RU2542445C2 - Medication for treating alzheimer's disease and method of treating alzheimer's disease - Google Patents
Medication for treating alzheimer's disease and method of treating alzheimer's disease Download PDFInfo
- Publication number
- RU2542445C2 RU2542445C2 RU2010130353/15A RU2010130353A RU2542445C2 RU 2542445 C2 RU2542445 C2 RU 2542445C2 RU 2010130353/15 A RU2010130353/15 A RU 2010130353/15A RU 2010130353 A RU2010130353 A RU 2010130353A RU 2542445 C2 RU2542445 C2 RU 2542445C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibodies
- brain
- activated potentiated
- synthase
- endothelial
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения болезни Альцгеймера.The invention relates to medicine and can be used to treat Alzheimer's disease.
Из уровня техники известно нейротропное лекарственное средство на основе антисыворотки к мозгоспецифическому белку S-100 (RU2156621 C1, A61K 39/395, 27.09.2000).A neurotropic drug based on antiserum to the brain-specific protein S-100 is known in the art (RU2156621 C1, A61K 39/395, 09/27/2000).
Известно также исследование препарата на основе сверхмалых доз антител к мозгоспецифическому белку S-100 при нарушении когнитивных функций, эмоционального и неврологического статуса в условиях экспериментальной модели болезни Альцгеймера, которое показало, что препарат обладает способностью восстанавливать нарушенные когнитивные функции, улучшает эмоциональное состояние, ослабляет тревожность и может быть перспективным для профилактики и лечения болезни Альцгеймера (Воронина Т.А., Белопольская М.В. и др. Действие сверхмалых доз антител к S-100 при нарушении когнитивных функций, эмоционального и неврологического статуса в условиях экспериментальной модели болезни Альцгеймера. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2009, №8, приложение, с.174-176).There is also a study of a drug based on ultra-low doses of antibodies to the brain-specific protein S-100 in case of cognitive impairment, emotional and neurological status in an experimental model of Alzheimer's disease, which showed that the drug has the ability to restore impaired cognitive function, improves emotional state, reduces anxiety and may be promising for the prevention and treatment of Alzheimer's disease (Voronina T.A., Belopolskaya M.V. et al. The effect of ultra-low doses of anti ate to S-100 in violation of cognitive functions, emotional and neurological status in an experimental model of Alzheimer's disease. Bulletin of experimental biology and medicine. 2009, No. 8, appendix, p.174-176).
Изобретение направлено на создание эффективного средства для профилактики и лечения болезни Альцгеймера.The invention aims to create an effective tool for the prevention and treatment of Alzheimer's disease.
Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что лекарственное средство для лечения болезни Альцгеймера, содержащее активированную потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100, согласно изобретению, выполнено в виде фармацевтической композиции и содержит в качестве дополнительного - усиливающего компонента активированную потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе.The solution to this problem is provided by the fact that the drug for the treatment of Alzheimer's disease, containing the activated potentiated form of antibodies to the brain-specific protein S-100, according to the invention, is made in the form of a pharmaceutical composition and contains an activated potentiated form of antibodies to endothelial NO- as an additional reinforcing component synthase.
При этом активированную потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе используют в виде активированного потенцированного водного или водно-спиртового раствора, активность которого обусловлена процессом последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения.In this case, the activated potentiated form of antibodies to the brain-specific protein S-100 and the activated potentiated form of antibodies to endothelial NO synthase are used in the form of an activated potentiated aqueous or hydroalcoholic solution, the activity of which is due to the process of multiple repeated dilutions in an aqueous or hydroalcoholic solvent in combination with external mechanical action - vertical shaking of each dilution.
Фармацевтическая композиция может быть выполнена в твердой лекарственной форме и содержать эффективное количество частиц нейтрального носителя, насыщенного смесью водных или водно-спиртовых растворов активированной потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированной потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.The pharmaceutical composition can be in solid dosage form and contain an effective amount of particles of a neutral carrier saturated with a mixture of aqueous or aqueous-alcoholic solutions of an activated potentiated form of antibodies to the brain-specific protein S-100 and an activated potentiated form of antibodies to endothelial NO synthase, and pharmaceutically acceptable additives including lactose, microcrystalline cellulose and magnesium stearate.
Причем водные или водно-спиртовые растворы активированных потенцированных форм антител к мозгоспецифическому белку S-100 и к эндотелиальной NO-синтазе получены путем многократного последовательного разведения в сочетании с внешним воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения из матричных растворов аффинно очищенных антител к мозгоспецифическому белку S-100 и к эндотелиальной NO-синтазе с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.Moreover, aqueous or aqueous-alcoholic solutions of activated potentiated forms of antibodies to the brain-specific protein S-100 and to endothelial NO synthase are obtained by multiple sequential dilutions in combination with an external action - vertical shaking of each dilution from matrix solutions of affinity-purified antibodies to the brain-specific protein S-100 and to endothelial NO synthase with a concentration of 0.5 ÷ 5.0 mg / ml.
Предпочтительно каждый из компонентов сверхмалых доз аффинно очищенных антител используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, разведений, приготовленных по гомеопатической технологии.Preferably, each of the components of the ultra-low doses of affinity-purified antibodies is used as a mixture of various, mainly hundred, dilutions prepared by homeopathic technology.
Решение поставленной задачи обеспечивается также тем, что в способе лечения болезни Альцгеймера путем введения в организм активированной потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, согласно изобретению, дополнительно (одновременно и сочетано) вводят активированную потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к эндотелиальной NO-синтазе.The solution to this problem is also ensured by the fact that in the method of treating Alzheimer's disease by introducing into the body an activated potentiated form of antibodies to the brain-specific protein S-100, according to the invention, an additional (simultaneously combined) additionally introduced activated potentiated form of ultra-low doses of affinity-purified antibodies to endothelial NO- synthase.
При этом активированную потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе используют в виде активированного потенцированного водного или водно-спиртового раствора каждого компонента, активность которого обусловлена процессом последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения.In this case, the activated potentiated form of antibodies to the brain-specific protein S-100 and the activated potentiated form of antibodies to endothelial NO synthase are used in the form of an activated potentiated aqueous or aqueous-alcoholic solution of each component, the activity of which is due to the process of multiple sequential dilutions in an aqueous or aqueous-alcoholic solvent in combination with external mechanical action - vertical shaking of each dilution.
Предпочтительно используют приготовленные в виде единого лекарственного препарата - одной лекарственной формы смесь различных разведений антител к мозгоспецифическому белку S-100 в сочетании со смесью различных разведений антител к эндотелиальной NO-синтазе, приготовленных по гомеопатической технологии.A mixture of different dilutions of antibodies to the brain-specific protein S-100 in combination with a mixture of different dilutions of antibodies to endothelial NO synthase prepared using homeopathic technology is preferably used as a single drug.
Кроме того, лекарственное средство содержит действующие компоненты в объемном соотношении 1:1, при этом каждый компонент используют в виде смеси трех соответствующих матричных растворов, разведенных, соответственно, в 10012, 10030, и 100200 раз, что эквивалентно сотенным разведениям С12, С30, С200, приготовленным по гомеопатической технологии.In addition, the drug contains active ingredients in a volume ratio of 1: 1, with each component being used as a mixture of three appropriate matrix solutions, diluted, respectively, 100 12 , 100 30 , and 100 200 times, which is equivalent to hundreds of dilutions of C12, C30, C200 prepared according to homeopathic technology.
Заявленную фармацевтическую композицию рекомендуется принимать, предпочтительно, по 1-2 таблетке 2-6 раз в день.The claimed pharmaceutical composition is recommended to be taken, preferably, 1-2 tablets 2-6 times a day.
При лечении болезни Альцгеймера возможно раздельное, но сочетанное и одновременное применение (введение в организм) заявленной фармацевтической композиции в виде двух отдельно приготовленных препаратов как в виде растворов, так и в твердых лекарственных формах (таблеток), каждый из которых содержит активированную потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к мозгоспецифическому белку S-100 и, соответственно, активированную потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к эндотелиальной NO-синтазе.In the treatment of Alzheimer's disease, separate, but combined and simultaneous use (introduction into the body) of the claimed pharmaceutical composition in the form of two separately prepared preparations, both in the form of solutions and in solid dosage forms (tablets), each of which contains an activated potentiated form of ultra-low doses affinity-purified antibodies to the brain-specific protein S-100 and, accordingly, the activated potentiated form of ultra-low doses of affinity-purified antibodies to endothelial NO synthase.
Предложенное сочетание активированных потенцированных форм антител к мозгоспецифическому белку S-100 и к эндотелиальной NO-синтазе в фармацевтической композиции (т.е. форм антител к мозгоспецифическому белку S-100 и к эндотелиальной NO-синтазе, приготовленных по гомеопатической технологии потенцирования путем многократного последовательного разведения и внешнего воздействия - вертикального встряхивания (см., например, В.Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29), которые обладают активностью, обусловленной технологией потенцирования, в фармакологических моделях и/или клинических методах лечения болезни Альцгеймера) обеспечивает получение неожиданного синергетического терапевтического эффекта, подтвержденного на адекватных (валидных) экспериментальных моделях и клинических исследованиях, который заключается в повышении эффективности лечения болезни Альцгеймера. Указанный технический результат обусловлен усилением нейропротекторной активности антител к белку S-100, усилением вегетостабилизирующего эффекта, нормализацией вегетативного статуса, синергическим влиянием обоих компонентов на нейрональную пластичность, и, вследствие этого, повышением устойчивости мозга к токсическим воздействиям, что улучшает интегративную деятельность и восстанавливает межполушарные связи головного мозга, способствует устранению когнитивных нарушений, стимулирует репаративные процессы и ускоряет восстановление функций ЦНС, повышает умственную работоспособность, восстанавливает процессы обучения и памяти, нормализует соматовегетативные проявления, увеличивает мозговой кровоток, и соответственно обеспечивает повышение эффективности лечения болезни Альцгеймера.The proposed combination of activated potentiated forms of antibodies to the brain-specific protein S-100 and to endothelial NO synthase in a pharmaceutical composition (i.e., forms of antibodies to the brain-specific protein S-100 and to endothelial NO synthase prepared according to the homeopathic potentiation technique by repeated serial dilution and external effects - vertical shaking (see, for example, V. Schwabe "Homeopathic medicines", M., 1967, p.14-29), which have activity due to technology p validation, in pharmacological models and / or clinical methods of treatment of Alzheimer's disease) provides an unexpected synergistic therapeutic effect, confirmed by adequate (valid) experimental models and clinical studies, which consists in increasing the effectiveness of treatment of Alzheimer's disease. The specified technical result is due to an increase in the neuroprotective activity of antibodies to the S-100 protein, an increase in the vegetative stabilizing effect, normalization of the vegetative status, the synergistic effect of both components on neuronal plasticity, and, as a result, increased brain resistance to toxic effects, which improves integrative activity and restores interhemispheric connections the brain, helps to eliminate cognitive impairment, stimulates reparative processes and accelerates recovery These functions of the central nervous system increase mental performance, restore learning and memory processes, normalize somatovegetative manifestations, increase cerebral blood flow, and, accordingly, increase the effectiveness of treatment of Alzheimer's disease.
При этом заявленное лекарственное средство, как и составляющие ее компоненты, не обладает седативным и миорелаксантным действием, не вызывает пристрастия и привыкания.In this case, the claimed drug, as well as its constituent components, does not have a sedative and muscle relaxant effect, does not cause addiction and addiction.
Кроме того, заявленное лекарственное средство расширяет арсенал препаратов, предназначенных для лечения и профилактики болезни Альцгеймера.In addition, the claimed drug expands the arsenal of drugs intended for the treatment and prevention of Alzheimer's disease.
Лекарственное средство приготовляют, преимущественно, следующим образом.The drug is prepared mainly as follows.
Для приготовления активированной потенцированной формы действующих компонентов используют моноклональные или, преимущественно, поликлональные антитела, которые могут быть получены по известным технологиям - методикам, описанным, например, в книге: Иммунологические методы, под ред. Г.Фримеля, М., «Медицина», 1987, с.9-33; или, например, в статье Laffly E., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005 - Vol.14. - N 1-2. P.33-55.To prepare the activated potentiated form of the active components, monoclonal or, mainly, polyclonal antibodies are used, which can be obtained by known technologies - the techniques described, for example, in the book: Immunological methods, ed. G. Fremel, M., "Medicine", 1987, S. 9-33; or, for example, in an article by Laffly E., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005 - Vol.14. - N 1-2. P.33-55.
