RU2535021C1

RU2535021C1 - Haemostimulating agent

Info

Publication number: RU2535021C1
Application number: RU2013148177/15A
Authority: RU
Inventors: Глеб Николаевич Зюзьков; Вадим Вадимович Жданов; Елена Владимировна Удут; Лариса Аркадьевна Мирошниченко; Елена Владиславовна Симанина; Николай Иннокентьевич Суслов; Татьяна Николаевна Поветьева; Александр Михайлович Дыгай
Priority date: 2013-10-29
Filing date: 2013-10-29
Publication date: 2014-12-10

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: what is declared is using Zongorine as a haemostimulating agent.

EFFECT: agent is the high-effective and haemostimulating agent.

2 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии и гематологии.The invention relates to medicine, specifically to pharmacology and hematology.

Высокая частота встречаемости анемических состояний и их влияние на продолжительность и качество жизни пациентов [1-3] являются основанием широкого применения специфических гемостимулирующих средств в медицинской практике.The high frequency of occurrence of anemic conditions and their impact on the duration and quality of life of patients [1-3] are the basis for the widespread use of specific hemostatic agents in medical practice.

Известно большое количество гемостимулирующих средств [1-3].A large number of hemostatic agents are known [1-3].

Наиболее близкими по техническому результату к предлагаемому средству являются препараты рекомбинантного эритропоэтина [2-4].The closest in technical result to the proposed tool are preparations of recombinant erythropoietin [2-4].

Недостатками данных средств являются побочные эффекты и осложнения [4-7], связанные с иммуногенностью эритропоэтина, представляющего собой вещество белковой природы, и единственно возможным путем их назначения - парентеральным введением. В частности, могут развиваться аллергические реакции различной интенсивности, в том числе сопровождаемые аплазией костного мозга. В связи с этим существует необходимость создания безопасных гемостимулирующих средств.The disadvantages of these funds are side effects and complications [4-7] associated with the immunogenicity of erythropoietin, which is a protein substance, and the only possible route of administration is parenteral administration. In particular, allergic reactions of various intensities may develop, including those accompanied by bone marrow aplasia. In this regard, there is a need to create safe hemostatic agents.

Задачей, решаемой настоящим изобретением, является расширение арсенала высокоэффективных безопасных гемостимулирующих средств.The problem solved by the present invention is to expand the arsenal of highly effective safe hemostatic agents.

Поставленная задача достигается применением зонгорина в качестве гемостимулирующего средства.The problem is achieved by the use of zonorin as a hemostatic agent.

Новым в предлагаемом изобретении является использование в качестве гемостимулирующего средства зонгорина.New in the present invention is the use as hemostatic agent zongorin.

Используемое оригинальное средство зонгорина было разработано и получено ФГБУ «НИИ фармакологии» СО РАМН (г. Томск) и представляло собой 0,00025% водный раствор данного алкалоида. Зонгорин извлекался из растительного сырья (травы растений семейства лютиковых) в виде свободных оснований экстракцией стандартным методом [8].The original zongorin agent used was developed and obtained by the FSBI Research Institute of Pharmacology SB RAMS (Tomsk) and was a 0.00025% aqueous solution of this alkaloid. Zongorin was extracted from plant materials (grasses of plants of the buttercup family) in the form of free bases by extraction by the standard method [8].

В практической медицине для лечения анемических состояний, представляющих собой как самостоятельные заболевания, так и патологический синдром, встречающийся при различных нозологиях, достаточно часто используют препараты на основе эритропоэтина (ЭП) [2, 4]. При этом белковая природа указанного вещества предопределяет существование единственно возможного - парентерального пути его введения в организм и значительного риска развития побочных эффектов и осложнений [4-7], обусловленных иммуногенностью данного линейно-рестриктированного фактора роста эритроидных гемопоэтических клеток.In practical medicine, drugs based on erythropoietin (EP) are often used to treat anemic conditions, which are both independent diseases and the pathological syndrome encountered in various nosologies [2, 4]. Moreover, the protein nature of this substance determines the existence of the only possible way - the parenteral route of its introduction into the body and a significant risk of side effects and complications [4–7] due to the immunogenicity of this linearly-restricted growth factor of erythroid hematopoietic cells.

