RU2481836C1

RU2481836C1 - Medication, possessing wound-healing activity

Info

Publication number: RU2481836C1
Application number: RU2012113188/15A
Authority: RU
Inventors: Глеб Николаевич Зюзьков; Татьяна Николаевна Поветьева; Аркадий Алексеевич Семенов; Вадим Вадимович Жданов; Николай Иннокентьевич Суслов; Юлия Владимировна Нестерова; Елена Владимировна Удут; Лариса Аркадьевна Мирошниченко; Александр Владимирович Крапивин; Татьяна Ивановна Фомина; Александр Михайлович Дыгай
Priority date: 2012-04-04
Filing date: 2012-04-04
Publication date: 2013-05-20

Abstract

FIELD: medicine, pharmaceutics.

SUBSTANCE: invention relates to medicine, in particular to pharmacology, to medication, possessing wound-healing activity. Application of hipaconitine as medication, possessing wound-healing activity is disclosed.

EFFECT: hipactonitin possesses expressed wound-healing activity.

6 tbl, 1 ex

Description

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии и клеточным технологиям.The invention relates to medicine, specifically to pharmacology and cell technology.

Известно большое количество средств, обладающих ранозаживляющей активностью: метилурапил, солкосерил, облепиховое масло, натрия нуклеинат и др. [1, 2].A large number of agents with wound healing activity are known: methylurapil, solcoseryl, sea buckthorn oil, sodium nucleinate, etc. [1, 2].

Недостатком данных средств является зачастую их низкая эффективность [2].The disadvantage of these funds is often their low efficiency [2].

Задачей, решаемой настоящим изобретением, является расширение арсенала средств, обладающих выраженной ранозаживляющей активностью.The problem solved by the present invention is the expansion of the arsenal of funds with pronounced wound healing activity.

Поставленная задача достигается применением гипаконитина в качестве средства, обладающего ранозаживляющей активностью.The task is achieved by the use of hypakonitin as a means of having wound healing activity.

Новым в предлагаемом изобретении является использование гипаконитина в качестве средства, обладающего ранозаживляющей активностью.New in the invention is the use of hypakonitin as an agent with wound healing activity.

Используемое оригинальное средство гипаконитина разработано и получено ФГБУ «НИИ фармакологии» СО РАМН (г. Томск) совместно с Национальным исследовательским Иркутским Государственным Техническим Университетом (г. Иркутск) и представляло собой 0,00025% водный раствор данного алкалоида. Гипаконитин извлекался из травы растений семейства лютиковых в виде свободных оснований экстракцией стандартным методом [3].The original hypakonitin used was developed and obtained by the Federal State Budget Scientific Institution Scientific Research Institute of Pharmacology SB RAMS (Tomsk) together with the National Research Irkutsk State Technical University (Irkutsk) and was a 0.00025% aqueous solution of this alkaloid. Hypaconitin was extracted from the grass of the buttercup family plants in the form of free bases by extraction by the standard method [3].

Важная роль в регенерации тканей принадлежит резидентным прогениторным, в том числе стволовым (СК), клеткам [4, 5]. При этом существует фармакологическая стратегия регенеративной медицины, заключающаяся в стимуляции эндогенных родоначальных элементов [5]. Причем активация последних может являться следствием как прямого воздействия фармакологических агентов на прогениторные элементы, так и результатом стимуляции клеток микроокружения тканей, опосредованно определяющей ускоренное течение репаративных процессов [5, 6].An important role in tissue regeneration belongs to resident progenitor, including stem (SC) cells [4, 5]. At the same time, there is a pharmacological strategy of regenerative medicine, which consists in stimulating endogenous parent elements [5]. Moreover, the activation of the latter can be a consequence of both the direct effect of pharmacological agents on progenitor elements, and the result of stimulation of tissue microenvironment cells, which indirectly determines the accelerated course of reparative processes [5, 6].

