RU2491962C1

RU2491962C1 - Transplant for scleroplasty (versions)

Info

Publication number: RU2491962C1
Application number: RU2012112756/15A
Authority: RU
Inventors: Валерий Евгеньевич Дьяков; Любовь Михайловна Федотова; Юрий Анатольевич Кортунов; Залина Николаевна Джанаева; Юрий Сергеевич Астахов; Владимир Викторович Томсон; Миральда Ивановна Блинова; Наталья Михайловна Юдинцева
Original assignee: Закрытое акционерное общество "Научно-производственный комплекс "Экофлон" (ЗАО "НПК "Экофлон")
Priority date: 2012-04-02
Filing date: 2012-04-02
Publication date: 2013-09-10

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: invention relates to medicine, namely to ophthalmosurgery, and in particular to scleroplasty. Transplant for scleroplasty has polymeric base, covered with porous layer of the same polymer. As polymer base, transplant includes layer, made from porous stretched polytetrafluoroethylene, which has nodular-fibrillar structure. As porous layer, it includes layer of porous polytetrafluoroethylene, which has volume fraction of void space 15-40%, specific surface of void space 0.25-0.55 mcm²/mcm³, average distance between voids in volume 25-30 mcm and average chord volume 8-25 mcm, with the total width of transplant constituting 0.15-0.35 mm (first version). Transplant for scleroplasty can also include porous layer of polymer, whose surface is processed to add compatibility with sclera tissue. Transplant surface is processed by application of allogenic dermal fibroblasts of 3-5 passages of culturing, with the total width of transplant being 0.15-0.35 mm (second version).

EFFECT: chemically and biologically inert transplant, which ensures effect of invasion of sclera tissues, is obtained.

2 cl

Description

Заявляемое изобретение относится к медицине, а именно к офтальмохирургии, и в частности к склеропластике.The claimed invention relates to medicine, namely to ophthalmosurgery, and in particular to scleroplasty.

В современной пластической офтальмохирургии проблема пересадки тканей остается достаточно актуальной. Применение различных трансплантатов несомненно повышает эффективность многих реконструктивных операций. Однако до сих пор актуален и до конца не решен вопрос выбора оптимального, отвечающего современным требованиям офтальмохирургии трасплантационного материала для проведения склеропластики, особенно с учетом гистосовместимости в каждом конкретном случае [Жаров В.В. Биопласт - отделение заготовки, консервации и производства пластических материалов / В.В. Жаров, Е.Р. Точилова. - Москва, 2003. - 105 с.].In modern plastic ophthalmic surgery, the problem of tissue transplantation remains quite relevant. The use of various transplants undoubtedly increases the effectiveness of many reconstructive operations. However, the issue of choosing the optimal transplantation material that meets the modern requirements of ophthalmic surgery for scleroplasty is still relevant and has not been completely resolved, especially taking into account histocompatibility in each case [Zharov V.V. Bioplast - Department of procurement, conservation and production of plastic materials / V.V. Zharov, E.R. Tochilova. - Moscow, 2003. - 105 p.].

Существует большое количество показаний для пластических операций на склере, в том числе такие как обширные раны с дефектом ткани, разрывы склеры, язвы роговицы и склеры, тяжелые ожоги склеры, дистрофия и истончение роговицы после кератопротезирования и т.д. [Сомов Е.Е. Склеропластика / Е.Е. Сомов. - Санкт-Петербург: Педиатрический медицинский институт, 1995. - 144 с.]. Во многих случаях отказ от склеропластики может привести к гибели глаза.There are a large number of indications for plastic surgery on the sclera, including such as extensive wounds with a tissue defect, scleral tears, corneal and scleral ulcers, severe scleral burns, dystrophy and thinning of the cornea after keratoprosthetics, etc. [Somov E.E. Scleroplasty / E.E. Somov. - St. Petersburg: Pediatric Medical Institute, 1995. - 144 p.]. In many cases, rejection of scleroplasty can lead to eye death.

