RU2562588C2 - Set for testing sperm in spots on analysed sample - Google Patents
Set for testing sperm in spots on analysed sample Download PDFInfo
- Publication number
- RU2562588C2 RU2562588C2 RU2013146903/15A RU2013146903A RU2562588C2 RU 2562588 C2 RU2562588 C2 RU 2562588C2 RU 2013146903/15 A RU2013146903/15 A RU 2013146903/15A RU 2013146903 A RU2013146903 A RU 2013146903A RU 2562588 C2 RU2562588 C2 RU 2562588C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mmol
- concentration
- sperm
- test
- spots
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Description
Изобретение относится к области судебно-медицинской экспертизы, а именно к тестовым наборам, и позволяет произвести тестирование спермы в пятнах на исследуемом образце.The invention relates to the field of forensic medical examination, namely to test sets, and allows testing of sperm in spots on the test sample.
Известен набор «Phosphatesmo КМ» для тестирования спермы в пятнах на исследуемом образце, содержащий индикаторную бумагу, специфичную на кислую фосфотазу - КФ (Khaldi N., Miras A., Botti К., Benali L., Gromb S. Evaluation of three rapid detection methods for the forensic identification of seminal fluid in rape cases // J. Forensic Sci. - 2004. - Vol.49, №4. - P. 749-753). При положительной реакции наблюдается фиолетовое окрашивание бумаги. Реакция не является заменой микроскопическому исследованию на живые сперматозоиды.Known kit "Phosphatesmo KM" for testing sperm in spots on the test sample, containing indicator paper specific for acid phosphatase - CF (Khaldi N., Miras A., Botti K., Benali L., Gromb S. Evaluation of three rapid detection methods for the forensic identification of seminal fluid in rape cases // J. Forensic Sci. - 2004. - Vol. 49, No. 4. - P. 749-753). With a positive reaction, violet staining of the paper is observed. The reaction is not a substitute for microscopic examination with live sperm.
Недостаток набора: с помощью индикаторной бумаги (тестовой полоски), входящей в набор, можно выявить лишь общую КФ, которая может быть обнаружена в пятнах на исследуемых образцах за счет присутствия на них как спермы, так и слюны, влагалищных выделений, крови, сока растений, а также за счет загрязнения их бактериальными ферментами.The drawback of the kit: using indicator paper (test strip) included in the kit, you can identify only the total CF, which can be detected in the stains on the test samples due to the presence of sperm and saliva, vaginal discharge, blood, plant juice , as well as due to contamination with their bacterial enzymes.
Простатическая же КФ, которая содержится только в сперме, с помощью этого набора не выявляется.Prostatic CF, which is found only in semen, is not detected with this kit.
Известен тест-набор «Кислая фосфотаза кинетика» фирмы «АБРИС+», содержащий цитратный буфер, тартрат натрия, α-нафтил фосфат и прочный красный TR. Набор используется в медицине для разделения общей и простатической кислой фосфатазы в диагностических целях (Лифшиц В.М., Сидельникова В.И. // Биохимические анализы в клинике. Медицинское информационное издательство, Москва, 2001, стр. 72-74). Этот набор принят авторами за прототип.Known test kit "Acid phosphatase kinetics" company "ABRIS +" containing citrate buffer, sodium tartrate, α-naphthyl phosphate and durable red TR. The kit is used in medicine for the separation of total and prostatic acid phosphatase for diagnostic purposes (Lifshits VM, Sidelnikova VI // Biochemical analyzes in the clinic. Medical Information Publishing House, Moscow, 2001, pp. 72-74). This set is accepted by the authors as a prototype.
Недостатком набора является большой расход дорогостоящих реактивов, значительные временные и трудовые затраты и в связи с этим нецелесообразность использования для целей судебно-медицинской экспертизы.The disadvantage of the set is the high consumption of expensive reagents, significant time and labor costs and, therefore, the inappropriateness of use for the purposes of forensic medical examination.
