RU2574669C2 - Instant diagnostic technique for female endocrine infertility - Google Patents
Instant diagnostic technique for female endocrine infertility Download PDFInfo
- Publication number
- RU2574669C2 RU2574669C2 RU2014146971/15A RU2014146971A RU2574669C2 RU 2574669 C2 RU2574669 C2 RU 2574669C2 RU 2014146971/15 A RU2014146971/15 A RU 2014146971/15A RU 2014146971 A RU2014146971 A RU 2014146971A RU 2574669 C2 RU2574669 C2 RU 2574669C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- infertility
- endocrine
- women
- female
- hormone
- Prior art date
Links
- 208000000509 Infertility Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 230000036512 infertility Effects 0.000 title claims abstract description 25
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 title claims abstract description 25
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 title claims abstract description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 5
- KAHDONZOCXSKII-NJVVDGNHSA-N Kisspeptin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)O)C1=CN=CN1 KAHDONZOCXSKII-NJVVDGNHSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 230000001850 reproductive Effects 0.000 claims abstract description 11
- 229940088597 Hormone Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims abstract description 7
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 5
- 102400001124 Metastin Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 210000003462 Veins Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 claims description 12
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 10
- 210000002784 Stomach Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 abstract description 10
- 230000035558 fertility Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000006894 menstrual cycle phase Effects 0.000 abstract 1
- 102100005648 KISS1 Human genes 0.000 description 9
- 108060004211 KISS1 Proteins 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 7
- 230000003054 hormonal Effects 0.000 description 7
- 229940028334 Follicle Stimulating Hormone Drugs 0.000 description 6
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 6
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 6
- 229940040129 Luteinizing Hormone Drugs 0.000 description 6
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 6
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 6
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 5
- 210000004696 Endometrium Anatomy 0.000 description 4
- RJKFOVLPORLFTN-STHVQZNPSA-N Progesterone Natural products O=C(C)[C@@H]1[C@@]2(C)[C@H]([C@H]3[C@@H]([C@]4(C)C(=CC(=O)CC4)CC3)CC2)CC1 RJKFOVLPORLFTN-STHVQZNPSA-N 0.000 description 4
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Syngestrets Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 4
- 210000002700 Urine Anatomy 0.000 description 4
- 210000004291 Uterus Anatomy 0.000 description 4
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 4
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 4
- WPOCIZJTELRQMF-QFXBJFAPSA-N 16α-hydroxyestrone Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C([C@H](O)C4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 WPOCIZJTELRQMF-QFXBJFAPSA-N 0.000 description 3
- SWINWPBPEKHUOD-JPVZDGGYSA-N 2-hydroxyestrone Chemical compound OC1=C(O)C=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 SWINWPBPEKHUOD-JPVZDGGYSA-N 0.000 description 3
- 206010046798 Uterine leiomyoma Diseases 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 230000029849 luteinization Effects 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 2
- 210000001367 Arteries Anatomy 0.000 description 2
- 210000003679 Cervix Uteri Anatomy 0.000 description 2
- 210000004246 Corpus Luteum Anatomy 0.000 description 2
- CZWCKYRVOZZJNM-USOAJAOKSA-N DHEA sulfate Chemical compound C1[C@@H](OS(O)(=O)=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 CZWCKYRVOZZJNM-USOAJAOKSA-N 0.000 description 2
- 229960005309 Estradiol Drugs 0.000 description 2
- 208000007984 Female Infertility Diseases 0.000 description 2
- 210000004392 Genitalia Anatomy 0.000 description 2
- 206010021928 Infertility female Diseases 0.000 description 2
- 101700055519 KISS1R Proteins 0.000 description 2
- 101710033964 KISS1R Proteins 0.000 description 2
- 102100005647 KISS1R Human genes 0.000 description 2
- 210000004293 Mammary Glands, Human Anatomy 0.000 description 2
- 229940097325 Prolactin Drugs 0.000 description 2
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 2
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 210000001215 Vagina Anatomy 0.000 description 2
- 230000001684 chronic Effects 0.000 description 2
- 238000007374 clinical diagnostic method Methods 0.000 description 2
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000001568 sexual Effects 0.000 description 2
- 230000000392 somatic Effects 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous Effects 0.000 description 2
- LDSYPJSYQOUQMN-CMZLOHJFSA-N (8R,9S,13S,14S,17S)-13-methyl-6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthrene-3,17-diol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 LDSYPJSYQOUQMN-CMZLOHJFSA-N 0.000 description 1
- 206010002659 Anovulatory cycle Diseases 0.000 description 1
- 210000003756 Cervix Mucus Anatomy 0.000 description 1
- 206010014698 Endocrine disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 210000000981 Epithelium Anatomy 0.000 description 1
- NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N GnRH Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009165 Gonadoliberin Human genes 0.000 description 1
- 108010084340 Gonadotropin-Releasing Hormone Proteins 0.000 description 1
- 210000002149 Gonads Anatomy 0.000 description 1
- 208000006454 Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 210000003016 Hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 238000003744 In vitro fertilisation Methods 0.000 description 1
- 206010022114 Injury Diseases 0.000 description 1
- 229920002521 Macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 101800001361 Metastin Proteins 0.000 description 1
- 210000001672 Ovary Anatomy 0.000 description 1
- 210000004197 Pelvis Anatomy 0.000 description 1
- 229960003604 Testosterone Drugs 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute Effects 0.000 description 1
- 230000002513 anti-ovulatory Effects 0.000 description 1
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 description 1
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing Effects 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 1
- 230000003203 everyday Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic Effects 0.000 description 1
- 239000003163 gonadal steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 200000000018 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002045 lasting Effects 0.000 description 1
- 210000004914 menses Anatomy 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic Effects 0.000 description 1
- 210000002569 neurons Anatomy 0.000 description 1
- 230000001575 pathological Effects 0.000 description 1
- 229950009829 prasterone sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting Effects 0.000 description 1
- WAQBISPOEAOCOG-DYKIIFRCSA-N testosterone sulfate Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)OS(O)(=O)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 WAQBISPOEAOCOG-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а более конкретно к медицинской лабораторной диагностике, и может быть использовано в акушерстве и гинекологии.The invention relates to medicine, and more specifically to medical laboratory diagnostics, and can be used in obstetrics and gynecology.
