RU2504018C1 - Способ моделирования состояния индукции функциональной активности гликопротеина-р финастеридом в эксперименте - Google Patents
Способ моделирования состояния индукции функциональной активности гликопротеина-р финастеридом в эксперименте Download PDFInfo
- Publication number
- RU2504018C1 RU2504018C1 RU2012121971/14A RU2012121971A RU2504018C1 RU 2504018 C1 RU2504018 C1 RU 2504018C1 RU 2012121971/14 A RU2012121971/14 A RU 2012121971/14A RU 2012121971 A RU2012121971 A RU 2012121971A RU 2504018 C1 RU2504018 C1 RU 2504018C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- finasteride
- glycoprotein
- induction
- functional activity
- pgp
- Prior art date
Links
Landscapes
- Steroid Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к экспериментальной медицине и фармакологии и предназначено для изучения принадлежности изучаемых лекарственных препаратов к субстратам эффлюксного белка-транспортера Pgp (гликопротеина-Р). Для этого моделируют в эксперименте состояние индукции функциональной активности этого белка. В качестве препарата-индуктора используют финастерид. Препарат вводят кроликам внутрижелудочно в форме суспензии в оливковом масле в суточной дозе 0,225 мг/кг массы тела животного в течение 14 дней. Способ обеспечивает создание модели, являясь безопасным, не требующим дорогостоящего лабораторного спецоборудования и материалов. 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии и клинической фармакологии и предназначено для внедрения в практику фармаколога и клинического фармаколога с целью прогнозирования возможной принадлежности изучаемых лекарственных препаратов к субстратам эффлюксиого белка-транспортера гликопротеипа-Р (Pgp). а также использования финастерида в качестве положительного контроля повышенной активности Pgp при поиске веществ аналогичного действия.
Pgp - это АТФ-зависимый эффлюксный транспортер с широкой субстратной специфичностью, контролирующий фармакокинетику различных соединений в физиологических и патологических условиях, препятствующий проникновению и ускоряющий выведение липофильных веществ через цитоплазматическис мембраны различных клеток [1].
Известен способ моделирования состояния индукции функциональной активности Pgp в клинике на добровольцах с целью исследования возможного участия белка-транспортера в фармакокинетике раиитидина путем введения рифамиицина в дозе 600 мг один раз в день в течение 7 дней [2]. Рифамиицин в дозе 300 мг дважды в день в течение 7 дней был предложен в качестве модели повышенной активности Pgp па добровольцах с целью его использования в качестве положительного контроля при поиске потенциальных индукторов транспортера [3].
Известен способ моделирования индукции функциональной активности Pgp на пациентах больных шизофренией, введением препаратов зверобоя продырявленного с целью исследования на этом фоне фармакокинетики атипичного нейролептика клозапина [4].
Известен способ моделирования состояния индукции Pgp в эксперименте у крыс с целью создания положительного контроля повышенной функциональной активности белка-транспортера путем двухнедельного пероралыюго введения животным экстракта зверобоя продырявленного в дозе 15 мг/кг в день [5].
Однако рифамиицин как индуктор, применяемый в клинической практике, характеризуется значительной токсичностью [6], а именно нежелательным действием на печень, почки, желудочно-кишечный тракт, систему кроветворения, развитием аллергических реакций. Исследования на добровольцах сопряжены с этическими проблемами, требуют получения разрешения в этическом комитете, госпитализации добровольцев в отделение реанимации для круглосуточного контроля за состоянием и почасового забора крови многократно в течение суток. Препараты растительного происхождения характеризуются сложностью дозирования, связанной с проблемой их стандартизации. Крысы как объект исследования (тест-система) не пригодны для оценки функциональной активности Pgp одним из современных, информативных и распространенных методов - путем анализа фармакокинстики маркерных субстратов белка-транспортера.
Известен способ моделирования состояния индукции функциональной активности Pgp па культуре клеток LS-180 с целью анализа возможного влияния активности Pgp па развитие болезни Альцгеймера путем введения рифампицина, дексаметазона, верапамила, гинерфорипа, β-эстрадиола и нентилентетразола [7].
Однако работа с культурой клеток сопряжена со значительными техническими и методическими сложностями, требует дорогостоящего лабораторного оборудования, поэтому методика не доступна большинству лабораторий.
