RU2570624C2 - STRAIN Bacillus atrophaeus ARCIM-11474, POSSESSING FUNGICIDAL PROPERTIES AND GROWTH-STIMULATING ACTIVITY - Google Patents
STRAIN Bacillus atrophaeus ARCIM-11474, POSSESSING FUNGICIDAL PROPERTIES AND GROWTH-STIMULATING ACTIVITY Download PDFInfo
- Publication number
- RU2570624C2 RU2570624C2 RU2014108910/10A RU2014108910A RU2570624C2 RU 2570624 C2 RU2570624 C2 RU 2570624C2 RU 2014108910/10 A RU2014108910/10 A RU 2014108910/10A RU 2014108910 A RU2014108910 A RU 2014108910A RU 2570624 C2 RU2570624 C2 RU 2570624C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- growth
- bacillus atrophaeus
- vkpm
- plants
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и сельскохозяйственной микробиологии, в частности к штамму Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474, обладающему выраженными фунгицидными и ростостимулирующими свойствами, который может быть использован для получения средств для защиты сельскохозяйственных культур от различных заболеваний, вызываемых фитопатогенными грибами, улучшения фитосанитарного состояния почв и стимуляции роста сельскохозяйственных культур.The invention relates to biotechnology and agricultural microbiology, in particular to a strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474, which has pronounced fungicidal and growth-promoting properties, which can be used to obtain funds for protecting crops from various diseases caused by phytopathogenic fungi, improving the phytosanitary condition of soils and stimulation of crop growth.
Известен штамм Bacillus subtilis В-14 (см. патент РФ №2337955, 2008), используемый для защиты сельскохозяйственных растений от фитопатогенных грибов. Недостатками данного штамма является невысокая фунгицидная активность в отношении фитопатогенных грибов - зоны подавления роста тест-культур небольшие: Alternaria alternata - 18-22 мм; Fusarium graminearum - 12-14 мм. Штамм Bacillus subtilis В-14 продуцирует умеренное количество индол-уксусной кислоты, поэтому оказывает небольшое ростостимулирующее действие на растения. Данный штамм оказывает ограниченное действие на заболеваемость сельскохозяйственный культур - действие направлено на возбудителей корневых гнилей сельскохозяйственный культур, в частности пшеницы.A known strain of Bacillus subtilis B-14 (see RF patent No. 2337955, 2008), used to protect agricultural plants from phytopathogenic fungi. The disadvantages of this strain is low fungicidal activity against phytopathogenic fungi - the zones of inhibition of growth of test cultures are small: Alternaria alternata - 18-22 mm; Fusarium graminearum - 12-14 mm. The strain Bacillus subtilis B-14 produces a moderate amount of indole-acetic acid, therefore, has a slight growth-promoting effect on plants. This strain has a limited effect on the incidence of crops - the action is aimed at pathogens of root rot of crops, in particular wheat.
Известен штамм Bacillus subtilis 8-а (см. патент РФ №2495119, 2013), обладающий фунгицидной активностью против фитопатогенных грибов, а также ростстимулирующей активностью по отношению к различным сельскохозяйственным культурам. Недостатками использования данного штамма является небольшой спектр фитопатогенных грибов при исследовании фунгицидной активности штамма, а также невысокая фунгицидная активность в отношении фитопатогенных грибов - Fusarium culmorum - 16,5 мм; Fusarium graminearum - 17,3 мм.A known strain of Bacillus subtilis 8-a (see RF patent No. 2495119, 2013), having fungicidal activity against phytopathogenic fungi, as well as growth-promoting activity in relation to various crops. The disadvantages of using this strain is a small spectrum of phytopathogenic fungi in the study of the fungicidal activity of the strain, as well as low fungicidal activity against phytopathogenic fungi - Fusarium culmorum - 16.5 mm; Fusarium graminearum - 17.3 mm.
Наиболее близким к предлагаемому штамму, взятым за прототип, является штамм Bacillus atrophaeus SKD-1 (см. ст. Коряжкина М.Ф. «Использование культуры Bacillus atrophaeus SKD-1 для разработки биопрепарата с фунгицидными свойствами». Первые Международные Беккеровские чтения. Сборник научных трудов по материалам конференции 27-29 мая, Волгоград, 2009 г., в 2-х частях, Ч. 2. С. 121-123), выделенный из аллювиально-луговой почвы Астраханской области. Штамм Bacillus atrophaeus SKD-1 обладает фунгицидной активностью по отношению к фитопатогенным грибам: Alternaria species, Fusarium graminearum, Fusarium culmorum, Phytium ultimum, Cladosporium species. Доказана фитостимулирующая активность штамма Bacillus atrophaeus SKD-1 в биотесте на семенах кресс-салата и в вегетационном опыте на томате сорта «Победитель».The closest to the proposed strain, taken as a prototype, is a strain of Bacillus atrophaeus SKD-1 (see Art. Koryazhkina MF “Using the culture of Bacillus atrophaeus SKD-1 to develop a biological product with fungicidal properties.” The First International Becker Readings. Collection of scientific Proceedings of the conference on May 27-29, Volgograd, 2009, in 2 parts, Part 2. P. 121-123), isolated from alluvial-meadow soil of the Astrakhan region. The strain Bacillus atrophaeus SKD-1 has fungicidal activity against phytopathogenic fungi: Alternaria species, Fusarium graminearum, Fusarium culmorum, Phytium ultimum, Cladosporium species. The phytostimulating activity of the Bacillus atrophaeus SKD-1 strain in the biotest on watercress seeds and in the vegetative experiment on tomato variety Pobeditel was proved.