Техническим результатом изобретения является создание набора для тестирования спермы в пятнах на исследуемом образце, позволяющего значительно удешевить, ускорить и упростить процесс тестирования спермы, обеспечить возможность проведения тестирования спермы в пятнах на исследуемом образце как в лабораторных условиях, так и непосредственно на месте происшествия.The technical result of the invention is the creation of a kit for testing sperm in spots on a test sample, which allows to significantly reduce the cost, speed up and simplify the process of testing sperm, to provide the ability to test sperm in spots on a test sample both in laboratory conditions and directly at the scene.
Указанный технический результат достигается тем, что набор для тестирования спермы в пятнах на исследуемом образце согласно изобретению содержит две тестовые полоски из фильтровальной бумаги, одна из которых пропитана раствором, содержащим:The specified technical result is achieved in that the kit for testing semen in spots on the test sample according to the invention contains two test strips of filter paper, one of which is impregnated with a solution containing:
а другая полоска пропитана раствором, содержащим:and the other strip is saturated with a solution containing:
дистиллированную воду для получения водного экстракта исследуемого образца и емкость для проведения тестирования, при этом чувствительность полосок к сперме составляет не менее 0,00625 мг/мл.distilled water to obtain an aqueous extract of the test sample and the capacity for testing, while the sensitivity of the strips to sperm is at least 0.00625 mg / ml.
Проведенные исследования показали, что тестовые полоски из фильтровальной бумаги, пропитанные реагентами из известного набора «Кислая фосфотаза кинетика», позволяют значительно сократить расход дорогостоящих реагентов. Один комплект реагентов позволяет провести около 2500 тестовых исследований. Для проведения одного исследования на тестирование спермы (разделение общей и простатической кислой фосфатазы) требуется около 30 минут. Набор позволяет провести исследование на месте происшествия. Тестовые полоски в процессе реакции накапливают на себе биоматериал (сперму). Их высушивают, сохраняют и в дальнейшем, при необходимости, используют для других целей судебно-медицинской экспертизы (исследования ДНК, выявления антигенов системы АВО).Studies have shown that test strips of filter paper, impregnated with reagents from the well-known set of “Acidic Phosphatase Kinetics”, can significantly reduce the cost of expensive reagents. One set of reagents allows you to conduct about 2500 test studies. A single sperm test study (separation of total and prostatic acid phosphatase) takes about 30 minutes. The kit allows you to conduct research at the scene. Test strips accumulate biomaterial (sperm) on themselves during the reaction. They are dried, stored and subsequently, if necessary, used for other purposes of the forensic medical examination (DNA research, detection of antigens of the ABO system).
Сущность изобретения иллюстрируется фиг. 1, 2 гдеThe invention is illustrated in FIG. 1, 2 where
на фиг. 1 изображены тестовые полоски 1 (цитратный буфер), 2 (тартрат натрия), емкость 4 для проведения тестирования, емкость со стерильной дистиллированной водой 5;in FIG. 1 shows test strips 1 (citrate buffer), 2 (sodium tartrate),
на фиг. 2 изображен объект, с поверхности которого вырезаны фрагменты для исследуемого образца 3.in FIG. 2 shows an object from the surface of which fragments were cut for the
Тестовые полоски 1 и 2, входящие в набор, приготовлены с использованием реагентов из набора «Кислая фосфотаза кинетика» фирмы «АБРИС+». В состав этого набора входят следующие ингредиенты: цитратный буфер в количестве 50 мл (концентрация 50 ммоль/л); тартрат натрия в количестве 50 мл (концентрация 2 ммоль/л); α-нафтил фосфат в количестве 10×26,5 мг (концентрация 10 ммоль/л); прочный красный TR в количестве 10×3,9 мг (концентрация 1,5 ммоль/л).
