или воплощений. Соответственно, изобретением предусмотрены рекомбинантные эукариотические или прокариотические клетки хозяина типа трансфектомы, которые вырабатывают приведенные здесь антитела или иммуноглобулины по изобретению. Примеры клеток хозяина включают дрожжевые, бактериальные клетки и клетки млекопитающих, как то клетки СНО или НЕК. Например, в одном воплощении настоящего изобретения предусмотрены клетки, содержащие нуклеиновую кислоту, стабильно встроенную в клеточный геном и содержащую последовательность, которая кодирует экспрессию специфичного к CD74 антитела по настоящему изобретению. В другом воплощении настоящего изобретения предусмотрены клетки, содержащие не встроенную нуклеиновую кислоту типа плазмиды, космиды, фагемиды или линейного экспрессирующего элемента, которая содержит последовательность, кодирующую экспрессию специфичного к CD74 антитела по изобретению.
В другом аспекте изобретение касается гибридом, вырабатывающих приведенные здесь антитела изобретения. В следующем аспекте изобретение касается трансгенных животных или растений, содержащих нуклеиновые кислоты, кодирующие тяжелую цепь и легкую цепь человека, причем животные или растения вырабатывают антитела по изобретению. Получение таких гибридом и трансгенных животных или растений было описано выше, а также описано в примерах.
В следующем аспекте изобретение касается способа получения специфичных к CD74 антител по изобретению, который включает стадии:
a) культивирования гибридомы или клеток хозяина по изобретению, как описано выше, и
b) выделения и/или очистки антител по изобретению из культуральной среды, и необязательно
c) получения ADC из специфичных к CD74 антител.
В следующем аспекте последовательность нуклеотидов, кодирующая последовательность антитела по изобретению, дополнительно кодирует вторую молекулу типа терапевтического полипептида. Примеры терапевтических полипептидов описаны здесь в другом месте. В одном воплощении изобретение касается способа получения слитого белка специфичных к CD74 антител, который включает стадии:
a) культивирования клеток хозяина, содержащих экспрессирующий вектор, включающий такую последовательность нуклеотидов, и
b) выделения и/или очистки слитого белка специфичных к CD74 антител из культуральной среды.
Фармацевтические композиции
В одном аспекте изобретения предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие антитела или ADCs, приведенные в любом из вышеприведенных аспектов и воплощений, и фармацевтически приемлемый носитель.
Фармацевтические композиции могут быть составлены с фармацевтически приемлемыми носителями или разбавителями, а также с любыми другими известными вспомогательными веществами и наполнителями в соответствии со стандартными методами типа тех, что изложены в Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19th Edition, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1995.
Фармацевтически приемлемые носители или разбавители, а также любые другие известные вспомогательные вещества и наполнители должны подходить для антител или конъюгатов антител настоящего изобретения и выбранного способа введения. Пригодность для носителей и других компонентов фармацевтических композиций определяется на основании отсутствия значительного отрицательного воздействия на требуемые биологические свойства выбранного соединения или фармацевтической композиции настоящего изобретения (например, не очень значительного воздействия на связывание антигена, как то: относительного ингибирования на 10% или меньше, на 5% или меньше и т.д.).
Фармацевтические композиции настоящего изобретения также могут включать разбавители, заполнители, соли, буфера, детергенты (например, неионные детергенты типа Tween-20 или Tween-80), стабилизаторы (например, сахара или свободные от белка аминокислоты), консерванты, фиксаторы тканей, солюбилизирующие вещества и/или другие материалы, подходящие для включения в фармацевтические композиции.
Фактический, уровень дозы активных ингредиентов в фармацевтических композициях настоящего изобретения может варьироваться с тем, чтобы получить такое количество активного ингредиента, которое будет эффективным для достижения требуемого терапевтического ответа для определенного пациента, композиции и способа применения, но не будет токсичным для пациента. Выбранный уровень дозы зависит от ряда фармакокинетических факторов, включая активность конкретной используемой композиции настоящего изобретения, способа применения, времени введения, скорости выведения используемого конкретного соединения, продолжительности лечения, других лекарственных препаратов, соединений и/или материалов, используемых в комбинации с данной композицией, возраста, пола, веса, заболевания, общего состояния здоровья и предыдущей медицинской истории пациента, подлежащего лечению, и других подобных факторов, хорошо известных в области медицины.
Фармацевтические композиции могут вводиться любым подходящим способом. Подходящие способы введения соединений настоящего изобретения in vivo и in vitro хорошо известны и могут быть выбраны рядовым специалистом.
В одном воплощении фармацевтическая композиция настоящего изобретения вводится парентерально.
Выражения "парентеральное введение" и "вводится парентерально" в настоящем изобретении означают другие способы введения, чем энтеральное и топическое, обычно посредством инъекции, и включают эпидермальное, внутривенное, внутримышечное, внутриартериальное, интратекальное, интракапсулярное, внутриглазничное, внутрисердечное, внутрикожное, внутрибрюшинное, внутрисухожильное, транстрахеальное, подкожное, субкутикулярное, внутрисуставное, субкапсулярное, субарахноидальное, интраспинальное, внутричерепное, внутригрудное, эпидуральное и интрастернальное введение и вливание.
В одном воплощении фармацевтическая композиция вводится посредством внутривенного или подкожного введения или вливания.
Фармацевтически приемлемые носители включают всевозможные подходящие растворители, диспергирующие среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые средства, средства поддержания изотоничности, антиоксиданты, замедляющие всасывание средства и др., которые физиологически совместимы с соединениями настоящего изобретения.
Примерами подходящих водных и неводных носителей, которые можно использовать в фармацевтических композициях настоящего изобретения, являются вода, физраствор, фосфатно-солевой буфер, этанол, декстроза, полиолы (как то глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и др.) и подходящие их смеси, растительные масла, как то оливковое масло, кукурузное масло, арахисовое масло, хлопковое масло и кунжутное масло, коллоидные растворы карбоксиметилцеллюлозы, трагакантовая камедь и органические эфиры для инъекций типа этилолеата и/или различные буфера. Другие носители хорошо известны в области фармацевтики.
Фармацевтически приемлемые носители включают стерильные водные растворы или дисперсии и стерильные порошки для приготовления ex temporo стерильных растворов или дисперсий для инъекций. Применение таких сред и веществ для фармацевтически активных субстанций хорошо известно. За исключением тех случаев, когда какая-либо обычная среда или вещество несовместимы с активным соединением, предусматривается их применение в фармацевтических композициях настоящего изобретения.
Надлежащая текучесть может поддерживаться, к примеру, за счет покрывающих материалов, таких как лецитин, выдерживанием требуемого размера частиц в случае дисперсий и использованием поверхностно-активных веществ.
Фармацевтические композиции настоящего изобретения также могут содержать фармацевтически приемлемые антиоксиданты, например, (1) водорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, цистеин гидрохлорид, бисульфат натрия, метабисульфит натрия, сульфит натрия и др.; (2) жирорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбилпальмитат, бутиловый гидроксианизол (ВНА), бутиловый гидрокситолуол (ВНТ), лецитин, пропилгаллат, альфа-токоферол и др.; и (3) хелаторы металлов, такие как лимонная кислота, этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA), сорбитол, винная кислота, фосфорная кислота и др.
Фармацевтические композиции настоящего изобретения также могут содержать средства поддержания изотоничности, такие как сахара, полиспирты, как то: маннитол, сорбитол, глицерин, или хлористый натрий в композициях.
Фармацевтические композиции настоящего изобретения также могут содержать одно или несколько вспомогательных веществ, подходящих для выбранного способа применения, таких как консерванты, увлажняющие вещества, эмульгирующие вещества, диспергирующие вещества, консерванты или буфера, которые могут увеличить срок годности или эффективность фармацевтической композиции. Соединения настоящего изобретения могут быть приготовлены с носителями, которые будут предохранять их от быстрого высвобождения, например, составы с контролируемым высвобождением, включая импланты, трансдермальные пластыри и микроинкапсулированные системы доставки. Такие носители могут включать желатин, глицерилмоностеарат, глицерилдистеарат, биоразложимые биосовместимые полимеры типа этиленвинилацетата, полиангидриды, полигликолевую кислоту, коллаген, полиортоэфиры и полимеры молочной кислоты сами по себе или вместе с воском или другими материалами, хорошо известными в данной области. Способы получения таких составов хорошо известны специалистам. Например, см. Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.
В одном воплощении соединения настоящего изобретения могут быть заключены в лекарственную форму, обеспечивающую надлежащее распределение in vivo. Фармацевтически приемлемые носители для парентерального введения включают стерильные водные растворы или дисперсии и стерильные порошки для приготовления ех temporo стерильных растворов или дисперсий для инъекций. Применение таких сред и веществ для фармацевтически активных субстанций известно в данной области. За исключением случаев, когда какая-либо обычная среда или вещество несовместимы с активным соединением, предусматривается их применение в фармацевтических композициях настоящего изобретения. В композиции также могут входить и другие активные или терапевтические соединения.
Фармацевтические композиции для инъекций, как правило, должны быть стерильными и стабильными в условиях изготовления и хранения. Композиции могут быть составлены в виде раствора, микроэмульсии, липосом или других упорядоченных структур, подходящих для высоких концентраций препарата. Носителем может быть водный или неводный растворитель или диспергирующая среда, содержащая, к примеру, воду, этанол, полиолы (например, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.п.) и подходящие их смеси, растительные масла, такие как оливковое масло, и органические эфиры для инъекций, например, этилолеат. Надлежащая текучесть может поддерживаться, к примеру, с помощью таких покрытий, как лецитин, выдерживанием требуемого размера частиц в случае дисперсий и применением поверхностно-активных веществ. Во многих случаях предпочтительно следует включать в композицию изотонические вещества, к примеру, сахара, полиспирты, как то: глицерин, маннитол, сорбитол, либо хлористый натрий. Пролонгированное всасывание композиций для инъекций может обеспечиваться включением в композицию вещества, замедляющего всасывание, к примеру, соли моностеарата и желатина.
Стерильные растворы для инъекций могут быть получены введением активного соединения в требуемом количестве в соответствующий растворитель с одним или несколькими ингредиентами, перечисленными выше, как потребуется, с последующей стерилизацией микрофильтрованием. Обычно дисперсии получают путем введения активного соединения в стерильный носитель, содержащий основную дисперсионную среду и другие нужные ингредиенты из тех, что перечислены выше. В случае стерильных порошков для приготовления стерильных растворов для инъекций примерами методов получения являются вакуумная сушка и замораживание-высушивание (лиофилизация), дающие порошок активного ингредиента плюс дополнительных нужных ингредиентов из предварительно стерилизованного фильтрованием раствора.
Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может содержать одно антитело или ADC настоящего изобретения, комбинацию из антитела или ADC по изобретению с другим терапевтическим соединением или комбинацию из соединений настоящего изобретения.
Терапевтическое применение
В следующем аспекте изобретение касается антител или ADCs, приведенных в любом аспекте или воплощении изобретения, для применения в качестве лекарств.
Специфичные к CD74 антитела настоящего изобретения могут применяться при лечении или профилактике заболеваний с участием клеток, экспрессирующих CD74. Например, антитела могут вводиться клеткам в культуре, например, in vitro или ex vivo, или же субъектам-людям, например, in vivo, для лечения или профилактики заболеваний с участием клеток, экспрессирующих CD74. В настоящем изобретении термин "субъект" обычно означает человека, который реагирует на специфичное к CD74 антитело или ADC. Субъектами, к примеру, могут быть люди с заболеваниями, которые можно исправить или облегчить путем модулирования функции CD74 или уничтожения клеток, прямо или косвенно.
В одном воплощении изобретения предусмотрен способ модулирования связанной с CD74 передачи сигналов в экспрессирующих CD74 клетках путем контактирования их со специфичным к CD74 антителом. Специфичное к CD74 антитело по изобретению может, к примеру, мешать связыванию MIF с CD74, что является неограничивающим примером того, как антитело по изобретению может модулировать связанную с CD74 передачу сигналов.
В одном воплощении изобретения предусмотрен способ уничтожения экспрессирующих CD74 клеток путем контактирования их со специфичным к CD74 антителом изобретения. Не ограничиваясь теорией, вызванное антителом сшивание или образование кластеров (например, при связывании области Fc связанных с CD74 антител с экспрессирующими FcR клетками) молекул CD74 на поверхности клетки может привести к апоптозу клеток.
В одном воплощении изобретения предусмотрен способ уничтожения экспрессирующих CD74 клеток путем контактирования их со специфичным к CD74 антителом изобретения в присутствии эффекторных клеток, способных вызвать опосредованный Fc ответ эффекторных клеток типа CDC, ADCC или ADCP. В этом воплощении, как правило, антитело является полноразмерным и того изотипа, который вызывает ответ типа CDC или ADCC, такого, например, как изотип IgG1,κ.
Специфичные к CD74 антитела по изобретению характеризуются эффективной интернализацией после связывания с CD74, что делает их пригодными для применения в виде ADCs, как описано в любом из приведенных здесь аспектов или воплощений.
Соответственно, в одном воплощении изобретения предусмотрен способ уничтожения экспрессирующих CD74 клеток путем контактирования их с ADC по изобретению, что требует интернализации и транспорта в лизосомы для специфического (т.е. расщепляемый линкер) или неспецифического (нерасщепляемый линкер) протеолитического расщепления комплекса антитело-линкер-препарат. В другом воплощении изобретения предусмотрен способ уничтожения экспрессирующих CD74 клеток путем контактирования их с ADC по изобретению, при этом специфичное к CD74 антитело соединено с терапевтической молекулой через линкер, способствующий высвобождению препарата после интернализации, например, при изменении рН или при восстановительных условиях. Подходящие технологии линкеров известны в этой области, как описано выше.
В другом аспекте настоящего изобретения предусмотрены способы лечения или профилактики заболеваний с участием клеток, экспрессирующих CD74 у субъекта, которые включают введение терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC по изобретению нуждающемуся в этом субъекту. Как правило, способ включает введение субъекту специфичного к CD74 антитела или ADC в количестве, эффективном для лечения или профилактики заболевания.
В предпочтительном аспекте специфичные к CD74 антитела или ADCs вводятся профилактически для уменьшения риска возникновения рака, замедления начала прогрессирования рака и/или уменьшения риска рецидива при ремиссии рака и/или после хирургического удаления первичной опухоли. В последнем случае специфичные к CD74 антитела можно вводить, к примеру, в связи с операцией (т.е. до, во время или после нее). Профилактическое введение может быть полезно и таким пациентам, у которых трудно локализовать опухоль, наличие которой известно по другим биологическим факторам.
Особенно хорошей мишенью для специфичных к CD74 антител или ADCs по изобретению являются клетки, суперэкспрессирующие CD74, как то раковые клетки, так как может связаться больше антител или ADCs на 1 клетку. Так, в одном аспекте заболевание с участием клеток, экспрессирующих CD74, представляет собой рак, т.е. онкогенное заболевание, как то заболевание, характеризующееся присутствием раковых клеток, экспрессирующих CD74, включая, к примеру, такие заболевания, при которых клетки происходят из твердой опухоли или гематологической опухоли. Экспрессия CD74 описана, например, при раке молочной железы (Koretz K et al., Int J Cancer 1989, 44:816-822), колоректальном раке (Cuthbert RJ et al., Eur J Cancer 2009, 45:1654-1663), раке эндометрия/ шейки матки (Glew SS et al., Cancer Res 1992, 52:4009-4016), раке желудка (Tamori Y et al., Oncol Rep 2005, 14:873-877), плоскоклеточном раке головы и шеи (SCCHN) (Han J et al., Head Neck Oncol 2009, 1:27), раке легких (McClelland M et al., Am J Pathol 2009, 174:638-646), глиобластоме (Kitange GJ et al., J Neurooncol 2010, 100:177-186), злокачественной лимфоме (Momburg F et al., Int J Cancer 1987, 40:598-603), хронической В-клеточной лимфоцитарной лейкемии (B-CLL) (Narni F et al., Blood 1986, 68:372-377), неходжкинской лимфоме (NHL), моноцитоидной В-клеточной лимфоме (MBCL) (Stroup R et al., Hum Pathol 1992, 23:172-177), волосковоклеточной лейкемии (HCL) (Spiro RC et al., Leuk Res 1984, 8:55-62), злокачественной меланоме (Weeraratna AT et al., Oncogene 2004, 23:2264-2274), раке яичников (Rangel LB et al., Cancer Biol Ther 2004, 3:1021-1027), раке простаты (Meyer-Siegler KL et al., BMC Cancer 2005, 5:73), раке поджелудочной железы (Koide N et al., Clin Cancer Res 2006, 12:2419-2426), раке почек (Saito Т et al., Cancer Lett 1997, 115:121-127), неоплазмах тимусного эпителия (Datta MW et al., Appi Immunohistochem Mol Morphol 2000, 8:210-215), злокачественной фиброзной гистиосаркоме (Lazova R et al., Cancer 1997, 79:2115-2124) и гипофизарной аденоме (Rossi ML et al., Tumori 1990, 76:543-547). CD74 также оказался повышенным, например, в желудочном эпителии при инфекции Н. pylori и язвенном колите (Beswick, World J Gastroenterol. 2009, 15(23):2855-61).
Примеры клеток, экспрессирующих CD74, включают такие раковые клетки, например, как клетки из NHL, множественной миеломы (ММ), рака яичников, рака молочной железы, рака поджелудочной железы, рака простаты, рака желудка, колоректального рака и рака печени.
В одном аспекте настоящего изобретения предусмотрены способы лечения или профилактики гематологических раковых заболеваний, которые включают введение терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC по настоящему изобретению нуждающемуся в этом субъекту, при этом гематологическое раковое заболевание выбрано из лимфомы, миеломы и/или лейкемии. В одном воплощении гематологическое раковое заболевание выбрано из группы, состоящей из злокачественной лимфомы, хронической B-клеточной лимфоцитарной лейкемии (B-CLL), хронической миелоидной лейкемии (CML) в бластной фазе, NHL, MM, MBCL, HCL и Т-клеточной лимфомы.
В одном воплощении гематологическим раковым заболеванием является NHL. Специфичные к CD74 антитела и ADCs по настоящему изобретению можно применять, к примеру, при лечении как вялотекущих, так и агрессивных форм NHL. Примерами В-клеточной NHL являются лимфоматоидный грануломатоз, фолликулярная лимфома, диффузная крупноклеточная В-лимфома, лимфома клеток мантии, первичная эффузионная лимфома, внутрисосудистая крупноклеточная В-лимфома, медиастинальная крупноклеточная В-лимфома, болезни тяжелых цепей (в том числе болезни γ-, μ- и α-цепей), лимфомы, вызванные лечением иммуносупрессивными средствами, такие как вызванная циклоспорином лимфома и вызванная метотрексатом лимфома. В одном воплощении гематологическим раковым заболеванием является множественная миелома, такая, например, как миеломная болезнь легких цепей или моноклональная гаммапатия неустановленного значения (MGUS). В других отдельных и особых воплощениях гематологическим раковым заболеванием является злокачественная лимфома, B-CLL (например, мелкоклеточная лимфоцитарная лимфома; SLL), CML в бластной фазе, MBCL или HCL. В одном воплощении гематологическим раковым заболеванием является Т-клеточная лимфома, как то, например, фунгоидная гранулема, какая-либо периферическая Т-клеточная лимфома, ангиоиммунобластическая Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома (ALCL), связанная с энтеропатией Т-клеточная лимфома или гепатоспленическая Т-клеточная лимфома. В другом воплощении гематологическим раковым заболеванием является лимфома Ходжкина. В другом воплощении гематологическим раковым заболеванием является макроглобулинемия Вальденстрома. В одном воплощении гематологическим раковым заболеванием является CLL типа B-CLL (например, мелкоклеточная лимфоцитарная лимфома; SLL).
В одном аспекте настоящего изобретения предусмотрены способы лечения или профилактики твердых опухолей, которые включают введение терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC по настоящему изобретению нуждающемуся в этом субъекту, при этом твердая опухоль представлена меланомой, карциномой, саркомой, аденомой и/или глиомой. В одном воплощении рак выбран из группы, состоящей из рака молочной железы (например, первичного или метастазирующего рака молочной железы), колоректального рака, рака эндометрия/шейки матки, рака желудка, рака головы и шеи (например, SCCHN), печеночно-клеточной карциномы, рака легких (например, мелкоклеточного рака легких или немелкоклеточного рака легких), злокачественной глиомы (например, анапластической астроцитомы и мультиформной глиобластомы), злокачественной меланомы (например, первичной или метастазирующей меланомы), рака яичников (например, серозной, эндометриоидной или светлоклеточной аденокарциномы), рака поджелудочной железы, рака простаты, рака почек, рака мочевого пузыря, рака тимуса (например, карциномы тимуса и инвазивной тимомы), злокачественной фиброзной гистиосаркомы, акустической шванномы, гипофизарной аденомы и опухолей мягких тканей.
В одном воплощении рак представляет собой рак яичников. В другом воплощении рак выбран из первичного или метастазирующего рака молочной железы. В другом воплощении рак представляет собой рак поджелудочной железы, как то: неоперабельный запущенный или метастазирующий рак поджелудочной железы. В другом воплощении рак представляет собой рак простаты. В другом воплощении рак представляет собой рак желудка. В другом воплощении рак представляет собой колоректальную карциному, как то метастазирующую колоректальную карциному. В другом воплощении рак представляет собой печеночно-клеточную карциному. В других отдельных и особых воплощениях рак представляет собой рак эндометрия/шейки матки, рак головы и шеи, рак легких, злокачественную глиому, злокачественную меланому, рак яичников, рак почек, рак тимуса, злокачественную фиброзную гистиосаркому, акустическую шванному, гипофизарную аденому или опухоль мягких тканей.
