RU2549475C1 - Pharmaceutical composition possessing therapeutic action on various skin pathologies - Google Patents
Pharmaceutical composition possessing therapeutic action on various skin pathologies Download PDFInfo
- Publication number
- RU2549475C1 RU2549475C1 RU2014119104/15A RU2014119104A RU2549475C1 RU 2549475 C1 RU2549475 C1 RU 2549475C1 RU 2014119104/15 A RU2014119104/15 A RU 2014119104/15A RU 2014119104 A RU2014119104 A RU 2014119104A RU 2549475 C1 RU2549475 C1 RU 2549475C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tryptantrine
- composition
- skin
- wound
- chitosan
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и ветеринарии и касается создания на основе алкалоида триптантрина (коуропитина) фармацевтических композиций, обладающих широким спектром действия, которые могут найти применение для лечения различных кожных патологий человека и животных.The invention relates to medicine and veterinary medicine and relates to the creation of tryptantrine (couropitine) alkaline based pharmaceutical compositions with a wide spectrum of action, which can be used to treat various skin pathologies of humans and animals.
Проблема использования универсальных средств наружного применения, сочетающих различные виды фармакологической активности, постоянно привлекает внимание исследователей, разрабатывающих новые лекарственные препараты. В настоящее время наблюдается нарастающая потребность в комплексных средствах широкого спектра действия, которая определяется, прежде всего, резким возрастанием количества воспалительных заболеваний кожи разной этиологии. Эти заболевания связаны с интенсивным загрязнением окружающей среды, ухудшением функциональной активности иммунной системы и аллергизацией населения, а также формированием штаммов лекарственноустойчивых микроорганизмов, что ограничивает использование существующих препаратов из-за их малой эффективности.The problem of using universal external products that combine various types of pharmacological activity is constantly attracting the attention of researchers developing new drugs. Currently, there is an increasing need for complex agents with a wide spectrum of action, which is determined, first of all, by a sharp increase in the number of inflammatory skin diseases of various etiologies. These diseases are associated with intense environmental pollution, deterioration of the functional activity of the immune system and allergization of the population, as well as the formation of strains of drug-resistant microorganisms, which limits the use of existing drugs because of their low efficiency.
Для лечения кожных повреждений разной этиологии традиционно применяется широкий спектр лекарственных средств - антибиотики, сульфаниламиды, нитрофураны и другие антисептики. Однако повсеместное использование антибиотиков привело к быстрому возникновению и распространению устойчивых штаммов.For the treatment of skin lesions of various etiologies, a wide range of drugs is traditionally used - antibiotics, sulfonamides, nitrofurans and other antiseptics. However, the widespread use of antibiotics has led to the rapid emergence and spread of resistant strains.
Из огромного числа лекарственных средств можно выделить несколько групп по их определенному действию на рану: противовоспалительное, противомикробное, противоаллергическое, ранозаживляющее, противоопухолевое и другие, но имеются и полифункциональные вещества, которые одновременно сочетают указанные выше активности. Последние представляют собой наиболее перспективные и ценные лекарственные средства.Of the huge number of drugs, several groups can be distinguished according to their specific effect on the wound: anti-inflammatory, antimicrobial, antiallergic, wound healing, antitumor and others, but there are also multifunctional substances that simultaneously combine the above activities. The latter are the most promising and valuable drugs.
Триптантрин был выделен в качестве природного антибиотика из целого ряда высших растений, таких как Isatis tinctoria L., Polygonum tinctorium (P. tinctorium), дрожжевидных грибов Candida lypolitica [Jahng Y. Progress in the studies on tryptanthrin, an alkaloid of history // Arch. Pharm. Res. 2013. V. 36(5). P. 517-535], морских микроорганизмов Oceanibulbus indolifex [Wagner-Dobler I. et al. Oceanibulbus indolifex gen. nov., sp.nov., a North Sea alphaproteobacterium that produces bioactive metabolites // Int. J. System. Evol. Microbial. 2004. V. 54. P. 1177-1184], а сравнительно недавно был найден в дрожжевых грибах рода Malassezia, которые являются частью естественного микробиома кожи человека [Vlachos С.et al. Malassezia-derived indoles activate the aryl hydrocarbon receptor and inhibit Toll-like receptor-induced maturation in monocyte-derived dendritic cells // Br. Assoc. Dermatol. 2012. V. 167. P. 496-505].Tryptantrine was isolated as a natural antibiotic from a number of higher plants, such as Isatis tinctoria L., Polygonum tinctorium (P. tinctorium), yeast Candida lypolitica [Jahng Y. Progress in the studies on tryptanthrin, an alkaloid of history // Arch . Pharm. Res. 2013.V. 36 (5). P. 517-535], marine microorganisms Oceanibulbus indolifex [Wagner-Dobler I. et al. Oceanibulbus indolifex gen. nov., sp.nov., a North Sea alphaproteobacterium that produces bioactive metabolites // Int. J. System. Evol. Microbial 2004. V. 54. P. 1177-1184], and relatively recently it was found in yeast fungi of the genus Malassezia, which are part of the natural microbiome of human skin [Vlachos C. et al. Malassezia-derived indoles activate the aryl hydrocarbon receptor and inhibit Toll-like receptor-induced maturation in monocyte-derived dendritic cells // Br. Assoc. Dermatol. 2012. V. 167. P. 496-505].
Важное патобиологическое значение триптантрина как вторичного метаболита этих дрожжей, возможно, состоит в том, что он, как и естественные компоненты иммунной системы кожи человека, принимает участие в ингибировании патологических воспалительных процессов, например, при разноцветном лишае и себорейном дерматите [Gaitanis G. et al. The Malassezia genus in skin and systemic diseases // Clin. Microbiol. Rev. 2012. V. 25. P. 106-141; Hay R.J. Malassezia, dandruff and seborrhoeic dermatitis: an overview // Br. J. Dermatol. 2011. V. 165 (Suppl. 2). P. 2-8].The important pathobiological significance of tryptantrine as a secondary metabolite of these yeasts, perhaps, lies in the fact that, like the natural components of the human skin’s immune system, it takes part in the inhibition of pathological inflammatory processes, for example, in multi-colored lichen and seborrheic dermatitis [Gaitanis G. et al . The Malassezia genus in skin and systemic diseases // Clin. Microbiol. Rev. 2012. V. 25. P. 106-141; Hay R.J. Malassezia, dandruff and seborrhoeic dermatitis: an overview // Br. J. Dermatol. 2011. V. 165 (Suppl. 2). P. 2-8].
Триптантрин обладает качествами сильного противовоспалительного агента, являясь специфическим ингибитором циклоксигеназы СОХ-2 (в дозе 1.5 мкМ подавляет ее активность на 50%) и 5-липоксигеназы (5-LOX) - ферментов, экспрессия которых резко возрастает в период резкого развития воспалительных процессов. В низких дозах триптантрин ингибирует продукцию макрофагами как NO, так и простагландина E2 и имеет двойной ингибирующий эффект на провоспалительные ферменты активированных макрофагов [Pergola С.et al. On the inhibition of 5-lipoxygenase product formation by tryptanthrin: mechanistic studies and efficacy in vivo // Brit. J. Pharm. 2012. V. 165. P. 765-776].Tryptantrine has the qualities of a strong anti-inflammatory agent, being a specific inhibitor of cyclooxygenase COX-2 (at a dose of 1.5 μM it inhibits its activity by 50%) and 5-lipoxygenase (5-LOX) - enzymes whose expression increases sharply during the period of sharp development of inflammatory processes. In low doses, tryptantrine inhibits macrophage production of both NO and prostaglandin E 2 and has a double inhibitory effect on the pro-inflammatory enzymes of activated macrophages [Pergola C. et al. On the inhibition of 5-lipoxygenase product formation by tryptanthrin: mechanistic studies and efficacy in vivo // Brit. J. Pharm. 2012. V. 165. P. 765-776].
Известна иммуностимулирующая композиция, которая включает, триптантрин или его производные, а также вещества или экстракты из шишек хмеля и розмарина, в том числе разнообразные тритерпены, дитерпеновые лактоны и их конъюгированные производные [WO 2004037180, 2004.05.06].Known immunostimulating composition, which includes tryptantrine or its derivatives, as well as substances or extracts from hop cones and rosemary, including a variety of triterpenes, diterpen lactones and their conjugated derivatives [WO 2004037180, 2004.05.06].
В патенте [US 2007184133, 2007.08.09] указывается на механизм иммуностимулирующего эффекта такой синергетической композиции, связанной с ингибированием СОХ-2 и синтеза простагландинов, в частности простагландина E2.The patent [US 2007184133, 2007.08.09] indicates the mechanism of the immunostimulating effect of such a synergistic composition associated with inhibition of COX-2 and the synthesis of prostaglandins, in particular prostaglandin E 2 .
Триптантрин может тормозить каскад арахидоновой кислоты, а также синтез NO, провоспалительных простагландинов и лейкотриенов [Ishihara Т. et al. Tryptanthrin inhibits nitric oxide and prostaglandin E(2) synthesis by murine macrophages // Eur. J. Pharmacol., 2000; 407, 197-204]. По своей противовоспалительной активности триптантрин близок к современному коммерческому препарату зилеутону, который является специфическим хелатором ионов железа в активном центре фермента 5-LOX [Pergola С. et al. On the inhibition of 5-lipoxygenase product formation by tryptanthrin: mechanistic studies and efficacy in vivo // Brit. J. Pharm. 2012. V. 165. P. 765-776].Tryptantrine can inhibit the cascade of arachidonic acid, as well as the synthesis of NO, pro-inflammatory prostaglandins and leukotrienes [Ishihara T. et al. Tryptanthrin inhibits nitric oxide and prostaglandin E (2) synthesis by murine macrophages // Eur. J. Pharmacol., 2000; 407, 197-204]. In its anti-inflammatory activity, tryptantrine is close to the modern commercial preparation zileuton, which is a specific chelator of iron ions in the active center of the 5-LOX enzyme [Pergola C. et al. On the inhibition of 5-lipoxygenase product formation by tryptanthrin: mechanistic studies and efficacy in vivo // Brit. J. Pharm. 2012. V. 165. P. 765-776].