Рабочий реагент №1 получают путем растворения содержимого одного флакона α-нафтил фосфата в 10 мл цитратного буфера. Переносят полученный раствор в один из флаконов с прочным красным TR и перемешивают до полного растворения. Рабочий реагент №1 используют для пропитывания тестовой полоски 1 цитратным буфером для обнаружения общей КФ.Working reagent No. 1 is obtained by dissolving the contents of one bottle of α-naphthyl phosphate in 10 ml of citrate buffer. Transfer the resulting solution to one of the vials with strong red TR and mix until completely dissolved. Working reagent No. 1 is used to impregnate the test strip 1 with citrate buffer to detect total CF.
Рабочий реагент №2 получают путем растворения содержимого одного флакона α-нафтил фосфата в 10 мл раствора тартрата натрия. Переносят полученный раствор в новый флакон с прочным красным TR и перемешивают до полного растворения. Рабочий реагент №2 используют для пропитывания тестовой полоски 2 тартратом натрия для обнаружения простатической КФ.Working reagent No. 2 is obtained by dissolving the contents of one bottle of α-naphthyl phosphate in 10 ml of sodium tartrate solution. Transfer the resulting solution to a new vial with a solid red TR and mix until completely dissolved. Working reagent No. 2 is used to impregnate the test strip with 2 sodium tartrate to detect prostatic CF.
Ленты фильтровальной бумаги (шириной 0,3 см и длиной 9-15 см) погружают в емкости, содержащие соответственно рабочий реагент №1 или рабочий реагент №2, не менее чем на 20 секунд для равномерного пропитывания соответствующим буфером. Пропитанные ленты фильтровальной бумаги высушивают в термостате при температуре 56°C в течение 30-40 минут. Высушенные ленты фильтровальной бумаги нарезают на тестовые полоски 1, 2 (реагент №1 и реагент №2) шириной 0,3 см и длиной 1,5 см. Приготовленные таким образом тестовые полоски 1, 2 сохраняют свои свойства в течение не менее 48 часов.Filter paper tapes (0.3 cm wide and 9-15 cm long) are immersed in containers containing, respectively, working reagent No. 1 or working reagent No. 2, for at least 20 seconds to uniformly soak with the appropriate buffer. The impregnated filter paper tapes are dried in a thermostat at a temperature of 56 ° C for 30-40 minutes. Dried filter paper tapes are cut into test strips 1, 2 (reagent No. 1 and reagent No. 2) 0.3 cm wide and 1.5 cm long. The thus prepared
Набор используют следующим образом.The kit is used as follows.
Подготавливают образец для исследования.Prepare a sample for research.
С поверхности объекта исследования вырезают фрагмент или несколько фрагментов размерами 0,5×0,5 см и используют их в качестве исследуемого образца 3. Фрагменты исследуемого образца 3 помещают в емкость 4 и заливают минимально необходимым объемом дистиллированной воды 5. Экстрагируют при температуре 4°C от 18 до 24 часов в условиях лаборатории, либо в течение 30 минут - 1 часа при температуре 15-20°C, если работа ведется непосредственно на месте происшествия.A fragment or several fragments 0.5 × 0.5 cm in size are cut from the surface of the object of study and used as the
Тестирование спермы в приготовленном экстракте исследуемого образца разделяют на 2 этапа.Sperm testing in the prepared extract of the test sample is divided into 2 stages.
1 этап. Обнаружение общей КФ.Stage 1. General CF detection.
В приготовленный водный экстракт (емкость 4) исследуемого образца 3 помещают тестовую полоску 1 с реагентом №1 так, чтобы верхняя часть полоски 1 выступала над жидкостью. Через 15-30 минут после погружения полоски 1 в экстракт исследуемого образца 3 при положительном результате выступающий конец тестовой полоски 1, а затем и вся полоска 1 окрашиваются в красно-коричневый цвет. При отрицательном результате - окраски полоски не наблюдается.In the prepared aqueous extract (capacity 4) of the
2 этап. Обнаружение простатической КФ.2 stage. Detection of prostatic CF.