Кроме того, известна возможность стимуляции процессов кроветворения с помощью дитерпенового алкалоида напеллина. Однако эффекты данного небелкового средства заключаются в стимуляции исключительно гранулоцитарного ростка кроветворения [9]. Стимуляции эритропоэза при его применении не наблюдается.In addition, it is known that hematopoiesis can be stimulated with the help of the diterpenic alkaloid napellin. However, the effects of this non-proteinaceous remedy consist in stimulating exclusively the granulocytic germ of hematopoiesis [9]. Stimulation of erythropoiesis with its use is not observed.

В ФГБУ «НИИ фармакологии» СО РАМН было установлено выраженное стимулирующее влияние другого алкалоида - зонгорина в отношении стромальных прогениторных клеток кожи и процесса заживления кожных ран при использовании его наружно [10]. При этом влияние зонгорина на процессы кроветворения и возможность стимуляции эритроидного ростка кроветворения в мировой литературе не описаны. Эксперимент показал непредсказуемые результаты.The FSBI Research Institute of Pharmacology SB RAMS established a pronounced stimulating effect of another alkaloid, zgororin, in relation to stromal progenitor skin cells and the healing process of skin wounds when used externally [10]. At the same time, the influence of zongorin on blood formation processes and the possibility of stimulating an erythroid germ of blood formation are not described in the world literature. The experiment showed unpredictable results.

Факт применения зонгорина с достижением нового технического результата, заключающегося в стимуляции гемопоэза, для специалиста является неочевидным.The fact of using zongorin with the achievement of a new technical result, which consists in stimulating hematopoiesis, is not obvious for a specialist.

Новые свойства не вытекают явным образом из уровня техники в данной области и не обнаружены в патентной и научно-технической литературе.New properties do not follow explicitly from the prior art in this field and are not found in the patent and scientific literature.

Предлагаемое изобретение может быть использовано в медицине.The present invention can be used in medicine.

Исходя из вышеизложенного, следует считать заявляемое техническое решение соответствующим критериям: «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».Based on the foregoing, the claimed technical solution should be considered relevant criteria: "Novelty", "Inventive step", "Industrial applicability".

Эксперименты были проведены на 64 мышах линии CBA/CaLac. Животные получены из питомника отдела экспериментального биомедицинского моделирования ФГБУ «НИИ фармакологии» СО РАМН.Experiments were performed on 64 CBA / CaLac mice. The animals were obtained from the nursery of the experimental biomedical modeling department of the Research Institute of Pharmacology SB RAMS.

Исследования проводили в соответствии с правилами лабораторной практики (GLP), Приказом МЗСР РФ №708н от 23.08.2010 «Об утверждении правил лабораторной практики», Федеральным Законом от 12 апреля 2010 г. №61-ФЗ «Об обращении лекарственных средств», «Методическими указаниями по изучению гемостимулирующей активности фармакологических веществ» (2002) [11].The studies were carried out in accordance with the rules of laboratory practice (GLP), Order of the Ministry of Health of the Russian Federation No. 708n dated 08/23/2010 “On the approval of laboratory practice rules”, Federal Law of April 12, 2010 No. 61-ФЗ “On circulation of medicines”, “Methodological guidelines for the study of hemostimulating activity of pharmacological substances ”(2002) [11].

Пример 1Example 1

Предлагаемое средство получали из травы аконита байкальского и живокости высокой (растения семейства лютиковых). Надземная часть растений, собранная в период цветения в Иркутской области, измельчалась до размера частиц менее 5 мм, обрабатывалась раствором карбоната натрия и подвергалась непрерывной экстракции хлороформом в течение 5 суток. Хлороформный экстракт упаривали до небольшого объема и тщательно экстрагировали 5% серной кислотой. Кислотную вытяжку подщелачивали карбонатом натрия до pH 9-10 и последовательно экстрагировали сначала эфиром, затем хлороформом. Эфирный экстракт упаривали досуха, растворяли в небольшом количестве эфира и хроматографировали на дезактивированной окиси алюминия в системе гексан-ацетон (9→50%). Эфирорастворимую фракцию подвергли дробной экстракции буферными растворами с увеличивающимися значениями pH. Эфирный раствор, оставшийся после экстракции наиболее щелочным буфером, упаривали досуха и хроматографировали на окиси алюминия в системе гексан-метанол до элюции зоноргина, происходящей после выхода напелина. Вещество растворяли в дистиллированной воде до конечной концентрации 0,00025%.The proposed tool was obtained from the grass of Baikal aconite and high liveliness (plants of the buttercup family). The aerial part of plants collected during the flowering period in the Irkutsk Region was ground to a particle size of less than 5 mm, treated with a solution of sodium carbonate and subjected to continuous extraction with chloroform for 5 days. The chloroform extract was evaporated to a small volume and carefully extracted with 5% sulfuric acid. The acid extract was made alkaline with sodium carbonate to pH 9-10 and sequentially extracted first with ether and then with chloroform. The ether extract was evaporated to dryness, dissolved in a small amount of ether and chromatographed on deactivated alumina in a hexane-acetone system (9 → 50%). The ester-soluble fraction was subjected to fractional extraction with buffer solutions with increasing pH values. The ethereal solution remaining after extraction with the most alkaline buffer was evaporated to dryness and chromatographed on alumina in a hexane-methanol system to elute the zonorgin after napelin emerged. The substance was dissolved in distilled water to a final concentration of 0,00025%.