Недостатками данного штамма является недостаточно высокая фунгицидная активность в отношении ряда фитопатогенных грибов {Alternaria species, Fusarium graminearum, Fusarium culmorum, Cladosporium species). Вегетационные испытания штамма Bacillus atrophaeus SKD-1 проводились в вегетационных сосудах с грунтом, а не в открытом грунте, что не дает возможности изучить влияние штамма на заболеваемость и урожайность сельскохозяйственных культур в полевых условиях. Недостаточная продолжительность эксперимента (37 дней) не позволяет проследить весь цикл вегетации сельскохозяйственных культур (от посадки до получения урожая).The disadvantages of this strain is not sufficiently high fungicidal activity against a number of phytopathogenic fungi (Alternaria species, Fusarium graminearum, Fusarium culmorum, Cladosporium species). Vegetation tests of the strain Bacillus atrophaeus SKD-1 were carried out in vegetation vessels with soil, and not in open ground, which makes it impossible to study the effect of the strain on the incidence and yield of crops in the field. The insufficient duration of the experiment (37 days) does not allow to trace the entire cycle of vegetation of crops (from planting to harvest).
Технической задачей заявляемого изобретения является выделение штамма с широким спектром свойств: антагонистических, фунгицидных и ростстимулирующих.The technical task of the invention is the selection of a strain with a wide range of properties: antagonistic, fungicidal and growth-promoting.
Технический результат - стимуляция защиты сельскохозяйственных культур от фитопатогенных грибов и их роста с помощью заявляемого штамма.The technical result is the stimulation of the protection of crops from phytopathogenic fungi and their growth using the inventive strain.
Он достигается тем, что заявляемый штамм Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 предлагается в качестве средства для защиты сельскохозяйственных культур от фитопатогенных грибов и стимуляции их роста.It is achieved by the fact that the claimed strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 is proposed as a means to protect crops from phytopathogenic fungi and stimulate their growth.
Штамм Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 выделен из городских почв (культуроземов) Астраханской области путем многоступенчатого отбора по следующим признакам: широкий спектр высокой фунгицидной активности к фитопатогенным грибам; высокая ростстимулирующая активность; отсутствие токсического действия на биологические объекты.The strain Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 was isolated from urban soils (culture soils) of the Astrakhan region by multi-stage selection according to the following characteristics: a wide range of high fungicidal activity to phytopathogenic fungi; high growth-promoting activity; lack of toxic effects on biological objects.
Таксономическая принадлежность штамма определена при помощи анализа нуклеотидных последовательностей генов 16S рРНК в базе данных GenBank и RDP-II (Ribosomal Database Project II). Штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов при ФГУП ГосНИИгенетика и имеет коллекционный номер ВКПМ В-11474.The taxonomic affiliation of the strain was determined by analyzing the nucleotide sequences of 16S rRNA genes in the GenBank and RDP-II (Ribosomal Database Project II) database. The strain is deposited in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms at FSUE GosNIIgenetika and has a collection number VKPM V-11474.
Заявляемый штамм характеризуется следующими признаками.The inventive strain is characterized by the following features.
1. Культурально-морфологические признаки1. Cultural and morphological characteristics
Прямые палочковидные клетки, слегка изогнутые с закругленными концами размером 1-5×0,7 мкм, расположены одиночно; имеют эллипсовидные эндоспоры, расположенные в центре клетки; подвижны. На МПА при температуре 28°C через 48 ч культура растет с формированием слегка складчатых мелкоморщинистых колоний с волнистым краем, слизистой консистенции, серо-бежевого цвета. На бобовом агаре при температуре 28°C через 48 ч культура формирует мелкоморщинистых колонии с волнистым краем, светло-бежевого цвета. Морфотип грамположительный.Direct rod-shaped cells, slightly curved with rounded ends 1-5 × 0.7 μm in size, are located singly; have ellipsoidal endospores located in the center of the cell; movable. On MPA at a temperature of 28 ° C after 48 h, the culture grows with the formation of slightly folded, fine wrinkled colonies with a wavy edge, mucous consistency, and gray-beige color. On bean agar at a temperature of 28 ° C after 48 h, the culture forms small-wrinkled colonies with a wavy edge, light beige in color. Gram-positive morphotype.