Следует отметить, что триптантрин обладает высоким противовоспалительным потенциалом при дерматологических заболеваниях, ингибируя активность тимического стромального лимфопоэтина и других цитокинов, которые играют решающую роль в развитии кожных воспалительных заболеваний [Han N.R. et al. Tryptanthrin ameliorates atopic dermatitis through down-regulation of TSLP. Arch Biochem Biophys. 2014. V. 542. P. 14-20]. В составе комплекса индольных соединений (индирубин, индиго, изатин и др.) или экстрактов, выделенных из различных растений, триптантрин применяется в Восточной медицине для лечения дерматозов различной этиологии и повреждений кожи, вызванных псориазом [Lin Y.K. et al. Indigo naturalis upregulates claudin-1 expression in human keratinocytes and psoriatic lesions. J. Ethnopharmacol. 2013. V. 145(2). P. 614-620]. Характерно, что экстракт из растения Indigo naturalis, содержащий в качестве главных компонентов триптантрин, индирубин и индиго, обладает выраженными лечебными свойствами при кожных заболеваниях, в частности псориазе, повышая синтез важного функционального белка кожи клаудина-1 и восстанавливая функцию плотных контактов у кератиноцитов [Lin Y.K. et al. Indigo naturalis upregulates claudin-1 expression in human keratinocytes and psoriatic lesions // J. Ethnopharmacol. 2013. V. 30, №145(2). P. 614-620].It should be noted that tryptantrine has a high anti-inflammatory potential in dermatological diseases, inhibiting the activity of thymic stromal lymphopoietin and other cytokines, which play a decisive role in the development of skin inflammatory diseases [Han N.R. et al. Tryptanthrin ameliorates atopic dermatitis through down-regulation of TSLP. Arch Biochem Biophys. 2014. V. 542. P. 14-20]. As part of a complex of indole compounds (indirubin, indigo, isatin, etc.) or extracts isolated from various plants, tryptantrine is used in Eastern medicine to treat dermatoses of various etiologies and skin lesions caused by psoriasis [Lin Y.K. et al. Indigo naturalis upregulates claudin-1 expression in human keratinocytes and psoriatic lesions. J. Ethnopharmacol. 2013.V. 145 (2). P. 614-620]. It is characteristic that the extract from the Indigo naturalis plant, containing tryptantrine, indirubin, and indigo as the main components, has pronounced healing properties for skin diseases, in particular psoriasis, increasing the synthesis of the important functional skin protein claudin-1 and restoring the function of tight contacts in keratinocytes [Lin Yk et al. Indigo naturalis upregulates claudin-1 expression in human keratinocytes and psoriatic lesions // J. Ethnopharmacol. 2013. V. 30, No. 145 (2). P. 614-620].
Важным является и то, что триптантрин проявляет выраженное противомикробное действие в отношении различных видов стафилакокков (Staphylococcus aureus, S. epidermis и метициллин-резистентного штамма S. aureus). По своей эффективности противомикробного действия триптантрин сравним с Р-лактамными антибиотиками [Chiang Y.R. et al. An in vitro study of the antimicrobial effects of indigo naturalis prepared from Strobilanthes formosanus Moore // Molecules. 2013. V. 18(11). P. 14381-14396]. В дозах, близких к 1 мкг/мл, триптантрин ингибирует на 50% также рост таких патогенных микроорганизмов, как В. subtilis [Schindler F., Zahner H. Metabolic products of microorganisms. 91. Tryptanthrin, a tryptophan derived antibiotic from Candida lipolytica // Arch. Microbiol. 1971. V. 79. P. 187-203] и микобактерии туберкулеза Mycobacterium tuberculosis [Hwang J.M. et al. Design, synthesis, and structure-activity relationship studies of tryptanthrins as antitubercular agents // J. Nat. Prod. 2013. V. 76(3). P. 354-367]. Недавно было высказано предположение, что он ингибирует рост патогенных микроорганизмов путем интеркалирования в микробную ДНК [Bandekar P.P. et al. Antimicrobial activity of tryptanthrins in Escherichia coli // J. Med. Chem. 2010. V. 53. P. 3558-3565].It is also important that tryptantrine exhibits a pronounced antimicrobial effect against various types of staphylococci (Staphylococcus aureus, S. epidermis and methicillin-resistant strain S. aureus). In its antimicrobial efficacy, tryptantrine is comparable to P-lactam antibiotics [Chiang Y.R. et al. An in vitro study of the antimicrobial effects of indigo naturalis prepared from Strobilanthes formosanus Moore // Molecules. 2013.V. 18 (11). P. 14381-14396]. At doses close to 1 μg / ml, tryptantrine also inhibits by 50% the growth of pathogenic microorganisms such as B. subtilis [Schindler F., Zahner H. Metabolic products of microorganisms. 91. Tryptanthrin, a tryptophan derived antibiotic from Candida lipolytica // Arch. Microbiol. 1971. V. 79. P. 187-203] and Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium tuberculosis [Hwang J.M. et al. Design, synthesis, and structure-activity relationship studies of tryptanthrins as antitubercular agents // J. Nat. Prod. 2013.V. 76 (3). P. 354-367]. Recently, it has been suggested that it inhibits the growth of pathogenic microorganisms by intercalation into microbial DNA [Bandekar P.P. et al. Antimicrobial activity of tryptanthrins in Escherichia coli // J. Med. Chem. 2010. V. 53. P. 3558-3565].
В дозах, сравнимых с дозами гризеофульвина, триптантрин также является высокоспецифическим антифунгальным агентом, проявляя активность против дерматофитов, в особенности в отношении Trichophyton mentagraphites, вызывающих стригущий лишай [Honda G. et al. The antimicrobial specificity of tryptanthrin // Planta Med. 1979. V. 37. P. 172-174]. Триптантрин обладает высокой специфичностью действия на возбудителей других заболеваний, включая Helicobacter pylori - основной микробный фактор, ответственный за развитие язвы желудка, и протозойные инфекции [Scovill J. et al. // Antimicrob Agents Chemother. 2002. V. 46(3). P. 882-883].At doses comparable to those of griseofulvin, tryptantrine is also a highly specific antifungal agent, showing activity against dermatophytes, especially against Trichophyton mentagraphites causing ringworm [Honda G. et al. The antimicrobial specificity of tryptanthrin // Planta Med. 1979. V. 37. P. 172-174]. Tryptantrine has a high specificity of action on pathogens of other diseases, including Helicobacter pylori, the main microbial factor responsible for the development of gastric ulcers, and protozoal infections [Scovill J. et al. // Antimicrob Agents Chemother. 2002. V. 46 (3). P. 882-883].
Показано также, что триптантрин обладает антиканцерогенной активностью. При пероральном введении в дозе 50 мг/кг, триптантрин уменьшает количество случаев рака кишечника у крыс, индуцированного азоксиметаном [Koya-Miyata S. et al. Prevention of azoxymethane-induced intestinal tumors by a crude ethyl acetate-extract and tryptanthrin extracted from Polygonum tinctorium Lour // Anticancer Res. 2001. V. 21. P. 3295-3300]. Кроме этого триптантрин супрессирует колиты, индуцируемые декстран сульфатом у мышей, вероятно путем ингибирования продукции интерлейкина-2 активированными клетками селезенки [Micallef М.J. et al. The natural plant product tryptanthrin ameliorates dextran sodium sulfate-induced colitis in mice // Int. Immunopharmacol. 2002. V. 2. P. 565-578].Tryptantrine has also been shown to have anticarcinogenic activity. When administered orally at a dose of 50 mg / kg, tryptantrine reduces the number of cases of intestinal cancer in rats induced by azoxymethane [Koya-Miyata S. et al. Prevention of azoxymethane-induced intestinal tumors by a crude ethyl acetate-extract and tryptanthrin extracted from Polygonum tinctorium Lour // Anticancer Res. 2001. V. 21. P. 3295-3300]. In addition, tryptantrine suppresses colitis induced by dextran sulfate in mice, probably by inhibiting the production of interleukin-2 by activated spleen cells [Micallef M.J. et al. The natural plant product tryptanthrin ameliorates dextran sodium sulfate-induced colitis in mice // Int. Immunopharmacol. 2002. V. 2. P. 565-578].
