RU2623864C1 - Способ подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии - Google Patents
Способ подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2623864C1 RU2623864C1 RU2016124198A RU2016124198A RU2623864C1 RU 2623864 C1 RU2623864 C1 RU 2623864C1 RU 2016124198 A RU2016124198 A RU 2016124198A RU 2016124198 A RU2016124198 A RU 2016124198A RU 2623864 C1 RU2623864 C1 RU 2623864C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- platelets
- thawed
- dmso
- cryopreserved
- transfusion
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
- A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
- A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Zoology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Anesthesiology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины, а именно производственной и клинической трансфузиологии, и предназначено для заготовки тромбоцитов длительного хранения, пригодных к трансфузии. Для подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии осуществляют следующие этапы. Размораживают контейнеры, содержащие замороженные тромбоциты, нагреванием при температуре от 37 до 40°С в течение от 2 до 4 минут. Определяют концентрацию ДМСО в размороженных криоконсервированных тромбоцитах. Определяют объем плазмы или ресуспендирующего раствора, необходимого для введения в размороженные криоконсервированные тромбоциты для получения конечной концентрации ДМСО не более 0,5%, с последующим ресуспендированием размороженных тромбоцитов данным объемом плазмы, совместимой по системе АВО, или ресуспендирующим раствором при постоянном перемешивании в течение 8-12 минут со скоростью подачи плазмы или раствора 1-3 мл в минуту. Хранят размороженные тромбоциты до трансфузии не более 4 часов при температуре от 20 до 24°С и постоянном перемешивании. Использование изобретения позволяет повысить качество получаемых после размораживания криоконсервированных тромбоцитов. 7 з.п. ф-лы, 1 ил., 4 табл., 2 пр.
Description
Область, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области медицины, а именно производственной и клинической трансфузиологии, и может быть использовано для заготовки тромбоцитов длительного хранения (до 24 месяцев), пригодных к трансфузии.
Уровень техники
Известен способ подготовки криоконсервировнных тромбоцитов для трансфузии, описанный в технологии криоконсервирования тромбоцитов в присутствии 10% ДМСО, предусматривающий отмывание тромбоцитов от ДМСО и разведение плазмой тромбоцитов после размораживания [Khuri S.F., Healey N., MacGregor H. et al. Comparison of the effects of transfusions of cryopreserved and liquid-preserved platelets on hemostasis and blood loss after cardiopulmonary bypass J Thorac Cardiovasc Surg 1999; 117: 172-84]. Однако данный способ не предусматривает оценку концентрации ДМСО в замороженных тромбоцитах, что часто приводит к значительному увеличению содержания в концентрате размороженных тромбоцитов активированных клеток.
Наиболее близким к заявляемому решению является способ подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии, описанный в технологии криоконсервирования тромбоцитов с ДМСО и хранения клеток при -80°С [С. Robert Valery, Gina Rango, and Shukri Khuri Freezing human platelets with 6 percent dimethyl sulfoxide with removal of the supernatant solution before freezing and storage at -80°C without postthaw processing II Transfusion 2005; 45: 1890-1898]. Размораживание тромбоцитов проводится в водяной бане (Thermogenesis), при температуре 36°С в течение 5 минут. Размороженную суспензию тромбоцитов разводят 10-20 мл 0,9% раствора NaCl с целью уменьшения общей концентрации клеток, увеличения объема ТК, а также для уменьшения концентрации ДМСО в дозе размороженных тромбоцитов. Проверку качества тромбоцитов после размораживания криоконсервированных тромбоцитов (КТ) проводят по следующим параметрам: количество тромбоцитов (109/мл); рН, величину R-периода на тромбоэластограмме, агрегационную активность тромбоцитов (индукторы - 50 мкг/мл арахидоновой кислоты и 2 мкМ/л АДФ); продукцию тромбоксана В2 после стимуляции 50 мкг/мл арахидоновой кислоты и 2 мкМ/л АДФ; содержание аннексин-положительных тромбоцитов. Трансфузию размороженных КТ проводят через фильтр диаметром 170 микрон.
