RU2481349C2 - Новые тетрациклические ингибиторы цистеиновых протеаз, их фармацевтические композиции и области их терапевтического применения - Google Patents
Новые тетрациклические ингибиторы цистеиновых протеаз, их фармацевтические композиции и области их терапевтического применения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2481349C2 RU2481349C2 RU2009120582A RU2009120582A RU2481349C2 RU 2481349 C2 RU2481349 C2 RU 2481349C2 RU 2009120582 A RU2009120582 A RU 2009120582A RU 2009120582 A RU2009120582 A RU 2009120582A RU 2481349 C2 RU2481349 C2 RU 2481349C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- fluoren
- cyclopenta
- oxime
- pentaaza
- ethyl
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 7
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 title description 2
- 229940042399 direct acting antivirals Protease inhibitors Drugs 0.000 title 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 121
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 78
- -1 phenyloxy, carboxy Chemical group 0.000 claims abstract description 66
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 35
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 28
- 102000005927 Cysteine Proteases Human genes 0.000 claims abstract description 17
- 108010005843 Cysteine Proteases Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 6
- 206010053643 Neurodegenerative disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 208000008787 Cardiovascular Disease Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 200000000018 inflammatory disease Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 125000004400 (C1-C12) alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 31
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 27
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 22
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 22
- YLQWCDOCJODRMT-UHFFFAOYSA-N Fluorenone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 YLQWCDOCJODRMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 10
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 claims description 7
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 claims description 7
- 206010027476 Metastasis Diseases 0.000 claims description 7
- 208000006551 Parasitic Disease Diseases 0.000 claims description 7
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 claims description 7
- CRNNFEKVPRFZKJ-UHFFFAOYSA-N N-fluoren-9-ylidenehydroxylamine Chemical compound C1=CC=C2C(=NO)C3=CC=CC=C3C2=C1 CRNNFEKVPRFZKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 206010012601 Diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 5
- 241000315672 SARS coronavirus Species 0.000 claims description 5
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims description 5
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 206010003246 Arthritis Diseases 0.000 claims description 4
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 claims description 4
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 claims description 4
- 230000001154 acute Effects 0.000 claims description 4
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 claims description 4
- 230000002458 infectious Effects 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 206010001897 Alzheimer's disease Diseases 0.000 claims description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 3
- 206010007554 Cardiac failure Diseases 0.000 claims description 3
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 claims description 3
- 206010019280 Heart failure Diseases 0.000 claims description 3
- 206010019663 Hepatic failure Diseases 0.000 claims description 3
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 claims description 3
- 210000003734 Kidney Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000007903 Liver Failure Diseases 0.000 claims description 3
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 claims description 3
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061536 Parkinson's disease Diseases 0.000 claims description 3
- 241000242594 Platyhelminthes Species 0.000 claims description 3
- 208000000474 Poliomyelitis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010038435 Renal failure Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims description 3
- 208000001756 Virus Disease Diseases 0.000 claims description 3
- 238000004891 communication Methods 0.000 claims description 3
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 claims description 3
- 231100000835 liver failure Toxicity 0.000 claims description 3
- 244000045947 parasites Species 0.000 claims description 3
- 206010060945 Bacterial infection Diseases 0.000 claims description 2
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 claims description 2
- 206010047461 Viral infection Diseases 0.000 claims description 2
- 230000017613 viral reproduction Effects 0.000 claims description 2
- 230000001684 chronic Effects 0.000 claims 4
- 230000000302 ischemic Effects 0.000 claims 3
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 208000010370 Adenoviridae Infections Diseases 0.000 claims 1
- 208000003432 Bone Disease Diseases 0.000 claims 1
- 241000193464 Clostridium sp. Species 0.000 claims 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims 1
- 208000007565 Gingivitis Diseases 0.000 claims 1
- 208000005252 Hepatitis A Diseases 0.000 claims 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 claims 1
- 206010021425 Immune system disease Diseases 0.000 claims 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims 1
- 210000004153 Islets of Langerhans Anatomy 0.000 claims 1
- 208000009883 Joint Disease Diseases 0.000 claims 1
- 210000004185 Liver Anatomy 0.000 claims 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 claims 1
- 206010061494 Rhinovirus infection Diseases 0.000 claims 1
- 206010041925 Staphylococcal infection Diseases 0.000 claims 1
- 206010061372 Streptococcal infection Diseases 0.000 claims 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 claims 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 claims 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 claims 1
