RU2536940C2 - New treatment of acute lymphoblastic leukaemia - Google Patents
New treatment of acute lymphoblastic leukaemia Download PDFInfo
- Publication number
- RU2536940C2 RU2536940C2 RU2011122819/10A RU2011122819A RU2536940C2 RU 2536940 C2 RU2536940 C2 RU 2536940C2 RU 2011122819/10 A RU2011122819/10 A RU 2011122819/10A RU 2011122819 A RU2011122819 A RU 2011122819A RU 2536940 C2 RU2536940 C2 RU 2536940C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mrd
- patients
- patient
- acute lymphoblastic
- use according
- Prior art date
Links
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 title claims abstract description 203
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 title claims abstract description 145
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 106
- 229960003008 blinatumomab Drugs 0.000 claims abstract description 23
- 208000007660 Residual Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 14
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 claims description 137
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 49
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 49
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 claims description 47
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 44
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 claims description 43
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 claims description 43
- 230000005945 translocation Effects 0.000 claims description 41
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims description 36
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 claims description 29
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims description 26
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims description 26
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 claims description 23
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 17
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 16
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 15
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 14
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 claims description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 claims description 10
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 10
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims description 8
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 claims description 7
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 claims description 4
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 claims description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 13
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 abstract 1
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 114
- 238000000034 method Methods 0.000 description 65
- 238000011134 hematopoietic stem cell transplantation Methods 0.000 description 31
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 22
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 19
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 19
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 18
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 18
- 230000004044 response Effects 0.000 description 15
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 13
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 13
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 13
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 12
- 208000014619 adult acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 11
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 11
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 11
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 11
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 11
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 10
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 10
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 10
- 201000011184 adult acute lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 238000007596 consolidation process Methods 0.000 description 8
- 210000001948 pro-b lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 238000011443 conventional therapy Methods 0.000 description 7
- 230000002559 cytogenic effect Effects 0.000 description 7
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 7
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 6
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 6
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 6
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 5
- ZBNZXTGUTAYRHI-UHFFFAOYSA-N Dasatinib Chemical compound C=1C(N2CCN(CCO)CC2)=NC(C)=NC=1NC(S1)=NC=C1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1Cl ZBNZXTGUTAYRHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005517 L01XE01 - Imatinib Substances 0.000 description 4
- 239000002067 L01XE06 - Dasatinib Substances 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 229960002448 dasatinib Drugs 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 229960002411 imatinib Drugs 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 4
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 4
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 4
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 4
- 238000011476 stem cell transplantation Methods 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 3-[6-[4-(trifluoromethoxy)anilino]-4-pyrimidinyl]benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(C=2N=CN=C(NC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C=2)=C1 WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- 208000028564 B-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 3
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 3
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 3
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 3
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 3
- KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N imatinib Chemical compound C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 238000000399 optical microscopy Methods 0.000 description 3
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 3
- 210000004214 philadelphia chromosome Anatomy 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 3
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 3
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 3
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 3
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 3
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 102000003729 Neprilysin Human genes 0.000 description 2
- 108090000028 Neprilysin Proteins 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000003969 blast cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 2
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 2
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 2
- 238000011262 co‐therapy Methods 0.000 description 2
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 2
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- -1 imatinib tyrosine kinase inhibitor Chemical class 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 210000003519 mature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000011255 standard chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000011301 standard therapy Methods 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 231100000440 toxicity profile Toxicity 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 6-Mercaptoguanine Natural products N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100022749 Aminopeptidase N Human genes 0.000 description 1
- 108020005098 Anticodon Proteins 0.000 description 1
- 102000015790 Asparaginase Human genes 0.000 description 1
- 108010024976 Asparaginase Proteins 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 208000032800 BCR-ABL1 positive blast phase chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000004860 Blast Crisis Diseases 0.000 description 1
- 208000018240 Bone Marrow Failure disease Diseases 0.000 description 1
- 206010065553 Bone marrow failure Diseases 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 206010051290 Central nervous system lesion Diseases 0.000 description 1
- 206010008805 Chromosomal abnormalities Diseases 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 206010013710 Drug interaction Diseases 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002000 Electrolyte additive Substances 0.000 description 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 101000757160 Homo sapiens Aminopeptidase N Proteins 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 101100383038 Homo sapiens CD19 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 1
- 101000582320 Homo sapiens Neurogenic differentiation factor 6 Proteins 0.000 description 1
- 201000001431 Hyperuricemia Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000035561 Leukaemic infiltration brain Diseases 0.000 description 1
- 206010024325 Leukaemic lymphoma Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 1
- 102100030589 Neurogenic differentiation factor 6 Human genes 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 241000206607 Porphyra umbilicalis Species 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 108700019889 TEL-AML1 fusion Proteins 0.000 description 1
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 1
- 206010066901 Treatment failure Diseases 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 238000011316 allogeneic transplantation Methods 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000719 anti-leukaemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 229960003272 asparaginase Drugs 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M asparaginate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000009583 bone marrow aspiration Methods 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000009104 chemotherapy regimen Methods 0.000 description 1
- 201000002797 childhood leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000024207 chronic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000011393 cytotoxic chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 238000009093 first-line therapy Methods 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 230000004077 genetic alteration Effects 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000013394 immunophenotyping Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000011368 intensive chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 238000009593 lumbar puncture Methods 0.000 description 1
- 201000011649 lymphoblastic lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000003147 molecular marker Substances 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000011505 plaster Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- 231100000279 safety data Toxicity 0.000 description 1
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000008362 succinate buffer Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012385 systemic delivery Methods 0.000 description 1
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 1
- MNRILEROXIRVNJ-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=NC=N[C]21 MNRILEROXIRVNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
- C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Настоящее изобретение относится к способу лечения, уменьшения интенсивности или устранения острого лимфобластного лейкоза (ALL), включающему введение фармацевтической композиции, включающей конструкцию CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, нуждающемуся в этом взрослому пациенту.The present invention relates to a method for treating, reducing the intensity or elimination of acute lymphoblastic leukemia (ALL), comprising administering a pharmaceutical composition comprising the construction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody to an adult patient in need thereof.
Лейкозы представляют собой клональные неопластические пролиферации незрелых гемопоэтических клеток, которые характеризуются аберрантной дифференциацией или дифференциацией с задержкой. Лейкозные клетки накапливаются в костном мозге, замещая, в конечном счете, большую часть нормальных гемопоэтических клеток. Это ведет к недостаточности костного мозга и ее последствиям в виде анемии, кровотечения и инфекции. Лейкозные клетки циркулируют в крови и других тканях по всему организму (DeVita, Hellmann, Rosenberg. Cancer: principles and practice of oncology. Eight edition. Library of Congress Cataloging-in-Publication Data, ISBN 0-781-72387-6). Острые лейкозы, которые можно приблизительно классифицировать либо как лимфобластные, либо как миелобластные, могут быть идентифицированы фенотипически и генетически и характеризуются быстрым клиническим течением, требующим немедленного лечения. Острые лейкозы возникают из ранних гемопоэтических клеток-предшественников. Напротив, клетки хронических лейкозов имеют фенотип и характерную биологическую особенность более зрелых клеток (DeVita et al., в процитированном месте). Острый лимфобластный лейкоз (ALL) отличается от лимфом, поскольку лимфомы имеют сходство с более зрелыми лимфоидными клетками и до распространения в костный мозг обычно находятся в лимфатических узлах, селезенке или других экстрамедуллярных местах. Определенные лимфомы, такие как лимфобластные лимфомы или лимфомы Беркитта, сохраняют признаки как лейкозов, так и лимфом, но возникают из незрелых клеток-предшественников, и для них требуется терапия, схожая с той, которая используется для острого лимфобластного лейкоза (ALL). Однако другие лимфомы могут значительно распространяться в кровь и костный мозг и на такой фазе могут характеризоваться как лейкозные варианты лимфом, а не истинные лейкозы (De Vita et al., в процитированном месте). Острый лимфобластный лейкоз является относительно редкой злокачественной опухолью. Общая частота возникновения острого лимфобластного лейкоза (ALL) составляет 1,1/100000 в год. Пик частоты возникновения приходится на детский возраст, постоянно уменьшаясь с возрастом. С возраста 35 лет частота возникновения снова повышается, и второй пик наблюдается начиная с возраста, составляющего 80 лет (2,3/100000 в год) (Hoelzer and Gokbuget; Der Onkologe 12 (2006); 983-1002). Хотя этиология острого лимфобластного лейкоза (ALL) неясна, он является одной из самых всесторонне изученных и наиболее охарактеризованных опухолей. Подгруппы острого лимфобластного лейкоза (ALL) определяют, главным образом, посредством иммунофенотипирования, цитогенетики и молекулярной генетики. Острый лимфобластный лейкоз (ALL) из клеток В-линии, составляющий 74% случаев, включает большинство ALL. Семьдесят процентов всех ALL являются ALL из В-клеток-предшественников, а 4% ALL являются ALL из зрелых В-клеток. ALL из клеток Т-линии относится к 26% всех ALL (Hoelzer and Gokbuget; Der Onkologe 12 (2006); 983-1002).Leukemia is a clonal neoplastic proliferation of immature hematopoietic cells that are characterized by aberrant differentiation or delayed differentiation. Leukemia cells accumulate in the bone marrow, eventually replacing most of the normal hematopoietic cells. This leads to bone marrow failure and its consequences in the form of anemia, bleeding and infection. Leukemia cells circulate in the blood and other tissues throughout the body (DeVita, Hellmann, Rosenberg. Cancer: principles and practice of oncology. Eight edition. Library of Congress Cataloging-in-Publication Data, ISBN 0-781-72387-6). Acute leukemia, which can be roughly classified as either lymphoblastic or myeloblastic, can be identified phenotypically and genetically and are characterized by a rapid clinical course requiring immediate treatment. Acute leukemia arises from early hematopoietic progenitor cells. In contrast, cells of chronic leukemia have a phenotype and a characteristic biological characteristic of more mature cells (DeVita et al., In the cited place). Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is different from lymphomas, since lymphomas are similar to more mature lymphoid cells and are usually located in the lymph nodes, spleen, or other extramedullary places before spreading to the bone marrow. Certain lymphomas, such as lymphoblastic lymphomas or Burkitt’s lymphomas, retain signs of both leukemia and lymphomas, but arise from immature progenitor cells, and require therapy similar to that used for acute lymphoblastic leukemia (ALL). However, other lymphomas can significantly spread into the blood and bone marrow and at this phase can be characterized as leukemic lymphomas, rather than true leukemia (De Vita et al., In the cited place). Acute lymphoblastic leukemia is a relatively rare malignant tumor. The total incidence of acute lymphoblastic leukemia (ALL) is 1.1 / 100000 per year. The peak frequency of occurrence occurs in childhood, constantly decreasing with age. From the age of 35 years, the incidence rate again increases, and a second peak is observed starting at the age of 80 years (2.3 / 100000 per year) (Hoelzer and Gokbuget; Der Onkologe 12 (2006); 983-1002). Although the etiology of acute lymphoblastic leukemia (ALL) is unclear, it is one of the most comprehensively studied and most characterized tumors. Subgroups of acute lymphoblastic leukemia (ALL) are determined primarily through immunophenotyping, cytogenetics, and molecular genetics. Acute lymphoblastic leukemia (ALL) from B-cell cells, accounting for 74% of cases, includes most ALL. Seventy percent of all ALL are ALL from precursor B cells, and 4% ALL are ALL from mature B cells. ALL from T-line cells refers to 26% of all ALL (Hoelzer and Gokbuget; Der Onkologe 12 (2006); 983-1002).
В начале 1980 острый лимфобластный лейкоз (ALL) у взрослых был редко излечимой болезнью, при этом общая выживаемость составляла меньше 10%. После применения адаптированных схем, назначаемых педиатрическим группам, благоприятный исход возрос до 30-40%. Период остановки с последующим улучшением отмечался только в отдельных подгруппах. Однако за последние пять лет был достигнут прогресс в молекулярной диагностике острого лимфобластного лейкоза (ALL). Трансплантация стволовых клеток увеличила благоприятный исход острого лимфобластного лейкоза (ALL) и сделала лечение более возможным. Хотя оцениваются различные новые специализированные лекарственные средства, в наличии еще нет эффективных специализированных терапий для острого лимфобластного лейкоза (ALL). Быстрое диагностирование и классификация острого лимфобластного лейкоза (ALL) становятся все более и более важными для идентификации прогностических и молекулярно-генетических подгрупп, которые будут фокусом специализированного лечения (Hoelzer and Gökbuget; Hematology (2006); 133-141). Филадельфийская (Ph) хромосома, результат реципрокной транслокации, приводящей к слиянию протоонкогена abl из хромосомы 9 с последовательностями областей локализации сайта инициации реаранжировки на хромосоме 22, была первой идентифицированной опухолевоспецифической транслокацией. Транслокация t(9;22) является самой часто встречающейся генетической аберрацией при остром лимфобластном лейкозе (ALL) у взрослых. Она обнаружена у 20-30% пациентов. Частота возникновения увеличивается с возрастом, достигая 50% у пациентов, старше 50 лет. В ранее проводимых клинических исследованиях пожилые пациенты были недостаточно представленными вследствие выявленной безрезультативности лечения, но эта картина меняется с доступностью многообещающих новых вариантов лечения. Примечательно, что она обнаруживается почти исключительно при остром лимфобластном лейкозе из CD10+ В-клеток-предшественников (общем В-клеточном ALL (c-ALL) (обычном пре-пре-В-клеточном ALL) и пре-B-клеточном ALL); редкие сообщения о ее присутствии при ALL из клеток Т-линии могут представлять хронический миелолейкоз (CML) в лимфоидном бластном кризе, а не истинный Ph+ ALL. Клинически пациенты, у которых имеются переменный уровень лейкоцитов, экспрессия на поверхности антигенов CD19, CD10 и CD34 и частая коэкспрессия маркеров, относящихся к костному мозгу, например, CD13 и CD33, подвержены увеличенному риску развития менингеального лейкоза. Прогноз для взрослых пациентов с Ph+ ALL, подвергнутых только лечению с использованием химиотерапии, является неблагоприятным, при этом вероятность длительного выживания составляет менее 10%. Из-за печального исхода при использовании химиотерапии в настоящее время считается, что трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (HSCT) является предпочтительным лечением Ph+ ALL у взрослых. Сообщалось о составляющих от 12% до 65% степенях длительного выживания для пациентов, подвергающихся SCT в первой полной ремиссии (CR), означая, что эта процедура является потенциально целебной. Однако приблизительно 30% этих пациентов переносят рецидив (Ottmann and Wassmann; Hematology (2005), 118-122). Присутствие лейкозных клеток на уровне, который ниже цитологического предела обнаружения (5% лейкозных клеток), получает определение «минимального остаточного заболевания» (MRD). Если MRD не выявляется (<10-4, т.е. меньше 1 лейкозной клетки на 104 клеток костного мозга), достигнута полная ремиссия на молекулярном уровне. В последние годы с помощью ряда изучений присущих некоторой группе людей признаков, связанных с развитием у них какого-либо заболевания в прошлом, установлено, что MRD при остром лимфобластном лейкозе (ALL) у взрослых является независимым прогностическим фактором, уже установленным для лейкоза в детском возрасте. Средствами диагностики MRD являются полимеразная цепная реакция (ПЦР) и/или проточная цитометрия. С помощью анализа с использованием ПЦР можно выявить транскрипты слияния, такие как bcr/abl, и отдельные клональные реаранжировки генов иммуноглобулинов (IgH) или Т-клеточных рецепторов (TCR). Приблизительно 25% пациентов с минимальным остаточным заболеванием (MRD), определенным по реаранжировке, включают группу, подверженную высокому - 94% риску рецидива в пределах 3 лет. Как правило, ослабление MRD происходит медленнее у взрослых, чем у детей. Поэтому решение, принимаемое в отношении интенсификации лечения с помощью трансплантации аллогенных стволовых клеток периферической крови (PBSCT), является очень скорым после индукции лечения. Однако после начала консолидации минимальное остаточное заболевание (MRD) в любой момент времени сопровождается высоким риском рецидива (Bruggemann et al., Blood 107 (2006), 1116-1123; Raff et al., Blood 109 (2007), 910-915).In early 1980, acute lymphoblastic leukemia (ALL) in adults was a rarely treatable disease, with an overall survival rate of less than 10%. After the use of adapted schemes assigned to pediatric groups, a favorable outcome increased to 30-40%. The period of stop with subsequent improvement was noted only in individual subgroups. However, over the past five years, progress has been made in the molecular diagnosis of acute lymphoblastic leukemia (ALL). Stem cell transplantation increased the favorable outcome of acute lymphoblastic leukemia (ALL) and made treatment more possible. Although various new specialized drugs are being evaluated, effective specialized therapies for acute lymphoblastic leukemia (ALL) are not yet available. The rapid diagnosis and classification of acute lymphoblastic leukemia (ALL) is becoming increasingly important for identifying prognostic and molecular genetic subgroups that will be the focus of specialized treatment (Hoelzer and Gökbuget; Hematology (2006); 133-141). The Philadelphia (Ph) chromosome, the result of reciprocal translocation leading to the fusion of the abl proto-oncogen from
Лечение взрослых пациентов с острым лимфобластным лейкозом (ALL) становится все более или более сложным, поскольку вводятся разные протоколы лечения для различных подтипов заболевания, отражающие усилие в отношении оптимального подбора терапии к категориям заболеваний с соответствием конкретному риску. Недавние улучшения были достигнуты посредством введения новых терапевтических принципов, таких как раннее добавление ингибитора тирозинкиназы иматиниба при Ph-позитивном (Ph+) ALL (Lee et al., Blood 102 (2003), 3068-3070) или применение антитела против CD20 ритуксимаба в случаях ALL из CD20+ клеток В-линии (смотри, например, Griffin et al., Pediatr Blood Cancer 2008). Улучшения диагностирования были достигнуты посредством определения либо с помощью молекулярно-генетических способов, либо с помощью проточной цитометрии уровня минимального остаточного заболевания (MRD), который, как было установлено, является прогнозируемым в отношении исхода в ряде исследований на детях (смотри, например, Cave et al., N. Engl. J. Med. 339 (1998), 591-598) и взрослых (смотри, например, Brüggemann et al., Blood 107 (2006), 1116-1123). Степени выживания при использовании современных протоколов лечения взрослых пациентов с острым лимфобластным лейкозом (ALL) достигли плато, на котором возможная польза от более интенсивных химиотерапевтических схем часто нивелирована избыточной смертностью вследствие осложнений, что делает, таким образом, усилия в отношении индивидуализации лечения даже более важными. Тогда как подверженных обычному риску пациентов без обычных факторов риска, шансы которых на длительное выживание при использовании только химиотерапии превышают 50% (Hoelzer et al., Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program 1 (2002), 162-192), потенциально подвергают излишнему риску при интенсификации и удлинении терапии, исход у пациентов с рецидивирующим острым лимфобластным лейкозом (ALL) является очень неблагоприятным, даже если достигается вторая ремиссия. В настоящем исследовании контролирование минимального остаточного заболевания (MRD) в течение первого года интенсивной химиотерапии повлекло за собой распределение риска на основе MRD (Bruggemann et al. (2006), в процитированном месте). Эта классификация позволила установить группу низкого риска MRD, состоящую из приблизительно 10% пациентов с минимальной возможностью рецидива за 3 года, группу высокого риска MRD, состоящую из приблизительно 25% пациентов, подверженных почти 100% риску рецидива, и группу среднего риска MRD. В последней группе приблизительно 30% пациентов, в конце концов, перенесут рецидив, несмотря на то, что они становятся MRD-негативными или достигают уровней MRD, которые ниже 10-4, в конце первого года терапии.The treatment of adult patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) is becoming more or more complicated, as different treatment protocols are introduced for different subtypes of the disease, reflecting the effort to optimally select therapy for the categories of diseases according to the specific risk. Recent improvements have been achieved through the introduction of new therapeutic principles, such as the early addition of imatinib tyrosine kinase inhibitor with Ph-positive (Ph +) ALL (Lee et al., Blood 102 (2003), 3068-3070) or the use of anti-rituximab anti-CD20 antibody in ALL cases from CD20 + B-line cells (see, for example, Griffin et al., Pediatr Blood Cancer 2008). Diagnostic improvements were achieved by either using molecular genetic methods or flow cytometry to determine the level of minimum residual disease (MRD), which was found to be predictable for outcome in a number of studies in children (see, for example, Cave et al., N. Engl. J. Med. 339 (1998), 591-598) and adults (see, for example, Brüggemann et al., Blood 107 (2006), 1116-1123). Survival rates using modern treatment protocols for adult patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) have reached a plateau on which the possible benefits of more intensive chemotherapeutic regimens are often offset by excessive mortality due to complications, which makes, therefore, efforts to individualize treatment even more important. Whereas patients at ordinary risk are without usual risk factors whose chances of long-term survival using chemotherapy alone are greater than 50% (Hoelzer et al., Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program 1 (2002), 162-192), at excessive risk with the intensification and prolongation of therapy, the outcome in patients with recurrent acute lymphoblastic leukemia (ALL) is very unfavorable, even if a second remission is achieved. In this study, the control of Minimum Residual Disease (MRD) during the first year of intensive chemotherapy entailed an MRD-based risk distribution (Bruggemann et al. (2006), cited). This classification allowed the establishment of a low-risk MRD group consisting of approximately 10% of patients with a minimum chance of relapse in 3 years, a high-risk MRD group consisting of approximately 25% of patients at almost 100% risk of relapse, and a medium-risk MRD group. In the latter group, approximately 30% of patients will eventually relapse despite becoming MRD negative or reaching MRD levels below 10 -4 at the end of the first year of therapy.