Однако данный способ подготовки КТ для трансфузии не предусматривает определение концентрации ДМСО в размороженном ТК; использует параметры агрегометрии, тромбоэластографии и проточной цитометрии, которые не отражают структурную целостность тромбоцитов, что не позволяет оценить сохранность (в %) биологически полноценных клеток в КТ после размораживания, что не позволяет произвести адекватный расчет требуемого количества тромбоцитов для конкретного пациента; для разведения размороженных тромбоцитов используется 0,9% раствор NaCl, не обладающий буферными свойствами, что приводит к закислению среды (рН=6.5-6.6) и повышает риск повреждения тромбоцитов; разведение размороженных ТК 0,9% раствором NaCl снижает конечную концентрацию ДМСО в ТК только до 3%, что является недостаточным для достижения концентрации, нетоксичной для тромбоцитов человека (0,5%); размороженная доза ТК обладает очень высокой осмолярностью (800-860 мОсмоль/л при физиологической норме 300-380 мОсмоль/л) и повышает риск развития у пациентов посттрансфузионных реакций.
Раскрытие изобретения
Задачей изобретения является разработка способа подготовки КТ для трансфузии, обеспечивающего получение безопасного гемокомпонента с высоким содержанием биологически полноценных тромбоцитов и его хранение при температуре 20-24°С в течение 4 часов без угрозы потери структурной или функциональной полноценности тромбоцитов.
Техническим результатом, на достижение которого направлено заявленное изобретение, является повышение качества получаемых после размораживания криоконсервированных тромбоцитов за счет комплекса используемых технологических операций, параметров и режимов, позволяющих сохранить гораздо большее число биологически полноценных тромбоцитов (в 1,5-1,8 раза по сравнению с технологией по прототипу), хранить размороженные ТК при комнатной температуре в течение 4 часов без угрозы потери структурной или функциональной полноценности тромбоцитов, получить осмолярность дозы ТК, соответствующей физиологической норме, не вызывающей развития у пациентов посттрансфузионных реакций.
Поставленная задача решается тем, что способ подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии включает следующие этапы:
- размораживание контейнеров, содержащих замороженные тромбоциты, нагреванием при температуре от 37 до 40°С в течение от 2 до 4 минут;
- определение концентрации ДМСО в размороженных криоконсервированных тромбоцитах;
- определение объема плазмы или ресуспендирующего раствора, необходимого для введения в размороженные криоконсервированные тромбоциты для получения конечной концентрации ДМСО не более 0,5%, с последующим ресуспендированием размороженных тромбоцитов данным объемом плазмы, совместимой по системе АВО, или ресуспендирующим раствором при постоянном перемешивании в течение 8-12 минут со скоростью подачи плазмы или раствора 1-3 мл в минуту;
- хранение размороженных тромбоцитов до трансфузии не более 4 часов при температуре от 20 до 24°С и постоянном перемешивании.
Концентрацию ДМСО, как правило, определяют в аликвоте размороженных криоконсервированных тромбоцитов методом газовой хроматографии. Для этого может быть использован газовый хроматограф Shimadzu GC-17A (Япония) с пламенно-ионизационным детектором и автосамплером.
В качестве ресуспендирующего раствора могут быть использованы SSP, SSP+. В зависимости от концентрации ДМСО в криоконсервированные тромбоциты вводят плазму или ресуспендирующий раствор в соотношении от 1:9 до 1:19.
Перед ресуспендированием размороженные тромбоциты из контейнера, в котором они хранились в замороженном состоянии, переводят в аэрируемый контейнер из ПВХ с фталатным пластификатором, например контейнер для получения, транспортировки и хранения тромбоцитов: 994CF-E № ФСЗ 2011/09569, 2011-04-18 от Дельрус (Россия); производитель: Haemonetics Corporation (США).
После размораживания тромбоцитов оценивают их качество по следующим параметрам: объем от 180 до 220 мл, сохранность тромбоцитов не менее 75% от исходного (определенного перед замораживанием), сохранность тромбоцитов с гранулами и тромбоцитов с адгезивной активностью не менее 50% от исходного. Перед трансфузией конкретному пациенту производят расчет дозы размороженных тромбоцитов исходя из его антропометрических характеристик по следующей формуле: (2×1011 тромбоцитов на 1 м2 поверхности тела пациента или 0,7×1011 тромбоцитов на 10 кг веса пациента).