Моноклональные антитела получают, например, с помощью гибридомной технологии. Причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовлении поликлональных антисывороток. Дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. Их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.Monoclonal antibodies are obtained, for example, using hybridoma technology. Moreover, the initial stage of the process includes immunization, based on the principles already developed in the preparation of polyclonal antisera. Further stages of the work include obtaining hybrid cells producing clones of antibodies of the same specificity. Their isolation in an individual form is carried out by the same methods as in the case of polyclonal antisera.
Поликлональные антитела могут быть получены активной иммунизацией животных. Для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций требуемыми в соответствии с изобретением веществами - антигенами: мозгоспецифическим белком S-100 и эндотелиальной NO-синтазой. В результате проведения такой процедуры получают моноспецифические антисыворотки с высоким содержанием антител, которые используют для получения активированных потенцированных форм компонентов. При необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке, например, методом аффинной хроматографии, путем применения фракционирования солевым осаждением или ионообменной хроматографии.Polyclonal antibodies can be obtained by active immunization of animals. For this purpose, according to a specially developed scheme, animals are given a series of injections with the antigens required by the invention: brain-specific protein S-100 and endothelial NO synthase. As a result of this procedure, monospecific antisera with a high antibody content are obtained, which are used to obtain activated potentiated forms of the components. If necessary, the antibodies present in the antiserum are purified, for example, by affinity chromatography, using fractionation by salt precipitation or ion exchange chromatography.
Предпочтительным для приготовления заявленной фармацевтической композиции является использование поликлональных антител к мозгоспецифическому белку S-100 и к эндотелиальной NO-синтазе, которые в качестве матричного (первичного) раствора с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, используют для последующего приготовления активированной потенцированной формы.Preferred for the preparation of the claimed pharmaceutical composition is the use of polyclonal antibodies to the brain-specific protein S-100 and to endothelial NO synthase, which are used as a matrix (primary) solution with a concentration of 0.5 ÷ 5.0 mg / ml for the subsequent preparation of activated potentiated forms.
Предпочтительной для приготовления каждого компонента является использование смеси трех водно-спиртовых разведений первичного матричного раствора антител, разведенных, соответственно, в 10012, 10030 и 100200 раз, что соответствует сотенным разведениям С 12, C30 и С 200, приготовленным по гомеопатической технологии. При выполнении заявленного лекарственного средства в твердой лекарственной форме на лактозу наносится смесь указанных компонентов.Preferred for the preparation of each component is the use of a mixture of three water-alcohol dilutions of the primary matrix solution of antibodies diluted, respectively, 100 12 , 100 30 and 100 200 times, which corresponds to hundreds of dilutions C 12, C30 and C 200 prepared according to homeopathic technology. When performing the claimed drug in solid dosage form, a mixture of these components is applied to lactose.
Предпочтительным для приготовления заявленного лекарственного препарата является использование поликлональных антител к мозгоспецифическому белку S - 100 и эндотелиальной NO-синтазе, которые могут быть получены иммунизацией кроликов следующим образом.Preferred for the preparation of the claimed drug is the use of polyclonal antibodies to the brain-specific protein S - 100 and endothelial NO synthase, which can be obtained by immunization of rabbits as follows.
Для проведения экспериментальных исследований были использованы антитела, приготовленные по заказу специализированной биотехнологической фирмой.For experimental studies, antibodies were used, prepared by order of a specialized biotechnological company.
Поликлональные антитела к эндотелиальной NO-синтазе получают, используя в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов адъювант и цельную молекулу эндотелиальной NO-синтазы следующей последовательности:Polyclonal antibodies to endothelial NO synthase are prepared using the adjuvant and the whole endothelial NO synthase molecule of the following sequence as immunogen (antigen) for rabbit immunization:
1 MGNLKSVGQE PGPPCGLGLG LGLGLCGKQG PASPAPEPSR АРАРАТРНАР DHSPAPNSPT1 MGNLKSVGQE PGPPCGLGLG LGLGLCGKQG PASPAPEPSR ARARATRNAR DHSPAPNSPT
61 LTRPPEGPKF PRVKNWELGS ITYDTLCAQS QQDGPCTPRR CLGSLVLPRK LQTRPSPGPP61 LTRPPEGPKF PRVKNWELGS ITYDTLCAQS QQDGPCTPRR CLGSLVLPRK LQTRPSPGPP
121 PAEQLLSQAR DFINQYYSSI KRSGSQAHEE RLQEVEAEVA STGTIHLRES ELVFGAKQAW121 PAEQLLSQAR DFINQYYSSI KRSGSQAHEE RLQEVEAEVA STGTIHLRES ELVFGAKQAW
181 RNAPRCVGRI QWGKLQVFDA RDCSSAQEMF TYICNHIKYA TNRGNLRSAI TVFPQRAPGR181 RNAPRCVGRI QWGKLQVFDA RDCSSAQEMF TYICNHIKYA TNRGNLRSAI TVFPQRAPGR
241 GDFRIWNSQL VRYAGYRQQD GSVRGDPANV EITELCIQHG WTPGNGRFDV LPLLLQAPDE241 GDFRIWNSQL VRYAGYRQQD GSVRGDPANV EITELCIQHG WTPGNGRFDV LPLLLQAPDE
301 APELFVLPPE LVLEVPLGAP HTGWRGPGL RWYALPAVSN MLLEIGGLEF SAAPFSGWYM301 APELFVLPPE LVLEVPLGAP HTGWRGPGL RWYALPAVSN MLLEIGGLEF SAAPFSGWYM
361 STEIGTRNLC DPHRYNILED VAVCMDLDTR TTSSLWKDKA AVEINLAVLH SFQLAKVTIV361 STEIGTRNLC DPHRYNILED VAVCMDLDTR TTSSLWKDKA AVEINLAVLH SFQLAKVTIV
421 DHHAATVSFM KHLDNEQKAR GGCPADWAWI VPPIYGSLPP VFHQEMVNYI LSPAFRYQPD421 DHHAATVSFM KHLDNEQKAR GGCPADWAWI VPPIYGSLPP VFHQEMVNYI LSPAFRYQPD
481 PWKGSATKGA GITRKKTFKE VANAVKISAS LMGTLMAKRV KATILYASET GRAQSYAQQL481 PWKGSATKGA GITRKKTFKE VANAVKISAS LMGTLMAKRV KATILYASET GRAQSYAQQL
541 GRLFRKAFDP RVLCMDEYDV VSLEHEALVL VVTSTFGNGD PPENGESFAA ALMEMSGPYN541 GRLFRKAFDP RVLCMDEYDV VSLEHEALVL VVTSTFGNGD PPENGESFAA ALMEMSGPYN
601 SSPRPEQHKS YKIRFNSVSC SDPLVSSWRRKRKESSNTDS AGALGTLRFC VFGLGSRAYP601 SSPRPEQHKS YKIRFNSVSC SDPLVSSWRRKRKESSNTDS AGALGTLRFC VFGLGSRAYP
661 HFCAFARAVD TRLEELGGER LLQLGQGDEL CGQEEAFRGW AKAAFQASCE TFCVGEEAKA661 HFCAFARAVD TRLEELGGER LLQLGQGDEL CGQEEAFRGW AKAAFQASCE TFCVGEEAKA
721 AAQDIFSPKR SWKRQRYRLS AQAEGLQLLP GLIHVHRRKM FQATVLSVEN LQSSKSTRAT721 AAQDIFSPKR SWKRQRYRLS AQAEGLQLLP GLIHVHRRKM FQATVLSVEN LQSSKSTRAT
781 ILVRLDTAGQ EGLQYQPGDH IGISAPNRPG LVEALLSRVE DPPPPTESVA VEQLEKGSPG781 ILVRLDTAGQ EGLQYQPGDH IGISAPNRPG LVEALLSRVE DPPPPTESVA VEQLEKGSPG
841 GPPPSWVRDP RLPPCTVRQA LTFFLDITSP PSPRLLRLLS TLAEEPSEQQ ELETLSQDPR841 GPPPSWVRDP RLPPCTVRQA LTFFLDITSP PSPRLLRLLS TLAEEPSEQQ ELETLSQDPR
901 RYEEWKLVRC PTLLEVLEQF PSVALPAPLL LTQLPLLQPR YYSVSSAPNA HPGEVHLTVA901 RYEEWKLVRC PTLLEVLEQF PSVALPAPLL LTQLPLLQPR YYSVSSAPNA HPGEVHLTVA
961 VLAYRTQDGL GPLHYGVCST WLSQLKTGDP VPCFIRGAPS FRLPPDPYVP CILVGPGTGI961 VLAYRTQDGL GPLHYGVCST WLSQLKTGDP VPCFIRGAPS FRLPPDPYVP CILVGPGTGI
1021 APFRGFWQERLHDIESKGLQ PHPMTLVFGC RCSQLDHLYR DEVQDAQERG VFGRVLTAFS1021 APFRGFWQERLHDIESKGLQ PHPMTLVFGC RCSQLDHLYR DEVQDAQERG VFGRVLTAFS
1081 REPDSPKTYV QDILRTELAA EVHRVLCLER GHMFVCGDVT MATSVLQTVQ RILATEGDME1081 REPDSPKTYV QDILRTELAA EVHRVLCLER GHMFVCGDVT MATSVLQTVQ RILATEGDME
1141 LDEAGDVIGV LRDQQRYHED IFGLTLRTQE VTSRIRTQSF SLQERHLRGA VPWAFDPPGP1141 LDEAGDVIGV LRDQQRYHED IFGLTLRTQE VTSRIRTQSF SLQERHLRGA VPWAFDPPGP
1201 DTPGP1201 DTPGP
Возможно для получения поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе использование в качестве иммуногена (антигена) цельной молекулы эндотелиальной NO-синтазы следующей последовательности:It is possible to obtain polyclonal antibodies to endothelial NO synthase using the following sequence as an immunogen (antigen) of a whole molecule of endothelial NO synthase:
1 MGNLKSVAQE PGPPCGLGLG LGLGLCGKQG PATPAPEPSR APASLLPPAP EHSPPSSPLT1 MGNLKSVAQE PGPPCGLGLG LGLGLCGKQG PATPAPEPSR APASLLPPAP EHSPPSSPLT
61 QPPEGPKFPR VKNWEVGSIT YDTLSAQAQQ DGPCTPRRCL GSLVFPRKLQ GRPSPGPPAP61 QPPEGPKFPR VKNWEVGSIT YDTLSAQAQQ DGPCTPRRCL GSLVFPRKLQ GRPSPGPPAP
121 EQLLSQARDF INQYYSSIKR SGSQAHEQRL QEVEAEVAAT GTYQLRESEL VFGAKQAWRN121 EQLLSQARDF INQYYSSIKR SGSQAHEQRL QEVEAEVAAT GTYQLRESEL VFGAKQAWRN
181 APRCVGRIQW GKLQVFDARD CRSAQEMFTY ICNHIKYATN RGNLRSAITV FPQRCPGRGD181 APRCVGRIQW GKLQVFDARD CRSAQEMFTY ICNHIKYATN RGNLRSAITV FPQRCPGRGD
241 FRIWNSQLVRYAGYRQQDGS VRGDPANVEI TELCIQHGWT PGNGRFDVLP LLLQAPDDPP241 FRIWNSQLVRYAGYRQQDGS VRGDPANVEI TELCIQHGWT PGNGRFDVLP LLLQAPDDPP
301 ELFLLPPELV LEVPLEHPTL EWFAALGLRW YALPAVSNML LEIGGLEFPA APFSGWYMST301 ELFLLPPELV LEVPLEHPTL EWFAALGLRW YALPAVSNML LEIGGLEFPA APFSGWYMST
361 EIGTRNLCDP HRYNILEDVA VCMDLDTRTT SSLWKDKAAV EINVAVLHSY QLAKVTIVDH361 EIGTRNLCDP HRYNILEDVA VCMDLDTRTT SSLWKDKAAV EINVAVLHSY QLAKVTIVDH
421 HAATASFMKH LENEQKARGG CPADWAWIVP PISGSLTPVF HQEMVNYFLS PAFRYQPDPW421 HAATASFMKH LENEQKARGG CPADWAWIVP PISGSLTPVF HQEMVNYFLS PAFRYQPDPW
481 KGSAAKGTGI TRKKTFKEVA NAVKISASLM GTVMAKRVKA TILYGSETGR AQSYAQQLGR481 KGSAAKGTGI TRKKTFKEVA NAVKISASLM GTVMAKRVKA TILYGSETGR AQSYAQQLGR
541 LFRKAFDPRV LCMDEYDVVS LEHETLWLVV TSTFGNGDPP ENGESFAAAL MEMSGPYNSS541 LFRKAFDPRV LCMDEYDVVS LEHETLWLVV TSTFGNGDPP ENGESFAAAL MEMSGPYNSS
601 PRPEQHKSYK IRFNSISCSD PLVSSWRRKRKESSNTDSAG ALGTLRFCVF GLGSRAYPHF601 PRPEQHKSYK IRFNSISCSD PLVSSWRRKRKESSNTDSAG ALGTLRFCVF GLGSRAYPHF
661 CAFARAVDTRLEELGGERLL QLGQGDELCG QEEAFRGWAQ AAFQAACETF CVGEDAKAAA661 CAFARAVDTRLEELGGERLL QLGQGDELCG QEEAFRGWAQ AAFQAACETF CVGEDAKAAA
721 RDIFSPKRSW KRQRYRLSAQ AEGLQLLPGL IHVHRRKMFQ ATIRSVENLQ SSKSTRATIL721 RDIFSPKRSW KRQRYRLSAQ AEGLQLLPGL IHVHRRKMFQ ATIRSVENLQ SSKSTRATIL