Не было обнаружено информации о применении финастерида с целью моделирования состояния индукции активности Pgp у кроликов.
Финастерид-4-азо-3-оксостероид, ингибитор 5α-редуктазы II типа, фермента, локализованного на ядерной мембране клеток и трансформирующего тестостерон в дигидротестостерон - ключевой апдроген, ответственный за развитие доброкачественной гиперплазии предстательной железы и андрогенной аллопеции. Финастерид распределяется но всему организму, однако в связи со специфичностью действия вещества на 5α-редуктазу, которая в высоких концентрациях содержится лишь в ткани предстательной железы, коже головы и половых органов, побочные эффекты со стороны других систем организма у мужчин проявляются редко [8], а у женщин практически не будут выражены в связи с низкой активностью фермента в женском организме.
Целью изобретения являлось создание такой модели индукции функциональной активности Pgp, которая не создавала бы этических проблем, не сопровождалась проявлением побочных эффектов вводимого вещества при исследовании на добровольцах, а при изучении на животных была бы методически обоснована и не требовала дорогостоящего лабораторного спецоборудования, материалов и комплектующих для проведения исследований на культурах клеток.
Поставленная задача достигается тем, что в качестве индуктора Pgp выбран ингибитор 5α-редуктазы - финастерид, безопасный и экономически доступный препарат, который вводится перорально один раз в день 14-дневным курсом в дозе 0,225 мг/кг массы в форме суспензии в оливковом масле, а в качестве адекватной и удобной тест-системы используются кролики.
Описание способа
Для решения поставленной задачи нами выполнен эксперимент на 6 половозрелых кроликах-самцах породы Шиншилла, средней массой 3500-4300 г. Финастерид вводился животным в течение 14 дней внутрижелудочно в дозе 0,225 мг/кг массы тела в форме суспензии в оливковом масле. Функциональную активность Pgp определяли путем анализа динамики плазменной концентрации фексофенадина, маркерного субстрата белка-транспортера. Фексофенадин был выбран в качестве примера субстратов Pgp в связи с тем, что его фармакокииетика зависит исключительно от функционароваиия Pgp.
Фексофенадин (Препарат Телфаст 180 мг; производитель: Aventis Pharma, Италия) вводился однократно внутрижелудочно через зонд в дозе 67.5 мг/кг массы тела животного до и после 14 дневного введения финастерида [9]. Пробы крови отбирали в объеме 5-7 мл из краевой вены уха кролика в гепаринизированные побирки через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 12 и 24 часа после однократного внутрижелудочного введения фексофенадина, центрифугировали 10 минут при 3000 об/мин, плазму хранили при -28°C до анализа [10].
Содержание фексофенадина в плазме крови определяли методом ВЭЖХ па хроматографе «Стайер» (Россия) с ультрафиолетовым детектором и обращено-фазовой колонке «Весктап Coulter» 4,6*250 мм, зернением 5 мкм. Экстракцию и хроматографирование маркерного субстрата осуществляли по методу Раменской Г.В. с соавт. в собственной модификации. Анализ выполняли при длине волны 220 им и скорости подвижной фазы 1 мл/мин.
Элюирование выполняли подвижной фазой следующего состава (на 200 мл): 133,7 мл бидистиллированной воды, содержащей 2,33 мл ледяной уксусной кислоты и 0,936 мл триэтиламипа, доведенной триэтиламином до pH=4,3 и 64 мл ацетонитрила. Время удерживания пика фексофенадина составило 12,31 мин.
В качестве экстрагентов для жидкостной экстракции фексофенадина использовали дихлорметан, этилацетат и диэтиловый эфир. Коэффициент экстракции фексофенадина из плазмы крови составил 64%.
Полученные данные представлены в виде среднего арифметического значения и стандартной ошибки среднего результата в случае нормального распределения признака или в виде медианы, верхнего и нижнего квартиля - если распределение данных отличалось от нормального (таблица №1).
Фармакокииетические параметры рассчитывали с помощью программы Kinetica 5.0.
Достоверное снижение медиан значений Cmax на 13,63% (р□0,05), AUC0-t на 30,37% (р□0.05). AUC0-∞, на 47.45% (р□0,05), средних значений T½ на 65,16% (р□0,05), MRT на 59.43% (р□0,05) и повышению средних значений Kel на 131,88% (p□0,05) и Cl на 104,45% (р□0,05)1 маркерного субстрата Pgp - фексофенадина при назначении финастерида в дозе 0,225 мг/кг массы курсом 14 дней по сравнению с исходными значениями свидетельствует об ускоренном выведении маркерного субстрата, что может служить доказательством индуцирующего влияния финастерида па функциональную активность Pgp.