Триптантрин оказывает выраженное цитотоксическое действие in vitro в отношении различных линий опухолевых клеток человека и животных [Jao C.W. et al. Isolation, Structure Elucidation, and Synthesis of Cytotoxic Tryptanthrin Analogues from Phaius mishmensis // J. Nat. Prod. 2008. V. 71. P. 1275-1279]. Интересно, что в низких концентрациях этот алкалоид увеличивает экспрессию маркеров клеточной дифференцировки в человеческих моноцитарных (U-937) и промиелоцитарных (HL-60) лейкемических клетках, что является показателем их дифференцировки в моноциты/макрофаги. После действия высоких концентраций триптантрина в течение 24 ч наблюдается вакуолизация цитоплазмы и деструкция митохондрий. Лейкемические клетки гибнут по пути апоптоза в течение 48 ч после их обработки. Действие триптантрина усиливает Fas-индуцируемый апоптоз и увеличивает активность каспазы 3. Эти данные указывают на то, что низкие дозы триптантрина могут индуцировать дифференцировку лейкемических клеток, а высокие концентрации приводят к их апоптотической гибели [Kimoto Т. et. al. Cell differentiation and apoptosis of monocytic and promyelocytic leukemia cells (U-937 and HL-60) by tryptanthrin, an active ingredient of Polygonum tinctorium Lour//Pathol. Int. 2001. V. 51. P. 315-325].Tryptantrine exerts a pronounced in vitro cytotoxic effect on various human and animal tumor cell lines [Jao C.W. et al. Isolation, Structure Elucidation, and Synthesis of Cytotoxic Tryptanthrin Analogues from Phaius mishmensis // J. Nat. Prod. 2008. V. 71. P. 1275-1279]. Interestingly, at low concentrations, this alkaloid increases the expression of cell differentiation markers in human monocytic (U-937) and promyelocytic (HL-60) leukemic cells, which is an indicator of their differentiation into monocytes / macrophages. After the action of high concentrations of tryptantrine for 24 hours, vacuolization of the cytoplasm and destruction of mitochondria are observed. Leukemic cells die along the path of apoptosis within 48 hours after their treatment. The action of tryptantrine enhances Fas-induced apoptosis and increases caspase 3 activity. These data indicate that low doses of tryptantrine can induce differentiation of leukemic cells, and high concentrations lead to apoptotic death [Kimoto T. et. al. Cell differentiation and apoptosis of monocytic and promyelocytic leukemia cells (U-937 and HL-60) by tryptanthrin, an active ingredient of Polygonum tinctorium Lour // Pathol. Int. 2001. V. 51. P. 315-325].
Триптантрин очень эффективно блокирует действие и подавляет экспрессию различных цитокинов, в частности фактора роста гепатоцитов (HGF), который принимает участие в злокачественной трансформации нормальных клеток, а также в росте, инвазии и метастазировании опухолевых клеток [Motoki Т. et al. Inhibition of hepatocyte growth factor induction in human dermal fibroblasts by tryptanthrin // Biol Pharm Bull. 2005. V. 28(2). P. 260-266].Tryptantrine very effectively blocks the action and inhibits the expression of various cytokines, in particular hepatocyte growth factor (HGF), which is involved in the malignant transformation of normal cells, as well as in the growth, invasion and metastasis of tumor cells [Motoki T. et al. Inhibition of hepatocyte growth factor induction in human dermal fibroblasts by tryptanthrin // Biol Pharm Bull. 2005.V. 28 (2). P. 260-266].
Известно о проявлении триптантрином противоаллергических свойств [JP 2006241080, 2006.09.14].It is known that tryptantrine exhibits antiallergic properties [JP 2006241080, 2006.09.14].
Таким образом, триптантрин обладает широким спектром фармакологического действия, а именно: противовоспалительным, противомикробным, антиканцерогенным, противоопухолевым и дерматозащитным действием, что позволяет создавать на его основе лекарственные средства, которые можно успешно использовать при кожных патологиях различной этиологии.Thus, tryptantrine has a wide spectrum of pharmacological action, namely: anti-inflammatory, antimicrobial, anticarcinogenic, antitumor and dermatoprotective effects, which makes it possible to create drugs based on it that can be successfully used for skin pathologies of various etiologies.
Важным преимуществом триптантрина перед другими природными соединениями является то, что его получают одностадийным синтезом - окислением изатина [Московкина Т.В. и др. Синтез соединений ряда триптантрина путем окисления изатина // Журн. орган. химии. 2013. Т. 49. С. 1760-1763].An important advantage of tryptantrine over other natural compounds is that it is obtained by one-step synthesis - oxidation of isatin [Moskovkina T.V. et al. Synthesis of compounds of the tryptantrine series by oxidation of isatin // Zh. organ. chemistry. 2013.V. 49.P. 1760-1763].
Недостатком триптантрина является его плохая биодоступность, связанная с низкой растворимостью в биологических жидкостях.The disadvantage of tryptantrine is its poor bioavailability, associated with low solubility in biological fluids.
В результате решения задачи по созданию биодоступной композиции на основе триптантрина нами ранее была создана гелевая композиция, обладающая ранозаживляющим, противоожоговым, противовоспалительным, гепатопротекторным, противодиабетическим и противоопухолевым действием. Гелевая композиция содержит триптантрин, хитозан и дистиллированную воду при следующем соотношении ингредиентов, г/л геля: триптантрин 1,5-2,5; хитозан 15,0-25,0; дистиллированная вода - остальное [RU 2366408 C1, 10.2009].As a result of solving the problem of creating a bioavailable composition based on tryptantrine, we previously created a gel composition with wound healing, anti-burn, anti-inflammatory, hepatoprotective, antidiabetic and antitumor effects. The gel composition contains tryptantrine, chitosan and distilled water in the following ratio of ingredients, g / l of gel: tryptantrine 1.5-2.5; chitosan 15.0-25.0; distilled water - the rest [RU 2366408 C1, 10.2009].
Однако в процессе работы с гелевой композицией были выявлены ее существенные недостатки:However, in the process of working with the gel composition, its significant disadvantages were identified:
1. наблюдающееся расслоение гелевой формы препарата при хранении создает серьезные трудности при его фармакологическом наружном применении;1. the observed stratification of the gel form of the drug during storage creates serious difficulties with its pharmacological external use;
2. из-за высокой фармакологической активности триптантрина его концентрация в геле неоправданно высока и не отвечает оптимальной дозе при его наружном применении для лечения раневых повреждений кожи;2. due to the high pharmacological activity of tryptantrine, its concentration in the gel is unreasonably high and does not meet the optimal dose when applied externally to treat wound skin lesions;
3. отмечено снижение эффективности процесса эпителизации и регенерации раневого повреждения, что связано с двумя вышеназванными недостатками.3. A decrease in the efficiency of the process of epithelization and regeneration of wound damage was noted, which is associated with the two above-mentioned disadvantages.
Все эти факторы уменьшают эффективность фармакологического применения известной гелевой композиции при различных кожных патологиях.All these factors reduce the effectiveness of the pharmacological use of the known gel composition in various skin pathologies.
Технический результат, обеспечиваемый предлагаемым изобретением, заключается в устранении недостатков, присущих известной гелевой композиции на основе триптантрина, и, как следствие, повышении эффективности лечения кожных патологий разной этиологии. Изобретение расширяет арсенал фармацевтических композиций, обладающих лечебным действием при различных кожных патологиях.The technical result provided by the invention is to eliminate the disadvantages inherent in the known gel composition based on tryptantrine, and, as a result, increase the effectiveness of the treatment of skin pathologies of various etiologies. The invention expands the arsenal of pharmaceutical compositions having a therapeutic effect in various skin pathologies.
Технический результат достигается тем, что фармацевтическая композиция, обладающая лечебным действием при различных кожных патологиях, включающая триптантрин, хитозан и дистиллированную воду, согласно изобретению дополнительно содержит ланолин-вазелиновую смесь и белково-нуклеиновый гидролизат молок лососевых рыб при следующем соотношении компонентов, мас.%:The technical result is achieved in that the pharmaceutical composition having a therapeutic effect in various skin pathologies, including tryptantrine, chitosan and distilled water, according to the invention additionally contains a lanolin-vaseline mixture and protein-nucleic acid hydrolyzate of salmon milk in the following ratio of components, wt.%:
Совместное применение компонентов в заявляемой композиции обеспечивает синергетический эффект композиции, заключающийся в том, что каждый компонент проявляет характерные для него фармакологические свойства при действии на раневые повреждения и патологические воспалительные процессы кожи с большей эффективностью, при этом концентрация действующего начала - триптантрина в 5-10 раз ниже, чем в известной гелевой композиции.The combined use of the components in the claimed composition provides a synergistic effect of the composition, which consists in the fact that each component exhibits its characteristic pharmacological properties when acting on wound injuries and pathological inflammatory processes of the skin with greater efficiency, while the concentration of the active principle is tryptantrine 5-10 times lower than in the known gel composition.
В заявляемой композиции триптантрин используют в оптимальном в количественном соотношении 0,005-0,015 мас.% для проявления им максимального фармакологического действия. Повышение содержания триптантрина (более 0,015 мас.%) может привести к угнетению метаболических процессов в нормальных клетках и, тем самым, к нарушению эффективности его действия на стадии грануляции и эпителизации раневых повреждений. Снижение концентрации триптантрина (менее 0,005 мас.%) также не соответствует оптимальным дозам его фармакологической активности, а следовательно, не позволяет достичь нужного фармакологического эффекта у заявляемой композиции.In the claimed composition, tryptantrine is used in the optimal quantitative ratio of 0.005-0.015 wt.% For the manifestation of the maximum pharmacological effect. An increase in tryptantrine content (more than 0.015 wt.%) Can lead to inhibition of metabolic processes in normal cells and, thereby, to a violation of its effectiveness at the stage of granulation and epithelization of wound injuries. A decrease in the concentration of tryptantrine (less than 0.005 wt.%) Also does not correspond to the optimal doses of its pharmacological activity, and therefore does not allow to achieve the desired pharmacological effect in the claimed composition.
Для приготовления заявляемой композиции используют триптантрин, полученный окислением изатина, коммерческий препарат хитозана с 80%-ной степенью дезацетилирования и молекулярной массой 100000 Да, ланолин-вазелиновую смесь и белково-нуклеиновый гидролизат молок лососевых рыб, полученный известным способом [RU 2055482, 10.03.1996].To prepare the claimed composition using tryptantrine obtained by oxidation of isatin, a commercial preparation of chitosan with an 80% degree of deacetylation and a molecular weight of 100,000 Da, a lanolin-vaseline mixture and protein-nucleic acid hydrolyzate of salmon milk obtained in a known manner [RU 2055482, 03/10/1996 ].
