RU2481583C1 - Method for prediction of clinical effectiveness in chronic myeloid leukemia - Google Patents
Method for prediction of clinical effectiveness in chronic myeloid leukemia Download PDFInfo
- Publication number
- RU2481583C1 RU2481583C1 RU2012108809/15A RU2012108809A RU2481583C1 RU 2481583 C1 RU2481583 C1 RU 2481583C1 RU 2012108809/15 A RU2012108809/15 A RU 2012108809/15A RU 2012108809 A RU2012108809 A RU 2012108809A RU 2481583 C1 RU2481583 C1 RU 2481583C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- drb1
- hla
- therapy
- months
- response
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к внутренним болезням и гематологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности лечения ингибитором тирозинкиназ первого поколения иматинибом мезилатом (гливеком) хронического миелолейкоза.The invention relates to medicine, namely to internal medicine and hematology, and can be used to predict the effectiveness of treatment with a first-generation tyrosine kinase inhibitor imatinib mesylate (glivec) of chronic myelogenous leukemia.
Из практики медицины известны способы прогнозирования эффективности лечения хронического миелолейкоза (ХМЛ).From the practice of medicine, methods for predicting the effectiveness of the treatment of chronic myelogenous leukemia (CML) are known.
- Sokal JE, Сох ЕВ, Baccarani М, et al: Prognostic discrimination in "good-risk" chronic granulocytic leukemia. Blood 63: 789-799, 1984, заключающийся в определении прогностического фактора течения ХМЛ.- Sokal JE, Cox EB, Baccarani M, et al: Prognostic discrimination in "good-risk" chronic granulocytic leukemia. Blood 63: 789-799, 1984, which consists in determining the prognostic factor for the course of CML.
Недостатком способа является то, что способ использует в качестве исходных параметров только клинические данные на момент диагностики заболевания: возраст в годах, размер селезенка, число тромбоцитов, количество бластных клеток. Данный метод не приемлем для анализа в процессе лечения, не учитывает цитогенетические и молекулярные ответы.The disadvantage of this method is that the method uses only clinical data at the time of diagnosis of the disease as initial parameters: age in years, size of the spleen, number of platelets, number of blast cells. This method is not acceptable for analysis during treatment, does not take into account cytogenetic and molecular responses.
Известен также способ:There is also a known method:
- Hasford J, Pfirmann М, Hehlmann R, et al: A new prognostic score for survival of patients with chronic myeloid leukemia treated with interferon alfa. J Natl Cancer Inst 90: 850-858, 1998, заключающийся в определении прогностического фактора ХМЛ.- Hasford J, Pfirmann M, Hehlmann R, et al: A new prognostic score for survival of patients with chronic myeloid leukemia treated with interferon alfa. J Natl Cancer Inst 90: 850-858, 1998, which consists in determining the prognostic factor of CML.
Недостатком способа является то, что способ также использует только клинические данные на момент диагностики заболевания: возраст в годах, размер селезенка, число тромбоцитов, количество бластных клеток, базофиллов и эозинофиллов. Данный метод не предусматривает повторное определение фактора риска плохого прогноза в процессе лечения, не учитывает цитогенетические и молекулярные ответы на лечение гливеком.The disadvantage of this method is that the method also uses only clinical data at the time of diagnosis of the disease: age in years, spleen size, platelet count, number of blast cells, basophils and eosinophils. This method does not provide for re-determination of the risk factor of a poor prognosis during treatment, does not take into account cytogenetic and molecular responses to treatment with glivecom.
Изобретение направлено на повышение точности прогнозирования эффективности терапии хронического миелолейкоза.The invention is aimed at improving the accuracy of predicting the effectiveness of the treatment of chronic myelogenous leukemia.
Указанный технический результат достигается тем, что проводится иммуногенетическое исследование венозной крови больных хроническим миелолейкозом, получающих лечение ингибитором тирозинкиназ I поколения - гливеком и определение генов системы HLA II класса локуса В методом полимеразной цепной реакции PCR-SSP, при выявлении специфичностей HLA-DRB1*15(02) или HLA-DRB1*16(02) прогнозируют благоприятный исход хронического миелолейкоза с развитием в контрольные сроки (6, 12, 18 месяцев терапии) оптимального ответа, а при наличии специфичностей DRB1*11(05) или DRB1*14(06) прогнозируют неблагоприятный исход хронического миелолейкоза с недостижением в данные сроки оптимального ответа на лечениеThe specified technical result is achieved by the fact that an immunogenetic study of the venous blood of patients with chronic myelogenous leukemia receiving treatment with an inhibitor of tyrosine kinases of the first generation - glivec and determination of genes of the HLA system of class II locus B by the PCR-SSP polymerase chain reaction is performed, when HLA-DRB1 * 15 specificities are detected ( 02) or HLA-DRB1 * 16 (02) predict a favorable outcome of chronic myelogenous leukemia with the development of an optimal response in the control period (6, 12, 18 months of therapy), and in the presence of specificities DRB1 * 11 (05) or DRB1 * 14 (06) P ognoziruyut adverse outcome is not achieved with chronic myelogenous leukemia in a data timing optimum to respond to treatment
Хронический миелолейкоз (ХМЛ) представляет собой заболевание, которое характеризуется на первых этапах относительно доброкачественным течением, однако в конечном итоге неизбежно заканчивается бластным кризом. Несмотря на улучшение результатов терапии ХМЛ, связанных с внедрением ингибиторов тирозинкиназ, полный цитогенетический ответ удается получить у 70-87% больных в хронической фазе, у части больных заболевание прогрессирует до фазы акселерации и бластного криза.Chronic myeloid leukemia (CML) is a disease that is characterized in the first stages by a relatively benign course, but ultimately inevitably ends in a blast crisis. Despite the improvement in the results of CML therapy associated with the introduction of tyrosine kinase inhibitors, a complete cytogenetic response can be obtained in 70-87% of patients in the chronic phase, in some patients the disease progresses to the acceleration and blast crisis phases.
Первичная и вторичная резистентность к гливеку зависит от многих причин, которые не всегда в силу сложности методов их диагностики можно применить на практике. В связи с этим поиск дополнительных прогностических критериев ответа на лечение гливеком очень важен для пересмотра терапии (перевод больных на ингибиторы тирозинкиназ II поколения, трансплантация костного мозга).Primary and secondary resistance to glivec depends on many reasons, which are not always possible due to the complexity of their diagnostic methods. In this regard, the search for additional prognostic criteria for response to Glivec treatment is very important for reviewing therapy (transferring patients to generation II tyrosine kinase inhibitors, bone marrow transplantation).
В настоящее время не вызывает сомнений, что процесс онкогенеза заключается в патологических изменениях вначале на молекулярном, а затем на клеточном уровне, а предрасположенность к злокачественным новообразованиям и опухолевая прогрессия могут модифицироваться аллельными полиморфизмами различных генов. Одной из наиболее полиморфных генетических систем человека является система HLA. Иммуногенетические маркеры ранее изучались с помощью определения антигенного профиля HLA I класса. Использование ДНК-типирования с применением ПЦР позволило идентифицировать 1353 HLA-аллелей II класса. Наиболее полиморфным является ген DRB1, который детерминирует специфичности DR1-DR18. Специфичность абсолютного большинства DRB-аллелей связана с полиморфизмом именно DRB1 гена. Расположение молекул HLA класса II, определяющих аллельную специфичность непосредственно в антигенраспознающей области, является одним из основных механизмов, лежащих в основе развития ассоциированных с HLA заболеваний.At present, there is no doubt that the process of oncogenesis consists in pathological changes, first at the molecular and then at the cellular level, and the predisposition to malignant neoplasms and tumor progression can be modified by allelic polymorphisms of various genes. One of the most polymorphic human genetic systems is the HLA system. Immunogenetic markers were previously studied by determining the antigenic profile of class I HLA. The use of DNA typing using PCR allowed the identification of 1353 class II HLA alleles. The most polymorphic is the DRB1 gene, which determines the specificity of DR1-DR18. The specificity of the vast majority of DRB alleles is associated with the polymorphism of the DRB1 gene. The location of class II HLA molecules that determine allelic specificity directly in the antigen-recognizing region is one of the main mechanisms underlying the development of HLA-associated diseases.
В настоящее время иммуногенетическое исследование используется не только для определения предрасположенности к развитию патологии, но и прогнозирования течения и исходов заболеваний. С применением в иммуногенетической практике полимеразной цепной реакции значительно расширились возможности диагностики и прогнозирования заболеваний, в частности ХМЛ.Currently, immunogenetic research is used not only to determine a predisposition to the development of pathology, but also to predict the course and outcome of diseases. With the use of polymerase chain reaction in immunogenetic practice, the possibilities for diagnosing and predicting diseases, in particular CML, have expanded significantly.
Предрасположенность к ответу на терапию ингибитором тирозинкиназ первого поколения - гливеком может быть обусловлена определенными антигенами системы HLA. Выявление ассоциаций между специфичностями HLA-DRB1 и ответом на терапию гливеком позволят прогнозировать исход хронического миелолейкоза на фоне терапии гливеком и своевременно проводить коррекцию терапии (повышение дозы препарата или смена препарата).The predisposition to response to therapy with a first-generation tyrosine kinase inhibitor, glivec, may be due to certain HLA system antigens. The identification of associations between the specificities of HLA-DRB1 and the response to glivec therapy will allow predicting the outcome of chronic myelogenous leukemia with Glivec therapy and timely correction of therapy (increase in drug dose or drug change).
Таким образом, иммуногенетические исследования перспективны для прогнозирования исхода ХМЛ на фоне терапии гливеком.Thus, immunogenetic studies are promising for predicting the outcome of CML on the background of Glivec therapy.
Все вышесказанное дает основание для применения способа прогнозирования эффективности лечения хронического миелолейкоза.All of the above gives the basis for the application of a method for predicting the effectiveness of the treatment of chronic myeloid leukemia.