В одном аспекте настоящего изобретения предусмотрены способы лечения или профилактики аутоиммунных заболеваний, которые включают введение терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC по настоящему изобретению нуждающемуся в этом субъекту. В одном воплощении аутоиммунное заболевание выбрано из иммунологической тромбоцитопении (как то острой идиопатической тромбоцитопенический пурпуры и хронической идиопатической тромбоцитопенический пурпуры), дерматомиозита, синдрома Шегрена, рассеянного склероза, хореи Сиденхама, миастении гравис, системной красной волчанки, волчаночного нефрита, ревматизма, полигландулярных синдромов, буллезной пузырчатки, сахарного диабета, пурпуры Henoch-Schonlein, стрептококкового нефрита, узловатой эритемы, артериита Такаясу, болезни Аддисона, ревматоидного артрита, саркоидоза, язвенного колита, полиморфной эритемы, IgA-нейропатии, узелкового полиартериита, анкилозирующего спондилита, синдрома Гудпасчура, облитерирующего тромбангиита, первичного билиарного цирроза печени, тиреоидита Хасимото, тиреотоксикоза, склеродермы, хронического активного гепатита, полимиозита/дерматомиозита, полихондрита, обыкновенной пузырчатки, грануломатоза Вегенера, мембранозной нефропатии, бокового амиотрофического склероза, сухотки спинного мозга, гигантоклеточного артериита/полимиалгии, злокачественной анемии, быстро прогрессирующего гломерулонефрита и фиброзного альвеолита.
В одном воплощении аутоиммунным заболеванием является ревматоидный артрит. В другом воплощении аутоиммунным заболеванием является системный склероз. В другом воплощении аутоиммунным заболеванием является рассеянный склероз. В другом воплощении аутоиммунным заболеванием является воспалительная болезнь кишечника, например, болезнь Крона или язвенный колит.
В одном воплощении изобретением предусмотрен способ любого из заболеваний из вышеприведенных аспектов и воплощений путем введения нуждающемуся в этом индивиду специфичного к CD74 антитела или ADC по любому из вышеприведенных аспектов и воплощений. Изобретение также касается специфичных к CD74 антител или ADCs по изобретению для применения в качестве лекарств, например, при лечении рака или другого приведенного здесь заболевания.
В одном воплощении отбор пациентов для лечения специфичными к CD74 антителами основывается на уровне экспрессии CD74 в образце, как то в образце, содержащем опухолевые клетки, или на выявлении экспрессирующих CD74 опухолей с помощью меченых специфичных к CD74 антител или фрагментов антител, например, таковых по изобретению. Примеры диагностических способов определения экспрессии CD74 с помощью антител или фрагментов антител к CD74 по изобретению приведены ниже.
Эффективные дозировки и схемы дозировки для специфичных к CD74 антител или ADCs зависят от подлежащего лечению заболевания и могут быть установлены специалистами.
Врач с рядовой квалификацией в данной области может легко установить и прописать эффективное количество требуемой фармацевтической композиции. Например, врач может начать с дозы специфичного к CD74 антитела, используемого в фармацевтической композиции, на меньшем уровне, чем это требуется для получения нужного терапевтического эффекта, и постепенно увеличивать дозу, пока не будет достигнут требуемый эффект. В общем, подходящая доза композиции настоящего изобретения должна быть такой, чтобы количество соединения составляло самую низкую дозу, достаточную для получения терапевтического эффекта по определенной схеме дозировки. Такая эффективная доза в общем зависит от факторов, описанных выше.
Например, "эффективное количество" для терапевтического применения можно измерить по его способности стабилизировать течение болезни. Способность соединения к подавлению рака можно оценить, к примеру, на модельной системе у животных, прогнозирующей эффективность на опухолях человека. С другой стороны, это свойство композиции можно оценить, исследуя способность соединения ингибировать рост клеток или индуцировать цитотоксичность методами анализа in vitro, известными практикующим специалистам. Терапевтически эффективное количество терапевтического соединения может уменьшать размеры опухоли либо иным образом ослаблять симптомы у субъекта. Рядовой специалист сможет определить такое количество, исходя из таких факторов, как размер субъекта, тяжесть симптомов у субъекта и конкретная композиция или выбранный способ введения.
Типичный, без ограничения, диапазон для терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела настоящего изобретения составляет 0,1-100 мг/кг, как то 0,1-50 мг/кг, например, 0,1-20 мг/кг, как то 0,1-10 мг/кг, например, около 0,5 мг/кг, как то 0,3 или 1 или 3 мг/кг, 5 мг/кг или 8 мг/кг.
Типичный, без ограничения, диапазон для терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 ADC по изобретению составляет 0,02-100 мг/кг, как то 0,02-30 мг/кг, как то 0,05-10 мг/кг или 0,1-3 мг/кг, например, 0,5-2 мг/кг.
Введение может осуществляться, например, внутривенно, внутримышечно, внутрибрюшинно или подкожно, например, проксимально к местонахождению мишени.
Схемы дозировки в вышеприведенных способах лечения и применения подбираются таким образом, чтобы обеспечить оптимальный требуемый ответ (например, терапевтический ответ). Например, можно вводить болюсом, можно вводить несколько дробных доз за какое-то время либо пропорционально уменьшать или повышать дозу в соответствии с требованиями терапевтической ситуации.
В одном воплощении оптимизируется окошко эффективности-безопасности путем уменьшения специфической токсичности, к примеру, путем снижения соотношения препарат-антитело (DAR) и/или смешивания специфичного к CD74 ADC с немеченым специфичным к CD74 антителом.
В одном воплощении во время терапии отслеживается эффективность лечения, например, в заданные моменты времени. В одном воплощении эффективность отслеживается по измерению уровня CD74 в образцах, содержащих опухолевые клетки, по визуализации пораженного участка или же другими диагностическими методами, изложенными здесь, например, по одному или нескольким снимкам методом РЕТ-СТ, к примеру, с помощью меченого специфичного к CD74 антитела, фрагмента или миниантитела, происходящего из специфичного к CD74 антитела настоящего изобретения.
Если нужно, эффективная суточная доза фармацевтической композиции может вводиться в виде двух, трех, четырех, пяти, шести и больше дробных доз, вводимых по отдельности через соответствующие промежутки в течение суток, необязательно в виде дозовых форм. В другом воплощении специфичные к CD74 антитела вводятся путем медленного непрерывного вливания на протяжении длительного времени, как то: более 24 часов, чтобы уменьшить нежелательные побочные эффекты.
Хотя соединения настоящего изобретения можно вводить и сами по себе, однако предпочтительно они вводятся в виде фармацевтической композиции, как описано выше.
Эффективная доза специфичного к CD74 антитела или ADC по изобретению может вводиться и раз в неделю, раз в 2 недели или раз в 3 недели. Продолжительность введения дозы может ограничиваться, например, 8 неделями, 12 неделями или до тех пор, пока не наступит клиническое улучшение.
Например, в одном воплощении специфичное к CD74 антитело или ADC вводится вливанием раз в неделю в дозе от 10 до 500 мг/м2, как то от 200 до 400 мг/м2. Такое введение можно повторять, например, от 1 до 8 раз, как то от 3 до 5 раз. Введение может осуществляться путем непрерывного вливания на протяжении от 1 до 24 часов, как то от 1 до 12 часов.
В другом воплощении специфичное к CD74 антитело или ADC вводится вливанием раз в 3 недели в дозе от 10 до 500 мг/м2, как то от 50 до 200 мг/м2. Такое введение можно повторять, например, от 1 до 8 раз, как то от 3 до 5 раз. Введение может осуществляться путем непрерывного вливания на протяжении от 1 до 24 часов, как то от 1 до 12 часов.
В одном воплощении специфичное к CD74 ADC вводится в виде однократной дозы в 0,1-10 мг/кг, как то 1-3 мг/кг, раз в неделю или раз в 3 недели вплоть до 12 раз, до 8 раз или до клинического улучшения. Введение может осуществляться путем непрерывного вливания на протяжении от 1 до 24 часов, как то от 1 до 12 часов. Такой курс можно повторить один или несколько раз, как потребуется, к примеру, через 6 месяцев или 12 месяцев. Дозировка может определяться или подбираться путем измерения количества соединения настоящего изобретения в крови после введения, например, отбирая биологические образцы и используя антиидиотипические антитела, мишенью которых является антигенсвязывающий участок специфичных к CD74 антител настоящего изобретения.
В одном воплощении специфичные к CD74 антитела вводятся в качестве поддерживающей терапии, к примеру, раз в неделю на протяжении 6 месяцев или больше.
В качестве неограничивающего примера лечение по настоящему изобретению может проводиться при ежедневном введении соединения настоящего изобретения в дозе 0,1-100 мг/кг, как то 0,2, 0,5, 0,9, 1,0, 1,1, 1,5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 или 100 мг/кг в день, по меньшей мере в один из дней 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35,36, 37, 38, 39 или 40-й день или же по меньшей мере в одну из недель 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20-ю неделю после начала лечения или же в любой их комбинации, используя однократные или дробные дозы через каждые 24, 12, 8, 6, 4 или 2 часа или же в любой комбинации.
Парентеральные композиции могут быть составлены в виде стандартных дозовых форм для легкости введения и однородности дозировки. Стандартная дозовая форма в настоящем изобретении означает физически дискретные единицы, пригодные в качестве стандартной дозировки для подлежащих лечению субъектов; каждая единица содержит заданное количество активного соединения, рассчитанное на получение требуемого терапевтического эффекта в сочетании с требуемым фармацевтическим носителем. Спецификация для стандартных дозовых форм настоящего изобретения определяется и напрямую зависит от (а) уникальных характеристик активного соединения и требуемого конкретного терапевтического эффекта, и (b) ограничений, существующих в области составления рецептур с таким активным соединением для лечения чувствительности у индивидов.
Комбинации
Изобретением также предусмотрено терапевтическое применение, при котором антитело или ADC по изобретению применяется в комбинации по меньшей мере еще с одним терапевтическим средством, уместными для подлежащего лечению заболевания, как описано выше. Такое введение может быть одновременным, раздельным или последовательным. При одновременном введении средства вводятся в виде одной композиции или в виде отдельных композиций, как подойдет.
Соответственно, настоящим изобретением предусмотрены способы лечения заболеваний с участием экспрессирующих CD74 клеток, как описано выше, которые включают введение специфичного к CD74 антитела или ADC по настоящему изобретению в сочетании с одним или несколькими другими терапевтическими средствами. Настоящим изобретением также предусмотрено применение специфичных к CD74 антител или ADCs по настоящему изобретению для получения фармацевтических композиций, предназначенных для введения вместе с по меньшей мере одним химиотерапевтическим средством для лечения таких заболеваний.
Дополнительное терапевтическое средство, как правило, подходит для того заболевания, которое подлежит лечению. Примеры таких терапевтических средств включают другие противораковые антитела или ADCs, цитотоксические средства, химиотерапевтические средства, антиангиогенные средства, противораковые иммуногены, средства, контролирующие клеточный цикл/регулирующие апоптоз, гормональные регулирующие средства и другие средства, описанные ниже.
В одном аспекте дополнительное терапевтическое средство представляет собой по меньшей мере одно второе антитело или ADC, которое связывается с другой мишенью, такой, например, как CD4, CD5, CD8, CD14, CD15, CD19, CD21, CD22, CD23, CD25, CD30, CD33, CD37, CD38, CD40, CD40L, CD46, CD52, CD54, CD80, CD126, В7, MUC1, тенасцин, НМ1.24 или HLA-DR. Например, второе антитело может связываться с B-клеточным антигеном, включая, без ограничения, CD20, CD19, CD21, CD23, CD38, CD46, CD80, CD138, HLA-DR, CD22, или с другим эпитопом на CD74. В другом воплощении второе антитело связывается с фактором роста А сосудистого эндотелия (VEGF-A). В отдельных и особых воплощениях дополнительное терапевтическое средство представляет собой специфичное к CD20 или CD138 антитело.
В одном воплощении специфичные к CD74 антитела или ADCs по изобретению предназначаются для применения в комбинации с определенным терапевтическим антителом, таким как велтузумаб, бевацизумаб (Avastin®), залутумумаб, цетуксимаб (Erbitux®), панитумумаб (Vectibix™), офатумумаб (Arzerra™), окрелизумаб, занолимумаб, даратумумаб, ранибизумаб (Lucentis®), Zenapax, Simulect, Remicade, Humira, Tysabri, Xolair, раптива, нимотузумаб, ритуксимаб и/или трастузумаб (Herceptin®). В одном воплощении специфичное к CD74 антитело или ADC настоящего изобретения вводится в комбинации со специфичным к CD20 антителом, таким, например, как велтузумаб, окрелизумаб или офатумумаб (Arzerra™). В другом воплощении специфичное к CD74 антитело или ADC настоящего изобретения вводится в комбинации с бевацизумабом (Avastin®).
В одном аспекте изобретения предусмотрены антитела или ADCs по любому из вышеприведенных аспектов или воплощений для лечения заболеваний с участием экспрессирующих CD74 клеток, таких как рак, в сочетании с по меньшей мере одним химиотерапевтическим средством.
В одном воплощении химиотерапевтическое средство выбирают из антиметаболитов, таких как метотрексат, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, цитарабин, флоксуридин (FudR), 3',5'-O-диолеоил-FudR, флударабин, 5-фторурацил, дакарбазин, гидроксимочевина, аспарагиназа, гемцитабин, кладрибин и аналогичных средств.
В одном воплощении химиотерапевтическое средство выбирают из алкилирующих средств, таких как мехлорэтамин, тиоэпа, хлорамбуцил, мелфалан, кармустин (BSNU), ломустин (CCNU), циклофосфамид, бусульфан, дибромманнитол, стрептозотоцин, дакарбазин (DTIC), прокарбазин, митомицин С, и таких производных платины, как цисплатин и карбоплатин, и аналогичных средств.
В одном воплощении химиотерапевтическое средство выбирают из антимитотических средств типа таксанов, например, доцетакселя, паклитакселя и алкалоидов барвинка, к примеру, виндесина, винкристина, винбластина и винорелбина.
В одном воплощении химиотерапевтическое средство выбирают из ингибиторов топоизомеразы, таких как топотекан или иринотекан.
В одном воплощении химиотерапевтическое средство выбирают из цитостатических препаратов, таких как этопозид и тенипозид.
В одном воплощении химиотерапевтическое средство выбирают из ингибиторов рецепторов факторов роста, как то ингибиторов ErbB1 (EGFR) (таких как иресса, эрбитукс (цетуксимаб), тарцева и аналогичные средства), ингибиторов ErbB2 (Her2/neu) (таких как герцептин и другие подобные средства) и аналогичных средств.
В одном воплощении химиотерапевтическое средство выбирают из ингибиторов тирозинкиназы, таких как иматиниб (Glivec, Gleevec STI571), лапатиниб, PTK787/ ZK222584 и аналогичные средства.
В одном аспекте настоящего изобретения предусмотрен способ лечения заболеваний с участием клеток, экспрессирующих CD74 у субъекта, как то больного раком, который включает введение терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC настоящего изобретения и по меньшей мере одного ингибитора ангиогенеза, неоваскуляризациии и/или иной васкуляризации нуждающемуся в этом субъекту.
Примерами таких ингибиторов ангиогенеза являются ингибиторы урокиназы, ингибиторы матриксных металлопротеаз (как то маримастат, неовастат, BAY 12-9566, AG 3340, BMS-275291 и аналогичные средства), ингибиторы миграции и пролиферации эндотелиальных клеток (как то TNP-470, скваламин, 2-метоксиэстрадиол, комбретастатины, эндостатин, ангиостатин, пеницилламин, SCH66336 (Schering-Plough Corp., Madison, NJ), R115777 (Janssen Pharmaceutica Inc, Titusville, NJ) и аналогичные средства), антагонисты ангиогенных факторов роста (как то ZD6474, SU6668, антитела против ангиогенных агентов и/или их рецепторов (типа VEGF, bFGF и ангиопоэтина-1), талидомид, аналоги талидомида (как то СС-5013), Sugen 5416, SU5402, антиангиогенные рибозимы (например, ангиозим), интерферон-α (например, интерферон-α2а), сурамин и аналогичные средства), ингибиторы киназы VEGF-R и ингибиторы других ангиогенных тирозинкиназ (например, SU011248), ингибиторы эндотелиального интегрина/сигнального пути выживания (как то витаксин и аналогичные средства), антагонисты/хелаторы меди (как то тетратиомолибдат, каптоприл и аналогичные средства), карбоксиамидо-триазол (CAI), ABT-627, CM101, интерлейкин-12 (IL-12), IM862, PNU145156E, а также нуклеотидные молекулы, ингибирующие ангиогенез (как то антисмысловая кДНК VEGF, кДНК, кодирующая ангиостатин, кДНК, кодирующая р53, и кДНК, кодирующая дефектный рецептор-2 VEGF) и аналогичные средства.
Другими примерами таких ингибиторов ангиогенеза, неоваскуляризации и/или иной васкуляризации являются антиангиогенные производные гепарина и родственные им молекулы (например, гепариназа III), темозоломид, NK4, ингибиторы циклооксигеназы-2, ингибиторы индуцируемого гипоксией фактора 1, антиангиогенные изофлавоны сои, олтипраз, фумагиллин и его аналоги, аналоги соматостатина, пентозанполисульфат, текогалан натрия, дальтепарин, тумстатин, тромбоспондин, NM-3, комбретастатин, канстатин, авастатин, антитела против других соответствующих мишеней (как то mAbs против интегрина α-v/β-3 и против кининостатина) и аналогичные средства.
В одном воплощении терапевтическое средство для применения в комбинации со специфичным к CD74 антителом или ADC для лечения вышеописанных заболеваний представляет собой противораковый иммуноген, как то раковый антиген/опухолевый антиген (например, молекула адгезии эпителиальных клеток (EpCAM/TACSTD1), муцин 1 (MUC1), карциноэмбриональный антиген (СЕА), опухолевый гликопротеин 72 (TAG-72), gp100, мелан-А, MART-1, KDR, RCAS1, MDA7, связанные с раком вирусные вакцины (например, вакцины от папилломавируса человека), опухолевые белки теплового шока и аналогичные средства. В таком воплощении могут применяться и другие подходящие раковые антигены/опухолевые антигены, известные в данной области,. Противораковые иммуногенные пептиды также включают антиидиотипические "вакцины", как то антиидиотипические антитела к ВЕС2 (митомумаб), CeaVac и родственные им антиидиотипические антитела, антиидиотипическое антитело к антителу MG7 и другие противораковые антиидиотипические антитела (например, см. Birebent et al., Vaccine 21(15), 1601-12 (2003); Li et al., Chin Med J (Engl) 114(9), 962-6 (2001); Schmitt et al., Hybridoma 13(5), 389-96 (1994); Maloney et al., Hybridoma 4(3), 191-209 (1985); Raychardhuri et al., J Immunol. 137(5), 1743-9 (1986); Pohl et al., Int J Cancer 50(6), 958-67 (1992); Bohlen et al., Cytokines Mol Ther. 2(4), 231-8 (1996); и Maruyama, J Immunol Methods 264(1-2), 121-33 (2002)). Такие антиидиотипические Abs необязательно могут быть конъюгированы с носителем, которым может быть синтетическая (как правило, инертная) молекула носителя, белок (к примеру, гемоцианин моллюска блюдечко (KLH) (например, см. Ochi et al., Eur J Immunol. 17(11), 1645-8 (1987)) или клетки (к примеру, эритроциты - например, см. Wi et al., J Immunol Methods 122(2), 227-34 (1989)).
В одном воплощении терапевтическое средство для применения в комбинации со специфичным к CD74 антителом или ADC для лечения вышеописанных заболеваний представляет собой цитокин, хемокин или комбинацию цитокин/хемокин со свойствами ингибитора ракового роста. Примеры подходящих цитокинов и факторов роста включают IFNγ, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-10, IL-12, IL-13, IL-15, IL-18, IL-23, IL-24, IL-27, IL-28a, IL-28b, IL-29, KGF, IFNα (например, INFα2b), IFNβ, GM-CSF, CD40L, лиганд Flt3, фактор стволовых клеток, анцестим и TNFα. Подходящими хемокинами могут быть Glu-Leu-Arg (ELR)-отрицательные хемокины, такие как IP-10, МСР-3, MIG и SDF-1α из семейств СХС и С-С хемокинов человека. Подходящие цитокины включают производные цитокинов, варианты цитокинов, фрагменты цитокинов и слитые белки цитокинов. Эти и другие способы или применения с использованием нуклеиновых кислот, кодирующих пептиды естественного происхождения, могут дополнительно или альтернативно выполняться методами "активации генов" и повышающей регуляции генов путем гомологичной рекомбинации типа тех, что описаны в US 5,968,502, US 6,063,630, US 6,187,305 и ЕР 0505500.
В одном воплощении терапевтическое средство для применения в комбинации со специфичным к CD74 антителом или ADC для лечения вышеописанных заболеваний представляет собой регулятор контроля клеточного цикла/апоптоза (или "регулирующий агент"). Регуляторы контроля клеточного цикла/апоптоза могут включать молекулы, которые воздействуют на и модулируют регуляторы контроля клеточного цикла/апоптоза, такие как (i) cdc-25 (например, NSC 663284), (ii) циклин-зависимые киназы, которые суперстимулируют клеточный цикл (как то флавопиридолы (L868275, HMR1275), 7-гидроксистауроспорин (UCN-01, KW-2401) и росковитин (R-росковитин, CYC202)), и (iii) модуляторы теломеразы (как то BIBR1532, SOT-095, GRN163 и композиции, описанные, к примеру, в US 6440735 и US 6713055). Неограничивающие примеры молекул, влияющих на апопотозные пути, включают родственный TNF индуцирующий апоптоз лиганд (TRAIL)/апоптозный лиганд-2 (Apo-2L), антитела, активирующие рецепторы TRAIL, IFNs и антисмысловые к Bcl-2.
В одном воплощении терапевтическое средство для применения в комбинации со специфичным к CD74 антителом или ADC для лечения вышеописанных заболеваний представляет собой гормональное регуляторное средство типа средств, применяемых для антиандрогенной и антиэстрогенной терапии. Примерами таких гормональных регуляторных средств являются тамоксифен, идоксифен, фулвестрант, дролоксифен, торемифен, ралоксифен, диэтилстильбестрол, этинилэстрадиол/эстинил, антиандрогены (такие как флутаминд/эулексин), прогестины (такие как гидроксипрогестерон капроат, медроксипрогестерон/провера, мегестрол ацепат/мегаце), адренокортикостероиды (такие как гидрокортизон, преднизон), рилизинг-гормон лютеинизирующего гормона (и его аналоги и другие агонисты LHRH, такие как бусерелин и госерелин), ингибиторы ароматазы (такие как анастразол/аримидекс, аминоглютетимид/цитраден, экземестан), ингибиторы гормонов (такие как октреотид/сандостатин) и аналогичные средства.