Хитозан широко используется для приготовления средств наружного применения в форме гелей, пленок, губок, коллоидных растворов, так как он обладает антибактериальными, противогрибковыми, противовирусными, ранозаживляющими и иммуномодулирующими свойствами (LD50 для организма человека составляет 1,33 г/день/1 кг/веса) [Li Q. et al. Application and properties of chitosan. In: Applications of chitin and chitosan, M.F.A. Goosen, Ph.D. ed. Technomic publishing CO., Inc., Lancaster. Basel. 1997. pp. 3-29].Chitosan is widely used for the preparation of external agents in the form of gels, films, sponges, colloidal solutions, since it has antibacterial, antifungal, antiviral, wound healing and immunomodulating properties (LD 50 for the human body is 1.33 g / day / 1 kg / weight) [Li Q. et al. Application and properties of chitosan. In: Applications of chitin and chitosan, MFA Goosen, Ph.D. ed. Technomic publishing CO., Inc., Lancaster. Basel. 1997. pp. 3-29].
Выбранный интервал концентраций хитозана в заявляемой композиции является оптимальным для проявления максимальной фармакологической активности. При концентрации хитозана более 1,2 мас.% происходит усиленное образование покрытия раны в виде пленки и нарушение оттока раневого содержимого. При концентрации менее 1,0 мас.% хитозан уже не оказывает оптимального фармакологического действия.The selected range of chitosan concentrations in the claimed composition is optimal for the manifestation of maximum pharmacological activity. When the concentration of chitosan is more than 1.2 wt.% There is an increased formation of a wound coating in the form of a film and violation of the outflow of wound contents. At a concentration of less than 1.0 wt.%, Chitosan no longer has an optimal pharmacological effect.
Гидролизат молок лососевых рыб содержит такие ценные биологически активные продукты, как дезоксинуклеозиды, олигонуклеотиды различной величины, аминокислоты, среди которых преобладают аргенин и лизин. Данные метаболические предшественники принимают участие в грануляции, эпителизации раневого повреждения. Экспериментально установлено, что концентрация гидролизата, используемая в заявляемой композиции, оптимальна с точки зрения эффективности лечебного действия и ускорения процесса заживления ран.The hydrolyzate of salmon milk contains such valuable biologically active products as deoxynucleosides, oligonucleotides of various sizes, amino acids, among which argenin and lysine predominate. These metabolic precursors are involved in granulation, epithelialization of wound damage. It was experimentally established that the concentration of the hydrolyzate used in the claimed composition is optimal in terms of the effectiveness of the therapeutic effect and accelerate the healing process of wounds.
Способ получения заявляемой композиции включает следующие стадии:A method of obtaining the claimed composition includes the following stages:
1. Получают гель хитозана известным способом [RU 2366408].1. Get the gel of chitosan in a known manner [RU 2366408].
2. Ланолин-вазелиновую смесь в весовом соотношении компонентов 3:1 расплавляют на водяной бане при 80°C и добавляют триптантрин, растворенный в хлороформе, перемешивают и выдерживают при этой температуре около 20 мин до испарения хлороформа.2. The lanolin-vaseline mixture in a weight ratio of 3: 1 is melted in a water bath at 80 ° C and tryptantrine dissolved in chloroform is added, mixed and kept at this temperature for about 20 minutes until the chloroform evaporates.
3. К ланолин-вазелиновой смеси с триптантрином добавляют гель хитозана в весовом соотношении компонентов 1:1 и белково-нуклеиновый гидролизат молок лососевых рыб согласно рецептуре. Смесь перемешивают до однородной массы и готовую мазь хранят при комнатной температуре.3. To the lanolin-vaseline mixture with tryptantrine add chitosan gel in a weight ratio of 1: 1 components and protein-nucleic acid hydrolyzate of salmon milk according to the recipe. The mixture is stirred until homogeneous and the finished ointment is stored at room temperature.
Подобранные нами экспериментальным путем количественное соотношение геля и мази (1:1) позволяет исключить их расслоение при хранении. Известно, что ланолин-вазелиновая мазь, особенно в первой фазе раневого процесса, не смешивается с раневым экссудатом и не поглощает раневое отделяемое, что ухудшает возможности очищения раны от гноя и некротических масс, а следовательно, задерживает процессы регенерации кожных повреждений [Доценко Б.М. и др. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению лекарственных препаратов для местного лечения гнойных ран (МЗ СССР Фармакологический Комитет). М.: 1989. 46 с.]. Авторами установлено, что ланолин-вазелиновая мазь с добавлением геля хитозана в равном соотношении позволяет устранить вышеперечисленные недостатки, т.к. улучшается адсорбция раневого экссудата хитозаном.The experimentally selected quantitative ratio of the gel and ointment (1: 1) allows us to exclude their delamination during storage. It is known that lanolin-vaseline ointment, especially in the first phase of the wound process, does not mix with wound exudate and does not absorb wound, which worsens the ability to cleanse the wound from pus and necrotic masses, and therefore delays the regeneration of skin lesions [Dotsenko B.M. . et al. Methodological recommendations for the experimental (preclinical) study of drugs for the local treatment of purulent wounds (MH USSR Pharmacological Committee). M .: 1989. 46 p.]. The authors found that lanolin-vaseline ointment with the addition of chitosan gel in equal proportions eliminates the above disadvantages, because adsorption of wound exudate by chitosan improves.
Заявляемая композиция представляет собой сбалансированную, стабильную гидрофильно-гидрофобную мазь, обеспечивающую достаточное высвобождение фармакологически активного триптантрина для оказания им лечебного действия.The inventive composition is a balanced, stable hydrophilic-hydrophobic ointment, providing a sufficient release of pharmacologically active tryptantrine to provide them with a therapeutic effect.
Повышение эффективности использования заявляемой композиции для лечения кожных патологий разной этиологии в сравнении с прототипом и базовыми коммерческими препаратами доказана экспериментами in vivo.Improving the effectiveness of the use of the claimed composition for the treatment of skin pathologies of various etiologies in comparison with the prototype and basic commercial preparations is proved by in vivo experiments.
Все эксперименты выполнены на животных, которые были получены из питомника «Пущино» и разведены в виварии ТИБОХ ДВО РАН (сертификат имеется). Животных содержали в соответствии с международными правилами, утвержденными приказом №267 МЗСР РФ от 19.06.2003, а также «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (2005).All experiments were performed on animals that were obtained from the Pushchino nursery and bred in the vivarium of TIBOKh FEB RAS (certificate is available). The animals were kept in accordance with international rules approved by order No. 267 of the Ministry of Health and Social Development of the Russian Federation dated 06/19/2003, as well as the “Guidelines for the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances” (2005).
Коммерческие препараты для наружного применения «Синафлан», «Фуцидин» и «Метилурацил» применяли как базовые препараты сравнения.Commercial preparations for external use, Sinaflan, Fucidin and Methyluracil were used as the base comparison preparations.
Препарат «Синафлан» представляет собой 0,025%-ную мазь синтетического глюкокортикоидного гормона - флуоцинолона ацетонида, обладающую противовоспалительным, противоаллергическим и противозудным действием. Применяют в комплексной терапии воспалительных и аллергических заболеваний кожи немикробной этиологии. Мазь назначают больным экземой, нейродермитом, кожным зудом, псориазом и другими хроническими сухими формами воспалительных и аллергических заболеваний кожи [Машковский М.Д. Лекарственные средства. ч. 1 // М.Д. Машковский. - М.: Медицина, 1993. С. 675-676].Sinaflan is a 0.025% ointment of synthetic glucocorticoid hormone - fluocinolone acetonide, which has anti-inflammatory, anti-allergic and antipruritic effects. They are used in the complex therapy of inflammatory and allergic skin diseases of non-microbial etiology. The ointment is prescribed for patients with eczema, neurodermatitis, pruritus, psoriasis and other chronic dry forms of inflammatory and allergic skin diseases [Mashkovsky
Препарат «Метилурацил» представляет собой 5%-ную метилурациловую мазь на ланолин-вазелиновой основе - пиримидиновое производное, широко используемое для профилактики и лечения нарушений репаративных процессов в организме и нормализации его защитно-приспособительных реакций. Препарат дает местный противовоспалительный эффект, нормализует обменные процессы в тканях, способен активировать местный фагоцитоз и поэтому стимулирует процессы заживления ран. Мазь не обладает прямой антимикробной активностью, в связи с чем подавление вегетирующей в ране вторичной инфекции обеспечивается косвенно - за счет местных реакций иммунитета [Машковский М.Д. Лекарственные средства. ч. II // М.Д. Машковский. - М.: Медицина, 1993. С. 161-162].The drug "Methyluracil" is a 5% methyluracil ointment on a lanolin-vaseline basis - the pyrimidine derivative, which is widely used for the prevention and treatment of disorders of reparative processes in the body and the normalization of its protective and adaptive reactions. The drug gives a local anti-inflammatory effect, normalizes metabolic processes in tissues, is able to activate local phagocytosis and therefore stimulates the healing process of wounds. The ointment does not have direct antimicrobial activity, and therefore the suppression of the secondary infection growing in the wound is provided indirectly - due to local immunity reactions [Mashkovsky M.D. Medicines Part II // M.D. Mashkovsky. - M .: Medicine, 1993. S. 161-162].
Препарат «Фуцидин» представляет собой 2%-ную мазь бактериостатического антибиотика фузидовой кислоты. Она относится к группе фузидинов, противомикробным соединениям, механизм действия которых связан с нарушением синтеза белка в бактериальной клетке. К фузидовой кислоте чувствительны грамположительные бактерии и грамотрицательные кокки [Машковский М.Д. Лекарственные средства. ч. II // М.Д. Машковский. - М.: Медицина, 1993. С. 306-308].The drug "Fucidin" is a 2% ointment of the bacteriostatic antibiotic fusidic acid. It belongs to the group of fusidines, antimicrobial compounds, the mechanism of action of which is associated with a violation of protein synthesis in the bacterial cell. Gram-positive bacteria and gram-negative cocci are sensitive to fusidic acid [Mashkovsky MD Medicines Part II // M.D. Mashkovsky. - M .: Medicine, 1993. S. 306-308].