В качестве пластического материала для склеропластики использовались ауто- и аллогенные материалы, такие как собственная широкая фасция бедра, взвесь аутохряща с аутокровью, аллогенная твердая мозговая оболочка, взвесь плаценты, аллоамнион, смесь сухой плазмы и тромбина в растворе новокаина [Василькова Я.С. Аутохондропластика в лечении и профилактике миопии и дистрофии сетчатки: Автореф. дисс. канд. мед. наук. - М., 1989], однако используемые для данной цели различные биологические ткани (аллосклера, консервированная твердая мозговая оболочка, амнион, ауто- и аллохрящ) в результате приживления вовлекаются в процесс патологических изменений, происходящих в склере реципиента [Е.П. Тарутта, Л.Д. Андреева и др. // Вестник офтальмологии. - 1999. - №5. - С.8-10]. Пересаженные аллотрансплантаты замещаются собственной соединительной тканью реципиента, в результате чего не образуется комплекс «склера-имплантат» и патологический процесс продолжается. В послеоперационном периоде возникает воспалительная реакция в виде тенонита и гранулематозного воспаления [Wiswe I., GrungreiffJ., Schlotte H.W., Bansche I., Fortschr. Ophthalmol. - 1991. - Bd 88, №6. - S.881-884]. Все это ограничивает возможности склеропластики с помощью ауто- или аллотрасплантатов.As a plastic material for scleroplasty, auto- and allogeneic materials were used, such as intrinsic wide fascia of the thigh, suspension of auto-cartilage with autoblood, allogeneic dura mater, placenta suspension, alloamnion, a mixture of dry plasma and thrombin in novocaine solution [Vasilkova Ya.S. Autochondroplasty in the treatment and prevention of myopia and retinal dystrophy: Author. diss. Cand. honey. sciences. - M., 1989], however, various biological tissues used for this purpose (allosclera, canned dura, amnion, auto- and allo-cartilage) as a result of engraftment are involved in the process of pathological changes that occur in the sclera of the recipient [E.P. Tarutta, L.D. Andreeva et al. // Bulletin of Ophthalmology. - 1999. - No. 5. - S.8-10]. The transplanted allografts are replaced by the recipient's own connective tissue, as a result of which the sclera-implant complex does not form and the pathological process continues. In the postoperative period, an inflammatory reaction occurs in the form of tenonitis and granulomatous inflammation [Wiswe I., Grungreiff J., Schlotte H.W., Bansche I., Fortschr. Ophthalmol. - 1991. - Bd 88, No. 6. - S.881-884]. All this limits the possibilities of scleroplasty with the help of auto- or allografts.

Известен трансплантат для склеропластики, представляющий собой аллотрансплантат склеры, прошитый нитями биосовместимых шовных материалов с образованием сетчатой структуры с размером ячеек 1,0×1,0 мм [RU №2140242, МПК A61F 9/007, 1999].В качестве биосовместимого шовного материала использовался капрон, полиэфирное волокно или лавсан. Трансплантат использовали для лечения быстро прогрессирующей близорукости; представлены результаты склероукрепляющего эффекта через 6 месяцев.A graft for scleroplasty is known, which is a scleral allograft stitched with threads of biocompatible suture materials to form a mesh structure with a mesh size of 1.0 × 1.0 mm [RU No. 2140242, IPC A61F 9/007, 1999]. Used as a biocompatible suture material nylon, polyester fiber or lavsan. The graft was used to treat rapidly progressive myopia; The results of the sclero-strengthening effect after 6 months are presented.

Однако пересадка аллосклеры вызывает выраженную воспалительную реакцию и грубое капсулообразование [Л.Д. Андреева, Е.П. Тарутта и др. // Вестник офтальмологии.- 1999. - №3. - С.15-18]. В дальнейшем, через 1,5-2 месяца после трансплантации начинается лизис донорской склеры и замещение ее новообразованным коллагеном реципиента, вследствие чего, склероукрепляющий эффект нивелируется [Е.П. Тарутта и др., 1999; Whitmore W.G., Harnson W., Curtin B.J. Ophthalmic Surg. - 1990. - Vol.21, №5.- Р.327-330].However, a transplant of allosclera causes a pronounced inflammatory reaction and gross capsule formation [L.D. Andreeva, E.P. Tarutta et al. // Bulletin of Ophthalmology. - 1999. - No. 3. - S.15-18]. In the future, after 1.5-2 months after transplantation, lysis of the donor sclera begins and its replacement with newly formed collagen of the recipient, as a result, the sclera-strengthening effect is leveled [E.P. Tarutta et al., 1999; Whitmore W.G., Harnson W., Curtin B.J. Ophthalmic Surg. - 1990. - Vol.21, No. 5. - P.327-330].