Пример 2Example 2

Эффективность стимуляции гемопоэза определялась на модели цитостатической миелосупрессии в соответствии с методическими указаниями по изучению гемостимулирующей активности фармакологических веществ [11].The effectiveness of hematopoiesis stimulation was determined on the model of cytostatic myelosuppression in accordance with the guidelines for the study of hemostimulating activity of pharmacological substances [11].

Цитостатическую миелосупрессию моделировали путем однократного внутрибрюшинно введения раствора 5-фторурацила (5-ФУ) в ¹/₂ максимально переносимой дозы (МПД) (114 мг/кг). Начиная со следующего дня после введения цитостатика мыши опытной группы получали per os 0,00025% - водный раствор зонгорина по 0,025 мг/кг 1 раз в сутки в течение 5 дней. Контрольным животным в аналогичных условиях вводили растворитель (дистиллированную воду) в эквивалентном объеме (0,2 мл).Cytostatic myelosuppression was modeled by a single intraperitoneal injection of a solution of 5-fluorouracil (5-FU) in ^1/2 _{of the} maximum tolerated dose (MTD) (114 mg / kg). Starting from the day after the administration of cytostatic, the mice of the experimental group received per os 0,00025% - an aqueous solution of zgororin at 0.025 mg / kg once a day for 5 days. Control animals under similar conditions were injected with a solvent (distilled water) in an equivalent volume (0.2 ml).

На 5, 8-е и 12-е сут после введения цитостатика животных умерщвляли путем ингаляции CO₂. У опытных и контрольных мышей общепринятыми методами определяли содержание ретикулоцитов в периферической крови, а также показатели костномозгового кроветворения (общее количество миелокариоцитов, миелограмма) [12]. Содержание коммитированных клеток - предшественников эритропоэза (КОЕ-Э) и стромальных механоцитов (КОЕ-Ф) в костном мозге, а также продукцию эритропоэтически активных субстанций (ЭПА) прилипающими и неприлипающими элементами гемопоэзиндуцирующего микроокружения (ГИМ) определяли с помощью культуральных методов in vitro [12].On days 5, 8, and 12 after administration of the cytostatic, the animals were killed by inhalation of CO ₂ . In experimental and control mice, the content of reticulocytes in peripheral blood, as well as indicators of bone marrow hematopoiesis (total number of myelocaryocytes, myelogram) were determined by conventional methods [12]. The content of committed cells - precursors of erythropoiesis (CFU-E) and stromal mechanocytes (CFU-F) in the bone marrow, as well as the production of erythropoietically active substances (EPA) by adherent and non-adherent elements of the hematopoietic inducing microenvironment (GIM) was determined using in vitro culture methods [12 ].

Статистическую обработку полученных данных проводили методом вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента. В случаях отклонения распределения вариант в выборках от нормального для оценки достоверности различий применяли непараметрический критерий Уилкоксона-Манна-Уитни.Statistical processing of the obtained data was carried out by the method of variation statistics using t-student criterion. In cases of deviation of the distribution, the variant in the samples from normal to assess the significance of the differences, the non-parametric Wilcoxon-Mann-Whitney test was used.

