RU2583140C1

RU2583140C1 - Disinfectant

Info

Publication number: RU2583140C1
Application number: RU2014144486/15A
Authority: RU
Inventors: Валерий Маврикиевич Стоянов; Игорь Анатольевич Карпенко; Юрий Дмитриевич Дробин; Александр Александрович Зубенко; Александр Иванович Клименко; Николай Геннадьевич Могильный; Анатолий Александрович Потатуев
Original assignee: Ооо "Химпоставщик-Дон"
Priority date: 2014-11-05
Filing date: 2014-11-05
Publication date: 2016-05-10

Abstract

FIELD: pharmacology.

SUBSTANCE: invention provides disinfectant, including alkyldimethylbenzylammonium chloride, didecyldimethylammonium chloride, glutaric aldehyde, glyoxal and additives with ingredients taken in certain ratio, wt%.

EFFECT: invention intensifies disinfecting effect in 2-4-fold.

1 cl, 2 dwg

Description

Изобретение относится к области сельского хозяйства, а именно к препаратам для дезинфекции объектов ветеринарного надзора.The invention relates to the field of agriculture, namely, preparations for the disinfection of objects of veterinary surveillance.

Известны дезинфицирующие средства, в состав которых входят препараты йода, хлора, щелочей и кислот (Смирнов А.М., Дорожкин В.И. Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. 1(11), 2014, с. 6-10). Недостатком препаратов данного ряда является их высокая агрессивность к производственному оборудованию.Disinfectants are known, which include preparations of iodine, chlorine, alkalis and acids (Smirnov A.M., Dorozhkin V.I. Problems of veterinary sanitation, hygiene and ecology. 1 (11), 2014, p. 6-10). The disadvantage of this series of drugs is their high aggressiveness to production equipment.

Известны дезинфицирующие средства на основе перекисей (Готовский Д.Г. Ученые записки учреждения образования "Витебская ордена "Знак почета" государственная академия ветеринарной медицины". 2013. Т.49. №1-2. С. 66-69). Недостатком данных препаратов является их быстрое разложение во внешней среде. Катализаторами этих процессов являются присутствующие во внешней среде ионы металлов.Peroxide-based disinfectants are known (DG Gotovsky. Scientific notes of the educational institution "Vitebsk Order" Badge of Honor "State Academy of Veterinary Medicine". 2013. V. 49. No. 1-2. P. 66-69). The disadvantage of these drugs is their rapid decomposition in the environment. The catalysts for these processes are metal ions present in the external environment.

Известны дезинфектанты на основе катионоактивных поверхностно-активных веществ (Готовский Д.Г. Ученые записки учреждения образования "Витебская ордена "Знак почета" государственная академия ветеринарной медицины". 2012. Т.48. №2-1. С. 61-64. Киселев А.Л., Краснобаева О.А., Краснобаев Ю.В., Бессарабова Е.В. Ветеринария. 2010. №11. С. 19-21). К препаратам данного ряда относится поликомпонентный дезинфицирующий состав Вироцид, выбранный нами в качестве прототипа. Недостатком препаратов на основе четвертичных аммониевых соединений, в том числе Вироцида, является слабая эффективность против резистентных штаммов микроорганизмов (Bridier A., Briandet R., Thomas V., Dubois-Brissonnet F. Comparativebiocidalactivityofperaceticacid, benzalkoniumchlorideandortho-phthalaldehydeon 77 bacterialstrains, Journalof Hospital Infection v.78, p. 208-213, 2011. Aylin Akoglu, Evrim Gunes Altuntas, Gokce Polat Yemis A Modified Selective Medium Containing Benzalkonium Chloride (BKC) for the Isolation of Pseudomonas aeruginosa from Raw Milk, Food and Nutrition Sciences, v.3, p. 947-950, 2012).Known disinfectants based on cationic surfactants (Gotovskiy D.G. Scientific notes of the educational institution "Vitebsk Order" Badge of Honor "State Academy of Veterinary Medicine". 2012. V. 48. No. 2-1. P. 61-64. Kiselev A.L., Krasnobaeva O.A., Krasnobaev Yu.V., Bessarabova E.V. Veterinary Medicine. 2010. No. 11. S. 19-21). The multicomponent disinfectant Virocid, which we have chosen as a prototype, belongs to the preparations of this series. The disadvantage of drugs based on Quaternary ammonium compounds, including Virocide, is their low effectiveness against resistant strains of microorganisms (Bridier A., Briandet R., Thomas V., Dubois-Brissonnet F. Comparativebiocidalactivityofperaceticacid, benzalkoniumchlorideandortho-phthalaldehydeon 77 bacterialstrains .78, p. 208-213, 2011. Aylin Akoglu, Evrim Gunes Altuntas, Gokce Polat Yemis A Modified Selective Medium Containing Benzalkonium Chloride (BKC) for the Isolation of Pseudomonas aeruginosa from Raw Milk, Food and Nutrition Sciences, v.3, p. 947-950, 2012).