781 VRLDTGGQEG LQYQPGDHIG VCPPNRPGLV EALLSRVEDP PAPTEPVAVE QLEKGSPGGP781 VRLDTGGQEG LQYQPGDHIG VCPPNRPGLV EALLSRVEDP PAPTEPVAVE QLEKGSPGGP
841 PPGWVRDPRL PPCTLRQALT FFLDITSPPS PQLLRLLSTL AEEPREQQEL EALSQDPRRY841 PPGWVRDPRL PPCTLRQALT FFLDITSPPS PQLLRLLSTL AEEPREQQEL EALSQDPRRY
901 EEWKWFRCPT LLEVLEQFPS VALPAPLLLT QLPLLQPRYY SVSSAPSTHP GEIHLTVAVL901 EEWKWFRCPT LLEVLEQFPS VALPAPLLLT QLPLLQPRYY SVSSAPSTHP GEIHLTVAVL
961 AYRTQDGLGP LHYGVCSTWL SQLKPGDPVP CFIRGAPSFR LPPDPSLPCI LVGPGTGIAP961 AYRTQDGLGP LHYGVCSTWL SQLKPGDPVP CFIRGAPSFR LPPDPSLPCI LVGPGTGIAP
1021 FRGFWQERLHDIESKGLQPTPMTLVFGCRC SQLDHLYRDE VQNAQQRGVF GRVLTAFSRE1021 FRGFWQERLHDIESKGLQPTPMTLVFGCRC SQLDHLYRDE VQNAQQRGVF GRVLTAFSRE
1081 PDNPKTYVQD ILRTELAAEV HRVLCLERGH MFVCGDVTMA TNVLQTVQRI LATEGDMELD1081 PDNPKTYVQD ILRTELAAEV HRVLCLERGH MFVCGDVTMA TNVLQTVQRI LATEGDMELD
1141 EAGDVIGVLRDQQRYHEDIF GLTLRTQEVT SRIRTQSFSL QERQLRGAVP WAFEPPGSDT1141 EAGDVIGVLRDQQRYHEDIF GLTLRTQEVT SRIRTQSFSL QERQLRGAVP WAFEPPGSDT
1201 NSP1201 NSP
Возможно для получения поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе использование в качестве иммуногена (антигена) синтетического пептида эндотелиальной NO-синтазы, выбранного, например, из следующих аминокислотных последовательностей:It is possible to obtain polyclonal antibodies to endothelial NO synthase using, as an immunogen (antigen), a synthetic peptide of endothelial NO synthase, selected, for example, from the following amino acid sequences:
1192-11951192-1195
PWAFPwaf
1189-1192:1189-1192:
GAVPGavp
1185-1205:1185-1205:
RHLRGAVPWAF DPPGPDTPGPRHLRGAVPWAF DPPGPDTPGP
1194-1205:1194-1205:
AF DPPGPDTPGPAF DPPGPDTPGP
1186-1196:1186-1196:
HLRGAVPWAF DHLRGAVPWAF D
1186-1205:1186-1205:
HLRGAVPWAF DPPGPDTPGPHLRGAVPWAF DPPGPDTPGP
Перед отбором крови за 7-9 дней проводят 1-3 внутривенных инъекций для повышения уровня антител. В процессе иммунизации у кроликов отбирают небольшие пробы крови для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунного ответа на введение большинства растворимых антигенов достигается через 40-60 дней после первой инъекции. После окончания первого цикла иммунизации кроликов в течение 30 дней дают восстановить здоровье и проводят реиммунизацию, включающую 1-3 внутривенные инъекции. Для получения антисыворотки из иммунизированных кроликов собирают кровь в центрифужную пробирку объемом 50 мл. С помощью деревянного шпателя удаляют со стенок пробирки образовавшиеся сгустки и помещают палочку в сгусток, образовавшийся в центре пробирки. Кровь помещают в холодильник (температура 4°С) на ночь. На следующий день удаляют сгусток, прикрепившийся к шпателю, и центрифугируют оставшуюся жидкость при 13000g в течение 10 мин. Супернатант (надосадочная жидкость) является антисывороткой.Before blood sampling for 1-3 days, 1-3 intravenous injections are performed to increase the level of antibodies. During immunization, small blood samples are taken from rabbits to evaluate the amount of antibody. The maximum level of the immune response to the administration of most soluble antigens is achieved 40-60 days after the first injection. After the end of the first cycle of immunization of rabbits for 30 days, they restore health and re-immunization, including 1-3 intravenous injections. To obtain antisera from immunized rabbits, blood is collected in a 50 ml centrifuge tube. Using a wooden spatula, the formed clots are removed from the walls of the tube and the wand is placed in the clot formed in the center of the tube. Blood is placed in a refrigerator (temperature 4 ° C) at night. The next day, the clot attached to the spatula is removed and the remaining liquid is centrifuged at 13000g for 10 minutes. The supernatant (supernatant) is an antiserum.
Полученная антисыворотка должна быть желтого цвета. Добавляют к антисыворотке 20% (весовая концентрация) NaNs до конечной концентрации 0,02% и хранят до использования в замороженном состоянии при температуре -20°С (или без добавления NaNs - при температуре -70°С). Для выделения из антисыворотки антител к эндотелиальной NO-синтазе производят абсорбцию на твердой фазе в следующей последовательности:The resulting antiserum should be yellow. Add to the antiserum 20% (weight concentration) NaNs to a final concentration of 0.02% and store until use in a frozen state at a temperature of -20 ° C (or without adding NaNs at a temperature of -70 ° C). To isolate antibodies to endothelial NO synthase from antiserum, solid phase absorption is performed in the following sequence:
1. 10 мл антисыворотки кролика разбавляют в 2 раза 0,15 М Nad, добавляют 6,26 г Na2SO4, перемешивают и инкубируют 12-16 ч при 4°С;1. 10 ml of rabbit antiserum is diluted 2 times with 0.15 M Nad, 6.26 g of Na 2 SO 4 are added, mixed and incubated for 12-16 hours at 4 ° C;
2. Выпавший осадок удаляют центрифугированием, растворяют в 10 мл фосфатного буфера и затем диализуют против того же буфера в течение ночи при комнатной температуре;2. The precipitate formed is removed by centrifugation, dissolved in 10 ml of phosphate buffer and then dialyzed against the same buffer overnight at room temperature;
3. После удаления осадка центрифугированием раствор наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенную фосфатным буфером;3. After removing the precipitate by centrifugation, the solution is applied to a column with DEAE-cellulose, balanced with phosphate buffer;
4. Фракцию антител определяют, измеряя оптическую плотность элюата при 280 нм.4. The antibody fraction is determined by measuring the optical density of the eluate at 280 nm.
Затем производят очистку антител методом аффинной хроматографии путем прикрепления полученных антител к эндотелиальной NO-синтазе, который находится на нерастворимом матриксе с последующим элюированием концентрированными растворами соли.The antibodies are then purified by affinity chromatography by attaching the obtained antibodies to endothelial NO synthase, which is located on an insoluble matrix, followed by elution with concentrated salt solutions.
Полученный, таким образом, буферный раствор поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NO-синтазе, очищенных на антигене, с концентрацией 0,5-5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0-3,0 мг/мл, используют в качестве матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной потенцированной формы.Thus obtained buffer solution of polyclonal rabbit antibodies to endothelial NO synthase purified on an antigen with a concentration of 0.5-5.0 mg / ml, preferably 2.0-3.0 mg / ml, is used as a matrix ( primary) solution for the subsequent preparation of the activated potentiated form.
Для получения поликлональных антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют мозгоспецифический белок S-100, физико-химические свойства которого описаны в статье М.В.Старостина, С.М.Свиридов. Нейроспецифический белок S-100. Успехи современной биологии, 1977 г., т.5, с.170-178; книге М.Б.Штарк, Мозгоспецифические белки /антигены/ и функции нейрона, М., "Медицина", 1985 г.; с.12-14, выделенный из ткани головного мозга быка по следующей методике:To obtain polyclonal antibodies to the brain-specific protein S-100, the brain-specific protein S-100 is used, the physicochemical properties of which are described in the article by M.V. Starostin, S. M. Sviridov. Neurospecific protein S-100. Successes of modern biology, 1977, v.5, p.170-178; book of MB Stark, Brain-specific proteins / antigens / and neuron functions, M., "Medicine", 1985; p.12-14, isolated from tissue of the brain of a bull by the following method:
- замороженную в жидком азоте ткань растирают в порошок на специальной мельнице;- fabric frozen in liquid nitrogen is ground into powder in a special mill;
- экстракцию белков проводят в соотношении 1:3 (вес/объем) в экстрагирующем буфере при гомогенизации;- the extraction of proteins is carried out in a ratio of 1: 3 (weight / volume) in the extraction buffer during homogenization;
- гомогенат прогревают в течение 10 мин при 60°С и охлаждают до 4°С на ледяной бане;- the homogenate is heated for 10 min at 60 ° C and cooled to 4 ° C in an ice bath;
- термолабильные белки удаляют центрифугированием;- thermolabile proteins are removed by centrifugation;
- проводят ступенчатое фракционирование сульфатом аммония с последующим удалением выпадающих в осадок примесных белков;- carry out stepwise fractionation with ammonium sulfate, followed by removal of precipitated impurity proteins;
- содержащую белок S-100 фракцию осаждают 100% насыщенным сульфатом аммония при снижении рН до 4,0 и собирают центрифугированием;- the S-100 protein-containing fraction is precipitated with 100% saturated ammonium sulfate when the pH is reduced to 4.0 and collected by centrifugation;
- осадок растворяют в минимальном объеме буфера, содержащего ЭДТА и меркаптоэтанол, диализируют против деионизованной воды и лиофильно высушивают;- the precipitate is dissolved in a minimum volume of a buffer containing EDTA and mercaptoethanol, dialyzed against deionized water and freeze-dried;
- фракционирование кислых белков продолжают хроматографией на ионообменных носителях - ДЭАЭ целлюлозе ДЕ-52 и затем ДЭАЭ-сефадексе А-50;- fractionation of acidic proteins is continued by chromatography on ion-exchange media — DEAE cellulose DE-52 and then DEAE-Sephadex A-50;
- собранные и отдиализованные фракции, содержащие белок S-100, разделяют по молекулярному весу гель-фильтрацией на сефадексе G-100;- collected and dialyzed fractions containing S-100 protein are separated by molecular weight by gel filtration on Sephadex G-100;
- очищенный белок S-100 диализируют и лиофильно высушивают.- purified S-100 protein is dialyzed and freeze-dried.
