RU2633087C2 - Стабилизированный кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации при диагностике сифилиса и способ его получения - Google Patents
Стабилизированный кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации при диагностике сифилиса и способ его получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2633087C2 RU2633087C2 RU2016110574A RU2016110574A RU2633087C2 RU 2633087 C2 RU2633087 C2 RU 2633087C2 RU 2016110574 A RU2016110574 A RU 2016110574A RU 2016110574 A RU2016110574 A RU 2016110574A RU 2633087 C2 RU2633087 C2 RU 2633087C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cardiolipin
- solution
- antigen
- substituted
- thimerosal
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к медицине и касается диагностических реагентов для клинической лабораторной диагностики сифилитической инфекции. Заявлены стабилизированный кардиолипиновый антиген и способ его получения. Кардиолипиновый антиген получен способом, включающим приготовление буферного раствора с последовательным добавлением друг к другу ЭДТА динатриевой соли, натрия фосфорнокислого 2-замещенного, калия фосфорнокислого 1-замещенного, холин-хлорида, тимеросала (мертиолята), воды очищенной, далее получившийся раствор перемешивают и фильтруют, после чего приготавливают спиртовой раствор липидов, для этого смешивают кардиолипин, лецитин, холестерин и спирт этиловый абсолютированный, затем осуществляют смешение буферного раствора и спиртового раствора. Техническими результатами группы изобретений является:
- законченный цикл получения готовой к применению суспензии кардиолипинового антигена на производственном предприятии,
- контроль качества и обеспечение длительной специфической активности приготовленного реагента в реакции микропреципитации при диагностике сифилиса с исключением этапа лабораторного приготовления рабочей эмульсии Аг Кл. 2 н.п. ф-лы, 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине и касается диагностических реагентов для клинической лабораторной диагностики сифилитической инфекции.
В соответствии с действующими Национальными стандартами и клиническими рекомендациями при обследовании населения с целью выявления больных сифилисом, а также при установлении клинической формы этого заболевания и оценке динамики гуморального иммунитета после проведенной антибактериальной терапии в учреждениях здравоохранения большинства стран мира широко применяются лабораторные тесты, оценивающие качественное и полуколичественное содержание антител к кардиолипиновому антигену (в крови у больных сифилисом или в ликворе у больных нейросифилисом).
Приоритет в разработке кардиолипинового антигена (Аг Кл), используемого в современных иммунохимических лабораторных исследованиях, принадлежит шведской исследовательнице Margaret С. Pangborn (1941) [1], несколько позже оригинальная методика получения этого антигена для реакции микропреципитации (РМП) была предложена в СССР профессором Л.С. Резниковой (1951) [2]. Кроме этого в Лабораториях по изучению венерических заболеваний (Venereal Diseases Research Laboratories) американского Центра по контролю заболеваемости (Center Diseases Control - CDC) также была создана оригинальная пропись этого реагента и особая методика проведения лабораторного исследования - VDRL тест [3, 4].
По своей сути современные иммунохимические исследования с Аг Кл являются нетрепонемными тестами, так как применяемый антиген по своему происхождению не имеют прямого отношения к возбудителю сифилиса (Treponema pallidum). При разработке состава Аг Кл отдельные его компоненты первоначально получали из сырьевых материалов животного происхождения: водных, водно-спиртовых, ацетоновых или эфирных экстрактов ткани сердечной мышцы крупного рогатого скота и из куриных яиц. Позднее в качестве антигена для лабораторных целей стали применять сложную пропись очищенных липоидных субстанций производственного выпуска: кардиолипин - 0,033%, лецитин - 0,27% и холестерин - 0,9%, растворенных в абсолютизированном этиловом спирте.
При определении содержания гуморальных антител в иммунохимических реакциях (РМП и VDRL) кардиолипиновый антиген применяют в виде рабочей эмульсии Аг Кл; для ее получении перед началом исследования в клинических лабораториях медицинских учреждений кардиолипиновый антиген переводят из спиртового раствора в водную фазу (10% раствор холина хлорида на основе 0,89-0,9% раствора натрия хлорида). Смесь липоидов в водной среде представлена в мелкодиспергированном эмульгированном состоянии, даже при кратковременном хранении в спокойном состоянии эмульсия расслаивается с образованием осадка белого цвета и бесцветной надосадочной жидкости [5, 6].