2. Физиолого-биохимические признаки2. Physiological and biochemical characteristics
Хемоорганогетеротроф с дыхательным типом метаболизма, оптимальной температурой 28°C и оптимумом pH 7,2. Каталазоположителен. В качестве источника углерода способен использовать глюкозу, пропионат, казеин и крахмал. Восстанавливает нитраты, образует кислоту из глюкозы. Растет при температуре 15-37°C, 7% NaCl и на среде с pH 5,7.A chemo-organoheterotroph with a respiratory type of metabolism, an optimum temperature of 28 ° C and an optimum pH of 7.2. Catalase positive. It can use glucose, propionate, casein and starch as a carbon source. Restores nitrates, forms acid from glucose. It grows at a temperature of 15-37 ° C, 7% NaCl and in an environment with a pH of 5.7.
3. Условия культивирования3. Cultivation conditions
Для получения препаративной формы в виде суспензии заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 в качестве питательной используют дешевую среду - бобовый отвар следующего состава (г/л): бобы - 50 г; pH 7,0±0,2. Для получения посевного материала используют стандартную методику: культуру рассевают в пробирки со скошенной средой ПА, инкубируют в условиях термостата при температуре 28°C в течение 48 ч, затем вносят в пробирки по 5 мл 0,85% раствора NaCl, бактериологической петлей снимают с поверхности агара бактериальную массу, встряхивают в течение 5 минут, полученный посевной материал с содержанием клеток и спор 1×108 КОЕ/мл вносят в жидкую питательную среду и выращивают при температуре 28°C в течение 48 ч. При культивировании штамм Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 не нуждается в факторах роста.To obtain a formulation in the form of a suspension of the inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474, a low-cost medium is used as a nutrient - bean broth of the following composition (g / l): beans - 50 g; pH 7.0 ± 0.2. To obtain seed, a standard technique is used: the culture is seeded into tubes with a slanted PA medium, incubated in a thermostat at 28 ° C for 48 hours, then 5 ml of a 0.85% NaCl solution are introduced into the tubes, the bacteriological loop is removed from the surface the agar is the bacterial mass, shaken for 5 minutes, the obtained seed with a cell content and spores of 1 × 10 8 CFU / ml are introduced into the liquid nutrient medium and grown at a temperature of 28 ° C for 48 hours. During cultivation, the Bacillus atrophaeus strain VKPM B- 11474 not well given growth factors.
4. Хранение штамма4. Storage of strain
Для хранения штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 используют метод периодических пересевов на скошенный МПА (3-4 раза в год). После пересевакультивирование штамма ведут при температуре 28°C в течение 48-72 ч, после чего культуру хранят при температуре 4°C.To store the strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 using the method of periodic reseeding on oblique MPA (3-4 times a year). After re-cultivation of the strain is carried out at a temperature of 28 ° C for 48-72 hours, after which the culture is stored at a temperature of 4 ° C.
Заявляемый штамм Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 хранится в коллекции кафедры «Прикладная биология и микробиология» ФГБОУ ВПО АГТУ, во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов.The inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 is stored in the collection of the Department of Applied Biology and Microbiology, FSBEI HPE ASTU, in the All-Russian Collection of Industrial Microorganisms.
Для исследований использовалась суспензия заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 с титром клеток 108 КОЕ/мл.For research, a suspension of the inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 with a cell titer of 10 8 CFU / ml was used.
Применение заявляемого штамма поясняется нижеприведенными примерами.The use of the claimed strain is illustrated by the examples below.
Пример 1. Изучение фунгицидной активности заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474.Example 1. The study of the fungicidal activity of the inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474.
Фунгицидную активность в отношении тест-объектов фитопатогенных грибов определяли методом диффузии в агар с использованием лунок. В качестве тест-объектов использовали фитопатогенные грибы, являющиеся возбудителями различных заболеваний сельскохозяйственных культур: Alternaria species, Fusarium graminearum, Fusarium culmorum, Cladosporium species. Культуры фитопатогенных грибов поддерживали на агаризованной среде Чапека при 24°C и хранили на кафедре «Прикладная биология и микробиология» ФГБОУ ВПО АГТУ.Fungicidal activity against test objects of phytopathogenic fungi was determined by agar diffusion using wells. Phytopathogenic fungi that are the causative agents of various diseases of agricultural crops were used as test objects: Alternaria species, Fusarium graminearum, Fusarium culmorum, Cladosporium species. Cultures of phytopathogenic fungi were maintained on Chapek’s agar medium at 24 ° C and stored at the Department of Applied Biology and Microbiology of FSBEI HPE ASTU.