Ранняя диагностика аномалий секреторной функции гонад, выражающаяся в нарушениях процессов овуляции, позволяет в значительной степени сократить количество бесплодных браков и улучшить демографическую ситуацию в популяции. Определение начальных признаков нарушений гормонального статуса и фертильности является актуальной проблемой современной медицины, поскольку естественная убыль населения только в России сегодня составляет около 1 млн. человек за три года.Early diagnosis of anomalies in the secretory function of gonads, expressed in violations of ovulation processes, can significantly reduce the number of infertile marriages and improve the demographic situation in the population. Determination of the initial signs of hormonal status and fertility disorders is an urgent problem of modern medicine, since the natural population decline in Russia alone today amounts to about 1 million people in three years.
Сегодня не вызывает сомнения и тот факт, что одним из главных факторов, ведущих к снижению рождаемости, является ухудшение репродуктивного здоровья женщин. Согласно данным ряда авторов за последние 10 лет число абсолютно здоровых с гинекологической точки зрения женщин снизилось до 6,3% от общего количества женщин детородного возраста (Кулаков В.И., Корнеева И.Е. Диагностика и лечение женского бесплодия // Практическая гинекология. / Под ред. В.И. Кулакова и В.Н. Прилепской. - М.: МЕДпресс-информ, 2001. - С. 298-317). Это приводит к тому, что около 20% пар, планирующих беременность, сталкивается с теми или иными проблемами, препятствующими зачатию.Today, there is no doubt that the fact that one of the main factors leading to a decrease in the birth rate is the deterioration of the reproductive health of women. According to some authors, over the past 10 years, the number of women who are absolutely healthy from a gynecological point of view has decreased to 6.3% of the total number of women of childbearing age (Kulakov V.I., Korneeva I.E. Diagnosis and treatment of female infertility // Practical Gynecology. / Under the editorship of V.I. Kulakov and V.N. Prilepskaya. - M.: MEDpress-inform, 2001. - S. 298-317). This leads to the fact that about 20% of couples planning a pregnancy encounter certain problems that impede conception.
Нарушение фертильности (бесплодие) диагностируется при неспособности женщины забеременеть в течение одного года активной половой жизни со здоровым мужчиной без применения контрацепции. Этиология женского бесплодия многообразна и, по мнению большинства авторов, на первое место выходят эндокринные нарушения. В некоторых случаях эти нарушения носят обратимый характер и поддаются коррекции, в других - требуют применения более радикальных методов, таких как ЭКО или суррогатное материнство.Fertility impairment (infertility) is diagnosed when a woman is unable to conceive during one year of active sex with a healthy man without contraception. The etiology of female infertility is diverse and, according to most authors, endocrine disorders come first. In some cases, these disorders are reversible and can be corrected; in others, they require the use of more radical methods, such as IVF or surrogacy.
Для прогнозирования бесплодия в настоящее время предложены различные биохимические и инструментальные методы диагностики.To predict infertility, various biochemical and instrumental diagnostic methods are currently proposed.
Существует способ прогнозирования состояния фертильности у женщин репродуктивного возраста с миомой матки путем определения концентрации 2-гидроксиэстрона и 16α-гидроксиэстрона в моче, концентрацию прогестерона в сыворотке крови (Патент RU №2433411, G01N 33/74, 13.07.2009).There is a method for predicting fertility in women of reproductive age with uterine myoma by determining the concentration of 2-hydroxyestrone and 16α-hydroxyestrone in the urine, the concentration of progesterone in the blood serum (Patent RU No. 2433411, G01N 33/74, 07/13/2009).