Эти данные показывают, что в случае большинства пациентов острый лимфобластный лейкоз (ALL) остается бурно протекающей и неизлечимой болезнью. Ввиду этого имеется острая необходимость в улучшенных терапиях для ALL.These data show that in most patients, acute lymphoblastic leukemia (ALL) remains a rapidly progressing and incurable disease. In view of this, there is an urgent need for improved therapies for ALL.
Настоящее изобретение относится к способу лечения, уменьшения интенсивности или устранения острого лимфобластного лейкоза (ALL), включающему введение фармацевтической композиции, включающей конструкцию CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, нуждающемуся в этом взрослому пациенту. В предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению указанным острым лимфобластным лейкозом (ALL) является острый лимфобластный лейкоз (ALL) из клеток В-линии, предпочтительно острый лимфобластный лейкоз (ALL) из В-клеток-предшественников. Острый лимфобластный лейкоз (ALL) из клеток В-линии, составляющий 74% случаев, включает большинство ALL. Семьдесят процентов всех ALL являются ALL из В-клеток-предшественников, а 4% ALL являются ALL из зрелых В-клеток. Поскольку CD19×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело, описываемое в настоящем описании, направлено против связанного с B-клетками маркера CD19, указанное антитело особенно подходит в качестве терапевтического средства для острого лимфобластного лейкоза из клеток В-линии, предпочтительно для ALL из В-клеток-предшественников, которые можно дополнительно подразделить на про-В-клеточный ALL, пре-В-клеточный ALL и общий В-клеточный ALL (c-ALL).The present invention relates to a method for treating, reducing the intensity or elimination of acute lymphoblastic leukemia (ALL), comprising administering a pharmaceutical composition comprising the construction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody to an adult patient in need thereof. In a preferred embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, said acute lymphoblastic leukemia (ALL) is acute lymphoblastic leukemia (ALL) from B-line cells, preferably acute lymphoblastic leukemia (ALL) from B-cell progenitors. Acute lymphoblastic leukemia (ALL) from B-cell cells, accounting for 74% of cases, includes most ALL. Seventy percent of all ALL are ALL from precursor B cells, and 4% ALL are ALL from mature B cells. Since the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody described herein is directed against the B19-linked CD19 marker, this antibody is particularly suitable as a therapeutic agent for acute lymphoblastic leukemia from B-line cells, preferably ALL from B-cells precursors that can be further subdivided into pro-B-cell ALL, pre-B-cell ALL and total B-cell ALL (c-ALL).
Введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела (также называемого блинатумомаб или MT103), описываемого более детально ниже, впервые обусловливает терапевтический подход, который позволяет лечить минимальное остаточное заболевание у пациентов с острым лимфобластным лейкозом (ALL). Как показано в следующем примере и проиллюстрировано на фиг.1, CD19×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело (последовательность нуклеиновой кислоты и аминокислотная последовательность которого отображены в SEQ ID NO: 2 и 1, соответственно) было разработано для связи T-клеток с CD19-экспрессирующими клетками-мишенями, приводящей к неограниченной цитотоксической T-клеточной реакции и активации T-клеток. Недавно в испытании фазы I на рецидивирующей B-клеточной неходжкинской лимфоме (NHL) была продемонстрирована значительная клиническая активность CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела (Bargou et al., Science 321 (2008): 974-977). На основе этих результатов исследование фазы II было спланировано совместно с German Multicenter Study Group on Adult Acute Lymphoblastic Leukemia (GMALL) для исследования эффективности, безопасности и переносимости CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела у пациентов с острым лимфобластным лейкозом (ALL), которые достигли полной гематологической ремиссии, но все еще имели минимальное остаточное заболевание (MRD). MRD является независимым прогностическим фактором, который отражает резистентность к первоначальному лекарственному средсту(ам) и имеет связь с высоким риском рецидива после начала консолидации. MRD определяли с помощью стандартных способов посредством либо количественного определения отдельных реаранжировок генов иммуноглобулинов или реаранжировок генов Т-клеточных рецепторов (TCR), транслокаций t(4;11), либо определения транскриптов слияния bcr/abl (смотри, например, Van der Velden et al., Leukemia 18 (2004), 1971-1980). Исследуемая популяция включает взрослых пациентов с острым лимфобластным лейкозом (ALL) из В-клеток-предшественников, которые демонстрируют сигнал в отношении bcr/abl или сигнал в отношении транслокации t(4;11), превышающий предел выявления, и/или по крайней мере один маркер на реаранжировку с чувствительностью ≥10-4. Первоначальным ожидаемым результатом проводящего исследования фазы II является степень перевода в негативное по показателю минимального остаточного заболевания (MRD) состояние, определяемое по сигналу в отношении bcr/abl или транслокации t(4;11), который ниже предела выявления, и/или по выявлению отдельных реаранжировок генов иммуноглобулинов или Т-клеточных рецепторов (TCR) на уровне, который ниже 10-4. Одним циклом лечения CD19×CD3-биспецифическым одноцепочечным антителом является 4-недельная непрерывная внутривенная инфузия, за которой может следовать трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток после первого цикла или повторные циклы после 2-недельного промежутка времени без лечения. Доза CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела составляет 15 микрограмм/м2/24 ч, при этом допускается повышение дозы у одного и того же пациента вплоть до 30 микрограмм/м2/24 ч. Состояние минимального остаточного заболевания (MRD) контролируется после каждого цикла лечения. Пациентам, достигшим MRD-негативности, возможно назначение дополнительных циклов лечения.The introduction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody (also called blinatumomab or MT103), described in more detail below, for the first time leads to a therapeutic approach that allows the treatment of minimal residual disease in patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL). As shown in the following example and illustrated in FIG. 1, a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody (the nucleic acid sequence and amino acid sequence of which is displayed in SEQ ID NO: 2 and 1, respectively) was designed to bind T cells to CD19 expressing target cells leading to unlimited cytotoxic T-cell response and activation of T-cells. Recently, a significant clinical activity of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody was demonstrated in a phase I test for recurrent B-cell non-Hodgkin's lymphoma (NHL) (Bargou et al., Science 321 (2008): 974-977). Based on these results, a phase II study was planned in conjunction with the German Multicenter Study Group on Adult Acute Lymphoblastic Leukemia (GMALL) to study the efficacy, safety, and tolerability of CD19 × CD3 bispecific single chain antibodies in patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) who achieved complete hematologic remission, but still had minimal residual disease (MRD). MRD is an independent prognostic factor that reflects resistance to the original drug (s) and is associated with a high risk of relapse after the onset of consolidation. MRD was determined using standard methods, either by quantifying individual rearrangements of immunoglobulin genes or rearrangements of T cell receptor (TCR) genes, translocations of t (4; 11), or the determination of bcr / abl fusion transcripts (see, for example, Van der Velden et al ., Leukemia 18 (2004), 1971-1980). The study population includes adult patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) from precursor B cells that show a signal for bcr / abl or a signal for translocation t (4; 11) that exceeds the detection limit and / or at least one marker for rearrangement with sensitivity ≥10 -4 . The initial expected result of a Phase II study is the degree of negative negative residual disease (MRD) status, determined by a signal with respect to bcr / abl or translocation t (4; 11), which is below the detection limit, and / or by identifying individual rearrangements of immunoglobulin genes or T-cell receptors (TCR) at a level that is below 10 -4 . One treatment cycle for a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody is a 4-week continuous intravenous infusion, followed by transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells after the first cycle or repeated cycles after a 2-week period without treatment. Dose CD19 × CD3-bispecific single chain antibody is 15 mcg / m 2/24 hours, while allowing higher doses of one and the same patient, up to 30 microgram / m 2/24 hours. The condition of minimum residual disease (MRD) is controlled after each treatment cycle. Patients who have reached MRD negativity may be given additional treatment cycles.
На данное число семнадцать взрослых пациентов с ALL были подвергнуты лечению, или все еще находятся на лечении, CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом. 14 пациентам был назначен уровень дозы, составляющий 15 микрограмм/м2/24 ч CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, тогда как для трех пациентов доза была повышена с 15 до 30 микрограмм/м2/24 ч после первого или дальнейших циклов лечения. Все из этих пациентов с ALL имели минимальное остаточное заболевание (MRD): одиннадцать из них имели MRD, определенное по реаранжировкам генов иммуноглобулинов или TCR, два пациента имели транслокации t(4;11), а у четырех пациентов выявлены транскрипты слияния bcr/abl.By this number, seventeen adult ALL patients have been treated, or are still being treated, with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody. 14 patients were assigned dose level is 15 mcg / m 2/24 hours CD19 × CD3-bispecific single chain antibody, whereas three patients the dose was increased from 15 to 30 microgram / m 2/24 hours after the first or further treatment cycles. All of these ALL patients had minimal residual disease (MRD): eleven of them had MRD determined by rearrangements of immunoglobulin or TCR genes, two patients had t translocations (4; 11), and four patients showed bcr / abl fusion transcripts.
В результате, ответ MRD поддавался оценке у 16 из 17 пациентов. 13 из 16 пациентов стали MRD-негативными, что соответствует удивительной степени полного ответа на молекулярном уровне, составляющей 81%. Конкретнее, MRD-негативность могла быть достигнута у девяти из одиннадцати пациентов с реаранжировками генов иммуноглобулинов или TCR, у одного из двух пациентов с транслокациями t(4;11) и у трех из четырех пациентов с транскриптами bcr/abl. Наибольший период MRD-негативности, наблюдаемый до сих пор у пациента, не подвергнутого трансплантации после лечения антителом, составляет 41 недель. Другой пациент, подвергнутый лечению CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом, который был MRD-негативным с 23.06.2008 по 27.10.2008 и которому осуществлена успешная трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток после этого, не перенес рецидив до сих пор.As a result, the MRD response was measurable in 16 of 17 patients. 13 out of 16 patients became MRD-negative, which corresponds to an amazing degree of complete response at the molecular level of 81%. More specifically, MRD negativity could be achieved in nine of eleven patients with rearrangements of immunoglobulin or TCR genes, in one of two patients with t translocations (4; 11), and in three of four patients with bcr / abl transcripts. The largest period of MRD negativity observed so far in a patient who has not undergone transplantation after treatment with an antibody is 41 weeks. Another patient treated with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody that was MRD negative from 06/23/2008 to 10/27/2008 and who underwent successful transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells after this, has not yet recurred.
Примечательно, что пациенты с bcr/abl, которых можно было с успехом подвергнуть лечению CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом, в предшествующей схеме лечения ALL были резистентными к ингибиторам тирозинкиназы иматинибу и/или дасатинибу или непереносящими их. Например, один из пациентов с bcr/abl, ответивших на лечение CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом, имел мутацию T315I, которая была резистентной к терапии с использованием ингибиторов тирозинкиназы. Таким образом, введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела теперь впервые обусловливает терапию для резистентных к иматинибу и/или дасатинибу пациентов, страдающих ALL, с транскриптами bcr/abl. Только три из всего 17 пациентов не стали MRD-негативными. Однако у двух из них могла быть достигнута стабилизация болезни. Только один пациент перенес тестикулярный рецидив с последующим гематологическим рецидивом, после 19 недель негативности по показателю минимального остаточного заболевания. Один пациент не мог быть оценен из-за серьезного побочного эффекта в день 2 исследования.It is noteworthy that patients with bcr / abl, who could be successfully treated with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, in the previous ALL treatment regimen were resistant to imatinib and / or dasatinib tyrosine kinase inhibitors. For example, one of the bcr / abl patients who responded to treatment with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody had a T315I mutation that was resistant to tyrosine kinase inhibitor therapy. Thus, the introduction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody is now the first to provide therapy for imatinib and / or dasatinib resistant patients with ALL with bcr / abl transcripts. Only three of the total 17 patients did not become MRD-negative. However, in two of them, stabilization of the disease could be achieved. Only one patient suffered a testicular relapse followed by hematologic relapse after 19 weeks of negativity in terms of the minimum residual disease. One patient could not be evaluated due to a serious side effect on
В заключение, определенно исключительная степень полного ответа на молекулярном уровне, составляющая 81%, могла быть достигнута у взрослых пациентов с ALL из В-клеток-предшественников в результате лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом. Активность указанного антитела можно было зарегистрировать во всех подгруппах пациентов с ALL, подвергнутых лечению, в том числе у резистентных к ингибиторам тирозинкиназы (T315I) пациентов с bcr/abl и пациентов с транслокациями t(4;11). Эти подгруппы пациентов с ALL в общем считались неизлечимыми с помощью общепринятой стандартной терапии для ALL, за исключением варианта выбора аллогенной HSCT. Кроме того, при лечении CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом демонстрируется подходящий профиль токсичности, в противоположность общепринятым терапиям для ALL, таким как химиотерапия. Ввиду этого введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, описываемого в настоящем описании, обеспечивает новый и преимущественный вариант лечения острого лимфобластного лейкоза (ALL) у взрослых, особенно в тех случаях, когда ALL является резистентным к общепринятой терапии для ALL, такой как химиотерапия и/или аллогенная HSCT. Кроме того, введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела теперь впервые обусловливает терапию для MRD-позитивного ALL.In conclusion, a definitely exceptional degree of complete response at the molecular level of 81% could be achieved in adult patients with ALL from precursor B cells as a result of treatment with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody. The activity of this antibody could be detected in all subgroups of patients treated with ALL, including those resistant to tyrosine kinase inhibitors (T315I) patients with bcr / abl and patients with translocations t (4; 11). These subgroups of patients with ALL were generally considered incurable using generally accepted standard therapy for ALL, with the exception of the allogeneic HSCT choice. In addition, when treating a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, a suitable toxicity profile is demonstrated, as opposed to conventional ALL therapies such as chemotherapy. In view of this, the administration of the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody described herein provides a new and advantageous treatment option for acute lymphoblastic leukemia (ALL) in adults, especially in cases where ALL is resistant to conventional therapy for ALL, such as chemotherapy and / or allogeneic HSCT. In addition, the introduction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody is now the first to determine therapy for MRD-positive ALL.
Способ по настоящему изобретению обусловливает следующие основные преимущества:The method of the present invention provides the following main advantages:
1. Меньше неблагоприятных воздействий, чем в случае общепринятых терапий для острого лимфобластного лейкоза (ALL), включающих химиотерапию или аллогенную HSCT. Общепринятые терапии для ALL сопровождаются значительными рисками для здоровья пациентов; смотри, например, Schmoll, Höffken, Possinger: Kompendium lnternistische Onkologie, S. 2660 ff.; 4. Auflage, Springer Medizin Verlag Heidelberg).1. Less adverse effects than conventional therapies for acute lymphoblastic leukemia (ALL), including chemotherapy or allogeneic HSCT. Conventional therapies for ALL are associated with significant health risks for patients; see, for example, Schmoll, Höffken, Possinger: Kompendium lnternistische Onkologie, S. 2660 ff .; 4. Auflage, Springer Medizin Verlag Heidelberg).
2. Хотя в настоящее время считается, что аллогенная HSCT является предпочтительным лечением при Ph+ ALL, приблизительно одна треть подвергшихся трансплантации пациентов переносит рецидив. Наибольшему риску рецидива подвержены пациенты с Ph+ ALL среди всех пациентов в пределах подтипов ALL. Как показано в следующем примере, введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела особенно подходит для взрослых страдающих ALL пациентов с минимальным остаточным заболеванием (MRD). Это с учетом минимального остаточного заболевания (MRD), определяемого по транслокации с образованием филадельфийской хромосомы, а также MRD, определяемого по реаранжировке генов иммуноглобулинов или TCR или транслокации t(4;11). Взрослые пациенты с ALL, не подходящие для трансплантации костного мозга, несущие t(4;11), или резистентные пациенты с Ph+ ALL считались до сих пор излечимыми. Следовательно, фармацевтические способы и средства по настоящему изобретению обеспечивают терапевтический подход к лечению, уменьшению интенсивности или устранению MRD ALL у взрослых, уменьшая или даже отменяя тем самым риск рецидива для пациента. Следует отметить, что до сих пор еще не было приводящего к излечению лечения для MRD-позитивных пациентов с ALL.2. Although it is now believed that allogeneic HSCT is the preferred treatment for Ph + ALL, approximately one third of the transplanted patients suffer a relapse. Patients with Ph + ALL are most at risk of relapse among all patients within the ALL subtype. As shown in the following example, the administration of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody is particularly suitable for adult ALL sufferers with minimal residual disease (MRD). This is taking into account the minimum residual disease (MRD), determined by translocation with the formation of the Philadelphia chromosome, as well as MRD, determined by the rearrangement of immunoglobulin or TCR genes or translocation t (4; 11). Adult patients with ALL, not suitable for bone marrow transplantation, bearing t (4; 11), or resistant patients with Ph + ALL were still considered treatable. Therefore, the pharmaceutical methods and means of the present invention provide a therapeutic approach to treating, reducing the intensity or eliminating MRD ALL in adults, thereby reducing or even eliminating the risk of relapse for a patient. It should be noted that until now there has not been a cure for MRD-positive patients with ALL.
3. В частности, CD19×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело может использоваться для лечения MRD-позитивного острого лимфобластного лейкоза (ALL), резистентного к общепринятой терапии, такой как химиотерапия, введение ингибиторов тирозинкиназы и/или HSCT.3. In particular, a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody can be used to treat MRD-positive acute lymphoblastic leukemia (ALL) resistant to conventional therapies such as chemotherapy, administration of tyrosine kinase inhibitors and / or HSCT.
4. CD19×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело может не только заместить общепринятые терапии для острого лимфобластного лейкоза (ALL) у пациентов, не подходящих для аллогенной HSCT, оно может также использоваться для перевода состояния пациентов с ALL, подходящих для указанной трансплантации, в MRD-негативное состояние, поскольку MRD-негативные пациенты подвержены меньшему риску рецидива после трансплантации, чем MRD-позитивные пациенты.4. A CD19 × CD3 bispecific single chain antibody can not only replace conventional therapies for acute lymphoblastic leukemia (ALL) in patients not suitable for allogeneic HSCT, it can also be used to translate the condition of patients with ALL suitable for the indicated transplantation into MRD- negative state, since MRD-negative patients are at lower risk of relapse after transplantation than MRD-positive patients.
5. Высокая цитотоксическая активность CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела позволяет элиминировать лейкозные клетки в костном мозге.5. The high cytotoxic activity of the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody allows the elimination of leukemia cells in the bone marrow.
Обзор острого лимфобластного лейкоза (ALL), в том числе острого лимфобластного лейкоза из В-клеток-предшественников и других типов ALL из клеток В-линии, и их лечений приведен, например, в Pui and Evans, N. Engl. J. Med. 354 (2006), 166-178; Hoelzer and Gökbuget; Hematology (2006); 133-141; или Apostolidou et al., Drugs 67 (2007), 2153-2171. Информацию в отношении ALL можно также найти, например, на сайте http://www.cancer.gov, http://www.wikipedia.org или http://www.leukemia-lymphoma.org.A review of acute lymphoblastic leukemia (ALL), including acute lymphoblastic leukemia from precursor B cells and other types of ALL from B-line cells, and their treatments is provided, for example, in Pui and Evans, N. Engl. J. Med. 354 (2006), 166-178; Hoelzer and Gökbuget; Hematology (2006); 133-141; or Apostolidou et al., Drugs 67 (2007), 2153-2171. Information regarding ALL can also be found, for example, at http://www.cancer.gov, http://www.wikipedia.org or http://www.leukemia-lymphoma.org.