Второй этап проводят при получении положительного результата тестирования на 1 этапе. В приготовленный водный экстракт исследуемого образца помещают тестовую полоску 2 с реагентом №2 и наблюдают за реакцией, протекающей в емкости 4. Если в течение 15-30 минут окрашивания тестовой полоски 2 не происходит, результат считают положительным. Это объясняется тем, что простатическая КФ блокируется тартратом и после подавления ее ингибитором (тартратом) окрашивания тестовой полоски 2 не происходит. При отрицательном результате тестовая полоска 2 окрашивается в коричневатый цвет. Тестирование является ориентировочным и не является заменой микроскопическому исследованию на живые сперматозоиды.The second stage is carried out upon receipt of a positive test result in stage 1.
Исследования показали, что тестовые полоски 1,2 размером 1,5 см×0,3 см при последовательном их использовании обеспечивают положительный результат тестирования при концентрации спермы в водном экстракте исследуемого образца не менее 0,00625 мг/мл.Studies have shown that test strips 1.2 with a size of 1.5 cm × 0.3 cm, when used successively, provide a positive test result with a concentration of sperm in the aqueous extract of the test sample of at least 0.00625 mg / ml.
Предлагаемый набор для ориентировочного тестирования спермы в пятнах на исследуемом образце отличается дешевизной и простотой использования, позволяет сохранять результаты исследования, которые в дальнейшем могут быть использованы для выделения и типирования ДНК, а также выявления антигенов системы АВО стандартными серологическими реакциями.The proposed kit for indicative testing of sperm in spots on the test sample is notable for its low cost and ease of use, it allows you to save the results of the study, which can be further used for DNA isolation and typing, as well as for detection of ABO system antigens by standard serological reactions.
Claims (1)
а другая полоска пропитана раствором, содержащим:
дистиллированную воду для получения водного экстракта исследуемого образца и емкость для проведения тестирования, при этом чувствительность полосок к сперме составляет не менее 0,00625 мг/мл. A set for testing semen in spots on the test sample, characterized in that it contains two test strips of filter paper, one of which is impregnated with a solution containing:
and the other strip is saturated with a solution containing:
distilled water to obtain an aqueous extract of the test sample and the capacity for testing, while the sensitivity of the strips to sperm is at least 0.00625 mg / ml.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2013146903/15A RU2562588C2 (en) | 2013-10-21 | 2013-10-21 | Set for testing sperm in spots on analysed sample |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2013146903/15A RU2562588C2 (en) | 2013-10-21 | 2013-10-21 | Set for testing sperm in spots on analysed sample |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2013146903A RU2013146903A (en) | 2015-04-27 |
RU2562588C2 true RU2562588C2 (en) | 2015-09-10 |
Family
ID=53283008
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013146903/15A RU2562588C2 (en) | 2013-10-21 | 2013-10-21 | Set for testing sperm in spots on analysed sample |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2562588C2 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2023180900A1 (en) | 2022-03-22 | 2023-09-28 | Me & Laba S.L. | A method of the in-home prevention of the development of the first stage of the emotional stress in a person and/or normalization of the person's psycho-emotional condition at the first stage of the emotional stress in situations related to the suspicion of certain subjects in committing unauthorized sexual acts, a kit for in-home test for the unauthorized sexual act (variants) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU946549A1 (en) * | 1980-03-11 | 1982-07-30 | Астраханский государственный медицинский институт им.А.В.Луначарского | Method of determining sperm presence in forensic medical examination |
SU1682931A1 (en) * | 1989-07-18 | 1991-10-07 | Астраханский государственный медицинский институт им.А.В.Луначарского | Method for sperm identification in forensic medical examination of a spot |
-
2013