- 230000002503 metabolic Effects 0.000 claims 1
- 210000003867 nerve cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000002569 neurons Anatomy 0.000 claims 1
- 230000001590 oxidative Effects 0.000 claims 1
- 201000008838 periodontal disease Diseases 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 125000004642 (C1-C12) alkoxy group Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000004453 alkoxycarbonyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 41
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N acetic acid ethyl ester Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 29
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 27
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 description 24
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 20
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 19
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 18
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 16
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 15
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 15
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- 150000003536 tetrazoles Chemical class 0.000 description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N Imidazole Chemical compound C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 125000004432 carbon atoms Chemical group C* 0.000 description 11
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 11
- 230000002194 synthesizing Effects 0.000 description 11
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 102100011579 USP7 Human genes 0.000 description 10
- 108010032448 Ubiquitin-Specific Peptidase 7 Proteins 0.000 description 10
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 10
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 9
- 239000002585 base Substances 0.000 description 9
- 102100011581 USP8 Human genes 0.000 description 8
- 101700064687 USP8 Proteins 0.000 description 8
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 8
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 8
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 8
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108091005771 Peptidases Proteins 0.000 description 7
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 7
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N edta Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 6
- 102000004225 Cathepsin B Human genes 0.000 description 6
- 229920002676 Complementary DNA Polymers 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 6
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 6
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 6
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 6
- 125000005842 heteroatoms Chemical group 0.000 description 6
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 6
- 230000003287 optical Effects 0.000 description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 6
- 230000002829 reduced Effects 0.000 description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 6
- 102000003952 Caspase 3 Human genes 0.000 description 5
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 5
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 description 5
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 1-[(1S,2R,3R,4S,5R,6R)-3-carbamimidamido-6-{[(2R,3R,4R,5S)-3-{[(2S,3S,4S,5R,6S)-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-3-(methylamino)oxan-2-yl]oxy}-4-formyl-4-hydroxy-5-methyloxolan-2-yl]oxy}-2,4,5-trihydroxycyclohexyl]guanidine Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 229940098773 Bovine Serum Albumin Drugs 0.000 description 4
- 108091003117 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N DDT Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C(C(Cl)(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N N'-amino-N-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 4
- MNCQRDMUOBPJCR-UHFFFAOYSA-N N-methoxyfluoren-9-imine Chemical compound C1=CC=C2C(=NOC)C3=CC=CC=C3C2=C1 MNCQRDMUOBPJCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N Ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000035443 Peptidases Human genes 0.000 description 4
- 102100002751 USP5 Human genes 0.000 description 4
- 101700023306 USP5 Proteins 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 4
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 4
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 4
- 125000004183 alkoxy alkyl group Chemical group 0.000 description 4
- 125000005078 alkoxycarbonylalkyl group Chemical group 0.000 description 4
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 125000005160 aryl oxy alkyl group Chemical group 0.000 description 4
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 108010042785 ubiquitin C-terminal 7-amido-4-methylcoumarin Proteins 0.000 description 4
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N D-sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 102000033147 ERVK-25 Human genes 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N Sucrose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)[C@@]1(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N 0.000 description 3
- 102000018390 Ubiquitin-Specific Proteases Human genes 0.000 description 3
- 108010066496 Ubiquitin-Specific Proteases Proteins 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 125000004181 carboxyalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 3
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- 239000002852 cysteine proteinase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 3
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 3
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 3
- 230000003000 nontoxic Effects 0.000 description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 230000001575 pathological Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutic aid Substances 0.000 description 3
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 3