В одном воплощении терапевтическое средство для применения в комбинации со специфичным к CD74 антителом или ADC для лечения вышеописанных заболеваний представляет собой антианергическое средство (например, соединения небольших молекул, белки, гликопротеины или антитела, устраняющие толерантность к опухолевым и раковым антигенам). Примерами таких соединений являются молекулы, блокирующие активность CTLA-4, как то MDX-010 (ипилимумаб, Yervoy™) (Phan et al., PNAS USA 100, 8372 (2003)).
В одном воплощении терапевтическое средство для применения в комбинации со специфичным к CD74 антителом или ADC для лечения вышеописанных заболеваний представляет собой нуклеиновую кислоту, содержащую ген супрессора опухолей, или вектор типа дефектного по репликации аденовируса, кодирующего рекомбинантный p53/SCH58500 дикого типа человека, и др.; антисмысловую нуклеиновую кислоту, направленную на онкоген, мутированный или дерегулированный ген; или siRNA, направленную на мутированный или дерегулированный ген. Примеры мишеней для супрессоров опухолей включают, к примеру, BRCA1, RB1, BRCA2, DPC4 (Smad4), MSH2, MLH1 и DCC.
В одном воплощении терапевтическое средство для применения в комбинации со специфичным к CD74 антителом или ADC для лечения вышеописанных заболеваний представляет собой противораковую нуклеиновую кислоту. Примеры противораковых нуклеиновых кислот включают генасенс (augmerosen/G3139), LY900003 (ISIS 3521), ISIS 2503, OGX-011 (ISIS 112989), LE-AON/LEraf-AON (инкапсулированный в липосомах антисмысовой олигонуклеотид к c-raf, ISIS-5132), MG98 и другие антисмысловые нуклеиновые кислоты, направленные на PKCα, кластерин, IGFBPs, протеинкиназу А, циклин D1 или Bcl-2h.
В одном воплощении терапевтическое средство для применения в комбинации со специфичным к CD74 антителом или ADC для лечения вышеописанных заболеваний представляет собой противораковую ингибиторную молекулу РНК (например, см. Lin et al., Curr Cancer Drag Targets 1(3), 241-7 (2001), Erratum in: Curr Cancer Drag Targets 3(3), 237 (2003); Lima et al., Cancer Gene Ther. 11(5), 309-16 (2004); Grzmil et al., Int J Oncol. 4(1), 97-105 (2004); Collis et al., Int J Radiat Oncol Biol Phys. 57(2 Suppl), S144 (2003); Yang et al., Oncogene 22(36), 5694-701 (2003); и Zhang et al., Biochem Biophys Res Commun. 303(4), 1169-78(2003)).
Комбинированные композиции и способы введения по настоящему изобретению также включают введение вакцин из нуклеиновых кислот типа вакцин из "голой" ДНК, кодирующей такие раковые антигены/опухолевые антигены (например, см. US 5589466, US 5593972, US 5703057, US 5879687, US 6235523 и US 6387888). В одном воплощении комбинированный способ введения и/или комбинированная композиция включает композицию аутологичной вакцины. В одном воплощении комбинированный способ введения и/или комбинированная композиция включает вакцину из целых клеток или клеток, экспрессирующих цитокин (например, фибробластов, экспрессирующих рекомбинантный IL-2, дендритных клеток, экспрессирующих рекомбинантные цитокины, и др.) (например, см. Kowalczyk et al., Acta Biochim Pol. 50(3), 613-24 (2003); Reilly et al., Methods Mol Med. 69, 233-57 (2002); и Tirapu et al., Curr Gene Ther. 2(1), 79-89 (2002)). Другим примером такого подхода с аутологичными клетками, который может быть полезным в комбинированных способах настоящего изобретения, является метод индивидуализированной иммунотерапии MyVax® (раньше назывался GTOP-99) (Genitope Corporation - Redwood City, CA, США).
В одном воплощении специфичные к CD74 антитела или ADCs по изобретению комбинируются или вводятся совместно с вирусом, вирусными белками и т.п. Полезными компонентами таких композиций и способов могут быть, к примеру, дефектные по репликации вирусы, которые обычно способны только на один или всего лишь несколько циклов репликации in vivo и направлены на опухолевые клетки. Такие вирусные агенты могут содержать или быть связанными с нуклеиновыми кислотами, кодирующими такие иммуностимуляторы, как GM-CSF и/или IL-2. Полезными компонентами таких способов и композиций могут быть как природные онколитические, так и рекомбинантные онколитические вирусы (например, вирусы HSV-1, реовирусы, дефектные по репликации и чувствительные к репликации аденовирусы и др.). Соответственно, в одном воплощении настоящего изобретения предусмотрены комбинированные композиции и комбинированные способы введения, в которых специфичные к CD74 антитела комбинируются или вводятся совместно с онколитическим вирусом. Примеры таких вирусов включают онколитические аденовирусы и герпесвирусы, которые могут быть или не быть модифицированными вирусами (например, см. Shah et al., J Neurooncol. 65(3), 203-26 (2003); Stiles et al., Surgery 134(2), 357-64 (2003); Sunarmura et al., Pancreas 28(3), 326-9 (2004); Teshigahara et al., J Surg Oncol. 85(1), 42-7 (2004); Varghese et al., Cancer Gene Ther. 9(12), 967-78 (2002); Wildner et al., Cancer Res. 59(2), 410-3 (1999); Yamanaka, Int J Oncol. 24(4), 919-23 (2004); и Zwiebel et al., Semin Oncol. 28(4), 336-43 (2001).
Комбинированные композиции и комбинированные способы введения настоящего изобретения также могут включать методы "цельноклеточной" и "адоптивной" иммунотерапии. Например, такие способы могут включать инфузию или повторное вливание клеток иммунной системы (к примеру, инфильтрирующих опухоль лимфоцитов (TILs), как то Т-клеток CD4+ и/или CD8+ (например, Т-клеток, подвергшихся экспансии под действием опухолевых антигенов и/или генетических усилителей), экспрессирующих антитела В-клеток или других клеток, продуцирующих или презентирующих антитела, дендритных клеток (например, дендритных клеток, культивировавшихся с вызывающим их экспансию агентом типа GM-CSF и/или Flt3-L, и/или связанных с опухолями нагруженных антигеном дендритных клеток), противоопухолевых NK-клеток, так называемых гибридных клеток или их комбинаций. В таких способах и композициях могут быть полезными и клеточные лизаты. Клеточные "вакцины" в клинических испытаниях, которые могут быть полезными в таких аспектах, включают клеточные лизаты Canvaxin™, APC-8015 (Dendreon), HSPPC-96 (Antigenics) и Melacine®. Антигены, выделяющиеся из раковых клеток, и их смеси (например, см. Bystryn et al., Clinical Cancer Research Vol.7, 1882-1887, July 2001), необязательно в смеси с такими адъювантами, как квасцы, тоже могут быть компонентами в таких способах и комбинированных композициях.
В одном воплощении специфичные к CD74 антитела или ADC вводятся пациентам в сочетании с применением способа внутренней вакцинации. Внутренняя вакцинация означает индуцированную гибель опухолевых или раковых клеток, как то вызванную лекарствами или радиацией, криокоагуляцией или радиочастотной коагуляцией гибель опухолевых клеток у пациента, которая, как правило, вызывает иммунный ответ, направленный на (i) опухолевые клетки в целом или (ii) части опухолевых клеток, включая (а) секретируемые белки, гликопротеины или другие продукты, (b) мембраносвязанные белки или гликопротеины или другие компоненты, связанные с мембранами или встроенные в них, и/или (с) внутриклеточные белки или другие внутриклеточные компоненты. Иммунный ответ, индуцируемый при внутренней вакцинации, может быть гуморальным (т.е. опосредованным антителами - комплементом) или опосредованным клетками (например, развитием и/или возрастанием числа эндогенных цитотоксических Т-лимфоцитов, распознающих погибшие внутри опухолевые клетки или их части). Наряду с лучевой терапией, неограничивающими примерами лекарств и средств, которые можно использовать для индуцирования такой гибели опухолевых клеток и внутренней вакцинации, являются стандартные химиотерапевтические средства, ингибиторы клеточного цикла, антиангиогенные препараты, моноклональные антитела, индуцирующие апоптоз вещества и ингибиторы передачи сигналов.
Примерами других противораковых средств, которые могут быть адекватными в качестве терапевтических средств для применения в комбинации со специфичными к CD74 антителами или ADC для лечения вышеописанных заболеваний, являются вещества, индуцирующие дифференцировку, аналоги ретиноевой кислоты (такие как полностью транс-ретиноевая кислота, 13-цис-ретиноевая кислота и аналогичные, вещества), аналоги витамина D (такие как сеокальцитол и аналогичные вещества), ингибиторы ErbB3, ErbB4, IGF-IR, инсулиновых рецепторов, PDGFRα, PDGFRβ, Flk2, Flt4, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGFR4, TRKA, TRKC, c-met, Ron, Sea, Tie, Tie2, Eph, Ret, Ros, Alk, LTK, PTK7 и аналогичные средства.
Примерами других противораковых средств, которые могут быть адекватными в качестве терапевтических средств для применения в комбинации со специфичными к CD74 антителами или ADC для лечения вышеописанных заболеваний, являются катепсин В, модуляторы активности дегидрогеназы катепсина D, глутатион-S-трансферазы (такие как глутацилцистеинсинтетаза и лактатдегидрогеназа) и аналогичные средства.
Примерами других противораковых средств, которые могут быть адекватными в качестве терапевтических средств для применения в комбинации со специфичными к CD74 антителами для лечения вышеописанных заболеваний, являются эстрамустин и эпирубицин.
Примерами других противораковых средств, которые могут быть адекватными в качестве терапевтических средств для применения в комбинации со специфичными к CD74 антителами для лечения вышеописанных заболеваний, являются ингибиторы HSP90 типа 17-аллиламиногелданамицина, антитела против таких опухолевых антигенов, как PSA, CA125, KSA и др., интегрины типа интегрина β1, ингибиторы VCAM и аналогичные средства.
Примерами других противораковых средств, которые могут быть адекватными в качестве терапевтических средств для применения в комбинации со специфичными к CD74 антителами или ADCs для лечения вышеописанных заболеваний, являются ингибиторы кальцинейрина (такие как вальсподар, PSC 833 и другие ингибиторы MDR-1 или p-гликопротеина), ингибиторы TOR (такие как сиролимус, эверолимус и рапамицин) и ингибиторы механизмов "самонаведения лимфоцитов" (такие как FTY720), а также средства, воздействующие на клеточную сигнализацию, такие как ингибиторы молекул адгезии (например, антитела против LFA и др.).
В одном воплощении специфичные к CD74 антитела или ADCs можно вводить в сочетании с введением одного или нескольких веществ, способствующих доступу специфичного к CD74 антитела или комбинированной композиции внутрь опухоли. Такие способы могут выполняться, к примеру, в сочетании с введением релаксина, который способен расслабить опухоль (например, см. US 6719977). В одном воплощении специфичное к CD74 антитело или ADC может быть соединено с проникающим в клетки пептидом (СРР). Проникающие в клетки пептиды и родственные им пептиды (как то искусственные проникающие в клетки антитела) описаны, к примеру, в Zhao et al., J Immunol Methods 254(1-2), 137-45 (2001); Hong et al., Cancer Res. 60(23), 6551-6 (2000); Lindgren et al., Biochem J. 377(Pt 1), 69-76 (2004); Buerger et al., J Cancer Res Clin Oncol. 129(12), 669-75 (2003); Pooga et al., FASEB J. 12(1), 67-77 (1998); и Tseng et al., Mol Pharmacol. 62(4), 864-72 (2002).
В следующем воплощении специфичные к CD74 антитела или ADCs вводятся в сочетании с вызывающим повышение уровня CD74 средством, таким, например, как IFNγ или инактивированные клетки Н. pylori.
В одном воплощении настоящего изобретения предусмотрен способ лечения заболеваний с участием клеток, экспрессирующих CD74 у субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC и по меньшей мере одного противовоспалительного средства, иммуносупрессорного и/или иммуномодулирующего средства нуждающемуся в этом субъекту.
В одном воплощении такое противовоспалительное средство может быть выбрано из аспирина и других салицилатов, ингибиторов Сох-2 (таких как рофекоксиб и целекоксиб), NSAIDs (таких как ибупрофен, фенопрофен, напроксен, сулиндак, диклофенак, пироксикам, кетопрофен, дифлунисал, набуметон, этодолак, оксапрозин и индометацин), антител против IL6R, антител против IL-8 (например, антител, описанных в WO 2004058797, например, 10F8), антител против IL-15 (например, антител, описанных в WO 03017935 и WO 2004076620), антител против рецептора IL-15, антител против CD4 (например, занолимумаб), антител против CD11a (например, эфализумаб), антител против α4/β1-интегрина (VLA4) (например, натализумаб), CTLA4-Ig для лечения воспалительных заболеваний, преднизолона, преднизона, модифицирующих заболевания противоревматических препаратов (DMARDs) типа метотрексата, гидроксихлорохина, сульфасалазина, ингибиторов синтеза пиримидинов (например, лефлуномид), блокаторов рецептора IL-1 (таких как анакинра), блокаторов TNF-α (таких как этанерсепт, инфликсимаб и адалимумаб) и аналогичных средств.
В одном воплощении такое иммуносупрессорное и/или иммуномодулирующее средство может быть выбрано из циклоспорина, азатиоприна, микофеноловой кислоты, микофенолата мофетила, кортикостероидов типа преднизона, метотрексата, солей золота, сульфасалазина, противомалярийных препаратов, бреквинара, лефлуномида, мизорибина, 15-дезоксиспергуалина, 6-меркаптопурина, циклофосфамида, рапамицина, такролимуса (FK-506), тимопентина, тимозина-α и аналогичных средств.
В одном воплощении такое иммуносупрессорное и/или иммуномодулирующее средство может быть выбрано из иммуносупрессорных антител, как. то антител, связывающихся с р75 рецептора IL-2, антител против CD25 (например, описанных в WO 2004045512 типа АВ1, АВ7, АВ11 и АВ12), антител против глобулина тимоцитов или антител, связывающихся, к примеру, с МНС, CD2, CD3 (например, OKT3), CD4, CD7, CD28, В7, CD40, CD45, IFNγ, TNFα, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, CD11a или CD58, либо антител, связывающихся с их рецепторами или лигандами.
В одном воплощении такое иммуносупрессорное и/или иммуномодулирующее средство может быть выбрано из растворимых молекул IL-15R, IL-10R, В7 (В7-1, В7-2, их вариантов и фрагментов), ICOS и OX40, ингибиторов отрицательного регулятора Т-клеток (как то антител против CTLA4) и аналогичных средств.
В одном воплощении настоящего изобретения предусмотрен способ лечения заболеваний с участием клеток, экспрессирующих CD74 у субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC и антитела против C3b(i) нуждающемуся в этом субъекту.
В одном воплощении терапевтическое средство для применения в комбинации со специфичными к CD74 антителами или ADCs для лечения вышеописанных заболеваний может быть выбрано из ингибиторов деацетилаз гистонов (к примеру, фенилбутирата) и/или агентов репарации ДНК (к примеру, ферментов репарации ДНК и аналогичных композиций типа димерицина).
Способы настоящего изобретения для лечения вышеописанных заболеваний, включающие введение терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC, также могут включать противораковую фотодинамическую терапию (например, противораковую лазерную терапию - которая необязательно может осуществляться с применением фотосенсибилизирующего средства, например, см. Zhang et al., J Control Release 93(2), 141-50 (2003)), противораковую звуковолновую и ударноволновую терапию (например, см. Kambe et al., Hum Cell 10(1), 87-94 (1997)) и/или противораковую нутрицевтическую терапию (например, см. Roudebush et al., Vet Clin North Am Small Anim Pract. 34(1), 249-69, viii (2004); и Rafi, Nutrition 20(1), 78-82 (2004). Кроме того, специфичные к CD74 антитела могут применяться для получения фармацевтических композиций для лечения заболеваний, как описано выше, которые должны применяться с противораковой фотодинамической терапией (например, противораковой лазерной терапией - которая необязательно может осуществляться с применением фотосенсибилизирующего средства, противораковой звуковолновой и ударноволновой терапией и/или противораковой нутрицевтической терапией.
В одном воплощении настоящего изобретения предусмотрен способ лечения заболеваний с участием клеток, экспрессирующих CD74 у субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC по настоящему изобретению и назначение радиотерапии нуждающемуся в этом субъекту.
В одном воплощении настоящего изобретения предусмотрен способ лечения или профилактики рака, который включает введение терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC по настоящему изобретению и назначение радиотерапии нуждающемуся в этом субъекту.
В одном воплощении настоящего изобретения предусмотрено применение специфичных к CD74 антител или ADCs настоящего изобретения для получения фармацевтической композиции для лечения рака, которая должна применяться в комбинации с радиотерапией.
Радиотерапия может включать облучение или связанное с ним введение пациенту радиоактивных фармпрепаратов. Источник излучения может быть либо внешним, либо внутренним по отношению к подлежащему лечению пациенту (облучение, к примеру, может проводиться в виде наружной лучевой терапии (EBRT) или брахитерапии (ВТ)). Радиоактивные элементы, которые можно использовать при выполнении таких способов, включают, например, радий, цезий-137, иридий-192, америций-241, золото-198, кобальт-57, медь-67, технеций-99, йод-123, йод-131 и индий-111.
В следующем воплощении настоящего изобретения предусмотрен способ лечения или профилактики рака, который включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества специфичного к CD74 антитела или ADC по настоящему изобретению в сочетании с хирургией.
Как описано выше, фармацевтическая композиция настоящего изобретения может вводиться при комбинированной терапии, т.е. в сочетании с одним или несколькими средствами, адекватными для подлежащего лечению заболевания, либо в виде отдельных фармацевтических композиций, либо вместе с соединением настоящего изобретения, составленным вместе с одним или несколькими дополнительными терапевтическими средствами, как описано выше. Такая комбинированная терапия может потребовать меньших доз соединения настоящего изобретения и/или вводимых вместе с ним средств, что позволяет избежать токсичности или осложнений, связанных с различными монотерапиями.
В одном воплощении дополнительное терапевтическое средство для конкретного терапевтического применения выбирается из следующего:
- специфичных к CD20 антител, в особенности для лечения гематологических раковых заболеваний, таких, например, как B-CLL или фолликулярная лимфома;
- специфичных к CD138 антител, в особенности для лечения гематологических раковых заболеваний, таких, например, как миелома;
- специфичных к CD38 антител, в особенности для лечения гематологических раковых заболеваний, таких, например, как миелома или CLL;
- мелфалана (или мелфалана гидрохлорида) для лечения гематологических раковых заболеваний, таких, например, как миелома;
- антител против VEGF-A, таких, например, как бевацизумаб, в особенности для лечения такого рака, например, как рак молочной железы;
- леналидомида или бортезомиба, в особенности для лечения гематологических раковых заболеваний, таких, например, как миелома;
- фторурацила или гемцитабина, в особенности для лечения такого рака, например, как рак поджелудочной железы;
- иринотекана, в особенности для лечения такого рака, например, как колоректальный рак; и
- цисплатина или другого производного платины, в особенности для лечения такого рака, например, как SCCHN.
Диагностическое применение
Специфичные к CD74 антитела по изобретению также могут применяться и для диагностических целей, с использованием композиций, содержащих описанные здесь специфичные к CD74 антитела. Соответственно, изобретением предусмотрены способы диагностики и композиции с использованием описанных здесь специфичных к CD74 антител. Такие способы и композиции могут применяться для чисто диагностических целей, таких как выявление или идентификация заболеваний с участием экспрессирующих CD74 клеток, а также для мониторинга прогресса терапевтического лечения, мониторинга течения заболевания, оценки состояния после лечения, отслеживания рецидивов заболевания, определения риска возникновения заболевания и др.
В одном аспекте специфичные к CD74 антитела настоящего изобретения применяются ex vivo, как то при диагностике заболеваний, при которых экспрессирующие CD74 клетки указывают на заболевание или задействованы в патогенезе, путем детектирования уровня CD74 или уровня клеток, экспрессирующих CD74 на своей поверхности, в образцах, взятых у пациентов. Это может осуществляться, к примеру, контактированием исследуемого образца, необязательно вместе с контрольным образцом, со специфичным к CD74 антителом в условиях, способствующих связыванию антитела с CD74. Затем детектируется образование комплекса (например, методом ELISA). При использовании контрольного образца вместе с исследуемым образцом проводится анализ уровня специфичного к CD74 антитела и комплекса специфичного к CD74 антитела с CD74 в обоих образцах, при этом статистически значимое повышение уровня специфичного к CD74 антитела или комплекса специфичного к CD74 антитела с CD74 в исследуемом образце означает повышение уровня CD74 в исследуемом образце по сравнению с контрольным образцом.
Примеры стандартных иммунологических методов, в которых можно использовать специфичные к CD74 антитела настоящего изобретения, включают, без ограничения, методы ELISA, RIA, FACS, плазменного резонанса, хроматографические методы, методы иммуногистохимии тканей, western-блота и/или иммунопреципитации.
В одном воплощении изобретение касается способа выявления наличия антигена CD74 или экспрессирующих CD74 клеток в образце, который включает:
- контактирование образца со специфичным к CD74 антителом по изобретению в условиях, способствующих связыванию специфичного к CD74 антитела с CD74 в образце; и
- анализ образовавшегося комплекса.
Как правило, образец представлен биологическим образцом.
В одном воплощении образец представлен образцом ткани, причем известно или предполагается, что он содержит антиген CD74 и/или клетки, экспрессирующие CD74. Например, может осуществляться детектирование экспрессии CD74 in situ путем взятия гистологических образцов у пациентов и применения антител настоящего изобретения к таким образцам. Антитела могут применяться путем нанесения или наложения антител на образец, который затем подвергается детектированию подходящими способами. При этом можно определить не только наличие CD74 или клеток, экспрессирующих CD74, но также и распределение CD74 или клеток, экспрессирующих CD74, в исследуемой ткани (например, при оценке распространения раковых клеток). При применении настоящего изобретения рядовые специалисты в данной области должны хорошо понимать, что для осуществления такого детектирования in situ можно модифицировать любые методики из широкого спектра гистологических методов (как то методики окрашивания).