В ходе эксперимента введение 5-ФУ проводило к развитию глубокой продолжительной депрессии эритроидного ростка кроветворения. На протяжении всего сроки исследования отмечалось падение содержания эритрокариоцитов в гемопоэтической ткани и количества ретикулоцитов в периферической крови (до 10,2% и 0,0% от фона на 5-е сут соответственно). Вместе с тем имела место выраженная компенсаторная реакция со стороны пула кроветворных предшественников. Регистрировалось возрастание числа костномозговых КОЕ-Э (табл.1), связанное с повышением продукции гемопоэтинов (ЭПА) прилипающими и неприлипающими миелокариоцитами. Кроме того, было выявлено возрастание функциональной активности мезенхимальных прекурсоров (табл.2), играющее важную роль в восстановлении поврежденного данным цитостатическим агентом ГИМ [13].During the experiment, the introduction of 5-FU led to the development of deep, prolonged depression of the erythroid germ of hematopoiesis. Throughout the study period, a decrease in the content of red blood cells in the hematopoietic tissue and the number of reticulocytes in the peripheral blood (up to 10.2% and 0.0% of the background on the 5th day, respectively) was noted. At the same time, there was a pronounced compensatory reaction from the pool of hematopoietic predecessors. An increase in the number of bone marrow CFU-E was recorded (Table 1), associated with an increase in the production of hematopoietins (EPA) by adherent and non-adherent myelocaryocytes. In addition, an increase in the functional activity of mesenchymal precursors was revealed (Table 2), which plays an important role in the restoration of GMM damaged by this cytostatic agent [13].

Введение зонгорина приводило к значительному повышению интенсивности восстановления процессов эритропоэза. Наблюдалось увеличение содержания эритрокариоцитов в костном мозге, которое на 8-е и 12-е сут эксперимента достигало уровней фоновых показателей и составляло 240,4% и 306,8% от аналогичных значений у животных цитостатического контроля. Отражением ускорения регенерации гемопоэтической ткани явилось появление значительного количества ретикулоцитов в периферической крови во все сроки наблюдения (табл.1).The introduction of zongorin led to a significant increase in the intensity of restoration of erythropoiesis processes. There was an increase in the content of erythrokaryocytes in the bone marrow, which on the 8th and 12th day of the experiment reached the levels of background indicators and amounted to 240.4% and 306.8% of the corresponding values in animals of the cytostatic control. A reflection of the acceleration of hematopoietic tissue regeneration was the appearance of a significant number of reticulocytes in the peripheral blood at all observation times (Table 1).

Исследование механизмов гемостимулирующего действия зонгорина выявило зависимость формирования картины крови и костного мозга от состояния пула костномозговых родоначальных клеток. Введение раствора исследуемого фармакологического вещества сопровождалось резким увеличением содержания эритроидных прекурсоров в гемопоэтической ткани на 5, 8-е и 12-е сут опыта (до 140,2%, 117,7 и 323,2% от цитостатического контроля соответственно) (табл.1).The study of the mechanisms of hemostimulating action of zgororin revealed the dependence of the formation of a blood picture and bone marrow on the state of the pool of bone marrow parent cells. The introduction of a solution of the studied pharmacological substance was accompanied by a sharp increase in the content of erythroid precursors in the hematopoietic tissue on the 5th, 8th and 12th days of the experiment (up to 140.2%, 117.7 and 323.2% of the cytostatic control, respectively) (Table 1 )

Реакция со стороны кроветворных предшественников, во многом, определялась изменением секреторной функции стромальных элементов ГИМ. В ходе эксперимента под влиянием зонгорина регистрировалось возрастание выработки эритропоэтически активных субстанций прилипающими миелокариоцитами на 5, 12-е сут опыта (табл.2).The reaction from the hematopoietic precursors, in many respects, was determined by the change in the secretory function of stromal elements of GIM. During the experiment, an increase in the production of erythropoietically active substances by adherent myelocaryocytes on the 5th, 12th day of the experiment was recorded under the influence of zongorin (Table 2).