Сущность способа: в лютеиновую фазу менструального цикла определяют концентрации 2-гидроксиэстрона и 16α-гидроксиэстрона в моче, концентрацию прогестерона в сыворотке крови. Затем рассчитывают каноническую величину по формуле K=4,23-0,04×A+0,0016×B-0,18×C, где A - концентрация прогестерона в сыворотке крови на 20-21 дни менструального цикла (лютеиновая фаза) (нмоль/л), B - концентрация 2-гидроксиэстрона в моче (нмоль/л), C - концентрация 16α-гидроксиэстрона в моче (нмоль/л). При K больше -0,175 прогнозируют бесплодие, при K меньше -0,175 - сохранную фертильность. Использование способа повышает точность прогнозирования бесплодия и сохранной фертильности у женщин с миомой матки.The essence of the method: in the luteal phase of the menstrual cycle, determine the concentration of 2-hydroxyestrone and 16α-hydroxyestrone in the urine, the concentration of progesterone in the blood serum. Then the canonical value is calculated by the formula K = 4.23-0.04 × A + 0.0016 × B-0.18 × C, where A is the concentration of progesterone in the blood serum for 20-21 days of the menstrual cycle (luteal phase) ( nmol / L), B is the concentration of 2-hydroxyestrone in the urine (nmol / L), C is the concentration of 16α-hydroxyestrone in the urine (nmol / L). With K greater than -0.175 infertility is predicted, with K less than -0.175 - preserved fertility. Using the method improves the accuracy of predicting infertility and intact fertility in women with uterine fibroids.
Недостатками данного способа являются возможность его применения у женщин с миомой матки, расчет показателей требует специальной математической подготовки и сложен в практическом применении. Метод привязан к лютеиновой фазе менструального цикла, что делает возможность его применения в очень ограниченный интервал времени (21-22 дни менструального цикла).The disadvantages of this method are the possibility of its use in women with uterine myoma, the calculation of indicators requires special mathematical training and is difficult in practical application. The method is tied to the luteal phase of the menstrual cycle, which makes it possible to use it in a very limited time interval (21-22 days of the menstrual cycle).
Еще одним способом для диагностики эндокринной формы бесплодия является допплерографический и ультразвуковой (Патент RU №2350272, A61B 8/00, 27.03.2009), который позволяет непосредственно отслеживать процессы овуляции.Another method for diagnosing the endocrine form of infertility is dopplerographic and ultrasound (Patent RU No. 2350272, A61B 8/00, 03/27/2009), which allows you to directly monitor ovulation processes.
Способ заключается в том, что проводят допплерографическое и ультразвуковое исследование до овуляции каждый день, начиная с седьмого дня цикла, с определением прироста эндометрия, доминантного фолликула и изменений показателей кровотока в аркуатных артериях матки и перифолликулярном кровотоке. Оценивают достижение размеров толщины эндометрия и доминантного фолликула, а также изменения показателей кровотока на 9, 11 день цикла и на момент овуляции с индивидуальным подбором гормональных препаратов. Проводят контрольное исследование через 7 и 14 дней после овуляции. Оценивают толщину эндометрия, размеры желтого тела, показатели кровотока в аркуатных артериях матки и желтом теле. Назначают индивидуальную гормональную терапию. Избирают дальнейшую тактику гормональной терапии при наличии или отсутствии беременности. Способ позволяет повысить точность диагностики нарушений овариально-менструального цикла у женщин, страдающих эндокринной формой бесплодия, и индивидуализировать подбор дозы гормональных препаратов за счет увеличения контролируемых параметров.The method consists in conducting dopplerographic and ultrasound examinations before ovulation every day, starting from the seventh day of the cycle, with the determination of the growth of the endometrium, the dominant follicle and changes in blood flow in the aromatic arteries of the uterus and perifollicular blood flow. They assess the achievement of the dimensions of the thickness of the endometrium and the dominant follicle, as well as changes in blood flow indices on the 9th, 11th day of the cycle and at the time of ovulation with an individual selection of hormonal preparations. A control study is carried out 7 and 14 days after ovulation. Evaluate the thickness of the endometrium, the size of the corpus luteum, blood flow in the arcuate arteries of the uterus and the corpus luteum. Prescribe individual hormone therapy. Further tactics of hormone therapy are chosen in the presence or absence of pregnancy. The method allows to increase the accuracy of diagnosis of disorders of the ovarian-menstrual cycle in women suffering from the endocrine form of infertility, and to individualize the selection of the dose of hormonal drugs by increasing the controlled parameters.
Недостатком способа является невозможность амбулаторного обследования, длительность исследования (поскольку даже у здоровых женщин по статистическим данным до 10% циклов могут быть ановуляторными), значительная дороговизна и субъективность в интерпретации данных УЗИ.The disadvantage of this method is the impossibility of an outpatient examination, the duration of the study (since even in healthy women, according to statistical data, up to 10% of the cycles can be anovulatory), a significant cost and subjectivity in the interpretation of ultrasound data.