- 230000002335 preservative Effects 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000001681 protective Effects 0.000 description 3
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 3
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- BZKBCQXYZZXSCO-UHFFFAOYSA-N sodium hydride Chemical compound [H-].[Na+] BZKBCQXYZZXSCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XMGWNAIPGOPSNX-UHFFFAOYSA-N 1,5-diaminotetrazole Chemical compound NC1=NN=NN1N XMGWNAIPGOPSNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- DQSBZDLZCZUJCJ-UHFFFAOYSA-N 2H-triazole-4,5-diamine Chemical class NC=1N=NNC=1N DQSBZDLZCZUJCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- APRZHQXAAWPYHS-UHFFFAOYSA-N 4-[5-[3-(carboxymethoxy)phenyl]-3-(4,5-dimethyl-1,3-thiazol-2-yl)tetrazol-3-ium-2-yl]benzenesulfonate Chemical compound S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=C(OCC(O)=O)C=CC=2)=NN1C1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 APRZHQXAAWPYHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IOVWOJAZNMBARY-UHFFFAOYSA-N 941568-44-1 Chemical compound C1=CC=C2C3=NN4C(CCCC)=NN=C4N=C3C(=O)C2=C1 IOVWOJAZNMBARY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MGSKVZWGBWPBTF-UHFFFAOYSA-N AEBSF Chemical compound NCCC1=CC=C(S(F)(=O)=O)C=C1 MGSKVZWGBWPBTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 2
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 230000036912 Bioavailability Effects 0.000 description 2
- ARWFDGUJOHRWHJ-UHFFFAOYSA-N C1=CC=C2C3=NN4C(C)=NN=C4N=C3C(=O)C2=C1 Chemical compound C1=CC=C2C3=NN4C(C)=NN=C4N=C3C(=O)C2=C1 ARWFDGUJOHRWHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BWIZYXKYGDJTMR-UHFFFAOYSA-N C1=CC=C2C3=NN4C(CC)=NN=C4N=C3C(=O)C2=C1 Chemical compound C1=CC=C2C3=NN4C(CC)=NN=C4N=C3C(=O)C2=C1 BWIZYXKYGDJTMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 description 2
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 2
- RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N Glycocholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N 0.000 description 2
- 208000004559 Hearing Loss Diseases 0.000 description 2
- 206010011879 Hearing loss Diseases 0.000 description 2
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 2
- 208000006454 Hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 241000709721 Hepatovirus A Species 0.000 description 2
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N Iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N Lactose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H]1CO)[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N 0.000 description 2
- 108020004999 Messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N Methyl salicylate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1O OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000003067 Myocardial Ischemia Diseases 0.000 description 2
- LPEGZUXDCRDWCB-UHFFFAOYSA-N N1=C2C(=NOC)C3=CC=CC=C3C2=NN2C(C)=NN=C21 Chemical compound N1=C2C(=NOC)C3=CC=CC=C3C2=NN2C(C)=NN=C21 LPEGZUXDCRDWCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940100662 Nasal Drops Drugs 0.000 description 2
- 229940049954 Penicillin Drugs 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 210000003491 Skin Anatomy 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 229960005322 Streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 2
- 102400000757 Ubiquitin Human genes 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 2
- 150000001337 aliphatic alkines Chemical class 0.000 description 2
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 2
- 230000000172 allergic Effects 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 description 2
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 201000001320 atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial Effects 0.000 description 2
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000626 benzylpenicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000035514 bioavailability Effects 0.000 description 2
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 238000003570 cell viability assay Methods 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003111 delayed Effects 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N dilactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 2
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 231100000888 hearing loss Toxicity 0.000 description 2
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N hydroxylamine hydrochloride Substances Cl.ON WTDHULULXKLSOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 2
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 2
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 2
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 229920002106 messenger RNA Polymers 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N methylene dichloride Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000003505 mutagenic Effects 0.000 description 2
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 2
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N n-butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 2
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N oxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003071 parasitic Effects 0.000 description 2
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 2
- 230000000149 penetrating Effects 0.000 description 2
- 230000003169 placental Effects 0.000 description 2
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000017105 transposition Effects 0.000 description 2
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cells Anatomy 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 230000003612 virological Effects 0.000 description 2
- ALZSTTDFHZHSCA-RNVDEAKXSA-N (4S)-4-[[(2S)-2-acetamido-3-carboxypropanoyl]amino]-5-[[(2S)-1-[[(2S)-3-carboxy-1-[(4-methyl-2-oxochromen-7-yl)amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC1=CC(=O)OC2=CC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(C)=O)C(C)C)=CC=C21 ALZSTTDFHZHSCA-RNVDEAKXSA-N 0.000 description 1