Технология приготовления рабочей эмульсии Аг Кл, которая является наиболее близким по осуществлению аналогом (прототипом), включает несколько этапов:
- смешивание спиртового концентрата кардиолипинового антигена с равным объемом физиологического раствора с целью «высаливания» активных компонентов антигена и созревание смеси;
- осаждение кардиолипинового антигена при мягком центрифугировании;
- удаление надосадочной жидкости;
- ресуспендирование кардиолипинового антигена путем осторожного размывания осадка 10% раствором холина хлорида, приготовленным на основе 0,9% раствора натрия хлорида (при наличии - с добавлением 0,01% раствора метриолята до конечной концентрации 1:10000).
При этом свежеприготовленная в разных лабораториях рабочая эмульсия Аг Кл может существенно различаться по своей специфической активности в РМП, что зависит от особенностей ее приготовления (использование разных вариантов получения 0,9% раствора натрия хлорида, точность соблюдения лабораторными специалистами инструкции по приготовлению реагента). Свежеприготовленная рабочая эмульсия Аг Кл сохраняет свою специфическую активность и пригодна для использования в РМП только в течение 7 дней, а при добавлении мертиолята (1:10000) - 14 дней; в эти сроки реагент должен сохраняться при температуре +4-8°C в посуде темного стекла или иным способом должна обеспечиваться его защита от нагревания и прямого воздействия солнечного света, которые снижают активность суспензии Аг Кл [6].
Другим вариантом обеспечения возможности длительного сохранения активности кардиолипинового антигена (вариант VDRL) является внесение в свежеприготовленный реагент 1,0% спиртового раствора бензойной кислоты до конечной концентрации 0,01% [3].
Технической задачей изобретения является разработка раствора стабилизированного кардиолипинового антигена и способа получения готовой к применению суспензии кардиолипинового антигена с длительным сроком годности и контролируемым уровнем его специфической активности в реакции микропреципитации (РМП).
Эта задача достигается за счет изменения состава водной фазы и технологии приготовления рабочей суспензии Аг Кл, а также включения в ее состав стабилизирующих и консервирующих добавок. В качестве водной используется фосфатный буфер стандартной прописи.
Новый состав и технология получения рабочей суспензии Аг Кл предполагает дробное поэтапное внесение спиртовых растворов липидов, входящих в состав Аг Кл, в фосфатный буферный раствор с добавлением в качестве стабилизатора этилен-дитетрамина ацетата (ЭДТА) и консерванта мертиолята (тимеросала) при постоянном активном перемешивании всего объема изготавливаемой серии реагента.
Состав готовой к применению суспензии кардиолипинового антигена отличается от прототипа сохранением всего количества этилового спирта (в прототипе подавляющая его часть удалялась после центрифугирования в составе супернатанта), использованием буферного раствора вместо физиологического раствора и добавлением стабилизатора ЭДТА и консерванта мертиолята (тимеросала).
Техническими результатами группы изобретений является
- законченный цикл получения готовой к применению суспензии кардиолипинового антигена на производственном предприятии,
- контроль качества и обеспечение длительной специфической активности приготовленного реагента в реакции микропреципитации при диагностике сифилиса с исключением этапа лабораторного приготовления рабочей эмульсии Аг Кл.
Также преимуществами предлагаемого способа получения суспензии Аг Кл заключается в:
- замене лабораторного кустарного процесса получения рабочей эмульсии Аг Кл производственным, контроль осуществления которого на всех этапах централизованно осуществляется специалистами-технологами ОБТК предприятия и средствами автоматического слежения; обеспечении стабильности и сохранении специфических свойств готового реагента Аг Кл путем внесения в его состав стабилизирующих и консервирующих добавок и фасовке готового продукта во флаконы темного стекла;
- обеспечении выпускающего и текущего контроля качества специфической активности полученного реагента в РМП сотрудниками ОБТК предприятия на всех этапах производства и при хранении музейных образцов в период срока годности набора реагентов;
- экономии затрат рабочего времени специалистами лабораторной медицины за счет исключения этапа приготовления рабочей суспензии реагента Аг Кл при проведении лабораторного исследования методом РМП;
- переводе РМП в разряд лабораторных исследований, которые позволяют оперативно обеспечивать обследование пациентов.