Термин «биспецифическое одноцепочечное антитело», или «одноцепочечное биспецифическое антитело», или родственные термины в соответствии с настоящим изобретением означает конструкции антител, являющиеся следствием соединения по крайней мере двух вариабельных областей антител в одну полипептидную цепь, свободную от константных областей и/или Fc-части(ей), присутствующих в полноразмерных иммуноглобулинах. «Линкер» соединяет V-домены одной и той же специфичности, тогда как «спейсер» соединяет V-домены различных специфичностей. Например, биспецифическое одноцепочечное антитело может быть конструкцией, в которой использованы всего две вариабельные области антител, например, две VH-области, каждая из которых способна к специфическому связыванию особого антигена, и которые соединены друг с другом через короткий (обычно менее 10 аминокислот) синтетический полипептидный спейсер из условия, чтобы две вариабельные области антител со вставленным между ними спейсером существовали в виде одной непрерывной полипептидной цепи. Другим примером биспецифического одноцепочечного антитела может быть единственная полипептидная цепь с тремя вариабельными областями антител. В этом случае две вариабельные области антител, например одна VH и одна VL, могут составлять scFv, в котором две вариабельные области антител соединены друг с другом через синтетический полипептидный линкер, при этом линкер часто генетически конструируют так, чтобы он был в минимальной степени иммуногенным при сохранении максимальной устойчивости к протеолизу. Этот scFv способен к специфическому связыванию с конкретным антигеном и соединен с дополнительной вариабельной областью антитела, например VH-областью, способной к связыванию с антигеном, отличным от того, который связывается scFv. Еще одним примером биспецифического одноцепочечного антитела может быть единственная полипептидная цепь с четырьмя вариабельными областями антител. В этом случае первые две вариабельные области антител, например VH-область и VL-область, могут образовывать один scFv, способный к связыванию с одним антигеном, тогда как вторые две вариабельные области: VH и VL - могут образовывать второй scFv, способный к связыванию с другим антигеном. В пределах одной непрерывной полипептидной цепи отдельные вариабельные области антител одной специфичности могут быть преимущественно разделены синтетическим полипептидным линкером, описываемым выше, тогда как соответствующие scFv могут быть преимущественно разделены коротким полипептидным спейсером, описываемым выше. Неограничивающие примеры биспецифических одноцепочечных антител, а также способов их получения представлены в WO 99/54440, WO 2004/106381, WO 2007/068354, Mack, J. Immunol. (1997), 158, 3965-3970; Mack, PNAS, (1995), 92, 7021-7025; Kufer, Cancer Immunol. Immunother, (1997), 45, 193-197; Loffler, Blood, (2000), 95, 6, 2098-2103; Bruhl, J. Immunol., (2001), 166, 2420-2426.The term “bispecific single chain antibody” or “single chain bispecific antibody” or related terms in accordance with the present invention means antibody constructs resulting from the joining of at least two variable regions of antibodies into a single polypeptide chain free of constant regions and / or Fc- part (s) present in full-sized immunoglobulins. A linker connects V domains of the same specificity, while a spacer connects V domains of different specificities. For example, a bispecific single chain antibody can be a construct in which only two variable regions of antibodies are used, for example, two VH regions, each of which is capable of specific binding of a particular antigen, and which are connected to each other via a short (usually less than 10 amino acids) synthetic a polypeptide spacer so that two variable regions of antibodies with a spacer inserted between them exist as a single continuous polypeptide chain. Another example of a bispecific single chain antibody may be a single polypeptide chain with three variable regions of antibodies. In this case, two variable regions of antibodies, for example, one VH and one VL, can be scFv, in which two variable regions of the antibodies are connected to each other via a synthetic polypeptide linker, the linker is often genetically designed so that it is minimally immunogenic when maintaining maximum resistance to proteolysis. This scFv is capable of specific binding to a particular antigen and is coupled to an additional variable region of the antibody, for example a VH region capable of binding to an antigen other than that which binds to scFv. Another example of a bispecific single chain antibody can be a single polypeptide chain with four variable regions of antibodies. In this case, the first two variable regions of antibodies, for example, the VH region and the VL region, can form one scFv capable of binding to one antigen, while the second two variable regions: VH and VL - can form a second scFv capable of binding to another antigen. Within a single continuous polypeptide chain, the individual variable regions of antibodies of the same specificity can be predominantly separated by the synthetic polypeptide linker described above, while the corresponding scFv can be predominantly separated by the short polypeptide spacer described above. Non-limiting examples of bispecific single chain antibodies, as well as methods for their preparation, are presented in WO 99/54440, WO 2004/106381, WO 2007/068354, Mack, J. Immunol. (1997), 158, 3965-3970; Mack, PNAS, (1995), 92, 7021-7025; Kufer, Cancer Immunol. Immunother, (1997), 45, 193-197; Loffler, Blood, (2000), 95, 6, 2098-2103; Bruhl, J. Immunol., (2001), 166, 2420-2426.
«CD3» обозначает антиген, который экспрессируется на T-клетках, предпочтительно T-клетках человека в виде части многомолекулярного рецепторного комплекса T-клеток, при этом CD3 состоит из пяти различных цепей: CD3-эпсилон, CD3-гамма, CD3-дельта, CD3-эта и CD3-зета. Агрегация CD3 на T-клетках, например, антителами против CD3 приводит к активации T-клеток, схожей с таковой при связывании антигена, но не зависящей от клональной специфичности субпопуляции T-клеток. Таким образом, термин «CD19×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело» относится к CD3-специфической конструкции, способной к связыванию с включающим CD3 человека комплексом, экспрессируемым на T-клетках человека, и способной к индукции элиминации/лизиса клеток-мишеней, причем такие клетки-мишени несут/представляют антиген, который связывается другой частью, не являющейся CD3-связывающей частью, биспецифического одноцепочечного антитела. Связывание включающего CD3 комплекса CD3-специфическими связующими веществами (например, биспецифическим одноцепочечным антителом, вводимым в соответствии с фармацевтическими средствами и способами по настоящему изобретению) приводит к активации T-клеток, как известно в данной области техники; смотри, например, WO 99/54440 или WO 2007/068354. Соответственно, подходящая для фармацевтических средств и способов по настоящему изобретению конструкция предпочтительно способна к элиминации/лизису клеток-мишеней in vivo и/или in vitro. Соответствующие клетки-мишени включают клетки, экспрессирующие опухолевый антиген, такой как CD19, который распознается второй специфичностью (т.е. частью, не являющейся CD3-связывающей частью, биспецифического одноцепочечного антитела) указанной конструкции. Предпочтительно указанной второй специфичностью является специфичность в отношении CD19 человека, который уже был описан в WO 99/54440, WO 2004/106381 или WO 2007/068354. В соответствии с этим вариантом осуществления каждая антигенспецифическая часть биспецифического одноцепочечного антитела включает VH-область антитела и VL-область антитела. Преимущественным вариантом этого биспецифического одноцепочечного антитела является следующий вариант в направлении от N-конца к C-концу:"CD3" refers to an antigen that is expressed on T cells, preferably human T cells, as part of a multi-molecular T-cell receptor complex, wherein CD3 consists of five different chains: CD3 epsilon, CD3 gamma, CD3 delta, CD3 -eta and CD3-zeta. Aggregation of CD3 on T cells, for example, with anti-CD3 antibodies, results in T-cell activation similar to that of antigen binding, but independent of the clonal specificity of the T-cell subpopulation. Thus, the term “CD19 × CD3 bispecific single chain antibody” refers to a CD3-specific construct capable of binding to a human CD3 complex expressed on human T cells and capable of inducing elimination / lysis of target cells, such cells the targets carry / represent an antigen that binds to the other non-CD3 binding part of the bispecific single chain antibody. The binding of a CD3 comprising complex to CD3-specific binding agents (for example, a bispecific single chain antibody administered in accordance with the pharmaceutical agents and methods of the present invention) results in T-cell activation, as is known in the art; see, for example, WO 99/54440 or WO 2007/068354. Accordingly, a construct suitable for the pharmaceuticals and methods of the present invention is preferably capable of eliminating / lysing target cells in vivo and / or in vitro. Suitable target cells include cells expressing a tumor antigen, such as CD19, which is recognized by the second specificity (i.e., the non-CD3 binding portion of the bispecific single chain antibody) of the indicated construct. Preferably, said second specificity is specificity for human CD19, which has already been described in WO 99/54440, WO 2004/106381 or WO 2007/068354. In accordance with this embodiment, each antigen-specific portion of a bispecific single chain antibody comprises an antibody VH region and an antibody VL region. An advantageous variant of this bispecific single chain antibody is the following variant in the direction from the N-terminus to the C-terminus:
VL(CD19)-VH(CD19)-VH(CD3)-VL(CD3) (SEQ ID NO: 1).V L (CD19) -V H (CD19) -V H (CD3) -V L (CD3) (SEQ ID NO: 1).
В значении по настоящему изобретению под термином «специфически связывающийся» или родственными терминами, такими как «специфичность», должно подразумеваться характеризующийся, главным образом, двумя параметрами: качественным параметром (эпитопом связывания, или где антитело связывается) и количественным параметром (аффинностью связывания, или насколько сильно это антитело связывается там, где оно связывается). Какой эпитоп связывается антителом, можно преимущественно определить, например, с помощью методики с использованием FACS, ELISA, картирования эпитопов с использованием пептидных районов или масс-спектроскопии. Силу связывания антитела с конкретным эпитопом можно преимущественно определить, например, с помощью известных методик Biacore и/или ELISA. Комбинация таких методов позволяет рассчитать отношение сигнал:шум в качестве репрезентативного показателя специфичности связывания. В таком отношении сигнал:шум сигнал представляет силу связывания антитела с представляющим интерес эпитопом, тогда как шум представляет силу связывания антитела с другими, неродственными эпитопами, отличными от представляющего интерес эпитопа. Отношение сигнал:шум, составляющее, например, по крайней мере 50, но предпочтительно приблизительно 80, для соответствующего эпитопа, представляющего интерес, определенное, например, с помощью Biacore, ELISA или FACS, может быть принято в качестве индикатора того, что оцениваемое антитело связывается с представляющим интерес эпитопом специфическим образом, т.е. оно является «специфическим связующим веществом». Термин «связывающийся с/взаимодействующий с» может также относиться к конформационному эпитопу, структурному эпитопу или детерминанте прерывистого типа, состоящей из двух или даже более районов молекул-мишеней человека или их частей. Конформационный эпитоп задается двумя или более дискретными аминокислотными последовательностями, разделенными в первичной последовательности, которые сближаются на поверхности молекулы при укладке полипептида во встречающийся в природе белок (Sela, (1969) Science 166, 1365 и Laver, (1990) Cell 61, 553-556). Термин «детерминанта прерывистого типа» означает нелинейные эпитопы, которые собираются из остатков из находящихся на расстоянии частей полипептидной цепи. Эти остатки сближаются на поверхности молекулы при укладке полипептидной цепи в трехмерную структуру с созданием конформационного/структурного эпитопа.In the meaning of the present invention, the term “specifically binding” or related terms such as “specificity” should be understood to be characterized mainly by two parameters: a qualitative parameter (binding epitope, or where the antibody binds) and a quantitative parameter (binding affinity, or how strongly this antibody binds where it binds). Which epitope is bound by an antibody can advantageously be determined, for example, using a technique using FACS, ELISA, epitope mapping using peptide regions or mass spectroscopy. The binding strength of an antibody to a particular epitope can be advantageously determined, for example, using known Biacore and / or ELISA techniques. The combination of these methods allows us to calculate the signal: noise ratio as a representative indicator of the specificity of binding. In this respect, signal: noise, the signal represents the binding force of the antibody to the epitope of interest, while the noise represents the binding force of the antibody to other, unrelated epitopes other than the epitope of interest. The signal-to-noise ratio, for example, of at least 50, but preferably approximately 80, for the corresponding epitope of interest, as determined, for example, by Biacore, ELISA or FACS, can be taken as an indicator that the antibody being evaluated is bound with the epitope of interest in a specific way, i.e. it is a “specific binder”. The term “binding to / interacting with” may also refer to a conformational epitope, a structural epitope, or a discontinuous type determinant consisting of two or even more regions of human target molecules or parts thereof. The conformational epitope is defined by two or more discrete amino acid sequences, separated in the primary sequence, which converge on the surface of the molecule when the polypeptide is packed into a naturally occurring protein (Sela, (1969) Science 166, 1365 and Laver, (1990) Cell 61, 553-556 ) The term “discontinuous type determinant” means non-linear epitopes that are assembled from residues from spaced portions of a polypeptide chain. These residues converge on the surface of the molecule when the polypeptide chain is laid in a three-dimensional structure with the creation of a conformational / structural epitope.
В самом широком значении термин «лечение» означает медицинские процедуры или применения, которые предназначены для ослабления заболевания. В случае настоящего изобретения введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела (приготовленного для введения взрослому пациенту с ALL), описываемого в настоящем описании, осуществляется для лечения, уменьшения интенсивности или устранения заболевания ALL у взрослых пациентов.In its broadest sense, the term "treatment" means medical procedures or applications that are intended to alleviate the disease. In the case of the present invention, the administration of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody (prepared for administration to an adult patient with ALL) described herein is performed to treat, reduce the intensity or eliminate the ALL disease in adult patients.
Термин «пациент» относится к пациенту-взрослому человеку. Упоминаемый в настоящем описании термин «ALL у взрослых», или «взрослый пациент с ALL», или «взрослый пациент» обозначает взрослых возрастом, превышающим 18 лет, т.е. пациентов возрастом 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 35, 40 или 50 лет или старше. Лечению с использованием способов и средств по настоящему изобретению можно даже подвергать пациентов возрастом 70, 75, 80, 85, 90, 100 лет или старше. Следует понимать, что указанный возраст является возрастом взрослых при диагностировании заболевания ALL.The term “patient” refers to an adult patient. As used herein, the term “ALL in adults” or “adult patient with ALL” or “adult patient” means adults over the age of 18 years, i.e. patients aged 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 35, 40, or 50 years or older.
Термин «уменьшение интенсивности» является синонимом термина «улучшение». Если в состоянии взрослого пациента с ALL демонстрируется улучшение, пациенту очевидно лучше - существует некоторое улучшение ее или его состояния. Например, в состоянии пациента с ALL может быть улучшение, если можно достичь стабилизации заболевания ALL (стадии заболевания, также называемой стабильным заболеванием), т.е. заболевание ALL больше не является прогрессирующим. Даже лучше, когда MRD-позитивный острый лимфобластный лейкоз (ALL) переводится в MRD-негативное состояние.The term “intensity reduction” is synonymous with the term “improvement”. If the condition of an adult patient with ALL shows improvement, the patient is obviously better - there is some improvement in her or his condition. For example, in the condition of a patient with ALL, there may be an improvement if stabilization of ALL disease (stage of the disease, also called stable disease) can be achieved, i.e. ALL disease is no longer progressive. Even better, when MRD-positive acute lymphoblastic leukemia (ALL) translates into an MRD-negative state.
Термин «устранение (элиминация)» означает удаление лейкозных клеток из организма взрослого пациента с ALL. Как показано в следующем примере, введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела способно к переводу MRD-позитивного острого лимфобластного лейкоза (ALL) в MRD-негативное состояние при различных подтипах ALL.The term "elimination (elimination)" means the removal of leukemia cells from the body of an adult patient with ALL. As shown in the following example, the administration of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody is capable of translating MRD-positive acute lymphoblastic leukemia (ALL) into an MRD-negative state for various ALL subtypes.
Термин «введение» означает введение терапевтически эффективной дозы вышеотмеченного CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела индивидууму, т.е. являющемуся человеком пациенту. Предпочтительно пациентом с ALL является взрослый пациент, определенный в настоящем описании.The term “administration” means the administration of a therapeutically effective dose of the aforementioned CD19 × CD3 bispecific single chain antibody to an individual, i.e. a human patient. Preferably, the ALL patient is an adult patient as defined herein.
Под «терапевтически эффективным количеством» подразумевается доза, которая вызывает эффекты, ради которых она вводится, предпочтительно перевод MRD-позитивного состояния острого лимфобластного лейкоза (ALL) в MRD-негативное состояние ALL. Точная доза будет зависеть от цели лечения, и ее сможет определить квалифицированный в данной области техники специалист, используя известные методы. Как известно в данной области техники и описано выше, могут потребоваться приведения в соответствие с системной доставкой в сравнении с местной доставкой, возрастом, весом тела, общим состоянием здоровья, полом, режимом питания, временем ведения, взаимодействием лекарственных средств и тяжестью состояния, и такие приведения в соответствие смогут установить квалифицированные в данной области техники специалисты с помощью обычного экспериментирования.By “therapeutically effective amount” is meant a dose that causes the effects for which it is administered, preferably the conversion of the MRD-positive state of acute lymphoblastic leukemia (ALL) to the MRD-negative state ALL. The exact dose will depend on the purpose of the treatment and can be determined by a person skilled in the art using known methods. As is known in the art and described above, harmonization with systemic delivery may be required compared with local delivery, age, body weight, general health, gender, diet, management time, drug interactions and severity, and such matching can be established by those skilled in the art using routine experimentation.
Штатный врач и клинические факторы будут определять схему дозирования. Как это хорошо известно в области медицины, дозы для какого-либо одного пациента зависят от множества факторов, включающих размер, площадь поверхности тела, возраст, вес тела пациента, конкретное вводимое соединение, пол, время и путь введения, общее состояние здоровья и другие лекарственные средства, вводимые одновременно.The staff doctor and clinical factors will determine the dosage regimen. As is well known in the medical field, doses for any one patient depend on many factors, including size, body surface area, age, patient body weight, specific compound administered, gender, time and route of administration, general health status, and other medicinal products funds administered simultaneously.
Как это хорошо известно в области медицины, дозы для какого-либо одного пациента зависят от множества факторов, включающих размер, площадь поверхности тела, возраст, вес тела пациента, конкретное вводимое соединение, пол, время и путь введения, общее состояние здоровья и другие лекарственные средства, вводимые одновременно. Типичная доза может, например, находиться в диапазонах, изложенных в вариантах осуществления настоящего изобретения и прилагаемых примерах; однако предусматриваются дозы, которые ниже или выше этого приводимого в качестве примера диапазона, особенно принимая во внимание вышеотмеченные факторы.As is well known in the medical field, doses for any one patient depend on many factors, including size, body surface area, age, patient body weight, specific compound administered, gender, time and route of administration, general health status, and other medicinal products funds administered simultaneously. A typical dose may, for example, be in the ranges set forth in embodiments of the present invention and the accompanying examples; however, doses are provided that are lower or higher than this exemplary range, especially taking into account the above factors.
Термин «непрерывная инфузия» относится к инфузии, дозволенной к осуществлению постоянно в течение периода времени, т.е. без перерыва. «Непрерывная инфузия» относится к постоянно проводимой инфузии. Соответственно, в контексте настоящего изобретения термины «постоянная» и «непрерывная» используются в качестве синонимов. В значении настоящего изобретения, например, термин «непрерывная инфузия в течение 4 недель» обозначает ситуацию, в которой CD19×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело, используемое в фармацевтических средствах и способах в соответствии с настоящим изобретением, вводят непрерывно в организм взрослого пациента в течение периода, составляющего 4 недели, непрерывным, постоянным образом на протяжении всего срока, требуемого в фармацевтических средствах и способах настоящего изобретения. Схемы непрерывного введения CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела описаны подробнее в WO 2007/068354. Избегают перерыва во введении CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, т.е. не имеет место, или в значительной степени не имеет место, переход от ситуации, в которой антитело вводят в организм пациента, к ситуации, в которой это антитело дольше не вводят в организм пациента, в течение всего срока введения, который требуют фармацевтические средства и способы настоящего изобретения, по причинам, отличным от пополнения запаса вводимого CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела или медицинских вмешательств, которые стали необходимыми, и т.п. Поскольку такое необходимое пополнение приводит к временному перерыву во введении вводимого антитела, такое введение все еще должно считаться «непрерываемым» или «постоянным» в значении фармацевтических средств и способов в соответствии с настоящим изобретением. В большинстве случаев обычно продолжительность такого пополнения будет настолько короткой, что время, в течение которого антитело не вводится в организм пациента, будет исчезающе малым по сравнению со временем, планируемым для всей схемы введения в соответствии с фармацевтическими средствами и способами в соответствии с настоящим изобретением. В соответствии с настоящим изобретением под одним циклом введения следует понимать непрерывную инфузию CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела взрослому пациенту с ALL в течение периода, составляющего 4 недели, с последующим 2-недельным промежутком времени без лечения. Не исключено, что после определения стадии MRD у подвергаемого лечению пациента(ов) после непрерывного введения в течение 4 недель или одного цикла лечения может быть диагностирована минимальная или частичная ответная реакция на лечение биспецифическим одноцепочечным антителом. В этом случае непрерывное введение может быть продолжено на дополнительный один, два, три, четыре, пять или даже вплоть до десяти циклов лечения для достижения лучшего терапевтического результата, например, стабилизации заболевания или даже полной ответной реакции. Предпочтительно указанная полная ответная реакция является MRD-негативностью. В альтернативном варианте осуществления за непрерывной инфузией CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела взрослому пациенту с ALL в течение 4 недель может следовать аллогенная HSCT. Также предусматривается, что пациенту, подвергнутому лечению с использованием одного, двух, трех, четырех или даже более циклов лечения, как изложено выше, могут быть после этого трансплантированы аллогенные гемопоэтические стволовые клетки.The term “continuous infusion” refers to an infusion that is allowed to be administered continuously over a period of time, i.e. nonstop. “Continuous infusion” refers to a continuous infusion. Accordingly, in the context of the present invention, the terms “constant” and “continuous” are used as synonyms. For the purposes of the present invention, for example, the term “continuous infusion over 4 weeks” refers to a situation in which a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody used in the pharmaceutical agents and methods of the present invention is continuously administered to an adult patient for a period of constituting 4 weeks, in a continuous, constant manner throughout the entire period required in the pharmaceutical products and methods of the present invention. Schemes for continuous administration of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody are described in more detail in WO 2007/068354. Avoid interruption in the administration of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, i.e. the transition from a situation in which an antibody is administered to a patient to a situation in which this antibody is no longer administered to a patient during the entire administration period required by pharmaceutical agents and methods does not take place, or substantially does not take place of the present invention, for reasons other than replenishment of the administered CD19 × CD3 bispecific single chain antibody or medical interventions that have become necessary, etc. Since such necessary replenishment leads to a temporary interruption in the administration of the administered antibody, such administration should still be considered “uninterrupted” or “permanent” in the meaning of the pharmaceutical agents and methods in accordance with the present invention. In most cases, usually the duration of such replenishment will be so short that the time during which the antibody is not introduced into the patient’s body will be vanishingly small compared to the time planned for the entire administration schedule in accordance with the pharmaceutical agents and methods of the present invention. In accordance with the present invention, a single cycle of administration should be understood as continuous infusion of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody to an adult patient with ALL for a period of 4 weeks, followed by a 2-week period without treatment. It is possible that after determining the stage of MRD in the treated patient (s) after continuous administration for 4 weeks or one treatment cycle, a minimal or partial response to treatment with a bispecific single chain antibody can be diagnosed. In this case, continuous administration can be continued for an additional one, two, three, four, five, or even up to ten treatment cycles to achieve a better therapeutic result, for example, stabilization of the disease or even a complete response. Preferably, said full response is MRD negativity. In an alternative embodiment, continuous infusion of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody into an adult ALL patient for 4 weeks may be followed by allogeneic HSCT. It is also contemplated that a patient subjected to treatment using one, two, three, four or even more treatment cycles, as described above, can then be transplanted with allogeneic hematopoietic stem cells.