В вышеприведенных методах специфичное к CD74 антитело можно пометить детектируемой меткой, способствующей детектированию связанных с CD74 антител. С другой стороны, можно детектировать связывание специфичного к CD74 антитела (первичного) с помощью вторичного антитела, помеченного детектируемой меткой и связывающегося с первичным антителом.
Уровень CD74 в образцах также можно определить методом конкурентного иммуноанализа с использованием стандартов CD74, помеченных детектируемой меткой, и немеченого специфичного к CD74 антитела. При таком анализе биологический образец, меченый стандарт CD74 и специфичное к CD74 антитело смешивают и определяют количество меченого стандарта CD74, связавшегося с немеченым специфичным к CD74 антителом. Количество CD74 в биологическом образце обратно пропорционально количеству меченого стандарта CD74, связавшегося со специфичным к CD74 антителом.
Подходящими метками для специфичных к CD74 антител, вторичных антител и/или стандартов CD74, используемых в методах диагностики in vitro, являются, без ограничения, различные ферменты, простетические группы, флуоресцентные вещества, люминесцентные вещества и радиоактивные вещества. Примеры подходящих ферментов - пероксидаза хрена, щелочная фосфатаза, β-галактозидаза и ацетилхолинэстераза; примеры подходящих комплексов простетических групп - стрептавидин/биотин и авидин/биотин; примеры подходящих флуоресцентных веществ - умбеллиферон, флуоресцеин, флуоресцеин-изотиоцианат, родамин, дихлортриазиниламинофлуоресцеин, дансилхлорид и фикоэритрин; примеры подходящих люминесцентных веществ - люминол; и примеры подходящих радиоактивных веществ - 125I, 131I, 35S и 3H.
В одном аспекте специфичные к CD74 антитела по изобретению применяются при визуализации in vivo экспрессирующих CD74 тканей типа опухолей. Для методов in vivo особенно подходят фрагменты антител, такие, например, как фрагменты (Fab')2, Fab и Fab' вследствие их быстрой кинетики распределения.
Визуализация in vivo может проводиться любым подходящим методом. Например, можно использовать специфичное к CD74 антитело (например, его фрагмент), помеченное 99Tc, 131I, 111In или другим изотопом, дающим гамма-излучение, чтобы визуализировать накопление или распределение специфичного к CD74 антитела в экспрессирующих CD74 тканях типа опухолей с помощью гамма-сцинтилляционной камеры (например, установки Elscint Apex 409ECT), как правило, с использованием низкоэнергетического коллиматора с высоким разрешением или низкоэнергетического универсального коллиматора. С другой стороны, можно использовать мечение 89Zr, 76Br, 18F или другим излучающим позитроны радионуклидом для распределения специфичного к CD74 антитела или его фрагмента в опухолях методом позитрон-эмиссионной томографии (PET). Полученные с применением таких методов снимки можно использовать для оценки биораспределения CD74 у пациентов, млекопитающих или в тканях, например, при использовании CD74 в качестве биомаркера на присутствие раковых клеток. Варианты такого метода могут включать применение магнитно-резонансной томографии (MRI) для улучшения изображений по сравнению, с методом гамма-камеры. Стандартные, методы и принципы иммуносцинтиграфии описаны, например, в Srivastava (ed.) Radiolabeled Monoclonal Antibodies for Imaging and Therapy (Plenum Press, 1988); Chase, "Medical Applications of Radioisotopes," in Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Gennaro et al. (eds.), pp.624-652 (Mack Publishing Co., 1990); и Brown, "Clinical Use of Monoclonal Antibodies," in Biotechnology and Pharmacy 227-49, Pezzuto et al. (eds.) (Chapman & Hall, 1993). Более того, такие снимки также могут служить основанием для хирургических методов удаления опухолей. Кроме того, такие методы визуализации in vivo могут способствовать идентификации и локализации опухолей в ситуации, когда у пациента установлена опухоль (по наличию других биомаркеров, метастазов и т.д.), но ее невозможно идентифицировать обычными аналитическими методами. Все эти способы являются предметом настоящего изобретения.
Визуализация in vivo и другие способы диагностики, предусмотренные настоящим изобретением, особенно применимы при выявлении микрометастазов у больных людей (например, тех, кому ранее не был поставлен диагноз рака или в период выздоровления/ ремиссии от рака).
В одном воплощении настоящего изобретения предусмотрен способ визуализации in vivo, в котором специфичное к CD74 антитело настоящего изобретения конъюгируют со способствующим детектированию рентгеноконтрастным веществом, конъюгированное антитело вводят в организм посредством инъекции в кровоток и определяют наличие и локализацию меченого антитела в организме. По этой методике и другими способами диагностики, представленными здесь, настоящим изобретением предусмотрен способ скрининга на наличие связанных с болезнью клеток у больных или в биологических образцах, взятых у больных людей, и/или оценки распределения специфичных к CD74 антител перед терапией специфичным к CD74 ADC.
Для диагностической визуализации радиоизотопы могут быть связаны со специфичными к CD74 антителами как непосредственно, так и косвенно через промежуточную функциональную группу. Полезными промежуточными функциональными группами являются хелаторы, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота и диэтилентриаминпентауксусная кислота (например, см. US 5,057,313).
Наряду с радиоизотопами и рентгеноконтрастными веществами, способы диагностики могут выполняться с помощью специфичных к CD74 антител, конъюгированных с красителями (например, с комплексом биотин-стрептавидин), контрастными веществами, флуоресцентными соединениями или молекулами и усиливающими веществами (например, парамагнитными ионами) для магнитно-резонансной томографии (MRI) (например, см. US Pat. No. 6,331,175, в котором описаны методы MRI и получение антител, конъюгированных с усиливающим средством для MRI). Такие диагностические/детектирующие вещества могут быть выбраны из веществ, предназначенных для MRI, и флуоресцентных соединений. Для того, чтобы нагрузить специфичные к CD74 антитела радиоактивными металлами или парамагнитными ионами, может потребоваться подвергнуть их реакции с реагентом, имеющим длинный "хвост", к которому прикрепляется множество хелатирующих групп для связывания ионов. Таким хвостом может быть полимер типа полилизина, полисахарид или другая функционализированная цепь с подвешенными группами, с которыми могут связываться хелатирующие группы, такие, например, как порфирины, полиамины, краун-эфиры, бистиосемикарбазоны, полиоксимы и подобные группы, применимые для этой цели. Хелаты можно конъюгировать со специфичными к CD74 антителами с помощью стандартных химических методов.
Итак, настоящим изобретением предусмотрены диагностические специфичные к CD74 антитела, при этом специфичные к CD74 антитела конъюгированы с контрастным веществом (как то для магнитно-резонансной томографии, компьютерной томографии или с усилителем контрастности ультразвука) или радионуклидом, который может быть представлен, к примеру, изотопом, дающим гамма-, бета-, альфа-излучение или излучающим электроны Оже или позитроны.
В следующем аспекте изобретение касается наборов для выявления наличия антигена CD74 или экспрессирующих CD74 клеток в образце, которые включают:
- специфичное к CD74 антитело или ADC по изобретению; и
- инструкции по применению набора.
В одном воплощении настоящего изобретения предусмотрен набор для диагностики рака, включающий контейнер, содержащий специфичное к CD74 антитело и один или несколько реагентов для детектирования связывания специфичного к CD74 антитела с CD74. Реагенты могут включать, к примеру, флуоресцентные метки, ферментные метки или другие детектируемые метки. Реагенты также могут включать вторичные или третичные антитела или реагенты для ферментативных реакций, причем ферментативные реакции дают продукт, который можно визуализировать. В одном воплощении настоящего изобретения предусмотрен диагностический набор, содержащий одно или несколько специфичных к CD74 антител по настоящему изобретению в меченом или немеченом виде в подходящем контейнере, реагенты для инкубации при непрямом определении и субстраты или функционализирующие реагенты для детектирования при таком определении, в зависимости от природы метки. Также могут входить контрольные реагенты и инструкции по применению.
Диагностические наборы также могут поставляться для применения со специфичным к CD74 антителом, как то конъюгированным/меченым специфичным к CD74 антителом, для детектирования присутствия CD74 в образцах ткани или в организме. В таких диагностических наборах, а также наборах для терапевтического применения, тоже описанных здесь, специфичные к CD74 антитела обычно предоставляются в лиофилизированном виде в контейнере, либо сами по себе, либо в сочетании с другими антителами, специфичными для клеток или пептида мишени. Как правило, сюда же входит и фармацевтически приемлемый носитель (например, инертный разбавитель) и/или его компоненты, такие как трис-буфер, фосфатный или карбонатный буфер, стабилизаторы, консерванты, биоциды, инертные белки, например, сывороточный альбумин и др. (обычно в отдельном контейнере для смешивания) и дополнительные реагенты (также обычно в отдельном контейнере). В некоторые наборы также входит вторичное антитело, способное связываться со специфичным к CD74 антителом, которое, как правило, находится в отдельном контейнере. Второе антитело обычно конъюгировано с меткой и составлено таким же образом, как и специфичное к CD74 антитело настоящего изобретения. При помощи способов, описанных выше и далее здесь, специфичные к CD74 антитела могут применяться для определения подгрупп раковых/опухолевых клеток и характеристики таких клеток и родственных им опухолевых тканей.
Антиидиотипические антитела
В следующем аспекте изобретение касается антиидиотипических антител, которые связываются с описанными здесь специфичными к CD74 антителами по изобретению.
Антиидиотипическое (Id) антитело представляет собой такое антитело, которое распознает уникальные детерминанты, обычно связанные с антигенсвязывающим сайтом какого-либо антитела. Антиидиотипическое антитело может быть получено путем иммунизации животного того же вида и генетического типа, что и источник специфичного к CD74 моноклонального антитела, тем моноклональным антителом, против которого нужно получить анти-Id антитело. Как правило, иммунизированное животное распознает и реагирует на идиотипические детерминанты иммунизирующего антитела тем, что оно вырабатывает антитело к этим идиотипическим детерминантам (анти-Id антитело). Такие антитела описаны, к примеру, в US 4,699,880. Такие антитела тоже являются предметом настоящего изобретения.
Анти-Id антитела также можно использовать в качестве "иммуногена" для индуцирования иммунного ответа у другого животного, получая так называемые антитела против анти-Id антитела. Антитело против анти-Id антитела по эпитопу может быть идентично исходному mAb, индуцировавшему анти-Id антитело. Таким образом, при использовании антител к идиотипическим детерминантам одного mAb можно идентифицировать другие клоны, экспрессирующие антитела с такой же специфичностью. Анти-Id антитела можно подвергать изменениям (получая при этом варианты анти-Id антител) и/или дериватизировать любым подходящим методом типа тех, что описаны здесь в отношении специфичных к CD74 антител настоящего изобретения. Например, моноклональное анти-Id антитело можно конъюгировать с носителем типа гемоцианина моллюска блюдечко (KLH) и использовать для иммунизации мышей BALB/c. Сыворотка из таких мышей, как правило, содержит антитела против анти-Id антитела, которые обладают свойствами связывания, близкими, если не идентичными исходному специфичному к CD74 антителу.
Далее настоящее изобретение раскрывается на следующих примерах, которые не следует воспринимать как дополнительные ограничения.
Примеры
Пример 1. Конструирование экспрессирующих векторов CD74v1 и -v2, His-CD74v1 и -v2 и CD74del2-36v1 и -v2
Кодирующие последовательности для варианта 1 CD74 человека (CD74v1) (идентична последовательности NP_001020330 в Genbank) и варианта 2 CD74 человека (CD74v2) (идентична последовательности AAV383110330 в Genbank) получали путем синтеза и подвергали полной оптимизации кодонов (GeneArt, Regensburg, Germany). Конструкции клонировали в экспрессирующий вектор для млекопитающих рЕЕ13.4 (Lonza Biologies, Slough, UK). Эти конструкции были названы pEE13.4CD74v1 и pEE13.4CD74v2. Для повышения уровня экспрессии CD74 на поверхности клеток удаляли сигнал цитоплазматического удержания в ER (а.к. 2-36), как описано (Khalil H et al., J Cell Sci 2005, 118:4679-4687). Для этого создавали новые конструкции путем амплификации кодирующих CD74 участков из pEE13.4CD74v1 и pEE13.4CD74v2 и удаления при этом кодирующих (а.к. 2-36) участков. Эти ПЦР-фрагменты повторно клонировали в рЕЕ13.4 и полностью секвенировали для проверки, правильности новых конструкций. Эти экспрессирующие векторы были названы pEE13.4CD74v1del2-36 и pEE13.4CD74v2del2-36.
Кодирующие участки для внеклеточных доменов CD74v1 (а.к. 73-296) и -v2 (а.к. 73-232) амплифицировали методом ПЦР из pEE13.4CD74v1 и pEE13.4CD74v2, при этом вводили кодирующий участок для гексамерного N-концевого His-тега. ПЦР-фрагменты клонировали в экспрессирующий вектор для млекопитающих рЕЕ12.4 (Lonza Biologies), содержащий кодирующий участок эффективного сигнального пептида НММ38 (Barash S et al., Biochem Biophys Res Commun 2002, 294:835-842). Экспрессирующие векторы были полностью просеквенированы и названы pEE12.4SPHisCD74v1 и pEE12.4SPHisCD74v2. Полученные белки были названы HisCD74v1 и HisCD74v2.
Белковые последовательности вариантов CD74 представлены на фиг.1.
Пример 2. Кратковременная экспрессия в клетках HEK-293F и CHO-S
Клетки Freestyle™ 293-F (субклон HEK-293, адаптированный для культивирования в суспензии в химически определенной среде Freestyle; HEK-293F) получали от Invitrogen и трансфецировали плазмидой pEE13.4CD74v1, pEE13.4CD74v2, pEE13.4CD74del2.36v1, pEE13.4CD74del2-36v2, pEE12.4SPHisCD74v1 или pEE12.4SPHisCD74v2 с помощью 293 фектина (Invitrogen) в соответствии с инструкцией производителя.
В случае pEE12.4SPHisCD74v1 или pEE12.4CD74v2 собирали супернатанты клеточных культур и очищали растворимый HisCD74v1 или HisCD74v2 методом металлоаффинной хроматографии, как описано ниже.
В случае pEE13.4CD74v1, pEE13.4CD74v2, pEE13.4CD74v1del2-36 или pEE13.4CD74v2del2-36 собирали клетки через 1-2 дня после трансфекции и использовали при последующих анализах. Эти клетки были названы TH2013-CD74v1, TH2013-CD74v2, TH2013-CD74v1del2-36 и TH2013-CD74v2del2-36.
Адаптированные для суспензии клетки линии CHO-K1SV (CHO-S, Invitrogen) трансфецировали плазмидой pEE13.4CD74v1, pEE13.4CD74v2, pEE13.4CD74v1del2-36 или pEE13.4CD74v2del2-36 по методике производителя с помощью реагента СНО-Мах (Invitrogen). Трансфецированные клетки CHO-S собирали через 1-2 дня после трансфекции и использовали при последующих анализах. Эти клетки были названы TC2013-CD74v1, TC2013-CD74v2, TC2013.CD74v1del2.36 и TC2013-CD74v2del2-36.
При экспрессии антител соответствующие векторы тяжелой цепи и легкой цепи, описанные в примере 9, совместно экспрессировали в клетках HEK-293F, как описано выше.
Пример 3. Стабильная экспрессия в клетках NSO
Плазмиду pEE13.4CD74v1del2-36 трансфецировали в клетки NSO (Lonza Biologies). Клетки подвергали отбору на стабильное встраивание экспрессирующего вектора путем культивирования в лишенной глутамина культуральной среде в присутствии 25 мкМ метилсульфоксимина (MSX), как описано (Bebbington CR et al., Biotechnology (N Y) 1992, 10:169-175). Клетки, экспрессирующие CD74, объединяли и использовали в качестве полустабильной популяции или же отбирали и использованы отдельные стабильные клоны. Эти клетки были названы N2013del-v1-012.
Пример 4. Очистка CD74 с His-тегом
HisCD74v1 и HisCD74v2 экспрессировали в клетках HEK-293F. His-тег в белках позволяет проводить очистку методом аффинной хроматографии с иммобилизованным металлом. При этом хелатор фиксирован на хроматографической смоле и заряжен катионами Со2+. Содержащий CD74ECDHis супернатант инкубировали со смолой в режиме batch (т.е. в растворе). Белок с His-тегом прочно связывается с шариками смолы, тогда как другие белки, находящиеся в супернатанте культуры, связываются не прочно. После инкубации шарики извлекали из супернатанта и набивали в колонку. Колонку промывали для удаления слабо связанных белков. Затем прочно связанные белки CD74ECDHis элюировали буфером, содержащим имидазол, который конкурирует со связыванием His с Со2+. Элюент удаляли из белка заменой буфера на обессоливающей колонке.
Пример 5. Процедура иммунизации трансгенных мышей
Антитела HuMab-CD 74-005, -006, -008 и -011 получали при иммунизации мышей HCo17 HuMAb (человеческое моноклональное антитело; Medarex Inc., San Jose, CA, USA), содержащих четыре генетические модификации. Эти мыши были трансгенными по тяжелой цепи Ig человека и по легкой каппа-цепи Ig человека и с двойным нокаутом по локусам тяжелой и легкой каппа-цепи мыши. Эти нарушения предотвращают экспрессию любых полностью мышиных антител. Использовали различные линии: НСо12, НСо12-BALB/c, HCo17 и НСо20. Они отличаются по количеству генов VH (вариабельная область тяжелой цепи) и VL (вариабельная область легкой цепи) человека. Мышей HCo12-BALB/c получали при перекрестном скрещивании с мышами KCo5-BALB/c (трансгенными по легкой каппа-цепи).
Для иммунизации использовали шесть разных иммуногенов: TH2013-CD74v1del2-36, TH2013-CD74v2del2-36, N2013del-v1-012, клетки SU-DHL-4 (линия клеток B-клеточной лимфомы человека) и HisCD74v1 или HisCD74v2, конъюгированные с белком-носителем KLH (гемоцианин моллюска блюдечко). Мышей иммунизировали через каждые 2 недели, поочередно при 5×106 клеток или при 15 мкг белка. В общей сложности проводили 8 иммунизации, четыре внутрибрюшинно (ip) и четыре подкожно (sc).
Антитела -005, -006 и -008 получали при иммунизации мышей HCo17 с помощью 5×106 клеток TH2013-CD74v1Ldel2-36 ip, чередуясь с 15 мкг HisCD74v2 sc. Первую иммунизацию проводили ip, используя клетки в полном адъюванте Фрейнда (CFA; Difco Laboratories, Detroit, MI, USA), а последующие иммунизации - в неполном адъюванте Фрейнда (IFA) (белок, sc) или в PBS (клетки, ip).
Антитело -011 получали при иммунизации мышей HCo17 с помощью 5×106 клеток TH2013-CD74v1del2-36 ip, чередуясь с 15 мкг HisCD74v1 SC. Первую иммунизацию проводили, используя белок в CFA (ip), а последующие иммунизации - в IFA (белок, sc) или PBS (клетки, ip).
Когда титры в сыворотке оказывались достаточными (разведение сыворотки 1/50 или меньше давало положительную реакцию при антигенспецифичном скрининге, как описано в примере 6, по меньшей мере при двух последовательных, раз в две недели, случаях скрининга), мышам дополнительно дважды вводили внутривенно (iv) 10 мкг белка HisCD74 в 100 мкл PBS за 4 и 3 дня до слияния.
Пример 6. Гомогенный антигенспецифинный метод скрининга
Сыворотки мышей и супернатанты гибридом анализировали на наличие антител против CD74 высокопроизводительным методом скрининига (HTS) по технологии флуорометрического анализа в микрообъеме (FMAT; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). В этом методе для выявления человеческих антител против CD74 использовали клетки TC2013-CD74v1del2-36 и TC2013-CD74v2del2-36. Для измерения неспецифического связывания использовали клетки CHO-S дикого типа. К клеткам добавляли образцы, вызывая связывание с CD74. После этого детектировали связывание HuMab с помощью флуоресцентного конъюгата (козье антитело против IgG человека с Су5; Jackson ImmunoResearch). В качестве положительного контроля использовали антитело мыши против CD74 человека (Becton Dickinson; IgG2a, κ; клон М-В741), помеченное Alexa-647, как описано ниже, а в качестве отрицательного контроля -антитело chrompure мыши (Jackson Immunoresearch), помеченное Alexa-647.
Антитела метили красителем Alexa Fluor® 647 (Molecular Probes), в дальнейшем "Alexa-647", по следующей методике.
Готовили растворы антител в 1 мг/мл IgG в буфере из 0,1 М карбоната натрия рН 9,0 (NaHCO3, Riedel de Haen, кат. №31437). Alexa-647 готовили свежим путем добавления 100 мкл DMSO (Sigma, кат. № D2438) и 900 мкл 0,1 М карбоната натрия рН 9,0 в один флакон сукцинимидилового эфира карбоновой кислоты Alexa Fluor® 647 (1 мг/флакон, Molecular Probes, Leiden, Нидерланды, кат. № А-20006). В раствор IgG добавляли 5-кратный молярный избыток Alexa-647, рассчитанный как указано ниже, и инкубировали, с вращением, в темноте при комнатной температуре в течение 1 ч. После мечения несвязавшийся Alexa-647 удаляли на колонке PD-10 (Amersham Biosciences, кат. №17-0851-01), заполненной трис-буфером рН 8,0 (50 мМ трис-основания [Trizma base, Sigma, кат. № Т-6066], 100 мМ NaCl [Riedel de Haen, кат. №31437], 0,01% азида натрия [NaN3, Riedel de Haen, кат. №13412]). Количество Alexa-647, добавляемое в раствор IgG, рассчитывали по формуле:
добавляемый объем Alexa-647 (в мкл) = (конц. IgG (мг/мл)/м.в. IgG (Да) × соотношение × объем × м.в. Alexa-647 × 1000,
где: м.в. IgG = 150000 Да; соотношение означает молярный избыток Alexa-647; объем = объем подвергаемого мечению образца (в мл); м.в. Alexa-647 = 1250 Да.