При этом после размораживания измеряют следующие параметры тромбоцитов: количество тромбоцитов, количество тромбоцитов с гранулами и количество адгезивно активных тромбоцитов. Данную информацию наносят на контейнер для последующего выбора контейнера с необходимыми параметрами для трансфузии конкретному пациенту в зависимости от его антропометрических характеристик.
Таким образом, поставленная задача решается за счет внедрения в процедуру метода количественного определения ДМСО в размороженных КТ; режимов размораживания и ресуспендирования КТ плазмой до концентрации тромбоцитов от 1,0×109/мл до 1,5×109/мл и снижения концентрации ДМСО до значения менее 0,5%, использования методов анализа структурной целостности и функциональной активности тромбоцитов и оценки сохранности биологически полноценных тромбоцитов после размораживания КТ.
Определение количества ДМСО в размороженных КТ необходимо для расчета объема плазмы, используемой для ресуспендирования тромбоцитов, для снижения концентрации ДМСО до 0,5% и ниже. Количество ДМСО определяется газохроматографическим методом. На этапе пробоподготовки 100 мкл тромбоцитарной массы ресуспендируют 900 мкл метанола и 50 мкл 0,02% метанольного внутреннего стандарта диметилформамида, перемешивают на орбитальном шейкере 10 минут с частотой 120 об/мин. Центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 минут, декантируют надосадочную жидкость и помещают в виалу для проведения исследования на газовом хроматографе Agilent 6850 с пламенно-ионизационным детектором, испарителем для режимов работы со сбросом/без сброса и автоматическим дозатором. Колонка - HP-FFAP, 25 метров, диаметр - 0,32 мм, толщина фазы - 0,5 нм. Температура испарителя - 200°С, режим работы с постоянным давлением - 45 кПa, 1 мкл образца вводится с сбросом 1/15. Температурный режим печи - 70°С начальная температура, плато 3 мин, подъем температуры со скоростью 15°С/мин до 180°С, плато 10 мин. Температура детектора - 280°С, поток водорода - 40 мл/мин, поток воздуха - 300 мл/мин. Время удерживания диметилсульфоксида составляет 11,05 мин, диметилформамида - 8,12 мин.
Для оценки качества клеток в ТК на разных этапах криоконсервирования может быть использован разработанный ранее способ оценки морфофункционального статуса тромбоцитов человека [Патент РФ на изобретение №2485502 «Способ оценки морфофункционального статуса тромбоцитов человека», авторы Хубутия М.Ш., Макаров М.С., Хватов В.Б., Высочин И.В., Кобзева Е.Н., Боровкова Н.В., Конюшко О.И., 20.06.2013], основанный на витальном (прижизненном) окрашивании тромбоцитов флуорохромным красителем на основе трипафлавина и акридинового оранжевого с последующим их анализом во флуоресцентном микроскопе. Данный метод позволяет параллельно оценить структурную целостность и функциональную активность тромбоцитов независимо от их концентрации в пробе, в том числе - в бесплазменной среде. Таким образом, используя данный метод, появляется возможность оценить общее содержание биологически полноценных тромбоцитов в исследуемом ТК (109/мл), а также оценить сохранность таких клеток после разных процедур криоконсервирования. Проведенные исследования показывают, что биологически полноценными (с нормальной структурой и функциями) являются лишь те тромбоциты, в которых при витальном окрашивании отчетливо выявляются гранулы - не менее 3 гранул диаметром более 300 мкм на клетку во флуоресцентном микроскопе, яркость свечения клетки - не менее 40 фут-кандел (Макаров М.С., Кобзева Е.Н., Высочин И.В., Боровкова Н.В., Хватов В.Б. Морфофункциональный анализ тромбоцитов человека с помощью витального окрашивания // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2013. - №9. - С. 388-391). Следовательно, оценка содержания тромбоцитов с гранулами может быть использована для контроля качества клеток ТК до и после криоконсервирования.
