RU2619300C2

RU2619300C2 - Method for obtaining of composition with herbicid activity

Info

Publication number: RU2619300C2
Application number: RU2015140786A
Authority: RU
Inventors: Александр Олегович Берестецкий; Екатерина Викторовна Полуэктова
Priority date: 2015-09-24
Filing date: 2015-09-24
Publication date: 2017-05-15
Also published as: RU2015140786A

Abstract

FIELD: biotechnology.

SUBSTANCE: to obtain a herbicidal formulation, fesospheride A or an extract from the culture of its producer containing at least 60% of fesospheride A is diluted in an organic solvent and an aqueous adjuvant solution is added at a ratio of 1:50:950 and 5:50:950, respectively.

EFFECT: invention allows the above purpose.

4 cl, 4 dwg, 4 ex

Description

Изобретение относится к биотехнологии, химическому производству биологически активных веществ, сельскому хозяйству, в частности к технологии получения состава, содержащего феосферид A, с гербицидной активностью, в т.ч. на основе экстракта гриба Phoma sp. штамм №19, проявляющего фитотоксические свойства и обладающего гербицидными свойствами.The invention relates to biotechnology, the chemical production of biologically active substances, agriculture, in particular to a technology for producing a composition containing pheosperide A, with herbicidal activity, including based on Phoma sp. strain No. 19, showing phytotoxic properties and possessing herbicidal properties.

Известно, что феосферид A и грубый экстракт из мицелия гриба Phoma sp. штамм №19 обладают высокими фитотоксическими свойствами на пораненных листовых высечках бодяка полевого и пырея ползучего в низкой концентрации. Так, минимальная концентрация феосферида A, вызывающая некрозы на листовых дисках бодяка, составляет 250 мкг/мл (1,4×10^-6 моль/мл или 2.5 мкг/диск), на отрезках листьев пырея - 125 мкг/мл (0,7×10^-6 моль/мл). При этом соединение не проявляет антимикробных свойств и не проявляет токсичности в отношении культуры инфузории-туфельки, т.е. является экологически достаточно безвредным (Poluektova, Berestetskiy, 2014, [1]).It is known that the pheosperide A and the coarse extract from the mycelium of the fungus Phoma sp. strain No. 19 possess high phytotoxic properties on wounded leaf carvings of the field butyx and wheatgrass creeping in low concentration. So, the minimum concentration of pheosperide A, which causes necrosis on the leafy discs of the butyx, is 250 μg / ml (1.4 × 10 ^-6 mol / ml or 2.5 μg / disk), on the segments of the wheat grass leaves - 125 μg / ml (0.7 × 10 ^-6 mol / ml). In this case, the compound does not exhibit antimicrobial properties and does not show toxicity with respect to the ciliates-shoe culture, i.e. It is environmentally friendly enough (Poluektova, Berestetskiy, 2014, [1]).

Не обнаружены аналоги известных составов, содержащих феосферид A и его соединений, проявляющих гербицидную активность. Известные составы гербицидов токсичны для окружающей среды (Tsui, Chu, 2003, [2]; Ma et al., 2006, [3]; Zhenjiang et al., 2014, [4]), а составы на основе конидий или мицелия фитопатогенных штаммов обладают неустойчивой эффективностью (Gressel et al., 1997, [5]).No analogues of known compositions containing theospheriide A and its compounds exhibiting herbicidal activity were found. Known herbicide formulations are toxic to the environment (Tsui, Chu, 2003, [2]; Ma et al., 2006, [3]; Zhenjiang et al., 2014, [4]), and formulations based on conidia or mycelium of phytopathogenic strains have unstable efficiency (Gressel et al., 1997, [5]).

Отдельные компоненты состава известны.The individual components of the composition are known.

