RU2619384C1 - Способ получения тетраплоидных форм осины - Google Patents
Способ получения тетраплоидных форм осины Download PDFInfo
- Publication number
- RU2619384C1 RU2619384C1 RU2015154308A RU2015154308A RU2619384C1 RU 2619384 C1 RU2619384 C1 RU 2619384C1 RU 2015154308 A RU2015154308 A RU 2015154308A RU 2015154308 A RU2015154308 A RU 2015154308A RU 2619384 C1 RU2619384 C1 RU 2619384C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- aspen
- forms
- tetraploid
- internodes
- trifluralin
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
- A01H1/04—Processes of selection involving genotypic or phenotypic markers; Methods of using phenotypic markers for selection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G7/00—Botany in general
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Botany (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Forests & Forestry (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии растений и лесному хозяйству и может быть использовано для получения новых тетраплоидных форм осины с измененной продуктивностью и морфологией. Способ включает обработку междоузлий (эксплантов) трифлуралином в концентрации 3 мкмоль в течение 24 часов, в котором для получения междоузлий используют этиолированные побеги. Способ позволяет существенно повысить выход тетраплоидных форм осины. 1 ил., 1 табл., 6 пр.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии растений и лесному хозяйству и может быть использовано для получения новых тетраплоидных форм осины с измененной продуктивностью и морфологией.
Стремительное сокращение площадей лесов и снижение доступности к существующим лесам привело к развитию плантационного лесоводства, основывающегося на производстве лесных культур узкоцелевой направленности с ожидаемой продукцией и законченностью всего цикла производства. Эффективное ведение плантационного лесоводства предполагает наличие высокопродуктивных форм деревьев, обеспечивающих быструю ротацию, и для этих целей подходят тетраплоидные формы осины. В лесном хозяйстве осина (Populus tremula) постепенно начинает занимать приоритетное направление для использования в целлюлозно-бумажной промышленности и получении стройматериалов. Колхицин, более широко применяющийся для полиплоидизации, обладает канцерогенным действием и более дорогой, чем трифлуралин. Трифлуралин характеризуется более высокой аффинностью с микротрубочками растений, чем животных, и используется в сельском хозяйстве в качестве гербицида.
Известен способ получения тетраплоидных форм розы «Trifluralin-mediated polyploidization of Rosa chinensis minima (Sims) Voss seedlings» (Zlesak, D.C., Thill C.A., Anderson N.O. et al. // Euphytica, 2005, 141(3): 281-290.), который является наиболее близким техническим решением. В нем суспензию трифлуралина в концентрации 0,0086 и 0,086% наносили в точку роста между семядолями и укрывали пленкой для поддержания высокого уровня влажности.
Задачей предлагаемого изобретения является повышение эффективности способа получения растений осины с тетраплоидным статусом.
Поставленная задача достигается за счет того, что после высадки растений осины на искусственную питательную среду для мультипликации - WPM (Lloyd, G. and В.Н. McCown. 1980. // Commercially feasible micropropagation of mountain laurel, (Kalmia latifolia), растения культивируют при стандартном световом режиме (16/8 часов, уровень освещенности - 2,5 тыс.люкс, температура 23-25°C) в течение 7 дней. После этого растения выдерживают в темноте в течение 4 дней. Затем растения вынимают из темноты и срезают этиолированные части побегов. Из побегов вырезают междоузлия и помещают их в раствор трифлуралина с концентрацией 3 мкмоль на 24 часа. Через 24 часа междоузлия промывают стерильной дистиллированной водой и помещают на вышеуказанную питательную среду для мультипликации. Далее производят пересадку на свежую питательную среду для мультипликации через каждые 4 недели.
Предлагаемый способ, заключается в использовании междоузлий этиолированных побегов в качестве эксплантов, что обеспечивает лучшее проникновение трифлуралина в глубокие слои апикальной меристемы.
Анализ известных способов подготовки растений для последующей обработки трифлуралином, проведенный по научно-технической и патентной документации, показал, что совокупность существенных признаков заявляемого способа неизвестна из уровня техники.