Ранее авторами было показано ускорение заживления ран кожи комплексными экстрактами и алкалоидной фракцией живокости высокой [7]. При этом максимальный ранозаживляющий эффект наблюдался при использовании суммы алкалоидов, среди которых доминирующим является элатин [8]. В то же время с помощью метода тонкослойной хроматографии в алкалоидной фракции было установлено содержание других алкалоидов, в том числе гипаконитина. Гипаконитин (C₃₃H₄₅NO₁₀),Previously, the authors have shown the acceleration of healing of skin wounds with complex extracts and an alkaloid fraction of high longevity [7]. In this case, the maximum wound healing effect was observed when using the sum of alkaloids, among which elatin is dominant [8]. At the same time, using the method of thin layer chromatography in the alkaloid fraction, the content of other alkaloids, including hypaconitine, was established. Hypaconitin (C ₃₃ H ₄₅ NO ₁₀ ),

представляет собой гетероциклическое азотсодержащее органическое соединение растительного происхождения. Чаще всего его извлекают из растений рода Аконит, хотя он встречается и в других растениях [7, 9]. Известно, что гипоаконитин, как и некоторые другие алкалоиды аконитиновой группы, обладает анальгетической активностью [10]. При этом способность гипаконитина стимулировать процессы регенерации, в том числе заживления ран, в литературе не описана. Эксперимент показал непредсказуемые результаты.is a heterocyclic nitrogen-containing organic compound of plant origin. Most often it is extracted from plants of the genus Aconite, although it is also found in other plants [7, 9]. It is known that hypoaconitin, like some other alkaloids of the aconitine group, has analgesic activity [10]. At the same time, the ability of hypakonitin to stimulate regeneration processes, including wound healing, is not described in the literature. The experiment showed unpredictable results.

Факт применения гипоаконитина с достижением нового технического результата, заключающегося в стимуляции заживления ран, для специалиста не является очевидным.The fact of using hypoaconitin with the achievement of a new technical result, which consists in stimulating wound healing, is not obvious to a specialist.

Новые свойства не вытекают явным образом из уровня техники в данной области и не обнаружены в патентной и научно-технической литературе. Предлагаемое изобретение может быть использовано в медицине.New properties do not follow explicitly from the prior art in this field and are not found in the patent and scientific literature. The present invention can be used in medicine.

Исходя из вышеизложенного, следует считать заявляемое техническое решение соответствующим критериям: «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».Based on the foregoing, the claimed technical solution should be considered relevant criteria: "Novelty", "Inventive step", "Industrial applicability".

Эксперименты были проведены на 86 беспородных мышах-самцах. Животные получены из питомника отдела экспериментального биомедицинского моделирования ФГБУ «НИИ фармакологии» СО РАМН.The experiments were conducted on 86 outbred male mice. The animals were obtained from the nursery of the experimental biomedical modeling department of the Research Institute of Pharmacology SB RAMS.

Исследования проводили в соответствии с правилами лабораторной практики (GLP), Приказом МЗСР РФ №708н от 23.08.2010 «Об утверждении правил лабораторной практики», Федеральным Законом от 12 апреля 2010 г. №61-ФЗ «Об обращении лекарственных средств», «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (Москва, 2005).The studies were carried out in accordance with the rules of laboratory practice (GLP), Order of the Ministry of Health and Social Development of the Russian Federation No. 708n dated 08/23/2010 “On approval of the rules of laboratory practice”, Federal Law of April 12, 2010 No. 61-FZ “On the circulation of medicines”, “Manual on experimental (preclinical) study of new pharmacological substances ”(Moscow, 2005).

Пример 1Example 1

Ранозаживляющую активность предлагаемого средства и механизмы его действия изучали на модели плоскостной кожной раны [11]. На депилированном участке спины у мышей под легким эфирным наркозом вырезали лоскут кожи размером 10×10 мм. Для моделирования более длительного заживления струп с экспериментальной раны регулярно (через сутки) снимали.The wound healing activity of the proposed agent and its mechanisms of action were studied on a model of planar skin wounds [11]. A skin flap 10 × 10 mm in size was cut out on the depilated back area in mice under mild ether anesthesia. To simulate longer healing, the scabs were removed from the experimental wound regularly (every other day).