Таким образом, нами разработан стабилизированный кардиолипиновый антиген, содержащий кардиолипин, лецитин, холестерин, спирт этиловый абсолютированный, ЭДТА динатриевая соль, натрий фосфорнокислый 2-замещенный, калий фосфорнокислый 1-замещенный, холин-хлорид, тимеросал (мертиолят), воду очищенную при следующем количественном соотношении ингредиентов, мас %:
кардиолипин | 0,0029-0,0033 |
лецитин | 0,021-0,027 |
холестерин | 0,069-0,090 |
спирт этиловый абсолютированный | 6,03-7,83 |
ЭДТА динатриевая соль | 0,32-0,42 |
натрий фосфорнокислый 2-замещенный | 0,086-0,11 |
калий фосфорнокислый 1-замещенный | 0,094-0,12 |
холин-хлорид | 6,92-9,00 |
тимеросал (мертиолят) | 0,069-0,090 |
вода очищенная | остальное |
Кроме того, нами разработан способ получения стабилизированного кардиолипинового антигена, включающий приготовление буферного раствора с последовательным добавлением друг к другу ЭДТА динатриевой соли, натрия фосфорнокислого 2-замещенного, калия фосфорнокислого 1-замещенного, холин-хлорида, тимеросала (мертиолята), воды очищенной, далее получившийся раствор перемешивают и фильтруют, после чего приготавливают спиртовой раствор липидов, для этого смешивают кардиолипин, лецитин, холестерин и спирт этиловый абсолютированный, затем осуществляют смешение буферного раствора и спиртового раствора.
Группа изобретений в частных случаях осуществления поясняется следующими примерами.
Пример приготовления стабилизированного Аг Кл осуществляют следующим образом.
1. Приготовление буферного раствора.
1.1. Сделать на электронных весах навески необходимых реактивов. Для приготовления 10 л буферного раствора:
ЭДТА динатриевая соль | 46,5 г |
Натрий фосфорнокислый 2-замещенный | 14,2 г |
Калий фосфорнокислый 1-замещенный | 13,6 г |
Холин-хлорид | 1000 г |
Тимеросал (мертиолят) | 10 г |
Вода очищенная | до 10000 мл |
1.2. Последовательно перенести навески в чистую промаркированную емкость и добавить до необходимого объема воды очищенной.
1.3. Включить магнитную мешалку и тщательно перемешать приготовленный раствор до полного растворения солей.
При необходимости довести pH приготовленного буферного раствора до 6,9±0,2 путем добавления 0,1 моль/л раствора гидроокиси натрия.
1.4. Провести фильтрацию буферного раствора с помощью перистальтического насоса через фильтр мембранный ФМАЦ-0,45 в чистую маркированную емкость. Допускается хранение при температуре 2- 8°C.
2. Приготовление спиртового раствора липидов
2.1. Сделать навески липидов исходя из следующего расчета:
Кардиолипин | 0,33 г |
Лецитин | 2,7 г |
Холестерин | 9,0 г |
Спирт этиловый абсолютированный | до 1000 мл |
2.2. Перенести навеску кардиолипина в чистую сухую мерную колбу и добавить немного спирта этилового абсолютированного, затем добавить навеску лецитина в ту же мерную колбу и вновь добавить немного спирта, внести навеску холестерина и довести общий объем до метки 1000 мл.
2.3. Перемешивать содержимое на магнитной мешалке не менее одного часа до полного растворения компонентов. Емкость с раствором плотно укупорить. Наклеить этикетки утвержденного образца.
Раствор выдержать при комнатной температуре не менее 15 часов.
3. Приготовление взвеси стабилизированного Аг Кл
3.1. В чистую сухую емкость вносят 1 часть общего объема буфера и частями при непрерывном перемешивании добавляют приготовленный спиртовой раствор липидов (приготовление взвеси стабилизированного Аг Кл осуществляют из расчета: на 1 часть раствора липидов - 9 частей буферного раствора).
3.2. Перемешивают в течение 10-15 минут и добавляют оставшийся буфер; взвесь перемешать еще в течение 30 минут.
3.3. Емкость плотно укупоривают. Наклеивают этикетки утвержденного образца. Взвесь стабилизированного Аг Кл выдерживают в холодной комнате при температуре 2-8°C не менее 24 часов (допускается хранение в течение 1 месяца).
4. Контроль качества и специфической активности взвеси стабилизированного Аг Кл.
4.1. Контроль осуществляют с использованием проверенной серии Набора реагентов «Сифилис - АгКл-РМП» и охарактеризованных образцjd положительных и отрицательных сывороток (содержащих и не содержащих антитела к кардиолипиновому антигену).
4.2. При получении нормированных результатов контроля приготовленную серию взвеси стабилизированного Аг Кл передают на розлив с маршрутной картой за подписью ответственного микробиолога.
5. Розлив взвеси стабилизированного Аг Кл в первичную упаковку.
5.1. Взвесь стабилизированного Аг Кл разливают с помощью дозатора в предварительно подготовленные флаконы из темного стекла вместимостью 5 мл по 5,0±0,05 мл; в процессе розлива контролируют точность дозирования.
5.2. Флаконы укупоривают крышками.
5.3. На флаконы наклеивают этикетки и передают их на участок комплектации наборов.
Эффективность разработанного способа иллюстрируются примерами выпуска опытно-экспериментальных серий реагента стабилизированного Аг Кл и проведения исследований его специфической активности в натурных испытаниях с целью определения возможного срока годности.
Пример 1:
В лаборатории перспективных разработок ЗАО «ЭКОлаб» в период с 27 по 31 января 2010 г. были приготовлены 3 опытно-экспериментальные серии нового разработанного реагента «стабилизированный Аг Кл для РМП» в соответствии с последовательностью действий и количественными показателями, описанныvb выше. А 31 января 2010 г. на основе 3 производственных серий набора реагентов «Сифилис АгКл-РМП» (производства ЗАО «ЭКОлаб», г. Электрогорск Московской обл.) были приготовлены 3 лабораторные серии рабочей суспензии кардиолипинового антигена.
Проведена серия сравнительных испытаний специфической активности приготовленных вариантов Аг Кл с использованием панели охарактеризованных стандартных образцов (ОСО) предприятия - контрольных сывороток крови, полученных от пациентов со вторичным сифилисом (n=3) и от здоровых доноров крови (n=2).
Исследования в РМП выполнялись 2 разными специалистами. При этом показано полное совпадение результатов определения антител к кардиолипину в реакции микропреципитации и оценки их полуколичественного содержания при исследовании серии 2-кратных разведений образцов (титрования антител).
Результаты примера подтверждали тождественную активность в РМП образцов рабочей суспензии кардиолипинового антигена, приготовленных по способу, описанному в инструкции по применению компонентов набора реагентов «Сифилис АгКл-РМП», и по вновь разработанному способу.
Пример 2:
Специфическую активность 3 опытно-экспериментальных серий готового к применению жидкого реагента Аг Кл (приготовленных, как описано в примере 1, в лаборатории перспективных разработок ЗАО «ЭКОлаб» с 27 по 31 января 2010 г.) оценивали в РМП при их длительном хранении.
Флаконы с готовым к применению Кл Аг сохраняли в условиях бытового холодильника при температуре 4-8°C на протяжении 1,75-1,8 лет. Исследование специфической активности проверяли в РМП через каждые 10-14 дней разными лабораторными специалистами. Исследованию в РМП подвергали образцы панели ОСО предприятия (полученных от пациентов со вторичным сифилисом и содержавших антикардиолипиновые антитела (n=3) и от здоровых доноров крови (n=2), не содержавших указанные антитела).
Сопоставление полученных данных позволило установить, что специфическая активность 2-х серий реагентов за 1,5-летний период времени их сохранения не претерпела изменений, а в 1 серии через 14 месяцев понизилась на одну степень разведения (с титра 1:8 до титра 1:4), что в соответствии с существующими требованиями к воспроизводимости результатов исследования в РМП не является ошибкой полуколичественного измерения этим методом.