Как показано в следующем примере, в результате лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом 13 из 16 взрослых пациентов с ALL стали MRD-негативными, что соответствует удивительной степени полного ответа на молекулярном уровне, составляющей 81%. Конкретнее, негативность по показателю минимального остаточного заболевания могла быть достигнута у девяти из одиннадцати пациентов с реаранжировками генов иммуноглобулинов или TCR, у одного из двух пациентов с транслокациями t(4; 11) и у трех из четырех пациентов с транскриптами bcr/abl. Предпочтительно основной терапевтической целью введения CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, либо самого по себе, либо в комбинации с аллогенной HSCT, взрослому пациенту с ALL является перевод MRD-позитивного состояния в MRD-негативное состояние, определяемое в настоящем описании.As shown in the following example, as a result of treatment with CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, 13 of 16 adult ALL patients became MRD negative, which corresponds to an amazing degree of complete response at the molecular level of 81%. More specifically, negativity in terms of the minimum residual disease could be achieved in nine of eleven patients with rearrangements of immunoglobulin or TCR genes, in one of two patients with t translocations (4; 11), and in three of four patients with bcr / abl transcripts. Preferably, the main therapeutic goal of administering a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, either alone or in combination with allogeneic HSCT, to an adult ALL patient is to convert the MRD-positive state to the MRD-negative state as defined herein.
Продолжение непрерываемого введения биспецифического одноцепочечного антитела в стиле фармацевтических средств и способов в соответствии с настоящим изобретением в течение более длительных периодов времени делает возможным предпочтительную активацию Т-клеток, указанную в примерах, с проявлением ее эффекта в течение длительного времени, достаточного для предпочтительного удаления всех пораженных болезнью клеток из организма. Поскольку скорость непрерываемого введения биспецифического одноцепочечного антитела сохраняют низкой, применение терапевтического средства может продолжаться дольше без риска вредных побочных эффектов для пациента.Continued continuous administration of the bispecific single chain antibody in the style of pharmaceuticals and methods in accordance with the present invention for longer periods of time makes it possible to preferentially activate the T cells indicated in the examples with a manifestation of its effect for a long time, sufficient for the preferred removal of all diseased cell disease from the body. Since the rate of continuous administration of a bispecific single chain antibody is kept low, the use of a therapeutic agent can last longer without risking harmful side effects for the patient.
Предпочтительно, когда используемое CD19×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело находится в форме фармацевтической композиции для введения являющемуся человеком пациенту, у которого диагностирован острый лимфобластный лейкоз (ALL). Предпочтительно пациентом-человеком является взрослый, определенный ниже. Хотя используемое в настоящем описании биспецифическое одноцепочечное антитело может вводиться само по себе, предпочтительным является введение в фармацевтически приемлемом носителе. Примеры подходящих фармацевтически приемлемых носителей хорошо известны в данной области техники и включают забуференные фосфатом солевые растворы, воду, липосомы, различные типы смачивающих веществ, стерильные растворы и т.д. Включающие такие носители композиции могут быть составлены с использованием широко известных обычных способов. Эти фармацевтические композиции могут вводиться субъекту в соответствующей дозе. Штатный врач и клинические факторы будут определять схему дозирования. Как это хорошо известно в области медицины, дозы для какого-либо одного пациента зависят от множества факторов, включающих размер, площадь поверхности тела, возраст, вес тела пациента, конкретное вводимое соединение, пол, время и путь введения, общее состояние здоровья и другие лекарственные средства, вводимые одновременно. Препараты для парентерального введения включают стерильные водные или неводные растворы или суспензии. Примерами неводных растворителей являются пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и инъецируемые эфиры органических кислот, такие как этилолеат. Водные носители включают воду, водные растворы или суспензии, в том числе солевой раствор и забуференные среды. Носители для парентерального введения включают раствор натрия хлорида, декстрозу в растворе Рингера, декстрозу и натрия хлорид, или раствор Рингера с лактатом. Носители для внутривенного введения включают жидкость и пищевые добавки, электролитные добавки (такие как те, которые основаны на декстрозе в растворе Рингера) и т.п. Могут также присутствовать консерванты и другие добавки, такие как, например, противомикробные средства, антиоксиданты, хелатообразующие вещества и инертные газы и т.п. Кроме того, композиция могла бы включать белковоподобные носители, вроде, например, сывороточного альбумина или иммуноглобулина, предпочтительно человеческого происхождения. Предусматривается возможное включение в композицию, помимо белковоподобного биспецифического одноцепочечного антитела, дополнительных биологически активных агентов в зависимости от намеченного применения фармацевтической композиции. Такими агентами могли бы быть агенты, действующие в качестве цитостатиков, агенты для предупреждения гиперурикемии, агенты, ингибирующие иммунные реакции (например, кортикостероиды, FK506), лекарственные средства, оказывающие действие на сердечно-сосудистую систему, и/или такие агенты, как костимулирующие T-клетки молекулы или цитокины, известные в данной области техники.Preferably, the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody used is in the form of a pharmaceutical composition for administration to a human patient diagnosed with acute lymphoblastic leukemia (ALL). Preferably, the human patient is an adult, as defined below. Although the bispecific single chain antibody used herein can be administered alone, administration in a pharmaceutically acceptable carrier is preferred. Examples of suitable pharmaceutically acceptable carriers are well known in the art and include phosphate buffered saline, water, liposomes, various types of wetting agents, sterile solutions, etc. Compositions comprising such carriers can be formulated using well-known conventional methods. These pharmaceutical compositions may be administered to a subject in an appropriate dose. The staff doctor and clinical factors will determine the dosage regimen. As is well known in the medical field, doses for any one patient depend on many factors, including size, body surface area, age, patient body weight, specific compound administered, gender, time and route of administration, general health status, and other medicinal products funds administered simultaneously. Preparations for parenteral administration include sterile aqueous or non-aqueous solutions or suspensions. Examples of non-aqueous solvents are propylene glycol, polyethylene glycol, and injectable organic acid esters such as ethyl oleate. Aqueous carriers include water, aqueous solutions or suspensions, including saline and buffered media. Carriers for parenteral administration include sodium chloride solution, dextrose in Ringer's solution, dextrose and sodium chloride, or Ringer's solution with lactate. Carriers for intravenous administration include liquid and food additives, electrolyte additives (such as those based on dextrose in Ringer's solution) and the like. Preservatives and other additives may also be present, such as, for example, antimicrobials, antioxidants, chelating agents and inert gases and the like. In addition, the composition could include protein-like carriers, such as, for example, serum albumin or immunoglobulin, preferably of human origin. It is possible to include, in addition to a protein-like bispecific single chain antibody, additional biologically active agents, depending on the intended use of the pharmaceutical composition. Such agents could be agents acting as cytostatics, agents for preventing hyperuricemia, agents that inhibit immune reactions (e.g., corticosteroids, FK506), drugs that have an effect on the cardiovascular system, and / or agents such as costimulatory T β-cells of a molecule or cytokines known in the art.
Предпочтительно составляют смесь определенного в настоящем описании CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела с буфером, стабилизатором и поверхностно-активным веществом. Буфером может быть фосфатный, цитратный, сукцинатный или ацетатный буфер. Стабилизатором может быть аминокислота(ы) и/или сахар. Поверхностно-активными веществами могут быть детергенты, ПЭГ или т.п. Более предпочтительно, когда составляют смесь CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, определенного в настоящем описании, с цитратом, лизином, трегалозой и Tween 80. В качестве разбавителя для фармацевтической композиции настоящего изобретения предпочтительным является изотонический солевой раствор и Tween 80.Preferably, a mixture of the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody as defined herein with a buffer, stabilizer and surfactant is formulated. The buffer may be phosphate, citrate, succinate or acetate buffer. The stabilizer may be amino acid (s) and / or sugar. Surfactants may be detergents, PEG, or the like. More preferably, when a mixture of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, as defined herein, is made up of citrate, lysine, trehalose and
Предпочтительно в применениях или способах по настоящему изобретению фармацевтическая композиция должна вводиться являющемуся человеком взрослому пациенту, у которого диагностирован острый лимфобластный лейкоз (ALL).Preferably, in the uses or methods of the present invention, the pharmaceutical composition should be administered to a human adult patient diagnosed with acute lymphoblastic leukemia (ALL).
Состоятельность терапии с использованием CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела можно контролировать посредством широко известных стандартных способов для соответствующих категорий заболеваний: в случае терапии для В-клеточного ALL может использоваться анализ с использованием клеточного сортера с возбуждением флуоресценции (FACS), аспирация костного мозга и различные, специфичные для лейкоза, клинические химические параметры, и другие широко известные стандартные способы. Способы и средства для определения состояния MRD описаны в настоящем описании.The viability of therapy using a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody can be controlled using well-known standard methods for the respective disease categories: in the case of therapy for B-cell ALL, analysis using a fluorescence-excited cell sorter (FACS), bone marrow aspiration and various specific for leukemia, clinical chemical parameters, and other well-known standard methods. Methods and means for determining the state of MRD are described herein.
Цитотоксичность можно определить с помощью способов, известных в данной области техники, и способов, проиллюстрированных, например, в WO 99/54440, WO 2004/106381, WO 2007/068354.Cytotoxicity can be determined using methods known in the art and methods illustrated, for example, in WO 99/54440, WO 2004/106381, WO 2007/068354.
В предпочтительном варианте резистентным к химиотерапии является острый лимфобластный лейкоз (ALL) взрослого пациента(ов), предпочтительно в части MRD (т.е. MRD у этих пациентов с ALL является резистентным к химиотерапии). Даже предпочтительнее, когда острый лимфобластный лейкоз (ALL) является резистентным к химиотерапии у пациентов, не подходящих для трансплантации аллогенных стволовых клеток.In a preferred embodiment, chemotherapy resistant is acute lymphoblastic leukemia (ALL) of an adult patient (s), preferably in terms of MRD (i.e., MRD in these ALL patients is chemotherapy resistant). Even more preferably, acute lymphoblastic leukemia (ALL) is chemotherapy resistant in patients not suitable for allogeneic stem cell transplantation.
Термин «химиотерапия» обозначает химиотерапию, используемую для лечения острого лимфобластного лейкоза (ALL). Химиотерапия является первоначальным предпочтительным лечением ALL. Большинство пациентов с ALL оказываются получающими комбинацию различных лечений. При лечении ALL нет возможности выбора хирургического вмешательства из-за распространения злокачественных клеток по всему организму. Как правило, цитотоксическая химиотерапия для ALL объединяет множество противолейкозных средств в различных комбинациях. Химиотерапия для ALL состоит из трех этапов: вызова ремиссии, интенсификации и поддерживающей терапии. Химиотерапию также назначают для защиты центральной нервной системы от лейкоза. Целью вызова ремиссии является быстрое уничтожение большинства опухолевых клеток и введение пациента в ремиссию. Ее определяют как присутствие менее 5% лейкозных бластных клеток в костном мозге (что определяют с помощью оптической микроскопии), нормальные клетки крови и отсутствие опухолевых клеток в крови, и отсутствие других признаков или симптомов заболевания. Для вызова ремиссии используют, например, комбинацию преднизолона или дексаметазона (у детей), винкристина, аспарагиназы и даунорубицина (используемых при ALL у взрослых). При интенсификации используются высокие дозы химиотерапии с использованием множества лекарственных средств, вводимых внутривенно, для дальнейшего уменьшения опухолевой массы. В типичных протоколах интенсификации используется винкристин, циклофосфамид, цитарабин, даунорубицин, этопозид, тиогуанин или меркаптопурин, назначаемые в виде групп в различных комбинациях. Поскольку иногда клетки ALL проникают в центральную нервную систему (ЦНС), большинство протоколов включает доставку химиотерапии в спинномозговую жидкость (называемую интратекальной химиотерапией). Некоторые центры доставляют лекарственное средство благодаря резервуару Оммайя (устройству, хирургически размещаемому под скальпом и используемому для доставки лекарственных средств в спинномозговую жидкость и извлечения спинномозговой жидкости для различных анализов). Другие центры делают множество люмбальных пункций, по мере необходимости, для анализа и доставки лечения. Для этой цели обычно используется вводимый интратекально метотрексат или цитарабин. Целью поддерживающей терапии является уничтожение любой сохранившейся клетки, которая не была уничтожена при вызове ремиссии и схемах интенсификации. Хотя таких клеток немного, они будут вызывать рецидив, если их не уничтожить. Для этой цели используется ежедневно меркаптопурин, назначаемый перорально, раз в неделю метотрексат, назначаемый перорально, раз в месяц 5-дневный курс внутривенного введения винкристина и назначаемых перорально кортикостероидов. Продолжительность поддерживающей терапии составляет 3 года для мальчиков, 2 года - для девочек и взрослых. Рецидивы с поражением центральной нервной системы лечат с помощью интратекального введения гидрокортизона, метотрексата и цитарабина (Hoffbrand et al., Essential Hematology, Blackwell, 5th edition, 2006). Так как схемы химиотерапии могут быть интенсивными и длительными (часто в течение приблизительно 2 лет в случае протоколов GMALL UKALL, HyperCVAD или CALGB; в течение приблизительно 3 лет для мужчин в протоколах COG), многие пациенты имеют внутривенный катетер, введенный в центральную вену (называемый центральным венозным катетером или катетер Хикмана), или Portacath (конусообразное небольшое устройство с силиконовой носовой частью, которое хирургически внедряют под кожу, обычно около ключицы).The term “chemotherapy” refers to chemotherapy used to treat acute lymphoblastic leukemia (ALL). Chemotherapy is the initial preferred treatment for ALL. Most patients with ALL find themselves receiving a combination of different treatments. In the treatment of ALL, there is no choice of surgery due to the spread of malignant cells throughout the body. Typically, cytotoxic chemotherapy for ALL combines many anti-leukemia drugs in various combinations. Chemotherapy for ALL consists of three steps: inducing remission, intensification, and supportive care. Chemotherapy is also prescribed to protect the central nervous system from leukemia. The goal of inducing remission is the rapid destruction of most tumor cells and the introduction of a patient into remission. It is defined as the presence of less than 5% leukemic blast cells in the bone marrow (as determined by optical microscopy), normal blood cells and the absence of tumor cells in the blood, and the absence of other signs or symptoms of the disease. To induce remission, for example, a combination of prednisone or dexamethasone (in children), vincristine, asparaginase and daunorubicin (used in ALL in adults) is used. Intensification uses high doses of chemotherapy using a variety of intravenous drugs to further reduce the tumor mass. Typical intensification protocols use vincristine, cyclophosphamide, cytarabine, daunorubicin, etoposide, thioguanine, or mercaptopurine, which are assigned as groups in various combinations. Since sometimes ALL cells enter the central nervous system (CNS), most protocols include delivering chemotherapy to the cerebrospinal fluid (called intrathecal chemotherapy). Some centers deliver the drug thanks to the Ommaya reservoir (a device that is surgically placed under the scalp and used to deliver drugs to the cerebrospinal fluid and to extract cerebrospinal fluid for various tests). Other centers make many lumbar punctures, as necessary, for analysis and treatment delivery. Intrathecal methotrexate or cytarabine is usually used for this purpose. The goal of maintenance therapy is to destroy any surviving cell that was not destroyed during the remission and intensification schemes. Although there are few such cells, they will cause a relapse if they are not destroyed. For this purpose, mercaptopurine is used daily, given orally, once a week, methotrexate, given orally, once a month, a 5-day course of intravenous administration of vincristine and orally prescribed corticosteroids. The duration of maintenance therapy is 3 years for boys, 2 years for girls and adults. Recurrences of the central nervous system lesions treated with intrathecal administration of hydrocortisone, methotrexate, and cytarabine (Hoffbrand et al., Essential Hematology , Blackwell, 5 th edition, 2006). Since chemotherapy regimens can be intense and lengthy (often for about 2 years for GMALL UKALL, HyperCVAD or CALGB protocols; for about 3 years for men in COG protocols), many patients have an intravenous catheter inserted into the central vein (called a central venous or Hickman catheter), or Portacath (a cone-shaped small device with a silicone nose that is surgically inserted under the skin, usually around the collarbone).
Химиотерапия для ALL описана, например, в Schmoll, Hoffken, Possinger (в процитированном месте).Chemotherapy for ALL is described, for example, in Schmoll, Hoffken, Possinger (in the cited place).
Ввиду вышесказанного, используемый в настоящем описании термин «резистентный к химиотерапии» обозначает резистентность клеток острого лимфобластного лейкоза к химиотерапии.In view of the foregoing, the term “chemotherapy resistant” as used herein refers to the resistance of chemotherapy to acute lymphoblastic leukemia cells.
Пациенты могут переносить рецидив ALL после первоначальной терапии и/или стать резистентными к химиотерапии после лечения. Пациенты с ALL, резистентные к химиотерапии, имеют явно неблагоприятный прогноз. В частности, является неблагоприятным прогноз для взрослых пациентов с Ph+ ALL, подвергнутых только лечению с использованием химиотерапии, при этом вероятность длительного выживания составляет менее 10%. Поскольку фармацевтические способы и средства по настоящему изобретению могут привести к MRD-негативности у взрослых пациентов с ALL, они особенно пригодны для лечения пациентов с ALL, резистентных к химиотерапии.Patients may tolerate ALL relapse after initial therapy and / or become chemotherapy resistant after treatment. Chemotherapy-resistant patients with ALL have a clearly poor prognosis. In particular, the prognosis is unfavorable for adult patients with Ph + ALL who underwent only treatment with chemotherapy, while the probability of prolonged survival is less than 10%. Because the pharmaceutical methods and agents of the present invention can lead to MRD negativity in adult ALL patients, they are particularly suitable for treating chemotherapy resistant ALL patients.
Термин «трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток» означает трансплантацию аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (HSCT) или трансплантацию костного мозга (BMT), которая является медицинской процедурой в области гематологии и онкологии, которая включает трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток (HSC). Чаще всего ее выполняют в случае пациентов с заболеваниями лимфатических узлов, крови или костного мозга или некоторыми типа рака, такими как ALL. Аллогенная HSCT является процедурой, при которой человек получает гемопоэтические стволовые клетки (клетки из которых образуются все клетки крови) от генетически схожего, но не идентичного донора. Им часто является близкий родственник, такой как мать, отец, сестра или брат, но также мог бы быть не являющийся родственником донор. Большинство реципиентов HSCT являются пациентами с лейкозом (например, ALL), которым могло бы помочь лечение высокими дозами химиотерапии или облучение всего тела. Однако аллогенная HSCT остается опасным и обладающим токсичностью лечением.The term "allogeneic hematopoietic stem cell transplantation" means allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) or bone marrow transplantation (BMT), which is a medical procedure in the field of hematology and oncology, which includes hematopoietic stem cell transplantation (HSC). Most often, it is performed in the case of patients with diseases of the lymph nodes, blood or bone marrow, or some types of cancer, such as ALL. Allogeneic HSCT is a procedure in which a person receives hematopoietic stem cells (cells from which all blood cells are formed) from a genetically similar but not identical donor. It is often a close relative, such as a mother, father, sister or brother, but could also be a non-relative donor. Most HSCT recipients are patients with leukemia (e.g. ALL) who might benefit from treatment with high doses of chemotherapy or whole body irradiation. However, allogeneic HSCT remains a dangerous and toxic treatment.
Термин «не подходящие для HSCT» предназначен для тех взрослых пациентов, в случае которых алллогенная HSCT не является предпочтительным лечением ALL, например, по медицинским причинам. Например, не исключен случай, когда в наличии нет подходящего донора, или пациент уже превысил верхний предельный возраст. Как показано в следующем примере, все пациенты были резистентными к химиотерапии, или в случае Ph+ ALL также резистентными к ингибиторам тирозинкиназы или непереносящими их до включения в исследование. Восемь пациентов, подвергнутых лечению CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом, такие как, например, пациенты 111-003, 108-002, 109-006 или 109-007, не подходили для аллогенной HSCT.The term “not suitable for HSCT” is intended for those adult patients in whom allogeneic HSCT is not the preferred treatment for ALL, for example, for medical reasons. For example, it is possible that there is no suitable donor available or the patient has already exceeded the upper age limit. As shown in the following example, all patients were resistant to chemotherapy, or in the case of Ph + ALL, also resistant to tyrosine kinase inhibitors or not tolerating them before inclusion in the study. Eight patients treated with CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, such as, for example, patients 111-003, 108-002, 109-006 or 109-007, were not suitable for allogeneic HSCT.
До настоящего времени ALL означал приговор для пациентов, резистентных к химиотерапии и не подходящих для аллогенной HSCT. Фармацевтические способы и средства по настоящему изобретению впервые обеспечивают лечение этой популяции пациентов, при котором устраняется минимальное остаточное заболевание (MRD), которое иначе могло бы вызвать рецидив и убить указанных пациентов.To date, ALL has meant sentencing for patients who are resistant to chemotherapy and are not suitable for allogeneic HSCT. The pharmaceutical methods and means of the present invention for the first time provide treatment for this patient population, which eliminates the minimum residual disease (MRD), which otherwise could cause a relapse and kill these patients.
В альтернативном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению за указанным способом следует трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, или указанный способ замещает трансплантацию аллогенных гемопоэтических стволовых клеток у взрослых пациентов, подходящих для аллогенной HSCT.In an alternative embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, said method is followed by transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells, or the method replaces transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells in adult patients suitable for allogeneic HSCT.