Молекулярный вес очищенного мозгоспецифического белка S-100 составляет - 21000 д.The molecular weight of the purified brain-specific protein S-100 is 21,000 d.
Благодаря высокому содержанию аспарагиновой и глутаминовой кислот мозгоспецифический белок S-100 является сильнокислым и занимает крайнее анодное положение при электрофорезе в прерывистой буферной системе в полиакриламидном геле, что облегчает его идентификацию.Due to the high content of aspartic and glutamic acids, the brain-specific protein S-100 is strongly acidic and occupies the extreme anode position during electrophoresis in a discontinuous buffer system in a polyacrylamide gel, which facilitates its identification.
Для получения мозгоспецифической антисыворотки к выделенному мозгоспецифическому белку S-100 готовят смесь очищенного белка S-100 (антигена) в комплексе с метилированным бычьим сывороточным альбумином в качестве носителя с полным адъювантом Фрейнда, которую вводят подкожно лабораторному животному - кролику в область спины в количестве 1-2 мл. На 8-й, 15-й день проводят повторную иммунизацию. Забор крови производят (например, из вены уха) на 26-й и 28-й день.To obtain a brain-specific antiserum, a purified S-100 protein (antigen) is prepared in combination with methylated bovine serum albumin as a carrier with Freund's complete adjuvant, which is administered subcutaneously to a laboratory rabbit animal in the amount of 1- to a selected brain-specific protein S-100. 2 ml On the 8th, 15th day, re-immunization is carried out. Blood is taken (for example, from an ear vein) on the 26th and 28th day.
Полученная антисыворотка имеет титр 1:500-1:1000, образует единственную полосу преципитации с экстрактом из нервной ткани, но не реагирует с экстрактами гетерологичных органов и формирует единственный пик преципитации как с чистым белком S-100, так и с экстрактом нервной ткани, что свидетельствует о моноспецифичности полученной антисыворотки.The resulting antiserum has a titer of 1: 500-1: 1000, forms a single precipitation band with extract from nervous tissue, but does not react with extracts of heterologous organs, and forms a single precipitation peak with both pure S-100 protein and nervous tissue extract, which indicates the monospecificity of the obtained antiserum.
Активированную потенцированную форму каждого компонента готовят путем равномерного уменьшения концентрации в результате последовательного разведения 1 части упомянутого матричного раствора в 9 частях (для десятичного разведения D) или в 99 частях (для сотенного разведения С) или в 999 частях (для тысячного разведения М) нейтрального растворителя в сочетании с многократным вертикальным (не менее 10 раз) встряхиванием ("динамизацией") каждого полученного разведения и использованием отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой потенции - кратности разведения по гомеопатическому методу (см., например, В.Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29).The activated potentiated form of each component is prepared by uniformly decreasing the concentration as a result of sequential dilution of 1 part of the above matrix solution in 9 parts (for decimal dilution D) or 99 parts (for hundredth dilution C) or 999 parts (for thousandth dilution M) of a neutral solvent in combination with multiple vertical (at least 10 times) shaking ("dynamization") of each dilution obtained and the use of separate containers for each subsequent dilution to p radiation required potency - the multiplicity of homeopathic dilution method (see, eg, W. Schwabe "Homeopathic medicines", M., 1967, s.14-29.).
Внешнюю обработку в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.External processing in the process of reducing the concentration can also be performed by ultrasound, electromagnetic or other physical effects.
Например, для приготовления 12-го сотенного разведения С 12 одну часть упомянутого матричного раствора антител к мозгоспецифическому белку S-100 (или к NO-синтазе) с концентрацией 2,5 мг/мл разводят в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового растворителя (преимущественно 15% этилового спирта) и многократно (10 и более раз) вертикально встряхивают - потенцируют полученное 1-е сотенное С1 разведение. Из 1-го сотенного С1 разведения приготовляют 2-ое сотенное разведение С2. Данную операцию повторяют 11 раз, получая 12-е сотенное разведение С 12. Таким образом, 12-е сотенное разведение С 12 представляет собой раствор, полученный разбавлением последовательно в разных емкостях 12 раз 1-ой части исходного матричного раствора антител к мозгоспецифическому белку S-100 с концентрацией 2,5 мг/мл в 99-ти частях нейтрального растворителя, т.е. раствор, приготовленный разведением матричного раствора в 10012 раз. Аналогичные операции с соответствующей кратностью разведения проводят для получения разведений С 30 и С 200.For example, for the preparation of the 12th hundredth C12 dilution, one part of the above matrix solution of antibodies to the brain-specific protein S-100 (or to NO synthase) with a concentration of 2.5 mg / ml is diluted in 99 parts of a neutral aqueous or aqueous-alcoholic solvent ( mostly 15% ethyl alcohol) and repeatedly (10 or more times) vertically shake - potentiate the obtained 1st hundredth C1 dilution. From the 1st hundredth C1 dilution prepare the 2nd hundredth dilution C2. This operation is repeated 11 times, obtaining a 12th hundredth dilution of C 12. Thus, the 12th hundredth dilution of C12 is a solution obtained by diluting successively in different containers 12 times of the first part of the initial matrix solution of antibodies to the brain-specific protein S- 100 with a concentration of 2.5 mg / ml in 99 parts of a neutral solvent, i.e. a solution prepared by diluting the matrix solution in 100 12 times. Similar operations with the appropriate dilution ratio are carried out to obtain dilutions of C 30 and C 200.
При использовании в качестве биологически активного жидкого компонента смеси различных, преимущественно сотенных, разведений действующего вещества, полученных по гомеопатической технологии, каждый компонент состава (например, С12, С30, С0) приготовляют раздельно по описанной выше технологии до их предпоследнего разведения (соответственно, до получения С11, С29, С199) и затем вносят в соответствии с составом смеси в одну емкость по одной части каждого компонента и смешивают с требуемым количеством растворителя (соответственно, с 97 частями для сотенного разведения). При этом получают активированную потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением матричного раствора, соответственно, в 10012, 10030 и 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30 и С200.When using as a biologically active liquid component a mixture of various, mainly hundred, dilutions of the active substance obtained by homeopathic technology, each component of the composition (for example, C12, C30, C0) is prepared separately according to the technology described above to their penultimate dilution (respectively, to obtain C11, C29, C199) and then, in accordance with the composition of the mixture, make one part of each component in one container and mix with the required amount of solvent (respectively, with 97 parts for Autun dilution). In this case, an activated potentiated form of antibodies to the brain-specific protein S-100 is obtained in an ultra-low dose obtained by super-dilution of the matrix solution, respectively, 100 12 , 100 30 and 100 200 times, equivalent to a mixture of hundreds of homeopathic dilutions C12, C30 and C200.
Возможно использование каждого компонента в виде смеси других различных разведений по гомеопатической технологии, например, десятичных и или сотенных, (С12, С30, С100; D20, С30, С100 или D20, С30, М100 и т.д.), эффективность которых определяют экспериментально.It is possible to use each component in the form of a mixture of other various dilutions according to homeopathic technology, for example, decimal and or hundredths (C12, C30, C100; D20, C30, C100 or D20, C30, M100, etc.), the effectiveness of which is determined experimentally .
Для получения заявленной фармацевтической композиции водные или водно-спиртовые растворы действующих компонентов смешивают, преимущественно, в объемном соотношении 1:1 и используют в жидкой лекарственной форме.To obtain the claimed pharmaceutical composition, aqueous or aqueous-alcoholic solutions of the active ingredients are mixed, mainly in a volume ratio of 1: 1 and used in liquid dosage form.
Заявленная фармацевтическая композиция может быть использована и в твердой лекарственной форме, которая содержит эффективное количество частиц нейтрального носителя - лактозы, насыщенного путем пропитывания до насыщения смесью водных или водно-спиртовых растворов активированной потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированной потенцированной формой антител к эндотелиальной NO-синтазе, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие, преимущественно, лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.The claimed pharmaceutical composition can also be used in solid dosage form, which contains an effective amount of particles of a neutral carrier - lactose, saturated by impregnation of an activated potentiated form of antibodies to the brain-specific protein S-100 and an activated potentiated form of antibodies to endothelial NO synthase, and pharmaceutically acceptable additives, including mainly lactose, microcrystalline cellulose and magnesium stearate.
Для получения твердой оральной формы заявленного лекарственного средства производят в установке кипящего слоя (например, типа «Hiittim Pilotlab» производства компании Huttlin GmbH) орошение до насыщения вводимых в псевдоожиженный - кипящий слой частиц нейтрального вещества - лактозы (молочного сахара) с размером частиц 150÷300 мкм, предварительно полученным водным или водно-спиртовым раствором активированных потенцированных форм антител к С мозгоспецифическому белку S-100 и к эндотелиальной синтазе оксида азота (NO-синтазе), преимущественно, в соотношении 1 кг раствора антител на 5 или 10 кг лактозы (1:5-1:10) с одновременной сушкой в потоке подаваемого под решетку нагретого воздуха при температуре не выше 40°С. Расчетное количество 0,17÷0,34 от массы твердой оральной формы высушенных частиц, насыщенных активированной потенцированной формой антител, загружают в смеситель и смешивают с микрокристаллической целлюлозой, вводимой в количестве 3÷8 масс. частей от общей массы загрузки - от массы твердой оральной формы. Затем в эту смесь добавляют 25÷45 масс. частей от общей массы загрузки «ненасыщенной» чистой лактозы (для снижения стоимости и некоторого упрощения и ускорения технологического процесса без снижения эффективности лечебного воздействия) и стеарат магния в количестве 0,1÷0,3 масс. частей от общей массы загрузки. Полученную таблеточную массу равномерно перемешивают и таблетируют прямым сухим прессованием (например, в таблет-прессе Korsch - XL 400) с формированием круглых таблеток массой 150-500 мг. После таблетирования получают таблетки массой 300 мг, пропитанные водно-спиртовым раствором активированной потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 и NO-синтазы в сверхмалой дозе, каждого компонента, приготовленной из матричного раствора, разведенного, соответственно, в 10012, в 10030 в 100200, что эквивалентно смеси сотенных разведений С 12, C30 и С200, приготовленных по гомеопатической технологии.To obtain a solid oral form of the claimed medicinal product, a fluidized bed is installed (for example, type “Hiittim Pilotlab” manufactured by Huttlin GmbH) irrigation until saturation of particles of a neutral substance - lactose (milk sugar) with a particle size of 150 ÷ 300 μm, a pre-prepared aqueous or aqueous-alcoholic solution of activated potentiated forms of antibodies to C brain-specific protein S-100 and to endothelial synthase of nitric oxide (NO synthase), mainly in the ratio and 1 kg of antibody solution to 5 or 10 kg of lactose (1: 5-1: 10) with simultaneous drying in a heated air stream supplied under the grate at a temperature of not higher than 40 ° C. The estimated amount of 0.17 ÷ 0.34 by weight of the solid oral form of the dried particles saturated with the activated potentiated form of antibodies is loaded into the mixer and mixed with microcrystalline cellulose introduced in an amount of 3-8 mass. parts of the total mass of the load - from the mass of solid oral form. Then 25 ÷ 45 masses are added to this mixture. parts of the total mass of the load of "unsaturated" pure lactose (to reduce the cost and some simplification and acceleration of the process without reducing the effectiveness of the therapeutic effect) and magnesium stearate in an amount of 0.1 ÷ 0.3 mass. parts of the total mass of the load. The resulting tablet mass is uniformly mixed and tabletted by direct dry pressing (for example, in a Korsch tablet press - XL 400) with the formation of round tablets weighing 150-500 mg. After tabletting, 300 mg tablets are obtained, impregnated with an aqueous-alcoholic solution of an activated potentiated form of antibodies to the brain-specific protein S-100 and NO synthase in an ultra-low dose, each component prepared from a matrix solution diluted, respectively, in 100 12 , in 100 30 100,200 , which is equivalent to a mixture of hundred dilutions of C 12, C30 and C200 prepared according to homeopathic technology.