Известен феосферид A, полученный из штаммов FA 39 эндофитного гриба, имеющий 97% гомологии с видом Phaeosphaeria avenaria (Maloney et al., 2006, [6]), Phoma sp. №19 (Poluektova, Berestetskiy, 2014, [1]), Paraphaeosphaeria neglecta FT462 (Li et al., 2015, [7]). Известен феосферид A, полученный с помощью химического синтеза (Kobayashi et al., 2011, [8]; Chatzimpaloglou et al., 2012, [9]).Famous pheosperide A, obtained from strains of FA 39 endophytic fungus, having 97% homology with the species Phaeosphaeria avenaria (Maloney et al., 2006, [6]), Phoma sp. No. 19 (Poluektova, Berestetskiy, 2014, [1]), Paraphaeosphaeria neglecta FT462 (Li et al., 2015, [7]). Theosperid A is known by chemical synthesis (Kobayashi et al., 2011, [8]; Chatzimpaloglou et al., 2012, [9]).

Известно, что адъюванты позволяют повысить смачиваемость листа, площадь нанесенной капли и проникновение активного вещества в ткань листа (Sharma et al., 2004, [10]). Совместно с химическими гербицидами наиболее часто используют неионные и анионные поверхностно-активные вещества и различные масла (Radivojevic et al., 2011, [11]; Yilmaz, Dane, 2012, [12]). Некоторые растворители, например диметилсульфоксид (ДМСО), также способны повышать проницаемость липофильных молекул через мембраны (Gurtovenko, Anwar, 2007, [13]). На данный момент в литературе нет составов с адъювантами с природными фитотоксинами для повышения их активности на интактных листьях сорных растений.Adjuvants are known to increase the wettability of the sheet, the area of the applied drop and the penetration of the active substance into the sheet tissue (Sharma et al., 2004, [10]). Together with chemical herbicides, nonionic and anionic surfactants and various oils are most often used (Radivojevic et al., 2011, [11]; Yilmaz and Dane, 2012, [12]). Some solvents, for example, dimethyl sulfoxide (DMSO), are also able to increase the permeability of lipophilic molecules through membranes (Gurtovenko and Anwar, 2007, [13]). At the moment, in the literature there are no compounds with adjuvants with natural phytotoxins to increase their activity on intact leaves of weeds.

Известно, что адъювант Hasten представляет собой концентрат этерифицированных растительных масел, на основе рапсового и кукурузного масел, и применяется для усиления проникновения некоторых пестицидов, в том числе гербицидов в ткань листа (Somervaille et al., 2012, [14]).Hasten adjuvant is known to be a concentrate of esterified vegetable oils based on rapeseed and corn oils and is used to enhance the penetration of certain pesticides, including herbicides, into leaf tissue (Somervaille et al., 2012, [14]).

Задача изобретения состоит в получении состава на основе феосферида A с гербицидной активностью.The objective of the invention is to obtain a composition based on the pheosperide A with herbicidal activity.

Задача решена путем создания состава с гербицидной активностью на основе феосферида A - экологически безопасного вещества или экстракта мицелия гриба Phoma sp. штамм №19.The problem was solved by creating a composition with herbicidal activity on the basis of pheosperide A - an environmentally friendly substance or extract of the mycelium of the fungus Phoma sp. strain No. 19.

Сущность изобретения заключается в получении состава, содержащего компоненты: феосферид A или экстракт из культуры его продуцента Phoma sp. №19, в концентрации 0.1 и 0.5% соответственно, органический растворитель - 5%, водный раствор, содержащий 0.1% адъюванта Hasten - 95%.The essence of the invention is to obtain a composition containing the components: pheosperide A or extract from the culture of its producer Phoma sp. No. 19, at a concentration of 0.1 and 0.5%, respectively, an organic solvent - 5%, an aqueous solution containing 0.1% Hasten adjuvant - 95%.

Состав получают путем растворения феосферида A или экстракта из культуры его продуцента, содержащего не менее 60% феосферида A, в органическом растворителе и добавления водного раствора адъюванта в соотношении 1:50:950 или 5:50:950, соответственно.The composition is obtained by dissolving the pheosperide A or extract from the culture of its producer, containing at least 60% pheosperide A, in an organic solvent and adding an aqueous solution of adjuvant in a ratio of 1: 50: 950 or 5: 50: 950, respectively.

Феосферид A получали известным способом и из культуры его продуцента - известного штамма Phoma sp. №19 (Poluektova, Berestetskiy, 2014, [1]). В качестве субстрата для твердофазного культивирования гриба использовали перловую крупу.Theosperide A was obtained in a known manner and from the culture of its producer, the known strain of Phoma sp. No. 19 (Poluektova, Berestetskiy, 2014, [1]). Pearl barley was used as a substrate for solid-phase cultivation of the fungus.