- QWENRTYMTSOGBR-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-triazole Chemical compound C=1C=NNN=1 QWENRTYMTSOGBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004514 1,2,4-thiadiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- VVICLQXCPOEFTM-UHFFFAOYSA-N 1,2,4-triazole-3,4-diamine Chemical class NC1=NN=CN1N VVICLQXCPOEFTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 1,4-Butanediol, dimethanesulfonate Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VFHQHXUASZZPOJ-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-2,3,4,10,10a-pentaaza-cyclopenta[b]fluoren-9-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=NN4C(CC)=NN=C4N=C3C2=C1 VFHQHXUASZZPOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OXOBKZZXZVFOBB-UHFFFAOYSA-N 2-Diphenylmethylpyrrolidine Chemical class C1CCNC1C(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 OXOBKZZXZVFOBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YAQLSKVCTLCIIE-UHFFFAOYSA-M 2-bromobutanoate Chemical compound CCC(Br)C([O-])=O YAQLSKVCTLCIIE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000069 2-butynyl group Chemical group [H]C([H])([H])C#CC([H])([H])* 0.000 description 1
- UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]propane-1-sulfonate Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 0.000 description 1
- ICPOKTZORRQGLK-UHFFFAOYSA-N 3-methylbut-1-ene Chemical group C[C](C)C=C ICPOKTZORRQGLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N AI2O3 Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010021160 Ac-aspartyl-glutamyl-valyl-aspartyl-aminomethylcoumarin Proteins 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000000230 African Trypanosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 208000004881 Amebiasis Diseases 0.000 description 1
- 206010001980 Amoebiasis Diseases 0.000 description 1
- 241001147657 Ancylostoma Species 0.000 description 1
- 206010059512 Apoptosis Diseases 0.000 description 1
- 241001126258 Ascaris sp. Species 0.000 description 1
- 229940009098 Aspartate Drugs 0.000 description 1
- 241000228197 Aspergillus flavus Species 0.000 description 1
- 241000228257 Aspergillus sp. Species 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 241000244036 Brugia Species 0.000 description 1
- OSGPQKWUWXJPHK-UHFFFAOYSA-N C1=CC=C2C(=O)C3=NN4C(CCCC)=NN=C4N=C3C2=C1 Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=NN4C(CCCC)=NN=C4N=C3C2=C1 OSGPQKWUWXJPHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100015379 CTSS Human genes 0.000 description 1
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L Caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N Carbamazepine Chemical compound C1=CC2=CC=CC=C2N(C(=O)N)C2=CC=CC=C21 FFGPTBGBLSHEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000258 Cathepsin D Proteins 0.000 description 1
- 102000003908 Cathepsin D Human genes 0.000 description 1
- 108090000625 Cathepsin K Proteins 0.000 description 1
- 102000004171 Cathepsin K Human genes 0.000 description 1
- 108090000613 Cathepsin S Proteins 0.000 description 1
- 201000003884 Chagas disease Diseases 0.000 description 1
- 108090001092 Clostripain Proteins 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 229960001681 Croscarmellose Sodium Drugs 0.000 description 1
- 229920002785 Croscarmellose sodium Polymers 0.000 description 1
- 208000008953 Cryptosporidiosis Diseases 0.000 description 1
- 206010011502 Cryptosporidiosis infection Diseases 0.000 description 1
- 241000295636 Cryptosporidium sp. Species 0.000 description 1
- YYLLIJHXUHJATK-UHFFFAOYSA-N Cyclohexyl acetate Chemical compound CC(=O)OC1CCCCC1 YYLLIJHXUHJATK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N D-serine Chemical compound OC[C@@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N DL-aspartic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940009976 Deoxycholate Drugs 0.000 description 1
- 241000915524 Entamoeba sp. Species 0.000 description 1
- 229950008932 Epolamine Drugs 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N Ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 241001263042 Fasciola sp. Species 0.000 description 1
- 208000006275 Fascioliasis Diseases 0.000 description 1
- 241000224470 Giardia sp. Species 0.000 description 1
- 108050001705 Gingipain Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N HCl Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N HEPES Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000243976 Haemonchus Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 1
- 229940039717 Lanolin Drugs 0.000 description 1
- 241001137872 Leishmania sp. Species 0.000 description 1
- 208000004554 Leishmaniasis Diseases 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M Lithium acetate Chemical compound [Li+].CC([O-])=O XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940071257 Lithium acetate Drugs 0.000 description 1
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N Meglumine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 description 1
- 229960003194 Meglumine Drugs 0.000 description 1
- 240000006217 Mentha pulegium Species 0.000 description 1
- 235000016257 Mentha pulegium Nutrition 0.000 description 1
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004909 Moisturizer Substances 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinylpyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000243981 Onchocerca Species 0.000 description 1
- 241000243985 Onchocerca volvulus Species 0.000 description 1
- 208000002042 Onchocerciasis Diseases 0.000 description 1
- 239000004264 Petrolatum Substances 0.000 description 1
- 229940066842 Petrolatum Drugs 0.000 description 1
- 241001442539 Plasmodium sp. Species 0.000 description 1
- 229940068917 Polyethylene Glycols Drugs 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229940069328 Povidone Drugs 0.000 description 1
- 210000002307 Prostate Anatomy 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010037075 Protozoal infection Diseases 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N Saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 Saccharin Drugs 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N Salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000242678 Schistosoma Species 0.000 description 1