Предпочтительно заявленную фармацевтическую композицию рекомендуется принимать по 1-2 таблетке 2-6 раз в день.Preferably, the claimed pharmaceutical composition is recommended to take 1-2 tablets 2-6 times a day.
Пример 1.Example 1
Исследование влияния комплексного препарата, в состав которого входят активированные потенцированные формы поликлональных аффинно очищенных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100 (анти-S100) и к эндотелиальной NO-синтазе (анти-eNOS) в сверхмалых дозах (СМД), полученных сверхразведением исходного матричного раствора (концентрацией 2,5 мг/мл) в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентных смеси сотенных гомеопатических разведений С 12, C30, С200, в соотношении 1:1 (СМД анти-S100+анти-eNOS), а также компонентов, входящих в его состав - активированной потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе (СМД анти-S100), полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012,10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С 12, C30, С200 и активированной потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NO-синтазе, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе (СМД анти-eNOS), полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, C30, С200, проводили in vitro на связывание стандартного лиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма 1 рецептором человека оценивали радиолигандным методом.Investigation of the effect of a complex preparation, which includes activated potentiated forms of polyclonal affinity purified rabbit antibodies to brain-specific protein S-100 (anti-S100) and to endothelial NO synthase (anti-eNOS) in ultra-low doses (SMD) obtained by super-dilution of the original matrix a solution (concentration of 2.5 mg / ml) in 100 12 , 100 30 , 100 200 times, equivalent to a mixture of hundred homeopathic dilutions C 12, C30, C200, in a 1: 1 ratio (SMD anti-S100 + anti-eNOS), and also the components included in its composition - activated potenti bath forms of polyclonal rabbit antibodies to brain-specific protein S-100, purified on antigen, in an ultra-low dose (SMD anti-S100) obtained by super-dilution of the initial matrix solution 100 12 , 100 30 , 100 200 times, equivalent to a mixture of hundred-percent homeopathic dilutions C 12, C30, C200 and the activated potentiated form of polyclonal rabbit antibodies to endothelial NO-synthase, purified on an antigen, in ultralow dose (SMD anti-eNOS), obtained sverhrazvedeniem initial matrix solution 100 12, 100 30, 100 to 200 times the equivalent cell mixture GOVERNMENTAL homeopathic dilutions C12, C30, C200, performed in vitro on the binding of standard ligand [3H] pentazocine with recombinant human sigma 1 receptor was evaluated by radioligand.
Сигма-1 рецептор - внутриклеточный рецептор, локализованный в клетках центральной нервной системе, клетках большинства периферических тканей и иммунокомпетентных клетках. Рецепторы демонстрируют уникальную способность транслоцироваться, которая вызывается множеством психотропных препаратов. Динамика сигма-1 рецепторов непосредственно связана с различными влияниями, осуществляемыми препаратами при действии на сигма-1 рецепторы. Эти влияния включают регуляцию каналов активности, экоцитоз, передачу сигналов, ремоделирование плазменной мембраны (формирование рафтов) и транспортировку липидов/метаболизм. Все это может способствовать развитию пластичности нейронов в мозге. Имеются доказательные данные, что сигма-1 рецепторы оказывают модулирующее влияние на все основные нейромедиаторные системы: норадренергическую, серотонинергическую, дофаминергическую, холинергическую системы и NMDA-регулируемые глутаматные эффекты. Сигма-1 рецептор играет важную роль в патофизиологии нейроденегенративных заболеваний, в том числе Альцгеймера, участвует в процессах обучения и памяти. В связи с этим способность лекарственных средств оказывать влияние на эффективность взаимодействия лигандов с сигма-1 рецептором указывает на наличие нейропротекторного, противоишемического, анксиолитического, антидепрессивного, антиастенического компонентов в спектре их фармакологической активности, что позволяет рассматривать данные препараты в качестве эффективных лекарственных средств, в том числе, для лечения цереброваскулярных заболеваний.Sigma-1 receptor is an intracellular receptor localized in the cells of the central nervous system, the cells of most peripheral tissues and immunocompetent cells. Receptors demonstrate a unique ability to translocate, which is caused by many psychotropic drugs. The dynamics of sigma-1 receptors is directly related to the various effects carried out by the drugs when they act on sigma-1 receptors. These effects include regulation of activity channels, ecocytosis, signaling, plasma membrane remodeling (raft formation), and lipid transport / metabolism. All this can contribute to the development of plasticity of neurons in the brain. There is evidence that sigma-1 receptors have a modulating effect on all major neurotransmitter systems: noradrenergic, serotonergic, dopaminergic, cholinergic systems and NMDA-regulated glutamate effects. Sigma-1 receptor plays an important role in the pathophysiology of neurodegenerative diseases, including Alzheimer's, and is involved in learning and memory. In this regard, the ability of drugs to influence the effectiveness of the interaction of ligands with the sigma-1 receptor indicates the presence of neuroprotective, anti-ischemic, anxiolytic, antidepressant, anti-asthenic components in the spectrum of their pharmacological activity, which allows us to consider these drugs as effective drugs, including including, for the treatment of cerebrovascular disease.
В качестве контроля тестируемых препаратов была протестирована потенцированная дистиллированная вода (смесь гомеопатических разведений С12+C30+С200).Potentiated distilled water (a mixture of homeopathic dilutions C12 + C30 + C200) was tested as a control of the tested drugs.
В опыте (для измерения общего связывания) в инкубационную среду вносили 20 мкл комплексного препарата СМД анти-S100+анти-eNOS или по 10 мкл СМД анти-S100 или 10 мкл СМД анти-eNOS. Таким образом, количество СМД анти-S100+анти-eNOS, вносимых в экспериментальную лунку при тестировании комплексного препарата, было идентично количеству СМД анти-S100 и СМД анти-eNOS, тестируемых в качестве монопрепаратов, что позволяет провести сравнение эффективности комплексного препарата с его отдельными компонентами, входящими в его состав. Потенцированную дистиллированную воду вносили в инкубационную среду в объеме 20 мкл и 10 мкл.In the experiment (for measuring total binding), 20 μl of the complex preparation of SMD anti-S100 + anti-eNOS or 10 μl of SMD anti-S100 or 10 μl of SMD anti-eNOS was added to the incubation medium. Thus, the amount of SMD anti-S100 + anti-eNOS introduced into the experimental well when testing the complex preparation was identical to the number of SMD anti-S100 and SMD anti-eNOS tested as single drugs, which allows us to compare the effectiveness of the complex drug with its individual the components that make up its composition. Potentiated distilled water was introduced into the incubation medium in a volume of 20 μl and 10 μl.
Затем вносили 160 мкл (~200(-ig белка)) гомогената мембран клеток линии Jurkat (линия лейкемических Т-лимфоцитов человека), и в последнюю очередь 20 мкл радиолиганда меченого тритием [3H]пентазоцин (15 нМ).Then 160 μl (~ 200 (-ig protein)) of the homogenate of the cell membranes of the Jurkat line (human leukemic T-lymphocyte line), and lastly 20 μl of the tritium-labeled [ 3 H] pentazocine radioligand (15 nM) were added.
Для измерения неспецифического связывания вместо препаратов или потенцированной воды в инкубационную среду вносили 20 мкл немеченого лиганда - галоперидол (10 мкМ).To measure nonspecific binding, instead of preparations or potentized water, 20 μl of unlabeled ligand, haloperidol (10 μM), was added to the incubation medium.
Радиоактивность измеряли на сцинтилляционном счетчике (Topcount, Packard) с использованием сцинтилляционной смеси (Microscint 0, Packard) после инкубации в течение 120 минут при температуре 22°С в 50 мМ Tris-HCl буфере (рН=7,4) и фильтрации на стекловолоконных фильтрах (GF/B, Packard). Специфическое связывание (в опыте или контроле) рассчитывали как разницу между общим (в опыте или контроле) и неспецифическим связыванием.Radioactivity was measured on a scintillation counter (Topcount, Packard) using a scintillation mixture (Microscint 0, Packard) after incubation for 120 minutes at 22 ° C in 50 mM Tris-HCl buffer (pH = 7.4) and filtration on glass fiber filters (GF / B, Packard). Specific binding (in experiment or control) was calculated as the difference between total (in experiment or control) and non-specific binding.
Результаты представлены в виде процента ингибирования специфического связывания в контроле (в качестве контроля использовали дистиллированную воду) (Таблица 1).The results are presented as percent inhibition of specific binding in the control (distilled water was used as a control) (Table 1).
Результаты, отражающие ингибирование выше 50%, представляют собой значительные эффекты исследуемых соединений;Results reflecting inhibitions above 50% represent significant effects of the test compounds;
ингибирование от 25% до 50%, свидетельствуют об эффектах от слабого до умеренного; ингибирование менее 25% считаются незначительными эффектами исследуемого соединения и находятся в пределах уровня фона.inhibition from 25% to 50%, indicate effects from mild to moderate; inhibitions of less than 25% are considered minor effects of the test compound and are within the background level.
Таким образом, в условиях данной экспериментальной модели показано, что: комплексный препарат СМД анти-5100+анти-eNOS более эффективно, чем отдельные его компоненты (СМД анти-S100 и СМД анти-eNOS) ингибирует связывание стандартного радиолиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма 1 рецептором человека; СМД анти-S100, внесенные в экспериментальную лунку в объеме 10 мкл, ингибируют связывание стандартного радиолиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма 1 рецептором человека, но выраженность эффекта уступает выраженности эффекта комплексного препарата СМД анти-S100+анти-eNOS; СМД анти-eNOS, внесенные в экспериментальную лунку в объеме 10 мкл, не оказывали влияния на связывание стандартного радиолиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма 1 рецептором человека; потенцированная вода, внесенная в экспериментальную лунку в объеме 10 мкл или 20 мкл, не оказывала влияния на связывание стандартного радиолиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма 1 рецептором человека.Thus, in the conditions of this experimental model it was shown that: the complex preparation of SMD anti-5100 + anti-eNOS is more effective than its individual components (SMD anti-S100 and SMD anti-eNOS) inhibits the binding of the standard radioligand [ 3 H] pentazocine to recombinant human sigma 1 receptor; SMD anti-S100, introduced into the experimental well in a volume of 10 μl, inhibits the binding of the standard radioligand [ 3 H] pentazocine to the recombinant human sigma 1 receptor, but the severity of the effect is less than that of the complex drug SMD anti-S100 + anti-eNOS; SMD anti-eNOS introduced into the experimental well in a volume of 10 μl did not affect the binding of the standard radioligand [ 3 H] pentazocine to the recombinant human sigma 1 receptor; potentiated water introduced into the experimental well in a volume of 10 μl or 20 μl did not affect the binding of the standard radioligand [ 3 H] pentazocine to the recombinant human sigma 1 receptor.
Пример 2.Example 2
В исследование были включены пациенты с установленным диагнозом болезнь Альцгеймера.The study included patients with an established diagnosis of Alzheimer's disease.
Для исследования свойств заявленного лекарственного средства при лечении болезни Альцгеймера были использованы таблетки массой 300 мг, пропитанные фармацевтической композицией, содержащей водно-спиртовые растворы (6 мг/табл.) активированных потенцированных форм поликлональных аффинно очищенных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100 (анти-S100) и к эндотелиальной NO-синтазе (анти-eNOS) в сверхмалых дозах (СМД), полученных сверхразведением исходного матричного раствора (с концентрацией 2,5 мг/мл) в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентных смеси сотенных гомеопатических разведений С 12, C30, С200 (СМД анти-S100+анти-eNOS).To study the properties of the claimed drug in the treatment of Alzheimer's disease, 300 mg tablets were used, impregnated with a pharmaceutical composition containing water-alcohol solutions (6 mg / tablet) of activated potentiated forms of polyclonal affinity-purified rabbit antibodies to brain-specific protein S-100 (anti- S100) and to endothelial NO-synthase (anti-eNOS) in ultra low doses (RMA) obtained sverhrazvedeniem initial matrix solution (2.5 mg / ml) 100 12, 100 30, 100 to 200 times equivalent CME and centesimal homeopathic dilutions C12, C30, C200 (SMD anti-S100 + anti-eNOS).