Предлагаемое средство получали из травы аконита байкольского и живокости высокой. Надземная часть растений, собранная в период цветения в Иркутской области, измельчалась до размера частиц менее 5 мм, обрабатывалась раствором карбоната натрия и подвергалась непрерывной экстракции хлороформом в течение 5 суток. Хлороформный экстракт упаривали до небольшого объема и тщательно экстрагировали 5% серной кислотой. Кислотную вытяжку подщелачивали карбонатом натрия до рН 9-10 и экстрагировали сначала эфиром. Эфирный экстракт упаривали досуха, растворяли в небольшом количестве эфира и хроматографировали на дезактивированной окиси алюминия в системе гексан-ацетон (90→50%). При этом гипаконитин, дополнительно очищенный перекристаллизацией из смеси тех же растворителей, элюировался после мезаконитина. Вещество растворяли в дистиллированной воде до конечной концентрации 0,00025%.The proposed tool was obtained from the grass of aconite Baykolsky and high liveliness. The aerial part of plants collected during the flowering period in the Irkutsk Region was ground to a particle size of less than 5 mm, treated with a solution of sodium carbonate and subjected to continuous extraction with chloroform for 5 days. The chloroform extract was evaporated to a small volume and carefully extracted with 5% sulfuric acid. The acid extract was made alkaline with sodium carbonate to pH 9-10 and extracted first with ether. The ether extract was evaporated to dryness, dissolved in a small amount of ether and chromatographed on deactivated alumina in a hexane-acetone system (90 → 50%). In this case, hypakonitin, additionally purified by recrystallization from a mixture of the same solvents, was eluted after mesaconitin. The substance was dissolved in distilled water to a final concentration of 0,00025%.

Полученное средство применяли наружно, начиная с первого дня после моделирования раны, ежедневно в течение всего периода заживления. Раствор наносили в объеме 30 мкл. В качестве средств сравнения использовали гель «Солкосерил» (Ай Си Эн Швейцария АГ, Швейцария) и «Облепиховое масло» (ОАО Нижфарм, Россия), которые применяли по той же схеме и в эквивалентном количестве, что и раствор гипаконитина.The resulting tool was applied externally, starting from the first day after modeling the wound, daily for the entire healing period. The solution was applied in a volume of 30 μl. The Solcoseryl gel (IC CN Switzerland AG, Switzerland) and the Sea-buckthorn oil (Nizhpharm OJSC, Russia) were used as comparison tools, which were used according to the same scheme and in an equivalent amount as the hypaconitine solution.

Критериями стимулирующего регенерацию действия служили средний диаметр раны и результаты гистологического исследования биоптатов кожи мышей, полученных на 15-е сутки из края раневого дефекта. Биопсийные образцы раневого дефекта кожи окрашивали гематоксилин-эозином. В каждом препарате оценивали: рельеф регенерата кожи, степень и характер инфильтрации, наличие и выраженность отека, количество новообразованных сосудов, волосяных фолликулов и потовых желез. Изучали такие патоморфологические процессы, как акантоз, гиперкератоз, дискератоз [12]. На 3-и и 5-е сут методом клонирования определяли содержание мезенхимальных клеток-предшественников (КОЕ-Ф) в раневой поверхности [13], а также методом колониеобразования в тест-системе изучали продукцию гуморальных факторов стромальными клетками кожи (колониеобразующую активность супернатантов адгезирующих клеток с раневой поверхности в отношении КОЕ-Ф костного мозга) [13]. Кроме того, определяли прямое влияние гипаконитина на КОЕ-Ф. Для этого его вносили в культуру миелокариоцитов в концентрации 100 нМоль/мл, после чего на 7-е сут подсчитывали количество колоний [13]. Обработку результатов проводили методом вариационной статистики с использованием t критерия Стьюдента и непараметрического U критерия Манна-Уитни.The criteria for stimulating regeneration of action were the average diameter of the wound and the results of a histological examination of biopsy specimens of the skin of mice obtained on the 15th day from the edge of the wound defect. Biopsy samples of a wound skin defect were stained with hematoxylin-eosin. In each preparation, the skin regenerate relief, the degree and nature of infiltration, the presence and severity of edema, the number of newly formed vessels, hair follicles, and sweat glands were evaluated. Pathomorphological processes such as acanthosis, hyperkeratosis, and dyskeratosis were studied [12]. On days 3 and 5, the content of mesenchymal progenitor cells (CFU-F) in the wound surface was determined by cloning [13], and the production of humoral factors by stromal skin cells (colony-forming activity of adhesive cell supernatants was studied in the test system using colony formation) from the wound surface in relation to CFU-F bone marrow) [13]. In addition, the direct effect of hypaconitine on CFU-F was determined. For this, it was introduced into the culture of myelocaryocytes at a concentration of 100 nMol / ml, after which the number of colonies was counted on the 7th day [13]. The results were processed by the method of variation statistics using the Student t test and the nonparametric Mann-Whitney U test.