Примеры конкретного выполненияCase Studies

Пример 1. Получение грубого экстракта из мицелия гриба Phoma sp. штамм №19Example 1. Obtaining a coarse extract from the mycelium of the fungus Phoma sp. strain No. 19

В качестве субстрата для твердофазного культивирования гриба использовали перловую крупу. В колбы вносили по 150 г крупы и 100 мл воды. Стерилизацию зернового субстрата проводили автоклавированием в течение 30 минут при 121°C. Субстрат экстрагировали гексаном, отбрасывая органический слой. Затем водную фазу экстрагировали этилацетатом. Объединенный экстракт обезвоживали фильтрованием через безводный сернокислый натрий. Выход экстракта составил 2.84 г/кг субстрата. Полученный экстракт содержал 60% феосферида A.Pearl barley was used as a substrate for solid-phase cultivation of the fungus. 150 g of cereal and 100 ml of water were added to the flasks. The grain substrate was sterilized by autoclaving for 30 minutes at 121 ° C. The substrate was extracted with hexane, discarding the organic layer. Then, the aqueous phase was extracted with ethyl acetate. The combined extract was dehydrated by filtration through anhydrous sodium sulfate. The yield of extract was 2.84 g / kg of substrate. The extract obtained contained 60% of Feosferide A.

Пример 2. Получение феосферида с чистотой более 96%. Сухой остаток, растворенный в ацетонитриле, вносили партиями по 1 г в патрон, предварительно кондиционированный 20 мл ацетонитрила и 30 мл 0.1%-ной муравьиной кислоты. Фракционирование экстракта проводили системой растворителей ацетонитрил - 0.1%-ная муравьиная кислота в соотношении 0:100; 25:75; 50:50; 100:0, объемом 70 мл. Фракция, содержащая феосферид A, была получена в системе ацетонитрил - 0.1%-ная муравьиная кислота в соотношении 50:50. Дальнейшее разделение фракции проводили при помощи полупрепаративной ВЭЖХ на хроматографе BUCHI, на патроне PuriFlash-25 SiHC (Interchim, Франция) с массой сорбента 40 г с использованием предпатрона с предварительно сорбированным на силикагеле экстрактом. Разделение экстракта производили в системе гексан-этилацетат (в градиенте от 0 до 80% этилацетата) со скоростью потока 50 мл/мин, детектирование фитотоксина проводили на длине волны 260. Выход феосферида A составил 130 мг/кг субстрата.Example 2. Obtaining pheosperide with a purity of more than 96%. The dry residue dissolved in acetonitrile was added in batches of 1 g to a cartridge preconditioned with 20 ml of acetonitrile and 30 ml of 0.1% formic acid. Fractionation of the extract was carried out with a solvent system of acetonitrile - 0.1% formic acid in a ratio of 0: 100; 25:75; 50:50; 100: 0, with a volume of 70 ml. The fraction containing the pheosperide A was obtained in the acetonitrile - 0.1% formic acid system in a ratio of 50:50. Further fraction separation was carried out using semi-preparative HPLC on a BUCHI chromatograph on a PuriFlash-25 SiHC cartridge (Interchim, France) with a sorbent mass of 40 g using a prepatron with an extract preliminarily sorbed on silica gel. The extract was separated in a hexane-ethyl acetate system (in a gradient from 0 to 80% ethyl acetate) with a flow rate of 50 ml / min, the detection of phytotoxin was carried out at a wavelength of 260. The yield of pheosperide A was 130 mg / kg of substrate.