Термин «подходящий для аллогенной HSCT» означает, что аллогенная HSCT является необходимой терапией для взрослого пациента с ALL. В тех случаях, когда пациент с ALL является подходящим для аллогенной HSCT, могут предусматриваться следующие два варианта развития событий. Во-первых, в одном варианте осуществления фармацевтических способов и средств настоящего изобретения может использоваться введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела (самого по себе или предпочтительно в виде фармацевтической композиции) для замещения аллогенной HSCT, используемой в качестве общепринятой терапии для взрослых пациентов с ALL, подходящих для трансплантации. Значит, фармацевтические способы и средства по настоящему изобретению могут предотвратить риски для здоровья пациентов с ALL, связанные с трансплантацией аллогенных гемопоэтических стволовых клеток. Кроме того, приблизительно 30% подвергшихся трансплантации пациентов с ALL обычно переносят рецидив после трансплантации. Значит, фармацевтические способы и средства по настоящему изобретению могут использоваться для лечения этих пациентов. В альтернативном варианте осуществления за непрерывной инфузией CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела взрослому пациенту с ALL может следовать трансплантация аллогенных стволовых клеток. В этом варианте осуществления введение фармацевтической композиции, включающей конструкцию CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, может использоваться для перевода состояния пациентов с ALL, подходящих для трансплантации, в MRD-негативное состояние до осуществления трансплантации. Значит, фармацевтические способы и средства по настоящему изобретению могут использоваться для устранения MRD, которое приводит к меньшему риску рецидива, чем лечение с использованием трансплантации MRD-позитивных пациентов. В примере представлен пациент, которого сначала перевели в MRD-негативное состояние в результате лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом, с последующей аллогенной трансплантацией. До сих пор этот пациент все еще является MRD-негативным, при этом период MRD-негативности составляет 47 недель до настоящего времени.The term “suitable for allogeneic HSCT” means that allogeneic HSCT is a necessary therapy for an adult patient with ALL. In cases where a patient with ALL is suitable for allogeneic HSCT, the following two scenarios can be considered. First, in one embodiment of the pharmaceutical methods and means of the present invention, the administration of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody (alone or preferably in the form of a pharmaceutical composition) can be used to replace allogeneic HSCT used as a standard therapy for adult ALL patients suitable for transplantation. Therefore, the pharmaceutical methods and means of the present invention can prevent the health risks of patients with ALL associated with transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells. In addition, approximately 30% of transplanted patients with ALL usually suffer a relapse after transplantation. Therefore, the pharmaceutical methods and agents of the present invention can be used to treat these patients. In an alternative embodiment, continuous infusion of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody into an adult ALL patient may be followed by allogeneic stem cell transplantation. In this embodiment, the administration of a pharmaceutical composition comprising the construction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody can be used to translate the condition of patients with ALL suitable for transplantation into an MRD negative state prior to transplantation. Therefore, the pharmaceutical methods and means of the present invention can be used to eliminate MRD, which leads to a lower risk of relapse than treatment using transplantation of MRD-positive patients. The example shows a patient who was first transferred to an MRD negative state as a result of treatment with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, followed by allogeneic transplantation. So far, this patient is still MRD-negative, with a period of MRD-negativity of 47 weeks to date.
В пределах объема фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению находится также введение конструкции CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела взрослым пациентам с ALL, которые были подвергнуты аллогенной HSCT и перенесли рецидив после этого.Within the scope of the pharmaceutical methods and means of the present invention is also the introduction of the construction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody to adult ALL patients who have undergone allogeneic HSCT and suffered a relapse thereafter.
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтические способы и средства по настоящему изобретению предназначены для лечения, уменьшения интенсивности или устранения минимального остаточного заболевания (MRD) у взрослого пациента с острым лимфобластным лейкозом (ALL).In another preferred embodiment, the pharmaceutical methods and agents of the present invention are for treating, reducing the intensity or eliminating minimum residual disease (MRD) in an adult patient with acute lymphoblastic leukemia (ALL).
Термин «минимальное остаточное заболевание (MRD)» обозначает состояние заболевания после лечения, например, химиотерапевтическими средствами, когда лейкозные клетки больше нельзя выявить в костном мозге с помощью способов с использованием оптической микроскопии. Более чувствительные анализы, такие как проточная цитометрия (способы на основе FACS) или полимерная цепная реакция (ПЦР), должны использоваться для того, чтобы найти доказательство того, что лейкозные клетки остались в костном мозге пациента с ALL. Конкретнее, присутствие лейкозных клеток на уровне, который ниже цитологического предела выявления (5% лейкозных клеток), получает определение «минимального остаточного заболевания (MRD)». Если MRD не выявляется (<10-4, т.е. меньше 1 лейкозной клетки на 104 клеток костного мозга, поддающихся обнаружению), достигнута полная ремиссия на молекулярном уровне. Под «MRD-позитивным состоянием», как определяется в настоящем описании, подразумевается сигнал в отношении bcr/abl или сигнал в отношении транслокации t(4;11), превышающий предел выявления, и/или по крайней мере один маркер на отдельные реаранжировки генов иммуноглобулинов или Т-клеточных рецепторов (TCR), на уровне, превышающем 10-4. Под «MRD-негативным состоянием», как определяется в настоящем описании, подразумевается сигнал в отношении bcr/abl или сигнал в отношении транслокации t(4;11), который ниже предела выявления, или по крайней мере один маркер на отдельные реаранжировки генов иммуноглобулинов или Т-клеточных рецепторов (TCR), на уровне, который ниже 10-4. Состояние MRD можно определить с помощью анализа с использованием ПЦР или FACS, в котором количественно определяются отдельные реаранжировки генов иммуноглобулинов или реаранжировки Т-клеточных рецепторов (TCR), или транскрипты слияния bcr/abl, или транслокации t(4;11). Например, с помощью анализа с использованием ПЦР можно выявить транскрипты слияния, такие как bcr/abl, или транслокации t(4;11), а также отдельные клональные реаранжировки генов иммуноглобулинов (IgH) и/или Т-клеточных рецепторов (TCR).The term "minimum residual disease (MRD)" refers to the condition of the disease after treatment with, for example, chemotherapeutic agents, when leukemia cells can no longer be detected in the bone marrow using methods using optical microscopy. More sensitive assays, such as flow cytometry (FACS based methods) or polymer chain reaction (PCR), should be used to find evidence that leukemia cells remained in the bone marrow of a patient with ALL. More specifically, the presence of leukemic cells at a level that is below the cytological detection limit (5% of leukemic cells) is defined as “minimum residual disease (MRD)”. If MRD is not detected (<10 -4 , i.e., less than 1 leukemia cell per 10 4 detectable bone marrow cells), complete remission at the molecular level is achieved. By “MRD-positive state,” as defined herein, is meant a signal for bcr / abl or a signal for translocation t (4; 11) that exceeds the detection limit and / or at least one marker for individual immunoglobulin gene rearrangements or T cell receptors (TCR), in excess of 10 -4 . By “MRD negative state”, as defined herein, is meant a signal for bcr / abl or a signal for translocation t (4; 11) that is below the detection limit, or at least one marker for individual gene rearrangements of immunoglobulins or T cell receptors (TCR), at a level that is below 10 -4 . MRD status can be determined using PCR or FACS analysis, which quantifies individual rearrangements of immunoglobulin genes or rearrangements of T-cell receptors (TCR), or transcripts of bcr / abl fusion, or translocation t (4; 11). For example, using PCR analysis, fusion transcripts, such as bcr / abl, or translocations of t (4; 11), as well as individual clonal rearrangements of immunoglobulin (IgH) and / or T-cell receptor (TCR) genes, can be detected.
Повторяющиеся хромосомные отклонения в злокачественных клетках пациентов с острым лимфобластным лейкозом являются признаками заболевания (Harrison and Foroni, Rev. Clin. Exp. Hematol. 6 (2002), 91-113). Специфические аберрации, которые часто служат признаком закономерных, лежащих в основе повреждений на молекулярном уровне, могут помочь в диагностировании или даже установить диагноз и определить оптимальную терапию. В случае ALL у детей были идентифицированы многочисленные цитогенетические подгруппы низкого и высокого риска, которые регулярно используются для отнесения пациентов к конкретным терапиям (Pui and Evans, N. Engl. J. Med. 354 (2006), 166-178). Однако в случае ALL у взрослых роль цитогенетики в лечении пациентов была, главным образом, сфокусирована на присутствии филадельфийской (Ph) хромосомы, которая обычно возникает в результате транслокации t(9;22)(q34;q11.2) и приводит к слиянию BCR-ABL (bcr/abl) (Faderl et al., Blood 91 (1998), 3995-4019). Хотя общая частота возникновения Ph+ ALL у взрослых составляет приблизительно 25%, существует ее связь с возрастом, и она возрастает до более 50% среди пациентов старше 55 лет (Appelbaum, American Society of Clinical Oncology 2005 education book. Alexandria: ASCO, 2005: 528-532). Другие цитогенетические транслокации, связанные со специфическими молекулярно-генетическими отклонениями при остром лимфобластном лейкозе (ALL), представлены в таблице 1. Repeated chromosomal abnormalities in the malignant cells of patients with acute lymphoblastic leukemia are signs of the disease (Harrison and Foroni, Rev. Clin. Exp. Hematol. 6 (2002), 91-113). Specific aberrations, which often serve as a sign of regular, underlying damage at the molecular level, can help diagnose or even establish a diagnosis and determine the optimal therapy. In the case of ALL in children, numerous cytogenetic subgroups of low and high risk have been identified that are regularly used to refer patients to specific therapies (Pui and Evans, N. Engl. J. Med. 354 (2006), 166-178). However, in the case of ALL in adults, the role of cytogenetics in the treatment of patients was mainly focused on the presence of the Philadelphia (Ph) chromosome, which usually occurs as a result of translocation t (9; 22) (q34; q11.2) and leads to the fusion of BCR- ABL (bcr / abl) (Faderl et al., Blood 91 (1998), 3995-4019). Although the overall incidence of Ph + ALL in adults is approximately 25%, it is associated with age and increases to over 50% among patients over 55 years old (Appelbaum, American Society of Clinical Oncology 2005 education book. Alexandria: ASCO, 2005: 528 -532). Other cytogenetic translocations associated with specific molecular genetic abnormalities in acute lymphoblastic leukemia (ALL) are presented in Table 1.
Цитогенетика признавалась во все возрастающей мере в качестве важного прогностического фактора исхода ALL (Moormann et al., Blood 109 (2007), 3189-3197).Cytogenetics has been increasingly recognized as an important prognostic factor in the outcome of ALL (Moormann et al., Blood 109 (2007), 3189-3197).
Некоторые цитогенетические подтипы имеют более неблагоприятный прогноз, чем другие. Они, например, включают:Some cytogenetic subtypes have a poorer prognosis than others. These, for example, include:
(i) Транслокация между хромосомами 9 и 22, филадельфийская хромосома (Ph+), встречается у приблизительно 20% взрослых и 5% педиатрических пациентов с ALL.(i) Translocation between
(ii) Транслокация между хромосомами 4 и 11 встречается у приблизительно 4% пациентов и чаще всего у младенцев возрастом меньше 12 месяцев.(ii) Translocation between
Реаранжировки иммуноглобулиновых генов или реаранжировки генов Т-клеточных рецепторов (TCR) и их роль в ALL описаны в данной области техники (смотри, например, Szczepanski et al., Leukemia 12 (1998), 1081-1088).Rearrangement of immunoglobulin genes or rearrangement of T-cell receptor (TCR) genes and their role in ALL are described in the art (see, for example, Szczepanski et al., Leukemia 12 (1998), 1081-1088).
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению указанный взрослый пациент является MRD-позитивным при полной гематологической ремиссии.In another preferred embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, said adult patient is MRD positive with complete hematologic remission.
Под термином «ремиссия» или «гематологическая ремиссия» следует понимать отсутствие данных о заболевании после лечения, например, после химиотерапии или трансплантации. Это означает, что в костном мозге содержится менее 5% бластных клеток, определяемых с помощью оптической микроскопии, уровни клеток крови находятся в границах нормы, и отсутствуют признаки или симптомы заболевания ALL. «Полная ремиссия на молекулярном уровне» означает отсутствие данных по лейкозным клеткам в биопсиях костного мозга, даже после использования очень чувствительных анализов, таких как ПЦР. Иначе говоря, если MRD не выявляется (<10-4, т.е. меньше одной лейкозной клетки на 104 клеток костного мозга), достигнута полная ремиссия на молекулярном уровне.The term "remission" or "hematological remission" should be understood as the absence of data on the disease after treatment, for example, after chemotherapy or transplantation. This means that the bone marrow contains less than 5% of blast cells determined by optical microscopy, blood cell levels are within normal limits, and there are no signs or symptoms of ALL disease. “Complete remission at the molecular level” means the lack of data on leukemia cells in bone marrow biopsies, even after using very sensitive assays, such as PCR. In other words, if MRD is not detected (<10 -4 , i.e., less than one leukemia cell per 10 4 bone marrow cells), complete remission at the molecular level is achieved.
После полной ремиссии поражения(й) лейкозом у являющего человеком взрослого пациента с ALL, достигнутой с помощью химиотерапевтического лечения или трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, не исключено, что было невозможным элиминирование всех лейкозных клеток из организма. Однако эти остающиеся опухолевые клетки могут вызвать развитие рецидивирующего лейкоза. Фармацевтические средства и способы настоящего изобретения могут использоваться для уничтожения этих остающихся опухолевых клеток для того, чтобы предупредить рецидив лейкоза (возникающий из не выявляемых лейкозных клеток, остающихся в организме после первичной терапии). Таким образом, фармацевтические средства и способы помогают предупредить рецидив заболевания у взрослых пациентов с ALL.After complete remission of the lesion (s) by leukemia in a human adult patient with ALL achieved with chemotherapeutic treatment or transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells, it is possible that it was impossible to eliminate all leukemic cells from the body. However, these remaining tumor cells can cause the development of recurrent leukemia. The pharmaceutical agents and methods of the present invention can be used to kill these remaining tumor cells in order to prevent the recurrence of leukemia (arising from undetectable leukemia cells remaining in the body after the initial therapy). Thus, pharmaceutical agents and methods help prevent relapse in adult patients with ALL.
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению введение указанной фармацевтической композиции переводит MRD-позитивный острый лимфобластный лейкоз (ALL) в MRD-негативное состояние.In another preferred embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, administering said pharmaceutical composition converts MRD-positive acute lymphoblastic leukemia (ALL) into an MRD-negative state.
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению MRD определяют с помощью количественного определения отдельных реаранжировок генов иммуноглобулинов или реаранжировок генов Т-клеточных рецепторов (TCR), или транскриптов слияния bcr/abl, или транслокации t(4;11), используя анализ с использованием ПЦР или FACS.In another preferred embodiment of the pharmaceutical methods and means of the present invention, MRDs are determined by quantifying individual rearrangements of immunoglobulin genes or rearrangements of T cell receptor (TCR) genes, or bcr / abl fusion transcripts, or t translocation (4; 11) using analysis using PCR or FACS.
Как показано в следующем примере, введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела особенно подходит для взрослых пациентов с минимальным остаточным заболеванием (MRD). Это с учетом минимального остаточного заболевания (MRD), определяемого по транслокации с образованием филадельфийской хромосомы или транслокации t(4;11), а также MRD, определяемого по реаранжировкам генов иммуноглобулинов или TCR. Фармацевтические способы и средства по настоящему изобретению обеспечивают терапевтический подход к лечению, уменьшению интенсивности или устранению MRD, уменьшая или даже устраняя, тем самым, риск рецидива для взрослого пациента. Примечательно, что до сих пор в наличии еще не было способного к излечению лечения MRD у пациентов с ALL.As shown in the following example, the administration of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody is particularly suitable for adult patients with minimal residual disease (MRD). This is taking into account the minimum residual disease (MRD), determined by translocation with the formation of the Philadelphia chromosome or translocation t (4; 11), as well as MRD, determined by the rearrangement of immunoglobulin or TCR genes. The pharmaceutical methods and means of the present invention provide a therapeutic approach to treating, reducing the intensity or eliminating MRD, thereby reducing or even eliminating, thereby eliminating the risk of relapse for an adult patient. It is noteworthy that, until now, there was no curable MRD treatment in patients with ALL.
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению у указанного пациента демонстрируется сигнал в отношении bcr/abl или сигнал в отношении транслокации t(4;11), превышающий предел выявления, и/или по крайней мере один маркер на реаранжировку с чувствительностью ≥10-4.In another preferred embodiment of the pharmaceutical methods and means of the present invention, said patient exhibits a signal for bcr / abl or a signal for translocation t (4; 11) that exceeds the detection limit and / or at least one marker for rearrangement with sensitivity ≥10 -4 .
Термин «сигнал в отношении bcr/abl или сигнал в отношении транслокации t(4;11), превышающий предел выявления», означает, что анализ с использованием ПЦР или FACS приводит к поддающемуся обнаружению сигналу в отношении bcr/abl или сигналу в отношении транслокации t(4;11).The term “bcr / abl signal or translocation signal t (4; 11) that exceeds the detection limit” means that analysis using PCR or FACS results in a detectable signal for bcr / abl or a signal for translocation t (4; 11).
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению период времени до рецидива на молекулярном уровне (определяемого с помощью описанных выше анализов) составляет больше 4 месяцев.In another preferred embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, the period of time before relapse at the molecular level (determined using the assays described above) is more than 4 months.
Термин «рецидив на молекулярном уровне» означает, что у указанного пациента демонстрируется сигнал в отношении bcr/abl или транслокации t(4;11), превышающий предел выявления, и/или по крайней мере один маркер на реаранжировку с чувствительностью ≥10-4.The term “relapse at the molecular level” means that the indicated patient shows a signal for bcr / abl or translocation t (4; 11) that exceeds the detection limit and / or at least one marker for rearrangement with sensitivity ≥10 -4 .
Термин «с чувствительностью, составляющей ≥10-4», означает, что можно выявить одну или более одной лейкозной клетки среди 10000 клеток, в частности клеток костного мозга.The term “with a sensitivity of ≥10 -4 ” means that one or more of one leukemic cell can be detected among 10,000 cells, in particular bone marrow cells.
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению соответствующие вариабельные области тяжелых цепей (VH) и соответствующие вариабельные области легких цепей (VL) в указанной конструкции CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела располагаются, от N-конца к C-концу, в следующем порядке VL(CD19)-VH(CD19)-VH(CD3)-VL(CD3).In another preferred embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, the corresponding variable regions of the heavy chains (V H ) and the corresponding variable regions of the light chains (V L ) in the indicated construction of the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody are located, from the N-terminus to C- end, in the following order, V L (CD19) -V H (CD19) -V H (CD3) -V L (CD3).
Соответствующие вариабельные области тяжелых цепей (VH) и соответствующие вариабельные области легких цепей (VL) связывающих CD3 и CD19 доменов CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела представлены в SEQ ID NO: 3-10 соответственно. Соответствующие CDR-участки соответствующих VH- и VL-областей указанного CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела представлены в SEQ ID NO: 11-22.The corresponding variable regions of the heavy chains (V H ) and the corresponding variable regions of the light chains (V L ) of the binding CD3 and CD19 domains of the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody are presented in SEQ ID NO: 3-10, respectively. The corresponding CDR regions of the corresponding VH and VL regions of the indicated CD19 × CD3 bispecific single chain antibody are presented in SEQ ID NO: 11-22.
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению указанная конструкция CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела включает аминокислотную последовательность, отраженную в SEQ ID NO: 1, или аминокислотную последовательность, идентичную SEQ ID NO: 1 на по крайней мере 90%, предпочтительно на по крайней мере 95%.In another preferred embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, said CD19 × CD3 bispecific single chain antibody construct comprises at least 90% the amino acid sequence reflected in SEQ ID NO: 1 or the amino acid sequence identical to SEQ ID NO: 1, preferably at least 95%.