Изобретение иллюстрируют следующие примеры:
Пример 1. В нестерильных условиях готовится питательная среда, включающая минеральные соли среды WPM, 30 г/л сахарозы и 9 г/л агар-агара. Среда разливается по колбам, укупоривается фольгой и бумагой, завязывается банковской резинкой. Автоклавирование проводится при 1 атм (=1 изб. атм) в течение 20 минут. В остывшую до 55°C среду в ламинар-боксе добавляются 100 мг/л инозитола, 0,1 мг/л пиридоксина, 0,1 мг/л тиамина и 0,5 мг/л никотиновой кислоты. Питательную среду разливают по стерильным культуральным сосудам.
Пример 2. Все манипуляции с растительным материалом производят в стерильных условиях ламинар-бокса. В каждый контейнер помещают по 15-20 черенков, содержащих минимум одну пазушную почку.
Пример 3. Контейнеры с черенками помещают на светокультуральные стеллажи со световым режимом 16/8 часов, 2,5 тыс. люкс. Через неделю контейнеры с активно вегетирующими побегами помещают в темноту при комнатной температуре. Через 4 дня контейнеры вынимают и в асептических условиях срезают этиолированные части побегов, выделяя междоузлия с пазушными почками.
Пример 4. Междоузлия с пазушными почками помещают в жидкую (без добавления агар-агара) питательную среду WPM с трифлуралином с конечной концентрацией 3 мкмоль и оставляют на качалке на 24 часа при постоянном перемешивании.
Пример 5. После этого междоузлия ополаскивают стерильной дистиллированной водой и помещают на питательную среду для мультипликации.
Пример 6. Через каждые 4 недели проводят пересадку на свежую питательную среду для мультипликации.
В таблице 1 представлены результаты исследований по влиянию этиоляции на частоту получения тетраплоидных растений осины.
Трифлуралин является ингибитором микротрубочек, нарушающим процесс расхождения хромосом в делящихся клетках. Поскольку в качестве эксплантов используются междоузлия с меристематическими очагами, представляющими достаточно большую группу клеток, важно обеспечить такие условия, чтобы трифлуралин проник в как можно больше число меристематических клеток. Почки растений имеют естественные защитные слои, затрудняющие проникновение любых веществ. Известно, что при помещении растений в темноту происходит активизация роста побега и, как следствие, увеличение степени ювенильности формирующихся растительных тканей. Чем больше степень ювенильности тканей, тем она более проницаема для любых химических соединений. Исходя из этого, был заложен эксперимент по оценке влияния этиоляции на эффективность получения тетраплоидных форм осины, результаты которого представлены в таблице 1. Было установлено, что предварительная этиоляция побегов снижала выживаемость эксплантов после обработки трифлуралином, по сравнению с контрольными растениями, однако обеспечивала высокий выход тетраплоидных форм осины. Применение более высоких концентраций трифлуралина нецелесообразно из-за снижения общей выживаемости эксплантов.
Статус плоидности подтверждали с помощью цитологического анализа. Для этого производили подсчет числа хромосом в ядрах соматических клеток корешков, сформировавшихся из почек растений осины (фиг. 1).
Краткое описание чертежей
Фиг. 1. Метафазные пластинки корневой меристемы микрорастений осины: слева - исходный генотип Ptv 22 (2n=2x=38); справа - тетраплоидная линия (2n=4x=76).