В ходе эксперимента заживление ран у контрольных животных отмечалось к 18 сут опыта. Использование гипаконитина способствовало значительному ускорению процессов регенерации. Заживление дефекта при использовании предлагаемого средства наблюдалось к 14 сут опыта, в то время как при применении средств сравнения таковое отмечалось лишь к 16 сут. При этом в опытной группе (гипаконитин) имело место наиболее выраженное снижение размера ран (табл.1).During the experiment, wound healing in control animals was noted by day 18 of the experiment. The use of hypaconitine significantly accelerated the regeneration processes. The healing of the defect when using the proposed remedy was observed by the 14th day of the experiment, while when using the means of comparison, this was noted only by the 16th day. Moreover, in the experimental group (hypakonitin) there was a most pronounced decrease in the size of the wounds (Table 1).

При гистологическом исследовании процессов, протекающих в области раневого дефекта кожи мышей, показал, что в контрольной группе имело место формирование неполноценного регенерата. В подавляющем большинстве случаев поверхностный эпителий наблюдался не на всем протяжении, встречались небольшие участки отслойки эпидермиса от дермы с наличием субэпидермальных щелей, отмечалось резкое утолщение эпителиального пласта с нечеткой дифференцировкой слоев и увеличение количества базального, зернистого и рогового слоев. Внутриэпителиально обнаруживались нейтрофильные лейкоциты с формированием микроабсцессов, наблюдались слабовыраженные явления акантоза, гипер- и дискератоза. Подлежащая ткань была представлена созревающими грануляциями с умеренной гистиоцитарно-лейкоцитарной инфильтрацией, явлением отека и очагами кровоизлияний в верхних слоях дермы. Во всех образцах в прилежащей к зоне дефекта ткани отмечается малое количество волосяных фолликулов и потовых желез. Регенерат кожи у животных контрольной группы характеризовался умеренным воспалением, что привело к усиленной пролиферации эпителия, для которой характерны атипические разрастания и изменения эпителия в виде акантоза, гипер- и дискератоза. Изучение гистоструктуры раневого дефекта в группе животных, получавших терапию гипаконитином, показало формирование полноценного соединительнотканного рубца, покрытого эпителием. В остальных образцах (группы сравнения) эпителиальный слой был резко неравномерный, с утолщением в зоне дефекта за счет клеток базального слоя. Подлежащая ткань - грануляционная, местами с очаговой умеренной нейтрофильной инфильтрацией. В области, прилежащей к дефекту, во всех образцах ткани отмечалось умеренное количество волосяных фолликулов и потовых желез. При этом количество животных, у которых произошла полная эпителизация при использовании предлагаемого средства было достоверно выше, чем в контроле (табл.2).A histological examination of the processes occurring in the area of a wound defect in the skin of mice showed that formation of an inferior regenerate took place in the control group. In the overwhelming majority of cases, the surface epithelium was not observed along the entire length, there were small areas of epidermal detachment from the dermis with the presence of subepidermal fissures, a sharp thickening of the epithelial layer with fuzzy differentiation of layers was noted, and an increase in the number of basal, granular and horny layers. Neutrophilic leukocytes with the formation of microabscesses were detected intraepithelially, mild manifestations of acanthosis, hyper- and diskeratosis were observed. The underlying tissue was represented by maturing granulations with moderate histiocytic-leukocyte infiltration, the phenomenon of edema and foci of hemorrhage in the upper layers of the dermis. In all samples, a small amount of hair follicles and sweat glands is observed in the tissue adjacent to the defect zone. The skin regenerate in animals of the control group was characterized by moderate inflammation, which led to increased proliferation of the epithelium, which is characterized by atypical growths and changes in the epithelium in the form of acanthosis, hyper- and diskeratosis. The study of the histostructure of the wound defect in the group of animals treated with hypaconitin therapy showed the formation of a full connective tissue scar covered with epithelium. In the remaining samples (comparison group), the epithelial layer was sharply uneven, with a thickening in the defect zone due to the cells of the basal layer. The underlying tissue is granulation, in places with focal moderate neutrophilic infiltration. In the area adjacent to the defect, a moderate amount of hair follicles and sweat glands was noted in all tissue samples. At the same time, the number of animals in which complete epithelization occurred when using the proposed agent was significantly higher than in the control (Table 2).

