RU2601813C1 - Способ мацерации тканей листа липы мелколистной tilia cordata mill - Google Patents

Способ мацерации тканей листа липы мелколистной tilia cordata mill Download PDF

Info

Publication number
RU2601813C1
RU2601813C1 RU2015115223/13A RU2015115223A RU2601813C1 RU 2601813 C1 RU2601813 C1 RU 2601813C1 RU 2015115223/13 A RU2015115223/13 A RU 2015115223/13A RU 2015115223 A RU2015115223 A RU 2015115223A RU 2601813 C1 RU2601813 C1 RU 2601813C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
maceration
hydrochloric acid
tillet
collected
leaf tissues
Prior art date
Application number
RU2015115223/13A
Other languages
English (en)
Inventor
Ильзира Ильсуровна Гибадулина
Original Assignee
Ильзира Ильсуровна Гибадулина
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ильзира Ильсуровна Гибадулина filed Critical Ильзира Ильсуровна Гибадулина
Priority to RU2015115223/13A priority Critical patent/RU2601813C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2601813C1 publication Critical patent/RU2601813C1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G7/00—Botany in general
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G2/00—Vegetative propagation

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Forests & Forestry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области сельского хозяйства и ботаники. В способе получают гомогенную суспензию растительных тканей листа липы мелколистной Tilia cordata Mill., содержащей столбчатые и губчатые клетки мезофилла. Ткани листа обрабатывают раствором соляной кислоты при высокой температуре и ограниченном времени. При этом для листьев, собранных в июне, концентрация раствора соляной кислоты составляет 0,8-0,9 N, для собранных в июле - 1,0-1,1 N, для собранных в августе - 1,1-1,2 N, при температуре обработки 90°С и времени 25-30 мин. Способ позволяет получить гомогенную суспензию, содержащую столбчатые и губчатые клетки мезофилла липы мелколистной. 1 пр.