В настоящем изобретении описывается молекула биспецифического одноцепочечного антитела, включающая аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 1, а также аминокислотную последовательность, идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1 на по крайней мере 90% или предпочтительно 95%, наиболее предпочтительно на по крайней мере 96, 97, 98 или 99%. В настоящем изобретении также описывается соответствующая последовательность нуклеиновой кислоты, показанная в SEQ ID NO: 2, а также последовательность нуклеиновой кислоты, идентичная последовательности нуклеиновой кислоты, показанной в SEQ ID NO: 2, на по крайней мере 90%, предпочтительно 95%, наиболее предпочтительно на по крайней мере 96, 97, 98 или 99%. Следует принять к сведению, что идентичность последовательности определяют по всей нуклеотидной или аминокислотной последовательности. Кроме того, следует принять к сведению, что молекула биспецифического одноцепочечного антитела, включающая аминокислотную последовательность, идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1 на по крайней мере 90% или предпочтительно 95%, наиболее предпочтительно на по крайней мере 96, 97, 98 или 99%, содержит все из последовательностей CDR, показанных в SEQ ID NO: 11-22. Для совмещения последовательностей можно использовать, например, программы Gap или BestFit (Needleman and Wunsch J. Mol. Biol. 48 (1970), 443-453; Smith and Waterman, Adv. Appl. Math 2 (1981), 482-489), которые содержатся в пакете программ GCG (Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wisconsin, USA 53711 (1991). Такое совмещение является обычным для квалифицированных в данной области техники специалистов способом определения и идентификации нуклеотидной или аминокислотной последовательности, идентичной нуклеотидной или аминокислотной последовательности CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, описываемого в настоящем описании, например, на 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%. Например, в соответствии с гипотезой неоднозначного соответствия Крика 5' основание в антикодоне не является настолько пространственно ограниченным, как другие два основания и могло бы, следовательно, иметь нестандартное спаривание оснований. Иначе говоря, третье положение в триплете может отличаться, так что два триплета, которые отличаются по этому третьему положению, могут кодировать один и тот же аминокислотный остаток. Указанная гипотеза хорошо известна квалифицированному в данной области техники специалисту (смотри, например, http://en.wikipedia.org/wiki/Wobble_Hypothesis; Crick, J. Mol. Biol. 19 (1966): 548-555).The present invention describes a bispecific single chain antibody molecule comprising the amino acid sequence shown in SEQ ID NO: 1, as well as an amino acid sequence identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 by at least 90% or preferably 95%, most preferably at least at least 96, 97, 98 or 99%. The present invention also describes the corresponding nucleic acid sequence shown in SEQ ID NO: 2, as well as a nucleic acid sequence identical to the nucleic acid sequence shown in SEQ ID NO: 2, at least 90%, preferably 95%, most preferably at least 96, 97, 98, or 99%. It should be noted that sequence identity is determined throughout the nucleotide or amino acid sequence. In addition, it should be noted that a bispecific single chain antibody molecule comprising an amino acid sequence identical to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 is at least 90% or preferably 95%, most preferably at least 96, 97, 98 or 99 % contains all of the CDR sequences shown in SEQ ID NO: 11-22. For sequence matching, for example, Gap or BestFit programs can be used (Needleman and Wunsch J. Mol. Biol. 48 (1970), 443-453; Smith and Waterman, Adv. Appl. Math 2 (1981), 482-489), contained in the GCG software package (Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wisconsin, USA 53711 (1991). This combination is common for those skilled in the art to determine and identify a nucleotide or amino acid sequence identical to the nucleotide or amino acid sequence CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, describing in the present description, for example, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% or 99%. For example, in accordance with the hypothesis of ambiguous correspondence of Scream 5 ', the base in the anticodon is not as spatially limited as the other two bases and could therefore have non-standard base pairing, in other words, the third position in the triplet may be different, so two triplets that differ in this third position can encode the same amino acid residue. This hypothesis is well known to those skilled in the art (see, for example, http://en.wikipedia.org/wiki/Wobble_Hypothesis; Crick, J. Mol. Biol. 19 (1966): 548-555).
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению один цикл лечения представляет собой непрерывную инфузию в течение 4 недель с последующими повторными циклами после 2-недельного промежутка времени без лечения или с последующей трансплантацией аллогенных гемопоэтических стволовых клеток.In another preferred embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, one treatment cycle is a continuous infusion for 4 weeks, followed by repeated cycles after a 2-week period without treatment or followed by transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells.
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению цикл лечения повторяют по крайней мере три раза, предпочтительно четыре, пять, шесть, семь или даже вплоть до десяти раз, после определения MRD-негативного состояния (консолидации).In another preferred embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, the treatment cycle is repeated at least three times, preferably four, five, six, seven, or even up to ten times, after determining the MRD negative state (consolidation).
В другом предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению конструкция биспецифического одноцепочечного антитела должна вводиться в суточной дозе, составляющей от 10 мкг до 100 мкг на каждый квадратный метр площади поверхности тела пациента.In another preferred embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, the bispecific single chain antibody construct is to be administered in a daily dose of 10 μg to 100 μg per square meter of patient surface area.
В настоящем описании диапазон доз, который определяется «от X до Y», приравнен к диапазону доз, который определяется «между X и Y». Диапазон включают верхний предел, а также нижний предел. Это означает, что, например, суточная доза, составляющая от 10 мкг до 100 мкг на каждый квадратный метр площади поверхности тела пациента, включает «10 мкг» и «100 мкг».As used herein, a dose range that is defined as “X to Y” is equivalent to a dose range that is defined as “between X and Y”. The range includes an upper limit as well as a lower limit. This means that, for example, a daily dose of 10 μg to 100 μg per square meter of patient’s body surface area includes “10 μg” and “100 μg”.
В даже более предпочтительном варианте осуществления фармацевтических способов и средств по настоящему изобретению конструкция CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела должна вводиться в суточной дозе, составляющей 15 мкг, 30 мкг, 60 мкг или 90 мкг на каждый квадратный метр площади поверхности тела пациента. Даже более предпочтительно, указанное антитело должно вводиться в суточной дозе, составляющей от 15 мкг до 30 мкг на каждый квадратный метр площади поверхности тела пациента, наиболее предпочтительно - в суточной дозе, составляющей от 15 мкг до 30 мкг на каждый квадратный метр площади поверхности тела пациента.In an even more preferred embodiment of the pharmaceutical methods and agents of the present invention, a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody construct should be administered at a daily dose of 15 μg, 30 μg, 60 μg or 90 μg per square meter of patient surface area. Even more preferably, said antibody should be administered in a daily dose of 15 μg to 30 μg per square meter of patient surface area, most preferably in a daily dose of 15 μg to 30 μg per square meter of patient surface area .
Средняя площадь поверхности тела взрослого пациента, как рассчитано, таким образом, применительно к фармацевтическому способу или применению в соответствии с настоящим изобретением, находится в диапазоне от приблизительно 1,7 до 2,2 м2.The average body surface area of an adult patient, as calculated, therefore, in relation to the pharmaceutical method or use in accordance with the present invention, is in the range from about 1.7 to 2.2 m 2 .
Предпочтительно фармацевтическая композиция, включающая CD19×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело, описываемое в настоящем описании, кроме того, включает необязательно рабочий буферный раствор(ы), предназначенные для хранения растворы (исходные растворы) и/или остальные реагенты и материалы, необходимые для изложенного способа или применения. Кроме того, указанные компоненты могут быть упакованы по отдельности во флаконы или бутылочки или в комбинации в контейнеры или многоконтейнерные блоки.Preferably, the pharmaceutical composition comprising the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody described herein further comprises optionally working buffer solution (s), storage solutions (stock solutions) and / or other reagents and materials necessary for the method described above or application. In addition, these components can be packaged individually in bottles or bottles, or in combination in containers or multi-container units.
Для того чтобы оценить безопасность и переносимость CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, описываемого в настоящем описании, соединение должно вводиться с помощью длительной непрерывной инфузии.In order to evaluate the safety and tolerability of the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody described herein, the compound must be administered by continuous continuous infusion.
Было установлено, что положительные и неожиданные эффекты фармацевтических средств и способов по настоящему изобретению можно достичь посредством введения CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела в суточной дозе, составляющей от 10 мкг до 100 мкг на каждый квадратный метр площади поверхности тела. Суточная доза может оставаться постоянной в течение периода введения. Однако в границах этого варианта осуществления также находится то, что в течение начального дня (дней) инфузионного периода вводится более низкая доза биспецифического одноцепочечного антитела («начальная доза») перед выполнением описываемых в настоящем описании фармацевтических способов, тогда как в течение остального инфузионного периода применяется более высокая доза («поддерживающая доза»). Например, можно вводить 5 микрограмм биспецифического одноцепочечного антитела на каждый квадратный метр площади поверхности тела в первый день (дни) инфузионного периода с последующим введением 15 микрограмм на каждый квадратный метр площади поверхности тела в качестве суточной дозы в течение остального периода лечения. Или 15 микрограмм биспецифического одноцепочечного антитела на каждый квадратный метр площади поверхности тела можно вводить в первый день (дни) инфузионного периода с последующим введением 30 или 45 микрограмм на каждый квадратный метр площади поверхности тела в качестве суточной дозы в течение остального периода лечения. Начальная доза может вводиться в течение одного, двух или более дней или даже в течение одной недели (семи дней). Также предусматривается, что можно вводить 5 микрограмм биспецифического одноцепочечного антитела на каждый квадратный метр площади поверхности тела в первый день (дни) инфузионного периода с последующим введением 15 микрограмм биспецифического одноцепочечного антитела на каждый квадратный метр площади поверхности тела в течение последующего дня (дней) инфузионного периода, а затем вводить 45 микрограмм на каждый квадратный метр площади поверхности тела в качестве суточной (поддерживающей) дозы в течение остального периода лечения. Средняя площадь поверхности тела взрослого пациента, как рассчитано, таким образом, применительно к фармацевтическим способам или применениям в соответствии с настоящим изобретением, находится в диапазоне от 1,7 до 2,2 м2.It has been found that the positive and unexpected effects of the pharmaceutical agents and methods of the present invention can be achieved by administering a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody in a daily dose of 10 μg to 100 μg per square meter of body surface area. The daily dose may remain constant during the administration period. However, it is also within the scope of this embodiment that a lower dose of a bispecific single chain antibody (“initial dose”) is administered during the initial day (s) of the infusion period before performing the pharmaceutical methods described herein, while during the rest of the infusion period, higher dose ("maintenance dose"). For example, you can enter 5 micrograms of a bispecific single chain antibody per square meter of body surface area on the first day (s) of the infusion period, followed by 15 micrograms per square meter of body surface area as a daily dose for the rest of the treatment period. Or, 15 micrograms of a bispecific single chain antibody per square meter of body surface area can be administered on the first day (s) of the infusion period, followed by 30 or 45 micrograms per square meter of body surface area as a daily dose for the rest of the treatment period. The initial dose may be administered within one, two or more days, or even within one week (seven days). It is also contemplated that 5 micrograms of a bispecific single chain antibody per square meter of body surface area can be administered on the first day (s) of the infusion period, followed by the administration of 15 micrograms of a bispecific single chain antibody per square meter of body surface area for the next day (days) of the infusion period and then inject 45 micrograms per square meter of body surface area as a daily (maintenance) dose for the rest of the treatment period. The average body surface area of an adult patient, as calculated, therefore, in relation to pharmaceutical methods or applications in accordance with the present invention, is in the range from 1.7 to 2.2 m 2 .
В другом варианте осуществления способов и применений по настоящему изобретению дозу увеличивают после первого или дальнейших циклов лечения, например, с 15 до 30 или 60 или даже 90 микрограмм/м2/24 ч.In another embodiment, the methods and uses of the present invention the dosage is increased after the first or further treatment cycles, for example, from 15 to 30 or even 60 or 90 micrograms / m 2/24 hours.
Непрерываемое введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела может быть внутривенным, парентеральным, подкожным, чрескожным, внутрибрюшинным, внутримышечным или легочным. В большинстве случаев внутривенный способ введения будет предпочтительным способом для непрерываемого введения CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела и, в зависимости от обстоятельств, для совместного введения фармацевтического средства в виде части схемы котерапии. Как таковое, внутривенное введение является особенно предпочтительным. В этом случае может быть преимущественно выбрано подходящее дозирующего устройство, такое как предназначенный для множества терапий инфузионный нанос модели 6060, производимый Baxter. Какое бы дозирующее устройство не было выбрано, оно должно иметь такой дизайн или конструкцию, которая минимизируют или, лучше, исключает остановку введения терапевтического средства в случае замены резервуара и/или замены или перезарядки элемента питания. Это можно осуществить, например, посредством выбора устройства со вторым резервуаром раствора CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, помимо резервуара, который заменяют, так что непрерывная инфузия из этого второго резервуара пациенту может продолжаться даже в то время, когда пустой или почти пустой резервуар удаляют и замещают новым резервуаром.The continuous administration of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody can be intravenous, parenteral, subcutaneous, transdermal, intraperitoneal, intramuscular or pulmonary. In most cases, an intravenous route of administration will be the preferred method for continuous administration of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody and, as the case may be, for co-administration of a pharmaceutical agent as part of a co-therapy regimen. As such, intravenous administration is particularly preferred. In this case, a suitable dispensing device, such as the 6060 Model 6060 infusion dispenser manufactured by Baxter, can advantageously be selected. Whichever metering device is chosen, it should be of such a design or construction that minimizes or, better, eliminates the stoppage of the introduction of a therapeutic agent in the event of a replacement of the reservoir and / or replacement or recharging of the battery. This can be done, for example, by selecting a device with a second reservoir of a solution of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, in addition to the reservoir that is being replaced, so that continuous infusion from this second reservoir to the patient can continue even when the empty or almost empty reservoir is removed and replaced with a new tank.
Способ внутривенного введения и, в зависимости от обстоятельств, совместного введения в виде части схемы котерапии включает имплантацию насоса в тело пациента для дозирования такого введения. Специалист со средним уровнем компетентности в данной области техники знает о таких дозирующих насосах, например, модели 6060, производимой Baxter, как изложено выше.The method of intravenous administration and, as the case may be, co-administration as part of a co-therapy regimen involves the implantation of a pump into the patient's body to dose such administration. One of ordinary skill in the art will be aware of such metering pumps, such as the 6060 model manufactured by Baxter, as described above.
В качестве неограничивающего примера, не исключено, что непрерываемое, т.е. непрерывное введение должно быть осуществлено с помощью небольшой насосной системы, которую носит пациент или которая ему имплантирована для дозирования поступления терапевтического средства в организм пациента. Такие насосные системы в общем известны в данной области техники и обычно основываются на периодической замене резервуаров, содержащих терапевтическое средство, вводимое с помощью инфузии. При замене резервуара в такой насосной системе может следовать временное прерывание непрерываемого в других отношениях поступления терапевтического средства в организм пациента. В таком случае все еще можно было бы считать в значении фармацевтических средств и способов по настоящему изобретению, что этап введения до замены резервуара и этап введения после замены резервуара составляют вместе «непрерываемое введение» такого терапевтического средства. То же самое можно было бы применить к очень длительным введениям, при которых могла бы потребоваться замена резервуара более одного раза, или при которых могла бы потребоваться замена элементов питания, приводящих в действие насос, вызывая временное прекращение поступления терапевтического раствора в организм пациента.As a non-limiting example, it is possible that uninterrupted, i.e. continuous administration should be carried out using a small pumping system that the patient wears or which is implanted to dose the therapeutic agent into the patient. Such pumping systems are generally known in the art and are usually based on the periodic replacement of reservoirs containing a therapeutic agent administered by infusion. When replacing the reservoir in such a pumping system, a temporary interruption of the otherwise continuous flow of the therapeutic agent into the patient's body may follow. In such a case, it could still be considered, within the meaning of the pharmaceutical agents and methods of the present invention, that the administration step before replacing the reservoir and the administering step after replacing the reservoir together constitute the “continuous administration” of such a therapeutic agent. The same could be applied to very long administrations, in which the reservoir could have to be replaced more than once, or in which the batteries used to drive the pump could need to be replaced, causing the patient to temporarily stop receiving the therapeutic solution.
Должны быть приняты соответствующие меры для минимизации риска инфицирования в месте введения - прокола в теле пациента, поскольку такие существующие в течение длительного периода раны особенно подвержены такому инфицированию. Вышесказанное также распространяется на внутримышечное введение посредством схожей системы доставки.Appropriate measures should be taken to minimize the risk of infection at the injection site - a puncture in the patient's body, since such wounds existing over a long period of time are especially susceptible to such infection. The foregoing also applies to intramuscular administration through a similar delivery system.
Непрерывное введение может быть чрескожным посредством пластыря, который находится на коже и заменяется время от времени. Квалифицированному в данной области техники специалисту известны пластырные системы для доставки лекарственных средств, подходящие для этой цели. Примечательно, что чрескожное введение особенно соответствует непрерываемому введению, поскольку замену первого истощенного пластыря можно преимущественно осуществить одновременно с размещением нового, второго пластыря, например на участке поверхности кожи, непосредственно примыкающем к первому истощенному пластырю, и непосредственно перед удалением первого истощенного пластыря. Проблемы, связанные с прерыванием потока или выходом из строя элементов питания, не возникают.Continuous administration can be transdermal by means of a patch that is on the skin and is replaced from time to time. A person skilled in the art knows plaster systems for drug delivery suitable for this purpose. It is noteworthy that transdermal administration is particularly consistent with continuous administration, since the replacement of the first depleted patch can advantageously be carried out simultaneously with the placement of a new, second patch, for example, on a skin surface area immediately adjacent to the first depleted patch and immediately before the removal of the first depleted patch. Problems associated with interruption of the flow or failure of the batteries do not occur.
В дальнейшем предпочтительном варианте осуществления непрерывное введение осуществляют через легочный путь, например, через трубку, находящуюся в одной или обеих ноздрях, которая соединена с находящимся под давлением резервуаром, содержимое которого точно дозируется.In a further preferred embodiment, continuous administration is via the pulmonary route, for example, through a tube located in one or both nostrils, which is connected to a pressurized reservoir, the contents of which are accurately dosed.
Кроме того, настоящее изобретение относится к конструкции CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела для лечения, уменьшения интенсивности или устранения острого лимфобластного лейкоза (ALL) у взрослых. Настоящее изобретение, кроме того, относится к применению конструкции CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела для приготовления фармацевтической композиции для лечения, уменьшения интенсивности или устранения острого лимфобластного лейкоза (ALL) у взрослых. Предпочтительно указанным острым лимфобластным лейкозом (ALL) является острый лимфобластный лейкоз из клеток В-линии, более предпочтительно острый лимфобластный лейкоз из В-клеток-предшественников.In addition, the present invention relates to the construction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody for treating, reducing the intensity or eliminating acute lymphoblastic leukemia (ALL) in adults. The present invention further relates to the use of the construction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody for the preparation of a pharmaceutical composition for treating, reducing the intensity or eliminating acute lymphoblastic leukemia (ALL) in adults. Preferably, said acute lymphoblastic leukemia (ALL) is acute lymphoblastic leukemia from B-line cells, more preferably acute lymphoblastic leukemia from B-cell progenitors.
В предпочтительном варианте указанных медицинских применений указанный острый лимфобластный лейкоз (ALL) является резистентным к химиотерапии у пациентов, не подходящих для аллогенной HSCT.In a preferred embodiment of these medical applications, said acute lymphoblastic leukemia (ALL) is chemotherapy resistant in patients not suitable for allogeneic HSCT.
В альтернативном варианте указанных медицинских применений за введением конструкции CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела следует аллогенная HSCT, или указанные применения замещают аллогенную HSCT у пациентов, подходящих для аллогенной HSCT.In an alternative embodiment of these medical applications, the administration of the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody construct is followed by allogeneic HSCT, or these applications replace allogeneic HSCT in patients suitable for allogeneic HSCT.
В другом предпочтительном варианте указанных медицинских применений конструкция CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела предназначена для лечения, уменьшения интенсивности или устранения минимального остаточного заболевания (MRD) у пациента с острым лимфобластным лейкозом (ALL). Предпочтительно, когда указанный пациент является MRD-позитивным по показателю минимального остаточного заболевания при полной гематологической ремиссии.In another preferred embodiment of these medical applications, the construction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody is intended to treat, reduce the intensity or eliminate the minimum residual disease (MRD) in a patient with acute lymphoblastic leukemia (ALL). Preferably, when the specified patient is MRD-positive in terms of minimum residual disease with complete hematological remission.
В дальнейшем предпочтительном варианте указанных медицинских применений введение указанного CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела приводит к стабилизации заболевания или переводит MRD-позитивный острый лимфобластный лейкоз (ALL) в MRD-негативное состояние.In a further preferred embodiment of the indicated medical applications, the administration of the indicated CD19xCD3 bispecific single chain antibody will stabilize the disease or translate MRD-positive acute lymphoblastic leukemia (ALL) into an MRD-negative state.
Предпочтительно MRD определяют с помощью количественного определения отдельных реаранжировок генов иммуноглобулинов или реаранжировок генов Т-клеточных рецепторов (TCR), или транскриптов слияния bcr/abl, или транслокаций t(4;11), используя анализ с использованием ПЦР или FACS.Preferably, MRD is determined by quantifying individual rearrangements of immunoglobulin genes or rearrangements of T cell receptor (TCR) genes, or bcr / abl fusion transcripts, or t translocations (4; 11) using PCR or FACS analysis.
Даже предпочтительнее, когда у пациента с ALL демонстрируется сигнал в отношении bcr/abl или транслокации t(4;11), превышающий предел выявления, и/или по крайней мере один маркер на реаранжировку с чувствительностью ≥10-4.It is even more preferable when a patient with ALL shows a signal with respect to bcr / abl or translocation t (4; 11) that exceeds the detection limit and / or at least one rearrangement marker with sensitivity ≥10 -4 .
В другом предпочтительном варианте указанных медицинских применений период времени до рецидива на молекулярном уровне, выявляемого с помощью указанных способов выявления, составляет больше 4 месяцев.In another preferred embodiment of the indicated medical applications, the period of time until the relapse at the molecular level detected by said detection methods is more than 4 months.
В другом предпочтительном варианте указанных медицинских применений соответствующие вариабельные области тяжелых цепей (VH) и соответствующие вариабельные области легких цепей (VL) в указанной конструкции CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела располагаются, от N-конца к C-концу, в следующем порядке VL(CD19)-VH(CD19)-VH(CD3)-VL(CD3).In another preferred embodiment of the indicated medical applications, the corresponding variable regions of the heavy chains (V H ) and the corresponding variable regions of the light chains (V L ) in the indicated construction of the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody are arranged, from the N-terminal to the C-terminal, in the following order V L (CD19) -V H (CD19) -V H (CD3) -V L (CD3).
Предпочтительно, указанная конструкция CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела включает аминокислотную последовательность, отраженную в SEQ ID NO: 1, или аминокислотную последовательность, идентичную SEQ ID NO: 1 на по крайней мере 90%, предпочтительно 95%.Preferably, said CD19 × CD3 bispecific single chain antibody construct comprises an amino acid sequence reflected in SEQ ID NO: 1 or an amino acid sequence identical to SEQ ID NO: 1 by at least 90%, preferably 95%.