Недостатками каждого из трех указанных выше коммерческих препаратов наружного применения для лечения кожных патологий являются отсутствие универсальности и узкая направленность действия.The disadvantages of each of the three above commercial preparations for external use for the treatment of skin pathologies are the lack of versatility and a narrow focus of action.
На фиг. 1 представлена сравнительная оценка эффективности лечебного действия заявляемой композиции, гелевого средства (прототип) и других препаратов сравнения на эритему ушей на экспериментальной модели аллергического контактного дерматита (ось ординат - уровень повреждения кожи (эритемы), выраженный в условных единицах; ось абсцисс - количество проведенных лечебных аппликаций).In FIG. 1 presents a comparative assessment of the effectiveness of the therapeutic effect of the claimed composition, gel agent (prototype) and other comparison products for ear erythema in an experimental model of allergic contact dermatitis (the ordinate axis is the level of skin damage (erythema), expressed in arbitrary units; the abscissa axis is the number of therapeutic applications).
На фиг. 2 представлен гистопатологический анализ лечебного действия заявляемой композиции, гелевого средства и коммерческого препарата «Синафлан» при моделировании аллергического контактного дерматита, индуцированного динитрофторбензолом (ДНФБ) у экспериментальных животных.In FIG. 2 presents a histopathological analysis of the therapeutic effect of the claimed composition, gel agent and commercial drug "Sinaflan" in the simulation of allergic contact dermatitis induced by dinitrofluorobenzene (DNFB) in experimental animals.
а) отрицательный контроль, без лечения; б) лечение препаратом «Синафлан», в) лечение гелевой композицией, г) лечение заявляемой композицией. Срезы окрашены гематоксилином-эозином; 100-кратное увеличение.a) negative control, without treatment; b) treatment with Sinaflan; c) treatment with a gel composition; d) treatment with the claimed composition. Sections stained with hematoxylin-eosin; 100x magnification.
На фиг. 3 представлено действие заявляемой композиции на экспрессию цитокиновых белков в сыворотке крови, индуцированную ДНФБ. (-) контроль - ДНФБ (без лечения), (+) - контроль - гелевая композиция.In FIG. 3 presents the effect of the claimed composition on the expression of cytokine proteins in blood serum induced by DNFB. (-) control - DNFB (without treatment), (+) - control - gel composition.
Обозначения: ИЛ-1 - интерлейкин 1, ИЛ-2 - интерлейкин 2, ИЛ-4 - интерлейкин 4, ИЛ-10 - интерлейкин 10, ГМ-КСФ - гранолоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор, ИНФ - интерферон-γ, ТРФ - трансформирующий фактор роста-β1, ФНО - фактор некроза опухоли-α.Legend: IL-1 -
На фиг. 4 представлена цитотоксическая активность триптантрина in vitro в отношении различных линий опухолевых клеток: (а) мышиная асцитная линия опухолевых клеток Эрлиха; (б) лейкемическая линия опухолевых клеток человека ТНР-1; лейкемическая линия опухолевых клеток человека HL-60.In FIG. 4 shows the cytotoxic activity of tryptantrine in vitro against various tumor cell lines: (a) the mouse ascitic Ehrlich tumor cell line; (b) the leukemic line of human tumor cells THP-1; human tumor cell line HL-60.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.The invention is illustrated by the following examples of specific performance.
Пример 1. Состав фармацевтической композиции, мас.%: триптантрин - 0,005; хитозан - 1,0; ланолин-вазелиновая смесь - 40,0; белково-нуклеиновый гидролизат - 1,0; дистиллированная вода - остальное.Example 1. The composition of the pharmaceutical composition, wt.%: Tryptantrine - 0.005; chitosan - 1.0; lanolin-vaseline mixture - 40.0; protein-nucleic acid hydrolyzate - 1.0; distilled water - the rest.
Хитозан (4 г) растворяют при перемешивании в 100 мл 3%-ной уксусной кислоты, добавляют 2 объема 0,3 N NaOH (200 мл) и перемешивают. Гель хитозана промывают дистиллированной водой до pH 5,5-6,0. В полученный гель добавляют дистиллированную воду при объемном соотношении 1:(1-2) и гомогенизируют его с использованием блендора при 20000 об/мин в течение 1-3 мин. Избыток жидкости удаляют декантацией. Получают гель белого цвета, содержащий хитозан и дистиллированную воду.Chitosan (4 g) was dissolved with stirring in 100 ml of 3% acetic acid, 2 volumes of 0.3 N NaOH (200 ml) were added and stirred. The chitosan gel is washed with distilled water to a pH of 5.5-6.0. Distilled water is added to the gel obtained at a volume ratio of 1: (1-2) and homogenized using a blender at 20,000 rpm for 1-3 minutes. Excess liquid is removed by decantation. A white gel is obtained containing chitosan and distilled water.
Ланолин-вазелиновую мазь (200 г) расплавляют на водяной бане (80°C) и добавляют 20 мг триптантрина, растворенного в 10 мл хлороформа. Смесь перемешивают, выдерживают при 80°C 15 мин до испарения хлороформа. Затем к полученной смеси добавляют 200 мл геля хитозана и 1,0 г белково-нуклеинового гидролизата молок лососевых рыб. Смесь перемешивают до однородной массы и хранят при комнатной температуре.Lanolin-vaseline ointment (200 g) is melted in a water bath (80 ° C) and 20 mg of tryptantrine dissolved in 10 ml of chloroform is added. The mixture is stirred, kept at 80 ° C for 15 minutes until the chloroform evaporates. Then, 200 ml of chitosan gel and 1.0 g of protein-nucleic acid hydrolyzate of salmon fish milk are added to the resulting mixture. The mixture is stirred until homogeneous and stored at room temperature.
Пример 2. Состав фармацевтической композиции, мас.%: триптантрин - 0,015; хитозан - 1,2; ланолин-вазелиновая смесь - 50,0; белково-нуклеиновый гидролизат - 2,0; дистиллированная вода - остальное.Example 2. The composition of the pharmaceutical composition, wt.%: Tryptantrine - 0.015; chitosan - 1.2; lanolin-vaseline mixture - 50.0; protein-nucleic acid hydrolyzate - 2.0; distilled water - the rest.
Изготавливают композицию аналогичным образом.Make the composition in a similar manner.
Физико-химические характеристики фармацевтической композиции, полученной по примерам 1 и 2:Physico-chemical characteristics of the pharmaceutical composition obtained in examples 1 and 2:
консистенция - мягкая мазь (крем);consistency - soft ointment (cream);
тип - гидрофобно-гидрофильная;type - hydrophobic-hydrophilic;
pH - 5,5-6,0;pH 5.5-6.0;
цвет - светло-желтый;color - light yellow;
стабильность - расслоение отсутствует;stability - no stratification;
абсорбция - полная;absorption is complete;
срок годности - 18 месяцев;expiration date - 18 months;
условия хранения - хранить при 4-6°C в закрытой таре без доступа воздуха.storage conditions - store at 4-6 ° C in a closed container without access of air.
Пример 3. Фармакологическая оценка ранозаживляющего действия заявляемой композиции в отношении ожоговых ран.Example 3. Pharmacological evaluation of the wound healing effect of the claimed composition in relation to burn wounds.
Экспериментальная работа была проведена на беспатогенных мышах линии CD1, которым наносили термические раны. Перед нанесением термических ран глазными ножницами тщательно выстригали шерсть на боковой стороне между позвоночником и бедром. Затем выстриженный участок дополнительно выбривали с помощью одноразового станка. Медный стержень с плоским торцом диаметром около 6 мм нагревали на кипящей водяной бане и на 5-6 сек прижимали торцом к выбритому участку кожи животного. Для нанесения следующей раны остывший стержень повторно нагревали на водяной бане в течение 15 сек. Для измерения времени контакта стержня с кожей пользовались секундомером. Нанесение мазей начинали на 2 день, предварительно измеряя размер раны. Для определения ее размеров к ране прикладывали покровное стекло и переносили (срисовывали) на него контуры раны. Стекла с нанесенными контурами оцифровывали с помощью сканера в графический файл формата «ВМР». Площади ран определяли с помощью программы Adobe Photoshop CS (version 8.0): устанавливали экранную решетку со стороной квадрата 0.25 мм2, а затем подсчитывали количество квадратов, охватываемых контуром раны.The experimental work was carried out on pathogenic mice of the CD1 line, which inflicted thermal wounds. Before applying thermal wounds, eye scissors carefully cut the hair on the side between the spine and thigh. Then the clipped area was additionally shaved with a disposable machine. A copper rod with a flat end with a diameter of about 6 mm was heated in a boiling water bath and pressed against the shaved area of the animal’s skin for 5-6 seconds. To apply the next wound, the cooled rod was reheated in a water bath for 15 seconds. To measure the time of contact of the rod with the skin, a stopwatch was used. The application of ointments began on
Исследуемые препараты наносили на раны с помощью металлического шпателя в количестве, достаточном для полного покрытия раны. Курс лечения - 5 дней. В процессе эксперимента проводили ежедневную оценку состояния раны: формирование струпа, состояние струпа, наличие периферической эпителизации, отечность и гиперемия краев раны, заживление и степень восстановления кожного покрова. Оценку состояния ран проводили индивидуально для каждого животного.The studied drugs were applied to the wounds with a metal spatula in an amount sufficient to completely cover the wound. The course of treatment is 5 days. In the course of the experiment, a wound was assessed daily: scab formation, scab condition, peripheral epithelialization, swelling and hyperemia of the wound edges, healing and the degree of restoration of the skin. Assessment of the state of wounds was carried out individually for each animal.