Концентрацию белка (IgG) и степень включения метки (D.O.L.) определяли путем измерения OD при 280 нм и 650 нм на Ultrospec 2100 Pro (Amersham Biosciences). Концентрацию IgG (мг/мл) рассчитывали по формуле:
концентрация IgG=[A280-(0,03×A650)]/коэффициент экстинкции IgG,
а D.O.L. рассчитывали по формуле:
D.O.L.=А650/239000/[А280-(0,03×А650)/(коэффициент экстинкции IgG×м.в. IgG)],
где: 239000 - коэффициент экстинкции Alexa-647 при λmax в см-1⋅M-1; а 0,03 - поправочный коэффициент (A280 свободного красителя/Amax свободного красителя) (оба предоставлены производителем).
Бычий сывороточный альбумин (BSA; Sigma, кат. № А 2934) добавляли из 10% масс. раствора до конечной концентрации в 0,1% масс., а меченые антитела хранили при 5°С.
В некоторых случаях при скрининге на слияние, наряду с конъюгатом против IgG человека с Су5.5 для выявления человеческих антител, использовали меченый Су 5.5 конъюгат против IgG мыши для выявления определенных химерных антител. Образцы сканировали на установке Applied Biosystems 8200 Cellular Detection System (8200 CDS) и считывали показания в виде 'отсчет × флуоресценция'.
Пример 7. Получение гибридом для HuMab
Мышей HuMab при появлении достаточного (определяли как и выше) антигенспецифичного титра забивали и извлекали селезенку и лимфатические узлы, окружающие брюшную аорту и полую вену. Слияние спленоцитов и клеток лимфатических узлов с клетками миеломы мыши проводили методом электрослияния на установке CEEF 50 Electrofusion System (Cyto Pulse Sciences, Glen Burnie, MD, США), в основном следуя инструкциям производителя. Слитые клетки высеивали в среду для слияния, содержащую 10% эмбриональной бычьей сыворотки клона I (Perbio), 1 мМ пирувата натрия (Cambrex), 0,5 Е/мл пенициллина, 0,5 Е/мл стрептомицина (Cambrex), 50 мкМ 2-меркаптоэтанола (Invitrogen), 600 нг/мл интерлейкина-б (IL-6) (Strathmann), 1×НАТ (Sigma) и 0,5 мг/мл канамицина (Invitrogen) в HyQ mADCF-Mab (Perbio). Через 10 дней собирали супернатанты, а клетки обновляли средой выделения, содержащей 10% эмбриональной бычьей сыворотки клона I, 0,5 Е/мл пенициллина, 0,5 Е/мл стрептомицина, 600 нг/мл IL-6 и 1×proHT (Cambrex) в HyQ mADCF-Mab. Супернатанты культур гибридом подвергали скринингу методом первичного скрининга FMAT на клетках TC2013-CD74v1del2-36 и клетках TC2013-CD74v2del2-36 для выявления гибридом, продуцирующих человеческие (или химерные) антитела против CD74, как описано выше. Высеивали 60 самых лучших первичных лунок в полутвердую среду, состоящую из 40% CloneMedia (Genetix, Hampshire, UK) и 60% полной среды 2×HyQ (Hyclone, Waltham, USA). Из каждой первичной лунки засеивали две лунки черного 6-луночного планшета Genetix. Из каждой лунки отбирали 33 субклона, используя установку ClonePix (Genetix): Субклоны отбирали в среду выделения. Через 7 дней супернатанты субклонов снова подвергали скринингу на специфическое связывание со специфичным к CD74 IgG человека и измеряли концентрацию IgG человека с помощью Octet (Fortebio, Menlo Park, USA). Из каждой первичной лунки самый лучший субклон размножали в среде для размножения, содержащей только 600 нг/мл IL-6, 0,5 Е/мл пенициллина, 0,5 Е/мл стрептомицина и 1×proHT. Субклоны размножали из одной лунки 96-луночного планшета в одну лунку 24-луночного планшета, затем в четыре лунки 24-луночного планшета и в шесть лунок 6-луночного планшета, а затем в колбу Hyperflask (мелкомасштабная продукция). Супернатанты из колб Hyperflask подвергали скринингу на связывание со специфичным к CD74 IgG человека. Полученные при этом клоны были обозначены РС2013.
Пример 8. Масс-спектрометрия очищенных антител
Небольшие порции по 0,8 мл содержащих антитела супернатантов из 6-луночной стадии или стадии Hyperflask подвергали очистке на колонках PhyTip, содержащих смолу с белком G (PhyNexus Inc., San Jose, USA) на рабочей станции Sciclone ALH 3000 (Caliper Lifesciences, Hopkinton, USA). Колонки PhyTip использовали в соответствии с инструкциями производителя, но буфера поменяли. В качестве буфера для связывания использовали PBS (B. Braun, Medical B.V., Oss, Нидерланды), а в качества элюирующего буфера - 0,1М глицин-HCl рН 2,7 (Fluka Riedel-de Haen, Buchs, Germany). После очистки образцы нейтрализировали 2М трис-HCl рН 9,0 (Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, Нидерланды). Кроме того, в некоторых случаях большие объемы супернатантов культур подвергали очистке методом аффинной хроматографической на колонках с белком А.
После очистки образцы наносили на 384-луночный планшет (Waters, квадратные лунки на 100 мкл, №186002631). Образцы подвергали дегликозилированию с помощью N-гликозидазы F (Roche, кат. №11365177001) в течение ночи при 37°С. Добавляли (1 мкл на лунку) DTT (15 мг/мл) и инкубировали 1 час при 37°С. Образцы (5 или 6 мкл) обессоливали на установке Acquity UPLC™ (Waters, Milford, США) с колонкой ВЕН300 С18, 1,7 мкм, 2,1×50 мм при 60°С. В качестве элюентов А и В использовали воду MQ и ацетонитрил класса LC-MS (Biosolve, кат. №01204101, Valkenswaard, Нидерланды), соответственно, в обоих случаях с 0,1% муравьиной кислоты (Fluka, кат. №56302, Buchs, Германия). Времяпролетные масс-спектры при ионизации электрораспылением регистрировали онлайн на масс-спектрометре micrOTOF™ (Bruker, Bremen, Германия), работающем в режиме положительных ионов. Перед анализом проводили калибровку в интервале 900-3000 m/z с помощью настроечной смеси ES (Agilent Technologies, Santa Clara, США). Масс-спектры подвергали деконволюции с помощью программы DataAnalysis™ v3.4 (Bruker), используя поисковый алгоритм Maximal Entropy для молекулярных весов от 5 до 80 кДа.
После деконволюции полученные массы тяжелой и легкой цепи для всех образцов сопоставляли с целью поиска дубликатов антител. При сравнении тяжелых цепей учитывали возможное присутствие вариантов C-концевого лизина. В результате получили список уникальных антител, где уникальность определяется как уникальная комбинация тяжелых и легких цепей. При обнаружении дубликатов антител использовали результаты других тестов, чтобы решить, какой материал следует использовать для продолжения экспериментов.
При масс-спектрометрическом анализе молекулярных весов тяжелых и легких цепей 41 гибридомы против CD74 получили 18 уникальных антител (уникальных комбинаций тяжелой цепи и легкой цепи).
Пример 9. Анализ последовательности вариабельных доменов специфичных к CD74 HuMab и клонирование их в экспрессирущих векторах
Выделяли тотальную РНК антител HuMab против CD74 из 5×106 гибридомных клеток и получали комплементарную ДНК (кДНК) методом 5'-RACE- из 100 нг тотальной РНК с помощью набора SMART RACE cDNA Amplification kit (Clontech) согласно инструкциям производителя. Кодирующие участки VH (вариабельной области тяжелой цепи) и VL (вариабельной области легкой цепи) амплифицировали методом ПЦР. Амплифицированные ПЦР-продукты антител 006, 008 и 011 клонировали в вектор pCR-Blunt II-TOPO (Invitrogen) с помощью набора для клонирования Zero Blunt PCR (Invitrogen).
Амплифицированные ПЦР-продукты VH и VL антитела 005 клонировали в вектор pcDNA3.3 (Invitrogen), кодирующий G1f и константные каппа-домены. Для каждого HuMab секвенировали 16 клонов VL и 8 клонов VH. Клоны с ожидаемой массой тяжелой и легкой цепи в соответствии с массой полученного из гибридомы материала из того же антитела (при определении методом масс-спектрометрии) отбирали для дальнейшего изучения и экспрессирования. Полученные последовательности представлены в перечне последовательностей и на фиг.2.
В таблице 1 и таблице 2 (ниже) приведена сводка информации о последовательностях антител и наиболее гомологичных гаметных последовательностях.
Таблица 1 | |||||
Гомология тяжелых цепей | |||||
Ab | Ген V и его аллель | Идентичность по V-области, % (нт) | Ген J и его аллель | Ген D и его аллель | Длина CDR-IMGT |
005 | IGHV3-30-3*01 | 100,0 (288/288 нт) | IGHJ4-02 | IGHD3-10*01 | 8.8.17 |
006 | IGHV3-30-3*01 | 98,6 (284/288 нт) | IGHJ4*02 | IGHD3-16*02 | 8.8.17 |
008 | IGHV3-30-3*01 | 100,0 (288/288 нт) | IGHJ4*02 | IGHD3-16*02 | 8.8.17 |
011 | IGHV3-33*01 | 99,7 (287/288 нт) | IGHJ6*02 | IGHD3-10*01 | 8.8.16 |
Таблица 2 | ||||
Гомология легких цепей | ||||
Ab | Ген V и его аллель | Идентичность по V-области, % (нт) | Ген J и его аллель | Длина CDR-IMGT |
005 | IGKV1D-16*01 | 99,6 (278/279 нт) | IGKJ4*01 | 6.3.9 |
006 | IGKV1D-16*01 | 100,0 (279/279 нт) | IGKJ4*01 | 6.3.9 |
008 | IGKV1D-16*01 | 100,0 (279/279 нт) | IGKJ4*01 | 6.3.9 |
011 | IGKV1D-16*01 | 100,0 (279/279 нт) | IGKJ4*01 | 6.3.9 |
Таблица 3 | |
Ссылки на перечень последовательностей | |
VH-область | |
SEQ ID No:7 | VH 005 |
SEQ ID No:8 | VH 005, CDR1 |
SEQ ID No:9 | VH 005, CDR2 |
SEQ ID No:10 | VH 005, CDR3 |
SEQ ID No:11 | VH 006 |
SEQ ID No:12 | VH 006, CDR1 |
SEQ ID No:13 | VH 006, CDR2 |
SEQ ID No:14 | VH 006, CDR3 |
SEQ ID No:15 | VH 008 |
SEQ ID No:16 | VH 008, CDR1 |
SEQ ID No:17 | VH 008, CDR2 |
SEQ ID No:18 | VH 008, CDR3 |
SEQ ID No:19 | VH 011 |
SEQ ID No:20 | VH 011, CDR1 |
SEQ ID No:21 | VH 011, CDR2 |
SEQ ID No:22 | VH 011, CDR3 |
VL-область | |
SEQ ID No:23 | VL 005 |
SEQ ID No:24 | VL 005, CDR1 (=VL 011, VL 006, и VL 008 CDR1) |
AAS | VL 005, CDR2 (=VL 011, VL 006, и VL 008 CDR2) |
SEQ ID No:25 | VL 005, CDR3 (=VL 011, VL 006, и VL 008 CDR3) |
SEQ ID No:26 | VL 006 = VL 008 = VL 011 |
Пример 10. Очистка антител
Супернатанты из культур фильтровали через накладные фильтры на 0,2 мкм и наносили на колонки с 5 мл белка A (rProtein A FF, Amersham Bioscience) и элюировали 0,1 М лимонной кислотой-NaOH, рН 3. Элюат немедленно нейтрализировали 2М трис-HCl, рН 9 и диализировали в течение ночи до 12,6 мМ NaH2PO4, 140 мМ NaCl, pH 7,4 (B. Braun). После диализа образцы стерилизовали фильтрованием через накладные фильтры на 0,2 мкм. Чистоту определяли методом SDS-PAGE, а концентрацию измеряли по нефелометрии и поглощению при 280 нм. Очищенные антитела разделяли на порции и хранили при -80°С. После оттаивания порции очищенных антител хранили при 4°С. Молекулярную массу тяжелых и легких цепей антител, экспрессируемых гибридомами, определяли методом масс-спектрометрии, как описано в примере 9.
Пример 11. Связывание специфичных к CD74 антител HuMab с рекомбинантным внеклеточным доменом двух изоформ CD74 при определении методом ELISA и с клеточным CD74 на клетках Raji при определении методом FACS
Измеряли связывание антител HuMab против CD74 с двумя изоформами CD74 методом ELISA (фиксировали рекомбинантный внеклеточный домен CD74) и с клеточным CD74 на клетках Raji (ATCC, Manassas, VA) методом FACS.
Планшеты для ELISA (Greiner BioOne) в течение ночи при 4°С покрывали при 2 мкг/мл, по 100 мкл на лунку, рекомбинантным CD74VL или CD74v2 в PBS (В. Braun Melsungen AG). Последовательности и получение изоформ описаны выше. Лунки для ELISA промывали три раза PBS, содержащим 0,05% Tween-20 (PBST), сливали, блокировали 1% масс. BSA фракции V (Roche) в PBS при комнатной температуре в течение 1 ч со встряхиванием (300 об/мин) и сливали. После этого добавляли по 100 мкл антител HuMab против CD74 в виде серийных разведении в 0,2% масс. BSA фракции V в PBST (буфер для определения) и инкубировали со встряхиванием при комнатной температуре в течение 90 мин. Планшеты для ELISA промывали три раза PBST, сливали и выявляли связанные антитела HuMab с помощью конъюгированных с HRP козьих антител против IgG человека (100 мкл; 1:5000; Peroxidase Affinipure Goat anti-human IgG, F(ab')2 Fragment Specific [min X Bov,Hrs,Ms Sr Prot]; Jackson ImmunoResearch) в буфере для определения при инкубировании со встряхиванием при комнатной температуре в течение 90 мин. Планшеты промывали три раза PBST, сливали и инкубировали со 100 мкл раствора ABTS (50 мл буфера ABTS [Roche] и одна таблетка ABTS [50 мг; Roche]). После инкубации в темноте при комнатной температуре в течение 30 мин реакцию останавливали добавлением 100 мкл на лунку щавелевой кислоты (2% масс.). Планшеты измеряли по OD при 405 нм на считывающем устройстве для ELISA (Biotek Instruments, EL808 Absorbance Microplate Reader).
Для анализа методом FACS высеивали по 105 клеток на лунку в 100 мкл буфера FACS (PBS с добавлением 0,1% BSA и 0,02% азида натрия) в круглодонные 96-луночные планшеты. Клетки центрифугировали (1200 об/мин, 4°С, 5 мин) и отбрасывали супернатант. Добавляли серийные разведения антител HuMab против CD74 (100 мкл) и инкубировали на льду в течение 1 ч. Клетки промывали буфером FACS, супернатанты отбрасывали и добавляли 100 мкл меченных R-фикоэритрином козьих антител против IgG человека (R-Phycoerythrin AffiniPure F(ab')2 Frag Gt Anti-Human IgG, Fcγ Frag Spec [min X Bov,Hrs,Ms Sr Prot]; Jackson ImmunoResearch), разведенных 1:100 в буфере FACS. После 1 часа на льду (в темноте) клетки промывали один раз в буфере FACS, отбрасывали супернатант и выявляли специфическое связывание антител HuMab методом проточной цитометрии на установке FACS Canto II (BD Biosciences).
В качестве отрицательного контроля использовали контроль на изотип - Ab IgG1-b12. Кривые связывания анализировали методом нелинейной регрессии (сигмоидные кривые доза-эффект с переменным наклоном) с помощью программы GraphPad Prism 5 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA).
Как видно из фиг.3, HuMab-CD74-006 и -011 связываются с высоким сродством (значения ЕС50 от 210 до 344 нг/мл) с обеими изоформами внеклеточного домена CD74. HuMab-CD74-008 связывается с промежуточным сродством (ЕС50 от 759 до 1391 нг/мл) с обеими изоформами.
Как видно из фиг.4, HuMab-CD74-006 и -011 также связываются с высоким сродством (ЕС50 от 150 до 200 нг/мл) с клеточным CD74, экспрессированным на клетках Raji. HuMab-CD74-008 и -005 связываются с клеточным CD74 с промежуточным сродством (значения ЕС50 было невозможно определить, так как не достигалось максимальное связывание).
В таблице 4 представлены значения ЕС50 специфичных к CD74 антител HuMab для связывания с внеклеточным доменом CD74v1 и CD74v2 методом ELISA и с клеточным CD74 методом FACS на клетках Raji.
Таблица 4 | |||
Сводка значений ЕС50 для связывания специфичных к CD74 антител HuMab с внеклеточным доменом CD74v1 и CD74v2 при определении методом ELISA и с клеточным CD74 на клетках Raji при определении методом FACS. Все антитела HuMab получали при кратковременной совместной трансфекции клеток HEK293F соответствующими векторами, экспрессирующими тяжелые и легкие цепи (как описано выше). | |||
HuMab-CD74- | EC50 (ELISA) | EC50 (FACS) | |
CD74v1 | CD74v2 | ||
005 | н/о | н/о | н/р |
006 | 321 | 210 | 196 |
008 | 1391 | 759 | н/р |
011 | 344 | 245 | 151 |
Значения EC50 приведены в нг/мл | |||
н/р - не поддается расчету | |||
н/о - не определяли. |
Пример 12. Перекрестная реактивность антител HuMab против CD74 к тканям макаки
Способность специфичных к CD74 антител HuMab к связыванию с CD74 макаки тестировали по иммуногистохимии. Иммуногистохимию с антителами HuMab против CD74 проводили на замороженных миндалинах человека и ткани лимфатических узлов макаки, при этом ожидается экспрессия CD74 на (фолликулярных) В-лимфоцитах и макрофагах. Делали срезы замороженной ткани (толщиной 4-6 мкм) и фиксировали в ацетоне. Антитела HuMab образовали комплекс с флуоресцеин-изотиоцианатом (FITC) при инкубации с конъюгированным с FITC козьим антителом против IgG(Fc) человека (Fab) (Protos) (при соотношении 1:1 с Humab). Перед окрашиванием с HuMab (1 мкг/мл) ткани блокировали по эндогенному биотину, пероксидазе (РО) и иммуноглобулинам. Комплекс HuMab-Fab-FITC выявляли при последующей инкубации с кроличьим антителом против FITC (Invitrogen) (разведение 1:1000) и конъюгированным с РО козьим антителом против IgG кролика (Powervision, [rb IgG]-PO; неразведенное). Активность РО визуализировали с аминоэтилкарбазолом (АЕС) в качестве субстрата, дающим красную окраску, а ядра визуализировали с гематоксилином (синий). Окрашивание тканей изучали методом световой микроскопии (Axioskop-2 plus), преобразовывали в цифровые снимки с помощью камеры Axiocam и хранили в виде цифровых снимков.
Как видно из фиг.5, HuMab-CD74-006 и -011 проявляли перекрестную реактивность с CD74 макаки, о чем свидетельствует окрашивание макрофагов и фолликулярных В-клеток (окрашивание на контрольный изотип отрицательно). Степень перекрестной реактивности с CD74 макаки была меньше у HuMab-CD74-006, чем у -011, о чем свидетельствует менее интенсивное окрашивание ткани макаки по сравнению с тканью человека.
Пример 13. Индуцирование ADCC и CDC
Индуцирование ADCC специфичными к CD74 антителами HuMab тестировали методом высвобождения 5lCr. Вкратце, клетки Raji метили с помощью 100 μCi 5lCr и использовали в качестве клеток-мишеней. В качестве эффекторных клеток использовали мононуклеары периферической крови, выделенные из лейкоцитарных пленок. Клетки-мишени преинкубировали с антителами HuMab против CD74 (комнатная температура, 30 мин) и добавляли эффекторные клетки, при этом соотношение эффектор-мишень составляло 100:1, и инкубировали при 37°С, 5% CO2, в течение ночи. Высвобождение 51Cr в супернатанте измеряли на гамма-счетчике. Никакой существенной индукции ADCC антителами HuMab против CD74 не было обнаружено.
Индуцирование CDC антителами HuMab против CD74 тестировали с помощью пропидия йодида. Вкратце, клетки Raji преинкубировали с антителами HuMab против CD74 (комнатная температура, 15 мин), добавляли нормальную сыворотку человека до конечной концентрации в 20%, и инкубировали при 37°С, 5% СО2 в течение 45 мин. Для остановки реакции планшеты ставили на лед. Добавляли пропидия йодид и анализировали клетки методом FACS. Никакой существенной индукции CDC антителами HuMab против CD74 не было обнаружено.
Пример 14. Опосредованная антителами интернализация и гибель клеток, вызванная антителами HuMab против CD74 при анализе с помощью анти-каппа-ЕТА'
Чтобы оценить пригодность антител HuMab против CD74 для подхода типа конъюгатов антитело-препарат, разработали обобщенный метод измерения гибели клеток in vitro с использованием направленного на каппа-цепь экзотоксина A Pseudomonas (анти-каппа-ЕТА'). В этом методе используется конструкция, состоящая из высокоаффинного доменного антитела против легкой каппа-цепи человека и укороченной формы экзотоксина A Pseudomonas, а также удерживающего мотива KDEL. После интернализации конструкция из доменного антитела против каппа с ЕТА' подвергается протеолизу и восстановлению дисульфидных связей с отделением каталитического и связывающего домена. Каталитический домен переносится из системы Гольджи в эндоплазматический ретикулум через удерживающий мотив KDEL, а затем перемещается в цитозоль, где он ингибирует синтез белка и индуцирует апоптоз (Kreitman RJ., BioDrugs 2009, 23(1):1-13).