При этом введение зонгорина приводило к снижению количества фибробластных КОЕ в костном мозге на 5 и 12-е сут эксперимента (табл.2). Указанный факт, исходя из сведений литературы о фармакологических свойствах зонгорина в отношении функций стромальных прогениторных элементов [10], показывает, что развитие выявленного феномена являлось результатом ускорения дифференцировки и созревания мезенхимальных предшественников и послужило основой описанного выше повышения роли ГИМ в восстановлении подавленного 5-ФУ эритропоэза. Причем развитие описанной реакции со стороны мезенхимальных прекурсоров при введении зонгорина носило компенсаторный характер, так как соответствовало динамики изменений данного параметра в цитостатическом контроле (табл.2), когда имеет место значительное участие КОЕ-Ф в регенерации ГИМ [9].In this case, the introduction of zongorin led to a decrease in the number of fibroblast CFU in the bone marrow on the 5th and 12th days of the experiment (Table 2). This fact, based on the literature on the pharmacological properties of zongorin with respect to the functions of stromal progenitor elements [10], shows that the development of the identified phenomenon was the result of accelerated differentiation and maturation of mesenchymal precursors and served as the basis for the increased role of GIM in the restoration of suppressed 5-FU erythropoiesis described above . Moreover, the development of the described reaction on the part of mesenchymal precursors with the introduction of zongorin was compensatory in nature, since it corresponded to the dynamics of changes in this parameter in the cytostatic control (Table 2), when there was significant participation of CFU-F in the regeneration of GIM [9].

В целом, полученные результаты свидетельствуют о выраженных гемостимулирующих свойствах зонгорина при его пероральном использовании. При этом механизмом ускорения регенерации кроветворной ткани является активация родоначальных гемопоэтических эритроидных клеток и возрастание фидерной способности стромального компартмента ГИМ. В то же время выявленное выраженное влияние зонгорина на функции фибробластных предшественников (содержащих в своем составе, помимо коммитированных прогениторных элементов, истинные (мультипотентные) стволовые клетки [10]) указывает на перспективность разработки на основе зонгорина не только гемостимулирующего средства, но и препарата для регенеративной медицины в целом.In general, the results obtained indicate the pronounced hemostimulating properties of zonorin when administered orally. At the same time, the mechanism of accelerating the regeneration of hematopoietic tissue is the activation of the original hematopoietic erythroid cells and the increase in the feeder ability of the stromal compartment of GIM. At the same time, the revealed pronounced effect of zongorin on the functions of fibroblast precursors (containing, in addition to committed progenitor elements, true (multipotent) stem cells [10]) indicates the prospect of developing not only a hemostatic agent, but also a regenerative drug based on zgorgin medicine in general.

ЛитератураLiterature

1) Metcalf D. Hemopoietic growth factors. 1 // The Lancet. - 1989. - Vol.15. - P.825-827.1) Metcalf D. Hemopoietic growth factors. 1 // The Lancet. - 1989 .-- Vol.15. - P.825-827.

2) Волкова М.А., Ширин А.Д. Эритропоэтин в лечении анемии при онкологических заболеваниях // Гематол. и трансфузиол. - 1997. - Т.42. - №6. - С.33-36.2) Volkova M.A., Shirin A.D. Erythropoietin in the treatment of anemia in oncological diseases // Hematol. and transfusiol. - 1997. - T. 42. - No. 6. - S.33-36.

3) Машковский М.Д. Лекарственные средства: 15-е изд. - М.: ОО «Изд-во Новая Волна», 2008. - 1206 с.3) Mashkovsky M.D. Medicines: 15th ed. - M.: Public Association "Publishing House New Wave", 2008. - 1206 p.

4) Коломоец Н.М., Бакшеев В.И. Эритропоэтин в клинической практике // Клиническая медицина. - 2007. - N 9. - С.30-37.4) Kolomoets N.M., Baksheev V.I. Erythropoietin in clinical practice // Clinical medicine. - 2007. - N 9. - S.30-37.

5) Bennett С., Luminari S., Nissenson A. e.a. Pure Red-Cell Aplasia and Epoetin Therapy // N. Engl. J. Med. - 2004. - №351. P. - 1403-1407.5) Bennett S., Luminari S., Nissenson A. e.a. Pure Red-Cell Aplasia and Epoetin Therapy // N. Engl. J. Med. - 2004. - No. 351. P. - 1403-1407.

6) Clarke JB. Mechanisms of adverse drug reactions to biologies // Handb Exp Pharmacol. 2010; (196):453-74.6) Clarke JB. Mechanisms of adverse drug reactions to biologies // Handb Exp Pharmacol. 2010; (196): 453-74.