Исследование механизмов регенеративной активности данного средства выявило ряд уникальных феноменов. Применение алкалоида сопровождалось существенным увеличением числа КОЕ-Ф в раневой поверхности (табл.3) и ускорением их дифференцировки (табл.4). При этом выявленные изменения наблюдались на фоне возрастания продукции ростовых факторов стромальными клетками кожи (табл.5). В то же время отмечалось и прямое действие данного алкалоида на прогениторные клетки. Его внесение в культуру миелокариоцитов сопровождалось значительным увеличением выхода в метилцеллюлозной среде числа КОЕ-Ф (табл.6). При этом средства сравнения на данные параметры влияния не оказывали (табл.3-6).The study of the mechanisms of the regenerative activity of this drug revealed a number of unique phenomena. The use of alkaloid was accompanied by a significant increase in the number of CFU-F in the wound surface (Table 3) and the acceleration of their differentiation (Table 4). Moreover, the revealed changes were observed against the background of an increase in the production of growth factors by stromal skin cells (Table 5). At the same time, the direct effect of this alkaloid on progenitor cells was noted. Its introduction into the culture of myelokaryocytes was accompanied by a significant increase in the yield of CFU-F in methyl cellulose medium (Table 6). At the same time, the means of comparison did not have an effect on these parameters (Table 3-6).

В целом полученные результаты свидетельствуют о наличии способности у гипаконитина значительно стимулировать процессы заживления ран. Механизмами действия алкалоида является активация резидентных мезенхимальных клеток-предшественников, связанная как с его прямым влиянием на прогениторные клетки, так и с опосредованным повышением выработки ростовых факторов стромальными клетками кожи действием.In general, the obtained results indicate the ability of hypakonitin to significantly stimulate the healing processes of wounds. The mechanisms of action of the alkaloid are the activation of resident mesenchymal progenitor cells, associated both with its direct effect on progenitor cells, and with an indirect increase in the production of growth factors by stromal skin cells by action.

Таблица 1Table 1 Динамика среднего диаметра ран, в см (Х±т)The dynamics of the average diameter of the wounds, in cm (X ± t) Сроки исследования/суткиStudy Dates / Day КонтрольThe control ГипаконитинHypakonitin СолкосерилSolcoseryl Облепиховое маслоSea buckthorn oil 1one 1,09±0,011.09 ± 0.01 1,12±0,021.12 ± 0.02 1,06±0,031.06 ± 0.03 1,03±0,021.03 ± 0.02 33 0,98±0,020.98 ± 0.02 0,94±0,030.94 ± 0.03 1,0±0,021.0 ± 0.02 0,92±0,040.92 ± 0.04 55 0,9±0,020.9 ± 0.02 0,79±0,02*0.79 ± 0.02 * 0,78±0,03*0.78 ± 0.03 * 0,9±0,030.9 ± 0.03 77 0,76±0,030.76 ± 0.03 0,61±0,040.61 ± 0.04 0,73±0,020.73 ± 0.02 0,67±0,02*0.67 ± 0.02 * 99 0,57±0,020.57 ± 0.02 0,52±0,030.52 ± 0.03 0,51±0,01*0.51 ± 0.01 * 0,54±0,030.54 ± 0.03 1212 0,28±0,030.28 ± 0.03 0,17±0,02*0.17 ± 0.02 * 0,21±0,01*0.21 ± 0.01 * 0,2±0,01*0.2 ± 0.01 * 1313 0,20±0,020.20 ± 0.02 0,06±0,01*0.06 ± 0.01 * 0,14±0,01*0.14 ± 0.01 * 0,16±0,020.16 ± 0.02 14fourteen 0,1±0,030.1 ± 0.03 0,0±0,00,0 ± 0,0 0,07±0,010.07 ± 0.01 0,06±0,020.06 ± 0.02 1616 0,06±0,030.06 ± 0.03 0,0±0,00,0 ± 0,0 0,0±0,00,0 ± 0,0 0,0±0,00,0 ± 0,0 * - отмечена достоверность относительно контроля при р<0,05* - reliability was noted relative to control at p <0.05

Таблица 2table 2 Доля животных с полной эпителизацией места дефекта кожи, в % (Х±m)The proportion of animals with complete epithelization of the skin defect site, in% (X ± m) КонтрольThe control ГипаконитинHypakonitin СолкосерилSolcoseryl Облепиховое маслоSea buckthorn oil 4,6±0,94.6 ± 0.9 91,2±5,47*91.2 ± 5.47 * 56,4±10,3*56.4 ± 10.3 * 51,7±9,4*51.7 ± 9.4 * * - отмечена достоверность относительно контроля при р<0,05* - reliability was noted relative to control at p <0.05