Также известен трансплантат для склеропластики, выполненный в виде сетки с размером ячейки 1×1 мм из капроновых или полиэфирных волокон, прошитой коллагеновым волокном (шовный материал «коллаген 5,0») с шагом в 1 мм [RU №2157159, МПК A61F 9/01, 2000]. Указанный трансплантат также использовался для лечения прогрессирующей близорукости.Also known is a graft for scleroplasty made in the form of a mesh with a mesh size of 1 × 1 mm made of nylon or polyester fibers stitched with collagen fiber (suture material “collagen 5.0”) in increments of 1 mm [RU No. 2157159, IPC A61F 9 / 01, 2000]. Said graft has also been used to treat progressive myopia.

Недостатком известного трансплантата, так же как и трансплантата по RU №2140242, является недостаточная устойчивость используемых полимерных волокон к биодеструкции, как клеточной, так и неклеточной, а также распад и фрагментация материала на отдельные нити.A disadvantage of the known graft, as well as the graft according to RU No. 2140242, is the insufficient resistance of the polymer fibers used to biodegradation, both cellular and non-cellular, as well as the decay and fragmentation of the material into individual threads.

Наиболее близким по совокупности существенных признаков является трансплантат для склеропластики, представляющий собой полимерную основу, на которую нанесен пористый слой того же или иного полимера, поверхность которого обработана для придания ей совместимости с тканями склеры [RU №2160123, МПК A61L 27/56, 2000]. Трансплантат выполнен из пористого силикона (п.3 формулы), основа и слой с порами могут быть выполнены заодно (п.2 формулы); более пористый слой, который при имплантации должен быть обращен к склере, имеет поры, выполненные в форме перпендикулярных или наклонных к поверхности каналов (п.4 формулы), расположенные регулярным образом (п.7 формулы). Слой с порами обработан низкотемпературным плазменным разрядом (п.8 формулы), что вызывает образование в приповерхностном слое трансплантата переходной структуры, содержащей полимерные цепи и их фрагменты (п.1 формулы). Переходная структура создает постоянную гидрофильность рабочей стороны трансплантата, что создает «благоприятные условия прорастания живой ткани в поры для повышения тем самым механической прочности соединения трансплантата со склерой» (стр.5, абз.2 описания изобретения).The closest set of essential features is a transplant for scleroplasty, which is a polymer base on which a porous layer of the same or another polymer is applied, the surface of which is treated to give it compatibility with sclera tissues [RU No. 2160123, IPC A61L 27/56, 2000] . The graft is made of porous silicone (claim 3 of the formula), the base and the layer with pores can be made at the same time (claim 2 of the formula); the more porous layer, which should be facing the sclera during implantation, has pores made in the form of channels perpendicular or inclined to the surface (claim 4), arranged regularly (claim 7). The pore layer is treated with a low-temperature plasma discharge (claim 8 of the formula), which causes the formation in the surface layer of the graft of the transition structure containing polymer chains and their fragments (claim 1 of the formula). The transition structure creates constant hydrophilicity of the working side of the graft, which creates "favorable conditions for the germination of living tissue into the pores to thereby increase the mechanical strength of the connection of the graft with the sclera" (page 5, paragraph 2 of the description of the invention).

Однако в RU №2160123 не приведены конкретные примеры изготовления заявленного трансплантата и отсутствуют опытные данные по склеропластике. Изготовление трансплантата по RU №2160123 сложно; силиконовые полимеры не обладают достаточной химической и биологической инертностью; эффективность переходного гидрофильного слоя не доказана экспериментально.However, RU No. 2160123 does not provide specific examples of the manufacture of the claimed transplant and there are no experimental data on scleroplasty. The manufacture of a transplant according to RU No. 2160123 is difficult; silicone polymers do not have sufficient chemical and biological inertness; the effectiveness of the transition hydrophilic layer has not been proven experimentally.

Технический результат, на достижение которого направлено заявляемое изобретение, заключается в получении трансплантата для склеропластики, химически и биологически инертного и обеспечивающего эффект прорастания тканями склеры.The technical result to which the claimed invention is directed is to obtain a graft for scleroplasty, chemically and biologically inert and providing the effect of germination of sclera tissue.

Указанный результат достигается тем, что трансплантат для склеропластики, имеющий полимерную основу, на которую нанесен пористый слой того же полимера, в качестве полимерной основы включает слой, выполненный из пористого растянутого политетрафторэтилена, имеющего узелково-фибриллярную структуру, а в качестве пористого слоя он включает слой пористого политетрафторэтилена, имеющего объемную долю пространства пустот 15-40%, удельную поверхность пространства пустот 0,25-0,55 мкм²/мкм³, среднее расстояние между пустотами в объеме 25-50 мкм и среднюю хорду объемную 8-25 мкм при общей толщине трансплантата 0,15-0,35 мм (первый вариант).This result is achieved by the fact that the graft for scleroplasty having a polymer base on which a porous layer of the same polymer is applied, as a polymer base includes a layer made of porous stretched polytetrafluoroethylene having a nodular fibrillar structure, and as a porous layer it includes a layer porous polytetrafluoroethylene having a volume fraction of void space of 15-40%, a specific surface area of the void space of 0.25-0.55 μm ² / μm ³ , the average distance between voids in a volume of 25-50 μm and medium volume chord 8-25 microns with a total graft thickness of 0.15-0.35 mm (first option).

Указанный результат достигается также тем, что трансплантат для склеропластики, имеющий пористый слой полимера, поверхность которого обработана для придания ей совместимости с тканями склеры, в качестве пористого слоя включает слой пористого политетрафторэтилена, имеющего объемную долю пространства пустот 15-40%, удельную поверхность пространства пустот 0,25-0,55 мкм²/мкм³, среднее расстояние между пустотами в объеме 25-50 мкм и среднюю хорду объемную 8-25 мкм, поверхность которого обработана нанесением аллогенных дермальных фибробластов 3-5 пассажей культивирования при общей толщине трансплантата 0,15-0,35 мм (второй вариант)The indicated result is also achieved by the fact that the graft for scleroplasty having a porous polymer layer, the surface of which is processed to give it compatibility with sclera tissues, includes as a porous layer a layer of porous polytetrafluoroethylene having a volume fraction of void space of 15-40%, a specific surface of void space 0,25-0,55 m ² / m ^3, the average distance between the voids in the amount of 25-50 microns and an average chord bulk 8-25 microns, the surface of which is treated by applying allogeneic dermal fibroblasts 3-5 n ssazhey culturing a total thickness graft 0.15-0.35 mm (second embodiment)

Пористый растянутый политетрафторэтилен (ПТФЭ) узелково-фибриллярной структуры получают вытяжкой сырой каландрированной пленки из эмульсионного ПТФЭ, например марки Ф-4Д, так, как это описано в RU №2203685. Слой полимерной основы трансплантата включает 2-4 слоя пористой растянутой пленки указанной структуры, причем общая толщина этого слоя составляет 0,05-0,15 мм.A porous stretched polytetrafluoroethylene (PTFE) nodular fibrillar structure is obtained by drawing a crude calendared film from emulsion PTFE, for example, grade F-4D, as described in RU No. 2203685. The layer of the polymer base of the graft includes 2-4 layers of a porous stretched film of the specified structure, and the total thickness of this layer is 0.05-0.15 mm.

Пористый ПТФЭ, составляющий пористый слой, получен из суспензионного ПТФЭ, например марки Ф-4, так, как описано в RU №2270642. Толщина слоя пористого ПТФЭ в трансплантате составляет 0,10-0,30 мм.Porous PTFE constituting the porous layer was obtained from suspension PTFE, for example, grade F-4, as described in RU No. 2270642. The thickness of the layer of porous PTFE in the graft is 0.10-0.30 mm.

Пористый ПТФЭ по RU №2270642 был использован для изготовления имплантата для укрепления роговицы в форме выпукло-вогнутой линзы толщиной не менее 0,4 мм, которую вводили в роговичный интраламеллярный карман, формируемый в процессе операции. За 4 месяца соединительная ткань и единичные кровеносные сосуды врастали в пространство пустот между элементами полимера; не наблюдалось случаев отторжения или постоперационных осложнений.Porous PTFE according to RU No. 2270642 was used to manufacture an implant for strengthening the cornea in the form of a convex-concave lens with a thickness of at least 0.4 mm, which was inserted into the corneal intralamellar pocket formed during the operation. For 4 months, connective tissue and single blood vessels grew into the space of voids between the polymer elements; no cases of rejection or postoperative complications were observed.

Однако для склеропластики требуется трансплантат не толще 0,35 мм; если из материала по RU №2270642 вырезать пластинку такой толщины (а лучше толщиной 0,15-0,20 мм), такой трансплантат после операции не выдержит напряжения, и прежде, чем соединительная ткань врастет внутрь трансплантата, он будет поврежден.However, for scleroplasty, a transplant no thicker than 0.35 mm is required; if a plate of such a thickness (preferably 0.15-0.20 mm thick) is cut out of the material according to RU No. 2270642, such a graft will not withstand stress after surgery, and before the connective tissue grows inside the graft, it will be damaged.

Пористый ПТФЭ получают следующим образом.Porous PTFE is prepared as follows.

Суспензионный ПТФЭ по ГОСТ 10007-80 в виде порошка термостатируют при температуре 340-390°С и дополнительно измельчают в дробилке. Порошок рассеивают, отбирая фракцию 0,25-0,60 мм, из отобранной фракции прессуют заготовку при давлении 10-40 МПа, заготовку спекают при температуре 340-390°С в течение 5-6 часов. Трансплантат заданной толщины получают механической обработкой спеченной заготовки.Suspension PTFE according to GOST 10007-80 in the form of a powder is thermostated at a temperature of 340-390 ° C and further crushed in a crusher. The powder is dispersed, selecting a fraction of 0.25-0.60 mm, the preform is pressed from the selected fraction at a pressure of 10-40 MPa, the preform is sintered at a temperature of 340-390 ° C for 5-6 hours. A graft of a given thickness is obtained by machining a sintered preform.

Объемные параметры заявляемого трансплантата определяют по известной методике [Пантелеев В.Г. Рамм К.С. Неорганические материалы, 1986, том 22, №12, с.1941-1951; Автангило Г.Г. и др. Системная стереометрия в изучении патологического процесса. М., Медицина, 1981; Чернявский К.С. Стереология в металловедении. М., Металлургия, 1977].The volumetric parameters of the claimed transplant is determined by a known method [Panteleev V.G. Ramm K.S. Inorganic Materials, 1986, Volume 22, No. 12, pp. 1941-1951; Avtangilo G.G. et al. Systemic stereometry in the study of the pathological process. M., Medicine, 1981; Chernyavsky K.S. Stereology in metal science. M., Metallurgy, 1977].

Согласно определению структура пористого слоя ПТФЭ имеет объемную долю пространства пустот 15-40%, удельную поверхность пространства пустот 0,25-0,55 мкм²/мкм³, среднее расстояние между пустотами в объеме 25-50 мкм и среднюю хорду объемную 8-25 мкм,According to the definition, the structure of the porous PTFE layer has a volume fraction of void space of 15-40%, a specific surface area of void space of 0.25-0.55 μm ² / μm ³ , an average distance between voids in a volume of 25-50 μm and an average chord volume of 8-25 μm

Для получения материала по первому пункту формулы заготовку из пористого ПТФЭ, полученного суспензионным способом, совмещали наложением с 2-4 слоями двуосноориентированной пленки и собранный таким образом пакет термофиксировали между нагретыми пластинам при температуре (330-360)°С и давлении (0,003-0,008) МПа.To obtain the material according to the first claim, a preform of a porous PTFE obtained by the slurry method was combined by overlapping with 2-4 layers of a biaxially oriented film and the package thus assembled was thermofixed between heated plates at a temperature of (330-360) ° C and a pressure of (0.003-0.008) MPa

Для получения материала по второму пункту формулы изобретения были использованы дермальные фибробласты, выделенные из кожи человека. Источником выделения клеток служили фрагменты кожи век, ушей или лица, взятые в результате косметологической операции. Фибробласты были выделены методом спонтанной миграции их в процессе культивирования указанных фрагментов в питательной среде DMEM с добавлением 10% (по объему) эмбриональной сыворотки коров. Для посева взяты фибробласты, культивируемые не позднее 3-5-го пассажей. Известно, что фибробласты сами не являются иммунокомпетентными клетками, и в популяции фибробластов отсутствуют иммунокомпетентные клетки; в силу этого использование аллогенных фибробластов не может иметь отрицательного влияния на состояние реципиента трансплантата.To obtain the material according to the second claim, dermal fibroblasts isolated from human skin were used. The source of cell isolation were fragments of the skin of the eyelids, ears or face, taken as a result of cosmetic surgery. Fibroblasts were isolated by spontaneous migration during the cultivation of these fragments in DMEM nutrient medium with the addition of 10% (by volume) of fetal bovine serum. Fibroblasts cultured no later than the 3-5th passages were taken for inoculation. It is known that fibroblasts themselves are not immunocompetent cells, and there are no immunocompetent cells in the fibroblast population; therefore, the use of allogeneic fibroblasts cannot have a negative effect on the condition of the transplant recipient.

Посев осуществляли следующим образом.Sowing was carried out as follows.

Все варианты эксперимента были выполнены в 6 повторностях, т.е., клетки каждого варианта были посеяны в 6 лунок 96-луночной платы. Суспензию дермальных фибробластов человека высевали в концентрации по 2000 кл/лунку. Перед посевом клеток в лунки вариантов 2 и 3, закладывались диски диаметром 16 мм, вырезанные из пористого ПТФЭ толщиной 0,15-0,35 мм (предварительно инкубированные в 10% эмбриональной сыворотке коров).All variants of the experiment were performed in 6 replicates, i.e., cells of each variant were seeded in 6 holes of a 96-well plate. A suspension of human dermal fibroblasts was plated at a concentration of 2000 cells / well. Before seeding cells in the wells of options 2 and 3, discs 16 mm in diameter were inserted, cut from porous PTFE with a thickness of 0.15-0.35 mm (previously incubated in 10% fetal serum of cows).

Через 1 час после посева клеток по достижении их прикрепления к субстрату, в лунках варианта 3 (диски предварительно инкубированные в питательной среде) стандартная питательная среда заменялась на кондиционированную среду. На 5-ые сутки культивирования содержимое каждой лунки фотографировали. Затем методом колориметрии проводили определение количества (т.е., степень пролиферации) клеток, выросших в каждом из вариантов опыта.1 hour after seeding of cells upon reaching their attachment to the substrate, in the wells of option 3 (discs previously incubated in a nutrient medium), the standard nutrient medium was replaced with an air-conditioned medium. On the 5th day of cultivation, the contents of each well were photographed. Then, the method of colorimetry was used to determine the number (i.e., the degree of proliferation) of cells grown in each of the experimental variants.

Морфологическое состояние культивируемых клеток оценивали визуально под инвертированным микроскопом. Наличие и состояние клеток на мембранах через 5 суток культивирования оценивали методом сканирующей электронной микроскопии.The morphological state of the cultured cells was evaluated visually under an inverted microscope. The presence and condition of cells on the membranes after 5 days of cultivation was evaluated by scanning electron microscopy.

Данные колориметрических исследований показали, что при посеве клеток в дозе 2000 кл/лунку через 5 дней культивирования в варианте 3 (кондиционированная среда после инкубации в ней мембранных дисков) выросло 18000 ((±500) клеток, а в контрольном варианте (стандартные условия культивирования) - 20000 (±650) клеток. Полученными различиями можно пренебречь и, соответственно, можно сделать вывод об отсутствии токсического влияния материала мембраны из пористого политетрафторэтилена на культивируемые фибробласты.Colorimetric studies showed that when cells were seeded at a dose of 2000 cells / well after 5 days of cultivation in option 3 (conditioned medium after incubation of membrane disks in it), 18,000 ((± 500) cells grew, and in the control variant (standard cultivation conditions) - 20,000 (± 650) cells. The obtained differences can be neglected and, accordingly, it can be concluded that there is no toxic effect of the membrane material from porous polytetrafluoroethylene on cultured fibroblasts.

Морфологическое состояние (морфология отдельных клеток и состояние монослоя клеток, сформировавшегося за 5 дней культивирования) также свидетельствует об отсутствии токсического влияния мембран на клетки.The morphological state (morphology of individual cells and the state of the monolayer of cells formed after 5 days of cultivation) also indicates the absence of toxic effects of membranes on cells.

Сканирующая электронная микроскопия мембран через 5 дней культивирования на них клеток показала их присутствие, что может служить свидетельством возможности роста клеток на таком субстрате.Scanning electron microscopy of the membranes after 5 days of culturing cells on them showed their presence, which may indicate the possibility of cell growth on such a substrate.

Испытание заявляемого трансплантата проводилось на кроликах породы Шиншилла весом 3,5-3,7 кг. Испытания трансплантата по первому пункту формулы изобретения проводились на 15 животных; испытания трансплантата по второму пункту формулы проводились на 3 животных.The test of the claimed transplant was carried out on chinchilla rabbits weighing 3.5-3.7 kg The transplant tests according to the first claim were carried out on 15 animals; transplant tests according to the second claim were carried out on 3 animals.

Вмешательство проводилось под внутривенной анестезией. Для местной анестезии применяли инстилляции алкаина (Алкон, США). Зоной для операции служил верхне-наружный квадрант глазного яблока. В 1,5 мм от лимба выполнялся разрез конъюнктивы с подлежащей теноновой капсулой длиной 5 мм. Шпателем формировался тоннель в теноновом пространстве, куда затем помещался трансплантат овальной формы величиной 7х5 мм, вырезанный из материала первого варианта (15 животных) и изматериала второго варианта (3 животных), причем материал укладывался на склеру пористой стороной в первом случае и стороной с фибробластами во втором случае. На рану накладывалось 2 узловых шва шелком 8-0. Под конъюнктиву вводились 0,05 г цефазолина и 0,002 г дексаметазона.Intervention was performed under intravenous anesthesia. Alkain instillations (Alcon, USA) were used for local anesthesia. The area for the operation was the upper outer quadrant of the eyeball. Conjunctiva was cut 1.5 mm from the limbus with the underlying tenon capsule 5 mm long. A spatula formed a tunnel in the tenon space, where an oval-shaped transplant of 7x5 mm size was then placed, cut from the material of the first variant (15 animals) and the material of the second variant (3 animals), the material being laid on the sclera with the porous side in the first case and the side with fibroblasts in second case. 2 nodal sutures with 8-0 silk were applied to the wound. 0.05 g of cefazolin and 0.002 g of dexamethasone were administered under the conjunctiva.

После операции на протяжении 5 дней в оперированные глаза закапывали 0,3% р-р ципрофлоксацина гидрохлорида (ципромед; Промед, Индия).After surgery, for 5 days, 0.3% solution of ciprofloxacin hydrochloride was instilled into the operated eyes (cypromed; Promed, India).

Первые двое суток после операции инстилляции антибиотика проводили 4 раза в день, в остальной период 2 раза в день.The first two days after the operation of antibiotic instillation was performed 4 times a day, in the rest of the period 2 times a day.

В первые сутки после операции отмечалась легкая конъюнктивальная инъекция непосредственно в зоне вмешательства. В дальнейшем инъекция проходила полностью. Патологического отделяемого из конъюнктивальной полости отмечено не было ни в одном из случаев. За весь период наблюдения за экспериментальными животными не было отмечено признаков повреждения трансплантата, его отторжения или миграции.On the first day after the operation, a light conjunctival injection was observed directly in the intervention area. Subsequently, the injection took place completely. There was no pathological discharge from the conjunctival cavity in any of the cases. Over the entire period of observation of experimental animals, there were no signs of damage to the transplant, its rejection or migration.

Claims

1. The graft for scleroplasty, having a polymer base, on which a porous layer of the same polymer is applied, characterized in that the polymer base includes a layer made of porous stretched polytetrafluoroethylene having a nodular fibrillar structure, and as a porous layer it includes a layer porous polytetrafluoroethylene having a void space volume fraction of 15-40%, a specific surface area of voids 0,25-0,55 m ² / m ^3, the average distance between the voids in the amount of 25-50 microns and an average chord surround 8-25 m, with a total thickness of 0.15-0.35 mm graft.

2. A graft for scleroplasty having a porous polymer layer, the surface of which is treated to give it compatibility with sclera tissues, characterized in that as a porous layer it includes a layer of porous polytetrafluoroethylene having a volume fraction of void space of 15-40%, a specific surface of void space 0,25-0,55 m ² / m ^3, the average distance between the voids in the amount of 25-50 microns and an average chord bulk 8-25 microns, the surface of which is treated by applying allogeneic dermal fibroblasts passage 3-5 kultivirova Ia, when the total thickness of 0.15-0.35 mm graft.