При экспозиции богатой тромбоцитами плазмы (БоТП) с ДМСО в конечной концентрации от 0,5 до 20% при комнатной температуре было установлено, что в процессе контакта с ДМСО биологическая полноценность клеток БоТП снижается, параллельно с этим уменьшается содержание тромбоцитов с гранулами (табл. 1). Так, при 0,5% ДМСО содержание тромбоцитов с гранулами в БоТП практически не менялось в течение 2 часов при комнатной температуре, через 4 часа снижалось на 7-10%, через 20 часов - на 70%. При концентрации ДМСО от 1 до 20% динамика снижения числа тромбоцитов с гранулами была сходной в течение первых двух часов: через 1 час потеря тромбоцитов с гранулами составила 10-20%, через 2 часа - 40-50%, через 4 часа - от 60 до 80%, через 20 часов тромбоциты с гранулами в БоТП полностью отсутствовали. Еще более выраженной динамика снижения тромбоцитов с гранулами была при 10-20% ДМСО: через 2 часа потеря тромбоцитов с гранулами составила 55-65%, через 4 часа - 90-99%. Стоит особо отметить, что при концентрации ДМСО 5% и выше адгезивная активность тромбоцитов с гранулами падает гораздо быстрее, чем их содержание. Этот эффект становится выражен уже при концентрации ДМСО 2% и выше. При использовании 5% ДМСО после 30 мин экспозиции адгезивная активность тромбоцитов снижалась в среднем 2 раза (табл. 2). Таким образом, уже через 30 мин экспозиции БоТП с 5% ДМСО при комнатной температуре в среднем 50% тромбоцитов с гранулами не проявляли функциональной активности. Это указывает на то, что время контакта тромбоцитов с 5% ДМСО при комнатной температуре должно быть минимизировано. С другой стороны, при концентрации 0,3-0,5% ДМСО биологическая полноценность тромбоцитов практически не нарушается в течение нескольких часов. Следовательно, разведение размороженных ДМСО-содержащих ТК до концентрации 0,3-0,5% ДМСО позволит сохранить их структурную и функциональную полноценность в течение 4-6 часов после разморозки.
Результаты сравнения качества тромбоцитов в размороженных КТ, полученных с помощью технологии-прототипа и с помощью заявляемого способа, представлены в Таблице 3. Для оценки эффективности криоконсервирования решено было определять сохранность тромбоцитов с гранулами и сохранность их адгезивной активности. Было установлено, что заявляемый способ позволяет сохранить гораздо большее число биологически полноценных тромбоцитов (в 1,5-1,8 раза), чем технология-прототип. Размороженные КТ разводили плазмой. Объем размороженной плазмы составлял 90-100 мл, что позволяло развести КТ в 10 раз, снижая концентрацию ДМСО в ней до 0,4-0,6%. В то же время в прототипе концентрация ДМСО составляет 2,5-3%, осмолярность - более 800 мОсмоль/л, что является токсичным для тромбоцитов человека, при этом для дилюции КТ используется 0,9% раствор хлорида натрия, не обладающий буферными свойствами и не препятствующий закислению среды. В результате хранение размороженных ТК, полученных по технологии-прототипу, сопровождается выраженным снижением структурной и функциональной полноценности тромбоцитов. Так, через 1 час хранения в размороженных КТ адгезивная активность клеток снижается на 70%, через 2 часа - на 90%, через 4 часа - на 95-98% (рис. 1). Это указывает на неэффективность хранения ТК (в прототипе) при температуре от 20 до 24°С. Напротив, при разведении КТ плазмой (предлагаемая технология) адгезивная активность тромбоцитов снижается через 4 часа лишь на 10% (рис. 1). Таким образом, появляется возможность хранения размороженных КТ при комнатной температуре в течение 4 часов без угрозы потери структурной или функциональной полноценности тромбоцитов. Осмолярность полученной дозы КТ составляет 360-380 мОсмоль/л, что соответствует физиологической норме и не вызывает развития у пациентов посттрансфузионных реакций.
Краткое описание чертежей
Изобретение поясняется чертежами, где на фиг. 1 изображена динамика изменения адгезивной активности тромбоцитов в размороженных ТК, приготовленных с использованием технологии-прототипа и предложенной нами технологии.
Осуществление изобретения
Процесс подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии включает следующие этапы:
1. Определение концентрации ДМСО.