В качестве контрольной группы использовалась группа пациентов, получающих лекарственное средство в виде таблеток массой 300 мг, пропитанных водно-спиртовым раствором (3 мг/табл.) активированной потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе (СМД анти-S100), полученной сверхразведением исходного матричного раствора (концентрацией 2,5 мг/мл) в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С 12, C30, С200.As a control group, we used a group of patients receiving a drug in the form of tablets weighing 300 mg, impregnated with an aqueous-alcoholic solution (3 mg / tablet) of an activated potentiated form of polyclonal rabbit antibodies to brain-specific protein S-100, purified on antigen, in an ultra-low dose (SMD anti-S100) obtained by super-dilution of the initial matrix solution (concentration of 2.5 mg / ml) 100 12 , 100 30 , 100 200 times, equivalent to a mixture of hundred-percent homeopathic dilutions C 12, C30, C200.
Исследование представляло из себя открытое рандомизированное сравнительное клиническое исследование эффективности и безопасности исследуемой терапии (препараты СМД анти-S100 и СМД анти-S100+анти-eNOS) в двух параллельных группах при лечении пациентов с болезнью Альцгеймера легкой и средней степени тяжести.The study was an open, randomized, comparative clinical trial of the efficacy and safety of the study therapy (SMD anti-S100 and SMD anti-S100 + anti-eNOS) in two parallel groups in the treatment of patients with mild to moderate Alzheimer's disease.
В исследование были включены 6 пациентов с диагнозом «болезнь Альцгеймера» легкой и средней степени тяжести, в возрасте от 55 до 64 лет. Средний возраст пациентов составил 59,0±3,58 года.The study included 6 patients with a diagnosis of Alzheimer's disease of mild to moderate severity, aged 55 to 64 years. The mean age of the patients was 59.0 ± 3.58 years.
В исследовании проверялось соответствие пациентов следующим критериям включения и исключения.The study examined patients' compliance with the following inclusion and exclusion criteria.
Критерии включения:Inclusion Criteria:
1. Пациенты с болезнью Альцгеймера легкой и средней степени тяжести, подтвержденной данными медицинского анамнеза, неврологического обследования и медицинской документацией.1. Patients with mild to moderate Alzheimer's disease, confirmed by medical history, neurological examination and medical documentation.
2. Неизменность сопутствующей терапии в течение как минимум месяца до Визита 1.2. Constancy of concomitant therapy for at least a month before Visit 1.
3. Отсутствие предпосылок к изменению неврологической сопутствующей терапии в течение всего периода наблюдения.3. The lack of prerequisites for a change in neurological concomitant therapy throughout the observation period.
4. Отсутствие предпосылок к назначению иммуномодулирующих средств в течение ближайших 6 месяцев.4. Lack of prerequisites for the appointment of immunomodulating agents over the next 6 months.
5. Уровень образования и степень понимания пациента достаточны для того, чтобы адекватно общаться с исследователем и координатором исследования.5. The level of education and the degree of understanding of the patient are sufficient to adequately communicate with the researcher and the coordinator of the study.
6. Пациенты оцениваются исследователем как надежные, готовые выполнять все назначенные клинические визиты, тесты и процедуры, предусмотренные протоколом.6. Patients are evaluated by the researcher as reliable, ready to perform all prescribed clinical visits, tests and procedures provided for by the protocol.
7. Пациенты имеют действительный домашний адрес.7. Patients have a valid home address.
Критерии исключения:Exclusion Criteria:
1. В анамнезе хирургическое вмешательство на головном мозге.1. A history of surgical intervention on the brain.
2. Инсульт в анамнезе.2. A history of stroke.
3. Диагноз психоза, биполярного расстройства или шизоаффективного расстройства в анамнезе.3. A history of psychosis, bipolar disorder, or schizoaffective disorder.
4. Большое депрессивное расстройство согласно критериям модуля депрессии международного нейропсихиатрического мини-интервью (MINI).4. Major depressive disorder according to the criteria for the depression module of the international neuropsychiatric mini-interview (MINI).
5. Факторы/состояния, медицинского или иного характера, которые, по мнению исследователя, могут повлиять на результаты тестирования пациента в рамках данного исследования.5. Factors / conditions of a medical or other nature that, in the opinion of the researcher, may affect the patient's test results in this study.
6. Ответы «2А», «2Б», «2В» или «3» в рубрике «И» опросника депрессии Бека (активное суицидальное мышление с некоторым намерением к действию, без специфического плана или активное суицидальное мышление со специфическим планом и намерением).6. Answers “2A”, “2B”, “2B” or “3” in the heading “I” of the Beck Depression Questionnaire (active suicidal thinking with some intention to act, without a specific plan or active suicidal thinking with a specific plan and intent).
7. Аутоиммунное заболевание в анамнезе.7. A history of autoimmune disease.
8. Острое поражение печени или выраженный цирроз (класс С по Child-Pugh).8. Acute liver damage or severe cirrhosis (Child-Pugh class C).
9. Некоррегированное нарушение функции щитовидной железы.9. Unregulated thyroid dysfunction.
10. Некомпенсированная артериальная гипертензия в анамнезе.10. An uncompensated history of hypertension.
11. Серьезное или декомпенсированное сердечно-сосудистое заболевание, заболевание печени, почек, метаболическое, респираторное или гематологическое заболевание, симптоматическое заболевание периферических сосудов, или иное медицинское или психиатрическое состояние, которое, по мнению исследователя, может повлиять на участие пациента в исследовании или может привести к продлению сроков госпитализации или повторной госпитализации пациента в ходе проведения исследования.11. Serious or decompensated cardiovascular disease, liver, kidney disease, metabolic, respiratory or hematological disease, symptomatic peripheral vascular disease, or other medical or psychiatric condition that, in the opinion of the researcher, may affect the patient’s participation in the study or may lead to to extend the hospitalization or re-hospitalization of the patient during the study.
12. 3аболевания и состояния, которые, по мнению исследователя, могут препятствовать участию пациента в исследовании.12. Diseases and conditions that, in the opinion of the researcher, may interfere with patient participation in the study.
13. Прием препарата Импаза (СМД анти-eNOS) или Тенотен (СМД анти-S100) до участия в исследовании.13. Taking Impaz (SMD anti-eNOS) or Tenoten (SMD anti-S100) before taking the study.
14. Прием антидепрессантов любой группы, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.14. Admission of antidepressants of any group, not excluding herbal and homeopathic medicines.
15. Прием анксиолитиков любой группы, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.15. Reception of anxiolytics of any group, not excluding herbal and homeopathic preparations.
16. Прием иммуномодуляторов, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.16. Reception of immunomodulators, not excluding herbal and homeopathic preparations.
17. Системное лечение стероидами, в течение 1 месяца или менее до17. Systemic steroid treatment for 1 month or less until
18. Визита 1.18. Visit 1.
19. Прививки, в т.ч. против гриппа.19. Vaccinations, including against the flu.
20. Участие в исследовании препаратов Импаза (СМД анти-eNOS) или Тенотен (СМД анти-S100), если пациенты приняли хотя бы одну дозу препарата.20. Participation in the study of Impaz (SMD anti-eNOS) or Tenoten (SMD anti-S100), if patients have taken at least one dose of the drug.
21. Участие в других клинических исследованиях в течение 1 месяца перед включением в данное исследование.21. Participation in other clinical trials for 1 month before inclusion in this study.
22. Беременность, кормление грудью, невозможность использования адекватной контрацепции во время исследования и в течение месяца после последнего приема исследуемого препарата.22. Pregnancy, breast-feeding, the inability to use adequate contraception during the study and within a month after the last administration of the study drug.
23. Наличие аллергии/непереносимости любого из компонентов лекарственных препаратов, используемых в лечении, включая непереносимость лактозы.23. The presence of allergies / intolerances to any of the components of the drugs used in the treatment, including lactose intolerance.
24. Употребление наркотиков, нейролептиков, алкоголизм, психические заболевания пациента.24. The use of drugs, antipsychotics, alcoholism, mental illness of the patient.
25. Пациенты являются персоналом центра, напрямую связанным с проводимым исследованием и/или являются членами семьи персонала исследовательского центра, напрямую связанного с проводимым исследованием. Понятие "члены семьи" включает в себя супруга(у), родителей, детей, братьев (сестер) - связанных как биологическим, так и юридическим родством,25. Patients are staff of the center directly related to the study and / or are members of the family of the staff of the research center directly related to the study. The concept of "family members" includes spouse (s), parents, children, brothers (sisters) - related to both biological and legal kinship,
26. Участие в судебном процессе, либо предположительное получение компенсации или участие в судебном процессе, по мнению исследователя.26. Participation in litigation, or alleged compensation or participation in litigation, according to the researcher.
После определения соответствия пациента критериям включения и исключения протокола, пациенты были рандомизированы на две исследуемых группы: группу СМД анти-S100 (3 человека, женщины - 100%, мужчины - 0%, средний возраст - 59±3,6 года) и группу СМД анти-S100+анти-eNOS (3 человека, женщины - 66,66%, мужчины - 33,33%, средний возраст - 59±4,36 года).After determining whether the patient met the criteria for inclusion and exclusion of the protocol, the patients were randomized into two study groups: the SMD anti-S100 group (3 people, women 100%, men 0%, average age 59 ± 3.6 years) and the SMD group anti-S100 + anti-eNOS (3 people, women 66.66%, men 33.33%, average age 59 ± 4.36 years).
В ходе данного исследования было проведено 5 визитов в исследовательский центр. Фаза лечения продолжалась с Визита 1 до Визита 4 в течение 84±5 дней. Визит 4 (День 84±5) являлся первой конечной точкой исследования, после чего начиналась фаза катамнестического наблюдения. Фаза катамнестического наблюдения продолжалась до Визита 5 (День 168±5).During this study, 5 visits were made to the research center. The treatment phase lasted from Visit 1 to Visit 4 for 84 ± 5 days. Visit 4 (Day 84 ± 5) was the first endpoint of the study, after which the follow-up phase began. Follow-up phase continued until Visit 5 (Day 168 ± 5).
В анализ безопасности были включены данные всех пациентов, участвовавших в исследовании (n=6). В течение всего периода наблюдения за пациентами отмечалась хорошая переносимость исследуемых препаратов. Нежелательные явления отсутствовали. Все пациенты исследуемых групп завершили лечение в сроки, установленные протоколом исследования, досрочно выбывших пациентов не было.The safety analysis included data from all patients participating in the study (n = 6). During the entire period of observation of patients, good tolerability of the studied drugs was noted. Adverse events were absent. All patients of the study groups completed the treatment within the time period established by the study protocol; there were no prematurely retired patients.
При оценке действия препарата СМД анти-S100+анти-eNOS на основные нейропсихические проявления болезни Альцгеймера (нейропсихический опросник NPI, раздел выраженность), на выраженность сопутствующего дистресса ухаживающего за пациентом лица (нейропсихический опросник NPI, раздел дистресс), активность повседневной жизни пациента (опросник ADS-ADL), а также когнитивные функции пациента (опросник MMSE), было выявлено улучшение по основным нейропсихическим проявлениям болезни Альцгеймера, выражавшееся в статистически-достоверном уменьшении общего балла раздела «выраженность» нейропсихического опросника NPI (с 24,33±4,73 до 12,0±3,46, р<0,05) к Визиту 4 (Таблица 2).When assessing the effect of the drug SMD anti-S100 + anti-eNOS on the main neuropsychiatric manifestations of Alzheimer's disease (NPI neuropsychic questionnaire, severity section), on the severity of concomitant distress of the caregiver of the patient (NPI neuropsychic questionnaire, distress section), the patient's daily life activity (questionnaire ADS-ADL), as well as the patient's cognitive functions (MMSE questionnaire), an improvement was found in the main neuropsychic manifestations of Alzheimer's disease, expressed in a statistically significant decrease in total ba la under "severity" neurodevelopmental questionnaire NPI (from 24.33 ± 4.73 to 12.0 ± 3.46, p <0.05) for the visit 4 (Table 2).
Так же была выявлена тенденция к уменьшению дистресса ухаживающего лица, и увеличение активности повседневной жизни пациента, которая, впрочем, не достигла статистически значимых значений к окончанию терапии, что возможно связано с недостаточным числом пациентов.A tendency to a decrease in the distress of the caregiver, and an increase in the activity of the patient’s daily life, which, however, did not reach statistically significant values by the end of therapy, which was possibly associated with an insufficient number of patients, were also revealed.