- 229920001800 Shellac Polymers 0.000 description 1
- QDRKDTQENPPHOJ-UHFFFAOYSA-N Sodium ethoxide Chemical compound [Na+].CC[O-] QDRKDTQENPPHOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001147693 Staphylococcus sp. Species 0.000 description 1
- 241000194022 Streptococcus sp. Species 0.000 description 1
- 108090000794 Streptopain Proteins 0.000 description 1
- 241000244174 Strongyloides Species 0.000 description 1
- 108060008443 TPPP Proteins 0.000 description 1
- 241000244155 Taenia Species 0.000 description 1
- FKHIFSZMMVMEQY-UHFFFAOYSA-N Talc Chemical compound [Mg+2].[O-][Si]([O-])=O FKHIFSZMMVMEQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000035335 Threonine proteases Human genes 0.000 description 1
- 108091005539 Threonine proteases Proteins 0.000 description 1
- 241000244031 Toxocara Species 0.000 description 1
- 241000223996 Toxoplasma Species 0.000 description 1
- 229940116362 Tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 241000243774 Trichinella Species 0.000 description 1
- 208000005448 Trichomonas Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000220979 Trichomonas sp. Species 0.000 description 1
- 206010044620 Trichomoniasis Diseases 0.000 description 1
- 241001489151 Trichuris Species 0.000 description 1
- 229940035504 Tromethamine Drugs 0.000 description 1
- 241000223105 Trypanosoma brucei Species 0.000 description 1
- 241000223109 Trypanosoma cruzi Species 0.000 description 1
- 241000223093 Trypanosoma sp. Species 0.000 description 1
- 102100015867 UCHL3 Human genes 0.000 description 1
- 101700019160 UCHL3 Proteins 0.000 description 1
- ASCUXPQGEXGEMJ-GPLGTHOPSA-N [(2R,3S,4S,5R,6S)-3,4,5-triacetyloxy-6-[[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-triacetyloxy-6-(4-methylanilino)oxan-2-yl]methoxy]oxan-2-yl]methyl acetate Chemical compound CC(=O)O[C@@H]1[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](OC(C)=O)[C@@H](COC(=O)C)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](OC(C)=O)[C@H](NC=2C=CC(C)=CC=2)O1 ASCUXPQGEXGEMJ-GPLGTHOPSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000102 alkali metal hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008046 alkali metal hydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloids Natural products 0.000 description 1
- 125000004450 alkenylene group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001347 alkyl bromides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004419 alkynylene group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000111 anti-oxidant Effects 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 125000006615 aromatic heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000732 arylene group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004429 atoms Chemical group 0.000 description 1
- 125000000499 benzofuranyl group Chemical group O1C(=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001164 benzothiazolyl group Chemical group S1C(=NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000002902 bimodal Effects 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000001488 breeding Effects 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 125000000609 carbazolyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=CC=C3NC12)* 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 1
- 201000011231 colorectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 235000010947 crosslinked sodium carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000010192 crystallographic characterization Methods 0.000 description 1
- 125000002993 cycloalkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003493 decenyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000002704 decyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000005070 decynyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C#C* 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-M deoxycholate Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-M 0.000 description 1
- 230000001419 dependent Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- SCIZLHIMZCLSND-UHFFFAOYSA-N diamino(carbamimidoyl)azanium;chloride Chemical compound Cl.NN(N)C(N)=N SCIZLHIMZCLSND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005043 dihydropyranyl group Chemical group O1C(CCC=C1)* 0.000 description 1
- 125000004925 dihydropyridyl group Chemical group N1(CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 125000005072 dihydrothiopyranyl group Chemical group S1C(CCC=C1)* 0.000 description 1
- 125000000532 dioxanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005879 dioxolanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 125000005883 dithianyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000003821 enantio-separation Methods 0.000 description 1
- XBRDBODLCHKXHI-UHFFFAOYSA-N epolamine Chemical compound OCCN1CCCC1 XBRDBODLCHKXHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000007306 functionalization reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 201000006592 giardiasis Diseases 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 1
- 125000005549 heteroarylene group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008079 hexane Substances 0.000 description 1
- 235000001050 hortel pimenta Nutrition 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atoms Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002632 imidazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002636 imidazolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N iodine atom Chemical group [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N iso-propanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001786 isothiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 125000000842 isoxazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 239000000391 magnesium silicate Substances 0.000 description 1
