RU2524650C2 - Способ прогнозирования наступления беременности - Google Patents
Способ прогнозирования наступления беременности Download PDFInfo
- Publication number
- RU2524650C2 RU2524650C2 RU2012109534/15A RU2012109534A RU2524650C2 RU 2524650 C2 RU2524650 C2 RU 2524650C2 RU 2012109534/15 A RU2012109534/15 A RU 2012109534/15A RU 2012109534 A RU2012109534 A RU 2012109534A RU 2524650 C2 RU2524650 C2 RU 2524650C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- thrombin
- pregnancy
- nmol
- ivf
- thrombogenic risk
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения высокого тромбогенного риска у беременных при проведении экстракорпорального оплодотворения в плазме крови. Сущность способа: определяют пиковую концентрацию тромбина в тесте генерации тромбина и при его значении свыше 360 нмоль/л беременную относят в группу высокого тромбогенного риска и за 2-3 дня до выполнения пункции фолликулов яичника проводят гепаринотерапию. Способ прост в исполнении, является высокоинформативным и позволяет выявить группу высокого тромбогенного риска, дифференцировать назначение антикоагулянтной терапии у пациенток при проведении ВРТ и найдет широкое применение в практическом здравоохранении, в частности акушерстве и гинекологии. 1 пр., 2 ил.
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторной диагностике, и может быть использовано для повышения частоты наступления беременности у групп высокого тромбогенного риска, нуждающихся в антикоагулянтной терапии в программе вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) при проведении экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).
Одной из актуальных проблем медицины является бесплодный брак, который по своей социальной значимости занимает одно из ведущих мест в современном акушерстве. В связи с этим большое распространение в мире получил метод лечения бесплодия путем ЭКО. При этом эффективность программы ЭКО по частоте наступления беременности остается в мире на уровне 30-40%. Неудачи ЭКО могут быть обусловлены многими факторами, однако к числу наиболее важных причин высокая тромбогенность самой репродуктивной технологии вследствие эстрогенгестагеновой гормональной нагрузки, наличии других (исходных, до ЭКО) факторов тромбогенного риска. В настоящее время нет точных и объективных лабораторных критериев для отбора женщин высокого тромбогенного риска, нуждающихся в гепаринотерапии для улучшения исходов ЭКО по частоте наступления беременности.
Известен способ выбора применения гепарина для профилактики тромботических осложнений (Патент №2408288 от 10.01.2011), который был предложен для снижения тромбогенности по уровню растворимых фибринмономерных комплексов при беременности.
Однако недостатком известного способа является то, что он не позволяет отобрать группу тромбогенного риска при проведении ЭКО.
Наиболее близким по достигаемому техническому результату является способ прогнозирования наступления беременности при проведении ЭКО (прототип), отражающий количество и качество ооцитов путем определения овариального резерва по измерению базального уровня фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), определяемого на 3-4-й день менструального цикла (Серов В.В., Прилепская В.Н., Овсянникова Т.В. Гинекологическая эндокринология. М: Медпресс-информ, 2006. - 528 с.).
Недостатком известного способа является низкая информативность в прогнозировании вероятности наступления беременности при проведении ЭКО.
Авторы предлагают способ определения высокого тромбогенного риска у беременных при проведении ЭКО, позволяющий повысить частоту наступления беременности.
Техническим результатом заявляемого способа является повышение информативности наступления беременности при проведении ЭКО.
Технический результат достигается тем, что определяют пиковую концентрацию тромбина в тесте генерации тромбина и при его значении свыше 360 нмоль/л беременную относят в группу высокого тромбогенного риска и за 2-3 дня до выполнения пункции фолликулов яичника проводят гепаринотерапию.
Способ осуществляют следующим образом
Заявляемый способ проиллюстрирован фигурами 1, 2 в виде таблиц.
На фигуре 1 представлены исходы ЭКО по динамике концентрации пика тромбина.
На фигуре 2 дана оценка результатов ЭКО в зависимости от динамики пика тромбина при лечении фраксипарином.
Кровь берут утром натощак из локтевой вены иглой без шприца (самотеком) и немедленно смешивают с 3,8% раствором цитрата натрия. Стабилизированную кровь до центрифугирования (в том числе и в процессе транспортировки) хранят при комнатной температуре (+18…+25°) не более 1 ч. Исследование крови со сгустками или гемолизом не допускается. Стабилизированную кровь центрифугируют на центрифуге, например «Eppendorf 581R», Германия, при 1000 об/мин (140-160 g) в течение 5-7 мин. Богатую тромбоцитами плазму с помощью пипетки переносят в другую пробирку, в которой ее дополнительно центрифугируют при 3000-4000 об/мин (1200-1400 g) в течение 15 минут, в результате получают бедную тромбоцитами плазму (БТП).
Материал для исследования и реактивы
БТП замораживают при температуре минус 40°-70°C на срок до 1 суток. Размораживают плазму на водяной бане при +37°C, после чего проводят исследование.
Исследование плазмы крови выполняют на планшетном флюориметре Fluoroskan Ascent «ThermoFisher SCIENTIFIC» (Финляндия), оснащенным диспенсером, с программным обеспечением «Thrombinoscope 3.0.0.26». В лунки 96-луночного планшета добавляют 20 мкл тканевого фактора (5 рМ), 20 мкл калибратора тромбина и 80 мкл исследуемой плазмы крови. Затем смесь инкубируют 10 мин. После инкубации смеси при температуре +37°C в лунки вносят 1000 мкл буфера, содержащий ионизированный кальций и флуорогенный субстрат. Образующийся тромбин расщепляет субстрат, в результате чего высвобождается флуорофор. Его излучение автоматически регистрируется через равные промежутки времени, причем интенсивность свечения пропорциональна концентрации образовавшегося тромбина. По данной кривой автоматически расчитывается пик тромбина (пиковая концентрация тромбина, нмоль/л) - максимальная концентрация тромбина в единицу времени.
В среднем, в норме уровень пика тромбина составляет 306,87±6,57 нмоль/л с пределами нормальных колебаний (±2σ) 276,87-336,87 нмоль/л. Апробация заявляемого способа включала в себя 2 этапа. На первом из них у 150 женщин с бесплодием (средний возраст 34,6±0,4 лет) определена динамика тромбогенности по концентрации пика тромбина: перед гормональной стимуляцией в цикле ЭКО, за 2-3 дня до выполнения пункции фолликулов и на 14 день после переноса эмбриона, в день определения наступления беременности по результатам ХГЧ и проанализирована частота наступления беременности (фигура 1). Результаты первого этапа показали, что у 52 женщин при наступлении беременности концентрация пика тромбина была 334,32±4,65, у 98 женщин беременность не наступила, пиковая концентрация тромбина была выше 360 нмоль/л, тогда как в контроле эти показатели не превышали 360 нмоль/л.
На втором этапе была сформирована группа высокого тромбогенного риска, состоящая из 19 женщин (средний возраст 33,1±0,7 лет) в процессе проведения процедуры ЭКО, у которых концентрация пика тромбина за 2-3 дня до пункции фолликулов яичников превышала 360 нмоль/л (фигура 2). Апробация заявляемого способа проведена на этих 19 пациентках, которым в связи с высоким пиком тромбина, более 360 нмоль/л, в течение 12-14 дней (после подсадки эмбриона и до определения наступления беременности по результатам ХГЧ) назначалась тромбопрофилактика лечебными дозами низкомолекулярных гепаринов: фраксипарин по 0,3 мл 2 раза в день подкожно в течение 14 дней. Как видно из фигуры 2, у 7 (36,8%) женщин при лечении лечебными дозами фраксипарина определено снижение пика концентрации тромбина в тесте генерации тромбина и у них наступила беременность по результатам ХГЧ. У 12 (63,1%) женщин снижения концентрации пика тромбина не произошло и беременность по показателям ХГЧ не наступила.
Клинический пример
Пациентка П.Н., 27 лет, обратилась 3.09.2011 г. в центр сохранения и восстановления репродуктивной функции Алтайской краевой клинической больницы по поводу бесплодия (трубного) для прохождения программы экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). У нее имелся регулярный менструальный цикл, противопоказаний к беременностям и родам не выявлено.
Для исследования системы гемостаза применялся тест генерации тромбина. Обследование проводилось в динамике, в образцах плазмы крови, полученных перед началом гормональной стимуляции (исходный фон - 1-й этап), за 2 дня до пункции яйцеклеток (2-й этап) и на 14 день после переноса эмбрионов (3-й этап). Анализы выполнялись на планшетном флюориметре Fluoroskan Ascent «ThermoFisher SCIENTIFIC».
До вхождения в цикл ЭКО (1-й этап) пиковая концентрация тромбина у женщины составила 340,22 нмоль/л (при норме 306,87±6,57 нмоль/л). На втором этапе наблюдений, перед пункцией яйцеклеток, значения пика тромбина оказалось равным 386,62 нмоль/л (при норме 346,32±4,65 нмоль/л).
С учетом полученных данных больной назначен курс лечения фраксипарином по 0,3 мл ×2 раза в день, в течение двух недель. На фоне проводимой гепаринотерапии в конце цикла ЭКО, на 3-м этапе наблюдений, пик тромбина составил 320,20 нмоль/л и соответствовал пределам нормальных колебаний данного показателя, что сопровождалось успешным наступлением беременности.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что при концентрации тромбина свыше 360 нмоль/л (за 2-3 дня до выполнения пункции фолликулов яичника) необходимо назначение гепаринотерапии в лечебных дозах для повышения частоты наступления беременности при проведении экстракорпорального оплодотворения.
Таким образом, заявляемый способ определения высокого тромбогенного риска у беременных при проведении экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) обладает высокой информативностью и может быть использован в акушерстве и гинекологии.
Claims (1)
- Способ определения высокого тромбогенного риска у беременных при проведении экстракорпорального оплодотворения, заключающийся в том, что определяют пиковую концентрацию тромбина в тесте генерации тромбина, и при его значении свыше 360 нмоль/л беременную относят в группу высокого тромбогенного риска и за 2-3 дня до выполнения пункции фолликулов яичника проводят гепаринотерапию.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012109534/15A RU2524650C2 (ru) | 2012-03-13 | 2012-03-13 | Способ прогнозирования наступления беременности |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012109534/15A RU2524650C2 (ru) | 2012-03-13 | 2012-03-13 | Способ прогнозирования наступления беременности |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2012109534A RU2012109534A (ru) | 2013-09-20 |
RU2524650C2 true RU2524650C2 (ru) | 2014-07-27 |
Family
ID=49182947
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012109534/15A RU2524650C2 (ru) | 2012-03-13 | 2012-03-13 | Способ прогнозирования наступления беременности |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2524650C2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2720241C1 (ru) * | 2019-11-17 | 2020-04-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НИИ ОММ" Минздрава России) | Способ прогноза гиперкоагуляционных осложнений гестации после переноса "свежих" эмбрионов в программах ЭКО |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2286580C1 (ru) * | 2005-03-03 | 2006-10-27 | Илья Николаевич Медведев | Способ диагностики начинающихся нарушений агрегационной функции тромбоцитов |
RU2470303C1 (ru) * | 2011-08-03 | 2012-12-20 | Федеральное государственное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГУ "НИИ ОММ" Минздравсоцразвития России) | Способ определения функциональной активности тромбоцитов |
-
2012
- 2012-03-13 RU RU2012109534/15A patent/RU2524650C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2286580C1 (ru) * | 2005-03-03 | 2006-10-27 | Илья Николаевич Медведев | Способ диагностики начинающихся нарушений агрегационной функции тромбоцитов |
RU2470303C1 (ru) * | 2011-08-03 | 2012-12-20 | Федеральное государственное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГУ "НИИ ОММ" Минздравсоцразвития России) | Способ определения функциональной активности тромбоцитов |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
ДАНИЛОВ И.П. и др. Генетические аспекты тромбофилий. "Медицинские новости". Архив. 2010, * |
СЕРОВ В.Н., Прилепская В.Н., Овсянникова Т.В. Гинекологическая эндокринология. М: Медпресс-информ, 2006. - 528 с. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2720241C1 (ru) * | 2019-11-17 | 2020-04-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НИИ ОММ" Минздрава России) | Способ прогноза гиперкоагуляционных осложнений гестации после переноса "свежих" эмбрионов в программах ЭКО |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2012109534A (ru) | 2013-09-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Moreno-Sepulveda et al. | Lower risk of adverse perinatal outcomes in natural versus artificial frozen–thawed embryo transfer cycles: a systematic review and meta-analysis | |
Lee et al. | Interleukin-6, but not relaxin, predicts outcome of rescue cerclage in women with cervical incompetence | |
Farzadi et al. | Evaluation of ovarian reserve after laparoscopic surgery in patients with polycystic ovary syndrome | |
Viganò et al. | Frozen IVF cycles to circumvent the hormonal storm on endometrium | |
Sonigo et al. | Antral follicle responsiveness to FSH, assessed by the follicular output rate (FORT), is altered in Hodgkin’s lymphoma when compared with breast cancer candidates for fertility preservation | |
Gao et al. | Thyroid‐stimulating hormone level is negatively associated with fertilization rate in patients with polycystic ovary syndrome undergoing in vitro fertilization | |
Weiwei et al. | Expressions of adiponectin receptors in placenta and their correlation with preeclampsia | |
Varner et al. | Calcium metabolism in the hypertensive mother, fetus, and newborn infant | |
Wen et al. | [Retracted] Clinical Comparison of Preterm Birth and Spontaneous Preterm Birth in Severe Preeclampsia | |
Bolat et al. | The effect of serum and follicular fluid anti-Mullerian hormone level on the number of oocytes retrieved and rate of fertilization and clinical pregnancy | |
RU2524650C2 (ru) | Способ прогнозирования наступления беременности | |
Hosseini et al. | Controlled ovarian stimulation in endometriosis patients can be individualized by anti-Müllerian hormone levels | |
Toth | Clinical data supporting the importance of vascular LH/hCG receptors of uterine blood vessels | |
Wang et al. | Predictive value of maternal serum NF‐κB p65 and sTREM‐1 for subclinical chorioamnionitis in premature rupture of membranes | |
RU2429478C1 (ru) | Способ прогноза осложнений беременности у пациенток с тромбофилией | |
Benagiano et al. | Endometrial receptivity in PCOS | |
Devranoglu et al. | Coagulation tests at trigger day in patients with Factor V Leiden Mutation to predict implantation failure | |
Zhang et al. | The impact of estradiol on pregnancy outcomes in letrozole-stimulated frozen embryo transfer cycles | |
RU2670450C1 (ru) | Способ прогнозирования успеха имплантации в стандартном длинном протоколе стимуляции суперовуляции | |
Aisien et al. | Umbilical cord venous progesterone at term delivery in relation to mode of delivery | |
Çapkın et al. | Serum and follicular fluid Anti-Mullerian hormone concentrations at the time of follicle puncture and reproductive outcome | |
Khan et al. | Preventive role of low-molecular-weight heparin in unexplained recurrent pregnancy loss | |
Attanasio et al. | Factors VIII and von Willebrand levels in women undergoing Assisted Reproduction: are their levels associated with clinical pregnancy outcome? | |
Erşahin | The comparison of amniotic fluid nuclearfactor-kappa B levels in pregnant women who underwent cesarean section or normal vaginal labor | |
Xie et al. | Evaluation of diagnosis and prognosis with anti-mullerian hormone level in early missed abortion |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140608 |