Концентрацию ДМСО в криоконсервированных тромбоцитах определяют методом газовой хроматографии. Для хроматографирования применяют капиллярную колонку НР-FFAP фирмы Agilent Technologies (США) с полярной фазой (100% полиэтиленгликоль). Аликвоту криоконсервированных тромбоцитов в количестве 100 мл разводят 900 мкл метанола и 50 мкл метанольного раствора диметилформамида. Полученную смесь центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 минут. Надосадок декантируют и переносят в количестве 1 мкл в хроматограф. Количественный анализ проводили по методу внутреннего стандарта, в качестве которого использовали диметилформамид. Для построения калибровочного графика зависимости площади пика ДМСО от его концентрации готовят контрольные смеси ТК с ДМСО в конечной концентрации последнего: 1,51; 3,02; 6,05; 30,25; 60,5 и 121 мкг/мл. Калибровочный график, составляемый по результатам анализа контрольных смесей, представляет собой прямую линию во всем диапазоне используемых концентраций. Концентрацию ДМСО в криоконсервированных тромбоцитах пересчитывают в % с учетом объема замороженных тромбоцитов и далее учитывают при расчете объема раствора для ресуспендирования тромбоцитов.
2. Размораживание тромбоцитов.
Замороженные тромбоциты, нагревают в программном размораживателе плазмы (например, Barkey Plasmatherm) при температуре от 37 до 40°С в течение от 2 до 4 минут.
3. Ресуспендирование размороженных тромбоцитов.
Плазму или разводящий раствор SAGM добавляют к размороженным тромбоцитам в соотношении от 1:9 до 1:19 при постоянном перемешивании в течение 10 минут. Объем разводящего раствора или плазмы зависит от концентрации ДМСО в исходных криоконсервированных тромбоцитах и рассчитывается для достижения конечной концентрации ДМСО в размороженных тромбоцитах не более 0,5%.
4. Хранение размороженных тромбоцитов.
Хранят размороженные тромбоциты при температуре от 20 до 24°С и постоянном перемешивании не более 4 часов до трансфузии.
Пример 1.
Для приготовления КТ к трансфузии использовали две равные части замороженного гемокомпонента: КТ №1 (прототип) и КТ №2 (разработка). Параметры качества криоконсервированных тромбоцитов представлены в таблице 4.
Анализ результатов размороженных КТ показал, что предложенная технология криоконсервирования тромбоцитов по сравнению с прототипом обеспечивает значимо большую сохранность жизнеспособных клеток в размороженных ТК. Так, через 10 минут после размораживания криоконсервированных по предложенной технологии тромбоцитов содержание жизнеспособных клеток было больше, чем в прототипе в 2,5-3 раза, через 4 часа хранения при комнатной температуре - в 40 раз.
Пример 2.
Больной А, 65 лет
Диагноз: Расслаивающаяся аневризма грудного отдела аорты 2 типа.
Операция с использованием аппарата искусственного кровообращения (АИК) - протезирование грудного отдела аорты.
Состояние больного после операции. Кровопотеря за две операции - 2300 мл. После операции в течение первых суток сохраняется геморрагическое отделяемое по дренажам. Тромбоцитопения (концентрация тромбоцитов в крови больного) 59×109. Лейкопения (концентрация лейкоцитов в крови 3,5 тыс./мкл), анемия (гемоглобин 71 г/л и гематокрит 19,5%). Доля тромбоцитов с гранулами - 5%, адгезивная активность тромбоцитов - 3%, что говорит о выраженной тромбоцитопении и высоком риске кровотечения.
Тактика лечения. С учетом наличия у больного тромбоцитопении и выраженного геморрагического синдрома, развившихся после интраоперационной массивной кровопотери, для коррекции клеточного звена гемостаза проведена лечебная трансфузия тромбоцитного концентрата, размороженного после 9 месяцев криохранения и карантинизации.
Характеристика КТ. Общий объем - 200 мл, общее количество тромбоцитов - 2,4×1011, содержание тромбоцитов с гранулами - 0,84×1011, адгезивная активность тромбоцитов - 0,72×1011. Трансфузия - лечебная с учетом группы крови и фенотипа О (I) положительный.
Эффективность трансфузии.