Известен также способ диагностики эндокринной формы бесплодия путем измерения реографических показателей ткани в течение менструального цикла (а.с. №1398821, A61B 5/02, 30.05.1988). Сущность способа заключается в том, что в канале шейки матки измеряют электрическое сопротивление биполярным датчиком (не описан авторами). При этом у женщин с нормальным менструальным циклом, при нанесении результатов измерения на циклограмму, выявлена четкая двухфазность полученной кривой, а у женщин с анавуляторным циклом графическое изображение отличалось не только своей величиной, но и отсутствием динамических изменений.There is also known a method for the diagnosis of endocrine infertility by measuring the rheographic parameters of the tissue during the menstrual cycle (AS No. 1398821, A61B 5/02, 05/30/1988). The essence of the method lies in the fact that in the cervical canal the electrical resistance is measured by a bipolar sensor (not described by the authors). At the same time, in women with a normal menstrual cycle, when applying the measurement results to the cyclogram, a clear biphasicity of the obtained curve was revealed, and in women with the anavulatory cycle, the graphic image was distinguished not only by its size, but also by the absence of dynamic changes.
Недостатком данного способа является методическая сложность выполнения исследования и его травматичность для обследуемой женщины, невозможность динамического наблюдения, так как травмирование эпителия цервикального канала снижает диагностическую ценность показателей.The disadvantage of this method is the methodological complexity of the study and its invasiveness for the examined woman, the impossibility of dynamic observation, since trauma to the cervical canal epithelium reduces the diagnostic value of the indicators.
Существуют также известные общеклинические способы диагностики эндокринной формы бесплодия. Основным способом диагностики энодкринных нарушений является определение уровня половых гормонов в сыворотке крови (Карнищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: справочник. Медицинские лабораторные технологии. - Санкт-Петербург: Интермедика, 1999. - 656 с.).There are also well-known general clinical methods for the diagnosis of endocrine infertility. The main way to diagnose endodrine disorders is to determine the level of sex hormones in the blood serum (Karnischenko A.I. Medical laboratory technologies and diagnostics: a reference book. Medical laboratory technologies. - St. Petersburg: Intermedika, 1999. - 656 p.).
Показателями, по которым можно судить о гормональном статусе женщины, являются лютеинизирующий гормон (ЛГ), фолликулостимулирующий гормон (ФСГ), пролактин, тестостерон, эстрадиол и дегидроэпиандростерон-сульфат (ДГЭА-сульфат).Luteinizing hormone (LH), follicle-stimulating hormone (FSH), prolactin, testosterone, estradiol and dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA sulfate) are indicators that can be used to judge a woman’s hormonal status.
Для определения гормональной регуляции менструального цикла проводится определение гормонов в крови строго по дням цикла.To determine the hormonal regulation of the menstrual cycle, hormones in the blood are determined strictly according to the days of the cycle.
3-5 день цикла: ЛГ ФСГ Пролактин3-5 day cycle: LH FSH Prolactin
7-10 день цикла: Тестостерон Эстрадиол ДЭА-сульфат7-10 day cycle: Testosterone Estradiol DEA-sulfate
20-21 день цикла: Эстрадиол Прогестерон20-21 day cycle: Estradiol Progesterone
Все гормональные исследования сложны технологически и отличаются большой вариабельностью результатов из-за крайней лабильности регистрируемых показателей и длительности менструального цикла, на который могут влиять различные внешние и внутренние факторы - стресс, соматические острые и хронические заболевания и т.п.All hormonal studies are technologically complex and are characterized by great variability of results due to the extreme lability of the recorded parameters and the duration of the menstrual cycle, which can be influenced by various external and internal factors - stress, somatic acute and chronic diseases, etc.
Для оценки фертильности существуют так же различные функциональные тесты: кольпоцитологические, морфологические, биофизические. Они позволяют косвенно судить о характере гормональной секреции яичников (К.Н. Жмакин и др. Гинекологическая эндокринология, М., стр. 186., 1980) и процессов овуляции. Среди них наиболее распространены измерение базальной температуры, гистологические исследования влагалищных мазков и эндометрия, измерение вязкости цервикальной слизи.To assess fertility, there are also various functional tests: colpositological, morphological, biophysical. They allow you to indirectly judge the nature of hormonal secretion of the ovaries (K.N. Zhmakin et al. Gynecological endocrinology, M., p. 186., 1980) and ovulation processes. Among them, the most common are measurements of basal temperature, histological studies of vaginal smears and endometrium, and measurement of viscosity of cervical mucus.
Все эти тесты носят лишь ориентировочный характер и используются для формирования групп женщин для дальнейшего углубленного исследования. Выполнение этих исследований отличается инвазивностью, субъективной оценкой полученных результатов и, вследствие этого, относительно низкой точностью.All these tests are indicative only and are used to form groups of women for further in-depth research. The performance of these studies is characterized by invasiveness, subjective assessment of the results and, therefore, relatively low accuracy.
Анализ существующих способов диагностики эндокринного бесплодия показал, что ни один из них не может являться прототипом для способа, предлагаемого авторами.Analysis of existing methods for the diagnosis of endocrine infertility showed that none of them can be a prototype for the method proposed by the authors.