Опосредованную антителами интернализацию и вызванную токсином гибель клеток тестировали для различных антител HuMab против CD74 на клетках Raji. Число молекул CD74, экспрессированных на поверхности клеток Raji, составляет 104 молекул на клетку по методике с набором QIFIKIT® (Dako, Glostrup, Дания). Высеивали по 104 клеток на лунку в среде для клеточных культур в 96-луночные планшеты для тканевых культур (Greiner BioOne). Планшеты инкубировали 1 ч при 37°С, чтобы дать клеткам прикрепиться. Для идентификации антител HuMab против CD74, способствующих интернализации и уничтожению клеток токсином, анти-каппа-ЕТА' перед добавлением к клеткам проинкубировали при фиксированной концентрации (конечная концентрация 1 мкг/мл в лунках), не вызывающей неспецифической гибели клеток в отсутствие антител, в течение 30 мин с оттитрованным количеством антител HuMab против CD74. Через 3 дня определяли содержание жизнеспособных клеток с помощью AlamarBlue (BioSource International, San Francisco, США), который добавляли по 10 мкл на лунку, в соответствии с инструкциями производителя. После инкубации при 37°С в течение 4 ч регистрировали флуоресценцию на считывающем устройстве En Vision 2101 Multilabel reader (PerkinElmer, Turku, Финляндия) при стандартных настройках для AlamarBlue. В качестве отрицательного контроля использовали контроль на изотип - антитело IgG1-b12, проинкубированное с анти-каппа-ЕТА'. В качестве контроля для определения фонового сигнала использовали стауроспорин (Sigma-Aldrich), который добавляли к клеткам при конечной концентрации в 1 мкг/мл.
Степень жизнеспособности рассчитывали следующим образом:
(FLопыт-FLфон)/(FLконтроль-FLфон)×100%,
где: FLконтроль = флуоресценция в необработанных лунках, а FLфон = флуоресценция в обработанных стауроспорином лунках.
Как видно из фиг.6 и таблицы 5, все проинкубированные с анти-каппа-ЕТА' антитела HuMab против CD74 вызывали гибель клеток Raji дозо-зависимым образом. Проинкубированные с анти-каппа-ЕТА' HuMab-CD74-006, -011, -005 и -008 эффективно вызывали гибель клеток (ЕС50 от 25 до 250 мкг/мл, а минимальная степень жизнеспособности составляла от 0 до 15%). Преинкубированное с анти-каппа-ЕТА' контрольное mAb IgG1-b12 не вызывало гибели клеток.
Таблица 5 | ||
Сводка значений EC50 и степени жизнеспособности клеток после обработки клеток Raji антителами HuMab против CD74, проинкубированными с анти-каппа-ЕТА'. Данные представлены в виде значений ЕС50 (в мкг/мл) и минимальной степени жизнеспособности клеток Raji, обработанных антителами HuMab против CD74, проинкубированными с анти-каппа-ЕТА', полученных в одном репрезентативном эксперименте. | ||
Антитело (HuMab-CD74-) | Жизнеспособность (%) | EC50 (мкг/мл) |
005 | 3,24 | 120 |
006 | 1,50 | 57 |
008 | 14,65 | 247 |
011 | 0,47 | 25 |
IgG1-b12 | 85,89 | н/рa |
а) не поддается расчету |
Пример 15. Получение специфичных к CD74 ADCs
HuMab-CD74-005, HuMab-CD74-006, HuMab-CD74-011 и отрицательный контроль IgG1-b12 продуцировали кратковременно в клетках HEK-293F. Антитела очищали методом хроматографии с белком А по стандартной методике, получая в конечном счете примерно 263 мг очищенного HuMab-CD74-005, 165 мг HuMab-CD74-006 и 720 мг HuMab-CD74-011. Количество полученных конъюгированных антител приведено в таблице 6. Препарат-линкер vcMMAE или mcMMAF подвергали алкилированию по цистеинам восстановленных антител по описанным в литературе методикам (Sun et al. (2005) Bioconjugate Chem. 16:1282-1290; McDonagh et al. (2006) Protein Eng. Design Sel. 19:299-307; Alley et al. (2008) Bioconjugate Chem. 19:759-765). Реакцию останавливали добавлением избытка N-ацетилцистеина. Остаток неконъюгированного препарата удаляли диафильтрацией, и конечные конъюгаты специфичных к CD74 антител с препаратами переводили в PBS.
После этого конъюгаты специфичных к CD74 антител с препаратами подвергали анализу на концентрацию (по поглощению при 280 нм), соотношение препарат-антитело ('DAR') методом обратнофазовой хроматографии (RP-HPLC) и гидрофобной хроматографии (HIC), содержание неконъюгированного препарата (методом обратнофазовой хроматографии), степень агрегации (методом эксклюзионной хроматографии, SEC-HPLC) и уровень эндотоксина (тестом на эндотоксин с лизатом амебоцитов Limulus (LAL)). Результаты представлены в таблице 7.
Таблица 6 | ||
Количество полученных ADCs | ||
Антитело HuMab-CD74- | Линкер-препарат | Количество ADC (мг) |
005 | vcMMAE | 94 |
005 | mcMMAF | 91 |
006 | vcMMAE | 63 |
006 | mcMMAF | 60 |
011 | vcMMAE | 276 |
011 | mcMMAF | 293 |
b12 | vcMMAE | 174 |
b12 | mcMMAF | 245 |
Таблица 7 | ||||||||
Анализ конъюгатов антитело-препарат | ||||||||
Определение | HuMab-CD74-005 | HuMab-CD74-006 | HuMab-CD74-011 | IgG1-b12 | ||||
vcMMAE | mcMMAF | vcMMAE | mcMMAF | vcMMAE | mcMMAF | vcMMAE | mcMMAF | |
Концентрация (мг/мл) | 7,2 | 6,4 | 6,4 | 6,2 | 8,2 | 8,1 | 6,6 | 9,1 |
DAR по RP-HPLC | 3,9 | 3,9 | 4,0 | 3,7 | 3,8 | -* | 3,2 | 3,9 |
DAR по HIC | 4,0 | 4,0 | 4,0 | 4,1 | 3,9 | 3,9 | 3,3 | 4,0 |
Неконъюгированный препарат (%) | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
Агрегаты по SEC-HPLC (%) | 1,3 | 1,2 | 0,7 | 0,3 | 0,7 | 0,3 | 0,8 | 1,0 |
Эндотоксин (ЕЭ/мг) | 0,199 | 0,152 | 0,101 | 0,085 | 0,200 | 0,083 | 0,078 | 0,104 |
* DAR не поддается определению вследствие наложения пиков |
Пример 16. Связывание ADCs против CD74 с рекомбинантным внеклеточным доменом CD74v1 при определении методом ELISA
Измеряли связывание специфичных к CD74 ADCs с CD74 методом ELISA (фиксировали рекомбинантный внеклеточный домен CD74v1) и сравнивали со связыванием неконъюгированных специфичных к CD74 антител HuMab.
Планшеты для ELISA (Greiner BioOne) в течение ночи при 4°С покрывали при 2 мкг/мл, по 100 мкл на лунку, рекомбинантным CD74ECDHis в PBS (В. Braun Melsungen AG). Планшеты сливали и блокировали по 200 мкл/лунку PBS, содержащим 0,05% Tween-20 (PBST) со встряхиванием (300 об/мин), при комнатной температуре в течение 1 ч, промывали три раза по 300 мкл PBST и сливали. После этого добавляли по 100 мкл ADCs против CD74 или неконъюгированных специфичных к CD74 антител HuMab в виде серийных разведении в PBST и инкубировали со встряхиванием при комнатной температуре в течение 2 ч. Связанные ADCs против CD74 и неконъюгированные антитела HuMab выявляли добавлением конъюгированного с HRP мышиного антитела против IgG1 человека (100 мкл; 0,015 мкг/мл; Sanquin; # M1328) в PBST и инкубировали со встряхиванием при комнатной температуре в течение 2 ч. Планшеты промывали три раза PBST, сливали и инкубировали со 100 мкл раствора ABTS (50 мл буфера ABTS [Roche] и одна таблетка ABTS [50 мг; Roche]). После инкубации в темноте со встряхиванием при комнатной температуре в течение 30 мин реакцию останавливали добавлением 100 мкл на лунку щавелевой кислоты (2% масс., Riedel de Haen) в темноте со встряхиванием на 10 мин. Планшеты измеряли при OD 405 нм на считывающем устройстве для ELISA (Biotek Instruments, EL808 Absorbance Microplate Reader).
В качестве отрицательного контроля использовали антитело IgG1-b12, которое связывается с посторонним антигеном (как не конъюгированное, так и в формате ADC). Кривые связывания анализировали методом нелинейной регрессии (сигмоидные кривые доза-эффект с переменным наклоном) с помощью программы GraphPad Prism 5 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA).
Все антитела HuMab и ADCs против CD74 связывались в аналогичном диапазоне с внеклеточным доменом CD74v1 при ELISA (значения ЕС50 от 0,02 до 0,04 мкг/мл), о чем свидетельствуют кривые связывания на фиг.7. В таблице 8 представлены значения ECso специфичных к CD74 антител HuMab и ADCs для связывания с внеклеточным доменом CD74.
Таблица 8 | |||
Сводка значений ЕС50 для связывания специфичных к CD74 антител HuMab и ADCs с внеклеточным доменом CD74v1 при определении методом ELISA. Значения ЕС50 приведены в мкг/мл. Данные представлены в виде средних значений EC50, рассчитанных из четырех независимых экспериментов. | |||
HuMab-CD74- | EC50 (ELISA) | ||
Неконъюгированное | vcMMAE | mcMMAF | |
005 | 0,03 | 0,04 | 0,04 |
006 | 0,02 | 0,03 | 0,02 |
011 | 0,02 | 0,03 | 0,02 |
Пример 17. Связывание специфичных к CD74 ADCs с экспрессированным на поверхности CD74 при определении методом FACS на клетках Daudi
Измеряли связывание ADCs против CD74 с экспрессированным на поверхности CD74 методом FACS на клетках Daudi и сравнивали со связыванием неконъюгированных антител HuMab против CD74.
Высеивали по 1×105 клеток Daudi на лунку в 100 мкл PBS, содержащего 0,1% бычьего сывороточного альбумина (BSA) (Roche, кат. №10735086001) и 0,02% азида натрия (Sigma-Aldrich, кат. №13412) (буфер FACS), в круглодонные 96-луночные планшеты (Greiner BioOne, кат. №650101). Клетки центрифугировали (1200 об/мин, 4°С, 3 мин) и отбрасывали супернатанты. Добавляли серийные разведения антител HuMab или ADCs против CD74 (100 мкл) и инкубировали на льду в течение 30 мин. Клетки промывали дважды 150 мкл буфера FACS и добавляли 100 мкл кроличьих антител против IgG человека с FITC (Dako, кат. № F0185), разведенных 1:100 в буфере FACS. После 30 мин на льду (в темноте) клетки промывали дважды 150 мкл буфера FACS и выявляли специфическое связывание антител HuMab и ADCs методом проточной цитометрии на установке FACS Canto II (BD Biosciences).
В качестве отрицательного контроля использовали контроль на изотип - антитело IgG1-b12, которое связывается с посторонним антигеном (как не конъюгированное, так и в виде ADC). Кривые связывания анализировали методом нелинейной регрессии (сигмоидные кривые доза-эффект с переменным наклоном) с помощью программы GraphPad Prism 5 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA).
На фиг.8 представлены кривые связывания, а в таблицах 9 и 10 приведены значения ЕС50 и средние значения максимальной интенсивности флуоресценции для связывания антител HuMab и ADCs против CD74 с экспрессированным на поверхности CD74. Все конъюгированные антитела HuMab против CD74, кроме одного, связывались с экспрессированным на поверхности CD74 на клетках Daudi со сродством, близким к соответствующим неконъюгированным антителам HuMab. Конъюгат vcMMAE с HuMab-CD74-005 связывался с большим сродством (меньшее значение EC50), чем неконъюгированное HuMab. HuMab-CD74-005 и его конъюгат с mcMMAF связывались с меньшим сродством, чем HuMab-CD74-006 и -011 и их конъюгаты. Максимальное связывание было меньше у конъюгированных с vcMMAE HuMab-CD74-006 и -011, чем у соответствующих неконъюгированных антител HuMab.
Таблица 9 | |||
Сводка значений ЕС50 для связывания специфичных к CD74 антител HuMab и ADCs с экспрессированным на поверхности CD74 при определении методом FACS на клетках Daudi. Значения ЕС50 приведены в мкг/мл. Данные представлены в виде средних значений ЕС50, рассчитанных из трех независимых экспериментов. | |||
HuMab-CD74- | EC50 (FACS) | ||
Неконъюгированное | vcMMAE | mcMMAF | |
005 | 1,27 | 0,26 | 1,05 |
006 | 0,04 | 0,03 | 0,03 |
011 | 0,05 | 0,05 | 0,05 |
Таблица 10 |
Сводка средних значений интенсивности флуоресценции при 10 мкг/мл специфичных к CD74 антител HuMab и ADCs при определении методом FACS на клетках Daudi. Данные представлены в виде средних значений максимальной MFI при измерении при 10 мкг/мл mAbs HuMab-CD74 и ADCs. Средние значения максимальной MFI рассчитывали из трех независимых экспериментов. | |||
HuMab-CD74- | Максимальное связывание (FACS) | ||
Неконъюгированное | vcMMAE | mcMMAF | |
005 | 2784 | 2863 | 2526 |
006 | 4599 | 3277 | 4050 |
011 | 5782 | 3791 | 5330 |
Пример 18. Опосредованная антителами интернализация и гибель клеток, вызванная ADCs против CD74 при анализе на клетках in vitro
Для определения способности ADCs против CD74 индуцировать цитотоксичность проводили анализ гибели клеток in vitro.
Тестировали гибель клеток из 4 клеточных линий для различных ADCs против CD74. Все линии клеток получали из American Tissue Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA): Raji (кат. № CCL-86), Daudi (кат. № CCL-213), M4A4 (кат. № CRL-2914; происходят из линии клеток человека MDA MB 435) и клетки NCI-H747 (кат. № CCL-252, происходят из метастаза колоректальной аденокарциномы). Клетки высеивали при оптимальной концентрации (Raji: 1×104 клеток/лунку; Daudi: 1×103 клеток/лунку, M4A4: 2×103 клеток/лунку, NCI-H747: 3×103 клеток/лунку) в 100 мкл среды культивирования клеток (для Daudi и Raji: RPMI 1640 [Lonza, кат. № BE12-115F] с добавлением 10% телячьей сыворотки Cosmic [Perbio Science Nederland B.V., кат. № SH30087.04], 2 мМ L-глутамина [Lonza, кат. № BE17-605F] и 1 мМ пирувата натрия [Lonza, кат. № ВЕ13-115Е]; для NCI-H747: RPMI 1640 с добавлением 10% телячьей сыворотки Cosmic, 1 мМ пирувата натрия, 0,15% бикарбоната натрия [Lonza, кат. № ВЕ17-613Е] и 0,5% глюкозы [Sigma, кат. № G8769]; и для M4A4: DMEM [Lonza, кат. № BE12-709F] с добавлением 10% телячьей сыворотки Cosmic) в 96-луночные планшеты для тканевых культур (Greiner BioOne) и давали им прикрепиться. Добавляли серийные разведения ADCs против CD74 и инкубировали при 37°С в течение трех (Raji, Daudi) или пяти (M4A4, NCI-H747) дней. Количество жизнеспособных клеток определяли с помощью AlamarBlue (кат. № DAL1100, BioSource International, San Francisco, USA) в соответствии с инструкциями производителя. Флуоресценцию регистрировали на считывающем устройстве En Vision 2101 Multilabel reader (PerkinElmer, Turku, Финляндия) при стандартных настройках для AlamarBlue. В качестве отрицательного контроля использовали ADCs антитела IgG1-b12, которое связывается с посторонним антигеном. Для индуцирования максимальной гибели клеток использовали стауроспорин (Sigma, # S6942). Количество молекул CD74 на клетках определяли с помощью набора QIFIKIT® (Dako, Glostrup, Дания) в соответствии с инструкциями производителя, используя мышиный IgG1 против CD74 (клон Ву2; Santa Cruz, кат. № SC-20062) и контроль на изотип - антитело CLB (кат. № M1415). Оба антитела использовали при концентрации в 10 мкг/мл. Было установлено, что клетки Raji и Daudi экспрессируют ~20000, а клетки М4А4 ~11000 молекул CD74 на поверхности клеток.
Как видно из фиг.9 и таблицы 11, все ADCs против CD74 способны вызвать гибель клеток Raji, Daudi и М4А4 дозо-зависимым образом. Значения IC50 для всех конъюгатов были в 5-12 раз выше на клетках М4А4 (т.е. меньшая эффективность), экспрессирующих CD74 на примерно в 6 раз меньшем уровне. Клетки NCI-H747 погибали только при самой высокой дозе ADCs (10 мкг/мл). Для HuMab-CD74-006 и -011 конъюгаты с mcMMAF немного более эффективно вызывали гибель клеток Daudi и Raji, чем конъюгаты с vcMMEA (-006: значения IC50 в три раза меньше на клетках Daudi и в пять раз меньше на клетках Raji; -011: значения IC50 в два раза меньше на клетках Daudi и в четыре раза меньше на клетках Raji).
Таблица 11 | ||||||||
Сводка значений IC50 и степени гибели клеток, вызванной ADCs против CD74. Данные представлены в виде средних значений Юзо (в мкг/мл) и средних значений максимальной гибели клеток (при концентрации в 10 мкг/мл) указанных линий клеток, обработанных ADCs против CD74. Данные рассчитывали из трех независимых экспериментов. Степень гибели клеток (% погибших клеток) рассчитывали следующим образом: (MFIнеобработанные-MFIобработанные ADC против CD74)/(MFIнеобработанные-MFIобработанные стауроспорином)×100%. | ||||||||
ADC | Ragi | Daudi | М4А4 | NCI-H747 | ||||
Гибель | IC50 | Гибель | IC50 | Гибель | IC50 | Гибель | IC50 | |
005-vcMMAE | 88 | 0,11 | 85 | 0,08 | 100 | 0,56 | 41 | 7,48 |
005-mcMMAF | 92 | 0,05 | 90 | 0,03 | 97 | 0,38 | 5 | н/оa) |
006-vcMMAE | 90 | 0,05 | 85 | 0,03 | 100 | 0,28 | 49 | 6,12 |
006-mcMMAF | 93 | 0,01 | 93 | 0,01 | 97 | 0,12 | 21 | н/оa) |
011-vcMMAE | 89 | 0,04 | 86 | 0,02 | 100 | 0,32 | 40 | 7,91 |
011-mcMMAF | 92 | 0,01 | 92 | 0,01 | 96 | 0,10 | 17 | н/оa) |
b12-vcMMAE | н/оa | 0 | Н/0a | н/оa | 0 | н/оa | ||
b12-mcMMAF | н/оa | 0 | Н/0a | н/оa | 0 | н/оa | ||
a) не поддается расчету, так как не достигается уровень плато на кривой |
Пример 19. Терапевтическое лечение привитых опухолей Daudi у мышей SCID специфичными к CD74 ADCs
Эффективность ADCs HuMab-CD74-011 in vivo определяли на привитых внутривенно (i.v.) опухолях-ксенотрансплантатах Daudi (лимфома Беркитта) у мышей SCID.
Клетки Daudi трансфецировали методом электропорации люциферазой gWIZ (Aldevron, Fargo, ND, USA) и вектором pPur (BD Biosciences, Alphen a/d Rijn, Нидерланды) в соотношении 4:1. Через 48 ч добавляли пуромицин для отбора стабильно трансфецированных клонов (Daudi-luc). Клетки Daudi-luc #1Е3 культивировали в RPMI с добавлением 10% телячьей сыворотки Cosmic (кат. № SH30087.04, Hyclone), 1% пенициллина/стрептомицина (кат. № DE 17-603, Cambrex, Германия), 1% пирувата натрия и 1 мкг/мл пуромицина (кат. № Р-8833, Sigma, Zwijndrecht, Нидерланды). Самкам мышей SCID вводили i.v. 2,5×106 раковых клеток Daudi-luc в 100 мкл PBS в хвостовую вену. Мышей подвергали томографии сразу же после инокуляции опухолей, а затем с недельными интервалами, начиная с 14-го дня. Для томографии мышей анестезировали с помощью изофлурана, а затем вводили внутрибрюшинно (i.p.) 2,5 мг D-люциферина (в виде кислоты, кат. № ВТ11-1000; Biothema, Haninge, Швеция) в 200 мкл 10 мг/мл трис (кат. № T60666-1kg, Sigma). Биолюминесцентную томографию (BLI), со спины (дорзальный вид), начинали через 10 мин после введения D-люциферина, время экспозиции - 5 мин, на Biospace Imager. Делали черно-белые снимки для анатомической привязки. Мышам два раза в неделю вводили по 60 мкг (~3 мг/кг) HuMab-CD74-011 и контрольного антитела (IgG1-b12), то и другое как в виде ADC, так и неконъюгированного IgG1, в 100 мкл PBS, начиная с 21-го дня после инокуляции опухоли, в общей сложности 4 раза. Перед обработкой мышей разделяли на группы по семь мышей, причем все группы имели в среднем одинаковые сигналы BLI и одинаковые дисперсии.
Из фиг.10 видно, что и HuMab-CD74-011-vcMMAE, и -mcMMAF эффективно уменьшали размеры i.v. опухолей Daudi-luc. Как видно из фиг.10, проявлялась тенденция к более сильному подавлению роста опухолей в случае неконъюгированного HuMab-CD74-011 по сравнению с группой контрольного антитела, хотя эти отличия не были значимы.
Пример 20. Терапевтическое лечение привитых опухолей Raji у мышей SCID с помощью ADCs против CD74
Эффективность ADCs против CD74 in vivo также определяли на модели внутривенных (i.v.) опухолей-ксенотрансплантатов Raji у мышей SCID.
Клетки Raji трансфецировали методом электропорации люциферазой gWIZ (Aldevron, Fargo, ND, USA) и вектором pPur (BD Biosciences, Alphen a/d Rijn, Нидерланды) в соотношении 4:1. Через 48 ч добавляли пуромицин для отбора стабильно трансфецированных клонов (Raji-luc). Клетки Raji-luc #2D1 культивировали в RPMI с 10% телячьей сыворотки Cosmic (кат. № SH30087.04, Hyclone), 1% пенициллина/стрептомицина (кат. № DE17-603, Cambrex, Германия), 1% пирувата натрия и 1 мкг/мл пуромицина (кат. № Р-8833, Sigma, Zwijndrecht, Нидерланды). Самкам мышей SCID вводили i.v. 2,5×106 раковых клеток Raji-luc в 100 мкл PBS в хвостовую вену. Мышей подвергали томографии сразу же после инокуляции опухолей, а затем с недельными интервалами, начиная с 7-го дня. Для томографии мышей анестезировали с помощью изофлурана, а затем вводили внутрибрюшинно (i.p.) 2,5 мг D-люциферина (в виде кислоты, кат. № ВТ11-1000; Biothema, Haninge, Швеция) в 200 мкл 10 мг/мл трис (кат. № Т60666-1kg, Sigma). Биолюминесцентную томографию (BLI), со спины (дорзальный вид), начинали через 10 мин после введения D-люциферина, время экспозиции - 5 мин, на Biospace Imager. Делали черно-белые снимки для анатомической привязки. Мышам два раза в неделю вводили по 60 мкг (~3 мг/кг) HuMab-CD74-011 и контрольного антитела (IgG1-b12), то и другое как в виде ADC, так и неконъюгированного IgG1, в 100 мкл PBS, начиная с 11-го дня после инокуляции опухолей, в общей сложности 4 раза. Перед обработкой мышей разделяли на группы по семь мышей, причем все группы имели в среднем одинаковые сигналы BLI и одинаковые дисперсии.