Представленным способом апробировано 50 коренных жителей Астраханской и Волгоградской областей русской национальности, страдающих хроническим миелолейкозом и получающих лечение гливеком. Критерии включения больных в исследование: хроническая фаза хронического миелолейкоза (определялась согласно рекомендациям ВО3-2008 г.); терапия гливеком в течение 24 месяцев (без учета предлеченности и длительности заболевания до назначения гливека). Критерии исключения из исследования: пациенты в стадии акселерации и бластного криза; пациенты, имеющие в анамнезе заболевания, ассоциированные с генами HLA. В группу наблюдения были включены больные хроническим миелолейкозом, находившиеся на обследовании и лечении в гематологическом отделении, наблюдающиеся в консультативной поликлинике ГУЗ «Александро-Мариинская областная клиническая больница» г.Астрахани и в поликлинике Государственного учреждения здравоохранения «Волгоградский областной клинический онкологический диспансер №1» в период с 2008 г. по 2010 г. Контрольную группу составили 200 здоровых доноров - коренных астраханцев русской национальности.The presented method was tested 50 indigenous people of Astrakhan and Volgograd regions of Russian nationality, suffering from chronic myelogenous leukemia and receiving treatment with glivec. Criteria for inclusion of patients in the study: the chronic phase of chronic myelogenous leukemia (determined according to the recommendations of BO3-2008); Glivec therapy for 24 months (without taking into account the predisposition and duration of the disease before prescribing glivec). Criteria for exclusion from the study: patients in the stage of acceleration and blast crisis; patients with a history of diseases associated with HLA genes. The observation group included patients with chronic myelogenous leukemia who were undergoing examination and treatment in the hematology department, observed in an advisory clinic at the Alexandro-Mariinsk Regional Clinical Hospital, Astrakhan, and at the clinic of the Volgograd Regional Clinical Oncology Dispensary No. 1 in from 2008 to 2010, the control group consisted of 200 healthy donors - indigenous Astrakhanians of Russian nationality.
У всех пациентов было проведено обследование для диагностики и мониторирования терапии ХМЛ (согласно рекомендациям ELN-2009):All patients underwent examination for the diagnosis and monitoring of CML therapy (according to the recommendations of ELN-2009):
1. Общий анализ периферической крови: на момент диагностики ХМЛ, затем каждые 15 дней до достижения и подтверждения ПГО; далее, как минимум, каждые 3 месяца или по мере необходимости.1. General analysis of peripheral blood: at the time of diagnosis of CML, then every 15 days until the achievement and confirmation of PGO; further at least every 3 months or as needed.
2. Морфологическое, цитологическое исследование костного мозга при установлении диагноза, затем 1 раз в 6-12 месяцев2. Morphological, cytological examination of the bone marrow during diagnosis, then 1 time in 6-12 months
3. Цитогенетическое исследование костного мозга (определение транслокации t(9; 22)(q34; q11) в момент диагностики ХМЛ, затем через 3 месяца; далее каждые 6 месяцев до достижения и подтверждения ПЦО, после чего каждые 12 месяцев; всегда после неудачи лечения (первичная или вторичная резистентность) и при возникновении необъяснимой анемии, лейкопении или тромбоцитопении.3. Bone marrow cytogenetic examination (determination of translocation t (9; 22) (q34; q11) at the time of CML diagnosis, then after 3 months; then every 6 months until the PCO is reached and confirmed, then every 12 months; always after treatment failure (primary or secondary resistance) and in the event of unexplained anemia, leukopenia or thrombocytopenia.
4. Молекулярно-цитогенетическое исследование костного мозга - флуоресцентная in situ гибридизация хромосом (FISH) с ДНК зондом к слитному гену BCR-ABL (при невозможности проведения стандартного цитогенетического исследования).4. Molecular cytogenetic study of bone marrow - in situ fluorescence hybridization of chromosomes (FISH) with a DNA probe to the BCR-ABL fusion gene (if standard cytogenetic studies are not possible).
5. Молекулярно-генетическое исследование крови методом ПЦР в реальном времени (количественная оценка экспрессии химерного гена BCR-ABL типа р210) при установлении диагноза, затем 1 раз в 3 месяца до достижения и подтверждения БМО, затем не реже чем каждые 6 месяцев.5. Molecular genetic analysis of blood by real-time PCR (quantification of the expression of the chimeric gene BCR-ABL type p210) when a diagnosis is made, then 1 time in 3 months until the BMO is reached and confirmed, then at least every 6 months.
Типирование аллелей HLA II классаTyping HLA Class II Alleles
Определение аллелей HLA-DRB1 у больных хроническим миелолейкозом проводили методом полимеразной цепной реакции (PCR-SSP) с помощью наборов реагентов «Biotest» (Германия) в иммуногенетической лаборатории ЗАО «Межрегиональный центр иммуногенетики и гистотипирующих реагентов «Гисанс» (г.Санкт-Петербург, Россия). Контрольную группу составили 94 здоровых донора - коренных жителя астраханской геногеографической зоны русской национальности. Данные популяционного контроля опубликованы в 2005 году в журнале «Иммунология» совместной группой научных сотрудников ФГУ «Научно-исследовательский институт по изучению лепры Росздрава» (г.Астрахань) и ГНЦ «Институт иммунологии ФМБА России» (г.Москва).The determination of HLA-DRB1 alleles in patients with chronic myelogenous leukemia was carried out using the polymerase chain reaction (PCR-SSP) method using the Biotest reagent kits (Germany) in the immunogenetic laboratory of the Gisans Interregional Center for Immunogenetics and Histotyping Reagents (St. Petersburg, Russia). The control group consisted of 94 healthy donors - indigenous inhabitants of the Astrakhan genogeographic zone of Russian nationality. The population control data was published in 2005 in the journal “Immunology” by a joint group of scientists from the Federal State Institution “Research Institute for the Study of Leprosy of Roszdrav” (Astrakhan) and the SSC “Institute of Immunology of the FMBA of Russia” (Moscow).
Геномную ДНК для исследования выделяли из мононуклеарных клеток стабилизированной EDTA периферической крови, свежей или свежезамороженной и сохраняемой при -20°C. Кровь в количестве 500,0 мкл центрифугировали при 13000 g в течение 1 минуты в пластиковой пробирке типа «Eppendorf». Затем эритроциты удаляли путем обработки осадка 500,0 мкл лизирующего буфера (0.32М сахарозы; 10 mМ трис-HCl (рН 7,5); 5 mМ MgCl2; 2,1% тритона Х-100) с последующим центрифугированием при 13000 g в течение 1 минуты. Процедуру лизиса повторяли до тех пор, пока надосадочная жидкость не становилась совершенно прозрачной (до 6 раз).Genomic DNA for the study was isolated from mononuclear cells of stabilized peripheral blood EDTA, fresh or freshly frozen and stored at -20 ° C. Blood in an amount of 500.0 μl was centrifuged at 13000 g for 1 minute in an Eppendorf plastic tube. The red blood cells were then removed by treating the pellet with 500.0 μl of lysis buffer (0.32 M sucrose; 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 5 mM MgCl 2 ; 2.1% Triton X-100), followed by centrifugation at 13000 g in within 1 minute. The lysis procedure was repeated until the supernatant became completely transparent (up to 6 times).
После окончательного удаления надосадочной жидкости при помощи автоматического дозатора к осадку добавляли 60,0 мкл буфера (50 mM KCl; 10 mМ трис-HCl (рН 8,3); 2,5 ml MgCl2; 0,45% NP-40; 0,45% Tween 20), содержащего 250 мкг/мл протеиназы К и ресуспендировали. Инкубировали с ферментом в течение 60 минут при t=+55°C.After the final removal of the supernatant using an automatic dispenser, 60.0 μl of buffer (50 mM KCl; 10 mM Tris-HCl (pH 8.3); 2.5 ml MgCl 2 ; 0.45% NP-40; 0 was added to the precipitate. , 45% Tween 20) containing 250 μg / ml proteinase K and resuspended. Incubated with the enzyme for 60 minutes at t = + 55 ° C.
Инактивацию протеиназы после инкубации проводили нагреванием пробирки на водяной бане при t=+95°C в течение 10 минут. После остывания конденсат осаждали центрифугированием при 13000 g в течение 10-15 секунд. Раствор ДНК хранили при +4°C до использования.Proteinase inactivation after incubation was carried out by heating the tube in a water bath at t = + 95 ° C for 10 minutes. After cooling, the condensate was precipitated by centrifugation at 13000 g for 10-15 seconds. The DNA solution was stored at + 4 ° C until use.
Типирование аллелей HLA-DRBI-гена. Определение аллелей HLA-DRBI-гена проводили с использованием набора сиквенс-специфических праймеров, позволяющих определить 13 групп аллелей: DRB1*01, 03, 04, 07, 08, 09, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16. Амплификацию проводили в 2 этапа:Typing of alleles of the HLA-DRBI gene. Alleles of the HLA-DRBI gene were determined using a set of sequence-specific primers, which allowed 13 groups of alleles to be determined: DRB1 * 01, 03, 04, 07, 08, 09, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16. Amplification was carried out in 2 stages:
1 этап - амплификация II экзона DRBI-гена из выделенной ДНК.Stage 1 - amplification of exon II of the DRBI gene from isolated DNA.
Продукт амплификации первого этапа длиной 247 пар нуклеотидов после 10-кратного разведения разбавителем использовался как исследуемый материал на втором этапе типирования.The amplification product of the first stage with a length of 247 nucleotides after 10-fold dilution with diluent was used as the test material in the second stage of typing.
2 этап - серия амплификации со специфическими парами праймеров.Stage 2 - a series of amplification with specific pairs of primers.