7) Anderson J.A. Allergic reactions to drugs and biologic agents. JAMA. - 1992 - vol.268. - p.2845-2857.7) Anderson J.A. Allergic reactions to drugs and biologic agents. JAMA. - 1992 - vol. 268. - p. 2845-2857.

8) Патент (RU) на изобретение №2475260 «Средство, обладающее регенеративной активностью» (опубл. 20.02.2013, бюл. №5). Авторы: Зюзьков Г.Н., Поветьева Т.Н., Семенов А.А., Жданов В.В., Крапивин А.В., Нестерова Ю.В., Суслов Н.И., Фомина Т.И., Дыгай А.М.8) Patent (RU) for the invention No. 2475260 "Means with regenerative activity" (publ. 02/20/2013, bull. No. 5). Authors: Zyuzkov G.N., Povetieva T.N., Semenov A.A., Zhdanov V.V., Krapivin A.V., Nesterova Yu.V., Suslov N.I., Fomina T.I., Digay A.M.

9) Зюзьков Г.Н., Жданов В.В., Удут Е.В. и др. Механизмы стимулирующего регенерацию гемопоэтической ткани действия напеллина в условиях цитостатической миелосупрессии // Бюл. эксперим. биол. и медицины. - Изд-во РАМН, 2013. - №4. - С.431-434.9) Zyuzkov G.N., Zhdanov V.V., Udut E.V. et al. Mechanisms of hematopoietic tissue regeneration stimulating action of napellin under conditions of cytostatic myelosuppression // Bull. an experiment. biol. and medicine. - Publishing house of RAMS, 2013. - No. 4. - S. 431-434.

10) Зюзьков Г.Н., Крапивин А.В., Нестерова Ю.В. и др. Механизмы регенераторного действия дитерпеновых алкалоидов аконита байкальского // Бюл. эксперим. биол. и медицины. - 2012 - №6. - С.823-827.10) Zyuzkov G.N., Krapivin A.V., Nesterova Yu.V. et al. Mechanisms of the regenerative action of diterpenic alkaloids of aconite Baikal // Bull. an experiment. biol. and medicine. - 2012 - No. 6. - S. 823-827.

11) Дыгай A.M., Жданов В.В., Зюзьков Г.Н. и др. Методические рекомендации по изучению гемостимулирующей активности фармакологических веществ // Руководство по проведению доклинических исследований новых лекарственных средств. Часть первая / Под ред. А.Н. Миронова. - М.: Гриф и К, 2012. - С.759-766 (944 с.).11) Dygay A.M., Zhdanov V.V., Zyuzkov G.N. and other guidelines for the study of hemostimulating activity of pharmacological substances // Guidelines for preclinical studies of new drugs. Part One / Ed. A.N. Mironova. - M .: Grif and K, 2012 .-- S.759-766 (944 p.).

12) Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии. - Томск: Изд-во ТГУ, 1992. - 272 с.12) Goldberg E.D., Dygay A.M., Shakhov V.P. Methods of tissue culture in hematology. - Tomsk: Publishing house of TSU, 1992. - 272 p.

13) Dygai A.M., Zyuz′kov G.N., Zhdanov V.V., et al. Effect of Transplantation of Peripheral Blood Mononuclears Obtained Using Granulocytic Colony-Stimulating Factor and Hyaluronidase on Regeneration of Hemopoietic Tissue during Myelosuppression // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2009. - Vol.148. - №1. - P.120-125.13) Dygai A.M., Zyuz′kov G.N., Zhdanov V.V., et al. Effect of Transplantation of Peripheral Blood Mononuclears Obtained Using Granulocytic Colony-Stimulating Factor and Hyaluronidase on Regeneration of Hemopoietic Tissue during Myelosuppression // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2009. - Vol. 148. - No. 1. - P.120-125.