При оценке течения раневого процесса большое значение имеет объективная классификация как стадии заживления, так и характера самой раны. При анализе раневого процесса мы придерживались классификации, предложенной Кузиным М.И. [Раны и раневая инфекция. Руководство для врачей // под ред. Кузина М.И., Костюченок Б.М. - М.: Медицина, 1990. - 592 с.], согласно которой этот процесс можно разделить на три фазы: I - фаза воспаления, которая делится на период сосудистых изменений и период очищения раны от некротических (погибших) тканей; II фаза - регенерации, образования и созревания грануляционной ткани; III фаза - реорганизация рубца и эпителизация.In assessing the course of the wound healing process, objective classification of both the healing stage and the nature of the wound itself is of great importance. When analyzing the wound process, we adhered to the classification proposed by M. Kuzin. [Wounds and wound infection. Guidelines for Doctors // Ed. Kuzina M.I., Kostyuchenok B.M. - M .: Medicine, 1990. - 592 p.], According to which this process can be divided into three phases: I - the phase of inflammation, which is divided into a period of vascular changes and the period of cleansing the wound from necrotic (dead) tissues; Phase II - regeneration, formation and maturation of granulation tissue; III phase - reorganization of the scar and epithelization.
Экспериментальные данные, полученные нами на модели ожоговых ран, индуцированных у лабораторных мышей, свидетельствуют о высокой лечебной активности заявляемой композиции. Эффективность ее ранозаживляющего действия оставалась выше, чем у остальных исследованных препаратов, в течение всего эксперимента и достигала максимальной 100%-ной величины на 12 день после индукции раневого процесса. Результаты представлены в таблице 1.The experimental data obtained by us on the model of burn wounds induced in laboratory mice indicate a high therapeutic activity of the claimed composition. The effectiveness of its wound healing effect remained higher than that of the rest of the studied drugs throughout the experiment and reached a maximum of 100% on day 12 after the induction of the wound process. The results are presented in table 1.
Таким образом, заявляемая композиция обладает выраженным лечебным действием на процесс заживления ожоговых ран. Она проявляет большую эффективность, чем гелевая композиция (прототип), а также базовые коммерческие препараты сравнения.Thus, the claimed composition has a pronounced therapeutic effect on the healing process of burn wounds. It is more effective than a gel composition (prototype), as well as basic commercial comparison preparations.
Пример 4. Фармакологическая оценка ранозаживляющего действия заявляемой композиции в отношении лоскутных ран.Example 4. Pharmacological evaluation of the wound healing effect of the claimed composition in relation to patchwork wounds.
Экспериментальная работа была проведена на беспатогенных мышах линии CD1, которым наносили лоскутные раны. Для получения экспериментальных лоскутных ран волосяной покров удаляли так же, как при нанесении термических ран. Затем маленьким анатомическим пинцетом оттягивали кожную складку, зажимая в пинцет около 1 мм кожи, после чего срезали кожу непосредственно под концами пинцета с помощью глазных ножниц. Нанесение мазей начинали на 2 день, предварительно измеряя размер раны. Определение размеров лоскутных ран проводили, как описано выше для ожоговых ран. Курс лечения проводился в течение 5 дней. Оценку состояния ран проводили индивидуально для каждого животного.The experimental work was carried out on pathogen-free mice of the CD1 line, which were inflicted patchwork wounds. To obtain experimental patch wounds, the hair was removed in the same way as when applying thermal wounds. Then, with a small anatomical tweezers, the skin fold was pulled, clamping about 1 mm of skin into tweezers, and then the skin was cut directly under the ends of the tweezers using eye scissors. The application of ointments began on
Экспериментальные данные, полученные нами на модели лоскутных ран, индуцированных у лабораторных мышей, свидетельствуют о высокой лечебной активности заявляемого препарата. Эффективность ранозаживляющего действия заявляемой композиции, которая на 12 день после индукции раневого процесса вызывает 100%-ное заживление лоскутных ран, оказалась выше, чем у гелевой композиции и ряда коммерческих препаратов местного применения. Результаты представлены в таблице 2.The experimental data obtained by us on the model of patchwork wounds induced in laboratory mice indicate a high therapeutic activity of the claimed drug. The effectiveness of the wound healing effect of the claimed composition, which on day 12 after the induction of the wound process causes 100% healing of patchwork wounds, was higher than that of the gel composition and a number of commercial topical preparations. The results are presented in table 2.
Таким образом, заявляемая композиция обладает выраженным стимулирующим действием на процесс заживления лоскутных ран. Как и в случае ожоговых ран, она проявляет большую эффективность, чем гелевая композиция и ряд известных коммерческих препаратов, предназначенных для наружного применения при различных заболеваниях кожи.Thus, the claimed composition has a pronounced stimulating effect on the healing process of patchwork wounds. As in the case of burn wounds, it is more effective than the gel composition and a number of well-known commercial preparations intended for external use in various skin diseases.
Пример 5. Фармакологическая активность заявляемой композиции на модели аллергического контактного дерматита (АКД).Example 5. The pharmacological activity of the claimed composition on a model of allergic contact dermatitis (AKD).
АКД - это кожное воспалительное заболевание, которое опосредуется Т-клетками и вызывается повторным воздействием на кожу контактных аллергенов. Патогенез АКД связан поляризацией субпопуляций клеток в сторону Т-хелперного 2 пути и с соответствующим изменением цитокинового профиля. Во время развития АКД основная роль отводиться антиген-презентующим клеткам. При раздражении антигеном функционирование иммунной системы находится под контролем многочисленных молекулярных и клеточных механизмов. При этом существуют крайне сложные взаимодействия различных видов клеток иммунной системы: антиген-презентующих дендритных клеток, или клеток Лангерганса, Т- и В-клеток, естественных киллерных лимфоцитов, кератиноцитов, клеток эндотелия, тучных клеток и тромбоцитов. Следует отметить, что эти комплексные взаимодействия происходят под управлением многочисленных цитокинов и хемокинов [Watanabe Н. et al. Contact hypersensitivity: The mechanism of immune responses and T cell balance. / J. Interferon. Cytokine Res. 2002. V. 22. P. 407-412].AKD is a skin inflammatory disease that is mediated by T cells and is caused by repeated exposure to skin contact allergens. The pathogenesis of AKD is associated with the polarization of cell subpopulations towards the T-
Аллергические реакции кожи регулируют комплексные препараты, содержащие глюкокортикоиды, антигистаминные препараты, стабилизаторы тучных клеток и иммуносупрессоры. Эти лекарственные средства оказывают сильное противоаллергическое действие, но их длительное использование представляет большую проблему из-за выявленных сильных побочных эффектов [Martin S.F. Contact dermatitis: from pathomechanisms to immunotoxicology // Exp.Dermatol. 2012. V. 21(5). P. 382-389].Allergic skin reactions are regulated by complex preparations containing glucocorticoids, antihistamines, mast cell stabilizers and immunosuppressants. These drugs have a strong antiallergic effect, but their long-term use is a big problem due to the identified strong side effects [Martin S.F. Contact dermatitis: from pathomechanisms to immunotoxicology // Exp. Dermatol. 2012.V. 21 (5). P. 382-389].
Поэтому неслучайно, что в настоящее время все большее внимание привлекают универсальные соединения, которые обладают высокой противовоспалительной, ранозаживляющей, противомикробной и другими фармакологическими активностями. В серии фармакологических экспериментов нами определена эффективность лечебного действия заявляемой композиции на экспериментальной модели АКД.Therefore, it is no coincidence that universal compounds, which have high anti-inflammatory, wound healing, antimicrobial and other pharmacological activities, are currently attracting increasing attention. In a series of pharmacological experiments, we determined the effectiveness of the therapeutic effect of the claimed composition on an experimental model of AKD.
5.1 Действие заявляемой композиции на эритему кожи ушей, вызванной динитрофторбензолом.5.1 The effect of the claimed composition on erythema of the skin of the ears caused by dinitrofluorobenzene.
АКД ушей, индуцированный ДНФБ, представляет собой признанную во всем мире экспериментальную модель данного заболевания [Yuan X.Y. et al. Effects and mechanisms of aloperine on 2, 4-dinitrofluorobenzene-induced allergic contact dermatitis in BALB/c mice // Eur. J. Pharm. 2010. V. 629, №1-3, P. 147-152]. ДНФБ (Sigma, США) растворяли в смеси (ацетон:оливковое масло=4:1) и использовали в качестве индуктора АКД. Шерсть выбривали в области брюшины. Для активной сенсибилизации 100 мкл 0,5%-ного ДНФБ наносили однократно на выбритый участок. Через пять дней на внутреннюю и внешнюю поверхность ушей наносили по 20 мкл 0,2%-ного раствора ДНФБ. Через два дня животным повторно наносили аллерген на оба уха для индукции обширной воспалительной реакции. Лечение начинали на следующий день после последнего нанесения аллергена. В качестве положительного контроля использовали гелевую композицию и коммерческие препараты местного применения «Синафлан», «Фуцидин» и «Метилурацил». Мази наносили на оба уха один раз в день, в течение 4-х дней. Дерматит оценивали в баллах по следующей шкале: 1 - незначительное шелушение; 2 - шелушение, инфильтрация, гиперемия; 3 - серозные корочки; 4 - язвы.Ear AKD induced by DNFB is a worldwide recognized experimental model of this disease [Yuan X.Y. et al. Effects and mechanisms of aloperine on 2, 4-dinitrofluorobenzene-induced allergic contact dermatitis in BALB / c mice // Eur. J. Pharm. 2010. V. 629, No. 1-3, P. 147-152]. DNFB (Sigma, USA) was dissolved in a mixture (acetone: olive oil = 4: 1) and used as an AKD inducer. The hair was shaved in the peritoneum. For active sensitization, 100 μl of 0.5% DNPB was applied once to a shaved area. Five days later, 20 μl of a 0.2% solution of DNFB was applied to the inner and outer surfaces of the ears. Two days later, the animals were reapplied with an allergen in both ears to induce an extensive inflammatory response. Treatment was started the day after the last application of the allergen. As a positive control, the gel composition and commercial topical preparations Sinaflan, Fucidin and Methyluracil were used. Ointments were applied to both ears once a day for 4 days. Dermatitis was scored on the following scale: 1 - slight peeling; 2 - peeling, infiltration, hyperemia; 3 - serous crusts; 4 - ulcers.
Как видно из данных, приведенных на фиг. 1, местное применение заявляемой композиции в течение 4 раз приводит к гораздо более значительному лечебному эффекту, чем при использовании гелевой композиции и коммерческих препаратов сравнения.As can be seen from the data shown in FIG. 1, local application of the claimed composition for 4 times leads to a much more significant therapeutic effect than when using the gel composition and commercial comparison preparations.
5.2 Действие заявляемой композиции на гистопатологические изменения кожи ушей при дерматите.5.2 The effect of the claimed composition on histopathological changes in the skin of the ears with dermatitis.
Для оценки гистопатологических изменений тканей брали биопсийные пробы ушей размером 5 мм и фиксировали в 10%-ном растворе формальдегида, а затем заливали в парафин и производили тонкие срезы с использованием микротома. После этого срезы кожи окрашивали гематоксилином и эозином и полученные образцы анализировали с помощью микроскопа.To assess histopathological tissue changes, biopsy samples of ears of 5 mm in size were taken and fixed in a 10% formaldehyde solution, then embedded in paraffin and thin sections were made using a microtome. After that, skin sections were stained with hematoxylin and eosin and the obtained samples were analyzed using a microscope.
Проведенный нами гистологический анализ позволил продемонстрировать, что увеличение толщины ушей, индуцированное ДНФБ, и инфильтрация лейкоцитов в эпидермисе и дермисе наиболее эффективно нормализуется последовательным лечением в течение 4 дней заявляемой композицией. При этом гелевая композиция, содержащая триптантрин в высокой дозе (в 5-10 раз выше, чем в составе заявляемой композиции), и препарат «Синафлан», содержащий кортикостероид, по своей эффективности лечебного действия при АКД уступают заявляемой композиции (фиг. 2 а-г).Our histological analysis allowed us to demonstrate that the increase in ear thickness induced by DNFB and leukocyte infiltration in the epidermis and dermis are most effectively normalized by sequential treatment within 4 days of the claimed composition. In this case, the gel composition containing tryptantrine in a high dose (5-10 times higher than in the composition of the claimed composition), and the Sinaflan preparation containing the corticosteroid are inferior to the claimed composition in therapeutic efficacy in AKD (Fig. 2 a- d).
5.3 Действие заявляемого препарата на уровень содержания цитокинов в плазме крови экспериментальных животных при АКД.5.3 The effect of the claimed drug on the level of cytokines in the blood plasma of experimental animals with AKD.
Изменения в уровне продукции цитокинов (ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-10, ИНФ-γ, ГМ-КСФ, ТРФβ-1, ФНО-α и др.) рассматриваются в качестве важного патогенетического механизма иммунозависимых заболеваний, одним из которых является АКД. В контексте современных тенденций иммунотерапии цитокины являются маркерами прогноза и течения этого заболевания, а также потенциальными терапевтическими мишенями. Исследование цитокинового профиля при АКД позволяет оценить характер воспаления, а также назначить соответствующую противовоспалительную терапию.Changes in the level of cytokine production (IL-1, IL-2, IL-4, IL-10, INF-γ, GM-CSF, TRFβ-1, TNF-α, etc.) are considered as an important pathogenetic mechanism of immunodependent diseases, one of which is AKD. In the context of current trends in immunotherapy, cytokines are markers of the prognosis and course of this disease, as well as potential therapeutic targets. The study of the cytokine profile in AKD allows you to evaluate the nature of the inflammation, as well as prescribe appropriate anti-inflammatory therapy.
Уровни цитокинов определяли с использованием иммуноферментного анализа в образцах плазмы крови. Пробы сыворотки крови были взяты через 24 ч после последнего лечения. Сравнительную оценку уровней содержания цитокиновых белков проводили с использованием наборов BD ELISA Set Mouse (BD Biosciense, США) для интерлейкинов ИЛ-1, 2, 4, 10, а также для интерферона гамма (ИНФ-γ), фактора некроза опухоли (ФНО-α), трансфомирующего фактора роста (ТРФβ-1) и гранулоцитарно-моноцитарного колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) в соответствии с инструкциями. В каждой экспериментальной группе определяли относительное содержание цитокинов, выраженное в средних показателях оптической плотности при длине волны 450 нм.Cytokine levels were determined using an enzyme-linked immunosorbent assay in plasma samples. Serum samples were taken 24 hours after the last treatment. A comparative assessment of the levels of cytokine proteins was carried out using BD ELISA Set Mouse kits (BD Biosciense, USA) for IL-1, 2, 4, 10 interleukins, as well as for interferon gamma (INF-γ), tumor necrosis factor (TNF-α ), transfecting growth factor (TRFβ-1) and granulocyte-monocyte colony stimulating factor (GM-CSF) in accordance with the instructions. In each experimental group, the relative content of cytokines was determined, expressed in average optical density at a wavelength of 450 nm.
Как видно из данных, приведенных на фиг. 3, местное применение заявляемой композиции приводит к выраженному уменьшению локальной секреции исследованных цитокинов, но не в одинаковой степени. Можно видеть, что заявляемая композиция по уровню ингибирования цитокинов заметно превосходит гелевую композицию (прототип), что указывает на эффективность ее противовоспалительного и нормализующего действия при АКД, индуцированном ДНФБ.As can be seen from the data shown in FIG. 3, local application of the claimed composition leads to a pronounced decrease in local secretion of the studied cytokines, but not to the same extent. You can see that the claimed composition in terms of the level of inhibition of cytokines significantly exceeds the gel composition (prototype), which indicates the effectiveness of its anti-inflammatory and normalizing effects in AKD induced by DNFB.
Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что заявляемая композиция может успешно заменить многие известные коммерческие мазевые препараты при лечении АКД и других воспалительных кожных заболеваний.Our results indicate that the claimed composition can successfully replace many well-known commercial ointment preparations in the treatment of AKD and other inflammatory skin diseases.
Пример 6. Противомикробная активность заявляемой композиции.Example 6. Antimicrobial activity of the claimed composition.
При исследовании противомикробных свойств заявляемой композиции сравнили ее эффективность с гелевой композицией. Оценка эффективности противомикробного действия произведена по образованию зон ингибирования роста микробных тест-культур на поверхности агар-агара вокруг образца. Образец (в объеме 100 мкл) наносили непосредственно на агаровую пластинку, засеянную соответствующими тест-культурами. Учет результатов тестирования проводили через 24 ч (для заявляемой и гелевой композиций) и 48 ч (для заявляемой композиции).In the study of the antimicrobial properties of the claimed composition, its effectiveness was compared with a gel composition. Evaluation of the effectiveness of antimicrobial action was made by the formation of zones of inhibition of growth of microbial test cultures on the surface of agar-agar around the sample. A sample (in a volume of 100 μl) was applied directly to an agar plate seeded with appropriate test cultures. Analysis of the test results was carried out after 24 hours (for the claimed and gel compositions) and 48 hours (for the claimed composition).
Данные по антимикробной активности представлены в таблице 3.Data on antimicrobial activity are presented in table 3.
Анализ противомикробной активности показывает, что все тестируемые культуры микроорганизмов проявляют чувствительность к заявляемой композиции в дозе 20 мкг в 100 мкл. При этом нами зарегистрирована наибольшая активность в отношении Staphylococcus aureus - опасного патогена, вызывающего тяжелые гнойные инфекции. Действие композиции против этого штамма стафилококка носит дозозависимый характер. В дозе 10 мкг на 100 мкл заявляемый препарат сохраняет активность в отношении Staphylococcus aureus, но не проявляет активности в отношении остальных исследованных штаммов микроорганизмов. Следует отметить, что с увеличением времени экспозиции с 24 до 48 ч активность заявляемой композиции возрастает, что может быть связано с постепенной диффузией триптантрина из гидрофобно-гидрофильной основы.Analysis of antimicrobial activity shows that all tested cultures of microorganisms are sensitive to the claimed composition at a dose of 20 μg in 100 μl. At the same time, we recorded the highest activity against Staphylococcus aureus, a dangerous pathogen that causes severe purulent infections. The effect of the composition against this strain of staphylococcus is dose-dependent. At a dose of 10 μg per 100 μl, the claimed drug remains active against Staphylococcus aureus, but does not show activity against the remaining studied strains of microorganisms. It should be noted that with an increase in exposure time from 24 to 48 hours, the activity of the claimed composition increases, which may be associated with the gradual diffusion of tryptantrine from a hydrophobic-hydrophilic base.
Пример 7. Определение цитотоксической активности триптантрина in vitro в отношении различных линий опухолевых клеток.Example 7. Determination of the cytotoxic activity of tryptantrine in vitro against various tumor cell lines.
Для определения цитотоксической активности в отношении опухолевых клеток триптантрина как основного активного компонента заявляемой композиции использовали стандартный MTS-метод (усовершенствованная модификация МТТ-метода) [Barltrop J. et. al. // J. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1991. V. 11. P. 611-614].To determine the cytotoxic activity against tumor cells of tryptantrine as the main active component of the claimed composition used the standard MTS method (advanced modification of the MTT method) [Barltrop J. et. al. // J. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1991. V. 11. P. 611-614].