Продукт, полученный в ходе амплификации, определяли методом горизонтального электрофореза в окрашенном бромистым этидием 3,3%-ном агарозном геле в ультрафиолетовом свете (310 нм). Специфичность продукта амплификации на всех этапах исследования оценивали в соотношении со стандартным маркером длин ДНК (PUC-19).The product obtained during amplification was determined by horizontal electrophoresis in a 3.3% agarose gel stained with ethidium bromide in ultraviolet light (310 nm). The specificity of the amplification product at all stages of the study was evaluated in relation to the standard DNA length marker (PUC-19).
При обработке полученных результатов были использованы методы статистического анализа. Для определения показателя достоверности результатов рассчитывался непараметрический критерий X2 с поправкой Йетса. Значение X2, превышавшее 3,841 (что соответствует p<0,05), рассматривалось как показатель достоверной разницы между частотами в сравниваемых группах.When processing the results, statistical analysis methods were used. To determine the indicator of reliability of the results, the nonparametric criterion X 2 with Yates correction was calculated. The value of X 2 exceeding 3.841 (which corresponds to p <0.05) was considered as an indicator of a reliable difference between the frequencies in the compared groups.
Для определения силы ассоциации между геном и изучаемым заболеванием рассчитывался показатель относительного риска (RR). Величина RR, равная 1, указывает на отсутствие различий в частоте встречаемости генов HLA у больных и в контроле. RR>1 (положительная ассоциация) означает, что данная специфичность HLA чаще регистрируется в группе больных. Этиологическая фракция (или атрибутивный риск) вычислялась для RR>1. Наибольшая величина этиологической фракции указывает на первичность ассоциативной связи исследуемой патологии с конкретным геном HLA. Если RR<1 (отрицательная ассоциация), то определяется величина превентивной фракции (PF). Величина PF показывает ту часть случаев, когда заболевание не развилось, благодаря наличию ассоциированного HLA-гена.To determine the strength of the association between the gene and the disease under study, a relative risk score (RR) was calculated. A RR value of 1 indicates no difference in the frequency of HLA genes in patients and in the control. RR> 1 (positive association) means that this specificity of HLA is more often recorded in the patient group. The etiological fraction (or attributive risk) was calculated for RR> 1. The largest value of the etiological fraction indicates the primary associative relationship of the studied pathology with a specific HLA gene. If RR <1 (negative association), then the value of the preventive fraction (PF) is determined. The PF value shows that part of the cases when the disease has not developed, due to the presence of the associated HLA gene.
С целью поиска ассоциативных связей продуктов генов HLA и риском развития неудачи терапии гливеком нами был проведен анализ аллельного полиморфизма у больных ХМЛ с различным видом ответа на терапию.In order to search for associative relationships of HLA gene products and the risk of failure of Glivec therapy, we conducted an analysis of allelic polymorphism in CML patients with a different type of response to therapy.
На первом этапе мы проанализировали ответ на терапию в срок 6 месяцев лечения гливеком (таблица 1).At the first stage, we analyzed the response to therapy within 6 months of treatment with glivec (table 1).
Как представлено в таблице 1, статистически значимым было повышение в группе больных ХМЛ с оптимальным ответом через 6 месяцев терапии группы аллелей DRB1*17(03) по сравнению с контрольной группой - 29,6% против 10,6% (RR-3,51, EF-0,212, p<0,05). Подводя итог проведенному анализу по распределению генов HLA у больных ХМЛ через 6 месяцев терапии, можно сделать следующий вывод: маркерами благоприятного прогноза с развитием оптимального ответа на терапию гливеком через 6 месяцев терапии являются специфичности DRB1*17(03), DRB1*15(02) (таблица 2).As shown in table 1, the increase in the group of CML patients with the optimal response after 6 months of therapy with the DRB1 * 17 allele group (03) was statistically significant compared with the control group - 29.6% versus 10.6% (RR-3.51 , EF-0.212, p <0.05). Summing up the analysis of the distribution of HLA genes in CML patients after 6 months of therapy, the following conclusion can be drawn: the specificity of DRB1 * 17 (03), DRB1 * 15 (02) are markers of a favorable prognosis with the development of an optimal response to Glivec therapy after 6 months of therapy. (table 2).
Как представлено в таблице 2, у больных ХМЛ, не достигших оптимального ответа через 6 месяцев терапии гливеком, имеется достоверное повышение по сравнению с контролем частоты HLA-DRB1*14(06) - 13% против 0% (RR-32,3, EF-0,126, p<0,005) и снижение HLA-DRB1*15(02) - 8,7% против 28,7% (RR-0,29, PF-0,183, p<0,025).As shown in table 2, in CML patients who did not achieve an optimal response after 6 months of glivecom therapy, there was a significant increase compared with the control frequency of HLA-DRB1 * 14 (06) - 13% versus 0% (RR-32.3, EF -0.126, p <0.005) and a decrease in HLA-DRB1 * 15 (02) - 8.7% versus 28.7% (RR-0.29, PF-0.183, p <0.025).
Далее мы сравнили частоту генов в обеих группах и провели статистический анализ (таблица 3).Next, we compared the frequency of genes in both groups and conducted a statistical analysis (table 3).
Из таблицы 3 следует, что при сравнительном анализе генного профиля HLA-DRB1 у больных ХМЛ с различным ответом на терапию гливеком через 6 месяцев в группе с оптимальным ответом регистрируется достоверное снижение по сравнению с группой, не достигшей оптимального ответа терапии HLA-DRB1*11(05) - 22,2% против 47,8% (RR-0,33, PF-0,348, р<0,05), HLA-DRB1*12(05) - 0% против 8,7% (RR-0,16, p<0,025), HLA-DRB1*14(06) - 0% против 13% (RR-0,11, p<0,025).From table 3 it follows that a comparative analysis of the HLA-DRB1 gene profile in CML patients with a different response to glivec therapy after 6 months showed a significant decrease in the group with the optimal response compared to the group that did not achieve the optimal response of HLA-DRB1 * 11 therapy ( 05) - 22.2% against 47.8% (RR-0.33, PF-0.348, p <0.05), HLA-DRB1 * 12 (05) - 0% against 8.7% (RR-0 , 16, p <0.025), HLA-DRB1 * 14 (06) - 0% versus 13% (RR-0.11, p <0.025).
Подводя итог проведенному анализу по распределению генов HLA у больных ХМЛ через 6 месяцев терапии можно сделать следующий вывод: недостижение оптимального ответа маркируется специфичностями DRB1*11(05), DRB1*12(05), DRB1*14(06).Summing up the analysis of the distribution of HLA genes in CML patients after 6 months of therapy, the following conclusion can be drawn: failure to achieve an optimal response is marked by specificities DRB1 * 11 (05), DRB1 * 12 (05), DRB1 * 14 (06).
Следующим этапом работы был анализ ассоциативных связей аллелей HLA-DRB1 с ответом на лечение гливеком через 12 месяцев терапии (таблица 4). Из таблицы 4 следует, что у больных ХМЛ, достигших оптимального ответа через 12 месяцев терапии гливеком, регистрируется достоверное повышение по сравнению с контрольной группой HLA-DRB1*16(02) - 23,5% против 5,3% (RR-5,42, EF-0,192, p<0,05).The next stage of the work was the analysis of the associative relations of the HLA-DRB1 alleles with the response to Glivec treatment after 12 months of therapy (table 4). From table 4 it follows that in CML patients who achieved an optimal response after 12 months of Gleevec therapy, a significant increase was recorded compared with the control group HLA-DRB1 * 16 (02) - 23.5% versus 5.3% (RR-5, 42, EF-0.192, p <0.05).
Как следует из таблицы 5, у больных ХМЛ, не достигших оптимального ответа через 12 месяцев терапии гливеком, имеется достоверное повышение по сравнению с контролем частоты HLA-DRB1*14(06) - (9,1% против 0% (RR-21,69, EF-0,087, p<0,025) и снижение HLA-DRB1*15(02) - 9,1% против 28,7% (RR-0,28, PF-0,193, p<0,025).As follows from table 5, in CML patients who did not achieve an optimal response after 12 months of glivecom therapy, there was a significant increase compared with the control of the frequency of HLA-DRB1 * 14 (06) - (9.1% versus 0% (RR-21, 69, EF-0.087, p <0.025) and a decrease in HLA-DRB1 * 15 (02) - 9.1% versus 28.7% (RR-0.28, PF-0.193, p <0.025).
Затем мы сравнили распределение специфичностей HLA у больных ХМЛ с различным ответом на терапию гливеком через 12 месяцев между собой (таблица 6).Then we compared the distribution of HLA specificities in CML patients with a different response to Glivec therapy after 12 months between each other (Table 6).
Из представленной таблицы 6 следует, что отмечено достоверное снижение в группе больных ХМЛ с оптимальным ответом на лечение гливеком через 12 месяцев по сравнению с группой, не достигших этого ответа, HLA-DRB1*11(05) - 17,6% против 42,4% (RR-0,32, PF-0,289, p<0,05).From table 6 it follows that there was a significant decrease in the group of CML patients with an optimal response to Glivec treatment after 12 months compared with the group that did not reach this response, HLA-DRB1 * 11 (05) - 17.6% versus 42.4 % (RR-0.32, PF-0.289, p <0.05).
Анализируя данные, полученные при обработке распределения специфичностей HLA через 12 месяцев терапии гливеком, можно сделать следующий вывод: иммуногенетическими маркерами благоприятного прогноза ХМЛ через 12 месяцев лечения гливеком являются гены HLA-DRB1*15(02), DRB1*16(02).Analyzing the data obtained by processing the distribution of HLA specificities after 12 months of Glivec therapy, the following conclusion can be drawn: immunogenetic markers of a favorable prognosis of CML after 12 months of Glivec treatment are HLA-DRB1 * 15 (02), DRB1 * 16 (02) genes.
