RU2599016C1 - Способ количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной - Google Patents

Способ количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной Download PDF

Info

Publication number
RU2599016C1
RU2599016C1 RU2015130963/15A RU2015130963A RU2599016C1 RU 2599016 C1 RU2599016 C1 RU 2599016C1 RU 2015130963/15 A RU2015130963/15 A RU 2015130963/15A RU 2015130963 A RU2015130963 A RU 2015130963A RU 2599016 C1 RU2599016 C1 RU 2599016C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
solution
narcissin
narcissine
flowers
calendula
Prior art date
Application number
RU2015130963/15A
Other languages
English (en)
Inventor
Владимир Александрович Куркин
Анна Владимировна Куркина
Полина Валериевна Афанасьева
Original Assignee
федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России) filed Critical федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России)
Priority to RU2015130963/15A priority Critical patent/RU2599016C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2599016C1 publication Critical patent/RU2599016C1/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к способу количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной (Calendula officinalis L.). Способ количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной, при котором получают водно-спиртовое извлечение цветков календулы лекарственной путем экстракции измельченных цветков календулы лекарственной, помещенных в колбу, с добавлением 70% спирта этилового при нагревании на кипящей водяной бане, при этом количественное определение нарциссина проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии; водно-спиртовое извлечение цветков календулы лекарственной вводят в жидкостной хроматограф «Biotronic» с УФ-детектором; элюирование введенной пробы проводят в условиях обращенно-фазовой хроматографии в колонке «Phenomenex Luna С18(2)», в градиентном, трехступенчатом режиме, смешивая буферный раствор и метанол; УФ-детектирование проводят при длине волны 254 нм; параллельно в жидкостный хроматограф вводят 20 мкл раствора стандартного образца нарциссина и хроматографируют в тех же условиях; на хроматограмме испытуемого раствора определяют площадь пика нарциссина со временем удерживания около 37 мин и рассчитывают среднюю площадь пика по трем параллельным определениям; измеряют площадь пика нарциссина на хроматограмме раствора рабочего стандартного образца (РСО) нарциссина и рассчитывают среднюю площадь пика по трем параллельным определениям; содержание нарциссина в цветках календулы лекарственной в процентах (X) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле. Вышеописанный способ является эффективным для количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной. 2 ил.