- 235000019792 magnesium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052919 magnesium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- XOBKSJJDNFUZPF-UHFFFAOYSA-N methoxyethyl Chemical group CCOC XOBKSJJDNFUZPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001047 methyl salicylate Drugs 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001333 moisturizer Effects 0.000 description 1
- 125000002757 morpholinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006452 multicomponent reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004370 n-butenyl group Chemical group [H]\C([H])=C(/[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000000740 n-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005187 nonenyl group Chemical group C(=CCCCCCCC)* 0.000 description 1
- 125000001400 nonyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N o-xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004365 octenyl group Chemical group C(=CCCCCCC)* 0.000 description 1
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000005069 octynyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C#C* 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic Effects 0.000 description 1
- 125000000466 oxiranyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic Effects 0.000 description 1
- 125000003538 pentan-3-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000006678 peppermint Nutrition 0.000 description 1
- 235000015132 peppermint Nutrition 0.000 description 1
- 235000007735 peppermint Nutrition 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000000275 pharmacokinetic Effects 0.000 description 1
- 125000004437 phosphorous atoms Chemical group 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 125000004193 piperazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005936 piperidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 125000004585 polycyclic heterocycle group Chemical group 0.000 description 1
- 229920002503 polyoxyethylene-polyoxypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000001184 potassium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- OCFVSFVLVRNXFJ-UHFFFAOYSA-N potassium hydride Inorganic materials [H-].[K+] OCFVSFVLVRNXFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N precursor Substances N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003405 preventing Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive Effects 0.000 description 1
- 125000004368 propenyl group Chemical group C(=CC)* 0.000 description 1
- 230000000069 prophylaxis Effects 0.000 description 1
- 230000002633 protecting Effects 0.000 description 1
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 1
- 239000003586 protic polar solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 125000000561 purinyl group Chemical group N1=C(N=C2N=CNC2=C1)* 0.000 description 1
- 125000004309 pyranyl group Chemical group O1C(C=CC=C1)* 0.000 description 1
- 125000003373 pyrazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003072 pyrazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002755 pyrazolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003226 pyrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000719 pyrrolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001422 pyrrolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000002943 quinolinyl group Chemical group N1=C(C=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000002105 relative biological effectiveness Effects 0.000 description 1
- 238000001226 reprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive Effects 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000004208 shellac Substances 0.000 description 1
- 229940113147 shellac Drugs 0.000 description 1
- 235000013874 shellac Nutrition 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 201000002612 sleeping sickness Diseases 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000003718 tetrahydrofuranyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005942 tetrahydropyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004632 tetrahydrothiopyranyl group Chemical group S1C(CCCC1)* 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000001984 thiazolidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000335 thiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000004568 thiomorpholinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000001519 tissues Anatomy 0.000 description 1
- 230000000699 topical Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 201000005485 toxoplasmosis Diseases 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 230000001131 transforming Effects 0.000 description 1
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Abstract
Описываются новые тетрациклические соединения общей формулы (I),
V означает N; Т и Х как указано в структурных фрагментах выше;
U и W - независимо означают С или N, причем один из них - обязательно N;
R3, R4, R5 и R6 - Н; Rv отсутствует;
Ru и Rw - независимо отсутствуют или означают (С1-12)алкил;
Y=N-OR1 или NR'1, где
R1 - Н, (С1-12)алкил, возможно замещенный фенилом, фенилокси, карбокси, (С1-12)алкокси, (С1-12)алкоксикарбонилом, или (С2-12)алкенил;
R'1 - фенил, или их фармацевтически приемлемые соли, или их диастереомеры, или их региоизомеры, или их смеси, фармацевтическая композиция, их содержащая, и конкретные соединения для ингибирования цистеиновых протеаз. Соединения могут найти применение в медицине при лечения рака, нейродегенеративных заболеваний, воспалительных нарушений, сердечно-сосудистых заболеваний и т.д. 4 н. и 4 з.п. ф-лы, 1 табл.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новым ингибиторам цистеиновых протеаз, способу их получения и их терапевтическому применению.
Уровень техники
Протеазы можно классифицировать на основе их субстратной специфичности или по механизмам катализа. Если исходить из механизма гидролиза пептидов, то известно пять основных классов протеаз: сериновые, циотеиновые, аспартатные, треониновые протеазы и металлопротеазы. Цистеиновые протеазы включают, в частности, ферменты деубиквитинилирования, каспазы, катепсины, кальпаины, а также пистеиновые протеазы вирусов, бактерий или паразитов.