Целью изобретения является создание дезинфицирующего средства на основе четвертичных аммониевых соединений и глутарового альдегида, обладающего высокой активностью против резистентных штаммов микроорганизмов.The aim of the invention is the creation of a disinfectant based on Quaternary ammonium compounds and glutaraldehyde, which is highly active against resistant strains of microorganisms.

Поставленная цель достигается тем, что в состав дезинфектанта включен диальдегид глиоксаль при следующих соотношениях компонентов (мас.%):The goal is achieved by the fact that the disinfectant included dialdehyde glyoxal in the following ratios of components (wt.%):

- алкилдиметилбензиламмония хлорид - 1,0-35,0- alkyldimethylbenzylammonium chloride - 1.0-35.0

- дидецилдиметиламмония хлорид - 1,0-25,0- didecyldimethylammonium chloride - 1.0-25.0

- глутаровый альдегид - 1,0-15,0- glutaraldehyde - 1.0-15.0

- глиоксаль - 1,0-15,0- glyoxal - 1.0-15.0

- вспомогательные вещества - до 100,0- excipients - up to 100.0

Обоснование граничных значений массовых процентов компонентов в составе дезинфектанта: превышение массовых процентов алкилдиметилбензиламмония хлорида более 35,0 и дидецилдиметиламмония хлорида более 25,0 сильно повышает вязкость смеси, что затрудняет фасовку препарата и правильную дозировку при приготовлении рабочего раствора; превышение массовых процентов альдегидов более 15,0 приводит к росту токсичности и неоправданно завышенному их расходованию при изготовлении рабочего раствора; уменьшение нижних границ всех компонентов приводит к излишнему расходованию растворителя и повышению транспортных расходов.Justification of the boundary values of the mass percent of the components in the disinfectant: excess weight percent of alkyl dimethylbenzylammonium chloride over 35.0 and didecyldimethylammonium chloride over 25.0 greatly increases the viscosity of the mixture, which complicates the preparation of the drug and the correct dosage when preparing the working solution; exceeding the mass percent of aldehydes more than 15.0 leads to an increase in toxicity and unreasonably high consumption in the manufacture of a working solution; reducing the lower boundaries of all components leads to excessive consumption of solvent and increased transport costs.

Оптимальным является следующее соотношение компонентов (мас.%):Optimum is the following ratio of components (wt.%):

- алкилдиметилбензиламмония хлорид - 28,8- alkyldimethylbenzylammonium chloride - 28.8

- дидецилдиметиламмония хлорид - 11,9- didecyldimethylammonium chloride - 11.9

- глутаровый альдегид - 8,0- glutaraldehyde - 8.0

- глиоксаль - 12,4- glyoxal - 12.4

Антимикробную активность заявляемого дезинфектанта в сравнении с препаратом Вироцид определяли in vitro по методике серийных разведений в жидкой питательной среде, описанной в кн.: «Методы экспериментальной химиотерапии», М., Медицина, 1971. - С. 100-105. Бактерицидную активность каждого вещества определяли в ряду из 10 двухкратных разведений от 500 мкг/мл до 0,975 мкг/мл. Учитываемая бактериальная нагрузка составляла 250 тысяч микробных клеток в 1 мл. Исходные суспензии, содержащие 10⁹ микробных клеток в 1 мл забуференного физиологического раствора (ЗФР), готовили по оптическому стандарту плотности (Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им. А.Н. Тарасевича) из суточной агаровой культуры. Бактериальные суспензии разводили жидкой питательной средой до концентрации 500000 микробных тел в 1 мл. Затем вносили в пробирки по 1 мл приготовленной таким образом бактериальной взвеси и 1 мл раствора испытуемого вещества соответствующей концентрации в жидкой питательной среде. Выдерживали в термостате 18 часов при 37°C и из пробирок, в которых отсутствовал рост микроорганизмов, делали высевы в жидкую питательную среду. Учет результатов проводили после выдерживания пробирок при 37°C в течение 18 часов. Минимальную бактерицидную концентрацию (МБК) препаратов определяли по минимальной концентрации вещества (в пересчете на сухое вещество) в пробирке, в которой отсутствовал рост микроорганизмов (тест-бактерий).The antimicrobial activity of the claimed disinfectant in comparison with the drug Virocid was determined in vitro by the method of serial dilutions in a liquid nutrient medium described in the book: "Methods of experimental chemotherapy", M., Medicine, 1971. - S. 100-105. The bactericidal activity of each substance was determined in a series of 10 two-fold dilutions from 500 μg / ml to 0.975 μg / ml. The bacterial load taken into account was 250 thousand microbial cells in 1 ml. Stock suspensions containing 10 ⁹ microbial cells in 1 ml of buffered physiological saline (PBS) were prepared according to the optical density standard (A.N. Tarasevich State Research Institute for Standardization and Control of Medical and Biological Preparations) from daily agar culture. Bacterial suspensions were diluted with liquid nutrient medium to a concentration of 500,000 microbial bodies in 1 ml. Then, 1 ml of bacterial suspension thus prepared and 1 ml of a solution of the test substance of the appropriate concentration in a liquid nutrient medium were introduced into the tubes. It was kept in the thermostat for 18 hours at 37 ° C and from the tubes in which there was no growth of microorganisms, seeding was done in a liquid nutrient medium. Analysis was carried out after keeping the tubes at 37 ° C for 18 hours. The minimum bactericidal concentration (MBC) of the preparations was determined by the minimum concentration of the substance (in terms of dry matter) in a test tube in which there was no growth of microorganisms (test bacteria).

В таблице 1 представлены МБК заявляемого препарата и препарата Вироцид в отношении двух тест-культур (Escherichia coli АТСС-25922 и Staphylococcus aureus АТСС-6538Р), а также 10 полирезистентных полевых изолятов, устойчивых к двум и более антибиотикам (минимальные подавляющие концентрации антибиотиков в отношении этих культур составляли более 100 мкг/мл)Table 1 presents the MBC of the claimed drug and the drug Virocid in relation to two test cultures (Escherichia coli ATCC-25922 and Staphylococcus aureus ATCC-6538P), as well as 10 multiresistant field isolates resistant to two or more antibiotics (minimal inhibitory concentrations of antibiotics against these cultures were more than 100 μg / ml)

Из данных таблицы можно сделать вывод о том, что предлагаемый препарат в 2-3 раза более активен, чем Вироцид.From the table, we can conclude that the proposed drug is 2-3 times more active than Virocid.

Нами установлено, что причиной более высокой активности предлагаемого нами препарата является синергидный эффект, обусловленный сочетанием двух альдегидов - глутарового альдегида и глиоксаля. Так, замена глутарового альдегида в предлагаемом препарате таким же количеством глиоксаля резко снижает активность препарата: МБК такой смеси в отношении представленных в таблице микроорганизмов становятся такими же, как и для препарата Вироцид. С другой стороны, смесь, не содержащая глиоксаля (как и в Вироциде), не дает резкого повышения активности по мере возрастания процентного содержания глутарового альдегида: наблюдается лишь естественное плавное увеличение антибактериальной активности. Резкий скачок активности возможен только при сочетании глутарового альдегида и глиоксаля.We found that the reason for the higher activity of the drug we offer is a synergistic effect due to the combination of two aldehydes - glutaraldehyde and glyoxal. So, replacing glutaraldehyde in the proposed preparation with the same amount of glyoxal dramatically reduces the activity of the drug: MBC of such a mixture with respect to the microorganisms shown in the table become the same as for the Virocid preparation. On the other hand, a mixture that does not contain glyoxal (as in Virocide) does not give a sharp increase in activity with an increase in the percentage of glutaraldehyde: only a smooth, natural increase in antibacterial activity is observed. A sharp jump in activity is possible only with a combination of glutaraldehyde and glyoxal.

Определение дезинфицирующих свойств предлагаемого препарата в сравнении с Вироцидом.Determination of the disinfectant properties of the proposed drug in comparison with Virocid.

Дезинфицирующие свойства определяли на контаминированных тест-культурами (Escherichia coli АТСС-25922 и Staphylococcus aureus АТСС-6538Р) тест-объектах. В качестве тест-объектов использовались деревянные, кирпичные и металлические поверхности. Контаминированный тест-объект подсушивали в течение одного часа при комнатной температуре, а затем обрабатывали препаратами путем опрыскивания. Температура рабочего раствора дезинфицирующего средства и воздуха во время проведения опытов была в пределах 18-20°C, относительная влажность 65-75%. Все опыты были поставлены в пятикратной повторности.Disinfecting properties were determined on contaminated test cultures (Escherichia coli ATCC-25922 and Staphylococcus aureus ATCC-6538P) test objects. As test objects, wooden, brick and metal surfaces were used. The contaminated test object was dried for one hour at room temperature, and then treated with drugs by spraying. The temperature of the working solution of the disinfectant and air during the experiments was in the range of 18-20 ° C, relative humidity of 65-75%. All experiments were performed in five replicates.

Контроль эффективности дезинфекции осуществляли следующим образом. После окончания заданной экспозиции брали смывы с контрольных и опытных тест-объектов путем тщательного протирания их стерильным, слегка увлажненным тампоном. Тампоны, каждый в отдельности, помещали в пробирки с нейтрализатором (использовали стерильную водопроводную воду). Через 1-2 ч тампоны из пробирок удаляли, жидкость центрифугировали в течение 20-30 мин при 2500 об/мин. Затем надосадочную жидкость сливали, в пробирку добавляли стерильную воду, содержимое перемешивали и снова центрифугировали 20 мин. После этого вновь сливали надосадочную жидкость, а из центрифугата производили посевы на соответствующие питательные среды.Monitoring the effectiveness of disinfection was carried out as follows. After the end of the given exposure, swabs were taken from control and experimental test objects by thoroughly wiping them with a sterile, slightly moistened swab. Tampons, each individually, were placed in tubes with a neutralizer (sterile tap water was used). After 1-2 hours, the swabs were removed from the tubes, the liquid was centrifuged for 20-30 minutes at 2500 rpm. Then the supernatant was discarded, sterile water was added to the tube, the contents were mixed and centrifuged again for 20 minutes. After this, the supernatant was again drained, and from the centrifugate, crops were made on the appropriate nutrient medium.

Учет результатов проводился каждые 24 часа в течение 7 суток инкубирования тест-культур на питательных средах при температуре 37°C.The results were taken into account every 24 hours for 7 days of incubation of test cultures on nutrient media at a temperature of 37 ° C.

Качество дезинфекции оценивали по наличию или отсутствию роста исходных тест-культур. Заключение о качестве обеззараживания поверхностей делали на основании пяти повторных опытов с совпадающими результатами. Результаты представлены в таблице 2.The quality of disinfection was assessed by the presence or absence of growth of the original test cultures. The conclusion about the quality of surface disinfection was made on the basis of five repeated experiments with matching results. The results are presented in table 2.

Приведенные в таблице 2 данные свидетельствуют о высоком бактерицидном действии препарата. Из данных таблицы видно, что инактивация кишечной палочки (Escherichia coli) произошла при обработке тест-объектов рабочим раствором предлагаемого препарата при концентрации 0,031% и экспозиции 30 мин. Инактивация золотистого стафилококка произошла при концентрации рабочего раствора препарата 0,063% и экспозиции 30 мин, причем препарат в 4 раза более активен, чем Вироцид в отношении Escherichia coli, и в 2 раза - в отношении Staphylococcus aureus.The data presented in table 2 indicate a high bactericidal effect of the drug. The table shows that inactivation of Escherichia coli (Escherichia coli) occurred during the processing of test objects with the working solution of the proposed drug at a concentration of 0.031% and exposure of 30 minutes. Inactivation of Staphylococcus aureus occurred at a concentration of a working solution of the drug of 0.063% and exposure of 30 minutes, the drug being 4 times more active than Virocid against Escherichia coli, and 2 times against Staphylococcus aureus.

Расход рабочего раствора препарата составлял во всех случаях эксперимента - 350 мл/м².The flow rate of the working solution of the drug was in all cases of the experiment - 350 ml / m ² .

Технический результат, достигаемый при осуществлении данного изобретения:The technical result achieved by the implementation of this invention:

1. Усиление дезинфицирующего эффекта в 2-4 раза.1. The strengthening of the disinfecting effect in 2-4 times.

2. Применение в предлагаемом препарате сочетания глутарового альдегида и глиоксаля обеспечивает синергидный эффект, проявляющийся более надежным обеззараживанием объектов ветеринарного надзора.2. The use in the proposed preparation of a combination of glutaraldehyde and glyoxal provides a synergistic effect, which is manifested by a more reliable disinfection of objects of veterinary surveillance.

3. Препарат легко фасуется, предлагаемая форма препарата позволяет осуществлять правильную дозировку при приготовлении его рабочих растворов.3. The drug is easily packaged, the proposed form of the drug allows for the correct dosage in the preparation of its working solutions.

4. Препарат проявляет эффективное бактерицидное действие в одинаковой степени как в отношении референтных штаммов, так и в отношении клинических изолятов бактерий.4. The drug exhibits effective bactericidal action to the same extent both in relation to reference strains and in relation to clinical isolates of bacteria.

Claims

A disinfectant, including cationic surfactants: alkyldimethylbenzylammonium chloride and didecyldimethylammonium chloride, as well as glutaraldehyde and auxiliary substances, characterized in that glyoxal is additionally included in the composition in the following ratio of components (wt.%):
- alkyldimethylbenzylammonium chloride - 1.0-35.0
- didecyldimethylammonium chloride - 1.0-25.0
- glutaraldehyde - 1.0-15.0
- glyoxal - 1.0-15.0
- excipients - up to 100.0