В дальнейшем предпочтительном варианте указанных медицинских применений одним циклом лечения является непрерывная инфузия в течение 4 недель с последующими повторными циклами после 2-недельного промежутка времени без лечения.In a further preferred embodiment of these medical applications, one treatment cycle is continuous infusion for 4 weeks, followed by repeated cycles after a 2-week period of time without treatment.
Предпочтительно, когда цикл лечения повторяют по крайней мере три раза после определения MRD-негативного состояния (консолидации).Preferably, when the treatment cycle is repeated at least three times after determining the MRD-negative state (consolidation).
В другом предпочтительном варианте указанных медицинских применений конструкция CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела должна вводиться в суточной дозе, составляющей от 10 мкг до 100 мкг на каждый квадратный метр площади поверхности тела пациента.In another preferred embodiment of these medical applications, a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody construct should be administered in a daily dose of 10 μg to 100 μg per square meter of patient surface area.
Предпочтительно, когда конструкция CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела должна вводиться в суточной дозе, составляющей от 15 мкг до 30 мкг на каждый квадратный метр площади поверхности тела пациента.Preferably, when the design of the CD19 × CD3-bespecifically single-chain antibodies should be introduced in a daily dose of 15 μg to 30 μg per square meter of patient’s body surface area.
Определения и объяснения, предоставленные по отношению к фармацевтическим способам и средствам по настоящему изобретению, применимы с необходимыми поправками к медицинским применениям конструкции CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, описываемой в настоящем описании.The definitions and explanations provided in relation to the pharmaceutical methods and means of the present invention are applicable, with necessary amendments, to medical applications of the construction of the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody described herein.
На чертежах редставлены:The drawings are presented:
Фиг.1. Механизм действия CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела. CD19×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело (блинатумомаб или MT103) перенацеливает CD3-позитивные цитотоксические T-клетки на элиминацию клеток острого лимфобластного лейкоза человека, несущих антиген CD19.Figure 1. The mechanism of action of CD19 × CD3 bispecific single chain antibodies. CD19 × CD3 bispecific single chain antibody (Blinatumomab or MT103) redirects CD3 positive cytotoxic T cells to eliminate human acute lymphoblastic leukemia cells carrying the CD19 antigen.
Фиг.2. Пример течения минимального остаточного заболевания (MRD). Основанное на ПЦР определение реаранжировки генов TCR (MRD) у пациента 109-002 с общим В-клеточным ALL (cALL) доказывает MRD-позитивность до лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом и сохраняющуюся MRD-негативность после 1-го цикла лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом.Figure 2. An example of a course of minimal residual disease (MRD). PCR-based determination of TCR gene rearrangement (MRD) in patient 109-002 with total B-cell ALL (cALL) proves MRD positivity before treatment with CD19 × CD3 bispecific single chain antibody and persistent MRD negativity after the 1st treatment cycle of CD19 × CD3 bispecific single chain antibody.
Фиг.3. Динамика CD4 и CD8 Т-клеток пациента 109-002 во время цикла 1 лечения. Репрезентативный пример фармакодинамики, демонстрирующий быстрое перераспределение Т-клеток и увеличение, в основном, числа цитотоксических CD8 Т-клеток.Figure 3. The dynamics of CD4 and CD8 T cells of the patient 109-002 during
Фиг.4. Динамика субпопуляций Т-клеток пациента 109-002 во время цикла 1 лечения. Репрезентативный пример фармакодинамики, демонстрирующий быстрое перераспределение Т-клеток и размножение клеток памяти - Т-эффекторов (ТЕМ). Необученные Т-клетки не размножаются.Figure 4. The dynamics of the T-cell subpopulations of patient 109-002 during
Фиг.5. Первые четыре пациента, включенные в исследование фазы II. Всем пациентам ранее назначали стандартные схемы химиотерапии для ALL в соответствии с протоколами GMALL, включающими по крайней мере одно лечение для консолидации.Figure 5. The first four patients included in the phase II study. All patients had previously been prescribed standard chemotherapy regimens for ALL according to GMALL protocols, including at least one treatment for consolidation.
Фиг.6. Ответные реакции минимальных остаточных заболеваний (MRD) у указанных пациентов с ALL (т.е. первых четырех пациентов, включенных в исследование фазы II) после первого цикла лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом.6. Minimum residual disease (MRD) responses in these patients with ALL (i.e., the first four patients included in the phase II study) after the first cycle of treatment with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody.
Фиг.7. Откорректированные на текущий момент данные по ответным реакциям минимальных остаточных заболеваний (MRD). MRD-негативность могла быть достигнута у девяти из одиннадцати пациентов с реаранжировками генов иммуноглобулинов или TCR, у одного из двух пациентов с транслокациями t(4; 11) и у трех из четырех пациентов с транскриптами bcr/abl. В итоге, 13 из 16 поддающихся оценке пациентов (81%) стали MRD-негативными.7. Currently adjusted minimum residual disease (MRD) response data. MRD negativity could be achieved in nine of eleven patients with rearrangements of immunoglobulin or TCR genes, in one of two patients with t translocations (4; 11), and in three of four patients with bcr / abl transcripts. As a result, 13 of 16 measurable patients (81%) became MRD-negative.
Фиг.8. Период MRD-негативности (состояние на 25.05.2009). Наибольший период MRD-негативности, наблюдаемый до сих пор у пациента 108-001, не подвергнутого трансплантации после лечения антителом, составляет 41 недель. Пациент 111-001, который был MRD-негативным с 23.06.2008 по 27.10.2008 после лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом и которому осуществлена успешная трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток после этого, не перенес рецидив до сих пор. Стрелка означает, что ответная реакция все еще сохраняется (состояние на май 25, 2009). Пациент 109-002 (*) перенес тестикулярный рецидив с последующим гематологическим рецидивом после 19 недель MRD-негативности.Fig. 8. The period of MRD-negativity (state as of May 25, 2009). The longest period of MRD negativity observed so far in patient 108-001, not transplanted after treatment with antibody, is 41 weeks. Patient 111-001, who was MRD-negative from 06/23/2008 to 10/27/2008 after treatment with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody and who successfully transplanted allogeneic hematopoietic stem cells thereafter, has not suffered a relapse so far. An arrow indicates that the response is still persisting (as of May 25, 2009). Patient 109-002 (*) suffered a testicular relapse followed by hematologic relapse after 19 weeks of MRD negativity.
Настоящее изобретение далее иллюстрируется следующим примером.The present invention is further illustrated by the following example.
ПримерExample
1. Создание, экспрессия и цитотоксическая активность CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела описаны в WO 99/54440. Соответствующие аминокислотная последовательность и последовательность нуклеиновой кислоты CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела указаны в SEQ ID NO: 1 и 2 соответственно. VH- и VL-области CD3-связывающего домена CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела указаны в SEQ ID NO: 7-10 соответственно, тогда как VH- и VL-области CD19-связывающего домена CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела указаны в SEQ ID NO: 3-6 соответственно. Соответствующие CDR-участки представлены в SEQ ID NO: 11-22.1. The creation, expression and cytotoxic activity of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody are described in WO 99/54440. The corresponding amino acid sequence and nucleic acid sequence of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody are indicated in SEQ ID NOs: 1 and 2, respectively. VH and VL regions of the CD3 binding domain of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody are indicated in SEQ ID NOs: 7-10, respectively, while VH and VL regions of the CD19 binding domain of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody are shown in SEQ ID NO: 3-6, respectively. The corresponding CDR plots are presented in SEQ ID NO: 11-22.
2. Проводящееся испытание фазы I на пациентах c рецидивирующей B-клеточной неходжкинской лимфомой (NHL) демонстрирует высокую степень ответных реакций в дозе 60 мкг/м2/день CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела. Продолжительность ответных реакций составляет вплоть до более 12 месяцев (сохраняющихся у нескольких пациентов). Удаление инфильтрирующих костный мозг клеток B-NHL начиналось в дозе 15 мкг/м2/день (Bargou et al., Science 2008).2. The ongoing phase I test in patients with recurrent B-cell non-Hodgkin lymphoma (NHL) shows a high degree of response at a dose of 60 μg / m 2 / day of CD19 × CD3 bispecific single chain antibody. The duration of responses is up to more than 12 months (persisting in several patients). Removal of bone marrow-infiltrating B-NHL cells began at a dose of 15 μg / m 2 / day (Bargou et al., Science 2008).
3. На основе этих результатов исследование увеличения дозы фазы II было спланировано совместно с German Multicenter Study Group on Adult Acute Lymphoblastic Leukemia (GMALL) для исследования эффективности, безопасности и переносимости CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела у взрослых пациентов с острым лимфобластным лейкозом (ALL) (не подвергнутых трансплантации), которые достигли полной гематологической ремиссии, но все еще оставались MRD-позитивными. MRD является независимым прогностическим фактором, который отражает резистентность к первоначальному лекарственному средсту(ам) и имеет связь с высоким риском рецидива после начала консолидации. Это распространяется на Ph+/BCR-ABL-позитивный и -негативный ALL. MRD определяли с помощью стандартных способов посредством либо количественного определения отдельных реаранжировок генов иммуноглобулинов или Т-клеточных рецепторов (TCR), или определения транскриптов слияния bcr/abl или транслокаций t(4;11). Исследуемая популяция включает взрослых пациентов с острым лимфобластным лейкозом (ALL) из В-клеток-предшественников, которые демонстрируют сигнал в отношении bcr/abl или t(4;11), превышающий предел выявления, и/или по крайней мере один маркер на реаранжировку с чувствительностью ≥10-4. Конкретнее, основные критерии включения включали:3. Based on these results, a phase II dose increase study was planned in conjunction with the German Multicenter Study Group on Adult Acute Lymphoblastic Leukemia (GMALL) to study the efficacy, safety and tolerability of CD19 × CD3 bispecific single chain antibodies in adult patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL ) (not transplanted) that achieved complete hematologic remission but still remained MRD-positive. MRD is an independent prognostic factor that reflects resistance to the original drug (s) and is associated with a high risk of relapse after the onset of consolidation. This applies to Ph + / BCR-ABL-positive and -negative ALL. MRD was determined using standard methods, either by quantifying individual rearrangements of immunoglobulin genes or T cell receptors (TCR), or by detecting bcr / abl fusion transcripts or t translocations (4; 11). The study population includes adult patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) from precursor B cells that show a signal for bcr / abl or t (4; 11) that exceeds the detection limit and / or at least one marker for rearrangement with sensitivity ≥10 -4 . More specifically, the main inclusion criteria included:
- Пациенты с ALL из В-клеток-предшественников в полной гематологической ремиссии с нарушением или рецидивом на молекулярном уровне, начинающимся в любой момент времени после консолидации 1 от терапии первой линии в стандартных протоколах.- Patients with ALL from precursor B cells in complete hematological remission with impaired or relapse at the molecular level starting at any time after
- Пациенты должны иметь молекулярный маркер для оценки минимального остаточного заболевания, который является либо bcr/abl или транслокацией t(4;11) на любом уровне выявления, либо отдельными реаранжировками генов иммуноглобулинов или TCR, определенными с помощью анализа с чувствительностью как минимум 10-4 и количественными пределами до 10-4 для по крайней мере одного маркера.- Patients should have a molecular marker to assess the minimum residual disease, which is either bcr / abl or translocation t (4; 11) at any detection level, or separate rearrangements of immunoglobulin or TCR genes determined by analysis with a sensitivity of at least 10 -4 and quantitative limits up to 10 -4 for at least one marker.
Первоначальным ожидаемым результатом (проводящего) исследования фазы II является степень перевода в негативное по показателю минимального остаточного заболевания (MRD) состояние, определяемое по сигналу в отношении bcr/abl или транслокации t(4;11), который ниже предела выявления, и/или по выявлению отдельных реаранжировок генов иммуноглобулинов или Т-клеточных рецепторов (TCR) на уровне, который ниже 10-4. Вторичными ожидаемыми результатами являются период времени до гематологического рецидива, период времени до прогрессирования MRD и период времени до рецидива на молекулярном уровне. Одним циклом лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом является 4-недельная непрерывная внутривенная инфузия, за которой может следовать трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток после первого цикла или дальнейших циклов или повторные циклы после 2-недельного промежутка времени без лечения. Состояние минимального остаточного заболевания (MRD) контролируется после каждого цикла лечения. Начальный уровень дозы составляет 15 микрограмм/м2/24 ч, но он может быть повышен до 30 микрограмм/м2/24 ч и более высоких уровней дозы (60 микрограмм/м2/24 ч или 90 микрограмм/м2/24 ч), исходя из клинической активности и касающихся безопасности данных. Для статистического расчета используется MinMax двухэтапный расчет Саймона (14 из 21 пациента).The initial expected result of a (conducting) Phase II study is the degree of transition to a negative state according to the indicator of minimum residual disease (MRD), determined by a signal with respect to bcr / abl or translocation t (4; 11), which is below the detection limit, and / or the identification of individual gene rearrangements of immunoglobulins or T-cell receptors (TCR) at a level that is below 10 -4 . Secondary expected results are the period of time before hematologic relapse, the period of time before the progression of MRD, and the period of time before relapse at the molecular level. One treatment cycle for a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody is a 4-week continuous intravenous infusion, followed by transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells after the first cycle or further cycles, or repeated cycles after a 2-week period without treatment. The state of minimum residual disease (MRD) is monitored after each treatment cycle. The initial dose level of 15 microgram / m 2/24 hours, but it may be increased up to 30 micrograms / m 2/24 h, and higher dose levels (60 micrograms / m 2/24 hours or 90 micrograms / m 2/24 hours ) based on clinical activity and safety data. For statistical calculation, MinMax uses a two-stage calculation of Simon (14 out of 21 patients).
Далее данные по первым четырем пациентам, включенным в исследование, представлены для примера детальнее. Этим четырем пациентам возрастом 31, 57, 62 и 65 лет был назначен начальный уровень дозы, составляющий 15 микрограмм/м2/24 ч. Как показано на фиг.5, у пациентов с № 111-001, 109-002 и 110-002 был диагностирован общий В-клеточный ALL (cALL), тогда как пациент с № 108-001 является пациентом с пре-В-клеточным ALL. Четырем пациентам ранее назначали стандартные схемы химиотерапии для ALL в соответствии с протоколами GMALL, включающими по крайней мере одно лечение для консолидации. Все из них были резистентными к химиотерапии, что касается минимального остаточного заболевания (MRD). Конкретнее, все пациенты были MRD-позитивными при полной гематологической ремиссии. Пациенты с № 110-002, 108-001 и 109-002 не подходили для трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, тогда как пациент с № 111-0001 подходил для указанной трансплантации.Further, the data on the first four patients included in the study are presented in more detail as an example. These four
Как показано на фиг.6, три из первых 4 пациентов, включенных в исследование, имели минимальное остаточное заболевание (MRD), определенное по реаранжировкам генов иммуноглобулинов или TCR на уровнях, составляющих 10-4 (в случае пациента с № 111-001), 10-3 (в случае пациента с № 108-001) и 10-1 (в случае пациента с № 109-002), а один пациент (пациент с № 110-002) имел MRD, определенное по транскриптам слияния bcr/abl на уровне, составляющем 10-4. Три из 3 пациентов, т.е. пациенты с № 111-001, 108-001 и 109-002, с реаранжировками генов иммуноглобулинов или TCR оказались MRD-негативными после первого цикла лечения, независимо от уровня MRD-позитивности на исходной линии. Пациент с № 111-001, единственный из четырех пациентов, подходящий для трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, подвергся трансплантации после перевода в MRD-негативное состояние в результате лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом.As shown in Fig.6, three of the first 4 patients included in the study had a minimal residual disease (MRD), determined by rearrangements of immunoglobulin or TCR genes at levels of 10 -4 (in the case of a patient with No. 111-001), 10 -3 (in the case of the patient with No. 108-001) and 10 -1 (in the case of the patient with No. 109-002), and one patient (patient with No. 110-002) had an MRD determined by the bcr / abl fusion transcripts on level of 10 -4 . Three out of 3 patients, i.e. patients No. 111-001, 108-001, and 109-002, with rearrangements of immunoglobulin or TCR genes, were MRD negative after the first treatment cycle, regardless of the level of MRD positivity in the baseline. Patient No. 111-001, the only one of four patients suitable for transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells, underwent transplantation after being converted to an MRD negative state as a result of treatment with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody.
На фиг.2 представлен пример течения минимального остаточного заболевания (MRD) у пациента 109-002. Основанное на ПЦР определение реаранжировки генов TCR (MRD) у пациента 109-002 с общим В-клеточным ALL доказывает MRD-позитивность до лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом (блинатумомабом) и MRD-негативность, начинающуюся после 1-ого цикла лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом и продолжающуюся до недели 19. После этого пациент перенес тестикулярный рецидив с последующим гематологическим рецидивом.Figure 2 presents an example of the course of the minimum residual disease (MRD) in a patient 109-002. PCR-based determination of TCR gene rearrangement (MRD) in patient 109-002 with common B-cell ALL proves MRD positivity prior to treatment with CD19 × CD3 bispecific single chain antibody (blinatumomab) and MRD negativity starting after the 1st treatment cycle of CD19 × CD3 bispecific single chain antibody and lasting up to
Другой пациент, имеющий номер 110002, имел устойчивый уровень bcr/abl без признаков гематологического рецидива после начального цикла лечения; смотри фиг.6.Another patient, numbered 110002, had a steady bcr / abl level with no signs of hematologic relapse after the initial treatment cycle; see Fig.6.
Лечение пациентов CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом хорошо переносилось: за исключением лихорадки в первые 3 дня лечения, клинически значимые токсичности не были зарегистрированы.The treatment of patients with CD19 × CD3 bispecific single chain antibody was well tolerated: with the exception of fever in the first 3 days of treatment, clinically significant toxicities were not recorded.
Между тем, на данное число семнадцать взрослых пациентов были подвергнуты лечению, или все еще находятся на лечении, CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом. Все пациенты были резистентными к общепринятой терапии для ALL, включающей химиотерапии, до лечения антителом. До лечения антителом ни одному из них аллогенные гемопоэтические стволовые клетки не трансплантировались. Средний возраст пациентов составлял 48 лет, колеблясь от 20 до 77 лет. Десять пациентов были женщинами, семь пациентов были мужчинами. 14 пациентам был назначен уровень дозы, составляющий 15 микрограмм/м2/24 ч CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, тогда как для трех пациентов доза была повышена с 15 до 30 микрограмм/м2/24 ч после первого или дальнейших циклов лечения: в случае пациента 109-004 повышение дозы осуществляли после второго цикла лечения (с использованием всего трех циклов лечения с последующей трансплантацией аллогенных гемопоэтических стволовых клеток), в случае пациента 109-003 - после третьего цикла лечения (с использованием всего четырех циклов лечения), а в случае пациента 110-002 - после шестого цикла лечения (с использованием всего семи циклов лечения). Одиннадцать из этих пациентов имели минимальное остаточное заболевание (MRD), определенное по реаранжировкам генов иммуноглобулинов или TCR, два пациента имели транслокации t(4;11), а у четырех пациентов выявлены транскрипты слияния bcr/abl.Meanwhile, for this number seventeen adult patients have been treated, or are still being treated, with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody. All patients were resistant to conventional ALL therapy, including chemotherapy, prior to antibody treatment. Prior to antibody treatment, none of them allogeneic hematopoietic stem cells were transplanted. The average age of the patients was 48 years, ranging from 20 to 77 years. Ten patients were women, seven patients were men. 14 patients were assigned dose level is 15 mcg / m 2/24 hours CD19 × CD3-bispecific single chain antibody, whereas three patients the dose was increased from 15 to 30 microgram / m 2/24 hours after the first or further treatment cycles: in the case of patient 109-004, the dose was increased after the second treatment cycle (using only three treatment cycles followed by transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells), in the case of patient 109-003, after the third treatment cycle (using only four treatment cycles), and in the case of patient 110-002, after the sixth treatment cycle (using a total of seven treatment cycles). Eleven of these patients had minimal residual disease (MRD) as determined by rearrangements of immunoglobulin or TCR genes, two patients had t translocations (4; 11), and four patients showed bcr / abl fusion transcripts.