Ферменты деубиквитинилирования включают убиквитин-специфические протеазы (USPs) и убиквитинкарбоксигидролазы (UCHs). В широком смысле, убиквитин-зависимый метаболический путь регулирует разрушение белков и, в частности, он включен в развитие рака, нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, воспаления, в инфекционность и латентность вирусов (в частности, вируса простого герпеса 1, вируса Эпштейна-Бара, коронавируса SARS) или в развитие сердечно-сосудистых заболеваний (Chem. Rev. 1997, 97, р.133-171; Chem. Rev. 2002, 102, p.4459-4488; J.Biochem. 2003, 134, p.9-18; J.Virology, 2005, 79(7), p.4550-4551; Cardiovasc. Res. 2004, 61, p.11-21).
Было показано, что каспазы вовлечены в апоптоз и, таким образом, они являются мишенями при гепатите, печеночной недостаточности, воспалении, ишемии сердца и сердечной недостаточности, почечной недостаточности, нейродегенерации, тугоухооти, диабете или инсульте (J. Pharmacol Exp. Ther., 2004, 308(3), р.1191-1196, J. Cell. Physiol., 2004, 200(2), p.177-200; Kidney Int, 2004, 66(2), р.500-506; Am J. Pathol., 2004, 165(2), p.353-355; Mini Rev. Chem., 2004, 4(2), р.153-165; Otol. Neurotol., 2004, 25(4), р.627-632; Ref. 7, 21, 22, 23, 24, 25).
Было показано, что обычно катепсины вовлечены в развитие рака и метастазирование, воспаление, иммунологию/иммунорегуляпию (Eur. Respir. J, 2004, 23(4), р.620-628) и атеросклероз (Ageing Res. Rev.. 2003, 2(4), p.407-418). Более детально, катепсины включают катепсин В и катепсин В-подобную протеазу, которые вовлечены в развитие рака и метастазирование и артрит (Cancer Metastasis Rev., 2003, 22(2-3), p.271-286; Biol. Chem., 2003, 384(6), p.845-854 и Biochem. Soc. Symp., 2003, 70, р.263-276), катепсин D, вовлеченный, в частности, в развитие рака и метастазирование (Clin. Exp. Metastasis, 2004, 21(2), p.91-106), катепсин K, действующий при остеопорозе и артрите (Int. J. Pharm., 2004, 277(1-2), р.73-79), катепсин S, который, как было показано, играет роль в презентации антигенов в иммунологии (Dryg News Perspective, 2004, 17(6), р.357-363).
Кальпаины в основном играют роль при старении (Ageing Res. Rev. 2003, 2(4), p.407-418), а также при диабете (Mol. Cell. Biochem., 2004, 261(1), р.161-167) и, в частности, при катаракте (Trends Mol. Med., 2004, 10(2), р.78-84).
Вирусные цистеиновые протеазы были обнаружены у риновирусов, вируса полиомиелита, вируса гепатита А, вируса гепатита С, аденовируса или коронавируса SARS (Chem. Rev. 1997, 97, р.133-171; Chem. Rev. 2002, 102, p.4459-4488; J. Virology, 2005, 79(7), p.4550-4551 и Acta Microbiol. Immunol. Hung., 2003, 50(1), р.95-101).
Бактериальные цистеиновые протеазы включают стрептопаин, стафилококковую цистеиновую протеазу, клострипаин или гингипаины; было также показано, что дрожжи, такие как Aspergillus flavus, экспрессируют цистеиновые протеазы, которые могут представлять собой фактор вирулентности (Chem. Rev. 1997, 97, р.133-171).
Цистеиновые протеазы паразитов были рассмотрены, например, в Molecular & Biochemical Parasitology (2002, 120, p.1-21) и Chem. Rev. (2002, 102, p.4459-4488). Следует отметить, что паразитарные агенты, ответственные за большинство паразитарных заболеваний, используют свои собственные цистеиновые протеазы в тот или иной момент их инфекционных, пищевых или репродуктивных циклов; такие заболевания включают малярию, болезнь Чагаса, африканский трипаносомоз, лейшманиоз, лямблиоз, трихомониаз, амебиаз, криптоспоридиоз, токсоплазмоз, цистосомоз, фасциолез, онхоцеркоз и другие инфекции некоторыми другими плоскими или круглыми червями.
Таким образом, обнаружение нового класса ингибиторов цистеиновых протеаз очень важно для широкого спектра заболеваний и патологических состояний.
Патенты US 6,514,927, WO 01/79209 и WO 02/02562 раскрывают соединения, включающие 4 конденсированных цикла. Однако их применение в качестве ингибиторов цистеиновых протеаз предложено не было.