Для получения суспензии тест-объектов мицелиальную культуру выращивали газоном на поверхности чашки Петри с агаризованной средой Чапека в течение 14 суток. Выросшую спорово-мицелиальную массу брали с поверхности среды бактериологической петлей и вносили в пробирку с 9 мл стерильной дистиллированной воды. 0,5 мл полученной суспензии вносили в стерильные чашки Петри, после чего добавляли остуженный до 40-45°C бобовый агар. После того как среда застыла, стерильным пробочным сверлом вырезали лунки. Параллельно готовили суспензию штамма. Для чего производили смыв с поверхности скошенного агара 10 мл физраствора. 0,1 мл полученной суспензии аккуратно вносили в лунки (титр клеток 108 КОЕ/мл). В центральную лунку вносили 0,1 мл физраствора. Данная лунка является контролем эксперимента. Чашки Петри инкубировали в термостате при 24°C в течение 7 суток (см. методические указания И.С. Дзержинская «Методы выделения, исследования и определения антибиотической активности микроорганизмов, обладающих антагонистическими свойствами». - Астрахань: Изд-во АГТУ, 2005. - 76 с.).To obtain a suspension of test objects, the mycelial culture was grown with a lawn on the surface of a Petri dish with agarized Chapek medium for 14 days. The grown spore-mycelial mass was taken from the surface of the medium with a bacteriological loop and introduced into a test tube with 9 ml of sterile distilled water. 0.5 ml of the resulting suspension was introduced into sterile Petri dishes, after which bean agar cooled to 40-45 ° C was added. After the medium had solidified, holes were cut out with a sterile cork drill. In parallel, a suspension of strain was prepared. For this, 10 ml of saline was washed from the surface of mown agar. 0.1 ml of the resulting suspension was carefully added to the wells (cell titer 10 8 CFU / ml). 0.1 ml of saline was added to the central well. This well is the control of the experiment. Petri dishes were incubated in a thermostat at 24 ° C for 7 days (see I. Dzerzhinskaya guidelines “Methods for isolating, studying and determining the antibiotic activity of microorganisms with antagonistic properties.” - Astrakhan: Publishing House of ASTU, 2005. - 76 s.).
В зоне около контрольной лунки (контроль) наблюдался интенсивный рост мицелия тест-объектов во всех чашках Петри, что говорит о достоверности эксперимента. Возле лунок с внесением суспензии штамма наблюдалось полное отсутствие роста тест-объектов в зоне ингибирования. В условиях непосредственного взаимодействия Bacillus atrophaeus ВКПМ B-11474 формирующийся мицелий плесневых грибов отличался ярко выраженными морфологическими видоизменениями. Под воздействием Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 наблюдалось ограничение развития ростковых трубок с образованием на кончиках растущих гиф плесневых грибов сферопластоподобных структур. Нарушения в развитии гиф приводили к образованию излишне разветвленного, септированного, часто вакуолизированного мицелия, напоминающего нитку бусин. Также было отмечено уменьшение спорообразования.In the zone near the control well (control), an intensive growth of the mycelium of test objects was observed in all Petri dishes, which indicates the reliability of the experiment. Near the wells with the introduction of a suspension of the strain, there was a complete absence of growth of test objects in the inhibition zone. Under the conditions of direct interaction of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474, the forming mycelium of molds was distinguished by pronounced morphological modifications. Under the influence of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474, there was a restriction in the development of germ tubes with the formation of spheroplast-like structures at the ends of growing hyphae of fungi. Disturbances in the development of hyphae led to the formation of an overly branched, septated, often vacuolated mycelium, resembling a string of beads. A decrease in spore formation was also noted.
Оценку уровня фунгицидной активности осуществляли по зонам ингибирования (диаметр стерильных зон в мм) в мицелиальном газоне, образующимся вокруг лунок. Спектр подавляемых фитопатогенных грибов и уровень фунгицидной активности заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 представлен в таблице 1.The fungicidal activity level was estimated by the zones of inhibition (diameter of sterile zones in mm) in the mycelial lawn formed around the holes. The spectrum of suppressed phytopathogenic fungi and the level of fungicidal activity of the claimed strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 are presented in table 1.