Description

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в центрах контроля качества лекарственных средств и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной (Calendula officinalis L.).
Действующая система контроля качества лекарственных препаратов требует постоянного усовершенствования подходов к стандартизации биологически активных соединений (БАС) с использованием современных методов анализа и актуальных данных об их физико-химических, спектральных и фармакологических свойствах, позволяющих объективно и селективно определять содержание целевых веществ.
Цветки календулы лекарственной, или ноготки (Calendula officinalis L.), широко используются в отечественной и зарубежной медицине (1-5), однако до сих пор в полной мере не решены проблемы стандартизации, особенно в плане количественного определения БАС. Так, в фармакопейной статье на цветки ноготков, включенной в Государственную фармакопею СССР XI издания, предусмотрено определение лишь содержания экстрактивных веществ (1).
На кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии была разработана методика количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на ГСО рутина с использованием дифференциальной спектрофотометрии (6). Данный метод взят нами в качестве наиболее близкого аналога (прототипа). Недостатками данного метода являются низкая специфичность и невозможность определения в анализируемом сырье диагностически значимого компонента.
Ранее нами было установлено, что доминирующим и диагностическим веществом цветков календулы является флавоноид нарциссин (3-рутинозид изорамнетина) (4), что делает привлекательным определение данного компонента не только с помощью ТСХ, но и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
В литературе встречаются данные относительно возможности применения метода ВЭЖХ анализа для стандартизации сырья календулы (2, 5). По данным некоторых авторов анализ извлечения цветков календулы лекарственной методом ВЭЖХ необходимо проводить путем идентификации кверцетина с определением высоты пика данного вещества, а также с использованием ГСО кверцетина (5). На наш взгляд, кверцетин не является диагностическим веществом для цветков календулы лекарственной, так как, во-первых, содержится в следовых количествах, а во-вторых, является наиболее распространенным флавоноидным агликоном в растениях. Другие исследователи для целей ВЭЖХ-анализа предлагают использовать такие маркерные компоненты, как тифанеозид(изорамнетин-3-O-α-L-рамнопиранозил-(1→2)-α-L-рамнопиранозил-(1→6)-β-D-глюкопиранозид), нарциссин, изорамнетин-3-О-глюкозид и изорамнетин-3-O-(611-ацетил)-глюкозид (2), причем предусматривается определение суммы флавоноидов, что с точки зрения фармакопейного анализа представляется проблематичным в силу сложности методики, значительной ошибки методики (±10,50%) и ее низкой селективности.
Принимая во внимание тот факт, что доминирующими и диагностически значимым флавоноидом является нарциссин, на наш взгляд, для целей стандартизации сырья и препаратов календулы лекарственной целесообразным является определение данного флавоноида.
Таким образом, целью изобретения является разработка способа количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Техническим результатом предлагаемого способа является улучшение способа количественного определения флавоноида в цветках календулы лекарственной путем определения нарциссина как биологически активного соединения, определяющего желчегонные и противовоспалительные свойства лекарственных препаратов на основе данного сырья.
Технический результат достигается тем, что количественное определение нарциссина проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии; 20 мкл полученного водно-спиртового извлечения цветков календулы лекарственной вводят в жидкостной хроматограф «Biotronic» с УФ-детектором; элюирование введенной пробы проводят в условиях обращенно-фазовой хроматографии в колонке «Phenomenex Luna С18(2)» 250×2,0 мм, в градиентном, трехступенчатом режиме, смешивая буферный раствор, представляющий собой 0,01 М раствор KH2PO4, подкисленный Н3РО4 до рН 3,0, и метанол сначала в соотношении 90:10, с 10 минуты - 50:50, с 42 минуты - 70:30; скорость элюирования - 0.6 мл/мин; УФ-детектирование проводят при длине волны 254 нм; параллельно в жидкостный хроматограф вводят 20 мкл раствора стандартного образца нарциссина и хроматографируют в тех же условиях; на хроматограмме испытуемого раствора определяют площадь пика нарциссина со временем удерживания около 37 мин и рассчитывают среднюю площадь пика по трем параллельным определениям; измеряют площадь пика нарциссина на хроматограмме раствора рабочего стандартного образца (РСО) нарциссина и рассчитывают среднюю площадь пика по трем параллельным определениям; содержание нарциссина в цветках календулы лекарственной в процентах (X) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:
Figure 00000001
где:
S - площадь пика нарциссина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика нарциссина на хроматограмме стандартного образца;
m - навеска сырья, г;
m0 - масса нарциссина в растворе РСО, г;
V - объем извлечения, мл;
V1 - объем вводимой пробы раствора испытуемого раствора, мкл;
V0 - объем раствора РСО нарциссина (раствор А), мл;
V2 - объем вводимой пробы раствора РСО нарциссина, мкл;
W - влажность сырья, %.
Последовательное использование в градиентном режиме элюентной системы, состоящей из смеси буферного раствора и метанола в соотношении 90:10, 50:50 и 70:30, позволяет достигать оптимального разделения флавоноидов водно-спиртового извлечения цветков календулы лекарственной. Результаты ВЭЖХ-анализа свидетельствуют о том, что в подобранных условиях хроматографирования нарциссин с величиной времени удерживания около 37,42 мин хорошо отделяется от других компонентов цветков календулы лекарственной (рис. 1), что позволяет объективно и селективно определять площадь пика анализируемого флавоноида. При хроматографировании пробы рабочего стандартного образца нарциссина методом ВЭЖХ время удерживания анализируемого вещества составило 37,83±0,10 мин (рис. 2), что подтверждает корректность разделения компонентов в водно-спиртовом извлечении цветков календулы лекарственной (рис. 1). С использованием разработанного способа определено, что содержание нарциссина в цветках календулы лекарственной варьирует от 0,89±0,02% до 0,98±0,03%. Ошибка единичного определения методики с доверительной вероятностью 95% составляет ±4,51%.
Способ реализуется следующим образом.
Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. 1 г измельченного сырья (точная навеска) помещают в колбу со шлифом вместимостью 50 мл, прибавляют 30 мл 70% спирта этилового. Колбу закрывают пробкой, взвешивают на тарирных весах с точностью до ±0.01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 60 мин. Затем колбу охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр. 20 мкл полученного водно-спиртового извлечения цветков календулы лекарственной вводят в жидкостной хроматограф «Biotronic» с УФ-детектором; элюирование введенной пробы проводят в условиях обращенно-фазовой хроматографии в колонке «Phenomenex Luna С18(2)» 250×2,0 мм, в градиентном, трехступенчатом режиме, смешивая буферный раствор, представляющий собой 0,01 М раствор KH2PO4, подкисленный Н3РО4 до рН 3,0, и метанол сначала в соотношении 90:10, с 10 минуты - 50:50, с 42 минуты 70:30; скорость элюирования - 0.6 мл/мин; УФ-детектирование проводят при длине волны 254 нм; параллельно в жидкостный хроматограф вводят 20 мкл раствора стандартного образца нарциссина и хроматографируют в тех же условиях; на хроматограмме испытуемого раствора определяют площадь пика нарциссина со временем удерживания около 37 мин и рассчитывают среднюю площадь пика по трем параллельным определениям; измеряют площадь пика нарциссина на хроматограмме раствора РСО нарциссина и рассчитывают среднюю площадь пика по трем параллельным определениям; содержание нарциссина в цветках календулы лекарственной в процентах (X) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:
Figure 00000001
где:
S - площадь пика нарциссина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика нарциссина на хроматограмме стандартного образца;
m - навеска сырья, г;
m0 - масса нарциссина в растворе РСО, г;
V - объем извлечения, мл;
V1 - объем вводимой пробы раствора испытуемого раствора, мкл;
V0 - объем раствора РСО нарциссина (раствор А), мл;
V2 - объем вводимой пробы раствора РСО нарциссина, мкл;
W - влажность сырья, %.
Примечания: 1. Приготовление раствора рабочего стандартного образца нарциссина.
Около 0.02 г (точная навеска) стандартного образца нарциссина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 20 мл 95% спирта этилового, доводят объем раствора до метки тем же растворителем и перемешивают (раствор А). 5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора 95% спиртом этиловым до метки и перемешивают (раствор Б). Объем вводимой пробы составляет 20 мкл.
2. Приготовление элюента для ВЭЖХ.
Навеску калия гидрофосфата (ЧДА ГОСТ 2493-75) 1,36 г переносят в мерную колбу вместимостью 1 л, растворяют в воде и разбавляют водой до метки, перемешивают. Полученный раствор подкисляют раствором ортофосфорной кислоты до рН 3,00±0,01. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор не более 0,4-0,5 мкм. Раствор дегазируют с помощью ультразвуковой ванны непосредственно перед анализом. Раствор годен в течение 1 месяца.
3. Проверка пригодности хроматографической системы.
Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия: эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику нарциссина, должна быть не менее 3000 теоретических тарелок.
Предлагаемый способ поясняется следующим примером.
Пример.
Аналитическую пробу сырья (производитель - ОАО «Красногорсклексредства») измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. 1,0271- г измельченного сырья (точная навеска) помещают в колбу со шлифом вместимостью 50 мл, прибавляют 30 мл спирта этилового 70%. Колбу закрывают пробкой, взвешивают на тарирных весах с точностью до ±0.01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане при t=100°С в течение 60 мин. Затем колбу охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр. 20 мкл полученного водно-спиртового извлечения цветков календулы лекарственной вводят в жидкостной хроматограф «Biotronic» с УФ-детектором; элюирование введенной пробы проводят в условиях обращенно-фазовой хроматографии в колонке «Phenomenex Luna С18(2)» 250×2,0 мм, в градиентном, трехступенчатом режиме, смешивая буферный раствор, представляющий собой 0,01 М раствор KH2PO4, подкисленный H3PO4 до рН 3,0, и метанол сначала в соотношении 90:10, с 10 минуты - 50:50, с 42 минуты - 70:30; скорость элюирования - 0,6 мл/мин; УФ-детектирование проводят при длине волны 254 нм; параллельно в жидкостный хроматограф вводят 20 мкл раствора стандартного образца нарциссина и хроматографируют в тех же условиях; на хроматограмме испытуемого раствора определяют площадь пика нарциссина со временем удерживания около 37 мин и рассчитывают среднюю площадь пика по трем параллельным определениям; измеряют площадь пика нарциссина на хроматограмме раствора РСО нарциссина и рассчитывают среднюю площадь пика по трем параллельным определениям. Рассчитаны показатели площади пика нарциссина на хроматограмме испытуемого раствора (S=225,19), площади пика нарциссина на хроматограмме рабочего стандартного образца нарциссина (So=129,35) и массы сырья (m=1,0271).
Содержание нарциссина в цветках календулы лекарственной в процентах (X) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:
Figure 00000002
Содержание нарциссина=0,89%.
Все результаты были статистически обработаны. Ошибка единичного количественного определения составила ±4,51%.
Таким образом, предлагаемый способ количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии разработан впервые для анализа данного флавоноида и обладает следующими преимуществами перед методикой, используемой в известном способе (прототип):
1. Определение идет по содержанию доминирующего и диагностически значимого для цветков календулы лекарственной флавоноида - нарциссина.
2. Разработанный метод является более специфичным и селективным, поскольку обеспечивает четкое отделение нарциссина от других компонентов цветков календулы лекарственной.
3. Указанный способ менее громоздок с точки зрения расчета содержания одного компонента, а не суммы флавоноидов путем определения и сложения значений, полученных для каждого флавоноида, включая минорные компоненты.
4. Ошибка единичного определения предлагаемого способа составляет ±4,51%, тогда как в случае способа прототипа она достигает ±10,50%, что свидетельствует об объективности разработанного способа.
ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
1. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1990. - С. 237-238.
2. Кащенко Н.И. Фитохимическое исследование и совершенствование методов стандартизации цветков и травы календулы лекарственной (Calendula officinalis L.): дис … канд. фармац. наук. - Улан-Удэ, 2014. - 223 с.
3. Куркин В.А. Фармакогнозия. Учебник для студентов фармацевтических вузов (факультетов). 2-е изд., перераб. и доп. - Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ», 2007. - 1239 с.
4. Куркин В.А., Шарова О.В. Разработка методик стандартизации цветков ноготков // Фармация. - 2007. - №8. - С. 11-13.
5. Сампиев A.M., Хочава М.Р. Календула лекарственная. - Краснодар: Советская Кубань, 2010. - 144 с.
6. Шарова О.В. Фитохимическое исследование по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе календулы лекарственной: Автореф. дис. канд. фарм. наук. - Самара, 2007. - 24 с.

Claims (1)

  1. Способ количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной, при котором получают водно-спиртовое извлечение цветков календулы лекарственной путем экстракции 1 г (точная навеска) измельченных цветков календулы лекарственной, помещенных в колбу вместимостью 50 мл, с добавлением 30 мл 70% спирта этилового при нагревании на кипящей водяной бане в течение 60 мин, отличающийся тем, что количественное определение нарциссина проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии; 20 мкл полученного водно-спиртового извлечения цветков календулы лекарственной вводят в жидкостной хроматограф «Biotronic» с УФ-детектором; элюирование введенной пробы проводят в условиях обращенно-фазовой хроматографии в колонке «Phenomenex Luna С18(2)» 250×2,0 мм, в градиентном, трехступенчатом режиме, смешивая буферный раствор, представляющий собой 0,01 М раствор КН2РО4, подкисленный Н3РО4 до рН 3,0, и метанол сначала в соотношении 90:10, с 10 минуты - 50:50, с 42 минуты - 70:30; скорость элюирования - 0.6 мл/мин; УФ-детектирование проводят при длине волны 254 нм; параллельно в жидкостный хроматограф вводят 20 мкл раствора стандартного образца нарциссина и хроматографируют в тех же условиях; на хроматограмме испытуемого раствора определяют площадь пика нарциссина со временем удерживания около 37 мин и рассчитывают среднюю площадь пика по трем параллельным определениям; измеряют площадь пика нарциссина на хроматограмме раствора рабочего стандартного образца (РСО) нарциссина и рассчитывают среднюю площадь пика по трем параллельным определениям; содержание нарциссина в цветках календулы лекарственной в процентах (X) в пересчете на абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:
    Figure 00000001

    где:
    S - площадь пика нарциссина на хроматограмме испытуемого раствора;
    S0 - площадь пика нарциссина на хроматограмме стандартного образца;
    m - навеска сырья, г;
    m0 - масса нарциссина в растворе РСО, г;
    V - объем извлечения, мл;
    V1 - объем вводимой пробы раствора испытуемого раствора, мкл;
    V0 - объем раствора РСО нарциссина (раствор А), мл;
    V2 - объем вводимой пробы раствора РСО нарциссина, мкл;
    W - влажность сырья, %.
RU2015130963/15A 2015-07-24 2015-07-24 Способ количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной RU2599016C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015130963/15A RU2599016C1 (ru) 2015-07-24 2015-07-24 Способ количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015130963/15A RU2599016C1 (ru) 2015-07-24 2015-07-24 Способ количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2599016C1 true RU2599016C1 (ru) 2016-10-10

Family

ID=57127390

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015130963/15A RU2599016C1 (ru) 2015-07-24 2015-07-24 Способ количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2599016C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2696770C1 (ru) * 2018-11-08 2019-08-06 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ количественного определения суммы флавоноидов в траве монарды дудчатой

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1700463A1 (ru) * 1988-08-09 1991-12-23 Кемеровский государственный медицинский институт Способ разделени флавоноидов

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1700463A1 (ru) * 1988-08-09 1991-12-23 Кемеровский государственный медицинский институт Способ разделени флавоноидов

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ШАРОВА О.В. Фитохимическое исследование по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе календулы лекарственной/ Автореферат, Самара, 2007;ШАРОВА О.В. и др. Флавоноиды цветков календулы лекарственной //Химия растительного сырья, 2007, N1, стр.65-68; *
ШАРОВА О.В. Фитохимическое исследование по стандартизации и созданию лекарственных средств на основе календулы лекарственной/ Автореферат, Самара, 2007;ШАРОВА О.В. и др. Флавоноиды цветков календулы лекарственной //Химия растительного сырья, 2007, N1, стр.65-68;SU 1700463 А1, 23.12.1991. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2696770C1 (ru) * 2018-11-08 2019-08-06 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ количественного определения суммы флавоноидов в траве монарды дудчатой

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Rafamantanana et al. An improved HPLC-UV method for the simultaneous quantification of triterpenic glycosides and aglycones in leaves of Centella asiatica (L.) Urb (APIACEAE)
Thao et al. Simultaneous determination of bioactive flavonoids in some selected Korean thistles by high-performance liquid chromatography
Tan et al. Simultaneous determination of 13 bioactive compounds in Herba Artemisiae Scopariae (Yin Chen) from different harvest seasons by HPLC–DAD
CN105353053B (zh) 一种半枝莲药材或其配方颗粒中野黄芩苷和野黄芩素的含量测定方法
Sultan et al. Phytochemical studies for quantitative estimation of iridoid glycosides in Picrorhiza kurroa Royle
Abudayeh et al. Determination of four major saponins in skin and endosperm of seeds of horse chestnut (Aesculus hippocastanum L.) using high performance liquid chromatography with positive confirmation by thin layer chromatography
Charoensup et al. Pharmacognostic specifications and lawsone content of Lawsonia inermis leaves
Xie et al. Simultaneous determination of six main components in Bushen Huoxue prescription by HPLC-CAD
Li et al. Quality assessment and discrimination of the roots of Cynanchum auriculatum and Cynanchum wilfordii by HPLC–UV analysis
Qu et al. Qualitative and quantitative analyses of three bioactive compounds in different parts of Forsythia suspensa by high-performance liquid chromatography-electrospray ionization-mass spectrometry
Upadhyay et al. Quantitative determination of bioactive 4-hydroxy-α-tetralone, tetralone-4-O-β-D-glucopyranoside and ellagic acid in Ammannia baccifera (Linn.) by reversed-phase high-performance liquid chromatography
RU2599016C1 (ru) Способ количественного определения нарциссина в цветках календулы лекарственной
He et al. Simultaneous quantification of nine major active components in traditional Chinese prescription Mahuang decoction and the influence of herbal compatibility on their contents
Shi et al. Simultaneous quantification of two active compounds in raw and honey-processed Radix Astragali by high-performance thin-layer chromatography
Liu et al. Quantitative analysis of chemical constituents in different commercial parts of Notopterygium incisum by HPLC–DAD–MS
CN107941955B (zh) 一种同时快速检测椰岛鹿龟酒中9种功能活性成分的方法
Guo et al. A simple and sensitive LC–MS/MS method for determination of miltirone in rat plasma and its application to pharmacokinetic studies
Rosenthal et al. An HPLC method to determine sennoside A and sennoside B in Sennae fructus and Sennae folium
CN103512979B (zh) 一种药物组合物坐珠达西的检测方法
Jain et al. Development and validation of a high-performance thin-layer chromatography method for the simultaneous quantification of rosmarinic acid, quercetin, glycyrrhizin and betulinic acid in polyherbal immunostimulant formulation
Li et al. Simultaneous determination of phenols in Radix Polygalae by high performance liquid chromatography: quality assurance of herbs from different regions and seasons
Summanen A chemical and ethnopharmacological study on Phyllanthus emblica L.(Euphorbiaceae)
Mohamed et al. Validated HPLC method for quantitative analysis of gallic acid and rutin in leaves of Moringa oleifera grown in Egypt
Bo et al. Quantitative determination of multiple components in Herba Epimedii using a single reference standard: a comparison of two methods
Hussain et al. Rapid separation and determination of betulinic acid from a complex matrix using combination of TLC and RP-HPLC.

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20180725