Опухолевые клетки высевали в 96-луночные планшеты из расчета 60000 клеток в 50 мкл клеточной суспензии на 1 лунку. Планшеты инкубировали при 37°C в атмосфере 5% CO2 в течение 1 суток. К 50 мкл уже имеющейся в каждой лунке клеточной суспензии добавляли еще 50 мкл раствора исследуемых веществ в соответствующей среде. По завершении инкубирования в каждую лунку добавляли по 20 мкл MTS-реагента. Затем планшеты инкубировали при 37°C в атмосфере 5% СО2 еще в течение 2 часов. После чего оптическую плотность среды в каждой лунке регистрировали с помощью спектрофотометрического планшетного ридера при 492 нм. Количество живых клеток (N, в %) оценивали по сравнению с контролем по формуле:Tumor cells were seeded in 96-well plates at the rate of 60,000 cells in 50 μl of cell suspension per well. The plates were incubated at 37 ° C in an atmosphere of 5% CO 2 for 1 day. To 50 μl of the cell suspension already present in each well, another 50 μl of a solution of the test substances in an appropriate medium was added. At the end of the incubation, 20 μl of MTS reagent was added to each well. Then the plates were incubated at 37 ° C in an atmosphere of 5% CO 2 for another 2 hours. After that, the optical density of the medium in each well was recorded using a spectrophotometric plate reader at 492 nm. The number of living cells (N, in%) was evaluated in comparison with the control according to the formula:
N=(IЭ/IК)×100%, (3)N = (I E / I K ) × 100%, (3)
где IЭ - это интенсивность поглощения среды в каждой экспериментальной лунке;where I E is the intensity of the absorption of the medium in each experimental well;
IК - среднее значение полученных результатов для лунок со 100%-ным контролем.I K - the average value of the results for wells with 100% control.
Определение цитотоксической активности триптантрина в отношении опухолевых клеток in vitro проводили с использованием асцитной опухоли Эрлиха, а также лейкемических клеток линий ТНР-1 и HL-60. Как видно из данных, приведенных на фиг. 4а-с, триптантрин обладает выраженной дозозависимой ингибирующей активностью в отношении исследованных линий опухолевых клеток. При этом ингибирующие концентрации триптантрина, вызывающие 50%-ное ингибирование роста опухолевых клеток (IC50), составляют следующие величины: для человеческих лейкемических опухолевых клеток HL-60 IC50=5,8 мкг/мл; для мышиных асцитных опухолевых клеток Эрлиха IC50=6,68 мкг/мл. Значение IC50 для человеческих лейкемических опухолевых клеток ТНР-1 составляет около 10 мкг/мл (фиг. 4a-c).Determination of the cytotoxic activity of tryptantrine against tumor cells in vitro was carried out using an Ehrlich ascites tumor, as well as leukemic cells of the THP-1 and HL-60 lines. As can be seen from the data shown in FIG. 4a-c, tryptantrine has a pronounced dose-dependent inhibitory activity against the studied tumor cell lines. The inhibitory concentrations of tryptantrine, causing 50% inhibition of tumor cell growth (IC 50 ), are as follows: for human leukemic tumor cells, HL-60 IC 50 = 5.8 μg / ml; for murine ascitic Ehrlich tumor cells, IC 50 = 6.68 μg / ml. The IC 50 value for human leukemic tumor cells THP-1 is about 10 μg / ml (Fig. 4a-c).
Таким образом, хиназолиновый алкалоид триптантрин обладает высокой ингибирующей активностью в отношении исследованных линий опухолевых клеток. Поскольку концентрация триптантрина в заявляемой композиции как минимум на порядок выше (в среднем 100 мкг на 1 г мазевой основы), чем необходима для ингибирования роста опухолевых клеток in vitro, то можно предположить, что она будет эффективна при лечении кожных опухолевых образований разной этиологии. В связи с этим заявляемая композиция может быть рекомендована для исследований ее противоопухолевой активности in vivo в отношении различных злокачественных новообразований кожи.Thus, the quinazoline alkaloid tryptantrine has a high inhibitory activity against the studied tumor cell lines. Since the concentration of tryptantrine in the claimed composition is at least an order of magnitude higher (on average 100 μg per 1 g of ointment base) than is necessary for inhibiting the growth of tumor cells in vitro, it can be assumed that it will be effective in the treatment of skin tumor formations of different etiologies. In this regard, the claimed composition can be recommended for studies of its antitumor activity in vivo against various malignant neoplasms of the skin.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014119104/15A RU2549475C1 (en) | 2014-05-12 | 2014-05-12 | Pharmaceutical composition possessing therapeutic action on various skin pathologies |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014119104/15A RU2549475C1 (en) | 2014-05-12 | 2014-05-12 | Pharmaceutical composition possessing therapeutic action on various skin pathologies |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2549475C1 true RU2549475C1 (en) | 2015-04-27 |
Family
ID=53289756
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014119104/15A RU2549475C1 (en) | 2014-05-12 | 2014-05-12 | Pharmaceutical composition possessing therapeutic action on various skin pathologies |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2549475C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2694059C1 (en) * | 2019-02-26 | 2019-07-09 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук (ТИБОХ ДВО РАН) | Pharmaceutical composition having therapeutic effect in various skin pathologies |
| RU2694058C1 (en) * | 2019-04-08 | 2019-07-09 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук (ТИБОХ ДВО РАН) | Water-soluble derivative of tryptane-trin, having anti-tumor, anti-inflammatory and antimicrobial activity, and increasing therapeutic activity of anti-tumor antibiotics |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2055482C1 (en) * | 1994-05-13 | 1996-03-10 | Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН | Method of protein-nucleinic hydrolysate preparing |
| WO2004037180A2 (en) * | 2002-10-21 | 2004-05-06 | Metaproteomics, Llc | Compositions that treat or inhibit pathological conditions associated with inflammatory response |
| RU2366408C1 (en) * | 2008-07-21 | 2009-09-10 | Тихоокеанский Институт Биоорганической Химии Дальневосточного Отделения Российской Академии Наук (Тибох Дво Ран) | Gel composition of wound healing, burntreating, antiinflammatory, hepatoprotective, antidiabetic and antineoplastic action |
| RU2483110C1 (en) * | 2011-11-11 | 2013-05-27 | Денис Владимирович Полещук | Method to produce chitosan-nucleic hydrolysate |
-
2014
- 2014-05-12 RU RU2014119104/15A patent/RU2549475C1/en active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2055482C1 (en) * | 1994-05-13 | 1996-03-10 | Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН | Method of protein-nucleinic hydrolysate preparing |
| WO2004037180A2 (en) * | 2002-10-21 | 2004-05-06 | Metaproteomics, Llc | Compositions that treat or inhibit pathological conditions associated with inflammatory response |
| RU2366408C1 (en) * | 2008-07-21 | 2009-09-10 | Тихоокеанский Институт Биоорганической Химии Дальневосточного Отделения Российской Академии Наук (Тибох Дво Ран) | Gel composition of wound healing, burntreating, antiinflammatory, hepatoprotective, antidiabetic and antineoplastic action |
| RU2483110C1 (en) * | 2011-11-11 | 2013-05-27 | Денис Владимирович Полещук | Method to produce chitosan-nucleic hydrolysate |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2694059C1 (en) * | 2019-02-26 | 2019-07-09 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук (ТИБОХ ДВО РАН) | Pharmaceutical composition having therapeutic effect in various skin pathologies |
| RU2694058C1 (en) * | 2019-04-08 | 2019-07-09 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук (ТИБОХ ДВО РАН) | Water-soluble derivative of tryptane-trin, having anti-tumor, anti-inflammatory and antimicrobial activity, and increasing therapeutic activity of anti-tumor antibiotics |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Demirci et al. | Boron and poloxamer (F68 and F127) containing hydrogel formulation for burn wound healing | |
| RU2718919C1 (en) | Composition for treating acne | |
| RU2452475C2 (en) | Agent for wounds, burns and infectious inflammatory diseases of skin, appendages and mucous membranes | |
| RU2408372C2 (en) | Application of octenidine dihydrochloride in semisolid preparations | |
| JP6239041B2 (en) | Tamarind seed polysaccharide for use in the treatment of microbial infections | |
| RU2536264C2 (en) | Topical dermal composition containing salt and sugar as active ingredients for preventing and treating vaginosis, and using it | |
| WO2008140200A1 (en) | External compositions for the skin | |
| CN102985091A (en) | Compositions and methods for treatment of skin diseases and disorders using antimicrobial peptide sequestering compounds | |
| JP6546296B2 (en) | Low molecular weight polypeptide ZY4 and use thereof | |
| US20200297780A1 (en) | Anti-inflammatory compositions, methods and uses thereof | |
| JP2013060455A (en) | Composition using bee venom as active ingredient | |
| WO2020132930A1 (en) | Anti-dandruff anti-itch shampoo composition containing multiple-component zinc | |
| CN106620646A (en) | Application of polypeptides to preparation of medicine for treating eczematous dermatitis | |
| JP2013526595A (en) | Tamarind seed polysaccharide for use in the treatment of inflammatory diseases | |
| RU2549475C1 (en) | Pharmaceutical composition possessing therapeutic action on various skin pathologies | |
| RU2636530C2 (en) | Pharmaceutical compositions for treatment of wounds and burns | |
| KR101911377B1 (en) | Composition for anti-inflammatory | |
| RU2481834C2 (en) | Antimicrobial composition for treatment of wounds and burns | |
| RU2314792C1 (en) | Curative-cosmetic preparation | |
| US9023405B2 (en) | Pharmaceutical composition using stryphnodendron extracts for treating HPV infections | |
| AU7224400A (en) | Non-solid composition for local application | |
| KR101623553B1 (en) | Chlorin e6 for the treatment, prevention or improvement of acne | |
| EP3251682A1 (en) | Compositions for treating infections caused by the mite demodex spp | |
| RU2694059C1 (en) | Pharmaceutical composition having therapeutic effect in various skin pathologies | |
| RU2771010C1 (en) | Drug for treatment of cats with dermatitis of various etiologies |