Наряду с этим, была выявлена тенденция к улучшению когнитивных функций, проявлявшаяся в увеличении оценки по MMSE с 23,б6±3,21 баллов до 26,66+1,53 баллов, которая, однако, так же не достигла статистически значимых значений к окончанию терапии, что возможно так же связано с недостаточным числом пациентов.Along with this, a tendency toward improvement in cognitive functions was revealed, which manifested itself in an increase in MMSE scores from 23.66 ± 3.21 points to 26.66 + 1.53 points, which, however, also did not reach statistically significant values by the end therapy, which may also be associated with an insufficient number of patients.
Аналогичные показатели в группе пациентов, получавших СМД анти-S100, не показали тенденций к улучшению, за исключением статистически-недостоверного улучшения балла по MMSE с 22,66±0,577 баллов до 23,33±0,577 баллов.Similar indicators in the group of patients receiving anti-S100 SMD did not show improvement trends, with the exception of a statistically insignificant improvement in MMSE score from 22.66 ± 0.577 points to 23.33 ± 0.577 points.
При этом, разница между группами по общему баллу шкалы MMSE к окончанию терапии, была достоверной с вероятностью р<0,05.Moreover, the difference between the groups according to the overall MMSE score by the end of therapy was significant with a probability of p <0.05.
Таким образом, в проведенном клиническом исследовании комбинированного препарата СМД анти-S100+анти-eNOS показано положительное влияние на основные нейропсихические проявления болезни Альцгеймера и возможное влияния на когнитивные функции пациентов с болезнью Альцгеймера. Кроме того, подтверждена высокая переносимость препарата. Нежелательные явления при приеме препарата отсутствовали.Thus, a clinical study of the combined preparation of SMD anti-S100 + anti-eNOS showed a positive effect on the main neuropsychic manifestations of Alzheimer's disease and a possible effect on the cognitive functions of patients with Alzheimer's disease. In addition, high tolerance to the drug has been confirmed. Adverse events when taking the drug were absent.
Пример 3.Example 3
Эффективность препаратов при скополаминовой амнезии у крыс (модель болезни Альцгеймера).The efficacy of drugs for scopolamine amnesia in rats (model of Alzheimer's disease).
Болезнь Альцгеймера (БА) является нейродегенеративным заболеванием и характеризуется снижением когнитивных функций, ухудшением памяти, спутанностью сознания, изменениями эмоционального фона. Хотя основной причиной развития данной патологии в настоящее время считается накопление бета-амилоида, приводящее к образованию бета-амилоидных бляшек и нейрофибриллярных клубков в тканях мозга, БА также сопровождается дефицитом холинэргической системы. На этом основании один из наиболее распространенных способов моделирования БА у животных с помощью антагониста холинергической системы скополамина. Введение скополамина экспериментальным животным (обычно крысам или мышам) нарушает способность к обучению и приводит к ухудшению памяти.Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disease and is characterized by a decrease in cognitive functions, memory impairment, confusion, and changes in the emotional background. Although the main reason for the development of this pathology is currently considered to be the accumulation of amyloid beta, leading to the formation of amyloid beta plaques and neurofibrillary tangles in the brain tissue, AD is also accompanied by a deficiency of the cholinergic system. On this basis, one of the most common methods of modeling AD in animals using an antagonist of the cholinergic scopolamine system. Administration of scopolamine to experimental animals (usually rats or mice) impairs learning ability and leads to memory impairment.
Для оценки когнитивных функций крыс и мышей используют различные методы, в частности водный лабиринт Морриса. Суть этого теста состоит в том, что в сосуде с непрозрачной водой животные, выпускаемые в воду с разных точек, вынуждены искать скрытую неподвижную платформу. Преимуществом этого метода является то, что он позволяет как наблюдать за процессом обучения животного (формирование у него представления о пространственном расположении платформы независимо от того, в каком месте его опустили в воду), так и оценивать прочность запоминания (для этого проводят тест-пробу, когда платформу вынимают).Various methods are used to evaluate the cognitive functions of rats and mice, in particular the Morris water maze. The essence of this test is that in a vessel with opaque water, animals released into the water from different points are forced to look for a hidden fixed platform. The advantage of this method is that it allows you to observe the learning process of the animal (forming an idea of the spatial location of the platform, regardless of where it was lowered into the water), and to evaluate the strength of memorization (for this a test test is carried out, when the platform is taken out).
В нижеприведенном Примере 3 изучали эффективность при скополаминовой амнезии у крыс заявленного лекарственного средства в виде композиции, содержащей активированные потенцированные формы поликлональных аффинно очищенных на антигене кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100 (анти-S100) и к эндотелиальной NO-синтазе (анти-eNOS) в сверхмалых дозах (СМД), полученных сверхразведением исходного матричного раствора (с концентрацией 2,5 мг/мл) в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентных смеси сотенных гомеопатических разведений С 12, C30, С200 (СМД анти-S100+анти-eNOS).Example 3 below examined the efficacy in rat scopolamine amnesia of the claimed drug in the form of a composition containing activated potentiated forms of polyclonal affinity-purified rabbit antibodies to brain-specific protein S-100 (anti-S100) and to endothelial NO synthase (anti-eNOS ) in ultra-low doses (SMD) obtained by super-dilution of the initial matrix solution (with a concentration of 2.5 mg / ml) 100 12 , 100 30 , 100 200 times equivalent to a mixture of hundred-percent homeopathic dilutions C 12, C30, C200 (SMD anti-S100 + anti-eNOS).
В исследовании эффективности препарат СМД анти-S100+анти-eNOS при скополаминовой амнезии у крыс (модель болезни Альцгеймера) было использовано 48 крыс-самцов линии Rj: Wistar (Нап) (масса 180-280 г). В течение 4 дней крысам подкожно вводили физиологический раствор (n=12, интактные) или скополамин в дозе 0,5 мг/кг (n=36) (скополамин-индуцированная амнезия). Крыс со скополамин-индуцированной амнезией разделили на 3 группы и вводили им, соответственно, дистиллированную воду (7,5 мл/кг, n=12, контроль, группа №1), СМД анти-S100 (7,5 мл/кг, n=12, группа №2) и СМД анти-S100+анти-eNOS (7,5 мл/кг, n=12, группа №3) внутрижелудочно в течение 9 дней (4 дня до начала инъекций скополамина, 4 дня на фоне введения скополамина и 1 день после окончания введения скополамина).In a study of the effectiveness of the drug SMD anti-S100 + anti-eNOS in scopolamine amnesia in rats (model of Alzheimer's disease), 48 male rats of the Rj: Wistar strain (Nap) (weight 180-280 g) were used. For 4 days, rats were injected subcutaneously with saline (n = 12, intact) or scopolamine at a dose of 0.5 mg / kg (n = 36) (scopolamine-induced amnesia). Rats with scopolamine-induced amnesia were divided into 3 groups and, respectively, distilled water (7.5 ml / kg, n = 12, control, group No. 1), SMD anti-S100 (7.5 ml / kg, n = 12, group No. 2) and SMD anti-S100 + anti-eNOS (7.5 ml / kg, n = 12, group No. 3) intragastrically for 9 days (4 days before the start of scopolamine injection, 4 days against the background of administration scopolamine and 1 day after the end of scopolamine administration).
В течение 4 дней введения скополамина через 60 минут после введения тестируемых препаратов и 30 минут после введения скополамина проводили обучающую сессию в лабиринте Морриса (4 последовательных теста с интервалом 60 с). Лабиринт Морриса представляет собой круглый сосуд (диаметром 150 см, высотой 45 см), на 30 см заполненную водой (26-28°С). В 18 см от края сосуда находится скрытая платформа (диаметром 15 см), утопленная на 1,5 см ниже уровня воды. Воду делают мутной, добавляя в нее нетоксичный краситель (например, молочный порошок), что делает платформу невидимой. Для каждого теста животное помещали в лабиринт в одной из начальных точек, находящихся на одинаковом расстоянии от скрытой платформы, и давали им возможность найти ее. Если животное не могло найти платформу за 120 секунд, его ставили на платформу на 60 секунд и затем начинали новый тест. В ходе 4 испытаний в случайном порядке животные начинали прохождение по лабиринту дважды с каждой исходной точки. Испытания записывали на видеопленку, а затем анализировали расстояние, преодоленное в поисках платформы в каждом испытании и латентный период поиска платформы.Within 4 days of scopolamine administration, 60 minutes after administration of the test drugs and 30 minutes after administration of scopolamine, a training session was conducted in the Morris maze (4 consecutive tests with an interval of 60 s). The Morris Labyrinth is a round vessel (150 cm in diameter, 45 cm high), 30 cm filled with water (26-28 ° C). 18 cm from the edge of the vessel is a hidden platform (15 cm in diameter), recessed 1.5 cm below the water level. The water is made turbid by adding a non-toxic dye (for example, milk powder), which makes the platform invisible. For each test, the animal was placed in a maze at one of the starting points located at the same distance from the hidden platform, and allowed them to find it. If the animal could not find the platform in 120 seconds, it was placed on the platform for 60 seconds and then a new test was started. During 4 trials in random order, the animals began passing through the maze twice from each starting point. The tests were recorded on videotape, and then the distance traveled in search of the platform in each test and the latent period of the search for the platform were analyzed.
На 5 день проводили пробу: платформу убирали из лабиринта, и крысе давали свободно плавать на протяжении 60 секунд. Регистрировали время, проведенное в том месте, где раньше находилась платформа.On day 5, a test was performed: the platform was removed from the maze, and the rat was allowed to swim freely for 60 seconds. The time spent in the place where the platform used to be was recorded.
Введение скополамина значительно ухудшало способность животных к обучению: в контрольной группе №1 время, затраченное животными на поиск платформы и расстояние, которое животные проплыли в поисках платформы, значительно увеличивались (Таблицы 3, 4). Проба показала, что и память животных контрольной группы №1 значительно ухудшилась: в месте, где раньше находилась платформа, они находились меньше времени, чем интактные крысы (Таблица 5). Введение СМД анти-S100 в группе №2 не приводило к улучшению исследованных параметров (Таблицы 3, 4, 5). Введение СМД aHTH-S100+анти-eNOS в группе №3 приводило к некоторому улучшению обучения, которое выражалось в укорочении латентного времени поиска платформы (Таблица 3) и преодоленного расстояния (Таблица 4) в течение 4 дней обучения, и улучшению памяти, что выражалось в увеличении времени, проведенного в месте, где была платформа (Таблица 5).The introduction of scopolamine significantly impaired the learning ability of animals: in the control group No. 1, the time spent by the animals on the search for the platform and the distance that the animals sailed in search of the platform increased significantly (Tables 3, 4). The test showed that the memory of the animals of the control group No. 1 deteriorated significantly: in the place where the platform used to be, they spent less time than intact rats (Table 5). The introduction of SMD anti-S100 in group No. 2 did not lead to an improvement in the studied parameters (Tables 3, 4, 5). The introduction of SMD aHTH-S100 + anti-eNOS in group No. 3 led to some improvement in training, which was expressed in shortening the latent search time of the platform (Table 3) and the distance covered (Table 4) during 4 days of training, and memory improvement, which was expressed in increasing the time spent in the place where the platform was (Table 5).
Таким образом, в использованной модели болезни Альцгеймера, применение комплекса СМД анти-S100+анти-еКГОЗ было более эффективным по сравнению с изолированным введением СМД анти-S100.Thus, in the used model of Alzheimer's disease, the use of the anti-S100 + anti-eKHOZ SMD complex was more effective than the isolated administration of anti-S100 SMD.