Использование предлагаемого способа моделирования состояния индукции функциональной активности Pgp на кроликах позволяет применять финастерид в качестве положительного контроля повышенной функциональной активности белка-транспортера при поиске веществ аналогичного действия, а также для прогнозирования потенциальных субстратов Pgp среди лекарственных веществ на этапе доклинических исследований.
Источники информации:
1. The structure and functions of P-glycoprotein / Y. Li [et al.] // Curr. Med. Chcm. - 2010. - V.17. - №8. - P.786-800.
2. Machavaram K.K. Effect of ketoconazole and rifampicin on the pharmacokinetics of ranitidine in healthy human volunteers: a possible role of P-glycoprotein / K.K. Machavaram, J. Gundu, M.R. Yamsani // Drug Metabol. Drug Interact. - 2006. - V.22. - №1. - P.47-65.
3. Gauging the clinical significance of P-glycoprotein-mediated herb-drug interactions: comparative effects of St. John's wort, Echinacea, clarithromycin, and rifampin on digoxin pharmacokinetics / B.J. Gurley [et al] // Mol. Nutr. Food Res. - 2008. - V.52. - №7. - P.772 779.
3. Hughes J. Inhibition of P-glycoprotein-mediated efflux of digoxin and its metabolites by macrolide antibiotics / J.Hughes, A.Crowe // J.Pharmacol. Sci. - 2010. - V.113. - №4. - P.315-234.
4. Van Strater A.C. Interaction of St John's wort (Hypericum perforatum) with clozapine / A.C.Van Strater, J.P.Bogers // Int. Clin. Psychopharmacol. - 2012. - V.27. - №2. - P.121-124.
5. Apocynum venetum extract does not induce CYP3A and P-glycoprotein in rats / Kobayashi M. [et al.] // Biol. Pharm. Bull. - 2004. - V.27. - 10. - P.1649-1652.
6. Adverse reactions to antituberculosis drugs in in-hospital patients: Severity and risk factors / A.S.Vilarica [et al.] // Rev. Port. Pneumol. - 2010. - V.16. - №3. - P.431-451.
7. Up-rcgulation of P-glycoprotein reduces intracellular accumulation of beta amyloid: investigation of P-glycoprotein as a novel therapeutic target for Alzheimer's disease / A.M. Abuznait [et al.] // J. Pharm. Pharmacol. - 2011. - V.63. - №8. - P.11111-1118.
8. Steiner Clinical Pharmacokinetics and Pharmacodynamics of Finasteride / Steiner, F.Joseph // Clinical Pharmacokinetics. - 1996. - V.30. - №1. - P.16-27.
9. Скуридипа E.A. Особенности фармакокииетики фексофенадина при совместном применения с верапамилом и негрустином: автореф. дис. на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук: 15.00.02 / Е.Л. Скуридипа; ГОУ ВПО ММА им. И.М. Сеченова. - Москва, 2007. - 24 с.
10. Колхир С.В. Клиническое значение изучения активности транспортера лекарственных средств гликопротеина-Р для оптимизации фармакотерапии: диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук: 14.00.25 / С.В.Колхир; ГОУ ВПО ММА им. И.М. Сеченова. - Москва, 2007. - 21 с.
Claims (1)
- Способ моделирования состояния индукции функциональной активности гликопротеина-Р финастеридом в эксперименте, включающий введение препарата-индуктора, отличающийся тем, что в качестве такого препарата используют финастерид, который при проведении эксперимента вводят кроликам внутрижелудочно в форме суспензии в оливковом масле в суточной дозе 0,225 мг/кг массы тела животного в течение 14 дней.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012121971/14A RU2504018C1 (ru) | 2012-05-28 | 2012-05-28 | Способ моделирования состояния индукции функциональной активности гликопротеина-р финастеридом в эксперименте |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012121971/14A RU2504018C1 (ru) | 2012-05-28 | 2012-05-28 | Способ моделирования состояния индукции функциональной активности гликопротеина-р финастеридом в эксперименте |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012121971A RU2012121971A (ru) | 2013-12-10 |
| RU2504018C1 true RU2504018C1 (ru) | 2014-01-10 |
Family
ID=49682556
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012121971/14A RU2504018C1 (ru) | 2012-05-28 | 2012-05-28 | Способ моделирования состояния индукции функциональной активности гликопротеина-р финастеридом в эксперименте |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2504018C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2587780C1 (ru) * | 2015-03-02 | 2016-06-20 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ определения функциональной активности гликопротеина-р |
| RU2602688C1 (ru) * | 2015-06-29 | 2016-11-20 | Елена Николаевна Якушева | Способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-р ингибитором дипептидилпептидазы 4 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5399483A (en) * | 1989-03-30 | 1995-03-21 | Suntory Limited | Expression of MDR-related gene in yeast cell |
| RU2181289C2 (ru) * | 2000-06-26 | 2002-04-20 | Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования | Способ восстановления гипоталамо-гипофизарной регуляции у мужчин пожилого возраста |
| RU2197967C2 (ru) * | 1997-08-14 | 2003-02-10 | Авентис Фармасьютикалз, Инк. | Способ повышения биологической доступности фексофенадина и его производных |
| RU2404916C2 (ru) * | 2005-12-27 | 2010-11-27 | Лтс Ломанн Терапи-Зюстеме Аг | Система-носитель на протеиновой основе для преодоления резистентности опухолевых клеток |
| CN102288750A (zh) * | 2011-08-12 | 2011-12-21 | 杭州环特生物科技有限公司 | 斑马鱼p-糖蛋白抑制剂筛选模型的建立方法及其应用 |
| US20120015395A1 (en) * | 2010-06-17 | 2012-01-19 | Shusta Eric V | Human Blood-Brain Barrier Endothelial Cells Derived From Pluripotent Stem Cells and Blood-Brain Barrier Model Thereof |
-
2012
- 2012-05-28 RU RU2012121971/14A patent/RU2504018C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5399483A (en) * | 1989-03-30 | 1995-03-21 | Suntory Limited | Expression of MDR-related gene in yeast cell |
| RU2197967C2 (ru) * | 1997-08-14 | 2003-02-10 | Авентис Фармасьютикалз, Инк. | Способ повышения биологической доступности фексофенадина и его производных |
| RU2181289C2 (ru) * | 2000-06-26 | 2002-04-20 | Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования | Способ восстановления гипоталамо-гипофизарной регуляции у мужчин пожилого возраста |
| RU2404916C2 (ru) * | 2005-12-27 | 2010-11-27 | Лтс Ломанн Терапи-Зюстеме Аг | Система-носитель на протеиновой основе для преодоления резистентности опухолевых клеток |
| US20120015395A1 (en) * | 2010-06-17 | 2012-01-19 | Shusta Eric V | Human Blood-Brain Barrier Endothelial Cells Derived From Pluripotent Stem Cells and Blood-Brain Barrier Model Thereof |
| CN102288750A (zh) * | 2011-08-12 | 2011-12-21 | 杭州环特生物科技有限公司 | 斑马鱼p-糖蛋白抑制剂筛选模型的建立方法及其应用 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| MACHAVARAM КК, Effect of ketoconazole and rifampicin on the pharmacokinetics of ranitidine in healthy human volunteers: a possible role of P-glycoprotein. Drug Metabol Drug Interact. 2006; 22(1): 47-65. * |
| ZHANG J. Progesterone metabolism in human fibroblasts is independent of P-glycoprotein levels and Niemann-Pick type С disease // J Steroid Biochem Mol Biol. - 1999 Sep-Oct; 70(4-6): 123-31. * |
| КОЛХИР С.В. Значение полиморфизма гена MDR1, кодирующего гликопротеин-Р, для индивидуализации фармакотерапии. // Клиническая фармакология и терапия. - 2005, Т.14, No.1, С.92-96. * |
| КОЛХИР С.В. Значение полиморфизма гена MDR1, кодирующего гликопротеин-Р, для индивидуализации фармакотерапии. // Клиническая фармакология и терапия. - 2005, Т.14, №1, С.92-96. СИВКОВ А.В. Финастерид: 20 лет клинической практики лечения больных аденомой предстательной железы. Consilium medicum. - 2006, Т.8, №4, С.43-47. ZHANG J. Progesterone metabolism in human fibroblasts is independent of P-glycoprotein levels and Niemann-Pick type С disease // J Steroid Biochem Mol Biol. - 1999 Sep-Oct; 70(4-6): 123-31. * |
| СИВКОВ А.В. Финастерид: 20 лет клинической практики лечения больных аденомой предстательной железы. Consilium medicum. - 2006, Т.8, No.4, С.43-47. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2587780C1 (ru) * | 2015-03-02 | 2016-06-20 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ определения функциональной активности гликопротеина-р |
| RU2602688C1 (ru) * | 2015-06-29 | 2016-11-20 | Елена Николаевна Якушева | Способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-р ингибитором дипептидилпептидазы 4 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2012121971A (ru) | 2013-12-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Winther-Sørensen et al. | Glucagon acutely regulates hepatic amino acid catabolism and the effect may be disturbed by steatosis | |
| Miranda et al. | Complex genomic interactions in the dynamic regulation of transcription by the glucocorticoid receptor | |
| Syn et al. | Osteopontin is induced by hedgehog pathway activation and promotes fibrosis progression in nonalcoholic steatohepatitis | |
| Huang et al. | Protective effects of Nicotiflorin on reducing memory dysfunction, energy metabolism failure and oxidative stress in multi-infarct dementia model rats | |
| Kus et al. | LSEC fenestrae are preserved despite pro-inflammatory phenotype of liver sinusoidal endothelial cells in mice on high fat diet | |
| Peng et al. | Mitochondrial ATP-sensitive potassium channel regulates mitochondrial dynamics to participate in neurodegeneration of Parkinson's disease | |
| Wu et al. | Triptolide ameliorates ileocolonic anastomosis inflammation in IL-10 deficient mice by mechanism involving suppression of miR-155/SHIP-1 signaling pathway | |
| Anquetil et al. | Alpha cells, the main source of IL-1β in human pancreas | |
| Glaser et al. | Liver infiltrating T cells regulate bile acid metabolism in experimental cholangitis | |
| Feng et al. | The structure-activity relationship of ginsenosides on hypoxia-reoxygenation induced apoptosis of cardiomyocytes | |
| Wang et al. | White button mushroom (Agaricus bisporus) disrupts androgen receptor signaling in human prostate cancer cells and patient-derived xenograft | |
| CN103919787A (zh) | 牛磺熊脱氧胆酸及其可接受的盐的制药用途 | |
| Zhao et al. | Differentiation of seminiferous tubule-associated stem cells into leydig cell and myoid cell lineages | |
| Ney et al. | Translation of animal endocannabinoid models of PTSD mechanisms to humans: Where to next? | |
| Wang et al. | Baicalin induces Mrgprb2-dependent pseudo-allergy in mice | |
| Mennillo et al. | NCoR1 Protects Mice From Dextran Sodium Sulfate–Induced Colitis by Guarding Colonic Crypt Cells From Luminal Insult | |
| Igarashi et al. | Cyclosporine A and FK506 induce osteoclast apoptosis in mouse bone marrow cell cultures | |
| RU2504018C1 (ru) | Способ моделирования состояния индукции функциональной активности гликопротеина-р финастеридом в эксперименте | |
| Yao et al. | Metabolomic evidence for the therapeutic effect of gentiopicroside in a corticosterone-induced model of depression | |
| Hye et al. | Newer insights into the pathobiological and pharmacological basis of the sex disparity in patients with pulmonary arterial hypertension | |
| Faraji et al. | Stress after hippocampal stroke enhances spatial performance in rats | |
| Santarelli et al. | The amino acid transporter SLC6A15 is a regulator of hippocampal neurochemistry and behavior | |
| Zhang et al. | 2, 3, 5, 4′-tetrahydroxy-stilbene-2-O-β-D-glucoside ameliorates NAFLD via attenuating hepatic steatosis through inhibiting mitochondrial dysfunction dependent on SIRT5 | |
| Zhu et al. | Dynamic changes of proteasome and protective effect of bortezomib, a proteasome inhibitor, in mice with acute pancreatitis | |
| Xu et al. | In vitrometabolic mapping of neobavaisoflavone in human cytochromes P450 and UDP-glucuronosyltransferase enzymes by ultra high-performance liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140529 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20150320 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180529 |