Процессы овуляции, по последним данным (Gynecological Endocrinology 2011; 27 (1): 27-32 (doi: 10.3109/09513590.2010.493961) Elissavet Hatzi, Ioanna Bouba, Anna Galidi, Leandros Lazaros, Nectaria Xita, Prodromos Sakaloglou, Georgios Kolios, Eleni Bairaktari, Apostolos Kaponis et al.), регулируются в организме женщины кисспептином.Recent Ovulation Processes (Gynecological Endocrinology 2011; 27 (1): 27-32 (doi: 10.3109 / 09513590.2010.493961) Elissavet Hatzi, Ioanna Bouba, Anna Galidi, Leandros Lazaros, Nectaria Xita, Prodromos Sakaloglou, Georgios Kolios Bairaktari, Apostolos Kaponis et al.), Are regulated in the body of a woman by kisspeptin.
Гормон кисспептин («белок поцелуев»), кодируемый геном kiSS-1, был открыт в 1999 году. Было установлено, что это естественным образом вырабатываемое в организме вещество запускает процесс полового созревания в подростковом возрасте и в дальнейшем отвечает за регуляцию репродуктивной функции организма. Взаимодействие кисспептина и его клеточного рецептора GPR54 в гипоталамусе является определяющим фактором в активации нейронов, высвобождающих гонадолиберин, который, в свою очередь, управляет уровнем секреции ЛГ и ФСГ, от которых зависит возникновение овуляции и возможность зачатия. Система кисспептин/GPR54 активирует гипоталамо-гипофизарно-яичниковую систему, но механизмы этого влияния до конца не ясны (Ann Endocrinol (Paris). 2012 Nov; 73(5):448-58. doi: 10.1016 / j.ando. 2012.07.680. Epub 2012 Sep 20. «Overview of the impact of kisspeptin on reproductive function.)) Sonigo CI, Binart N.)The hormone kisspeptin (the “protein of kisses”), encoded by the kiSS-1 gene, was discovered in 1999. It was found that this substance, which is naturally produced in the body, initiates puberty in adolescence and is further responsible for the regulation of the reproductive function of the body. The interaction of kisspeptin and its cellular receptor GPR54 in the hypothalamus is a determining factor in the activation of neurons releasing gonadoliberin, which, in turn, controls the level of LH and FSH secretion, which determines the occurrence of ovulation and the possibility of conception. The Kisspeptin / GPR54 system activates the hypothalamic-pituitary-ovarian system, but the mechanisms of this influence are not completely understood (Ann Endocrinol (Paris). 2012 Nov; 73 (5): 448-58. Doi: 10.1016 / j.ando. 2012.07.680 Epub 2012 Sep 20. “Overview of the impact of kisspeptin on reproductive function.)) Sonigo CI, Binart N.)
Задачей данного изобретения является определение первичного звена поражения репродуктивной системы женщины, а также оперативность, высокая точность исследования и упрощение процесса диагностики женского эндокринного бесплодия по сравнению с существующими.The objective of the invention is to determine the primary link of the defeat of the female reproductive system, as well as the efficiency, high accuracy of the study and simplification of the diagnosis of female endocrine infertility compared to existing ones.
Поставленная задача достигается тем, что у женщин репродуктивного возраста натощак из кубитальной вены, вне зависимости от фазы менструального цикла, берут 5-10 мл венозной крови и в полученной сыворотке определяют уровень кисспептина, при этом нормальным считают уровень 2,5÷12,0 нг/мл, а эндокринное бесплодие достоверно диагностируют при его значении ниже 1,7 нг/мл.The task is achieved in that women of reproductive age on an empty stomach from the cubital vein, regardless of the phase of the menstrual cycle, take 5-10 ml of venous blood and determine the level of kispeptin in the resulting serum, while the level of 2.5 ÷ 12.0 ng is considered normal / ml, and endocrine infertility is reliably diagnosed with its value below 1.7 ng / ml.
Способ, предложенный авторами, является пионерным, т.к. определение уровня гормона кисспептина как предикт эндокринного бесплодия до настоящего времени не проводилось.The method proposed by the authors is pioneering, because determination of the level of the hormone kispeptin as a predictor of endocrine infertility has not yet been carried out.
На практике способ осуществляют следующим образом. Берут кровь у женщины натощак из кубитальной вены. Количество исследуемого материала 5-10 мл. Взятие крови у пациенток из группы исследования осуществляют вакуумным методом. На пробирке указывают ФИО, дату забора крови. Затем пробирки ставят на плоскую поверхность и оставляют на 20-30 минут до образования сгустка. В лаборатории проводят центрифугирование исследуемого материала при скорости 2000 об/мин в течение 10 минут. Полученную сыворотку помещают в пустую стерильнуюIn practice, the method is as follows. They take blood from a woman on an empty stomach from a cubital vein. The amount of test material 5-10 ml. Blood sampling from patients from the study group is carried out by the vacuum method. On a test tube indicate the name, date of blood sampling. Then the tubes are placed on a flat surface and left for 20-30 minutes until a clot forms. The laboratory centrifuges the test material at a speed of 2000 rpm for 10 minutes. The resulting serum is placed in an empty sterile
пластмассовую пробирку. Сыворотку можно при необходимости заморозить при температуре -20 °C и хранить до 4-х месяцев.plastic test tube. If necessary, whey can be frozen at -20 ° C and stored for up to 4 months.
Для определения кисспептина применяют Иммуноферментный анализ (сокращенно ИФА, англ. enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) - известный и широко применяемый лабораторный иммунологический метод качественного и количественного определения различных соединений, макромолекул, вирусов и пр., в основе которого лежит специфическая реакция антиген-антитело. Выявление образовавшегося комплекса проводят с использованием фермента в качестве метки для регистрации сигнала. Для исследования сыворотки крови на уровень кисспептина используют набор реагентов Кисспептин-54, метастин, 96 (Производство: ВСМ (Boots Contract Manufacturing, Великобритания); Метод: ELISA; Объем: 96; Кат.номер: S-1308) пептидная тест-система. Данный набор реагентов рассчитан на 96 определений.Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA, enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) is a well-known and widely used laboratory immunological method for the qualitative and quantitative determination of various compounds, macromolecules, viruses, etc., based on a specific antigen-reaction. antibody. Identification of the resulting complex is carried out using the enzyme as a label for signal registration. To study blood serum at the level of kispeptin, a set of reagents Kisspeptin-54, metastin, 96 is used (Production: BCM (Boots Contract Manufacturing, Great Britain); Method: ELISA; Volume: 96; Cat.no .: S-1308) peptide test system. This reagent kit is designed for 96 determinations.
Результат исследования - уровень кисспептина у пациентки из группы исследования известен в тот же день.The result of the study - the level of kisspeptin in a patient from the study group is known on the same day.
Т.к. кисспептин является генетически запрограмированым, то на его показатель не влияет день менструального цикла, что позволяет производить исследование однократно в любую фазу. Полученный результат считается достоверным.Because Since kispeptin is genetically programmed, its indicator is not affected by the day of the menstrual cycle, which allows the study to be performed once in any phase. The result obtained is considered reliable.
Для обследования были отобраны группы женщин, у которых по классификации ВОЗ можно было подозревать бесплодие - отсутствие беременности после одного года регулярной половой жизни со здоровым партнером при исключении других причин бесплодия.For the examination, groups of women were selected for whom, according to the WHO classification, infertility could be suspected - the absence of pregnancy after one year of regular sexual activity with a healthy partner, with the exclusion of other causes of infertility.
Для получения референтных диагностических концентраций уровня кисспептина в норме и при патологии были обследованы следующие группы женщин:The following groups of women were examined to obtain reference diagnostic concentrations of kispeptin in normal and pathological conditions:
1. Женщины в возрасте 18-35 лет, имеющие детей, которые не имеют проблем с наступлением беременности, = 212 человек;1. Women aged 18-35 years, having children who have no problems with pregnancy, = 212 people;
2. Женщины в возрасте 18-35 лет, имеющие детей, которые не могли забеременить более одного года при регулярной половой жизни со здоровым партнером и у которых были после комплексного обследования исключены все причины бесплодия, кроме эндокринного, = 171 человек;2. Women aged 18-35 years who have children who could not conceive for more than one year with regular sexual intercourse with a healthy partner and who, after a comprehensive examination, excluded all causes of infertility, except endocrine, = 171 people;
3. Женщины в возрасте 18-35 лет, не имеющие детей, которые были после тщательного обследования отнесены в группу эндокринного бесплодия и проходили процедуру ЭКО, = 46 человек.3. Women aged 18-35 years who do not have children who, after a thorough examination, were assigned to the endocrine infertility group and underwent IVF treatment, = 46 people.
По результатам обследования были установлены референтные значения уровня кисспептина для диагностики эндокринного бесплодия, которые указаны в таблице:According to the results of the survey, reference values of the level of kispeptin for the diagnosis of endocrine infertility were established, which are indicated in the table:
В результате проведенного исследования сделаны выводы, что при концентрации кисспептина в сыворотке крови имеются следующие значения:As a result of the study, it was concluded that at the concentration of kispeptin in serum there are the following values:
- 2,5-12 нг/мл - нормальное содержание;- 2.5-12 ng / ml - normal content;
- 1,7-2,5 нг/мл - умеренное снижение;- 1.7-2.5 ng / ml - moderate decrease;
-<1,7 нг/мл - значительное снижение.- <1.7 ng / ml - significant decrease.
В зависимости от показателей кисспептина в сыворотки крови, можно сделать вывод об этиологии бесплодия у женщины. Преимуществом способа являются:Depending on the indicators of kispeptin in blood serum, it can be concluded about the etiology of infertility in women. The advantage of the method are:
- определение первичного звена причины патологии эндокринного бесплодия;- determination of the primary link of the pathology of endocrine infertility;
- возможность диагностики в амбулаторных условиях;- the possibility of diagnosis in an outpatient setting;
- отсутствие привязки исследования к дням менструального цикла;- the lack of binding research to the days of the menstrual cycle;
- невозможность получения ложноположительных или ложноотрицательных результатов на фоне влияния внешних и внутренних факторов на репродуктивную сферу из-за генетической детерминированности секреции кисспептина в организме женщины;- the impossibility of obtaining false-positive or false-negative results against the background of the influence of external and internal factors on the reproductive sphere due to the genetic determinism of secretion of kisspeptin in the body of a woman;
- простота методики: не требуется никаких дополнительных реагентов, специальных установок для забора крови и проведения иммуноферментного анализа (ИФА). Результат возможно получить пациентке и врачу в день исследования.- simplicity of the method: no additional reagents, special facilities for blood sampling and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) are required. The result can be obtained by the patient and the doctor on the day of the study.
Этот способ позволяет быстро и достоверно определить причину бесплодия и провести дифференциальную диагностику между большим количеством причин эндокринного бесплодия.This method allows you to quickly and reliably determine the cause of infertility and conduct differential diagnosis between a large number of causes of endocrine infertility.
Клинический пример 1:Clinical example 1:
Пациентка С., 33 лет. Обратилась с жалобами на отсутствие беременностей в течение 5 лет. Находится замужем в течение 15 лет, ведет регулярную половую жизнь с мужем, который, по заключению андрологического обследования, не имеет отклонений в функционировании репродуктивной сферы. Не предохраняется 5 лет, но ни разу за эти годы не была беременна. Из анамнеза С: менструации начались в 17 лет, не регулярные, длительностью 1-3 дня. Общие заболевания отрицает. Гинекологические заболевания отрицает. Туберкулезом, гепатитами не болела. Объективно: женщина астенической конституции, оволосение по женскому типу, молочные железы развиты слабо, узкий таз.Patient S., 33 years old. I complained about the absence of pregnancy for 5 years. He has been married for 15 years, leads a regular sex life with her husband, who, according to the conclusion of the andrological examination, has no deviations in the functioning of the reproductive sphere. It is not protected for 5 years, but has never been pregnant during these years. From the anamnesis C: menstruation began at 17 years old, not regular, lasting 1-3 days. Denies common diseases. Gynecological diseases denied. Tuberculosis, hepatitis was not sick. Objectively: a woman with an asthenic constitution, female type hair, the mammary glands are poorly developed, a narrow pelvis.
АД 100 и 60 мм рт.ст. Пульс 70 уд. в минуту.HELL 100 and 60 mm Hg Pulse 70 beats. per minute.
Влагалищное исследование: Наружные половые органы развиты правильно, влагалище узкое. Шейка матки отклонена кзади, плотная, длиной 3 см. Матка не увеличена. Придатки не пальпируются с двух сторон. Своды глубокие, параметрии свободные.Vaginal examination: The external genitalia are developed correctly, the vagina is narrow. The cervix is deflected posteriorly, tight, 3 cm long. The uterus is not enlarged. Appendages are not palpable on both sides. The vaults are deep, the parameters are free.
Измерение ректальной температуры показало монофазную кривую, что подтверждает ановуляторный цикл. Анализ на ФСГ и ЛГ показал снижение их уровня независимо от фазы цикла.Measurement of rectal temperature showed a monophasic curve, which confirms the anovulatory cycle. Analysis for FSH and LH showed a decrease in their level, regardless of the phase of the cycle.
Уровень кисспептина составил 1,43 нг/мл.Kisspeptin level was 1.43 ng / ml.
Клинический пример 2:Clinical example 2:
Женщина К., 30 лет. Жалоб нет. Находится замужем в течение 10 лет. Ведет регулярную половую жизнь. Имеет двоих детей.Woman K., 30 years old. There are no complaints. Married for 10 years. Leads a regular sex life. Has two children.
Из анамнеза К.: месячные с 14 лет по 5 дней регулярные. Воспалительных заболеваний нет .Хронических соматических заболеваний нет. Гинекологические заболевания отрицает.From the anamnesis of K.: monthly from 14 years to 5 days regular. There are no inflammatory diseases. There are no chronic somatic diseases. Gynecological diseases denied.
Первые роды срочные самопроизвольные, без особенностей. Родился мальчик 3430/55 см. Вторые роды через два года срочные самопроизвольные, без особенностей. Родился мальчик 3500/56 см. Оба ребенка здоровы.The first birth is urgent spontaneous, without features. A boy was born 3430/55 cm. Second birth after two years, urgent spontaneous, without features. A boy was born 3500/56 cm. Both children are healthy.
Объективно: женщина нормального телосложения, оволосение по женскому типу. Молочные железы развиты правильно. АД 120 и 80 мм рт.ст. Пульс 65 уд. в минуту.Objectively: a woman of normal physique, female type hair. The mammary glands are developed correctly. HELL 120 and 80 mm Hg Pulse 65 beats per minute.
Влагалищное исследование: Наружные половые органы развиты правильно, влагалище узкое. Шейка матки отклонена кзади, плотная, длиной 3 см. Матка не увеличена. Придатки не пальпируются с двух сторон. Своды глубокие, параметрии свободные.Vaginal examination: The external genitalia are developed correctly, the vagina is narrow. The cervix is deflected posteriorly, tight, 3 cm long. The uterus is not enlarged. Appendages are not palpable on both sides. The vaults are deep, the parameters are free.
Анализ ФСГ и ЛГ показал их нормальное значение.Analysis of FSH and LH showed their normal value.
Уровень кисспептина у женщины составил 8,7 нг/мл.The level of kisspeptin in a woman was 8.7 ng / ml.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014146971/15A RU2574669C2 (en) | 2014-11-21 | Instant diagnostic technique for female endocrine infertility |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014146971/15A RU2574669C2 (en) | 2014-11-21 | Instant diagnostic technique for female endocrine infertility |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014146971A RU2014146971A (en) | 2015-04-10 |
| RU2574669C2 true RU2574669C2 (en) | 2016-02-10 |
Family
ID=
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2712627C1 (en) * | 2019-07-10 | 2020-01-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Method for infertility prediction in females with hypothalamic syndrome |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1685393A1 (en) * | 1988-03-30 | 1991-10-23 | Институт Физиологии Им.И.П.Павлова | Method for diagnosis of female endocrine infertility (aphoria) |
| WO2004101747A2 (en) * | 2003-05-07 | 2004-11-25 | The General Hospital Corporation | Identification and use of gpr54 and its ligands for reproductive disorders and contraception |
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1685393A1 (en) * | 1988-03-30 | 1991-10-23 | Институт Физиологии Им.И.П.Павлова | Method for diagnosis of female endocrine infertility (aphoria) |
| WO2004101747A2 (en) * | 2003-05-07 | 2004-11-25 | The General Hospital Corporation | Identification and use of gpr54 and its ligands for reproductive disorders and contraception |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Votsib E., Roussos D., Katsikis I., Karkanaki A., Kita M., and Panidis D. Kisspeptins: a multifunctional peptide system with a role in reproduction, cancer and the cardiovascular system. Hippokratia. 2008; 12(4) p.205-210. Yasuko Horikoshi et.al. Dramatic Elevation of Plasma Metastin Concentrations in Human Pregnancy: Metastin as a Novel Placenta-Derived Hormone in Humans. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism 2003. N88(2), p.914-919. Mead E.J. Kisspeptins: a multifunctional peptide system with a role in reproduction, cancer and the cardiovascular system. British Journal of Pharmacology 2007. N151, p.1143"1153. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2712627C1 (en) * | 2019-07-10 | 2020-01-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Method for infertility prediction in females with hypothalamic syndrome |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ben-Nagi et al. | The effect of hysteroscopic polypectomy on the concentrations of endometrial implantation factors in uterine flushings | |
| Davar et al. | Dilatation and curettage effect on the endometrial thickness | |
| Van der Gaast et al. | Impact of ovarian stimulation on mid-luteal endometrial tissue and secretion markers of receptivity | |
| Pavone et al. | The progressive simplification of the infertility evaluation | |
| Hezelgrave et al. | Tests to predict imminent delivery in threatened preterm labour | |
| Bumbuliene et al. | Uterine size and ovarian size in adolescents with functional hypothalamic amenorrhoea | |
| RU2572340C1 (en) | Method of predicting progression of mild intraepithelial neoplasia in women of young and first period of mature age | |
| RU2574669C2 (en) | Instant diagnostic technique for female endocrine infertility | |
| WO2011098783A1 (en) | Markers for preterm labour and subsequent delivery | |
| RU2617061C1 (en) | Method of assessment of readiness of females with chronic endometritis to extracorporeal fertilization | |
| RU2654685C1 (en) | Method of early non-invasive diagnostics of adenomyosis | |
| RU2681219C1 (en) | Method for predicting the recurrence of endometrial cysts after surgical treatment by means of immunohistochemical markers | |
| Bogavac et al. | The role of insulin-like growth factor in prediction and prevention of preterm delivery | |
| Kariman et al. | The role of vaginal prolactin in diagnosis of premature rupture of membranes | |
| RU2407015C1 (en) | Method of abortion threat prediction | |
| RU2735218C1 (en) | Method for prediction of implantation in programs of ancillary reproductive technology in women of senior reproductive age with tuboperitoneal infertility factor | |
| Al-Bayati et al. | Vaginal washing fluid B-HCG levels for detecting premature rupture of membranes | |
| Creswell et al. | Preterm Birth: Screening and Prediction | |
| Bhattacharya et al. | Management of Infertility for the MRCOG and Beyond | |
| RU2807923C1 (en) | Method of female fertility diagnostics | |
| RU2785487C1 (en) | Method for predicting ejaculate infertility in men | |
| Kolev et al. | COMBINED APPLICATION OF PLACENTAL ALPHA MICROGLOBULIN-1 (PAMG-1) AND INSULIN-LIKE GROWTH FACTOR IN THE DIAGNOSIS OF PRETERM BIRTH-OUR RESULTS | |
| RU2540499C1 (en) | Method for prediction of anembryonic pregnancy | |
| RU2750159C1 (en) | Method for diagnosis of premature ovarian insufficiency | |
| Hizkiyahu et al. | Initial Investigation of the Infertile Couple |