Claims (9)
Priority Applications (73)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010130353/15A RU2542445C2 (en) | 2010-07-21 | 2010-07-21 | Medication for treating alzheimer's disease and method of treating alzheimer's disease |
IT000633A ITTO20110633A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | METHOD TO TREAT THE DEAD OF ALZHEIMER |
AU2011281248A AU2011281248B2 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
KR1020137004331A KR20130102542A (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
MX2013000805A MX355371B (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia. |
US13/135,892 US20130058982A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Method of treating Alzheimer's disease |
SG10201505676RA SG10201505676RA (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
CN2011800454598A CN103124741A (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
ES201390006A ES2440393R1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A METHOD FOR INCREASING THE EFFECT OF A POTENTIATED ACTIVATED FORM OF AN ANTIBODY |
BR112013001296A BR112013001296A2 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | pharmaceutical compositions and their use and methods of treating vertigo of different origins, kinetosis and vegetative vascular dystonia |
BR112013000840A BR112013000840A2 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | method for enhancing the effect of potentiated activated form of antibody to biological endogenous molecule, pharmaceutical composition and use of combination of endogenous biological molecule with potentiated activated form of antibody to endothelial synthase. |
SG2013004809A SG187160A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
FR1156479A FR2962912A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | PHARMACEUTICAL ASSOCIATION COMPOSITION FOR USE IN A METHOD FOR TREATING ALZHEIMER'S DISEASE |
EA201300130A EA029399B1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical composition for treating alzheimer's disease and method of treating alzheimer's disease |
MX2013000543A MX2013000543A (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical composition and methods of treating functional diseases or conditions of gastrointestinal tract. |
CN2011800443324A CN103108657A (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
CN2011800454649A CN103119060A (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | A method of treating alzheimer's disease |
MX2013000808A MX2013000808A (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | A method of treating alzheimer's disease. |
NZ606988A NZ606988A (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
GB1302649.7A GB2495884B (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
PE2013000076A PE20130398A1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A METHOD TO INCREASE THE EFFECT OF AN ACTIVE ENHANCED FORM OF AN ANTIBODY |
PCT/IB2011/002434 WO2012010978A2 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | A method of treating alzheimer's disease |
NZ606767A NZ606767A (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
UAA201300104A UA107836C2 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Treatment of alzheimer's disease |
NZ606969A NZ606969A (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | A method of treating alzheimer’s disease |
AU2011278038A AU2011278038B2 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
PE2013000111A PE20131065A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | COMBINED PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS AND METHOD OF TREATMENT OF VERTIGO, KINETOSIS AND VEGETATIVE-VASCULAR DISTONIA |
ES201390010A ES2446643R1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combined pharmaceutical compositions and their use to prepare a drug for the treatment of vertigo, motion sickness and vegetative-vascular dystonia |
FR1156482A FR2962656A1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | METHOD FOR INCREASING THE EFFECT OF AN ACTIVATED-POTENTIALIZED FORM OF ANTIBODY |
DE112011102397T DE112011102397T5 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Pharmaceutical combination compositions and methods for the treatment of dizziness, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
EA201300127A EA029998B1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical composition and method of treatment of vertigo of various genesis, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
GB1302925.1A GB2496342B (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
JP2013520241A JP2013535445A (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | How to treat Alzheimer's disease |
FR1156477A FR2962910A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | PHARMACEUTICAL ASSOCIATION COMPOSITIONS AND THEIR USE IN A PROCESS FOR TREATING VERTIGE, KINETOSIS AND VEGETATIVE VASCULAR DYSTONIA |
IT000630A ITTO20110630A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS OF COMBINATION AND METHOD FOR TREATING VERTEINS, KINETOSIS AND VEGETATIVE VASCULAR DISTONIA |
JP2013520240A JP2013536174A (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical composition and method of treating rotational dizziness, motion sickness and autonomic neurovascular dystonia |
JP2013519175A JP2013538186A (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Method for increasing the effect of activation-enhancing antibodies |
US13/135,901 US9308275B2 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
DE112011102358T DE112011102358T5 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
EEP201300006A EE201300006A (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A pharmaceutical composition for enhancing the effect of an activated and potentiated form of an antibody |
DE112011102409T DE112011102409T5 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Method of treating Alzheimer's disease |
EP11775838.3A EP2593140A2 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
GB1302929.3A GB2496801B (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | A method of treating alzheimer's disease |
CA2805985A CA2805985A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
EP11773316.2A EP2596018A2 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
KR1020137003861A KR20140014059A (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
CA2805943A CA2805943A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Use of homeopathically potentized antibodies to brain-specific protein s-100 and to endothelial no synthase for treating alzheimer's disease |
EA201300126A EA030566B1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Method of increasing therapeutic effectiveness of an activated-potentiated form of an antibody to an endogenous biological molecule and pharmaceutical composition |
SG10201505561TA SG10201505561TA (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A Method Of Increasing The Effect Of An Activated-Potentiated Form Of An Antibody |
AU2011281252A AU2011281252A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | A method of treating Alzheimer's disease |
PCT/IB2011/002378 WO2012010974A2 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
EP11775840.9A EP2596021A2 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | A method of treating alzheimer's disease |
SG2013002324A SG187038A1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
CA2804966A CA2804966A1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
UAA201300108A UA112750C2 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
CZ20130105A CZ2013105A3 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | Method of increasing effect of antibody activated potentiated form |
SE1350184A SE1350184A1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | PROCEDURE TO INCREASE THE EFFECT OF AN ACTIVATED, POTENTIZED FORM OF AN ANTIBODY |
IT000639A ITTO20110639A1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | METHOD TO INCREASE THE EFFECT OF AN ACTIVE-ENHANCED SHAPE OF AN ANTI-BODY |
PCT/IB2011/002350 WO2012007845A2 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-15 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
US13/135,887 US20130058981A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-15 | Combination pharmaceutical compositions and method of treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
ARP110102578A AR082247A1 (en) | 2010-07-15 | 2011-07-18 | A METHOD FOR INCREASING THE EFFECTS OF A POTENTIATED ACTIVATED FORM OF AN ANTIBODY |
ARP110102644A AR082314A1 (en) | 2010-07-21 | 2011-07-21 | A PHARMACEUTICAL COMBINATION COMPOSITION FOR THE TREATMENT OF VERTIGO, KINETOSIS AND VASCULAR VEGETATIVE DISTONY |
CL2013000099A CL2013000099A1 (en) | 2010-07-15 | 2013-01-10 | A method of increasing the effect of an potentiated active form of an antibody to an endogenous biological molecule, comprising the combination of the endogenous biological molecule with an enhanced active form of an endoltelial non-synthase antibody; composition that understands it. |
IL224336A IL224336A (en) | 2010-07-21 | 2013-01-20 | Combination pharmaceutical composition for treatment of vertigo, kinetosis and vegetative-vascular dystonia |
CL2013000201A CL2013000201A1 (en) | 2010-07-21 | 2013-01-21 | Combined pharmaceutical compositions comprising an enhanced activated form of antibodies against the brain s-100 protein and an enhanced activated form of antibodies against endothelial nos; method of treatment of vertigo, motion sickness and vegetative-vascular dystonia. |
NO20130222A NO20130222A1 (en) | 2010-07-15 | 2013-02-08 | Process for increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
DKPA201370079A DK201370079A (en) | 2010-07-15 | 2013-02-14 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
LT2013016A LT5988B (en) | 2010-07-15 | 2013-02-14 | A method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
FI20135143A FI20135143L (en) | 2010-07-15 | 2013-02-15 | A method of increasing the potency of an activated potentiated form of an antibody |
US15/060,157 US20160244531A1 (en) | 2010-07-15 | 2016-03-03 | Method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
US15/060,202 US20160251448A1 (en) | 2010-07-15 | 2016-03-03 | Method of increasing the effect of an activated-potentiated form of an antibody |
JP2016131718A JP2016199571A (en) | 2010-07-21 | 2016-07-01 | Combination pharmaceutical compositions, and methods of treating vertigo, motion sickness, and autonomic vascular dystonia |
JP2016135750A JP2016216483A (en) | 2010-07-15 | 2016-07-08 | Method of increasing effect of activated-potentiated antibody |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010130353/15A RU2542445C2 (en) | 2010-07-21 | 2010-07-21 | Medication for treating alzheimer's disease and method of treating alzheimer's disease |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2010130353A RU2010130353A (en) | 2012-01-27 |
RU2542445C2 true RU2542445C2 (en) | 2015-02-20 |
Family
ID=45786201
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2010130353/15A RU2542445C2 (en) | 2010-07-15 | 2010-07-21 | Medication for treating alzheimer's disease and method of treating alzheimer's disease |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2542445C2 (en) |
UA (1) | UA112750C2 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2804334C2 (en) * | 2019-08-02 | 2023-09-28 | Шанхай Рэйзинг Фармасьютикал Ко., Лтд. | Using tpk as a target in alzheimer's disease |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2156621C1 (en) * | 1999-03-04 | 2000-09-27 | Эпштейн Олег Ильич | Neurotropic drug |
WO2007006732A1 (en) * | 2005-07-11 | 2007-01-18 | N.V. Organon | Synergistic combination for the treatment of pain (cannabioid receptor agonist and opiod receptor agonist) |
-
2010
- 2010-07-21 RU RU2010130353/15A patent/RU2542445C2/en not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-07-15 UA UAA201300108A patent/UA112750C2/en unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2156621C1 (en) * | 1999-03-04 | 2000-09-27 | Эпштейн Олег Ильич | Neurotropic drug |
WO2007006732A1 (en) * | 2005-07-11 | 2007-01-18 | N.V. Organon | Synergistic combination for the treatment of pain (cannabioid receptor agonist and opiod receptor agonist) |
Non-Patent Citations (1)
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2804334C2 (en) * | 2019-08-02 | 2023-09-28 | Шанхай Рэйзинг Фармасьютикал Ко., Лтд. | Using tpk as a target in alzheimer's disease |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
UA112750C2 (en) | 2016-10-25 |
RU2010130353A (en) | 2012-01-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20130058982A1 (en) | Method of treating Alzheimer's disease | |
US8987206B2 (en) | Method of treating attention deficit hyperactivity disorder | |
US8637030B2 (en) | Combination pharmaceutical composition and methods of treating functional diseases or conditions of gastrointestinal tract | |
US20120258146A1 (en) | Method of treating organic diseases of nervous system, pschoorganic syndrome and encephalopathy | |
US8637034B2 (en) | Pharmaceutical compositions comprising activated-potentiated antibodies to interferon-gamma and S100 protein | |
MX2013001451A (en) | Combination pharmaceutical composition and methods of treating and preventing the infectious diseases. | |
RU2536234C2 (en) | Neurotropic drug and method of treating structural diseases of nervous system, psychoorganic syndrome and encephalopathies of various origins | |
RU2536232C2 (en) | Therapeutic agent for alzheimer's disease and method of treating alzheimer's disease | |
RU2542445C2 (en) | Medication for treating alzheimer's disease and method of treating alzheimer's disease | |
RU2526153C2 (en) | Method for increase of pharmacological activity of active agent of drug preparation and pharmaceutical composition | |
RU2519695C2 (en) | Medication for treating attention deficit disorder and method of treating attention deficit disorder | |
RU2536230C2 (en) | Therapeutic agent for treating neurological behaviour disorders and method of treating neurological behaviour development disorders | |
RU2533224C2 (en) | Method of treating psychoactive substance dependence, alcohol and nicotine addiction and medication for treatment of psychoactive substance dependence, alcohol and nicotine addiction | |
RU2530638C2 (en) | Medication and method of treating organic diseases of nervous system, psychoorganic syndrome and encephalopathies of different genesis | |
RU2522499C2 (en) | Drug preparation for treating infectious diseases accompanied by neurotoxic disorders, and method of treating infectious diseases accompanied by neurotoxic disorders | |
RU2595809C2 (en) | Therapeutic agent | |
RU2441023C1 (en) | Drug for multiple sclerosis and method for treating multiple sclerosis | |
RU2500427C2 (en) | Therapeutic agent for treating functional gastrointestinal disturbance and method of treating functional gastrointestinal disturbance | |
RU2446821C2 (en) | Drug preparation for treating infectious diseases accompanied by neurotoxic disorders, and method of treating infectious diseases accompanied by neurotoxic disorders | |
RU2519196C2 (en) | Therapeutic agent for treating pathological syndrome and method of treating multiple sclerosis | |
RU2509573C2 (en) | Drug for treating multiple sclerosis and method of treating multiple sclerosis | |
RU2532323C2 (en) | Therapeutic agent for treating pathological syndrome and method of treating functional bowel disorders |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180722 |