Из фиг.11 видно, что и HuMab-CD74-011-vcMMAE, и -mcMMAF устраняли практически все опухоли Raji-luc. Как видно из фиг.11, проявлялась тенденция к более сильному подавлению роста опухолей в случае неконъюгированного HuMab-CD74-011 по сравнению с группой контрольного антитела, хотя эти отличия не были значимы.
Пример 21. Терапевтическое лечение привитых опухолей Raji у мышей SCID с помощью ADCs против CD74
Эффективность ADCs против CD74 in vivo также определяли на привитых подкожно (s.c.) опухолях-ксенотрансплантатах Raji (лимфома Беркитта) у мышей SCID.
Самкам мышей SCID вводили s.c. 5×106 опухолевых клеток Raji-luc #2D1 (полученных, как описано в примере 20) в 200 мкл PBS в правый бок, с последующими двумя инъекциями ADCs против CD74 или контроля (IgG1-b12; то и другое как в виде ADC, так и неконъюгированного IgG1), первый раз тогда, когда размеры опухолей составляли в среднем ~400 мм3, на 17 день, а второй раз четырьмя днями позже, на 21 день (по 60 мкг/мышь, ~3 мг/кг, в 100 мкл, внутрибрюшинно). Перед первой обработкой мышей с растущими опухолями разделяли на группы с одинаковым распределением объема опухолей. Объем опухолей определяли по меньшей мере два раза в неделю. Объем опухолей (мм3) рассчитывали по измерениям кронциркулем (PLEXX) как: 0,52 × (длина) × (ширина)2.
Как видно из фиг.12, все ADCs против CD74 эффективно уменьшали размеры привитых s.c. опухолей Raji-luc. У мышей, обработанных IgG1-b12, как в виде ADC, так и в неконъюгированном виде, опухоли продолжали расти.
Пример 22. Терапевтическое лечение привитых опухолей М4А4 у мышей SCID с помощью ADCs против CD74
Эффективность ADCs против CD74 in vivo также определяли на привитых подкожно (s.c.) опухолях-ксенотрансплантатах М4А4 у мышей SCID. Клетки меланомы М4А4 (кат. № CRL-2914; American Tissue Culture Collection, ATCC; происходят из линии клеток человека MDA-MB-435) культивировали в DMEM (кат. № BE12-709F, Cambrex, Германия), содержащей 10% телячьей сыворотки Cosmic (кат. № SH30087.04, Hyclone, Нидерланды) и 1% пенициллина/стрептомицина (кат. № DE17-603, Cambrex, Германия). Самкам мышей SCID вводили s.c. 107 опухолевых клеток М4А4 в 200 мкл PBS в правый бок, с последующими двумя инъекциями ADCs против CD74 или контроля (IgG1-b12; то и другое как в виде ADC, так и неконъюгированного IgG1), начиная по достижении размера опухолей ~200 мм3: на 11 день, 14 день, 18 день и 21 день (по 60 мкг/мышь, ~3 мг/кг, в 100 мкл, внутрибрюшинно). Перед первой обработкой мышей разделяли на группы с одинаковым средним объемом опухолей и одинаковой дисперсией объема опухолей. Объем опухолей определяли по меньшей мере два раза в неделю. Объем опухолей (мм3) рассчитывали по измерениям кронциркулем (PLEXX) как: 0,52 × (длина) × (ширина)2.
Из фиг.13 видно, что хотя все ADCs против CD74 подавляют рост привитых s.c. опухолей М4А4, однако конъюгаты с vcMMAE сильно уменьшают размер опухолей. По сравнению с неконъюгированным IgG1-b12, ADCs IgG1-b12 слегка подавляют рост опухолей.
Пример 23. Определение скорости диссоциации антител HuMab против CD74 на клетках Daudi
В этом примере описано определение скорости диссоциации (off-rate) антител HuMab против CD74 при связывании с клетками Daudi.
Антитела метили красителем Alexa Fluor® 488 (Molecular Probes), в дальнейшем "Alexa-488", по следующей методике.
Готовили растворы антител в 1 мг/мл IgG в буфере из 0,1 М карбоната натрия рН 9,0 (NaHCO3, Riedel de Haen, кат. №31437). Alexa-488 готовили свежим путем добавления 100 мкл DMSO (Sigma, кат. № D2438) в один флакон сукцинимидилового эфира карбоновой кислоты Alexa Fluor® 488 (1 мг/флакон, Molecular Probes, Leiden, Нидерланды, кат. № А-20000). В раствор IgG добавляли 25-кратный молярный избыток Alexa-488, рассчитанный как указано ниже, и инкубировали, с вращением, в темноте при комнатной температуре в течение 1 ч. После мечения несвязавшийся Alexa-488 удаляли на колонке PD-10 (Amersham Biosciences, кат. № 17-0851-01), заполненной трис-буфером рН 8,0 (50 мМ трис-основания [Trizma base, Sigma, кат. № T-6066], 100 мМ NaCl [Riedel de Haen, кат. № 31437], 0,01% азида натрия [NaN3, Riedel de Haen, кат. № 13412]). Количество Alexa-488, добавляемое в раствор IgG, рассчитывали по формуле:
добавляемый объем Alexa-488 (в мкл) = (конц. IgG (мг/мл)/м.в. IgG (Да) × соотношение × объем × м.в. Alexa-488 × 100,
где м.в. IgG=150000 Да; соотношение означает молярный избыток Alexa-488; объем = объем подвергаемого мечению образца (в мл); м.в. А1еха-488 = 643 Да.
Концентрацию белка (IgG) и степень включения метки (D.O.L.) определяли путем измерения OD при 280 нм и 495 нм на Ultrospec 2100 Pro (Amersham Biosciences). Концентрацию IgG (мг/мл) рассчитывали по формуле:
концентрация IgG=[А280-(0,11×А495)]/коэффициент экстинкции IgG,
а D.O.L. рассчитывали по формуле:
D.O.L.=A495/71000/[А280-(0,11×А495)/(коэффициент экстинкции IgG × м.в. IgG)],
где 71000 - коэффициент экстинкции Alexa-488 при λmax в см-1⋅М-1; а 0,11 - поправочный коэффициент (А280 свободного красителя/Amax свободного красителя) (оба предоставлены производителем).
Бычий сывороточный альбумин (BSA; Sigma, кат. № А 2934) добавляли из 10% масс. раствора до конечной концентрации в 0,1% масс., а меченые антитела хранили при 5°С.
Клетки Daudi инкубировали с меченными Alexa-488 антителами HuMab против CD74. Клетки Daudi дважды промывали ледяным PBS. Высеивали по 105 клеток на лунку в ледяном буфере FACS в 96-луночные круглодонные планшеты для тканевых культур (Greiner BioOne). Добавляли 0,5 мкг/мл (HuMab-CD74-006 и -011; конечная концентрация) или 1 мкг/мл (HuMab-CD74-008; конечная концентрация) меченного Alexa-488 HuMab против CD74 в ледяном буфере FACS. После инкубации на льду в течение 30 мин добавляли 50 мкг/мл (HuMab-CD74-006 и -011; конечная концентрация) или 100 мкг/мл (HuMab-CD74-008; конечная концентрация) немеченого HuMab против CD74 и инкубировали на льду в течение различных промежутков времени от 15 до 180 мин. Общее время инкубации с немеченым антителом указано под графиками. Для определения максимального связывания клетки Daudi инкубировали с меченными Alexa-488 антителами HuMab на льду в течение 30 мин. В качестве отрицательного контроля клетки инкубировали с контролем на изотип - антителом IgG1-b12 (конечная концентрация 0,5 мкг/мл), а затем с немеченым IgG1-b12 (конечная концентрация 50 мкг/мл). После инкубации с антителами клетки отмывали один раз в буфере FACS и детектировали связанные меченные Alexa антитела HuMab против CD74 методом проточной цитометрии на установке FACS Canto II (BD Biosciences).
Из фиг.14 видно, что скорости диссоциации (off-rates) у HuMab-CD74-006 и -008, измеренные при 0°С, были довольно быстрыми (половина связанных меченных Alexa-488 антител замещалась немечеными антителами в течение ~3 и ~4 мин при 0°С, а значения K составили 0,24 и 0,20 мин-1 [K=koff]); тогда как у -011 скорость диссоциации, измеренная при 0°С, была несколько медленнее (половина связанных меченных Alexa-488 антител замещалась немечеными антителами в течение ~10 мин при 0°С, значение K составило 0,07 мин-1).
Пример 24. Интернализация и накопление антител HuMab против CD74
Для того, чтобы выяснить, подходят ли антитела HuMab против CD74 для подхода типа конъюгатов антитело-препарат, исследовали интернализацию и накопление антител методом FACS после инкубации различных антител HuMab против CD74 с клетками Daudi. Высеивали по 105 клеток на лунку в культуральной среде в 96-луночные круглодонные планшеты для тканевых культур (Greiner BioOne). В различные моменты времени добавляли 10 мкг/мл (конечная концентрация) меченных Alexa-488 антител HuMab против CD74 и инкубировали при 4°С (для измерения связывания с экспрессированным на поверхности клеток CD74) или при 37°С (для измерения связывания и интернализации). Общее время инкубации с антителами указано под графиками. Интернализацию и накопление при 37°С также проверяли на клетках Raji и М4А4 при конечной концентрации 3 мкг/мл меченных Alexa-488 антител HuMab против CD74. После инкубации с антителами клетки ставили на лед и планшеты дважды промывали буфером FACS. Связанные с клетками меченые антитела детектировали методом проточной цитометрии на установке FACS Canto II (BD Biosciences).
Из фиг.15А видно, что после инкубации при 4°С обнаруживался лишь низкий уровень связывания меченных Alexa-488 антител HuMab против CD74 с поверхностью клеток Daudi в любые моменты времени. Таким образом, наблюдаемая интенсивность флуоресценции, измеренная после инкубации при 37°С, представляет интернализированные антитела. Из фиг.15B видно, что все исследованные антитела HuMab против CD74 подвергались интернализации, но с различной эффективностью. Интернализация была самой быстрой у HuMab-CD74-011, более медленной у HuMab-CD74-006 и самой медленной у HuMab-CD74-008. To же самое наблюдалось и при интернализации и накоплении в клетках Raji (15C) и клетках М4А4 (15D).
Пример 25. Профилактическое лечение привитых опухолей Daudi у мышей SCID с помощью антител HuMab против CD74
Эффективность антител HuMab против CD74 in vivo определяли на модели внутривенных (i.v.) опухолей-ксенотрансплантатов Daudi (лимфома Беркитта) у мышей SCID. Клетки Daudi трансфецировали методом электропорации люциферазой gWIZ (Aldevron, Fargo, ND, USA) и вектором pPur (BD Biosciences, Alphen a/d Rijn, Нидерланды) в соотношении 4:1. Через 48 ч добавляли пуромицин для отбора стабильно трансфецированных клонов (Daudi-luc). Клетки Daudi-luc #1E3 культивировали в RPMI с добавлением 10% телячьей сыворотки Cosmic (кат. № SH30087.04, Hyclone), 1% пенициллина/стрептомицина (кат. № DE 17-603, Cambrex, Германия), 1% пирувата натрия и 1 мкг/мл пуромицина (кат. № Р-8833, Sigma, Zwijndrecht, Нидерланды). Самкам мышей SCID (по 7 мышей на группу) вводили i.v. 2,5×106 раковых клеток Daudi-luc в 100 мкл PBS в хвостовую вену. В день инокуляции опухолей мышам вводили внутрибрюшинно (i.p.) 100 мкг (~5 мг/кг) HuMab-CD74-005, -006 или -011 или контрольного антитела (IgG1-b12) в 200 мкл PBS. Мышей подвергали томографии сразу же после инокуляции опухолей, а затем с недельными интервалами, начиная с 14-го дня. Для томографии мышей анестезировали с помощью изофлурана, а затем вводили i.p.2,5 мг D-люциферина (в виде кислоты, кат. № ВТ 11-1000; Biothema, Haninge, Швеция) в 200 мкл 10 мг/мл трис (кат. № T60666-1kg, Sigma). Биолюминесцентную томографию (BLI), со спины (дорзальный вид), начинали через 10 мин после введения D-люциферина, время экспозиции - 5 мин, на Biospace Imager. Делали черно-белые снимки для анатомической привязки.
Из фиг.16 видно, что все исследованные антитела HuMab против CD74 почти полностью предотвращали рост привитых i.v. опухолей Daudi-luc.
Эквиваленты
Специалистам в данной области должны быть известны или они сами смогут установить только лишь путем простого экспериментирования многие эквиваленты описанных здесь конкретных воплощений изобретения. Такие эквиваленты должны быть охвачены прилагаемой формулой изобретения. В рамки изобретения также входят всевозможные комбинации воплощений, изложенных в зависимых пунктах формулы.
Claims (74)
1. Выделенное антитело, которое связывается с вариантами 1 и 2 CD74 человека и включает область VL, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 SEQ ID NO: 24, AAS и SEQ ID NO: 25, и
a) область VH, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 SEQ ID NO: 20, 21 и 22;
b) область VH, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 SEQ ID NO: 8, 9 и 10;
c) область VH, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 SEQ ID NO: 12, 13 и 14; или
d) область VH, включающую последовательности CDR1, 2 и 3 SEQ ID NO: 16, 17 и 18.
2. Антитело по п.1, которое:
(а) связывается с внеклеточным доменом варианта 1 CD74 со значением ЕС50 менее 500 нг/мл, менее 400 нг/мл, менее 350 нг/мл или менее 330 нг/мл;
b) связывается с внеклеточным доменом варианта 2 CD74 со значением ЕС50 менее 400 нг/мл, менее 300 нг/мл, менее 250 нг/мл или менее 220 нг/мл; либо
(с) то и другое - и (а), и (b),
при определении так, как описано в примере 11.
3. Антитело по п.1, которое связывается с CD74 на клетках Raji со значением ЕС50 менее 400 нг/мл, менее 300 нг/мл, менее 250 нг/мл или менее 200 нг/мл при определении так, как описано в примере 11.
4. Антитело по п.1, которое связывается с CD74 яванской макаки.
5. Антитело по п.1, которое интернализируется после связывания с CD74, экспрессированным на поверхности клетки.
6. Антитело по п.5, где клетки представляют собой клетки Raji.
7. Антитело по п.1, у которого значение ЕС50 составляет менее 60 нг/мл, менее 40 нг/мл, менее 30 нг/мл или же 25 нг/мл или меньше при индуцировании гибели клеток Raji методом анти-каппа-ЕТА', при определении так, как описано в примере 14.
8. Антитело по п.1, которое проявляет скорость диссоциации (off-rate) при 0°С от 0,02 до 1,0 мин-1, от 0,03 до 0,30 мин-1, от 0,04 до 0,10 или от 0,15 до 0,30 мин-1.
9. Антитело по п.1, содержащее область VH, которая:
a) по меньшей мере на 80% идентична, предпочительно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 98% либо на 100% идентична последовательности области VH, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 7, 11, 15 и 19, или
b) содержит не более 20, предпочительно 15 или 10 или 5, 4, 3, 2 или 1 модификации аминокислот, более предпочтительно замены аминокислот, предпочительно консервативной замены аминокислот по сравнению с последовательностью области VH, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 7, 11, 15 и 19.
10. Антитело по п.1, содержащее область VL, которая:
a) по меньшей мере на 80% идентична, предпочительно по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или по меньшей мере на 98% либо на 100% идентична последовательности области VL, выбранной из группы, состоящей из: SEQ ID NO: 23 и 26, или
b) содержит не более 20, предпочительно 15 или 10, или 5, 4, 3, 2 или 1 модификации аминокислот, более предпочтительно замены аминокислот, предпочительно консервативной замены аминокислот по сравнению с последовательностью области VL, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 23 и 26.
11. Антитело, которое связывается с вариантами 1 и 2 CD74 и содержит:
а) область VH, включающую последовательность SEQ ID NO: 19, и область VL, включающую последовательность SEQ ID NO: 26;
b) область VH, включающую последовательность SEQ ID NO: 7, и область VL, включающую последовательность SEQ ID NO: 26;
c) область VH, включающую последовательность SEQ ID NO: 7, и область VL, включающую последовательность SEQ ID NO: 23;
d) область VH, включающую последовательность SEQ ID NO: 11, и область VL, включающую последовательность SEQ ID NO:26; или
e) область VH, включающую последовательность SEQ ID NO: 15, и область VL, включающую последовательность SEQ ID NO: 26.
12. Антитело по п.11, которое представляет собой человеческое моноклональное антитело.
13. Антитело по п.11, которое имеет изотип, выбранный из IgG1 и IgG4.
14. Антитело по п.11, которое конъюгировано с терапевтической молекулой.
15. Антитело по п.14, которое конъюгировано с терапевтической молекулой через линкер, присоединенный по сульфгидрильным группам антитела, полученным при хотя бы частичном восстановлении антитела.
16. Антитело по п.14, в котором терапевтическая молекула представляет собой цитотоксическую молекулу, радиоизотоп, химиотерапевтическое средство, литический пептид или цитокин.
17. Антитело по п.16, которое конъюгировано с цитотоксической молекулой.
18. Антитело по п.17, в котором цитотоксическая молекула выбрана из группы, состоящей из таксола; цитохалазина В; грамицидина D; бромистого этидия; эметина; митомицина; этопозида; тенопозида; винкристина; винбластина; колхицина; доксорубицина; даунорубицина; дигидроксиантрациндиона; майтансина либо его аналогов или производных; ауристатина либо его функциональных пептидных аналогов или производных типа монометилауристатина Е (ММАЕ) или F (MMAF); доластатина-10 или -15 либо их аналогов; иринотекана либо его аналогов; митоксантрона; митрамицина; актиномицина D; 1-дегидротестостерона; глюкокортикоидов; прокаина; тетракаина; лидокаина; пропранолола; пуромицина; калихеамицина либо его аналогов или производных; антиметаболитов типа метотрексата, 6-меркаптопурина, 6-тиогуанина, цитарабина, флударабина, 5-фторурацила, декарбазина, гидроксимочевины, аспарагиназы, гемцитабина или кладрибина; алкилирующих агентов типа мехлорэтамина, тиоэпа, хлорамбуцила, мелфалана, кармустина (BSNU), ломустина (CCNU), циклофосфамида, бусульфана, дибромманнитола, стрептозотоцина, дакарбазина (DTIC), прокарбазина, митомицина С; производных платины типа цисплатина или карбоплатина; дуокармицина А, дуокармицина SA, рахелмицина (СС-1065) либо их аналогов или производных; антибиотиков типа дактиномицина, блеомицина, даунорубицина, доксорубицина, идарубицина, митрамицина, митомицина, митоксантрона, пликамицина, антрамицина (АМС)); пирроло[2,1-с][1,4]-бензодиазепинов (PDB); дифтерийного токсина и родственных молекул типа цепи А дифтерийного токсина и ее активных фрагментов и гибридных молекул, рицинового токсина типа рицина А или дегликозилированной цепи А рицинового токсина, холерного токсина, Шига-подобных токсинов типа SLT I, SLT II, SLT IIV, токсина LT, токсина С3, Шига-токсина, коклюшного токсина, столбнячного токсина, соевого ингибитора протеаз Боуман-Бирка, экзотоксина Pseudomonas, алорина, сапорина, модекцина, геланина, цепи А абрина, цепи А модекцина, альфа-сарцина, белков Aleurites fordii, белков диантина, белков Phytolacca americana типа PAPI, PAPII и PAP-S, ингибитора из Momordica charantia, курцина, кротина, ингибитора из Sapaonaria officinalis, токсинов гелонина, митогеллина, рестриктоцина, феномицина и еномицина; рибонуклеазы (РНКазы); ДНКазы I, стафилококкового энтеротоксина А; противовирусного белка лаконоса; дифтерийного токсина; и эндотоксина Pseudomonas.
19. Антитело по п.17, которое конъюгировано с цитотоксической молекулой, выбранной из группы, состоящей из антрациклина, пирроло[2,1-с][1,4]-бензодиазепина, майтансина, калихеамицина, дуокармицина, рахелмицина (СС-1065), доластатина-10 или -15, иринотекана либо их аналогов, производных или пролекарств.
20. Антитело по п.17, в котором цитотоксической молекулой является ауристатин либо его функциональный пептидный аналог или производное, необязательно конъюгированный с антителом через линкер, присоединенный по одному или нескольким остаткам цистеина у антитела.
21. Антитело по п.14, у которого значение IC50 составляет менее 0,5 мкг/мл, менее 0,3 мкг/мл, менее 0,2 мкг/мл или менее 0,1 мкг/мл при индуцировании гибели клеток Raji, Daudi или М4А4, при определении так, как описано в примере 18.
22. Антитело по п.16, которое конъюгировано с цитокином, выбранным из группы, состоящей из IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-10, IL-12, IL-13, IL-15, IL-18, IL-23, IL-24, IL-27, IL-28a, IL-28b, IL-29, KGF, IFNα, IFNβ, IFNγ, GM-CSF, CD40L, лиганда Flt3, фактора стволовых клеток, анцестима и TNFα.
23. Антитело по п.1, которое представляет собой мультиспецифическое антитело, содержащее первый антигенсвязывающий участок из антитела, приведенного в любом из предыдущих пунктов, и по меньшей мере один второй антигенсвязывающий участок, обладающий другой специфичностью связывания.
24. Антитело по п.23, которое представляет собой биспецифическое антитело, где необязательно второй антигенсвязывающий участок обладает специфичностью связывания к антигену на эффекторных клетках человека типа Т-клеток человека.