Таким образом, приведенные примеры 1 и 2 демонстрируют:
- возможность успешного воспроизведения технологии получения готовой к применению суспензии кардиолипинового антигена по новому предлагаемому способу и его специфической активности для реакции микропреципитации (подтверждено в сравнительных испытаниях с реагентом, приготовленным по способу-прототипу);
- возможность длительного сохранения специфической активности готовой к использованию суспензии кардиолипинового антигена для РМП, приготовленной по предлагаемому способу, при условии соблюдения рекомендуемых условий хранения: обеспечения температуры плюс 4…8°C и первичной упаковки в стеклянные флаконы темного цвета с завинчивающейся крышкой (что явилось обоснованием выбора сроков годности реагента); - достоверность полученных результатов подтверждается результатами исследований в РМП, которые выполнялись в течение длительного периода времени разными специалистами лабораторной медицины.
Список источников информации
1. Pangborn М.С. Cardiolipin and its application in a chemically purified antigen for the serodiagnosis of syphilis. // Proc NY State Assoc Public Health Lab. 1946; 26(1): 26-9.
2. Резникова Л.С. Кардиолипиновые антигены в серодиагностике сифилиса. // Советская медицина, 1953; 1: 40-42.
3. Serologic tests for syphilis: 1959 Manual. Public Health Service Publication No 411. // United States Government Printing Office, Washington, 1959.
4. Larsen S.A., Pope V., Johnson R.E., Kennedy E.J. [Eds]. Manual of tests for syphilis. 9 -th Ed. // Washington: DC, 1998.
5. Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации №87 от 26 марта 2001 года «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» (Приложение №1. «Постановка отборочных и диагностических тестов на сифилис»).
6. Приказ Председателя Комитета контроля медицинской и фармацевтической деятельности МЗ РК от 27 июня 2011 года №350 (Инструкциия по применению изделия медицинского назначения для потребителя).
Claims (3)
1. Стабилизированный кардиолипиновый антиген, содержащий кардиолипин, лецитин, холестерин, спирт этиловый абсолютированный, ЭДТА динатриевая соль, натрий фосфорнокислый 2-замещенный, калий фосфорнокислый 1-замещенный, холин-хлорид, тимеросал (мертиолят), воду очищенную при следующем количественном соотношении ингредиентов, мас %:
2. Способ получения стабилизированного кардиолипинового антигена, включающий приготовление буферного раствора с последовательным добавлением друг к другу ЭДТА динатриевой соли, натрия фосфорнокислого 2-замещенного, калия фосфорнокислого 1-замещенного, холин-хлорида, тимеросала (мертиолята), воды очищенной, далее получившийся раствор перемешивают и фильтруют, после чего приготавливают спиртовой раствор липидов, для этого смешивают кардиолипин, лецитин, холестерин и спирт этиловый абсолютированный, затем осуществляют смешение буферного раствора и спиртового раствора.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016110574A RU2633087C2 (ru) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Стабилизированный кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации при диагностике сифилиса и способ его получения |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016110574A RU2633087C2 (ru) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Стабилизированный кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации при диагностике сифилиса и способ его получения |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2016110574A RU2016110574A (ru) | 2017-09-28 |
RU2633087C2 true RU2633087C2 (ru) | 2017-10-11 |
Family
ID=60047512
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016110574A RU2633087C2 (ru) | 2016-03-23 | 2016-03-23 | Стабилизированный кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации при диагностике сифилиса и способ его получения |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2633087C2 (ru) |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU629927A1 (ru) * | 1977-06-30 | 1978-10-30 | Завод Бактериальных Препаратов | Кардиолипиновый антиген |