Таблица 1Table 1 Динамика содержания эритроидных клеток в костном мозге, ретикулоцитов в периферической крови, КОЕ-Э в костном мозге мышей линии CBA/CaLac после введения дистиллированной воды (1) либо зонгорина (2) на фоне однократного введения 5-фторурацила в ¹/₂ МПД (X±m; P)Dynamics of erythroid cells in the bone marrow reticulocytes in peripheral blood CFU-E in the bone marrow of mice CBA / CaLac after administration of distilled water (1) or zongorina (2) due to single administration of 5-fluorouracil ^_1/2 MTD (X ± m; P) Сроки исследования, суткиStudy time, days Группы Groups Эритроидные клетки (×10⁶/бедро)Erythroid cells (× 10 ⁶ / thigh) Ретикулоциты
( %)Reticulocytes
(%) КОЕ-Э (×10⁵ нуклеаров)CFU-E (× 10 ⁵ nuclears) до введенияbefore introduction 1,77±0,321.77 ± 0.32 36,00±2,0536.00 ± 2.05 22,00±3,0222.00 ± 3.02 55 1one 0,18±0,05*0.18 ± 0.05 * 00 51,67±3,57*51.67 ± 3.57 * 22 0,51±0,06*#0.51 ± 0.06 * # 16,59±3,1*#16.59 ± 3.1 * # 72,3±3,57*#72.3 ± 3.57 * # 88 1one 1,04±0,161.04 ± 0.16 3,33±0,76*3.33 ± 0.76 * 73,33±4,89*73.33 ± 4.89 * 22 2,5±0,42#2.5 ± 0.42 # 56,04±2,6*#56.04 ± 2.6 * # 8б,30±3,64 #8b, 30 ± 3.64 # 1212 1one 0,59±0,08*0.59 ± 0.08 * 14,33±0,49*14.33 ± 0.49 * 20,33±2,9120.33 ± 2.91 22 1,81±0,3#1.81 ± 0.3 # 38,00±1,53#38.00 ± 1.53 # б5,7±2,33*#b5.7 ± 2.33 * # Примечание: * - различия достоверны по отношению к фону, # - различия достоверны по отношению к группе, получавшей дистиллированную воду на фоне введения 5-фторурацила (1)Note: * - the differences are significant in relation to the background, # - the differences are significant in relation to the group receiving distilled water on the background of the introduction of 5-fluorouracil (1)

Таблица 2table 2 Динамика уровней эритропоэтической активности в супернатантах от неприлипающих, прилипающих кариоцитов костного мозга, содержания КОЕ-Ф в костном мозге мышей линии CBA/CaLac после введения дистиллированной воды (1) либо зонгорина (2) на фоне однократного введения 5-фторурацила в ¹/₂ МПД, (X±m; P)Dynamics levels erythropoietic activity in the supernatants from non-adherent, adherent bone marrow kariotsitov, the content of CFU-F in the bone marrow of mice CBA / CaLac lines after administration of distilled water (1) or zongorina (2) due to single administration of 5-fluorouracil ^_1/2 MTD , (X ± m; P) Сроки исследования, суткиStudy time, days Группы Groups ЭПА от прилипающих миелокариоцитовEPA from adherent myelocaryocytes ЭПА от неприлипающих миелокариоцитовEPA from non-adherent myelocaryocytes КОЕ-Ф (на 2,5×10⁵ миелокариоцитов)CFU-F (2.5 × 10 ⁵ myelocaryocytes) до введенияbefore introduction 2,33±0,332.33 ± 0.33 4,00±0,734.00 ± 0.73 9,00±0,739.00 ± 0.73 55 1one 4,33±0,67*4.33 ± 0.67 * 6,33±0,676.33 ± 0.67 16,00±1,98*16.00 ± 1.98 * 22 8,3±0,65*#8.3 ± 0.65 * # 7,27±0,96*#7.27 ± 0.96 * # 7,4±0,59#7.4 ± 0.59 # 88 1one 4,33±1,094.33 ± 1.09 9,00±0,589.00 ± 0.58 7,17±0,797.17 ± 0.79 22 6,40±0,576.40 ± 0.57 10,7±2,3*#10.7 ± 2.3 * # 8,2±1,28.2 ± 1.2 1212 1one 2,50±0,722,50 ± 0,72 6,00±1,32*6.00 ± 1.32 * 3,33±0,84*3.33 ± 0.84 * 22 6,12±0,26*#6.12 ± 0.26 * # 8,3±2,02*#8.3 ± 2.02 * # 1,52±0,31*#1.52 ± 0.31 * # Примечание: * - различия достоверны по отношению к фону, # - различия достоверны по отношению к группе, получавшей дистиллированную воду на фоне введения 5-фторурацила (1)Note: * - the differences are significant in relation to the background, # - the differences are significant in relation to the group receiving distilled water on the background of the introduction of 5-fluorouracil (1)

Claims

The use of zongorin as a hemostatic agent.