25. Антитело по п.23, которое представляет собой биспецифическое антитело, где:
первый антигенсвязывающий участок соединяется с первой областью Fc, содержащей аминокислотную замену в положении, выбранном из группы, состоящей из 366, 368, 370, 399, 405, 407 и 409, а второй антигенсвязывающий участок соединяется со второй областью Fc, содержащей аминокислотную замену в положении, выбранном из группы, состоящей из 366, 368, 370, 399, 405, 407 и 409, причем
первая и вторая области Fc не содержат замен в одинаковых положениях.
26. Экспрессирующий вектор, содержащий последовательность нуклеотидов, кодирующую одну или несколько аминокислотных последовательностей, выбранных из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 7, 11, 15, 19, 23 и 26, или любые их комбинации.
27. Экспрессирующий вектор по п.26, дополнительно содержащий последовательность нуклеотидов, кодирующую константную область легкой цепи антител человека, тяжелой цепи антител человека или обеих цепей.
28. Рекомбинантная клетка-хозяин, которая вырабатывает антитело по любому из пп.1-14 или 16-25.
29. Рекомбинантная клетка-хозяин по п.28, которая является эукариотической клеткой-хозяином.
30. Рекомбинантная клетка-хозяин по п.28, которая является прокариотической клеткой-хозяином.
31. Фармацевтическая композиция для лечения рака, содержащая антитело по любому из пп.1-25 в эффективном количестве и фармацевтически приемлемый носитель.
32. Фармацевтическая композиция для профилактики рака, содержащая антитело по любому из пп.1-25 в эффективном количестве и фармацевтически приемлемый носитель.
33. Антитело по п.1 в качестве медикамента.
34. Антитело по п.1 для лечения рака.
35. Антитело по п.1 для профилактики рака.
36. Антитело по п.35, где профилактика рака включает одно или несколько из уменьшения риска возникновения рака, уменьшения риска прогрессирования рака и/или уменьшения риска рецидива при ремиссии рака.
37. Антитело по п.34, где рак выбран из группы, состоящей из рака молочной железы, колоректального рака, рака эндометрия /шейки матки, рака желудка, рака головы и шеи, рака легких, злокачественной глиомы, злокачественной меланомы, рака яичников, рака поджелудочной железы, рака простаты, рака почек, рака печени, рака тимуса, злокачественной фиброзной гистиосаркомы, акустической шванномы, гипофизарной аденомы и аденомы.
38. Антитело по п.34, где рак выбран из группы, состоящей из злокачественной лимфомы, В-клеточной хронической лимфоцитарной лейкемии (B-CLL), хронической миелоидной лейкемии (CML) в бластной фазе, неходжкинской лимфомы (NHL), множественной миеломы (ММ), моноцитоидной В-клеточной лимфомы (MBCL), волосковоклеточной лейкемии (HCL) и Т-клеточной лимфомы.
39. Антитело по п.38, где рак представляет собой NHL.
40. Антитело по п.38, где рак представляет собой ММ.
41. Антитело по п.37, где рак представляет собой рак яичников.
42. Антитело по п.37, где рак представляет собой рак молочной железы.
43. Антитело по п.37, где рак представляет собой рак поджелудочной железы.
44. Антитело по п.37, где рак выбран из рака простаты, рака желудка и колоректального рака.
45. Антитело по п.33 для лечения аутоиммунных заболеваний.
46. Антитело по любому из пп.33-45 в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством.
47. Антитело по п.46, где по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство выбрано из второго антитела или ADC; химиотерапевтического средства; ингибитора ангиогенеза, неоваскуляризациии и/или иной васкуляризации; противоракового иммуногена; цитокина или хемокина; регулятора контроля клеточного цикла или апоптоза; гормонального регуляторного средства; антианергического средства; содержащей ген супрессора опухолей нуклеиновой кислоты или вектора; противораковой нуклеиновой кислоты; вируса или вирусных белков; клеток иммунной системы; средства, вызывающего дифференцировку; средства, повышающего уровень CD74; и противовоспалительного, иммуносупрессорного и/или иммуномодулирующего средства; либо комбинации любых из них.
48. Антитело по п.47, где по меньшей мере одно терапевтическое средство выбрано из специфичного к CD20 антитела, специфичного к CD138 антитела, специфичного к CD38 антитела, антитела против VEGF-A, мелфалана, леналидомида, бортезомиба, фторурацила, гемцитабина, иринотекана, цисплатина либо их производных или аналогов.
49. Применение антитела по любому из пп.1-25 для изготовления медикамента для лечения рака.
50. Применение по п.49, включающее дополнительные признаки любого из пп.31-48.
51. Способ индуцирования клеточной смерти, клеток, экспрессирующих CD74, который включает введение антитела по любому из пп.1-25.
52. Способ ингибирования роста клетки, экспрессирующей CD74, включающий введение антитела по любому из пп.1-25.
53. Способ ингибирования пролиферации клетки, экспрессирующей CD74, включающий введение антитела по любому из пп.1-25.
54. Способ лечения рака, включающий введение нуждающемуся в этом индивиду эффективного количества антитела по любому из пп.1-25, необязательно в комбинации с дополнительным терапевтическим средством по любому из пп.47 и 48.
55. Способ профилактики рака, включающий введение нуждающемуся в этом индивиду эффективного количества антитела по любому из пп.1-25.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161438383P | 2011-02-01 | 2011-02-01 | |
DKPA201100064 | 2011-02-01 | ||
US61/438,383 | 2011-02-01 | ||
DKPA201100064 | 2011-02-01 | ||
PCT/EP2012/051679 WO2012104344A1 (en) | 2011-02-01 | 2012-02-01 | Human antibodies and antibody-drug conjugates against cd74 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2013140433A RU2013140433A (ru) | 2015-03-10 |
RU2636029C2 true RU2636029C2 (ru) | 2017-11-17 |
Family
ID=45560912
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013140433A RU2636029C2 (ru) | 2011-02-01 | 2012-02-01 | Человеческие антитела и конъюгаты антитело-препарат против cd74 |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US9540433B2 (ru) |
EP (1) | EP2670440B1 (ru) |
JP (1) | JP6261341B2 (ru) |
CN (1) | CN103458930B (ru) |
AU (1) | AU2012213437B2 (ru) |
CA (1) | CA2826186C (ru) |
ES (1) | ES2700514T3 (ru) |
IL (1) | IL227477B (ru) |
MX (1) | MX350200B (ru) |
RU (1) | RU2636029C2 (ru) |
SG (2) | SG10201608138RA (ru) |
WO (1) | WO2012104344A1 (ru) |
Families Citing this family (63)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2401136T3 (es) | 2002-11-15 | 2013-04-17 | Genmab A/S | Anticuerpos monoclonales humanos contra CD25 |
ES2420684T3 (es) | 2003-06-10 | 2013-08-26 | Neomedix Corporation | Dispositivo para el tratamiento del glaucoma y otros procedimientos quirúrgicos y método para su fabricación |
NZ614857A (en) * | 2007-03-29 | 2015-04-24 | Genmab As | Bispecific antibodies and methods for production thereof |
US10327947B2 (en) | 2012-04-24 | 2019-06-25 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Modified dual-blade cutting system |
US10682254B2 (en) | 2012-04-24 | 2020-06-16 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Intraocular device for dual incisions |
US9872799B2 (en) | 2012-04-24 | 2018-01-23 | The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate | Intraocular device for dual incisions |
EP2859017B1 (en) | 2012-06-08 | 2019-02-20 | Sutro Biopharma, Inc. | Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use |
WO2014037419A1 (en) * | 2012-09-04 | 2014-03-13 | Vib Vzw | Immunoglobulin single variable domains directed against cd74 and uses derived thereof |
JP6548630B2 (ja) * | 2013-03-12 | 2019-07-24 | モレキュラー テンプレーツ, インク.Molecular Templates, Inc. | 特定の細胞型の選択的死滅のための細胞標的化結合領域と志賀毒素aサブユニット領域とを含む細胞毒性タンパク質 |
EP2777714A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-17 | NBE-Therapeutics LLC | Method of producing an immunoligand/payload conjugate by means of a sequence-specific transpeptidase enzyme |
US9896685B2 (en) | 2013-04-25 | 2018-02-20 | Sutro Biopharma, Inc. | Use of LAMBDA-GAM protein in ribosomal display technology |
CA2916202C (en) * | 2013-06-24 | 2019-07-02 | Hanwha Chemical Corporation | Antibody-drug conjugate having improved stability and use thereof |
US9764039B2 (en) | 2013-07-10 | 2017-09-19 | Sutro Biopharma, Inc. | Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use |
WO2015067277A1 (en) | 2013-11-07 | 2015-05-14 | University Of Copenhagen | Timp-1 binding partner |
ES2916873T3 (es) | 2014-01-10 | 2022-07-06 | Birdie Biopharmaceuticals Inc | Compuestos y composiciones para inmunoterapia |
EP3868776A1 (en) | 2014-01-27 | 2021-08-25 | Molecular Templates, Inc. | Mhc class i epitope delivering polypeptides |
US11142584B2 (en) | 2014-03-11 | 2021-10-12 | Molecular Templates, Inc. | CD20-binding proteins comprising Shiga toxin A subunit effector regions for inducing cellular internalization and methods using same |
ES2717751T3 (es) * | 2014-06-11 | 2019-06-25 | Molecular Templates Inc | Polipéptidos efectores de la subunidad A de la toxina de Shiga resistentes a la escisión por proteasa y moléculas dirigidas a células que los comprenden |
ES2753551T3 (es) | 2014-07-22 | 2020-04-13 | Sutro Biopharma Inc | Anticuerpos anti-cd74, composiciones que comprenden anticuerpos anti-CD74 y procedimientos de uso de los anticuerpos anti-CD74 |
WO2016041915A1 (en) * | 2014-09-18 | 2016-03-24 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for monitoring cathepsin s inhibition |
CN104280553B (zh) * | 2014-09-22 | 2016-06-08 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种小鼠源性可溶型cd74蛋白的elisa检测试剂盒及检测方法 |
GB201416960D0 (en) | 2014-09-25 | 2014-11-12 | Antikor Biopharma Ltd | Biological materials and uses thereof |
CN105543279A (zh) * | 2014-10-30 | 2016-05-04 | 常州卡斯比生物科技有限公司 | 一种防治辐射线损伤、肿瘤治疗的IL-12/Fc融合蛋白的制备方法及其药剂 |
BR112017010110A2 (pt) | 2014-11-21 | 2018-01-30 | Bristol-Myers Squibb Company | anticorpos contra cd73 e usos do mesmo |
US10392425B2 (en) | 2015-02-05 | 2019-08-27 | Molecular Templates, Inc. | Multivalent CD20-binding molecules comprising Shiga toxin A subunit effector regions and enriched compositions thereof |
US11304976B2 (en) | 2015-02-18 | 2022-04-19 | Enlivex Therapeutics Ltd | Combination immune therapy and cytokine control therapy for cancer treatment |
US11000548B2 (en) | 2015-02-18 | 2021-05-11 | Enlivex Therapeutics Ltd | Combination immune therapy and cytokine control therapy for cancer treatment |
IL284985B2 (en) | 2015-02-18 | 2023-03-01 | Enlivex Therapeutics R& D Ltd | Combined immunotherapy and cytokine control therapy for cancer treatment |
US11596652B2 (en) | 2015-02-18 | 2023-03-07 | Enlivex Therapeutics R&D Ltd | Early apoptotic cells for use in treating sepsis |
US11318163B2 (en) | 2015-02-18 | 2022-05-03 | Enlivex Therapeutics Ltd | Combination immune therapy and cytokine control therapy for cancer treatment |
US11497767B2 (en) | 2015-02-18 | 2022-11-15 | Enlivex Therapeutics R&D Ltd | Combination immune therapy and cytokine control therapy for cancer treatment |
CN107708811B (zh) | 2015-04-21 | 2021-04-30 | 恩立夫克治疗有限责任公司 | 治疗性汇集的血液凋亡细胞制剂与其用途 |
RS60441B1 (sr) | 2015-05-30 | 2020-07-31 | Molecular Templates Inc | De-imunizovane, strukture shiga toksin a podjedinice i ciljani ćelijski molekuli koji sadrže isti |
GB201515321D0 (en) * | 2015-08-28 | 2015-10-14 | Immatics Biotechnologies Gmbh | Novel peptides, combination of peptides and scaffolds for use in immunotherapeutic treatment of various cancers |
GB201517538D0 (en) * | 2015-10-05 | 2015-11-18 | Immatics Biotechnologies Gmbh | Novel peptides and combination of peptides for use in immunotherapy against small cell lung cancer and other cancers |
US10779991B2 (en) | 2015-12-23 | 2020-09-22 | The Regents of the University of Colorado, a body corporated | Ophthalmic knife and methods of use |
BR112018012876A2 (pt) | 2015-12-23 | 2018-12-04 | New World Medical Inc | bisturi oftálmico e métodos de uso |
CN115252792A (zh) | 2016-01-07 | 2022-11-01 | 博笛生物科技有限公司 | 用于治疗肿瘤的抗-egfr组合 |
JP7022067B2 (ja) | 2016-01-14 | 2022-02-17 | メモリアル スローン ケタリング キャンサー センター | Foxp3由来のペプチドに特異的なt細胞受容体様抗体 |
MX2018009085A (es) | 2016-01-27 | 2019-05-09 | Sutro Biopharma Inc | Conjugados de anticuerpos anti-cd74, composiciones que comprenden conjugados de anticuerpos anti-cd74 y metodos de uso de congujados de anticuerpos anti-cd74. |
WO2017132103A2 (en) | 2016-01-29 | 2017-08-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Phosphonate linkers and their use to facilitate cellular retention of compounds |
US10835617B2 (en) | 2016-02-04 | 2020-11-17 | Ads Therapeutics Llc | VEGF antibody-drug conjugates |
JP6884155B2 (ja) | 2016-02-18 | 2021-06-09 | エンリヴェックス セラピューティクス リミテッド | 癌治療のための併用免疫療法及びサイトカイン制御療法 |
US9709386B1 (en) * | 2016-04-05 | 2017-07-18 | Kla-Tencor Corporation | Apparatus and methods for measuring properties in a TSV structure using beam profile reflectometry |
US10961311B2 (en) | 2016-04-15 | 2021-03-30 | Macrogenics, Inc. | B7-H3 binding molecules, antibody drug conjugates thereof and methods of use thereof |
JP7075125B2 (ja) * | 2016-05-25 | 2022-05-25 | イマティクス バイオテクノロジーズ ゲーエムベーハー | 標的としてのおよび胆嚢がんおよび胆管がんおよびその他のがんに対する免疫療法で使用するための新規ペプチド、ペプチド組み合わせ |
AU2017278573A1 (en) * | 2016-06-06 | 2019-01-03 | Linxis B.V. | Cell targeting conjugates |
IL302130A (en) | 2016-12-07 | 2023-06-01 | Molecular Templates Inc | Shiga toxin A subunit activator polypeptides, Shiga toxin activator scaffolds and cell-targeting molecules for site-specific conjugation |
KR102590672B1 (ko) | 2017-01-25 | 2023-10-18 | 몰레큘러 템플레이츠, 인코퍼레이션. | 탈면역된 시가 독소 a 서브유닛 이펙터 및 cd8+ t-세포 에피토프를 포함하는 세포-표적화 분자 |
JP2020507409A (ja) | 2017-02-16 | 2020-03-12 | ネオメディックス コーポレイションNeomedix Corporation | 侵襲性を最小限とした緑内障手術のためのデバイス、システム及び方法 |
CN108794467A (zh) | 2017-04-27 | 2018-11-13 | 博笛生物科技有限公司 | 2-氨基-喹啉衍生物 |
WO2018232725A1 (en) | 2017-06-23 | 2018-12-27 | Birdie Biopharmaceuticals, Inc. | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS |
EP3658588A1 (en) | 2017-07-26 | 2020-06-03 | Sutro Biopharma, Inc. | Methods of using anti-cd74 antibodies and antibody conjugates in treatment of t-cell lymphoma |
AU2018321359B2 (en) | 2017-08-22 | 2023-11-30 | Sanabio, Llc | Soluble interferon receptors and uses thereof |
WO2019075417A1 (en) * | 2017-10-14 | 2019-04-18 | Abbvie Inc. | CONJUGATES OF MEDICAMENT ANTI-CD71 ACTIVATED ANTIBODIES AND METHODS OF USE |
WO2019204272A1 (en) | 2018-04-17 | 2019-10-24 | Molecular Templates, Inc. | Her2-targeting molecules comprising de-immunized, shiga toxin a subunit scaffolds |
EP4225792A1 (en) | 2020-10-08 | 2023-08-16 | Affimed GmbH | Trispecific binders |
AU2022320948A1 (en) | 2021-07-30 | 2024-01-18 | Affimed Gmbh | Duplexbodies |
AR127568A1 (es) | 2021-11-03 | 2024-02-07 | Affimed Gmbh | Ligandos biespecíficos de cd16a |
US11877954B2 (en) | 2022-03-16 | 2024-01-23 | Sight Sciences, Inc. | Devices and methods for intraocular tissue manipulation |
WO2023225408A2 (en) * | 2022-05-20 | 2023-11-23 | The Regents Of The University Of California | Radioimmunoconjugates and therapeutic uses thereof |
WO2024051762A1 (en) * | 2022-09-07 | 2024-03-14 | Xadcera Biopharmaceutical (Suzhou) Co., Ltd. | Anti-trop2/egfr antibodies and uses thereof |
CN116139267A (zh) * | 2023-01-28 | 2023-05-23 | 华中科技大学同济医学院附属同济医院 | 小鼠cd74单克隆抗体在制备治疗肿瘤药物中的应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003074567A2 (en) * | 2002-03-01 | 2003-09-12 | Immunomedics, Inc. | Internalizing anti-cd74 antibodies and methods of use |
RU2360925C2 (ru) * | 2002-10-22 | 2009-07-10 | Уайт | Нейтрализующие антитела против gdf-8 и их применение |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8877901B2 (en) * | 2002-12-13 | 2014-11-04 | Immunomedics, Inc. | Camptothecin-binding moiety conjugates |
EP1572242B1 (en) | 2002-12-13 | 2014-04-16 | Immunomedics, Inc. | Immunoconjugates with an intracellularly-cleavable linkage |
SG172616A1 (en) * | 2004-04-13 | 2011-07-28 | Hoffmann La Roche | Anti-p-selectin antibodies |
CN103030696B (zh) | 2006-05-30 | 2016-09-28 | 健泰科生物技术公司 | 抗体和免疫偶联物及其用途 |
CA2787054A1 (en) * | 2010-01-11 | 2011-07-14 | Center For Molecular Medicine And Immunology | Enhanced cytotoxicity of anti-cd74 and anti-hla-dr antibodies with interferon-gamma |
-
2012
- 2012-02-01 SG SG10201608138RA patent/SG10201608138RA/en unknown
- 2012-02-01 MX MX2013008832A patent/MX350200B/es active IP Right Grant
- 2012-02-01 CN CN201280015984.XA patent/CN103458930B/zh active Active
- 2012-02-01 SG SG2013054044A patent/SG191977A1/en unknown
- 2012-02-01 JP JP2013552193A patent/JP6261341B2/ja active Active
- 2012-02-01 RU RU2013140433A patent/RU2636029C2/ru active
- 2012-02-01 ES ES12702033T patent/ES2700514T3/es active Active
- 2012-02-01 US US13/982,959 patent/US9540433B2/en active Active
- 2012-02-01 AU AU2012213437A patent/AU2012213437B2/en active Active
- 2012-02-01 EP EP12702033.7A patent/EP2670440B1/en active Active
- 2012-02-01 CA CA2826186A patent/CA2826186C/en active Active
- 2012-02-01 WO PCT/EP2012/051679 patent/WO2012104344A1/en active Application Filing
-
2013
- 2013-07-14 IL IL227477A patent/IL227477B/en unknown
-
2016
- 2016-12-01 US US15/366,791 patent/US20170173151A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-10-15 US US17/502,774 patent/US20220323582A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003074567A2 (en) * | 2002-03-01 | 2003-09-12 | Immunomedics, Inc. | Internalizing anti-cd74 antibodies and methods of use |
RU2360925C2 (ru) * | 2002-10-22 | 2009-07-10 | Уайт | Нейтрализующие антитела против gdf-8 и их применение |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IL227477B (en) | 2021-08-31 |
ES2700514T3 (es) | 2019-02-18 |
CA2826186A1 (en) | 2012-08-09 |
CN103458930B (zh) | 2019-10-15 |
CA2826186C (en) | 2020-08-04 |
SG10201608138RA (en) | 2016-11-29 |
MX2013008832A (es) | 2013-09-06 |
CN103458930A (zh) | 2013-12-18 |
EP2670440A1 (en) | 2013-12-11 |
AU2012213437A1 (en) | 2013-05-02 |
AU2012213437B2 (en) | 2016-08-18 |
JP6261341B2 (ja) | 2018-01-17 |
JP2014507138A (ja) | 2014-03-27 |
US20220323582A1 (en) | 2022-10-13 |
US9540433B2 (en) | 2017-01-10 |
SG191977A1 (en) | 2013-08-30 |
WO2012104344A1 (en) | 2012-08-09 |
US20170173151A1 (en) | 2017-06-22 |
IL227477A0 (en) | 2013-09-30 |
US20140030273A1 (en) | 2014-01-30 |
RU2013140433A (ru) | 2015-03-10 |
MX350200B (es) | 2017-08-30 |
EP2670440B1 (en) | 2018-09-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20220323582A1 (en) | Human antibodies and antibody-drug conjugates against cd74 | |
US20210395384A1 (en) | Human antibody drug conjugates against tissue factor | |
JP6609580B2 (ja) | ヒトcd38に対する抗体 | |
US9663578B2 (en) | Monoclonal antibodies against CD32b | |
NZ717560A (en) | Human antibodies and antibody-drug conjugates against cd74 | |
NZ717560B2 (en) | Human antibodies and antibody-drug conjugates against cd74 | |
BR112013019564B1 (pt) | Anticorpos, vetor de expressão, célula hospedeira procariótica recombinante, composição farmacêutica, e, uso de um anticorpo | |
AU2013203136A1 (en) | Human antibody drug conjugates against tissue factor |