Description

Изобретение относится к ботанике, в частности к анатомическому строению ассимиляционного аппарата растений. Описанный способ мацерации тканей может быть использован при изучении особенностей строения листовых пластинок. Методика позволяет провести мацерацию ассимиляционной ткани для изучения анатомических особенностей клеток палисадной и губчатой паренхимы, хлоропластов липы мелколистной.
Известен способ мацерации горячей соляной кислотой (см. Мокроносов А.Т. Мезоструктура и функциональная активность фотосинтетического аппарата // Мезоструктура и функциональная активность фотосинтетического аппарата. - Свердловск, 1978. - С. 7).
Способ заключается в помещении фиксированных этанолом дисков растительных тканей с известной площадью в горячий раствор соляной кислоты (концентрацией от 0,5 до 3 М раствора соляной кислоты в зависимости от объекта). После образования гомогенной суспензии клеток, ее доводят до определенного объема (обычно 1 см2 листьев в 1,5-2 см3).
Недостатком способа является широкий диапазон предлагаемых условий проведения мацерации тканей растений, то есть для проведения мацерации растительных тканей определенного объекта необходима предварительная подготовка, заключающаяся в подборе условий проведения мацерации.
Наиболее близким к заявляемому способу по максимальному количеству сходных признаков является способ мацерации горячей соляной кислотой (см. Борзенкова Р.А., Храмцова Е.В. Определение мезоструктурных характеристик фотосинтетического аппарата растений. - Екатеринбург: Изд-во Уральского университета, 2006. - С. 16), который выбран в качестве прототипа. Способ заключается в помещении дисков с известной площадью в мерную пробирку со шлифом (ориентировочно 2 см2 листьев в 1 мл соляной кислоты), куда приливают 0,5-1,0 N соляной кислоты. Затем пробирку помещают на водяную баню с температурой 80-100°С на 10-30 минут (в зависимости от объекта), при этом диски тщательно растирают стеклянной палочкой до получения гомогенной суспензии. После охлаждения пробирок объем жидкости доводят водой до 5-10 мл (в зависимости от количества клеток в суспензии), закрывают стеклянными пробками, взбалтывают для получения однородной суспензии клеток.
Недостатком прототипа является то, что он имеет ряд трудоемких и длительных по времени подготовительных операций: подбор концентрации соляной кислоты, ее температуры, времени протекания мацерации для каждого объекта.
Технической задачей изобретения является создание способа мацерации тканей ассимиляционного аппарата липы мелколистной, обладающего определенными условиями мацерации тканей.
Технический результат достигается тем, что в способе, согласно изобретению, мацерацию проводят растворами соляной кислоты разной концентрации при высокой температуре в течение ограниченного времени. Подобрана определенная концентрация растворов HCl (0,8-1,2 N растворы), температура соляной кислоты (90°С) и время проведения (25-30 минут) мацерации тканей листьев липы мелколистной Tilia cordata Mill, в зависимости от времени сбора образцов.
Заявленные условия проведения мацерации позволяют получить гомогенную суспензию, содержащую столбчатые и губчатые клетки мезофилла липы мелколистной.
Предлагаемый способ реализуется следующим образом. В пробирку помещают 5 дисков площадью 3,8 см2, вырезанных сверлом №4 из ткани ассимиляционного аппарата липы мелколистной, на 1 мл раствора соляной кислоты. Приливают 1 мл соляной кислоты определенной концентрации в зависимости от времени и места сбора образцов: 0,8-0,9 N раствор HCl - для листьев, собранных в июне, 1,0-1,1 N раствор HCl - для листьев, собранных в июле, 1,1-1,2 N раствор HCl - для листьев, собранных в августе. Для образцов из экологически чистых районов выбирают меньшую концентрацию из представленного диапазона, для образцов из промышленных районов и магистралей - большую концентрацию. При использовании растворов соляной кислоты меньшей концентрации эффект мацерации не достигается, так как ткани не распадаются на клетки. При использовании растворов более высокой концентрации разрушаются клетки фотосинтетического аппарата, а также проявляется дубящее действие соляной кислоты на растительные ткани липы мелколистной (в растворе HCl плавают кусочки ткани листа, не распавшиеся на клетки).
Пробирки с дисками помещают на водяную баню с температурой 90°С на 25-30 минут. При этом постоянно тщательно растирают диски стеклянной палочкой до получения гомогенной суспензии. Пробирку охлаждают, объем жидкости доводят водой до 5 мл, закрывают стеклянной пробкой и взбалтывают для получения однородной суспензии клеток.
Пример осуществления изобретения:
Для изучения анатомических особенностей ассимиляционного аппарата липы мелколистной Tilia cordata Mill, (подсчет количества, определения формы, площади, объема клеток мезофилла) в июле собранны образцы листьев из промышленной зоны города. Для проведения исследований необходимо провести мацерацию тканей взятых образцов.
В пробирку помещают 5 дисков площадью 3,8 см2 на 1 мл раствора соляной кислоты, вырезанных из ткани ассимиляционного аппарата липы мелколистной сверлом №4. Приливают 1 мл 1,1 N раствор HCl. Пробирки с дисками помещают на водяную баню с температурой 90°С на 30 минут. При этом постоянно тщательно растирают диски стеклянной палочкой до получения гомогенной суспензии. Пробирку охлаждают, объем жидкости доводят водой до 5 мл, закрывают стеклянной пробкой и взбалтывают для получения однородной суспензии клеток. В результате мацерации в растворе содержатся свободные клетки столбчатого и губчатого мезофилла, что позволяет изучать под микроскопом анатомические особенности клеток фотосинтезирующего аппарата липы мелколистной.
Источники информации
1. Мокроносов А.Т. Мезоструктура и функциональная активность фотосинтетического аппарата // Мезоструктура и функциональная активность фотосинтетического аппарата. - Свердловск, 1978. - С. 7.
2. Борзенкова Р.А., Храмцова Е.В. Определение мезоструктурных характеристик фотосинтетического аппарата растений. - Екатеринбург: Изд-во Уральского университета, 2006. - С. 16.

Claims (1)

  1. Способ мацерации растительных тканей листа липы мелколистной Tilia cordata Mill. для получения гомогенной суспензии, содержащей столбчатые и губчатые клетки мезофилла, заключающийся в обработке тканей листа раствором соляной кислоты при высокой температуре и ограниченном времени, отличающийся тем, что для листьев, собранных в июне, концентрация раствора соляной кислоты составляет 0,8-0,9 N, для собранных в июле - 1,0-1,1 N, для собранных в августе - 1,1-1,2 N, при температуре обработки 90°С и времени 25-30 мин.
RU2015115223/13A 2015-04-22 2015-04-22 Способ мацерации тканей листа липы мелколистной tilia cordata mill RU2601813C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015115223/13A RU2601813C1 (ru) 2015-04-22 2015-04-22 Способ мацерации тканей листа липы мелколистной tilia cordata mill

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015115223/13A RU2601813C1 (ru) 2015-04-22 2015-04-22 Способ мацерации тканей листа липы мелколистной tilia cordata mill

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2601813C1 true RU2601813C1 (ru) 2016-11-10