Следующим этапом работы был анализ ассоциативных связей HLA с ответом на терапию гливеком через 18 месяцев терапии (таблица 7). Как видно из таблицы 7, у больных ХМЛ, достигших оптимального ответа через 18 месяцев терапии гливеком, отмечается достоверное повышение по сравнению с контрольной группой HLA-DRB1*16(02) - 23,5% против 5,3% (RR-5,42, EF-0,192, p<0,05).The next stage of the work was the analysis of HLA associative relationships with the response to Glivec therapy after 18 months of therapy (table 7). As can be seen from table 7, in patients with CML who achieved an optimal response after 18 months of Gleevec therapy, a significant increase was noted compared with the control group HLA-DRB1 * 16 (02) - 23.5% versus 5.3% (RR-5, 42, EF-0.192, p <0.05).
У больных ХМЛ, не достигших оптимального ответа (таблица 8) через 18 месяцев терапии гливеком, имеется достоверное повышение по сравнению с контролем частоты HLA-DRB1*14(06) - 9,1% против 0% (RR-21,69, EF-0,087, p<0,025) и снижение HLA-DRB1*15(02) -12,1% против 28,7% (RR-0,37, PF-0,174, p<0,05).In CML patients who did not achieve the optimal response (table 8) after 18 months of glivecom therapy, there was a significant increase compared with the control of the frequency of HLA-DRB1 * 14 (06) - 9.1% versus 0% (RR-21.69, EF -0.087, p <0.025) and a decrease in HLA-DRB1 * 15 (02) -12.1% versus 28.7% (RR-0.37, PF-0.174, p <0.05).
Анализируя данные об особенностях распределения аллелей генов HLA у больных ХМЛ через 18 месяцев терапии гливеком, можно сделать следующий вывод: иммуногенетическими маркерами неблагоприятного прогноза ХМЛ через 18 месяцев лечения гливеком является ген HLA- DRB1*14(06). Затем мы сравнили распределение специфичностей HLA у больных ХМЛ с различным ответом на терапию гливеком через 18 месяцев между собой (таблица 9).Analyzing data on the distribution characteristics of HLA gene alleles in CML patients after 18 months of Glivec therapy, the following conclusion can be drawn: immunogenetic markers of poor CML prognosis after 18 months of Glivec treatment are HLA-DRB1 * 14 gene (06). Then we compared the distribution of HLA specificities in CML patients with a different response to Glivec therapy after 18 months between each other (Table 9).
Как представлено в данной таблице, специфичность HLA-DRB1*14(06) регистрируется у больных с недостижением оптимального ответа в 3 раза чаще, чем у больных с оптимальным ответом (RR-0,25), специфичность HLA-DRB1*16(02) в 7,22 раза чаще у больных с оптимальным ответом. Данные созвучны с предыдущим анализом, но не достигли достоверных величин.As presented in this table, the specificity of HLA-DRB1 * 14 (06) is recorded in patients with an unsatisfactory optimal response 3 times more often than in patients with an optimal response (RR-0.25), the specificity of HLA-DRB1 * 16 (02) 7.22 times more often in patients with an optimal response. The data are consonant with the previous analysis, but did not reach reliable values.
Анализируя данные об особенностях распределения аллелей генов HLA у больных ХМЛ через 18 месяцев терапии гливеком, можно сделать следующий вывод: иммуногенетическими маркерами благоприятного прогноза ХМЛ через 18 месяцев лечения гливеком являются гены HLA-DRB1*15(02), DRB1*16(02).Analyzing data on the distribution characteristics of HLA gene alleles in CML patients after 18 months of Glivec therapy, the following conclusion can be drawn: immunogenetic markers of a favorable prognosis of CML after 18 months of Glivec treatment are HLA-DRB1 * 15 (02), DRB1 * 16 (02) genes.
Подводя итог анализу особенностей распределения специфичностей HLA у больных ХМЛ на различных сроках лечения гливеком и с различным ответом на лечение (согласно критериям ELN-2009), можно сделать вывод: «генеральными маркерами» благоприятного исхода ХМЛ с развитием в контрольные сроки оптимального ответа от применения гливека, являются специфичности DRB1*15(02), DRB1*16(02). «Генеральными» маркерами неблагоприятного прогноза (недостижение оптимального ответа) являются специфичности DRB1*11(05), DRB1*14(06).Summing up the analysis of the distribution characteristics of HLA specificity in CML patients at different periods of treatment with glivec and with a different response to treatment (according to the criteria of ELN-2009), we can conclude: “general markers” of a favorable outcome of CML with the development of an optimal response from the use of glivec in the control period are the specificities of DRB1 * 15 (02), DRB1 * 16 (02). The “general" markers of an unfavorable prognosis (failure to achieve an optimal response) are the specificity of DRB1 * 11 (05), DRB1 * 14 (06).
Ниже приводятся результаты апробации.Below are the results of testing.
Пример 1.Example 1
Больная С., 1969 года рождения. Диагноз: хронический миелолейкоз, хроническая фаза, впервые выявленный, риск по Sokal низкий, установлен в гематологическом отделении ГУЗ AM ОКБ г.Астрахани 10.04.2007 г.Patient S., born in 1969. Diagnosis: chronic myelogenous leukemia, chronic phase, first detected, Sokal risk is low, established in the hematology department of the State Health Institution AM of Astrakhan Design Bureau on April 10, 2007.
Общий анализ крови от 09.04.2007: Эр.-3,72*1012/л, Hb-118 г/л, ЦП-0,9; Tr-115*109/л; L-28,0*109/л; миелоциты-7; метамиелоциты-8; П-6; С-54; М-7; Э-1; баз-4; СОЭ-14 мм/час. Миелограмма от 09.04.2007: бластные клетки - 2,4%, промиелоциты - 1,0%, миелоциты - 10,2%, метамиелоциты - 10,8%, палочкоядерные - 22,6%, сегментоядерные - 29,8%, эозинофилы - 0%, базофилы - 0%, лимфоциты - 4,6%, моноциты - 1,0%, плазматические клетки - 0,5%. По данным УЗИ: печень и селезенка не увеличены.General blood test dated 04/09/2007: Er.-3.72 * 10 12 / l, Hb-118 g / l, CP-0.9; Tr-115 * 10 9 / L; L-28.0 * 10 9 / L; myelocytes-7; metamyelocytes-8; P-6; S-54; M-7; E-1; Baz-4; ESR-14 mm / hour. Myelogram from 04/09/2007: blast cells - 2.4%, promyelocytes - 1.0%, myelocytes - 10.2%, metamyelocytes - 10.8%, stab nuclear - 22.6%, segmented - 29.8%, eosinophils - 0%, basophils - 0%, lymphocytes - 4.6%, monocytes - 1.0%, plasma cells - 0.5%. According to ultrasound: the liver and spleen are not enlarged.
Диагноз подтвержден в лаборатории медицинской генетики Ростовского государственного медицинского университета методом СЦИ 27.04.2007: исследовано 20 метафаз. Заключение: 46ХХ, t(9; 22)(q34; q11)[20] Ph-хромосома выявлена в 100% метафаз.The diagnosis was confirmed in the laboratory of medical genetics of the Rostov State Medical University by the SDH method on 04/27/2007: 20 metaphases were studied. Conclusion: 46XX, t (9; 22) (q34; q11) [20] The Ph chromosome was detected in 100% metaphases.
В общем анализе крови от 01.08.2007 (до начала приема гливека): Эр.-4,3*1012/л; Hb-132 г/л; ЦП-0,9; Tr-172*109/л; L-25*109/л; миелоциты-2; П-4; С-42; М-4, л-46; э-1; баз-1; СОЭ-6 мм/час. Больной 01.07.2007 был назначен гливек в дозе 400 мг внутрь. Предлеченность гидреа составила 3 месяца. При динамическом наблюдении у больной через 3 месяца от момента начала приема гливека был достигнут ПГО. В общем анализе крови от 01.10.2007: Эр.-3,7*1012/л, Hb-120 г/л, ЦП-0,9; Tr-155*109/л; L-5,2*109/л; П-6; С-43; М-7; л-41; э-3; СОЭ-2 мм/час. Миелограмма от 17.12.2007 г.: бластные клетки - 0,8%, нейтрофилы - 65% (промиелоциты-5%, миелоциты - 17%, метамиелоциты-5%, палочкоядерные - 18%, сегментоядерные - 20%), эозинофилы - 3,8%, базофилы - 0%, лимфоциты - 17,2%, моноциты - 0,6%.In the general blood test from 08/01/2007 (before the start of taking glivec): Er.-4.3 * 10 12 / l; Hb-132 g / l; CPU 0.9; Tr-172 * 10 9 / L; L-25 * 10 9 / L; myelocytes-2; P-4; S-42; M-4, l-46; e-1; Baz-1; ESR-6 mm / hour. The patient 01.07.2007 was prescribed glivec in a dose of 400 mg by mouth. Hydrae's predisposition was 3 months. During dynamic observation in a patient 3 months after the start of taking glivec, PGO was achieved. In the general analysis of blood from 01.10.2007: Er.-3.7 * 10 12 / l, Hb-120 g / l, CP-0.9; Tr-155 * 10 9 / L; L-5.2 * 10 9 / L; P-6; S-43; M-7; l-41; e-3; ESR-2 mm / hour. Myelogram from 12/17/2007: blast cells - 0.8%, neutrophils - 65% (promyelocytes-5%, myelocytes - 17%, metamyelocytes-5%, stab nuclear - 18%, segmented - 20%), eosinophils - 3 , 8%, basophils - 0%, lymphocytes - 17.2%, monocytes - 0.6%.
Согласно критериям ELN-2009 контрольные исследования проводились через 6 месяцев терапии гливеком. У больной достигнут оптимальный ответ: сохранялся ПГО, развился частичный цитогенетический ответ (в контрольном исследовании клеток костного мозга методом СЦИ 17.02.2008 г. исследовано 20 метафаз. Результат: 46ХХ, t(9; 22)(q34; q11[4] /46ХХ [16]. Заключение: Ph-хромосома обнаружена в 10% метафаз).According to the criteria of ELN-2009, control studies were conducted after 6 months of Glivec therapy. The patient achieved an optimal response: PGO was preserved, a partial cytogenetic response developed (20 metaphases were studied in the control study of bone marrow cells by the SDI method on February 17, 2008. Result: 46XX, t (9; 22) (q34; q11 [4] / 46XX [16] Conclusion: Ph chromosome detected in 10% metaphases).
Через 12 месяцев лечения гливеком у больной зарегистрирован оптимальный ответ: ПГО, полный цитогенетический ответ (Ph-хромосома методом СЦИ - 0%), большой молекулярный ответ (при количественном определении экспрессии гена BCR-ABL вариант р210 методом Real-Time PCR экспрессия гена BCR-ABL - 0,097%).After 12 months of Gleevec treatment, the patient registered the optimal response: PGO, complete cytogenetic response (Ph chromosome by SDH method - 0%), large molecular response (when quantifying BCR-ABL gene expression, p210 variant using Real-Time PCR BCR- gene expression ABL - 0.097%).
Через 18 месяцев лечения гливеком у больной сохранялся оптимальный ответ: ПГО, полный цитогенетический ответ (подтвержден в контрольном цитогенетическом исследовании методом СЦИ 03.02.2009: исследовано 20 метафаз. Заключение: 46ХХ[20]. Ph-хромосома не выявлена), полный молекулярный ответ (при количественном определении экспрессии гена BCR-ABL вариант р210 методом Real-Time PCR 03.02.2009 экспрессия гена BCR-ABL не обнаружена).After 18 months of Gleevec treatment, the patient retained the optimal response: PGO, complete cytogenetic response (confirmed in the control cytogenetic study using the SDI method 03.02.2009: 20 metaphases were examined. Conclusion: 46XX [20]. Ph chromosome was not detected), full molecular response ( when quantifying the expression of the BCR-ABL gene, the p210 variant using the Real-Time PCR method 02/03/2009 no expression of the BCR-ABL gene was detected).
Через 24 месяца лечения гливеком у больной сохранялись: полная клинико-гематологический ответ, полный цитогенетический, полный молекулярный ответ.After 24 months of treatment with Gleevec, the patient retained: a complete clinical and hematological response, a complete cytogenetic, and a complete molecular response.
Таким образом, диагноз больной С: хронический миелолейкоз, хроническая фаза от 10.04.2007 г., риск по Sokal низкий; полный клинико-гематологический ответ от 01.11.2007 г.; полный цитогенетический ответ от 20.06.2008 г.; полный молекулярный ответ от 03.02.2009 г. Оптимальный ответ на терапию гливеком.Thus, the diagnosis of patient C: chronic myelogenous leukemia, chronic phase of 04/10/2007, the risk of Sokal is low; full clinical and hematological response dated 01.11.2007; complete cytogenetic response of June 20, 2008; complete molecular response from 02/03/2009. Optimal response to Glivec therapy.
Иммуногенетическое исследование: HLA-DRB1*16(02): DRB1*13(06).Immunogenetic study: HLA-DRB1 * 16 (02): DRB1 * 13 (06).
Таким образом, присутствие в генотипе больной специфичности HLA-DRB1*16(02) способствовало развитию оптимального ответа на терапию гливеком с достижением полного цитогенетического и полного молекулярного ответов.Thus, the presence of HLA-DRB1 * 16 (02) in the patient’s genotype contributed to the development of an optimal response to Glivec therapy with the achievement of a complete cytogenetic and complete molecular response.
Пример 2.Example 2
Больной М., 1976 года рождения. Диагноз: Хронический миелолейкоз, хроническая фаза, риск прогноза по Sokal - низкий, установлен в гематологическом отделении ГУЗ AM ОКБ г.Астрахани 24.10.2006 г.Patient M., born in 1976. Diagnosis: Chronic myeloid leukemia, chronic phase, Sokal prognosis risk is low, established in the hematology department of the State Health Institution AM of the Astrakhan Design Bureau on October 24, 2006.
В общем анализе крови от 23.10.2006: Эр. - 3,02*1012/л; гемоглобин-93 г/л; Tr-169*109/л; L-210*109/л; бласты-1; миелоциты-20; п-20; с-35; м-2; л-11; э-2; б-1; СОЭ-30 мм/час. Миелограмма от 23.10.2006: бласты - 2,0%; промиелоциты - 1,0%; миелоциты - 13,0%; палочкоядерные - 21,0%; сегментоядерные - 31%; соотношение лейко/эритро 11,26. УЗИ органов брюшной полости от 23.10.2006 г.: размеры печени - правая доля 127 мм, левая доля 57 мм, размеры селезенки 150*56 мм. Диагноз подтвержден в Ростовском государственном медицинском университете стандартным цитогенетическим исследованием от 21.11.2006. Было исследовано 20 метафаз. Заключение: 46,XY,t(9; 22)(q34; q11)[19]/46,XY [1], Ph-хромосома выявлена в 95% метафаз.In the general analysis of blood from 10.23.2006: Er. - 3.02 * 10 12 / l; hemoglobin-93 g / l; Tr-169 * 10 9 / L; L-210 * 10 9 / l; blasts-1; myelocytes-20; p-20; s-35; m-2; l-11; e-2; b-1; ESR-30 mm / hour. Myelogram from 10.23.2006: blasts - 2.0%; promyelocytes - 1.0%; myelocytes - 13.0%; stab - 21.0%; segmented - 31%; the ratio of leuko / erythro is 11.26. Ultrasound of the abdominal cavity from 10.23.2006: the size of the liver - the right lobe is 127 mm, the left lobe is 57 mm, the size of the spleen is 150 * 56 mm. The diagnosis was confirmed at the Rostov State Medical University with a standard cytogenetic study of 11/21/2006. 20 metaphases were investigated. Conclusion: 46, XY, t (9; 22) (q34; q11) [19] / 46, XY [1], the Ph chromosome was detected in 95% of metaphases.
Больному 14.05.07 г. был назначен гливек в дозе 400 мг. Предлеченность гидреа составила 7 месяцев. При динамическом наблюдении у больного через 3 месяца от момента начала приема гливека был достигнут ПГО. В общем анализе крови от 20.08.07 г.: эр.-4,55*1012/л, Hb-148 г/л, ЦП-0,9; Tr-243*109/л; L-5,0*109/л; п-2; с-41; м-9; л-46; э-2; СОЭ-2 мм/час. Миелограмма от 20.08.07 г.: бластные клетки - 0,1%; нейтрофилы - 54,3%; (промиелоциты - 0,2%; миелоциты - 11,6%; метамиелоциты - 4,3%; палочкоядерные - 16,6%; сегментоядерные - 21,6%); эозинофилы - 2,0%; базофилы - 0,1%; лимфоциты - 26,0%; моноциты - 1,3%; плазматические клетки - 0,2%; соотношение лейко/эритро 5,4.On May 14, 2007, the patient was prescribed Glivec in a dose of 400 mg. Hydrae is 7 months old. During dynamic observation in a patient 3 months after the start of taking glivec, PGO was achieved. In the general analysis of blood from 08.20.07 g .: er.-4.55 * 10 12 / l, Hb-148 g / l, CP-0.9; Tr-243 * 10 9 / L; L-5.0 * 10 9 / L; p-2; s-41; m-9; l-46; e-2; ESR-2 mm / hour. Myelogram from 08/20/07: blast cells - 0.1%; neutrophils - 54.3%; (promyelocytes - 0.2%; myelocytes - 11.6%; metamyelocytes - 4.3%; stab - 16.6%; segmented - 21.6%); eosinophils - 2.0%; basophils - 0.1%; lymphocytes - 26.0%; monocytes - 1.3%; plasma cells - 0.2%; the ratio of leuko / erythro is 5.4.
Согласно критериям ELN-2009 через 6 месяцев терапии гливеком констатирована неудача терапии. У больного сохранялся ПГО, однако был достигнут лишь минимальный цитогенетический ответ - в контрольном стандартном цитогенетическом исследовании было исследовано 20 метафаз. Заключение: 46,XY, t(9; 22) (q34; q11) 16/[46], XY[4], Ph-хромосома выявлена в 80% метафаз.According to the criteria of ELN-2009, after 6 months of Gleevec therapy, failure of therapy was observed. The patient maintained PGO, but only a minimal cytogenetic response was achieved - in the control standard cytogenetic study, 20 metaphases were studied. Conclusion: 46, XY, t (9; 22) (q34; q11) 16 / [46], XY [4], the Ph chromosome was detected in 80% of metaphases.
Через 12 месяцев лечения гливеком - неудача терапии. У больного сохранялся ПГО, малый цитогенетический ответ (в контрольном стандартном цитогенетическом исследовании от 17.05.2008 было исследовано 20 метафаз. Заключение: 46,XY t(9;22) (q34; q11)12/[46], XY[8], Ph-хромосома выявлена в 60% метафаз). Было проведено количественное определение экспрессии гена BCR-ABL вариант р210 методом Real-Time PCR от 17.05.08. Результат исследования: 0,8% BCR-ABL. Заключение: высокий уровень экспрессии BCR-ABL. В связи с отсутствием оптимального ответа доза гливека увеличена до 600 мг в сутки.After 12 months of treatment with glivecom, therapy failure. The patient maintained PGO, a small cytogenetic response (20 metaphases were examined in the control standard cytogenetic study dated 05/17/2008. Conclusion: 46, XY t (9; 22) (q34; q11) 12 / [46], XY [8], Ph chromosome detected in 60% of metaphases). Quantitative determination of the expression of the BCR-ABL gene variant p210 was carried out using the Real-Time PCR method from 05.17.08. The result of the study: 0.8% BCR-ABL. Conclusion: High expression of BCR-ABL. Due to the lack of an optimal response, the dose of glivec is increased to 600 mg per day.
18 месяцев терапии - неудача терапии (Ph-хромосома выявлена в 60% метафаз), отсутствие БМО - высокий уровень экспрессии BCR-ABL-0,6%.18 months of therapy - failure of therapy (Ph chromosome detected in 60% of metaphases), lack of BMO - high level of expression of BCR-ABL-0.6%.
Через 24 месяца лечения гливеком у больного сохранялся ПГО, малый цитогенетический ответ (в контрольном стандартном цитогенетическим исследовании: исследовано 20 метафаз. Заключение: 46XY[4], t(9;22)(q34; q11)[16] Ph-хромосома выявлена в 60% метафаз); при количественном определении экспрессии гена BCR-ABL вариант p210 методом Real-Time PCR была выявлена экспрессия BCR-ABL: 0,04% BCR-ABL.After 24 months of Gleevec treatment, the patient retained PGO, a small cytogenetic response (in the control standard cytogenetic study: 20 metaphases were examined. Conclusion: 46XY [4], t (9; 22) (q34; q11) [16] Ph chromosome was detected in 60% metaphases); when quantifying the expression of the BCR-ABL gene, p210 variant using Real-Time PCR revealed the expression of BCR-ABL: 0.04% BCR-ABL.
Таким образом, диагноз пациента:Thus, the patient’s diagnosis:
Хронический миелолейкоз, хроническая фаза от 24.10.2006 г., риск прогноза по Sokal - низкий; полный клинико-гематологический ответ от 24.09.07 г.; малый цитогенетический ответ от 17.05.2008 г. Неудача терапии гливеком. Первичная резистентность к гливеку.Chronic myeloid leukemia, chronic phase of 10.24.2006, the risk of prognosis for Sokal is low; full clinical and hematological response of 09.24.07; small cytogenetic response of 05/17/2008. Failure of Glivecom therapy. Primary resistance to glivec.
Иммуногенетическое исследование: HLA-DRB1*14(06):DRB1*04.Immunogenetic study: HLA-DRB1 * 14 (06): DRB1 * 04.
Таким образом, наличие специфичности HLA-DRB1*14(06) способствовало развитию первичной резистентности к гливеку и неудачи терапии ХМЛ.Thus, the presence of specificity of HLA-DRB1 * 14 (06) contributed to the development of primary resistance to glivec and the failure of CML therapy.
Пример 3Example 3
Больная В., 1937 года рождения. Диагноз: Хронический миелолейкоз, хроническая фаза, впервые выявленный, риск по Sokal низкий. Диагноз установлен в гематологическом отделении ГУЗ AM ОКБ г.Астрахани 08.11.2007 г.Patient V., born in 1937. Diagnosis: Chronic myelogenous leukemia, chronic phase, first detected, Sokal risk is low. The diagnosis was made in the hematology department of the State Health Institution AM of the Design Bureau of Astrakhan on November 8, 2007.
В общем анализе крови от 08.11.2007 г.: Эр.-4,26*1012/л; гемоглобин-142 г/л; Tr-221,5*109/л; L-33,9*109/л; миелоциты - 10; метамиелоциты - 7; п - 10; с - 60; э - 3; м - 1; л - 9; м - 1; СОЭ-3 мм/ч. В миелограмме от 09.11.2007 г.: бласты - 0,6%; промиелоциты - 2,2%; миелоциты - 15,6%; метамиелоциты - 8,0%; палочкоядерные - 23,4%; сегментоядерные - 25,4% (гранулоцитарный росток раздражен, представлен всеми формами дифференцировки с преобладанием зрелых форм.In the general analysis of blood from 08/08/2007: Er.-4.26 * 10 12 / l; hemoglobin-142 g / l; Tr-221.5 * 10 9 / L; L-33.9 * 10 9 / L; myelocytes - 10; metamyelocytes - 7; n - 10; s - 60; e - 3; m - 1; l - 9; m - 1; ESR-3 mm / h. In the myelogram of November 9, 2007: blasts - 0.6%; promyelocytes - 2.2%; myelocytes - 15.6%; metamyelocytes - 8.0%; stab - 23.4%; segmented - 25.4% (granulocyte germ is irritated, is represented by all forms of differentiation with a predominance of mature forms.
По данным УЗИ: печень 151*92 мм, селезенка не увеличена.According to ultrasound: the liver is 151 * 92 mm, the spleen is not enlarged.
Диагноз подтвержден в лаборатории медицинской генетики Ростовского государственного медицинского университета методом СЦИ от 18.12.2007: было исследовано 20 метафаз. Заключение: 46 ХХ, t(9; 22)(q34; q11)[20]. Ph-хромосома выявлена в 100% метафаз.The diagnosis was confirmed in the laboratory of medical genetics at Rostov State Medical University using the SDH method of 12/18/2007: 20 metaphases were examined. Conclusion: 46 XX, t (9; 22) (q34; q11) [20]. Ph chromosome detected in 100% metaphases.
Больной 08.01.2008 был назначен гливек в дозе 400 мг. Предлеченность гидреа составила 2 месяца. При динамическом наблюдении у больной через 3 месяца от момента начала приема гливека была достигнута полная клинико-гематологическая ремиссия. В общем анализе крови от 11.04.2008: Эр.-3,8*1012/л, Hb-118 г/л, ЦП-0,9; Tr-255*109/л; L-5,1*109/л; П-7; С-42; М-8; л-40; э-3; СОЭ-2 мм/ч. Миелограмма от 11.04.2008 г.: бластные клетки - 0,3%, нейтрофилы - 60% (промиелоциты - 0,0%, миелоциты - 15%, метамиелоциты - 4%, палочкоядерные - 19%, сегментоядерные - 22%), эозинофилы - 2,1%, базофилы - 0%, лимфоциты - 13,1%, моноциты - 0,6%.The patient 08.01.2008 was prescribed glivec in a dose of 400 mg. Hydrae's predisposition was 2 months. During dynamic observation in a patient 3 months after the start of taking glivec, a complete clinical and hematological remission was achieved. In the general analysis of blood from 04/11/2008: Er.-3.8 * 10 12 / l, Hb-118 g / l, CP-0.9; Tr-255 * 10 9 / L; L-5.1 * 10 9 / L; P-7; S-42; M-8; l-40; e-3; ESR-2 mm / h. Myelogram from 04/11/2008: blast cells - 0.3%, neutrophils - 60% (promyelocytes - 0.0%, myelocytes - 15%, metamyelocytes - 4%, stab nuclear - 19%, segmented - 22%), eosinophils - 2.1%, basophils - 0%, lymphocytes - 13.1%, monocytes - 0.6%.
Через 6 месяцев терапии гливеком у больной достигнут оптимальный ответ: полный клинико-гематологический ответ, частичный цитогенетический ответ (в контрольном исследовании клеток костного мозга методом СЦИ от 02.10.2008 было исследовано 20 интерфазных ядер. Заключение: 46 XX, t (9; 22) (q34; q11) [6]/ 46 XX [14]. Результат: Ph-хромосома выявлена в 30% метафаз).After 6 months of Gleevec therapy, the patient achieved the optimal response: a complete clinical and hematological response, a partial cytogenetic response (in the control study of bone marrow cells by the SDI method from 02.10.2008, 20 interphase nuclei were examined. Conclusion: 46 XX, t (9; 22) (q34; q11) [6] / 46 XX [14]. Result: Ph chromosome detected in 30% of metaphases).
Через 12 месяцев терапии гливеком в дозе 400 мг/сут у больной сохранялся полный клинико-гематологичесий ответ. Был достигнут полный цитогенетический ответ (в контрольном исследовании клеток костного мозга методом СЦИ от 20.02.09 было исследовано 20 метафаз, результат: 46 ХХ[20], заключение: Ph-хромосома не выявлена). В контрольном количественном определении экспрессии гена BCR-ABL вариант р210 методом Real-Time PCR 20.02.2009, результат исследования: 0,21% BCR-ABL.After 12 months of Gleevec therapy at a dose of 400 mg / day, the patient retained a complete clinical and hematological response. A complete cytogenetic response was achieved (in a control study of bone marrow cells by SDH from 02.20.09, 20 metaphases were studied, result: 46 XX [20], conclusion: Ph chromosome was not detected). In the control quantitative determination of BCR-ABL gene expression, the p210 variant was performed using the Real-Time PCR method on 02.20.2009, the result of the study was 0.21% BCR-ABL.
Через 18 месяцев терапии гливеком в дозе 400 мг/сут. у больной сохранялся полный клинико-гематологический ответ, полный цитогенетический ответ. У больной был достигнут большой молекулярный ответ - в контрольном количественном определении экспрессия гена BCR-ABL методом Real-Time PCR не обнаружена (0% BCR-ABL). Через 24 месяца терапии гливеком в дозе 400 мг/сут. У больной сохранялись полный клинико-гематологический ответ, полный цитогенетический ответ и полный молекулярный ответы.After 18 months of therapy with Gleevec at a dose of 400 mg / day. the patient retained a complete clinical and hematological response, a complete cytogenetic response. A large molecular response was achieved in the patient — no real-time PCR expression of the BCR-ABL gene was detected in the control quantitative determination (0% BCR-ABL). After 24 months of Glivec therapy at a dose of 400 mg / day. The patient retained a complete clinical and hematological response, a complete cytogenetic response, and a complete molecular response.
Таким образом, диагноз пациентки на 24 месяца лечения гливеком: Хронический миелолейкоз, хроническая фаза от 08.11.2007 г. Риск по Sokal низкий. Полный клинико-гематологический ответ от 11.03.2008 г. Полный цитогенетический ответ от 20.02.09 г. Полный молекулярный ответ от 20.05.2009 г.Оптимальный ответ на терапию гливеком.Thus, the patient’s diagnosis for 24 months of treatment with glivecom: Chronic myelogenous leukemia, chronic phase of 11/08/2007. Sokal risk is low. A complete clinical and hematological response dated 03/11/2008. A complete cytogenetic response dated 2/20/09. A complete molecular response dated 05/20/2009. An optimal response to Glivecom therapy.
Иммуногенетическое исследование: DRB1*15(02); DRB1*09.Immunogenetic study: DRB1 * 15 (02); DRB1 * 09.
Таким образом, присутствие в генотипе больной специфичности HLA-DRB1*15(02) способствовало развитию оптимального ответа на терапию гливеком и указывает на благоприятный прогноз ХМЛ.Thus, the presence of HLA-DRB1 * 15 (02) in the patient’s genotype contributed to the development of an optimal response to Gleevec therapy and indicates a favorable prognosis of CML.
Пример 4. Больная В., 1936 года рождения.Example 4. Patient V., born in 1936.
Наблюдается в ГУЗ ВОКОД №1 г. Волгограда с 11.01.2001 года с диагнозом: хронический миелолейкоз, Ph - позитивный, хроническая фаза, высокая группа риска по J.Sokal. Обоснование диагноза:It has been observed in GUZ VOKOD No. 1 of Volgograd since January 11, 2001 with a diagnosis of chronic myelogenous leukemia, Ph - positive, chronic phase, high risk group according to J. Sokal. The rationale for the diagnosis:
В общем анализе крови от 12.01.2001 г.: Эг - 3,8*1012/л, Hb - 120 г/л, Tr - 152*109/л, Le - 49*109/л, миелоциты - 2%, метамиелоциты - 11%, палочкоядерные - 17%, сегментоядерные - 58%, эозинофилы - 1%, лимфоциты - 32%, моноциты - 5%, базофилы - 4%, бластные клетки - 1%, СОЭ - 26 мм/час.In the general blood test dated January 12, 2001: Eg - 3.8 * 10 12 / L, Hb - 120 g / L, Tr - 152 * 10 9 / L, Le - 49 * 10 9 / L, myelocytes - 2 %, metamyelocytes - 11%, stab - 17%, segmented - 58%, eosinophils - 1%, lymphocytes - 32%, monocytes - 5%, basophils - 4%, blast cells - 1%, ESR - 26 mm / hour.
Гепатоспленомегалия (селезенка +4 см, печень +2 см ниже реберной дуги). В миелограмме от 20.01.2001 г.: бластные клетки -1,8%, промиелоциты - 0,6%, миелоциты - 3,2%, метамиелоциты - 19,6%, палочкоядерные - 17%, сегментоядерные - 36,6%, эозинофилы - 6%.Hepatosplenomegaly (spleen +4 cm, liver +2 cm below the costal arch). In the myelogram of January 20, 2001: blast cells –1.8%, promyelocytes –0.6%, myelocytes – 3.2%, metamyelocytes –19.6%, stab nuclei –17%, segmented nuclei –– 36.6%, eosinophils - 6%.
В течение 70 месяцев больная получала терапию препаратами: миелосан (с 04.01.2001 г по 08.02.2003 г.), гидреа (с 16.03.2003 г.по 28.10.2006 г.). Был достигнут полный гематологический ответ, который сохраняется до настоящего времени. При цитогенетическом исследовании костного мозга от 15.10.2006 г.методом СЦИ 46, XX, t(9; 22)(q34; q11)[20] выявлена Ph-хромосома в 100% метафаз.For 70 months, the patient received therapy with drugs: myelosan (from January 4, 2001 to February 8, 2003), hydrea (from March 16, 2003 to October 28, 2006). A complete hematological response has been achieved, which remains to date. During a cytogenetic study of bone marrow dated October 15, 2006 by the SDI method 46, XX, t (9; 22) (q34; q11) [20], a Ph chromosome in 100% metaphases was detected.
С 08.11.2006 г. больная начала получать гливек в стандартной дозе 400 мг в сутки.Since 08/08/2006, the patient began to receive glivec in a standard dose of 400 mg per day.
Через 3 месяца лечения сохранялся полный гематологический ответ (оптимальный ответ по критериям ELN - 2009). В общем анализе крови от 11.02.2007 г.: Эр - 4,35*1012/л, Hb - 141 г/л, Tr - 178*1012/л; Le - 4,8*109/л; палочкоядерные - 2%, сегментоядерные - 48%, эозинофилы - 1%, лимфоциты - 24%, моноциты - 1%, СОЭ - 5 мм/час.After 3 months of treatment, a complete hematological response was retained (optimal response according to ELN criteria - 2009). In the general blood test dated February 11, 2007: Er - 4.35 * 10 12 / l, Hb - 141 g / l, Tr - 178 * 10 12 / l; Le - 4.8 * 10 9 / l; stab - 2%, segmented - 48%, eosinophils - 1%, lymphocytes - 24%, monocytes - 1%, ESR - 5 mm / hour.
Миелограмма от 17.02.2007 г.: бластные клетки - 0,8%, нейтрофилы - 65% (промиелоциты - 5%, миелоциты - 17%, метамиелоциты - 5%, палочкоядерные - 18%, сегментоядерные - 20%), эозинофилы - 4,8%, базофилы - 0%, лимфоциты - 17,2%, моноциты - 0,6%. При физикальном осмотре не обнаружено гепато- и спленомегалии. На фоне терапии гливеком у больной развилась негематологическая токсичность (отеки, требующие приема диуретиков). Впервые после начала терапии гливеком цитогенетическое исследование клеток костного мозга и количественное определение экспрессии гена BCR-ABL проведено через 18 месяцев: при цитогенетическом исследовании костного мозга от 15.05.2008 г. методом СЦИ исследовано 20 метафаз. Заключение: 46 XX, t(9; 22) (q 34; q 11) Ph-хромосома выявлена в 100% клеток костного мозга. Количественное определение экспрессии гена BCR-ABL от 15.05.2008 г. Заключение: высокая экспрессия гена BCR-ABL (13,5%).Myelogram from 02.17.2007: blast cells - 0.8%, neutrophils - 65% (promyelocytes - 5%, myelocytes - 17%, metamyelocytes - 5%, stab nuclear - 18%, segmented - 20%), eosinophils - 4 , 8%, basophils - 0%, lymphocytes - 17.2%, monocytes - 0.6%. On physical examination, hepato- and splenomegaly were not found. During the treatment with Gleevec, the patient developed non-hematologic toxicity (edema requiring diuretics). For the first time since the start of Gleevec therapy, a cytogenetic study of bone marrow cells and a quantitative determination of the expression of the BCR-ABL gene was carried out after 18 months: 20 metaphases were studied using the SDI method for a bone marrow cytogenetic study of May 15, 2008. Conclusion: 46 XX, t (9; 22) (q 34; q 11) Ph chromosome was detected in 100% of bone marrow cells. Quantitative determination of BCR-ABL gene expression dated May 15, 2008. Conclusion: high expression of the BCR-ABL gene (13.5%).
Согласно критериям ELN 2009 данный ответ оценен как неудача терапии. Установлена первичная цитогенетическая резистентность от 15.05.2008 г. Неудача терапии гливеком. В связи с неэффективностью гливека в 400 мг через 18 месяцев лечения гливеком доза была увеличена до 600 мг в сутки.According to the criteria of ELN 2009, this answer is rated as treatment failure. The primary cytogenetic resistance of 05/15/2008 was established. Failure of Glivecom therapy. Due to the inefficiency of glivec 400 mg after 18 months of treatment with glivec, the dose was increased to 600 mg per day.
Через 24 месяца лечения гливеком в дозе 600 мг/сут сохранялся полный гематологический ответ и был получен лишь минимальный цитогенетический ответ. Цитогенетическое исследование костного мозга от 10.11.2008 г. методом СЦИ, исследовано 20 метафаз. Заключение: 46 XX, t(9;22) (q 34; q 11) Ph-хромосома выявилась в 86% метафаз. Количественное определение экспрессии гена BCR-ABL от 10.11.2008 г. составляло - 1,5% (отсутствие молекулярного ответа по критериям ELN - 2009).After 24 months of treatment with Gleevec at a dose of 600 mg / day, a complete hematological response remained and only a minimal cytogenetic response was obtained. Cytogenetic study of bone marrow from 10.11.2008, the method of SDH, investigated 20 metaphases. Conclusion: 46 XX, t (9; 22) (q 34; q 11) Ph-chromosome was detected in 86% of metaphases. The quantitative determination of BCR-ABL gene expression dated November 10, 2008 was 1.5% (the absence of a molecular response according to ELN criteria - 2009).
Через 30 месяцев терапии гливеком сохранялся полный гематологический, минимальный цитогенетический ответы и отсутствовал молекулярный ответ. Цитогенетическое исследование от 11.06.2009 г. методом СЦИ. Заключение: 46 XX, t(9; 22) (q 34; q 11) Ph-хромосома выявилась в 81% метафаз. Количественное определение экспрессии гена BCR-ABL от 11.06.2009 г. составлял - 2,8% (отсутствие молекулярного ответа по критериям ELN - 2009).After 30 months of Gleevec therapy, a complete hematological, minimal cytogenetic response was maintained and there was no molecular response. Cytogenetic study of June 11, 2009 by the SDH method. Conclusion: 46 XX, t (9; 22) (q 34; q 11) Ph-chromosome was detected in 81% of metaphases. The quantitative determination of BCR-ABL gene expression dated June 11, 2009 was 2.8% (the absence of a molecular response according to ELN criteria - 2009).
Через 36 месяцев был утрачен минимальный цитогенетический ответ, сохранялся полный гематологический ответ. Контрольное цитогенетическое исследование методом СЦИ от 10.12.2009 г. Заключение: 46 XX, t(9; 22) (q 34; q 11) обнаружена Ph-хромосома в 100% клетках костного мозга. Количественное определение гена BCR-ABL составлял 4,5%. Также сохранялась негематологическая токсичность (отеки, требующие приема мочегонных препаратов). Данный ответ расценен как вторичная резистентность к гливеку. Неудача терапии гливеком.After 36 months, the minimal cytogenetic response was lost, and the complete hematological response was preserved. A control cytogenetic study using the SDH method of December 10, 2009. Conclusion: 46 XX, t (9; 22) (q 34; q 11) detected a Ph chromosome in 100% of bone marrow cells. Quantification of the BCR-ABL gene was 4.5%. Non-hematologic toxicity also remained (edema requiring diuretics). This response is regarded as secondary glivec resistance. Failure of gleevec therapy.
Заключительный диагноз (через 36 месяцев терапии гливеком): хронический миелолейкоз, Ph - позитивный, хроническая фаза от 11.01.2001 года. Высокая группа риска по J.Sokal. Полный гематологический ответ от 11.02.2007 г.Final diagnosis (after 36 months of Glivecom therapy): chronic myelogenous leukemia, Ph - positive, chronic phase from January 11, 2001. High risk group according to J. Sokal. Full hematologic answer of 11.02.2007
Минимальный цитогенетический ответ от 10.11.2008 г.Minimum cytogenetic response of 10.11.2008
Первичная цитогенетическая резистентность к гливеку от 10.11.2008 г.Primary cytogenetic resistance to glivec from 10.11.2008
Потеря минимального цитогенетического ответа от 10.12.2009 г.Loss of minimal cytogenetic response of 12/10/2009
Вторичная резистентность к гливеку от 10.12.2009 г.Secondary resistance to glivec from 12/10/2009
Отсутствие молекулярного ответа.Lack of molecular response.
Согласно критериям ELN - 2009 данный результат является неудачей терапии.According to the criteria of ELN - 2009, this result is a failure of therapy.
Иммуногенетическое исследование: HLA-DRB1*04; DRB1*11(05).Immunogenetic study: HLA-DRB1 * 04; DRB1 * 11 (05).
Таким образом, наличие специфичности HLA-DRB1*11(05) способствовало развитию резистентности к гливеку и неудачи терапии ХМЛ.Thus, the presence of specificity of HLA-DRB1 * 11 (05) contributed to the development of resistance to glivec and the failure of CML therapy.
Предлагаемым способом достигнуто повышение точности прогнозирования исхода хронического миелолейкоза на фоне терапии гливеком. Использование иммуногенетических методов в клинической практике позволит выработать индивидуальный алгоритм ведения больного ХМЛ, что будет способствовать увеличению общей и бессобытийной выживаемости.The proposed method has achieved an increase in the accuracy of predicting the outcome of chronic myelogenous leukemia during treatment with glivec. The use of immunogenetic methods in clinical practice will allow us to develop an individual algorithm for managing a patient with CML, which will increase the overall and event-free survival.
Достоинством способа является его высокая достоверность, однократность выполнения (генный спектр HLA не изменяется на протяжении всей жизни), что указывает на возможность широкого применения в терапевтических, гематологических стационарах.The advantage of the method is its high reliability, single execution (the HLA gene spectrum does not change throughout life), which indicates the possibility of widespread use in therapeutic, hematological hospitals.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012108809/15A RU2481583C1 (en) | 2012-03-07 | 2012-03-07 | Method for prediction of clinical effectiveness in chronic myeloid leukemia |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012108809/15A RU2481583C1 (en) | 2012-03-07 | 2012-03-07 | Method for prediction of clinical effectiveness in chronic myeloid leukemia |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2481583C1 true RU2481583C1 (en) | 2013-05-10 |
Family
ID=48789597
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012108809/15A RU2481583C1 (en) | 2012-03-07 | 2012-03-07 | Method for prediction of clinical effectiveness in chronic myeloid leukemia |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2481583C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2548766C1 (en) * | 2013-12-19 | 2015-04-20 | Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области " Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского" (ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского) | Method for determining clinical effectiveness in b-cell chronic lymphocytic leukaemia |
| RU2677279C1 (en) * | 2018-04-13 | 2019-01-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for prevention of diarrhea in patients with acute myeloblastic leukemia in case of agranulocytosis |
| RU2693815C1 (en) * | 2018-07-04 | 2019-07-04 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for managing patients with chronic myeloid leukemia in prescribing tyrosine kinase inhibitors |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2395090C2 (en) * | 2005-10-21 | 2010-07-20 | БАЙЕР ХелсКер ЛЛСи | Methods of forecasting and prediction of cancer and control on therapy of cancer |
| WO2012024543A1 (en) * | 2010-08-18 | 2012-02-23 | Caris Life Sciences Luxembourg Holdings | Circulating biomarkers for disease |
-
2012
- 2012-03-07 RU RU2012108809/15A patent/RU2481583C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2395090C2 (en) * | 2005-10-21 | 2010-07-20 | БАЙЕР ХелсКер ЛЛСи | Methods of forecasting and prediction of cancer and control on therapy of cancer |
| WO2012024543A1 (en) * | 2010-08-18 | 2012-02-23 | Caris Life Sciences Luxembourg Holdings | Circulating biomarkers for disease |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| HAWKINS B.R. Advances in Human Leukocyte Antigens and Transplantation. Advances in Clinical Chemistry, 1993; 30: 227-280. * |
| ХАМАГАНОВА Е.Г., ЗАРЕЦКАЯ Ю.М. Молекулярные механизмы ассоциаций HLA-системы с резистентностью к развитию хронического миелолейкоза. Гематология и трансфузиология, 2006; 51(1): 12-17. * |
| ХАМАГАНОВА Е.Г., ЗАРЕЦКАЯ Ю.М. Молекулярные механизмы ассоциаций HLA-системы с резистентностью к развитию хронического миелолейкоза. Гематология и трансфузиология, 2006; 51(1): 12-17. HAWKINS B.R. Advances in Human Leukocyte Antigens and Transplantation. Advances in Clinical Chemistry, 1993; 30: 227-280. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2548766C1 (en) * | 2013-12-19 | 2015-04-20 | Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области " Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского" (ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского) | Method for determining clinical effectiveness in b-cell chronic lymphocytic leukaemia |
| RU2677279C1 (en) * | 2018-04-13 | 2019-01-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for prevention of diarrhea in patients with acute myeloblastic leukemia in case of agranulocytosis |
| RU2693815C1 (en) * | 2018-07-04 | 2019-07-04 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for managing patients with chronic myeloid leukemia in prescribing tyrosine kinase inhibitors |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US9758831B2 (en) | Methods of predicting clinical course and treating multiple sclerosis | |
| US11519015B2 (en) | Methods for determining chemosensitivity and chemotoxicity | |
| Sprynski et al. | Insulin is a potent myeloma cell growth factor through insulin/IGF-1 hybrid receptor activation | |
| Weeding et al. | Genome-wide DNA methylation analysis in primary antiphospholipid syndrome neutrophils | |
| Putkonen et al. | Depth of response assessed by quantitative ASO‐PCR predicts the outcome after stem cell transplantation in multiple myeloma | |
| WO2013138237A9 (en) | Methods and compositions for the diagnosis, prognosis and treatment of acute myeloid leukemia | |
| MX2012002208A (en) | Methods for treatment of a sarcoma using an epimetabolic shifter (coenzyme q10). | |
| Obr et al. | TP53 mutation and complex karyotype portends a dismal prognosis in patients with mantle cell lymphoma | |
| JP5295950B2 (en) | Methods and reagents for detecting susceptibility to graft-versus-host disease or transplant-related death | |
| JP2017517271A (en) | Methods for diagnosing and treating multiple myeloma | |
| RU2481583C1 (en) | Method for prediction of clinical effectiveness in chronic myeloid leukemia | |
| Marcussen et al. | Molecular characteristics of high-dose melphalan associated oral mucositis in patients with multiple myeloma: a gene expression study on human mucosa | |
| İşman et al. | Association between SDF1-3′ A or CXCR4 gene polymorphisms with predisposition to and clinicopathological characteristics of prostate cancer with or without metastases | |
| Zaki et al. | Impact of CD39 expression on CD4+ T lymphocytes and 6q deletion on outcome of patients with chronic lymphocytic leukemia | |
| US20190234950A1 (en) | Method for the prognosis of multiple myeloma | |
| El-Kinawy et al. | Prognostic significance of del 17p, ZAP-70 and CD38 as independent indicators for B-CLL: correlation to response to treatment and disease outcome | |
| Severin et al. | Evidence for predictive validity of blood assays to evaluate individual radiosensitivity | |
| Shabandoust et al. | Serum 25-hydroxyvitamin D level and vitamin D receptor (VDR) polymorphisms in patients infected with Leishmania tropica: a case control study | |
| RU2580648C1 (en) | Method for predicting disease-free survival in patients with multiple myeloma after autologous hematopoietic stem cell transplantation | |
| RU2795720C1 (en) | Method for predicting the risk of development of the luminal subtype of breast cancer | |
| Bestach et al. | PS1169 CYTOKINE AND ARGINASE‐1 EXPRESSION DYNAMICS IN PATIENTS WITH CHRONIC MYELOID LEUKEMIA REVEALS EARLY MOLECULAR RESPONSE TO IMATINIB | |
| Bertoni et al. | Clinical relevance of bcl-2 (MBR)/JH rearrangement detected by polymerase chain reaction in the peripheral blood of patients with follicular lymphoma | |
| Valdes et al. | PB2099 PATIENT-SPECIFIC MULTIPLE MYELOMA MODEL USING 3D PRINTED ORGANOIDS FOR PREDICTING AND UNDERSTANDING TREATMENT RESPONSE | |
| US20210395829A1 (en) | Methods for monitoring response to treatment | |
| Midro et al. | Recurrence risks for different pregnancy outcomes and meiotic segregation analysis of spermatozoa in carriers of t (1; 11)(p36. 22; q12. 2) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140308 |