После переливания ТК геморрагический синдром купирован. В крови больного концентрация тромбоцитов повысилась до 77×109/л через 1 час, и до 102×109/л через 24 часа после переливания ТК. Скорректированный прирост тромбоцитов составил через 1 час 16; через 24 часа - 38×109/л, что говорит о высокой эффективности трансфузии ТК. Больной экстубирован, моча светлая, геморрагический синдром купирован.
Claims (12)
1. Способ подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии, включающий:
размораживание контейнеров, содержащих замороженные тромбоциты, нагреванием при температуре от 37 до 40°C в течение от 2 до 4 минут;
определение концентрации ДМСО в размороженных криоконсервированных тромбоцитах;
определение объема плазмы или ресуспендирующего раствора, необходимого для введения в размороженные криоконсервированные тромбоциты для получения конечной концентрации ДМСО не более 0,5%, с последующим ресуспендированием размороженных тромбоцитов данным объемом плазмы, совместимой по системе АВО, или ресуспендирующим раствором при постоянном перемешивании в течение 8-12 минут со скоростью подачи плазмы или раствора 1-3 мл в минуту;
хранение размороженных тромбоцитов до трансфузии не более 4 часов при температуре от 20 до 24°C и постоянном перемешивании.
2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что концентрацию ДМСО определяют в аликвоте размороженных криоконсервированных тромбоцитов методом газовой хроматографии.
3. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что концентрацию ДМСО в криоконсервированных тромбоцитах определяют на газовом хроматографе Shimadzu GC-17А с пламенно-ионизационным детектором и автосамплером.
4. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в качестве ресуспендирующего раствора используют SAGM.
5. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что ресуспендирование размороженных тромбоцитов осуществляют при объемных соотношениях плазмы/раствора и размороженных тромбоцитов от 1:9 до 1:19.
6. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что перед трансфузией размороженных тромбоцитов конкретному пациенту рассчитывают дозу исходя из его антропометрических характеристик: 2×1011 тромбоцитов на 1 м2 поверхности тела пациента или 0,7×1011 тромбоцитов на 10 кг веса пациента.
7. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что после размораживания тромбоцитов оценивают их качество по следующим параметрам: объем от 180 до 220 мл, сохранность тромбоцитов не менее 75% от исходного, сохранность тромбоцитов с гранулами и тромбоцитов с адгезивной активностью не менее 50% от исходного.
8. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что перед ресуспендированием размороженные тромбоциты из контейнера, в котором они хранились в замороженном состоянии, переводят в аэрируемый контейнер из ПВХ с фталатным пластификатором.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016124198A RU2623864C1 (ru) | 2016-06-20 | 2016-06-20 | Способ подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016124198A RU2623864C1 (ru) | 2016-06-20 | 2016-06-20 | Способ подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2623864C1 true RU2623864C1 (ru) | 2017-06-29 |
Family
ID=59312365
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016124198A RU2623864C1 (ru) | 2016-06-20 | 2016-06-20 | Способ подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2623864C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2795058C1 (ru) * | 2022-05-04 | 2023-04-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" | Способ отмывания криоконсервированных-оттаянных тромбоцитов от ограждающего раствора |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU99126524A (ru) * | 1999-12-16 | 2001-08-27 | Военно-медицинская академия | Способ низкотемпературного консервирования тромбоцитов |
| RU2233589C2 (ru) * | 2002-01-14 | 2004-08-10 | Галина Степановна Лобынцева | Способ криоконсервирования гемопоэтических клеток человека |
| RU2006131078A (ru) * | 2006-08-29 | 2008-03-10 | ФГУ "Кировский НИИ гематологии и переливани крови Росздрава" (RU) | Способ криоконсервирования тромбоцитов |
-
2016
- 2016-06-20 RU RU2016124198A patent/RU2623864C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU99126524A (ru) * | 1999-12-16 | 2001-08-27 | Военно-медицинская академия | Способ низкотемпературного консервирования тромбоцитов |
| RU2233589C2 (ru) * | 2002-01-14 | 2004-08-10 | Галина Степановна Лобынцева | Способ криоконсервирования гемопоэтических клеток человека |