Вышеприведенные данные свидетельствуют о более высокой фунгицидной активности заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 по сравнению со штаммом Bacillus atrophaeus SKD-1, предложенным в качестве прототипа. Заявляемый штамм оказывает более активное фунгицидное действие на ряд фитопатогенных грибов: Alternaria species (33 мм), Fusarium graminearum (23 мм), Fusarium culmorum (30 мм), Cladosporium species (40 мм) по сравнению со штаммом Bacillus atrophaeus SKD-1, который оказывает менее выраженное фунгицидное действие на фитопатогенные грибы: Alternaria species (24 мм), Fusarium graminearum (19 мм), Fusarium culmorum (22 мм), Cladosporium species (29 мм).The above data indicate a higher fungicidal activity of the claimed strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 compared with the strain of Bacillus atrophaeus SKD-1, proposed as a prototype. The inventive strain has a more active fungicidal effect on a number of phytopathogenic fungi: Alternaria species (33 mm), Fusarium graminearum (23 mm), Fusarium culmorum (30 mm), Cladosporium species (40 mm) compared to the Bacillus atrophaeus SKD-1 strain, which has a less pronounced fungicidal effect on phytopathogenic fungi: Alternaria species (24 mm), Fusarium graminearum (19 mm), Fusarium culmorum (22 mm), Cladosporium species (29 mm).
Пример 2. Изучение ростстимулирующей активности заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474.Example 2. The study of the growth-promoting activity of the proposed strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474.
Стимулирующий эффект заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 демонстрировали на семенах кресс-салата (сорт «Весенний»). Семена предварительно стерилизовали в 70% этаноле, отмывали их стерильной дистиллированной водой и помещали во влажные камеры стерильным по 50 штук в каждую. После этого семена поливали суспензией Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 (смыв делают 10 мл физраствора) с титром клеток 108 КОЕ/мл. Параллельно ставили контрольные влажные камеры с семенами, политыми физраствором вместо суспензии штамма. Чашки Петри проращивали в люминостате при температуре 25°C. Через 5-7 суток производили подсчеты всхожести семян и учитывали морфометрические показатели проростков (см. учебное пособие Г.М. Зенова «Практикум по биологии почв». - М.: Изд-во МГУ, 2002 - 120 с.).The stimulating effect of the inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 was demonstrated on watercress seeds (Spring variety). Seeds were pre-sterilized in 70% ethanol, washed with sterile distilled water and placed in sterile chambers, 50 pieces each. After that, the seeds were watered with a suspension of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 (10 ml of saline was washed off) with a cell titer of 10 8 CFU / ml. At the same time, control humid chambers were placed with seeds watered with saline instead of a suspension of the strain. Petri dishes were germinated in a luminostat at a temperature of 25 ° C. After 5-7 days, seed germination was calculated and morphometric indicators of seedlings were taken into account (see G. Zenov's training manual “Soil Biology Workshop.” - M.: Moscow State University Publishing House, 2002 - 120 pp.).
Наличие ростстимулирующего действия заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 на семена кресс-салата представлено в таблице 2.The presence of growth-promoting action of the claimed strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 on watercress seeds is presented in table 2.
Заявляемый штамм Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 оказывает более выраженное ростстимулирующее действие (стимулирует рост на 57%) по сравнению со штаммом Bacillus atrophaeus SKD-1 (стимулирует рост на 17%).The inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 has a more pronounced growth-stimulating effect (stimulates growth by 57%) compared with the strain of Bacillus atrophaeus SKD-1 (stimulates growth by 17%).
Пример 3. Изучение влияния заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ B11474 на стимуляцию роста томатов и зараженность фитопатогенными грибами в открытом грунте.Example 3. The study of the effect of the claimed strain of Bacillus atrophaeus VKPM B11474 on the stimulation of tomato growth and infection by phytopathogenic fungi in the open field.
Вегетационный опыт проводят на томате сорта «Подарочный» в открытом грунте ООО «Надежда-2» Камызякского района Астраханской области, по общепринятой методике полевых и вегетационных опытов (см. методические указания Б.А. Доспехов «Методика полевого опыта». - М.: Агропромиздат, 1985. - 351 с.).Vegetation experiment is carried out on tomato of the “Gift” variety in the open ground of LLC “Nadezhda-2” of the Kamyzyaksky district of the Astrakhan region, according to the generally accepted methodology of field and vegetation experiments (see B.A.Dospekh's methodological guidelines “Field experiment technique.” - M .: Agropromizdat, 1985 .-- 351 p.).
Семена томата сеяли в пленочную теплицу. Затем выращенные всходы перед высадкой в открытый грунт опрыскивали суспензией штамма. Суспензию заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 получали путем наращивания биомассы штамма на бобовом отваре с титром клеток 108 КОЕ/мл. Первый пролив суспензии под корень растений осуществили в фазу бутонизации томата, второй пролив - во время цветения. Рассаду томата размещали на однорядковых делянках, с междурядьями в 2,5 м. Расстояние между растениями в ряде составляло 1 м. Вегетационный опыт длился 5 месяцев.Tomato seeds were sown in a film greenhouse. Then, the grown seedlings were sprayed with a suspension of the strain before planting in open ground. A suspension of the inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 was obtained by increasing the biomass of the strain on a bean broth with a cell titer of 10 8 CFU / ml. The first strait of suspension under the root of the plants was carried out in the phase of tomato budding, the second strait during flowering. Tomato seedlings were placed on single row plots, with row spacing of 2.5 m. The distance between plants in the row was 1 m. The vegetation experiment lasted 5 months.