Claims (1)
- Способ получения тетраплоидных форм осины, включающий обработку междоузлий (эксплантов) трифлуралином в концентрации 3 мкмоль в течение 24 часов, в котором для получения междоузлий (эксплантов) используют этиолированные побеги.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2015154308A RU2619384C1 (ru) | 2015-12-17 | 2015-12-17 | Способ получения тетраплоидных форм осины |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2015154308A RU2619384C1 (ru) | 2015-12-17 | 2015-12-17 | Способ получения тетраплоидных форм осины |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2619384C1 true RU2619384C1 (ru) | 2017-05-15 |
Family
ID=58715951
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2015154308A RU2619384C1 (ru) | 2015-12-17 | 2015-12-17 | Способ получения тетраплоидных форм осины |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2619384C1 (ru) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2125796C1 (ru) * | 1992-06-19 | 1999-02-10 | М.Нономура Артур | Способ промотирования роста растений и композиция, промотирующая рост растений |
-
2015
- 2015-12-17 RU RU2015154308A patent/RU2619384C1/ru active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2125796C1 (ru) * | 1992-06-19 | 1999-02-10 | М.Нономура Артур | Способ промотирования роста растений и композиция, промотирующая рост растений |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
ZLESAK D.C. et al. Trifluralin-mediated polyploidization of Rosa chinensis minima (Sims);Voss seedlings// Euphytica, 2005, 141 (3): 281-290. * |
ZLESAK D.C. et al. Trifluralin-mediated polyploidization of Rosa chinensis minima (Sims);Voss seedlings// Euphytica, 2005, 141 (3): 281-290. ЖИГУНОВ А.В. и др. Лесные плантации триплоидной осины, созданные посадочным материалом in vitro /Лес. Экология. Природопользование // Вестник ПГТУ, 2014, N 4(24), с.21-30. * |
ЖИГУНОВ А.В. и др. Лесные плантации триплоидной осины, созданные посадочным материалом in vitro /Лес. Экология. Природопользование // Вестник ПГТУ, 2014, N 4(24), с.21-30. ЛЕБЕДЕВ В.Г. и др. Проявление сомаклональной изменчивости у микроразмноженных и трансгенных растений //Известия ТСХА, Вып.1, 2012, с.153-163. * |
ЛЕБЕДЕВ В.Г. и др. Проявление сомаклональной изменчивости у микроразмноженных и трансгенных растений //Известия ТСХА, Вып.1, 2012, с.153-163. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Alister et al. | Use of the temporary immersion bioreactor system (RITA®) for production of commercial Eucalyptus clones in Mondi Forests (SA) | |
Gupta et al. | Mass propagation of conifer trees in liquid cultures—progress towards commercialization | |
Paek et al. | Micropropagation of Phalaenopsis orchids via protocorms and protocorm-like bodies | |
Demeke et al. | Effects of plant growth regulators on in vitro cultured nodal explants of cassava (Manihot esculenta Crantz) clones | |
Sáenz et al. | Protocol for the micropropagation of coconut from plumule explants | |
Dziedzic et al. | Micropropagation of Rubus and Ribes spp. | |
Romadanova et al. | In vitro collection methods for Malus shoot cultures used for developing a cryogenic bank in Kazakhstan | |
Yancheva et al. | In vitro propagation of grape cultivars and rootstocks for production of pre-basic planting material. | |
Tesfa et al. | In vitro rooting and acclimatization of micropropagated elite sugarcane (Saccharum officinarum L.) genotypes-N52 and N53 | |
Shahriyar et al. | In vitro plant regeneration of potato (Solanum tuberosum L.) at the rate of different hormonal concentration | |
Sivanesan et al. | In vitro shoot regeneration and microcorm development in Crocus vernus (L.) Hill | |
Hegde et al. | Production of synthetic seed in cassava (Manihot esculenta Crantz) | |
JASIM et al. | Somatic embryogenesis and plantlet regeneration from nucleus tissues of Local orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck) | |
RU2619052C1 (ru) | Способ получения растений хризантемы килеватой (Chrysanthemum carinatum Schousb.) в условиях in vitro | |
Kabir et al. | Multiple shoot regeneration in Dendrobium fimbriatum hook an ornamental orchid. | |
Mir et al. | In vitro development and regeneration of microcorms in saffron (Crocus sativus L) | |
Pati et al. | Micropropagation of Rosa damascena and R. bourboniana in liquid cultures | |
RU2619384C1 (ru) | Способ получения тетраплоидных форм осины | |
Theiler | In vitro culture of shoot tips of Pelargonium species | |
RU2490871C1 (ru) | Способ поверхностной стерилизации эксплантов и апикальных почек земляники садовой, винограда, хурмы сорта "королек" in vitro | |
Velayutham et al. | In vitro Regeneration and Mass Propagation of Hybanthus enneaspermus (L.) F. Muell. from the stem explants through callus culture | |
Guerra et al. | Micropropagation systems of feijoa (Acca sellowiana (O. Berg) Burret) | |
JP6470987B2 (ja) | 発根に適した光強度を評価する方法 | |
RU2743967C1 (ru) | Способ получения посадочного материала хризантемы в условиях in vitro | |
CN113207695A (zh) | 一种榔榆组织培养的配方 |