- 2013-10-21 RU RU2013146903/15A patent/RU2562588C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU946549A1 (en) * | 1980-03-11 | 1982-07-30 | Астраханский государственный медицинский институт им.А.В.Луначарского | Method of determining sperm presence in forensic medical examination |
SU1682931A1 (en) * | 1989-07-18 | 1991-10-07 | Астраханский государственный медицинский институт им.А.В.Луначарского | Method for sperm identification in forensic medical examination of a spot |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
HOOFT PETER et al. Bayesian Evaluation of the Modified Zinc Test and the Acid Phosphatase Spot Test for Forensic Semen Investigation. The American Journal of Forensic Medicine and Pathology, vol.18(1), March 1997, pp.45-49 . СИДОРОВ В.Л., ГУСАРОВ А.А., ИСАКОВА И.В. Установление наличия спермы на вещественных доказательствах по кислой фосфатазе колориметрическим методом : Методические рекомендации, М., 2012, [он-лайн], [найдено 30.03.2015]. Найдено из Интернет: <URL: http://www.forens-med.ru/book.php?id=2121> * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2023180900A1 (en) | 2022-03-22 | 2023-09-28 | Me & Laba S.L. | A method of the in-home prevention of the development of the first stage of the emotional stress in a person and/or normalization of the person's psycho-emotional condition at the first stage of the emotional stress in situations related to the suspicion of certain subjects in committing unauthorized sexual acts, a kit for in-home test for the unauthorized sexual act (variants) |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2013146903A (en) | 2015-04-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Carruthers et al. | Free fatty acid estimation by a semi-automated fluorimetric method | |
CN103789202A (en) | Container for collecting nucleic acid preserved at normal temperature | |
US9044007B2 (en) | Device and method for ambient storage of fresh/frozen tissue sections via desiccation | |
CN103267760B (en) | Method and kit for detecting illegal cooking oil | |
CN102465167A (en) | Rapid and high-flux acute toxicity test method for luminous bacteria | |
CN105806840B (en) | The kit and detection method of paraquat in qualitative and half-quantitative detection serum or urine | |
KR101683798B1 (en) | Methods for Detecting, Identifying or Counting Microorganism and Systems Using Thereof | |
CN102313735A (en) | Kit for rapidly detecting pH value of water for fishery culture and detection method thereof | |
RU2562588C2 (en) | Set for testing sperm in spots on analysed sample | |
CN102590488B (en) | Method for regulating and controlling vitellogenin level of zebra fishes | |
CN103266164B (en) | Leucine aminopeptidase detection reagent | |
Annino et al. | Determination of 3-methoxy-4-hydroxymandelic acid (VMA) in urine by thin-layer chromatography | |
CN102827933B (en) | Kit for qualitative detection of pinewood nematode and detection method thereof | |
RU2589845C2 (en) | Method for quantitative determination of methylcarbamate benzimidazole derivatives | |
WO2017114406A1 (en) | Method for measuring formaldehyde content in liquid | |
CN106119354A (en) | Pig S.hominis LAMP detection kit and detection method thereof | |
CA2860590A1 (en) | Fixative composition for cytology, cell fixation method and its applications | |
CN106770265A (en) | A kind of kit of quick detection urinary calcium | |
CN104062441B (en) | Method for measuring content of steroid metabolites in dung excrements of sheep | |
RU2430372C1 (en) | Method of determining 2,4-dinitrophenol and 2-amino-4-nitrophenol when both are present in biological fluids | |
Figueroa-Santiago et al. | Purification of Native Fasciola hepatica Fatty Acid-Binding Protein and Induction of Alternative Activation of Human Macrophages | |
JP4021682B2 (en) | Toxin detection method and detection kit using enzyme activity inhibition as an index | |
CN101545836A (en) | Method and device for extracting histiocyte lysate capable of maintaining phosphorylation state of protein | |
BR102014021725A2 (en) | liquid medium for preservation of cytological examination sample cells | |
CN105891190B (en) | One kind being based on chemiluminescent crystal violet detection method |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20161022 |