| RU2006131078A (ru) * | 2006-08-29 | 2008-03-10 | ФГУ "Кировский НИИ гематологии и переливани крови Росздрава" (RU) | Способ криоконсервирования тромбоцитов |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| GLAFKE C et al. Cryopreservation of platelets using trehalose: the role of membrane phase behavior during freezing. Biotechnol Prog., 2012, 28(5), p.1347-54. * |
| VALERI CR et al. Freezing human platelets with 6 percent dimethyl sulfoxide with removal of the supernatant solution before freezing and storage at -80 degrees C without postthaw processing. Transfusion, 2005, 45(12), p.1890-8. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2795058C1 (ru) * | 2022-05-04 | 2023-04-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" | Способ отмывания криоконсервированных-оттаянных тромбоцитов от ограждающего раствора |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Van den Bossche et al. | Alternatively activated macrophages engage in homotypic and heterotypic interactions through IL-4 and polyamine-induced E-cadherin/catenin complexes | |
| Pidcoke et al. | Primary hemostatic capacity of whole blood: a comprehensive analysis of pathogen reduction and refrigeration effects over time | |
| US8097403B2 (en) | Freeze-dried platelets, method of making and method of use as a diagnostic agent | |
| Gielis et al. | Longitudinal quantification of radical bursts during pulmonary ischaemia and reperfusion | |
| Six et al. | Comparison between manufacturing sites shows differential adhesion, activation, and GPIbα expression of cryopreserved platelets | |
| US20200291356A1 (en) | Canine blood platelet preparations | |
| Kopacz et al. | Keap1 controls protein S-nitrosation and apoptosis-senescence switch in endothelial cells | |
| CA3074712A1 (en) | Canine blood platelet preparations | |
| Slichter et al. | Platelets stored in whole blood at 4° C: in vivo posttransfusion platelet recoveries and survivals and in vitro hemostatic function | |
| Vaugier et al. | Serum iron protects from renal postischemic injury | |
| Noulsri et al. | Effects of donor age, donor sex, blood-component processing, and storage on cell-derived microparticle concentrations in routine blood-component preparation | |
| US20230112136A1 (en) | Canine blood platelet preparations | |
| CN105717312B (zh) | 一种红细胞模拟粒子、其制备方法以及含该模拟粒子的质控物或校准物 | |
| Mondal et al. | Mechanistic insight of platelet apoptosis leading to non-surgical bleeding among heart failure patients supported by continuous-flow left ventricular assist devices | |
| Mondal et al. | Intraplatelet reactive oxygen species, mitochondrial damage and platelet apoptosis augment non-surgical bleeding in heart failure patients supported by continuous-flow left ventricular assist device | |
| Saunders et al. | In vitro storage characteristics of platelet concentrates suspended in 70% SSP+ TM additive solution versus plasma over a 14‐day storage period | |
| RU2623081C1 (ru) | Способ криоконсервирования тромбоцитов | |
| Wagner et al. | Impact of constant storage temperatures and multiple warming cycles on the quality of stored red blood cells | |
| Pulliam et al. | Expired but not yet dead: examining the red blood cell storage lesion in extended-storage whole blood | |
| RU2623864C1 (ru) | Способ подготовки криоконсервированных тромбоцитов для трансфузии | |
| Liu et al. | A 3D-printed transfusion platform reveals beneficial effects of normoglycemic erythrocyte storage solutions and a novel rejuvenating solution | |
| Herajärvi et al. | Exploring effects of remote ischemic preconditioning in a pig model of hypothermic circulatory arrest | |
| WO2023197518A1 (zh) | 一种细胞、组织或器官的抗损伤保存的方法及保存系统 | |
| Sudnitsyna et al. | Human erythrocyte ammonium transport is mediated by functional interaction of ammonium (RhAG) and anion (AE1) transporters | |
| Napolitano et al. | Buffy coat-derived platelets cryopreserved using a new method: results from a pivotal clinical trial on thrombocytopenic patients with acute leukaemia |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20180201 Effective date: 20180201 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20180426 Effective date: 20180426 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20180905 Effective date: 20180905 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20180912 Effective date: 20180912 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20181219 Effective date: 20181219 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20191107 Effective date: 20191107 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20191113 Effective date: 20191113 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20191120 Effective date: 20191120 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20200420 Effective date: 20200420 |