Пример 3. Влияние адъювантов на гербицидную активность феосферида AExample 3. The effect of adjuvants on the herbicidal activity of pheosperide A

Навеску 0.2 мг феосферида A, растворяли в 10 мкл 96%-ного этанола или диметилсульфоксида (ДМСО) и добавляли 190 мкл раствора ПАВ в дистиллированной воде. В качестве адъювантов были использованы следующие добавки: Тренд-90 0.01% (DuPont, этоксилат изодецилового спирта), Hasten 0.1% (BASF, концентрат рапсового и кукурузного масел), Biopower 0.1% (Bayer, 3,6-диоксаоктадецил-сульфат натрия), Tween-20 0.1% (Croda Crop, полиоксиэтилен (20) сорбитан монолаурат), Sylwette-Gold 0.01% (Chemtura, трисилоксан акоксилат). Гербицидная активность феосферида A с добавлением адъювантов была оценена при концентрации 1 мг/мл (0.1%). Раствор фитотоксина в 5%-ном этаноле и ДМСО без ПАВ использовали в качестве контроля. Объем тест-образца составлял 10 мкл. Оценку фитотоксической активности проводили методом листовых дисков (Berestetskiy et al., 2007, [15]), используя поврежденные и интактные листовые высечки бодяка полевого и пырея ползучего.A sample of 0.2 mg of pheosperide A was dissolved in 10 μl of 96% ethanol or dimethyl sulfoxide (DMSO) and 190 μl of a solution of surfactant in distilled water was added. The following additives were used as adjuvants: Trend-90 0.01% (DuPont, isodecyl alcohol ethoxylate), Hasten 0.1% (BASF, rapeseed and corn oil concentrate), Biopower 0.1% (Bayer, 3,6-dioxaoctadecyl sodium sulfate), Tween-20 0.1% (Croda Crop, polyoxyethylene (20) sorbitan monolaurate), Sylwette-Gold 0.01% (Chemtura, trisiloxane acoxylate). The herbicidal activity of pheospheride A with the addition of adjuvants was evaluated at a concentration of 1 mg / ml (0.1%). A solution of phytotoxin in 5% ethanol and DMSO without surfactant was used as a control. The volume of the test sample was 10 μl. The phytotoxic activity was assessed by the leaf disc method (Berestetskiy et al., 2007, [15]) using damaged and intact leaf carvings of the Creeper and Creeping wheatgrass.

Было установлено, что добавление некоторых адъювантов к 0.1% раствору феосферида A повышает способность проникновения феосферида A в ткань листа.It was found that the addition of certain adjuvants to a 0.1% solution of pheospheride A increases the ability of pheospheride A to penetrate into leaf tissue.

Так, добавление Biopower 0.1% и Hasten 0.1% к раствору фитотоксина повышало его эффективность в отношении интактных и пораненных листовых дисков бодяка полевого (фиг. 1, 2).Thus, the addition of Biopower 0.1% and Hasten 0.1% to the phytotoxin solution increased its effectiveness in relation to intact and wounded leaf disks of the field calf (Fig. 1, 2).

Также было показано, что при растворении феосферида A в ДМСО гербицидная активность на 20% выше, чем при использовании в качестве растворителя этанола.It was also shown that, when dissolving theospheride A in DMSO, the herbicidal activity is 20% higher than when ethanol was used as a solvent.

Таким образом, было показано, что добавление адъювантов Hasten 0.1% и Biopower 0.1% и использование в качестве растворителя ДМСО повышает гербицидные свойства 0.1%-ного раствора феосферида A.Thus, it was shown that the addition of Hasten 0.1% and Biopower 0.1% adjuvants and the use of DMSO as a solvent increases the herbicidal properties of a 0.1% solution of pheospheride A.

Пример 4. Оценка гербицидной активности состава на основе феосферида A с добавлением 2-х адъювантовExample 4. Evaluation of the herbicidal activity of a composition based on the pheosperide A with the addition of 2 adjuvants

Для опыта были использованы растения бодяка полевого в фазе розетки. По итогам предварительного исследования были выбраны адъюванты Biopower или Hasten в концентрации 0.1%. Дополнительно исследовали фитотоксичность экстракта без добавления адъювантов. 30 мг экстракта на основе феосферида A из мицелия гриба Phoma sp. штамм №19 растворяли в 300 мкл диметилсульфоксида и добавляли 5700 мкл раствора Hasten (0.1%) и Biopower (0.1%). Для оценки гербицидной активности грубого экстракта мицелия Phoma sp. №19, содержащего 60% феосферида A, растения бодяка полевого в фазе розетки опрыскивали суспензией, содержащей экстракт, растворенный в ДМСО и доведенный водой до концентрации 5 мг/мл (0.5%-й раствор) с добавлением Hasten (0.1%) или Biopower (0.1%). Для сравнения растения бодяка полевого обрабатывали раствором экстракта без добавления адъювантов.For the experiment, we used plants of the Cirsium field in the rosette phase. Based on a preliminary study, Biopower or Hasten adjuvants were selected at a concentration of 0.1%. Additionally investigated the phytotoxicity of the extract without the addition of adjuvants. 30 mg of Feospheride A-based extract from the mycelium of the fungus Phoma sp. strain No. 19 was dissolved in 300 μl of dimethyl sulfoxide and 5700 μl of a solution of Hasten (0.1%) and Biopower (0.1%) were added. To assess the herbicidal activity of the coarse extract of mycelium Phoma sp. No. 19, containing 60% of pheospheride A, the plants of the Cirsium arvense in the rosette phase were sprayed with a suspension containing the extract dissolved in DMSO and adjusted to 5 mg / ml (0.5% solution) with Hasten (0.1%) or Biopower ( 0.1%). For comparison, the plants of the artifact field were treated with an extract solution without the addition of adjuvants.

Обработка растений бодяка полевого раствором, содержащим экстракт мицелия гриба с добавлением Hasten (0.1%), вызывала некрозы листьев на уровне 70-80%. При этом масса наземной части растений бодяка достоверно уменьшилась до 30% от массы растений в контрольном варианте (фиг. 3, 4).The treatment of thistle plants with a field solution containing the mycelium extract of the fungus with the addition of Hasten (0.1%) caused leaf necrosis at the level of 70-80%. In this case, the mass of the terrestrial part of the plant of the artisan significantly decreased to 30% of the mass of the plants in the control variant (Fig. 3, 4).

Площадь некрозов листьев бодяка после опрыскивания растений раствором экстракта из мицелия Phoma sp. №19 с добавлением адъюванта Biopower (0.1%) составила около 20%, при этом достоверного снижения массы наземной части растений отмечено не было (фиг. 3, 4).The area of necrosis of the leaves of the calf after spraying the plants with a solution of the extract from the mycelium Phoma sp. No. 19 with the addition of Biopower adjuvant (0.1%) was about 20%, while there was no significant decrease in the mass of the terrestrial part of the plants (Figs. 3, 4).

Таким образом, состав с адъювантом Hasten (0.1%) и раствором экстракта мицелия Phoma sp. №19 способствует повышению его гербицидной активности на 50% по сравнению с раствором экстракта без адъювантов. Состав с раствором экстракта и добавлением Hasten (0.1%) приводило к 80%-ному повреждению листьев бодяка полевого, которое сопровождалось значительной потерей массы наземной части и полной гибелью растений спустя 48 часов. Следовательно, состав с адъювантом Hasten (0.1%) может быть рекомендован для применения совместно с экстрактом гриба Phoma sp. штамм №19.Thus, a composition with Hasten adjuvant (0.1%) and a solution of Phoma sp. No. 19 helps to increase its herbicidal activity by 50% compared with the extract solution without adjuvants. The composition with a solution of the extract and the addition of Hasten (0.1%) led to 80% damage to the leaves of the arthropod field, which was accompanied by a significant loss of mass of the ground part and complete death of the plants after 48 hours. Therefore, a Hasten adjuvant formulation (0.1%) may be recommended for use with Phoma sp. strain No. 19.

Как видно из примеров, полученный состав обладает гербицидной активностью. Состав может быть применен в биотехнологии для получения экологически безопасных гербицидов на основе феосферида A.As can be seen from the examples, the resulting composition has herbicidal activity. The composition can be used in biotechnology to obtain environmentally friendly herbicides based on pheospheride A.

Краткое описание рисунковBrief Description of Drawings

На Фиг. 1 приведен график, показывающий эффект добавления адъювантов на гербицидную активность феосферида A в отношении бодяка полевого при использовании в качестве растворителя 5%-ного этанола.In FIG. Figure 1 is a graph showing the effect of adding adjuvants on the herbicidal activity of pheosperide A in the field of Cirsium arvensis when using 5% ethanol as a solvent.

На Фиг.2 приведен график, показывающий эффект добавления адъювантов на гербицидную активность феосферида A в отношении бодяка полевого при использовании в качестве растворителя 5%-ного диметилсульфоксида.Figure 2 is a graph showing the effect of adding adjuvants on the herbicidal activity of the pheosperide A in relation to the field of artifact when using 5% dimethyl sulfoxide as a solvent.

На Фиг. 3 приведен график, показывающий оценку гербицидной активности экстракта гриба Phoma sp. №19.In FIG. Figure 3 is a graph showing the assessment of the herbicidal activity of Phoma sp. No. 19.

На Фиг. 4 приведен график, показывающий поражение листьев бодяка полевого после обработки растворами экстракта Phoma sp. №19.In FIG. 4 is a graph showing the defeat of the leaves of the Cirsium field after treatment with solutions of the extract of Phoma sp. No. 19.

Список использованной литературыList of references

1. Poluektova E.V., Berestetskiy А.О. Isolation and characterization of phytotoxins produced by phoma sp. 19. book of proceedings 7th world congress on allelopathy. Complex interactions in a changing climate. Congress held in Vigo, Spain. July, 28 - August, 1, 2014. P. 114.1. Poluektova E.V., Berestetskiy A.O. Isolation and characterization of phytotoxins produced by phoma sp. 19. book of proceedings 7th world congress on allelopathy. Complex interactions in a changing climate. Congress held in Vigo, Spain. July, 28 - August, 1, 2014. P. 114.

2. Tsui M.T.K., Chu L.M. Aquatic toxicity of glyphosate-based formulations: comparison between different organisms and the effects of environmental factors. Chemosphere. 2003. V. 52. P. 1189-1197.2. Tsui M.T.K., Chu L.M. Aquatic toxicity of glyphosate-based formulations: comparison between different organisms and the effects of environmental factors. Chemosphere. 2003. V. 52. P. 1189-1197.

3. Ma J., Wang S., Wang P., Ma L., Chen X., Xu R. Toxicity assessment of 40 herbicides to the green alga Raphidocelis subcapitata. Ecotoxicology and Environmental Safety. 2006. V. 63. P. 456-462.3. Ma J., Wang S., Wang P., Ma L., Chen X., Xu R. Toxicity assessment of 40 herbicides to the green alga Raphidocelis subcapitata. Ecotoxicology and Environmental Safety. 2006. V. 63. P. 456-462.

4. Zhenjiang W., Manhong L., Lixin G., Yukun M. Acute Toxicity of Clethodim, Cypermethrin and 2,4-D-butylate to the Larva of Chironomus sinicus. Agricultural Science and Technology. 2014.V. 15.9. P. 1583-1585.4. Zhenjiang W., Manhong L., Lixin G., Yukun M. Acute Toxicity of Clethodim, Cypermethrin and 2,4-D-butylate to the Larva of Chironomus sinicus. Agricultural Science and Technology. 2014.V. 15.9. P. 1583-1585.

5. Gressel J. Herbicides as Synergists for Mycoherbicides, and Vice Versa. J. Gressel. Weed Sci. 2010. V. 58.3. P. 324-328.5. Gressel J. Herbicides as Synergists for Mycoherbicides, and Vice Versa. J. Gressel. Weed sci. 2010. V. 58.3. P. 324-328.

6. Maloney K.N., Hao W., Xu J., Gibbons J., Hucul J., Roll D., Brady S.F., Schroeder F.C., Clardy J. Phaeosphaeride A, an inhibitor of STAT3-dependent signaling isolated from an endophytic fungus. Org Lett. 2006. P. 4067-4070.6. Maloney K.N., Hao W., Xu J., Gibbons J., Hucul J., Roll D., Brady S.F., Schroeder F.C., Clardy J. Phaeosphaeride A, an inhibitor of STAT3-dependent signaling isolated from an endophytic fungus. Org Lett. 2006. P. 4067-4070.

7. Li C.S., Ding Y., Yang B.J., Miklossy G., Yin H.Q., Walker L.A., Turkson J., Cao S. A new metabolite with a unique 4-pyranone-γ-lactam-1,4-thiazine moiety from a hawaiian-plant associated fungus. Org Lett. 2015.7. Li CS, Ding Y., Yang BJ, Miklossy G., Yin HQ, Walker LA, Turkson J., Cao S. A new metabolite with a unique 4-pyranone-γ-lactam-1,4-thiazine moiety from a hawaiian-plant associated fungus. Org Lett. 2015.

8. Kobayashi K., Okamoto I., Morita N., Kiyotani T., Tamura O. Synthesis of the proposed structure of phaeosphaeride A. Org. Biomol. Chem. 2011. V. 9. P. 5825-5832.8. Kobayashi K., Okamoto I., Morita N., Kiyotani T., Tamura O. Synthesis of the proposed structure of phaeosphaeride A. Org. Biomol. Chem. 2011. V. 9. P. 5825-5832.

9. Chatzimpaloglou A., Yavropoulou M.P., Rooij К.E., Biedermann R., Mueller U., Kaskel S., Sarli V. Total synthesis and biological activity of the proposed structure of phaeosphaeride a. J. Org. Chem. 2012. V. 77. 9659-9667.9. Chatzimpaloglou A., Yavropoulou M.P., Rooij K.E., Biedermann R., Mueller U., Kaskel S., Sarli V. Total synthesis and biological activity of the proposed structure of phaeosphaeride a. J. Org. Chem. 2012. V. 77. 9659-9667.

10. Sharma S.D., Chandrasena N., Singh M. Glyphosate-Adjuvant Interactions: A Review Of Recent Experiences. Proc. 20th Asia-Pacific Weed Science Soc. Conf., Ho-Chi-Minh City, Vietnam, P. 434-442.10. Sharma S. D., Chandrasena N., Singh M. Glyphosate-Adjuvant Interactions: A Review Of Recent Experiences. Proc. 20th Asia-Pacific Weed Science Soc. Conf., Ho-Chi-Minh City, Vietnam, P. 434-442.

11.

,

Impact of Different Adjuvants and Modes of Application on Efficacy of Rimsulfuron in Maize. Pestic. Phytomed. (Belgrade). 2011. V. 26 (3), P. 255-263.eleven.

,

Impact of Different Adjuvants and Modes of Application on Efficacy of Rimsulfuron in Maize. Pestic. Phytomed. (Belgrade). 2011. V. 26 (3), P. 255-263.

12. Yilmaz G., Dane F. Phytotoxicity Induced by Herbicide and Surfactant on stomata and epicuticular wax of Wheat. Romanian Biotechnological Letters. 2012. V. 17 (6) P. 7757-7765.12. Yilmaz G., Dane F. Phytotoxicity Induced by Herbicide and Surfactant on stomata and epicuticular wax of Wheat. Romanian Biotechnological Letters. 2012. V. 17 (6) P. 7757-7765.

13. Gurtovenko A., Anwar J. Modulating the structure and properties of cell membranes: the molecular mechanism of action of dimethyl sulfoxide. J Phys Chem B. 2007. V. 111 (35). P. 10453-10460.13. Gurtovenko A., Anwar J. Modulating the structure and properties of cell membranes: the molecular mechanism of action of dimethyl sulfoxide. J Phys Chem B. 2007. V. 111 (35). P. 10453-10460.

14. Somervaille A., Betts G., Gordon В., Green V., Burgis M., Henderson R. Adjuvants - Oils, surfactants and other additives for farm chemicals - revised 2012 edition. 48 p.14. Somervaille A., Betts G., Gordon B., Green V., Burgis M., Henderson R. Adjuvants - Oils, surfactants and other additives for farm chemicals - revised 2012 edition. 48 p.

15. Berestetskiy A.O., Fyodorova A.F., Kustova S.A laboratory technique for the evalution of pathogenicity of Septoria cirsii for Cirsium arvense, XV Congress of European mycologists, 2007, p. 242.15. Berestetskiy A.O., Fyodorova A.F., Kustova S.A. laboratory technique for the evalution of pathogenicity of Septoria cirsii for Cirsium arvense, XV Congress of European mycologists, 2007, p. 242.

Claims

1. A method of obtaining a composition with herbicidal activity by combining 5 percent of dimethyl sulfoxide containing pheosperide A with a concentration of 0.1%, or an extract from the culture of its producer containing at least 60% pheosperide A, with a concentration of 0.5% and 95 percent aqueous solution containing 0.1% adjuvant Hasten.

2. The method according to p. 1 is characterized in that a strain of the fungus Phoma sp. No. 19.