WO1991010138A1 (en) * | 1989-12-27 | 1991-07-11 | Baxter Diagnostics Inc. | Method to immobilize cardiolipin, phosphatidyl choline and cholesterol to solid phase and immunoassay |
SU1649807A1 (ru) * | 1988-07-20 | 1996-08-20 | Волгоградский государственный медицинский институт | Способ получения иммобилизованного кардиолипинового антигена для определения специфических антител |
RU2092189C1 (ru) * | 1994-11-18 | 1997-10-10 | Илья Петрович Гонтарь | Способ получения кардиолипинового иммуносорбента |
US20110136143A1 (en) * | 2005-11-18 | 2011-06-09 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of | Modified cardiolipin and uses therefor |
US20140322800A1 (en) * | 2005-11-18 | 2014-10-30 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of | Oxidized cardiolipin and uses to detect cardiolipin antibodies |
-
2016
- 2016-03-23 RU RU2016110574A patent/RU2633087C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU629927A1 (ru) * | 1977-06-30 | 1978-10-30 | Завод Бактериальных Препаратов | Кардиолипиновый антиген |
SU1649807A1 (ru) * | 1988-07-20 | 1996-08-20 | Волгоградский государственный медицинский институт | Способ получения иммобилизованного кардиолипинового антигена для определения специфических антител |
WO1991010138A1 (en) * | 1989-12-27 | 1991-07-11 | Baxter Diagnostics Inc. | Method to immobilize cardiolipin, phosphatidyl choline and cholesterol to solid phase and immunoassay |
RU2092189C1 (ru) * | 1994-11-18 | 1997-10-10 | Илья Петрович Гонтарь | Способ получения кардиолипинового иммуносорбента |
US20110136143A1 (en) * | 2005-11-18 | 2011-06-09 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of | Modified cardiolipin and uses therefor |
US20140322800A1 (en) * | 2005-11-18 | 2014-10-30 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of | Oxidized cardiolipin and uses to detect cardiolipin antibodies |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2016110574A (ru) | 2017-09-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Levens et al. | The hemoagglutinative properties of amniotic fluid from embryonated eggs infected with mumps virus | |
Ip et al. | Insulin binding and insulin response of adipocytes from rats adapted to fat feeding | |
CN103901208B (zh) | 能够更好地在医疗制品中检测非内毒素致热污染物的改进的单核细胞活化测试 | |
Mayer et al. | Spectrophotometric standardization of complement for fixation tests | |
CN108205059A (zh) | 一种测定降钙素含量的试剂盒及其测试方法 | |
CN107966432A (zh) | 一种测定可溶性生长刺激表达基因2蛋白含量的试剂盒及其测试方法 | |
CA1087966A (en) | Process and a metachromatic composition for effecting a count of leucocytes, and more particularly of basophiles | |
CN108287245A (zh) | 测定糖化血红蛋白的试剂盒及其制备方法 | |
CN102890083B (zh) | 化学发光底物溶液和含其的试剂盒及应用其的检测方法 | |
Noguchi | Serum diagnosis of syphilis and luetin reaction | |
RU2633087C2 (ru) | Стабилизированный кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации при диагностике сифилиса и способ его получения | |
McLean et al. | Hypomorphic variant of C3, arthritis, and chronic glomerulonephritis | |
CN108226464A (zh) | 一种测定甲状腺球蛋白含量的试剂盒及其测试方法 | |
CN106520702A (zh) | 一种杂交瘤细胞株、其分泌的单克隆抗体及应用 | |
CN109239344A (zh) | 一种神经元特异性烯醇化酶含量测定用液态校准品 | |
CN111175515B (zh) | 一种血清淀粉样蛋白a和c反应蛋白的二合一质控物及其制备方法 | |
CN102944682A (zh) | 蟹类抗体谱检测试剂盒 | |
CN108048408A (zh) | 牛单核细胞趋化蛋白-1杂交瘤细胞株、其分泌的单克隆抗体及应用 | |
CN112305212A (zh) | 一种触珠蛋白专利免疫比浊法检测试剂盒及其制备方法 | |
Lear et al. | Morphological, total nucleic acid and total protein analyses of rat embryos cultured in supplemented and unsupplemented human serum. | |
USRE28548E (en) | Method and reagents for the diagnosis of viral diseases | |
CN109283344A (zh) | 一种用于检测apoA I、apoB的试剂盒及其稳定剂的制备方法 | |
RU2279681C2 (ru) | Способ экспресс-определения содержания кальция в моче | |
RU2682714C1 (ru) | Стандартный образец содержания анти-D антител в препаратах иммуноглобулинов человека | |
Lile et al. | Bedside determination of urea nitrogen level in serum or plasma |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180324 |