Наступление основных фаз развития растений томата проходило во всех случаях одновременно. Данные биометрических измерений, проведенные во время плодообразования, показывают, что использование заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 не оказывает отрицательного влияния на рост и развитие растений томата (таблица 3).The onset of the main phases of development of tomato plants took place simultaneously in all cases. The biometric measurements carried out during fruit formation show that the use of the inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 does not adversely affect the growth and development of tomato plants (table 3).
Наиболее эффективным видом обработки суспензии заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 является двойной пролив под корень растений. Данный вид обработки максимально стимулирует рост растений и приводит к приросту биомассы.The most effective form of processing a suspension of the inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 is a double strait under the root of the plants. This type of treatment maximally stimulates the growth of plants and leads to an increase in biomass.
Использование суспензии заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 сдерживало развитие альтернариоза, вызываемого фитопатогенными грибами рода Alternaria, на протяжении всего периода эксперимента (таблица 4).The use of a suspension of the inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 restrained the development of alternariosis caused by phytopathogenic fungi of the genus Alternaria, throughout the entire period of the experiment (table 4).
Наиболее высокий показатель биологической эффективности применения суспензии заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 против альтернариоза наблюдался во время цветения 2-й кисти в варианте с обработкой почвы перед посадкой и двукратным проливом под корень растений во время вегетации (на 56,9%). Показатели эффективности этого варианта оставались выше других на протяжении всего периода эксперимента.The highest indicator of the biological effectiveness of using a suspension of the inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 against alternariosis was observed during flowering of the 2nd brush in the variant with tillage before planting and a double spill under the root of the plants during the growing season (56.9%). The performance indicators of this option remained higher than others throughout the entire period of the experiment.
Сдерживание развития альтернариоза на растениях томата способствовало увеличению урожайности (таблица 5).Inhibition of the development of alternariosis in tomato plants contributed to an increase in yield (table 5).
Применение суспензии заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 в варианте с обработкой почвы перед посадкой и двукратным проливом под корень растений во время вегетации дало 17,2% прибавку урожайности и снижение содержания больных плодов в урожае до 0,5%.The use of a suspension of the claimed strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 in a variant with tillage before planting and a double spill under the root of the plants during the growing season yielded a 17.2% increase in yield and a decrease in the content of diseased fruits in the crop to 0.5%.
Заявляемый штамм Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 оказывает более эффективное действие на стимуляцию роста и на прирост зеленой биомассы томатов по сравнению со штаммом Bacillus atrophaeus SKD-1, предложенным в качестве прототипа. Однако томат является овощной культурой, для которой важен больший выход плодовой массы. Штамм Bacillus atrophaeus SKD-1 в вегетационном опыте показал прирост зеленой биомассы томатов, однако из-за непродолжительности опыта (37 дней) не показано влияние штамма на зараженность растений болезнями, вызываемыми фитопатогенными грибами, на выход плодовой массы и урожайность томата.The inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 has a more effective effect on the stimulation of growth and growth of green biomass of tomatoes compared to the strain of Bacillus atrophaeus SKD-1, proposed as a prototype. However, tomato is a vegetable crop, for which a greater yield of fruit mass is important. The strain Bacillus atrophaeus SKD-1 in the growing experiment showed an increase in the green biomass of tomatoes, but due to the short duration of the experiment (37 days) the effect of the strain on the infection of plants with diseases caused by phytopathogenic fungi on the yield of fruit mass and tomato yield was not shown.
Вегетационный опыт заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 длился 5 месяцев - от фазы бутонизации томата до созревания плодов 2 кисти. В результате чего был прослежен весь цикл вегетации томата, который дал возможность изучить влияние заявляемого штамма на зараженность растений альтернариозом и на урожайность томата.The vegetative experience of the inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 lasted 5 months - from the phase of budding of tomato to ripening fruits 2 brushes. As a result, the entire cycle of tomato vegetation was traced, which made it possible to study the effect of the claimed strain on the infection of plants with alternariosis and on tomato productivity.
Заявляемый штамм Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 оказывает влияние на развитие альтернариоза на протяжении всего периода эксперимента, снижая количество заболевших растений и плодов. Сдерживание развития альтернариоза, в свою очередь, способствовало увеличению урожайности томатов и снижению содержания больных плодов в урожае.The inventive strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 affects the development of alternariosis throughout the entire period of the experiment, reducing the number of diseased plants and fruits. Inhibition of the development of alternariosis, in turn, contributed to an increase in tomato yield and a decrease in the content of diseased fruits in the crop.
Положительный эффект заявляемого штамма Bacillus atrophaeus ВКПМ В-11474 заключается в широком спектре высокой фунгицидной активности к фитопатогенным грибам, вызывающим заболевания сельскохозяйственных культур; в стимулирующем действии на рост и развитие сельскохозяйственных культур.The positive effect of the proposed strain of Bacillus atrophaeus VKPM B-11474 lies in a wide range of high fungicidal activity against phytopathogenic fungi that cause diseases of crops; in a stimulating effect on the growth and development of crops.
Источники информацииInformation sources
1. Патент РФ №2337955.1. RF patent №2337955.
2. Патент РФ №2495119.2. RF patent No. 2495119.
3. Коряжкина М.Ф. «Использование культуры Bacillus atrophaeus SKD-1 для разработки биопрепарата с фунгицидными свойствами». Первые Международные Беккеровские чтения. Сборник научных трудов по материалам конференции 27-29 мая, Волгоград, 2009 г., в 2-х частях, Ч. 2. С. 121-123 (прототип).3. Koryazhkina M.F. "Using the culture of Bacillus atrophaeus SKD-1 to develop a biological product with fungicidal properties." First International Becker Readings. The collection of scientific papers on the materials of the conference on May 27-29, Volgograd, 2009, in 2 parts, Part 2. P. 121-123 (prototype).
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014108910/10A RU2570624C2 (en) | 2014-03-06 | 2014-03-06 | STRAIN Bacillus atrophaeus ARCIM-11474, POSSESSING FUNGICIDAL PROPERTIES AND GROWTH-STIMULATING ACTIVITY |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014108910/10A RU2570624C2 (en) | 2014-03-06 | 2014-03-06 | STRAIN Bacillus atrophaeus ARCIM-11474, POSSESSING FUNGICIDAL PROPERTIES AND GROWTH-STIMULATING ACTIVITY |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014108910A RU2014108910A (en) | 2015-09-20 |
| RU2570624C2 true RU2570624C2 (en) | 2015-12-10 |
Family
ID=54147422
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014108910/10A RU2570624C2 (en) | 2014-03-06 | 2014-03-06 | STRAIN Bacillus atrophaeus ARCIM-11474, POSSESSING FUNGICIDAL PROPERTIES AND GROWTH-STIMULATING ACTIVITY |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2570624C2 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2655848C1 (en) * | 2016-12-21 | 2018-05-29 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "ФГБОУ ВО "Астраханский государственный технический университет" | Means for increasing the yield and protecting plants of solanaceae family from phytopathogenic mushrooms |
| RU2791332C1 (en) * | 2022-02-15 | 2023-03-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Красноярский государственный аграрный университет" | Bacterial strain bacillus atrophaeus b-13893 for the preparation of a biological drug against pathogens of fungal diseases of soy |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2099947C1 (en) * | 1996-11-15 | 1997-12-27 | Институт микробиологии и вирусологии НАН Украины | Biopreparation phytosporin for plant protection from illnesses |
| RU2216173C2 (en) * | 2001-05-10 | 2003-11-20 | Закрытое акционерное общество Научно-производственная система "Элита-комплекс" | Method for obtaining preparation for presowing treatment of seeds and vegetating plants of agricultural varieties, fruit trees and berry bushes |
| RU2478290C2 (en) * | 2011-11-11 | 2013-04-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Бациз" | Biological preparation for stimulation of growth and protection of plants from diseases, increase in productivity and soil fertility |
-
2014
- 2014-03-06 RU RU2014108910/10A patent/RU2570624C2/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2099947C1 (en) * | 1996-11-15 | 1997-12-27 | Институт микробиологии и вирусологии НАН Украины | Biopreparation phytosporin for plant protection from illnesses |
| RU2216173C2 (en) * | 2001-05-10 | 2003-11-20 | Закрытое акционерное общество Научно-производственная система "Элита-комплекс" | Method for obtaining preparation for presowing treatment of seeds and vegetating plants of agricultural varieties, fruit trees and berry bushes |
| RU2478290C2 (en) * | 2011-11-11 | 2013-04-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Бациз" | Biological preparation for stimulation of growth and protection of plants from diseases, increase in productivity and soil fertility |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| КОРЯЖКИНА М.Ф. Bacillus atrophaeus SKD- 1 как перспективный штамм для разработки биопрепарата, Экология микроорганизмов. Юг России: экология, развитие, 2010, N4, с. 80-82. * |
| КОРЯЖКИНА М.Ф. Использование культуры Bacillus atrophaeus SKD- 1 для разработки биопрепарата с фунгицидными свойствами, Первые Международные Беккеровские чтения. Сборник научных трудов по материалам конференции 27-29 мая, Волгоград, 2009, ч. 2, с. 121-123. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2655848C1 (en) * | 2016-12-21 | 2018-05-29 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "ФГБОУ ВО "Астраханский государственный технический университет" | Means for increasing the yield and protecting plants of solanaceae family from phytopathogenic mushrooms |
| RU2791332C1 (en) * | 2022-02-15 | 2023-03-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Красноярский государственный аграрный университет" | Bacterial strain bacillus atrophaeus b-13893 for the preparation of a biological drug against pathogens of fungal diseases of soy |
| RU2802234C1 (en) * | 2022-12-05 | 2023-08-23 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Bacterial strain bacillus subtilis subspecies subtilis krd-20 is a producer of fungistatic lipopeptides |
| RU2827176C1 (en) * | 2023-09-11 | 2024-09-23 | Общество с ограниченной ответственностью "ЕВРОБИОХИМ" | Method of using bacillus atrophaeus 119 strain together with mineral fertilizers and ameliorants to increase crop capacity and quality of crops |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2014108910A (en) | 2015-09-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101279044B1 (en) | Pantoea dispersa WCU35 strain, composition for control plant disease and control method of plant disease with same | |
| KR101279027B1 (en) | Bacillus amyloliquefaciens LM11 strain, composition for control plant disease and control method of plant disease with same | |
| BR112016001583B1 (en) | METHODS TO PROMOTE STRESS TOLERANCE AND/OR INTENSE PLANT GROWTH OR SEED GERMINATION, TO INCREASE SEED GERMINATION AND TO REDUCE THE ESTABLISHMENT OF FUNGI OTHER THAN TRICHODERMA HARZIANUM IN A PLANT | |
| BG67257B1 (en) | Bacterial strain of bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum bs89 as a means of increasing plant productivity and their protection against diseases | |
| Kumbar et al. | Evaluation of eggplant rootstocks for grafting eggplant to improve fruit yield and control bacterial wilt disease | |
| RU2495119C1 (en) | STRAIN OF BACTERIA Bacillus subtilis 8A AS AGENT TO INCREASE PRODUCTIVITY OF PLANTS AND THEIR PROTECTION AGAINST PHYTOPATHOGENIC MICROORGANISMS | |
| RU2284353C1 (en) | Strain of microorganism bacillus mycoides var. b. a. for preparing biopreparation used in stimulation of plant growth and protection against diseases | |
| KR20130016917A (en) | Serratia nematodiphila wcu338 strain, composition for control plant disease and control method of plant disease with same | |
| KR101279040B1 (en) | Exiguobacterium acetylicum WCU292 strain, composition for control plant disease and control method of plant disease with same | |
| JP5854517B2 (en) | New strain, root cancer control agent and / or plant seed germination rate improver using the new strain | |
| Mudyiwa et al. | Evaluation of Trichoderma harzianum in controlling damping-off (Pythium spp.) on tomato (Solanum lycopersicum) seedling varieties | |
| RU2695157C1 (en) | Strain of streptomyces carpaticus for protection against insect pests, fungal, viral diseases and stimulation of tomato growth | |
| RU2570624C2 (en) | STRAIN Bacillus atrophaeus ARCIM-11474, POSSESSING FUNGICIDAL PROPERTIES AND GROWTH-STIMULATING ACTIVITY | |
| RU2409660C1 (en) | Bacillus mucilaginosus bacteria strain exhibiting antagonist activity relatively to phytopathogenic microorganisms and ability to transform phosphorus difficult of plants access and application thereof | |
| RU2655848C1 (en) | Means for increasing the yield and protecting plants of solanaceae family from phytopathogenic mushrooms | |
| RU2624032C1 (en) | Strains of bacillus cereus 875 ts microorganism as tools for plant productivity improvement | |
| RU2403719C1 (en) | Method of cultivation of sugar beet | |
| KR101573584B1 (en) | Composition comprising Tsukamurella tyrosinosolvens strain YJR102 for controlling plant diseases and plant-growth promiting effect | |
| RU2692655C2 (en) | Bacillus thuringiensis var. darmstadiensis 56 strain as polyfunctional agent for plant growing | |
| RU2621356C1 (en) | Biophungicide for protecting agricultural crops against diseases and for yield increase | |
| RU2121271C1 (en) | Strain of bacterium pseudomonas lemoignei for preparing a preparation used for growth stimulation and plant protection from fungal phytopathogens during vegetation and at harvest storage | |
| RU2663335C1 (en) | Method of preplant treatment of potato tubers | |
| RU2640286C1 (en) | Fibre flax growing method | |
| RU2607028C1 (en) | Strain of microorganisms achromobacter spanius 10-50-ts2 as agent improving plant resistance to chloride salinity | |
| RU2626174C1 (en) | Agent for pre-sowing treatment of vegetable crop seeds in protected soil conditions |