Family

ID=57278226

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015115223/13A RU2601813C1 (ru) 2015-04-22 2015-04-22 Способ мацерации тканей листа липы мелколистной tilia cordata mill

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2601813C1 (ru)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070196523A1 (en) * 2006-02-21 2007-08-23 Integrated Botanical Technologies, Llc Parthenolide free bioactive ingredients from feverfew (tanacetum parthenium) and processes for their production
RU2322669C2 (ru) * 2006-03-15 2008-04-20 ФГОУ ВПО "Оренбургский государственный аграрный университет" Способ комплексного биотестирования воды, почвы, биологически активных веществ в фитотестах
CN101289385A (zh) * 2008-06-12 2008-10-22 中国人民解放军第二军医大学 从丹参中提取高纯度丹参素的方法
US20110201061A1 (en) * 2010-02-16 2011-08-18 Sarjit Johal Process For Hydrolysis Of Wet Fiber And Method For Producing Fermentation Products From Wet Fiber

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070196523A1 (en) * 2006-02-21 2007-08-23 Integrated Botanical Technologies, Llc Parthenolide free bioactive ingredients from feverfew (tanacetum parthenium) and processes for their production
RU2322669C2 (ru) * 2006-03-15 2008-04-20 ФГОУ ВПО "Оренбургский государственный аграрный университет" Способ комплексного биотестирования воды, почвы, биологически активных веществ в фитотестах
CN101289385A (zh) * 2008-06-12 2008-10-22 中国人民解放军第二军医大学 从丹参中提取高纯度丹参素的方法
US20110201061A1 (en) * 2010-02-16 2011-08-18 Sarjit Johal Process For Hydrolysis Of Wet Fiber And Method For Producing Fermentation Products From Wet Fiber

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Руководство к лабораторным занятиям большого спецпрактикума по физиологии и биохимии растений "Определение мезоструктурных характеристик фотосинтетического аппарата растений", Екатеринбург, Изд-во Уральского ун-та, 2006, с.15, п.8, с.16. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Mandáková et al. Chromosome preparation for cytogenetic analyses in Arabidopsis
Asif et al. Isolation of high-quality RNA from apple (Malus domestica) fruit
Marković et al. Cryopreservation and cryotherapy of grapevine (Vitis vinifera L.)
CN102628039B (zh) 一种通用植物总rna提取法
RU2601813C1 (ru) Способ мацерации тканей листа липы мелколистной tilia cordata mill
CN105021433A (zh) 一种披碱草属植物根尖染色体压片方法
Saber et al. Molecular phylogeny and detailed morphological analysis of two freshwater Rhizoclonium strains from contrasting spring types in Egypt and Italy
CN106035077A (zh) 一种澳洲坚果花药诱导愈伤组织的方法
CN113748784A (zh) 一种促进盐肤木种子快速发芽的方法
CN105713897B (zh) 一种高效的河蟹组织保存与rna提取的方法
CN106801102B (zh) 苋属的实时荧光pcr鉴定方法
Lisboa et al. Growth, development and foliary ultrastructural parameters of different eucalyptus genetic materials.
Coesel et al. Remarkable desmid species from the southern Patagonian highlands
Ajithamol et al. Phytoplankton density in comparison with monthly variation of hydro biological parameters in Manakudy Estuary, South West Coast of India
Hore et al. Seasonal profile of soil spore bank of ferns in a semi‐natural forest of Hooghly District, West Bengal, India and its implication in conservation
Adaniya et al. Variation in pollen fertility and germinability in ginger (Zingiber officinale Roscoe)
Reddy et al. An efficient and rapid method for the isolation of RNA from different recalcitrant tissues of mango (Mangifera indica L.)
Folorunso Diversity in the stem anatomy and tissues of several species of Annona (Annonaceae) in Nigeria
Petrova et al. Ex situ collection of model resurrection plant Haberlea rhodopensis as a prerequisite for biodiversity and conservation studies
Longo et al. Environmental impact assessment of the surrounding areas of urban forests
Arévalo et al. Identification of Urochloa humidicola hybrids with waterlogging tolerance and Biological Nitrification Inhibition (BNI) capability
Sarma Effects of colchicine on the green alga Sphaeroplea annulina (Roth) Ag
FOLORUNSO et al. Foliar Epidermal Traits of Invasive and Non-Invasive Species of Dracaena Vand. ex L.(Dracaenaceae) in Obafemi Awolowo University Campus, Ile-Ife, Nigeria
Agrawal et al. Cytological methods in algae.
Morrow et al. Crystals associated with the intertracheid pit membrane of the woody fern Botrychium multifidum

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20180423