Таблица 3Table 3 Содержание мезенхимальных клеток-предшественников в раневой поверхности, на 2,5×10⁵ нуклеаров, (Х±m)The content of mesenchymal progenitor cells in the wound surface, 2.5 × 10 ⁵ nuclears, (X ± m) Сроки исследования/суткиStudy Dates / Day КонтрольThe control ГипаконитинHypakonitin СолкосерилSolcoseryl Облепиховое маслоSea buckthorn oil 33 0,67±0,210.67 ± 0.21 2,83±0,31*2.83 ± 0.31 * 0,7±0,30.7 ± 0.3 0,65±0,190.65 ± 0.19 55 1,17±0,31.17 ± 0.3 3,0±0,37*3.0 ± 0.37 * 1,0±0,221.0 ± 0.22 0,92±0,430.92 ± 0.43 * - отмечена достоверность относительно контроля при р<0,05* - reliability was noted relative to control at p <0.05

Таблица 4Table 4 Индекс дифференцировки клеток-предшественников (отношение кластреробразующих единиц фибробластов к колониеобразующим единицам фибробластов) в раневой поверхности, в усл. ед., (Х±m)The differentiation index of progenitor cells (the ratio of clustering units of fibroblasts to colony forming units of fibroblasts) in the wound surface, in conv. units, (X ± m) Сроки исследования/суткиStudy Dates / Day КонтрольThe control ГипаконитинHypakonitin СолкосерилSolcoseryl Облепиховое маслоSea buckthorn oil 33 1,33±0,211.33 ± 0.21 1,82±0,21.82 ± 0.2 1,34±0,191.34 ± 0.19 1,42±0,371.42 ± 0.37 55 1,42±0,271.42 ± 0.27 2,4±0,26*2.4 ± 0.26 * 1,36±0,221.36 ± 0.22 1,41±0,161.41 ± 0.16 * - отмечена достоверность относительно контроля при р<0,05* - reliability was noted relative to control at p <0.05

Таблица 5Table 5 Колониестимулирующая активность супернатантов стромальных клеток кожи, в усл. Ед. ×10⁵, (Х±m)Colony-stimulating activity of supernatants of stromal skin cells, in conv. Units × 10 ⁵ , (X ± m) Сроки исследования/суткиStudy Dates / Day КонтрольThe control ГипаконитинHypakonitin СолкосерилSolcoseryl Облепиховое маслоSea buckthorn oil 33 8,08±0,578.08 ± 0.57 13,25±0,88*13.25 ± 0.88 * 11,3±2,4211.3 ± 2.42 7,65±0,787.65 ± 0.78 55 0,17±0,110.17 ± 0.11 2,75±0,28*2.75 ± 0.28 * 1,0±0,571.0 ± 0.57 0,19±0,030.19 ± 0.03 * - отмечена достоверность относительно контроля при р<0,05* - reliability was noted relative to control at p <0.05

Таблица 6Table 6 Число КОЕ-Ф в культуре клеток костного мозга при добавлении стимуляторов регенерации, на 2,5×10⁵ миелокариоцитов, (Х±m)The number of CFU-F in the bone marrow cell culture with the addition of regeneration stimulants, by 2.5 × 10 ⁵ myelocaryocytes, (X ± m) КонтрольThe control ГипаконитинHypakonitin СолкосерилSolcoseryl Облепиховое маслоSea buckthorn oil 12,25±0,8512.25 ± 0.85 17,6±0,33*17.6 ± 0.33 * 13,7±0,6413.7 ± 0.64 10,32±0,7910.32 ± 0.79 * - отмечена достоверность относительно контроля при р<0,05* - reliability was noted relative to control at p <0.05

ЛитератураLiterature

1. Машковский М.Д. Лекарственные средства: 15-е изд. - М.: OO «Изд-во Новая Волна», 2008. - 1206 с.1. Mashkovsky M.D. Medicines: 15th ed. - M .: OO "Publishing House New Wave", 2008. - 1206 p.

2. Котельников В.П. Раны и их лечение. - М.: Знание. 1991. - 123 с.2. Kotelnikov V.P. Wounds and their treatment. - M .: Knowledge. 1991 .-- 123 p.