В результате ответ MRD поддавался оценке у 16 из 17 пациентов. Как показано на фиг.7, 13 из 16, поддающихся оценке пациентов стали MRD-негативными, что соответствует удивительной степени полного ответа на молекулярном уровне, составляющей 81%. Конкретнее, MRD-негативность могла быть достигнута у девяти из одиннадцати пациентов с реаранжировками генов иммуноглобулинов или TCR, у одного из двух пациентов с транслокациями t(4;11) и у трех из четырех пациентов с транскриптами bcr/abl. Как показано на фиг.8, наибольший период MRD-негативности, наблюдаемый до сих пор у пациента 108-001, не подвергнутого трансплантации после лечения антителом, составляет 41 недель. Другой пациент, который был MRD-негативным с 23.06.2008 по 27.10.2008 и которому осуществлена успешная трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток после лечения антителом, не перенес рецидив до сих пор, смотри пациент 111-001 на фиг.8. Примечательно, что пациенты с bcr/abl, которых можно было успехом подвергнуть лечению CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом, в предшествующей схеме лечения ALL были резистентными к ингибиторами тирозинкиназы иматинибу и/или дасатинибу или непереносящими их. В частности, один из пациентов с bcr/abl, ответивших на лечение CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом, имел мутацию T315I, которая была резистентной к терапии с использованием ингибиторов тирозинкиназы. Таким образом, введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела теперь впервые обусловливает терапию для резистентных к дасатинибу пациентов, страдающих ALL, с транскриптами bcr/abl. Только три из всего 17 пациентов не стали MRD-негативными. Однако у двух из них могла быть достигнута стабилизация болезни. Только один пациент с исходным стабильным заболеванием перенес гематологический рецидив в третьем цикле лечения. Один пациент не мог быть оценен из-за серьезного побочного эффекта в день 2 исследования.As a result, the MRD response was measurable in 16 of 17 patients. As shown in FIGS. 7, 13 of 16 measurable patients became MRD-negative, corresponding to an amazing degree of complete response at the molecular level of 81%. More specifically, MRD negativity could be achieved in nine of eleven patients with rearrangements of immunoglobulin or TCR genes, in one of two patients with t translocations (4; 11), and in three of four patients with bcr / abl transcripts. As shown in FIG. 8, the longest period of MRD negativity observed so far in patient 108-001 not transplanted after treatment with antibody is 41 weeks. Another patient, who was MRD-negative from 06/23/2008 to 10/27/2008 and who successfully transplanted allogeneic hematopoietic stem cells after treatment with an antibody, has not suffered a relapse so far, see patient 111-001 in Fig. 8. It is noteworthy that patients with bcr / abl, who could be successfully treated with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, in the previous ALL treatment regimen were resistant to imatinib and / or dasatinib tyrosine kinase inhibitors and not tolerating them. In particular, one of the bcr / abl patients who responded to treatment with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody had a T315I mutation that was resistant to therapy with tyrosine kinase inhibitors. Thus, the introduction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody is now the first to provide therapy for dasatinib-resistant ALL patients with bcr / abl transcripts. Only three of the total 17 patients did not become MRD-negative. However, in two of them, stabilization of the disease could be achieved. Only one patient with an initial stable disease suffered a hematologic relapse in the third cycle of treatment. One patient could not be evaluated due to a serious side effect on
В заключение, определенно исключительная степень полного ответа на молекулярном уровне, составляющая 81%, могла быть достигнута у пациентов с ALL из В-клеток-предшественников в результате лечения CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом. Активность указанного антитела можно было зарегистрировать во всех подгруппах пациентов, подвергнутых лечению, в том числе у резистентных к ингибиторам тирозинкиназы (T315I) пациентов с bcr/abl и пациентов с транслокациями t(4;11). Кроме того, при лечении CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом демонстрируется подходящий профиль токсичности, в противоположность общепринятым терапиям для ALL, таким как химиотерапия. Ввиду этого введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, описываемого в настоящем описании, обеспечивает новый и преимущественный вариант лечения острого лимфобластного лейкоза (ALL), особенно в тех случаях, когда ALL является резистентным к общепринятой терапии для ALL, такой как химиотерапия. Кроме того, введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела теперь впервые обусловливает терапию для MRD-позитивного ALL.In conclusion, a definitely exceptional degree of complete response at the molecular level of 81% could be achieved in patients with ALL from precursor B cells as a result of treatment with a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody. The activity of this antibody could be registered in all subgroups of patients treated, including in patients resistant to tyrosine kinase inhibitors (T315I) with bcr / abl and patients with translocations t (4; 11). In addition, when treating a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody, a suitable toxicity profile is demonstrated, as opposed to conventional ALL therapies such as chemotherapy. In view of this, the administration of the CD19 × CD3 bispecific single chain antibody described herein provides a new and advantageous treatment option for acute lymphoblastic leukemia (ALL), especially in cases where ALL is resistant to conventional therapy for ALL, such as chemotherapy. In addition, the introduction of a CD19 × CD3 bispecific single chain antibody is now the first to determine therapy for MRD-positive ALL.
Эти откорректированные на текущий момент результаты показывают, что лечение пациентов с острым лимфобластным лейкозом (ALL) CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом способно перевести позитивный по показателю минимального остаточного заболевания (MRD) острый лимфобластный лейкоз (ALL) в MRD-негативное состояние (как показано в качестве примера на страдающих ALL пациентах с реаранжировками генов иммуноглобулинов или TCR, транскриптами bcr/abl или транслокациями t(4;11), и что это лечение хорошо переносится. Ввиду этого введение CD19×CD3-биспецифического одноцепочечного антитела, описываемого в настоящем описании, обеспечивает альтернативный вариант лечения, в частности острого лимфобластного лейкоза (ALL) у взрослых, особенно ALL, резистентного к общепринятой терапии для ALL, такой как химиотерапия и/или трансплантация гемопоэтических стволовых клеток. Лечение CD19×CD3-биспецифическим одноцепочечным антителом является особенно предпочтительным для лечения MRD-позитивного ALL.These currently corrected results show that treatment of patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) with CD19 × CD3 bispecific single chain antibody can translate acute minimal lymphoblastic leukemia (ALL) positive in terms of minimum residual disease (MRD) into MRD-negative state (as shown as an example, in ALL patients suffering from immunoglobulin or TCR gene rearrangements, bcr / abl transcripts, or t translocations (4; 11), and that this treatment is well tolerated. In view of this, the introduction of CD19 × CD3 bispecific The single chain antibody described herein provides an alternative treatment option, in particular acute lymphoblastic leukemia (ALL) in adults, especially ALL, resistant to conventional therapy for ALL, such as chemotherapy and / or hematopoietic stem cell transplantation. Treatment of CD19 × CD3 A b-specific single chain antibody is particularly preferred for the treatment of MRD-positive ALL.
Claims (21)
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US11232308P | 2008-11-07 | 2008-11-07 | |
US61/112,323 | 2008-11-07 | ||
US18329109P | 2009-06-02 | 2009-06-02 | |
US61/183,291 | 2009-06-02 | ||
PCT/EP2009/007970 WO2010052014A1 (en) | 2008-11-07 | 2009-11-06 | Treatment of acute lymphoblastic leukemia |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2011122819A RU2011122819A (en) | 2012-12-20 |
RU2536940C2 true RU2536940C2 (en) | 2014-12-27 |
Family
ID=41692882
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011122819/10A RU2536940C2 (en) | 2008-11-07 | 2009-11-06 | New treatment of acute lymphoblastic leukaemia |
Country Status (27)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US20130323247A1 (en) |
EP (2) | EP2982696B1 (en) |
JP (2) | JP5647132B2 (en) |
KR (1) | KR101695327B1 (en) |
CN (2) | CN102209728A (en) |
AU (4) | AU2009313040B2 (en) |
BR (1) | BRPI0921482B1 (en) |
CA (1) | CA2742249C (en) |
CY (2) | CY1117033T1 (en) |
DK (2) | DK2982696T3 (en) |
ES (2) | ES2558434T3 (en) |
HK (2) | HK1158668A1 (en) |
HR (2) | HRP20151168T1 (en) |
HU (2) | HUE028175T2 (en) |
IL (1) | IL212652A (en) |
LT (1) | LT2982696T (en) |
ME (2) | ME03480B (en) |
MX (1) | MX2011002927A (en) |
NZ (1) | NZ591311A (en) |
PL (2) | PL2982696T3 (en) |
PT (2) | PT2982696T (en) |
RS (2) | RS58827B1 (en) |
RU (1) | RU2536940C2 (en) |
SI (2) | SI2342227T1 (en) |
SM (1) | SMT201500328B (en) |
WO (1) | WO2010052014A1 (en) |
ZA (1) | ZA201103255B (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2797687C1 (en) * | 2022-04-08 | 2023-06-07 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for the treatment of acute lymphoblastic leukemia from progenitor b-cells with rearrangements in the kmt2a gene in children of the first year of life |
Families Citing this family (38)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007068354A1 (en) * | 2005-12-16 | 2007-06-21 | Micromet Ag | Means and methods for the treatment of tumorous diseases |
ME03480B (en) * | 2008-11-07 | 2020-01-20 | Amgen Res Munich Gmbh | Treatment of acute lymphoblastic leukemia |
DK2493503T4 (en) | 2009-10-27 | 2021-04-12 | Amgen Res Munich Gmbh | DOSAGE PLAN FOR ADMINISTRATION OF A CD19XCD3 BISPECIFIC ANTIBODY |
CN105251003B (en) * | 2010-10-27 | 2019-08-02 | 安进研发(慕尼黑)股份有限公司 | Device and method for treating DLBCL |
KR101891845B1 (en) * | 2010-11-10 | 2018-08-24 | 암젠 리서치 (뮌헨) 게엠베하 | Prevention of adverse effects caused by cd3 specific binding domains |
ES2806142T3 (en) * | 2011-04-28 | 2021-02-16 | Amgen Res Munich Gmbh | Dosage regimen for administering a bispecific CD19xCD3 antibody to patients at risk of possible adverse effects |
EP2710042A2 (en) | 2011-05-16 | 2014-03-26 | Fabion Pharmaceuticals, Inc. | Multi-specific fab fusion proteins and methods of use |
EP3105252B1 (en) * | 2014-02-12 | 2019-07-24 | Michael Uhlin | Bispecific antibodies for use in stem cell transplantation |
US9603927B2 (en) | 2014-02-28 | 2017-03-28 | Janssen Biotech, Inc. | Combination therapies with anti-CD38 antibodies |
US9732154B2 (en) * | 2014-02-28 | 2017-08-15 | Janssen Biotech, Inc. | Anti-CD38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia |
PT3531133T (en) | 2014-05-30 | 2023-11-07 | Amgen Inc | Risk-stratification of b-precursor acute lymphoblastic leukemia patients |
WO2016040294A2 (en) | 2014-09-09 | 2016-03-17 | Janssen Biotech, Inc. | Combination therapies with anti-cd38 antibodies |
NZ732753A (en) | 2014-12-04 | 2024-08-30 | Janssen Biotech Inc | Anti-cd38 antibodies for treatment of acute myeloid leukemia |
US20180021331A1 (en) | 2014-12-30 | 2018-01-25 | University Of Utah Research Foundation | Hdac1,2 inhibitors and methods of using the same |
CN107580603A (en) | 2015-02-24 | 2018-01-12 | 生物蛋白有限公司 | Condition active biological protein |
CA2986254A1 (en) * | 2015-05-18 | 2016-11-24 | TCR2 Therapeutics Inc. | Compositions and methods for tcr reprogramming using fusion proteins |
KR102602754B1 (en) | 2015-05-20 | 2023-11-14 | 얀센 바이오테크 인코포레이티드 | Anti-CD38 antibodies for treating light chain amyloidosis and other CD38-positive hematological malignancies |
EP3298042A1 (en) * | 2015-05-20 | 2018-03-28 | Amgen Research (Munich) GmbH | B-cell depletion as a diagnostic marker |
ES2890783T3 (en) | 2015-06-22 | 2022-01-24 | Janssen Biotech Inc | Combination therapies for hematologic malignancies with anti-CD38 antibodies and survivin inhibitors |
US20170044265A1 (en) | 2015-06-24 | 2017-02-16 | Janssen Biotech, Inc. | Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38 |
CN105154440B (en) * | 2015-08-14 | 2016-11-30 | 深圳市瀚海基因生物科技有限公司 | A kind of multiple PCR primer and method building Minimal Residual Disease of Leukemia stove TCR library based on high-flux sequence |
US10781261B2 (en) | 2015-11-03 | 2020-09-22 | Janssen Biotech, Inc. | Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses |
CN108472369A (en) | 2015-11-03 | 2018-08-31 | 詹森生物科技公司 | The subcutaneous preparations and application thereof of 8 antibody of AntiCD3 McAb |
RU2651776C2 (en) * | 2015-12-01 | 2018-04-23 | Общество с ограниченной ответственностью "Международный биотехнологический центр "Генериум" ("МБЦ "Генериум") | Bispecific antibodies against cd3*cd19 |
GB201602974D0 (en) * | 2016-02-19 | 2016-04-06 | Clube Jasper R | Engineered cells & methods (1) |
US10870701B2 (en) | 2016-03-15 | 2020-12-22 | Generon (Shanghai) Corporation Ltd. | Multispecific fab fusion proteins and use thereof |
WO2018026953A1 (en) | 2016-08-02 | 2018-02-08 | TCR2 Therapeutics Inc. | Compositions and methods for tcr reprogramming using fusion proteins |
KR20190058509A (en) | 2016-10-07 | 2019-05-29 | 티씨알2 테라퓨틱스 인크. | Compositions and methods for T-cell receptor reprogramming using fusion proteins |
CA3044593A1 (en) * | 2016-11-22 | 2018-05-31 | TCR2 Therapeutics Inc. | Compositions and methods for tcr reprogramming using fusion proteins |
MA50514A (en) | 2017-10-31 | 2020-09-09 | Janssen Biotech Inc | HIGH-RISK MULTIPLE MYELOMA TREATMENT METHODS |
SG11202004273YA (en) * | 2017-12-11 | 2020-06-29 | Amgen Inc | Continuous manufacturing process for bispecific antibody products |
KR102083481B1 (en) | 2018-03-22 | 2020-03-02 | 강원대학교산학협력단 | Pharmaceutical composition for acute lymphoblastic leukemia comprising zinc-chitosan nanoparticles |
WO2020132810A1 (en) * | 2018-12-24 | 2020-07-02 | Generon (Shanghai) Corporation Ltd. | Multispecific antigen binding proteins capable of binding cd19 and cd3, and use thereof |
KR20230031981A (en) | 2019-05-14 | 2023-03-07 | 프로벤션 바이오, 인코포레이티드 | Methods and compositions for preventing type 1 diabetes |
WO2021183861A1 (en) | 2020-03-12 | 2021-09-16 | Amgen Inc. | Method for treatment and prophylaxis of crs in patients comprising a combination of bispecifc antibodies binding to cds x cancer cell and tnfalpha or il-6 inhibitor |
MX2022015872A (en) | 2020-06-11 | 2023-05-16 | Provention Bio Inc | Methods and compositions for preventing type 1 diabetes. |
AU2021345124A1 (en) | 2020-09-16 | 2023-03-30 | Amgen Inc. | Methods for administering therapeutic doses of bispecific T-cell engaging molecules for the treatment of cancer |
CA3235228A1 (en) | 2021-10-15 | 2023-04-20 | Amgen Research (Munich) Gmbh | Subcutaneous administration of cd19-binding t cell engagers |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007068354A1 (en) * | 2005-12-16 | 2007-06-21 | Micromet Ag | Means and methods for the treatment of tumorous diseases |
RU2005141512A (en) * | 2003-05-31 | 2007-07-20 | Микромет Аг (De) | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS, INCLUDING BISPECIFIC ANTI-CD3, ANTI-CD19 ANTIBODY STRUCTURES FOR TREATMENT OF B-CELL DISORDERS |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998008875A1 (en) * | 1996-08-28 | 1998-03-05 | Viva Diagnostika Diagnostische Produkte Gmbh | Novel combination preparations and their use in immunodiagnosis and immunotherapy |
BG65066B1 (en) * | 1998-04-21 | 2007-01-31 | Micromet Gessellschaft Fur Biomedicinische Forschung Mbh | CD19xCD3 SPECIFIC POLYPEPTIDES AND USE THEREOF |
NZ507381A (en) | 1998-04-21 | 2003-12-19 | Micromet Ag | CD19xCD3 specific polypeptides and uses thereof |
CA2542239C (en) * | 2003-10-16 | 2014-12-30 | Micromet Ag | Multispecific deimmunized cd3-binders |
CN101331151A (en) * | 2005-12-16 | 2008-12-24 | 麦克罗梅特股份公司 | Means and methods for treating neoplastic diseases |
ES2402591T3 (en) * | 2006-08-14 | 2013-05-07 | Xencor Inc. | Optimized antibodies that target CD19 |
ME03480B (en) * | 2008-11-07 | 2020-01-20 | Amgen Res Munich Gmbh | Treatment of acute lymphoblastic leukemia |
NZ593593A (en) * | 2009-01-19 | 2013-11-29 | Abbvie Inc | Apoptosis-inducing agents for the treatment of cancer and immune and autoimmune diseases |
RU2538965C2 (en) * | 2009-01-19 | 2015-01-10 | Эббви Инк. | Apoptosis inducing agents for treating cancer and immune and autoimmune diseases |
CA2763633A1 (en) * | 2009-05-27 | 2010-12-02 | Gary T. Wang | Pyrimidine inhibitors of kinase activity |
KR20120085781A (en) * | 2009-09-20 | 2012-08-01 | 아보트 러보러터리즈 | Abt-263 crystalline forms and solvates for use in treating bcl-2 protein related diseases |
DK2493503T4 (en) * | 2009-10-27 | 2021-04-12 | Amgen Res Munich Gmbh | DOSAGE PLAN FOR ADMINISTRATION OF A CD19XCD3 BISPECIFIC ANTIBODY |
-
2009
- 2009-11-06 ME MEP-2019-146A patent/ME03480B/en unknown
- 2009-11-06 CA CA2742249A patent/CA2742249C/en active Active
- 2009-11-06 RU RU2011122819/10A patent/RU2536940C2/en active
- 2009-11-06 CN CN2009801443998A patent/CN102209728A/en active Pending
- 2009-11-06 NZ NZ591311A patent/NZ591311A/en unknown
- 2009-11-06 MX MX2011002927A patent/MX2011002927A/en active IP Right Grant
- 2009-11-06 SI SI200931306T patent/SI2342227T1/en unknown
- 2009-11-06 LT LTEP15185767.9T patent/LT2982696T/en unknown
- 2009-11-06 DK DK15185767.9T patent/DK2982696T3/en active
- 2009-11-06 AU AU2009313040A patent/AU2009313040B2/en active Active
- 2009-11-06 HU HUE09760483A patent/HUE028175T2/en unknown
- 2009-11-06 EP EP15185767.9A patent/EP2982696B1/en active Active
- 2009-11-06 PL PL15185767T patent/PL2982696T3/en unknown
- 2009-11-06 RS RS20190593A patent/RS58827B1/en unknown
- 2009-11-06 DK DK09760483.9T patent/DK2342227T3/en active
- 2009-11-06 ME MEP-2015-181A patent/ME02363B/en unknown
- 2009-11-06 PL PL09760483T patent/PL2342227T3/en unknown
- 2009-11-06 EP EP09760483.9A patent/EP2342227B1/en active Active
- 2009-11-06 WO PCT/EP2009/007970 patent/WO2010052014A1/en active Application Filing
- 2009-11-06 BR BRPI0921482-8A patent/BRPI0921482B1/en active IP Right Grant
- 2009-11-06 JP JP2011533633A patent/JP5647132B2/en active Active
- 2009-11-06 CN CN201710366308.1A patent/CN107184977A/en active Pending
- 2009-11-06 US US13/127,541 patent/US20130323247A1/en not_active Abandoned
- 2009-11-06 ES ES09760483.9T patent/ES2558434T3/en active Active
- 2009-11-06 HU HUE15185767A patent/HUE043326T2/en unknown
- 2009-11-06 SI SI200931967T patent/SI2982696T1/en unknown
- 2009-11-06 PT PT15185767T patent/PT2982696T/en unknown
- 2009-11-06 ES ES15185767T patent/ES2727585T3/en active Active
- 2009-11-06 RS RS20150797A patent/RS54456B1/en unknown
- 2009-11-06 PT PT97604839T patent/PT2342227E/en unknown
- 2009-11-06 KR KR1020117010641A patent/KR101695327B1/en active IP Right Grant
-
2011
- 2011-05-03 IL IL212652A patent/IL212652A/en active IP Right Grant
- 2011-05-05 ZA ZA2011/03255A patent/ZA201103255B/en unknown
- 2011-12-07 HK HK11113215.9A patent/HK1158668A1/en unknown
-
2014
- 2014-11-06 JP JP2014226022A patent/JP5955921B2/en active Active
-
2015
- 2015-10-06 AU AU2015238784A patent/AU2015238784A1/en not_active Abandoned
- 2015-11-03 HR HRP20151168TT patent/HRP20151168T1/en unknown
- 2015-12-09 CY CY20151101123T patent/CY1117033T1/en unknown
- 2015-12-30 SM SM201500328T patent/SMT201500328B/en unknown
-
2016
- 2016-07-22 HK HK16108827.4A patent/HK1220705A1/en unknown
-
2017
- 2017-08-25 AU AU2017219083A patent/AU2017219083B2/en active Active
-
2018
- 2018-11-06 AU AU2018260815A patent/AU2018260815B2/en active Active
- 2018-12-13 US US16/218,797 patent/US11597766B2/en active Active
-
2019
- 2019-05-16 HR HRP20190912TT patent/HRP20190912T1/en unknown
- 2019-05-17 CY CY20191100527T patent/CY1122366T1/en unknown
-
2023
- 2023-02-03 US US18/164,304 patent/US20240109964A1/en active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2005141512A (en) * | 2003-05-31 | 2007-07-20 | Микромет Аг (De) | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS, INCLUDING BISPECIFIC ANTI-CD3, ANTI-CD19 ANTIBODY STRUCTURES FOR TREATMENT OF B-CELL DISORDERS |
WO2007068354A1 (en) * | 2005-12-16 | 2007-06-21 | Micromet Ag | Means and methods for the treatment of tumorous diseases |
Non-Patent Citations (1)
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2797687C1 (en) * | 2022-04-08 | 2023-06-07 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for the treatment of acute lymphoblastic leukemia from progenitor b-cells with rearrangements in the kmt2a gene in children of the first year of life |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2536940C2 (en) | New treatment of acute lymphoblastic leukaemia | |
RU2736802C2 (en) | New treatment of acute lymphoblastic leukemia in children | |
CN111479613A (en) | Methods of administering chimeric antigen receptor immunotherapy | |
US20220273722A1 (en) | Anti-egfr/high affinity nk-cells compositions and methods for chordoma treatment | |
CN114206346A (en) | Methods of administering chimeric antigen receptor immunotherapy |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant |