RU2607751C2 - Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав - Google Patents
Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав Download PDFInfo
- Publication number
- RU2607751C2 RU2607751C2 RU2014145406A RU2014145406A RU2607751C2 RU 2607751 C2 RU2607751 C2 RU 2607751C2 RU 2014145406 A RU2014145406 A RU 2014145406A RU 2014145406 A RU2014145406 A RU 2014145406A RU 2607751 C2 RU2607751 C2 RU 2607751C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- wool
- sampling
- sample
- animal
- water
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/02—Devices for withdrawing samples
- G01N1/04—Devices for withdrawing samples in the solid state, e.g. by cutting
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/34—Purifying; Cleaning
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/4833—Physical analysis of biological material of solid biological material, e.g. tissue samples, cell cultures
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано при отборе проб биоматериала для получения достоверных данных по содержанию макро- и микроэлементов шерсти крупного рогатого скота. Способ отбора и подготовки проб шерсти включает настриг требуемого образца по массе не менее 2 г с верхней части холки животного с участка кожи размером 5×5 см. Полученную пробу шерсти замачивают в электрохимически дезинфицирующей активированной католитной воде с температурой от +40 до +60°С в течение 2-3 часов. Далее промывают проточной водой с большим напором до исчезновения видимых загрязнений. Очищают в ультразвуковых ваннах с рабочей частотой колебания 35 кГц, используя последовательно моющие среды: 40%-ный этиловый спирт, бидистиллированную воду по 60 мин в каждой среде. По окончании пробу высушивают в сушильном шкафу при +40°С. Обеспечивается удобство взятия образца шерсти с менее загрязненного участка кожи. 1 з.п. ф-лы, 3 табл.
Description
Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано при отборе и подготовке проб биосубстратов для получения достоверных данных об особенностях метаболизма химических элементов в организме животных.
Покров служит одним из объективных показателей приспособленности животного к условиям среды. Он изменяется в пределах генотипа не только в зависимости от природно-климатической зоны, но и от уровня кормления и содержания. В этой связи неинвазивные методики взятия и оценки химического состава шерсти позволяют разрабатывать индивидуальные программы профилактики и коррекции элементозов.
Шерсть как биосубстрат не требует специального оборудования для хранения и транспортировки, может хранится практически неограниченное время, не теряя своей информационной ценности. При этом следует учесть, что при исследовании шерсти на макро- и микроэлементный состав их концентрация выше, чем в физиологических жидкостях, традиционно используемых для клинических и биохимических анализов, что позволяет существенно расширить набор химических элементов, доступных для аналитического определения.
Между тем при использовании шерсти следует учитывать, что этот субстрат животного как правило сильно загрязнен, это искажает результат исследования и не дает возможности объективной оценки минерального обмена в организме.
В ветеринарии до настоящего времени не существует унифицированной комплексной методики отбора и подготовки проб шерсти животных для исследований на элементный состав. Не определены оптимальные места и размеры участка на теле животного для отбора образцов шерсти.
Известен способ отбора племенных каракульских овец серой окраски, характеризующейся тем, что у ягнят при рождении и 30-дневном возрасте берут образцы шерсти с 1 см2 кожи на крестце и холке с последующим определением степени пигментированности волосков методом ЭПР спектрометрии [1]. Однако данный способ не показывает накопления макро- и микроэлементов в шерсти и возможность взятия образцов с холки для определения элементозов скота. Исследования проведены на ягнятах 30-дневного возраста, сильно отличающихся шерстью по структуре (ость, пух, переходный) и длине с шерстью крупного рогатого скота, недостаточной площадью для взятия образцов, так как у крупного рогатого скота масса шерсти, выстриженной с 1 см2 поверхности кожи на холке, составляет - 0,08 г, что недостаточно для определения макро- и микроэлементов стандартными методами атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии.
Известен способ диагностики хронических микроэлементозов сельскохозяйственных копытных животных, характеризующийся отбором образцов шерсти путем настрига ее с кисти хвоста [2], основными недостатками которого являются:
- невозможность взятия образца шерсти из-за купирования хвоста или утраты его вследствие механической травмы;
- сильного загрязнения шерсти кисти хвоста, что не позволяет отобрать пригодный для анализа образец;
- неполный состав химических элементов (7 элементов), для которых выполнены исследования.
Наиболее близким техническим решением к заявленному при подготовке пробы шерсти к анализу является способ отмывки в моющих средах [3].
Цель нашего изобретения - разработка способа отбора и пробоподготовки шерсти крупного рогатого скота к исследованию на элементный состав.
Способ осуществляется следующим образом:
1. Отбор образца шерсти по массе не менее 2 г, согласно стандартным требованиям при методах исследования на элементный состав, обеспечивающим достижение необходимой точности [4, 6], осуществляется путем настрига его с верхней части холки животного.
2. При пробоподготовке образец волос погружается в лабораторный стакан объемом 200 мл с электрохимически активированной дезинфицирующей католитной водой с температурой от +40 до +60С° на 2-3 часа.
Техническая подготовка ЭХА воды предусматривает применение активатора типа PTV-A (ИВА-1), производимого в России (сертификат соответствия №РОССLТ.АЯ 46.А14995). Водопроводная вода с исходными характеристиками поступает в активатор и на выходе после установленного времени католитная (щелочная) принимает требуемое значение (3,4).
3. Затем воду сливают, а лабораторный стакан с образцом помещают под проточную воду с большим напором и проводят отмывание волос до исчезновения видимых загрязнений, разбивая их стеклянной палочкой.
4. По истечении указанного времени воду сливают, пробу заливают 40% этиловым спиртом и вновь помещают на 60 минут в ультразвуковую ванну с рабочей частотой 35 кГц.
5. Спирт сливают, пробу заливают бидистилированной водой и снова подвергают очистке в ультразвуковой ванне в течение 60 минут.
6. Пробу высушивают в сушильном шкафу при +40С° и исследуют на макро- и микроэлементный состав.
В связи с тем, что в настоящее время не существует унифицированной методики взятия образцов шерсти для изучения элементного статуса по основным химическим элементам, нами проведены исследования шерсти из различных частей тела животного:
- затылочная часть головы;
- корень хвоста с верхней стороны;
- середина последнего ребра;
- передняя часть грудной области;
- верхняя часть холки (впервые в практике взятия проб);
- кисть хвоста.
Данные места взятия проб оценивались по диапазону варьирования элементов, отклонению от средней по всем элементам, удобству и возможности отбора, загрязненности.
При оценке удобства отбора образцов наиболее доступными являются места у корня хвоста с верхней стороны и верхней части холки, так как при фиксации животного в станках данные места всегда доступны.
Для оценки загрязненности шерсти произведен отбор образцов с участка 5×5 см у 120 голов крупного рогатого скота герефордекой и казахской белоголовой пород. После этого нами определялась степень загрязнения пробы путем вычисления разницы массы шерсти до и после пробоподготовки (табл. 1).
Данные табл. 1 показывают, что наиболее «чистой» является шерсть с верхней части холки и передней части грудной области, самой загрязненной частью является кисть хвоста.
Для определения содержания макро- и микроэлементов в биосубстрате мытую шерсть от физиологически здоровых животных в количестве 120 образцов (различные половозрастные группы и время года) исследовали в лаборатории АНО «Центра биотической медицины» г. Москва (регистрационный номер в государственном реестре - Росс.RU 0001. 513118 от 29 мая 2003; Registration Certificate of ISO 9001: 2000, Number 4017-5.04.06) по 25 химическим элементам. Точность определяемых параметров достигалась путем использования методов атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии (АЭС-ИСП и МС-ИСП) на оборудовании Elan 9000 (Perkin Elmer, США) и Optima 2000 V (Perkin Elmer, США), обеспечивающих достижение точности 109-1012 по 25 химическим элементам (Са, Cu, Fe, Li, Mg, Mn, Ni, As, Cr, K, Na, P, Zn, I, V, Co, Se, Al, B, Cd, Pb, Hg, Sn, Si, Sr) [5].
Масс-спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой (ИСП-МС) является современным методом определения малых (мкг/кг) и сверхмалых (нг/кг и менее) концентраций элементов, а также их изотопного состава в различных объектах. Метод позволяет проводить определение практически всех элементов периодической системы в одной пробе за время около минуты. Он основан на использовании индуктивно-связанной плазмы в качестве источника ионов и масс-спектрометра для их разделения и детектирования [4].
Результаты анализа шерсти на содержание макро- и микроэлементов представлены в табл. 2.
При исследовании учитывалось отклонение содержания изучаемых элементов отдельно взятой пробы шерсти от среднего показателя всех зон его отбора, для выявления места отбора, которое наиболее соответствует общему элементному статусу всего организма животного.
Анализ полученных в исследовании данных показал, что по 22 (K, Са, Mg, Na, Р, Zn, Fe, Cu, Mn, I, Se, Cr, Co, Si, B, Li, V, Al, Sr, Pb, Sn, Hg) из 25 исследованных макро- и микроэлементов, влияющих на биологические процессы обмена веществ, наиболее близкими к средней величине, при недостоверной разнице, характеризовались пробы шерсти с верхней части холки, следовательно, ее можно использовать в качестве маркера для взятия и определения элементного статуса животного (табл. 2, 3).
Таким образом, на основании изучения элементного статуса средних показателей проб шерсти, по удобству и возможности отбора, загрязненности шерсти наиболее приемлемым для анализа является предлагаемое место отбора образца с верхней части холки.
При отборе образцов шерсти в производственных условиях существует проблема с выбором оптимальной площади участка настрига шерсти, с которого гарантированно дает необходимую для исследований навеску образца. Проблема обусловлена еще и тем, что чрезмерно большой по площади участок, выстриженный на холке животного, негативным образом отражается на защитной и терморегуляционной функции, которую выполняет шерстяной покров животного.
С целью определения площади участка для отбора образца нами проведено исследование на крупном рогатом скоте (n=120).
Источники информации
1. Патент на изобретение KZ №23604 Способ отбора племенных каракульских овец серой окраски / Бейбеков Е., Омбаев A.M., Ескара М.А., Алибаев П., Саденов А., Алибаев П., Саденов А., Абуов Г., Бойбеков М.Е.: Опубликовано 15.10.2010 г.
2. Патент на изобретение РФ №2477483 Способ диагностики хронических микроэлементозов сельскохозяйственных копытных животных / С.Ф. Тютиков, В.В. Ермаков: опубликовано 10.03.2013.
3. Патент на изобретение РФ №2451926. Способ подготовки проб волос крупного рогатого скота к исследованию на макро- и микроэлементный состав / Ю.К. Коваленок: опубликовано 27.05.2012 - прототип.
4. МУК 4.1.1483-03 Определение содержания химических элементов в диагностируемых биосубстратах, препаратах и биологически активных добавках методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной аргоновой плазмой.
5. Http://www.fgu-radiovetlab.ru/preimuschestva-metoda-atomno-emissionnoy-spektrometrii-s-induktivno-svyazannoy-plazmoy.html
6. Мирошников С.А. и др. Закономерность формирования элементного состава биосубстратов человека как основа технологии и коррекции элементозов. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН, №4, 2014. - С. 1-11.
Claims (2)
1. Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав, включающий настриг требуемого образца по массе не менее 2 г с верхней части холки животного с участка кожи размером 5×5 см, подготовку проб шерсти, включающую ее замачивание в электрохимически дезинфицирующей активированной католитной воде с температурой от +40 до +60°С в течение 2-3 часов с последующим промыванием проточной водой с большим напором до исчезновения видимых загрязнений и последующую очистку в ультразвуковых ваннах с рабочей частотой колебания 35 кГц, используя последовательно моющие среды: 40%-ный этиловый спирт, бидистиллированную воду по 60 мин в каждой среде, по окончании пробу высушивают в сушильном шкафу при +40°С.
2. Cпособ по п. 1, отличающийся тем, что точность определяемых параметров образца шерсти по элементному статусу животного достигается путем использования методов атомно-эмиссионной и масс-спектрометрии, обеспечивающих достижение точности 109-1012 по 25 химическим элементам.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2014145406A RU2607751C2 (ru) | 2014-11-11 | 2014-11-11 | Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2014145406A RU2607751C2 (ru) | 2014-11-11 | 2014-11-11 | Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2014145406A RU2014145406A (ru) | 2016-05-27 |
RU2607751C2 true RU2607751C2 (ru) | 2017-01-10 |
Family
ID=56095820
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2014145406A RU2607751C2 (ru) | 2014-11-11 | 2014-11-11 | Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2607751C2 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2701350C1 (ru) * | 2019-06-25 | 2019-09-25 | Федеральное Государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий российской академии наук" | Способ прогнозирования молочной продуктивности коров по элементному составу шерсти |
RU2750749C1 (ru) * | 2020-08-07 | 2021-07-02 | Марина Вячеславовна Степанова | Способ отбора и пробоподготовки проб шерсти грызунов для определения микроэлементного состава |
RU2795768C1 (ru) * | 2021-11-27 | 2023-05-11 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт геологии и геохимии им. академика А.Н. Заварицкого Уральского отделения Российской академии наук | Способ очистки археологического шерстяного и растительного текстиля, а также современной шерсти животных для изучения изотопного состава стронция методом масс-спектрометрии |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2675584C1 (ru) * | 2017-11-28 | 2018-12-19 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт коневодства" | Способ отбора проб волос лошадей для исследования на элементный состав |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6008897A (en) * | 1999-01-19 | 1999-12-28 | National Research Council Of Canada | Method and apparatus for materials analysis by enhanced laser induced plasma spectroscopy |
RU2451926C1 (ru) * | 2010-12-23 | 2012-05-27 | Юрий Казимирович Ковалёнок | Способ подготовки проб волос крупного рогатого скота к исследованию на макро- и микроэлементный состав |
RU2478956C1 (ru) * | 2011-10-24 | 2013-04-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургский государственный университет" | Способ оценки элементного статуса птицы по перу |
RU2011139264A (ru) * | 2011-09-26 | 2013-04-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Ивановская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Способ диагностики нарушений элементного статуса по соотношению содержания элементов в волосах человека |
RU2521336C1 (ru) * | 2013-04-16 | 2014-06-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургский государственный университет" | Способ выявления групп риска лиц, склонных к агрессивным видам поведения |
-
2014
- 2014-11-11 RU RU2014145406A patent/RU2607751C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6008897A (en) * | 1999-01-19 | 1999-12-28 | National Research Council Of Canada | Method and apparatus for materials analysis by enhanced laser induced plasma spectroscopy |
RU2451926C1 (ru) * | 2010-12-23 | 2012-05-27 | Юрий Казимирович Ковалёнок | Способ подготовки проб волос крупного рогатого скота к исследованию на макро- и микроэлементный состав |
RU2011139264A (ru) * | 2011-09-26 | 2013-04-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Ивановская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Способ диагностики нарушений элементного статуса по соотношению содержания элементов в волосах человека |
RU2478956C1 (ru) * | 2011-10-24 | 2013-04-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургский государственный университет" | Способ оценки элементного статуса птицы по перу |
RU2521336C1 (ru) * | 2013-04-16 | 2014-06-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургский государственный университет" | Способ выявления групп риска лиц, склонных к агрессивным видам поведения |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2701350C1 (ru) * | 2019-06-25 | 2019-09-25 | Федеральное Государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий российской академии наук" | Способ прогнозирования молочной продуктивности коров по элементному составу шерсти |
RU2750749C1 (ru) * | 2020-08-07 | 2021-07-02 | Марина Вячеславовна Степанова | Способ отбора и пробоподготовки проб шерсти грызунов для определения микроэлементного состава |
RU2795768C1 (ru) * | 2021-11-27 | 2023-05-11 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт геологии и геохимии им. академика А.Н. Заварицкого Уральского отделения Российской академии наук | Способ очистки археологического шерстяного и растительного текстиля, а также современной шерсти животных для изучения изотопного состава стронция методом масс-спектрометрии |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2014145406A (ru) | 2016-05-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2607751C2 (ru) | Способ отбора и подготовки проб шерсти крупного рогатого скота для исследования на элементный состав | |
JP5869116B2 (ja) | 頭皮のフケの状態又は皮膚の健康状態を評価する方法 | |
CN108535205B (zh) | 体外生物瓣抗钙化处理方法、钙化评价方法 | |
Gogaev | Postembryonic development of the skin of young ewes of the romanov and tushin breeds in the conditions of the foothill zone of the north caucasus | |
Song et al. | Toxic responses of zebrafish (Danio rerio) to thallium and deltamethrin characterized in the electrocardiogram | |
Chloupek et al. | Changes in selected biochemical indices resulting from various pre-sampling handling techniques in broilers | |
Naftalin et al. | The character of the tectorial membrane | |
Akpa et al. | Relationships between semen cation concentrations, semen characteristics, testicular measurements and body conformation traits in Red Sokoto goat | |
RU2611755C1 (ru) | Способ отбора образцов шерсти для исследования элементного статуса крупного рогатого скота в различные временные периоды | |
Choe et al. | The relation of blood glucose level to muscle fiber characteristics and pork quality traits | |
RU2477483C1 (ru) | Способ диагностики хронических микроэлементозов сельскохозяйственных копытных животных | |
RU2675584C1 (ru) | Способ отбора проб волос лошадей для исследования на элементный состав | |
RU2478951C1 (ru) | Способ диагностики субклинического мастита у коров | |
Tarhan et al. | Evaluation of tear and serum trace elements (copper, selenium, and cobalt) in sheep | |
Kovalionok | Improvement of the procedure of cattle hair sample preparation for chemical analysis | |
Tartaglione et al. | Altered responsiveness to pups in virgin female mice of the BTBR strain: Insights from pattern of c-Fos expression in brain regions involved in maternal behavior | |
RU2582596C2 (ru) | Способ диагностики функционального состояния и патологии молочной железы | |
Elezaj et al. | Metal Accumulation, Blood δ-Aminolevulinic Acid Dehydratase Activity and Micronucleated Erythrocytes of Feral pigeons (Columba Livia) Living Near Former Lead-Zinc Smelter “Trepça”–Kosovo | |
Al‐Yousuf et al. | Combining cytotoxicity assessment and Xenopus laevis phenotypic abnormality assay as a predictor of nanomaterial safety | |
RU2251263C1 (ru) | Способ оценки энергии роста телят по физиологическому показателю | |
RU2803003C1 (ru) | Способ оценки степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота | |
Yakubchak et al. | Use of iodine preparation in rabbit breeding | |
Solov'ev et al. | A method of preparation of osteological specimens of mammals and birds | |
Farouk et al. | Genetic analysis of blood protein and COMET assay on the ovary in relation to reproductive performance in she-camel (C. dromedaries) | |
RU2775788C1 (ru) | Способ прижизненной оценки степени накопления контаминантов в организме животных, например овец |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170402 |