3. Погодаева Н.Н., Жапова Ц., Верещагин А.Л., Горшков А.Г., Семенов А.А. / Изучение алкалоидного состава некоторых видов сибирских аконитов // Раст. ресурсы, вып.2, 2000 г., с.79-84.3. Pogodaeva NN, Zhapova Ts., Vereshchagin A. L., Gorshkov A. G., Semenov A. A. / Study of the alkaloid composition of some species of Siberian aconites // Rast. Resources, issue 2, 2000, p. 79-84.

4. Бабаева А.Г. Регенерация: факты и перспективы. - М.: Изд-во РАМН, 2009. - 336 с.4. Babaeva A.G. Regeneration: facts and perspectives. - M.: Publishing House of the RAMS, 2009 .-- 336 p.

5. Дыгай A.M., Зюзьков Г.Н., Жданов В.В. и др. Иммобилизированный гранулоцитарный колониестимулирующий фактор. Фармакологические свойства и перспективы использования. - Томск: ООО «Печатная мануфактура», 2011. - 149 с.5. Digay A.M., Zyuzkov G.N., Zhdanov V.V. and others. Immobilized granulocyte colony stimulating factor. Pharmacological properties and prospects of use. - Tomsk: LLC “Printing Manufactory”, 2011. - 149 p.

6. Дыгай A.M., Зюзьков Г.Н. Клеточная терапия: новые подходы // Наука в России. - М.: Наука, 2009. - Том. 169. - №1. - С.4-8.6. Digay A.M., Zyuzkov G.N. Cell therapy: new approaches // Science in Russia. - M .: Nauka, 2009. - Volume. 169. - No. 1. - S. 4-8.

7. Нестерова Ю.В., Поветьева Т.Н., Нагорняк Ю.Г., Перова А.В., Андреева Т.И., Рослякова Е.П., Суслов Н.И. Механизмы влияния комплексных и выделенных веществ на репаративную активность тканей в эксперименте // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2009. - Т.72, №3. - С.40-43.7. Nesterova Yu.V., Povetieva T.N., Nagornyak Yu.G., Perova A.V., Andreeva T.I., Roslyakova E.P., Suslov N.I. The mechanisms of the influence of complex and excreted substances on the reparative activity of tissues in an experiment // Experimental and Clinical Pharmacology. - 2009. - T.72, No. 3. - S. 40-43.

8. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия: Учебник 3-е изд. М.: Медицина, 2002.8. Muravyova D.A., Samylina I.A., Yakovlev G.P. Pharmacognosy: Textbook 3rd ed. M .: Medicine, 2002.

9. Осадчий С.А., Ганбаатар Ж., Шульц Э.Э., Толстиков Г.А. Алкалоиды сибирских видов живокости и аконита и их превращения // Материалы Первой Международной конференции "Химия и биологическая активность азотистых гетероциклов и алкалоидов" (том 1) Москва, 9-12 октября 2001 г.9. Osadchiy S.A., Ganbaatar J., Schulz E.E., Tolstikov G.A. Alkaloids of Siberian species of anthrax and aconite and their transformation // Materials of the First International Conference "Chemistry and Biological Activity of Nitrogen Heterocycles and Alkaloids" (Volume 1) Moscow, October 9-12, 2001

10. Алефиров А.Н. Борец за жизнь. Аконит / А.Н.Алефиров. - СПб.: ИД «Весь», 2002. - 192 с.10. Alefirov A.N. A fighter for life. Aconite / A.N. Alefirov. - St. Petersburg: Publishing House "Ves", 2002. - 192 p.

11. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией член-корр. РАМН, проф. Р.У.Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО «Издательство "Медицина"», 2005. - 832 с.11. Guidance on the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances / Edited by the corresponding member. RAMS, prof. R.U. Khabrieva. - 2-ed., Revised. and add. - M .: OJSC "Publishing house" Medicine ", 2005. - 832 p.

12. Микроскопическая техника / Под ред. Д.С.Саркисова. М., 1996.12. Microscopic technology / Ed. D.S. Sarkisova. M., 1996.

13. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии. Томск, 1992.13. Goldberg E.D., Dygay A.M., Shakhov V.P. Methods of tissue culture in hematology. Tomsk, 1992.

Claims

The use of hypaconitin as a means of having wound healing activity.