Раскрытие изобретения
В соответствии с первой целью настоящее изобретение относится к соединению
где:
представляет собой 5-7-членный гетероцикл, предпочтительно гетероарил, включающий от 1 до 5 гетероатомов, необязательно замещенных одним или несколькими заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из Н, CN, =O, Hal, Alk, OAlk, ОН, NRCN, C(CN)=C(OH)(OAlk), SR, NRR', C(O)NRR', гетероцикла, арила, гетероарила, где Alk, арил, гетероарил, гетероцикл необязательно замещены Hal, NRR', CN, ОН, CF3, арилом, гетероарилом, OAlk;
Y представляет собой N-OR1, NR'1, CR2R'2;
R1 представляет собой Н, алкил, алкенил, алкоксиалкил, арилоксиалкил, арилалкил, алкоксикарбонилалкил, карбоксиалкил;
R'1 представляет собой Н, алкил, арил или арилалкил;
каждый из R2, R'2 является одной и той же или разными группами, и их независимо выбирают из Н, алкила, арила или арилалкила;
Т, U, V, W, Х являются одинаковыми или разными, и их выбирают из С, N, О, S.
Ru, Rv, Rw являются одинаковыми или разными, и их выбирают из группы, состоящей из Н, CN, =O, Hal, Alk, OAlk, OH, NRCN, C(CN)=C(OH)(OAlk), SR, NRR', C(O)NRR' гетероцикла, арила, гетероарила, циклоалкила, где Alk, арил, гетероарил, гетероцикл, циклоалкил необязательно замещены Hal, NRR', CN, ОН, CF3, арилом, гетероарилом, OAlk.
Каждая из R3, R4, R5, R6 является одной и той же или разными группами, и их независимо выбирают из группы, состоящей из Н, OAlk, Alk, Hal, NRR', CN, ОН, OCF3, CF3, арила, гетероарила;
каждая из R и R' является одной и той же или разными группами, и их независимо выбирают из группы, состоящей из Н, Alk, где Alk необязательно замещен Hal, NRR', CN, ОН, CF3, арилом, гетероарилом;
или к его фармацевтически приемлемым солям, гидратам или гидратированным солям, или к полиморфным кристаллическим структурам этих соединений, или к их оптическим изомерам, рацематам, диастереомерам или энантиомерам, или к их региоизомерам, геометрическим изомерам (Е и Z), или к их смесям.
Предпочтительно Т, U, V, W, Х являются С или N.
Предпочтительно Y представляет собой N-OR1 или NR'1, более предпочтительно N-OR1, в частности, N-OH, N-алкил, N-O-алкенил, N-O-алкил-О-алкил, N-O-алкил-СО-О-алкил, N-O-алкил-СООН.
Следует понимать, что если Y представляет собой CR2R2', то R2 и/или R2' не могут образовывать конденсированное кольцо с остатком структуры формулы (I).
Предпочтительно содержит 2 или 3 гетероатома; более предпочтительно 2 или 3 N. Наиболее предпочтительно представляет собой , или .
Предпочтительно Ru, Rv, Rw выбирают из Н, арила, Alk, NRR', Hal, -алкиларила, -AlkOH, -AlkOAlk, циклоалкила.
Предпочтительно каждая из R3, R4, R5, R6 является одной и той же или разными группами, и их независимо выбирают из группы, состоящей из Н, Hal, Alk, OAlk, OCF3.
Предпочтительно каждая из R и R' является одной и той же или разными группами,
и их независимо выбирают из группы, состоящей из Н, Alk.
Предпочтительно Rv, Rw либо представляют собой Н, либо отсутствуют.
Предпочтительными соединениями формулы (I), являются соединения формулы
Наиболее предпочтительные соединения, в частности, представляют собой соединения формулы (I1)-(I4):
Предпочтительные соединения изобретения выбирают из группы, состоящей из:
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b] флуорен-9-она O-метил-оксима
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b] флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1-метил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b] флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 3-бутил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b] флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1-бутил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-децил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(2-метокси-этил)-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(3-фенокси-пропил)-оксима
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-этил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-этип-оксима
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b] флуорен-9-она O-бензил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-бензил-оксима
- [1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-илиден]-фенил-амина
- этилового эфира (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-уксусной кислоты
- (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-ацетата лития,
или их фармацевтически приемлемых солей, гидратов или гидратированных солей, или полиморфных кристаллических структур этих соединений, или их оптических изомеров, рацематов, диастереомеров или энантиомеров, или их региоизомеров, геометрических изомеров (Е и Z), или их смесей.
Наиболее предпочтительные соединения, в частности, выбирают из группы, состоящей из:
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 3-бутил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-децил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(2-метокси-этил)-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(3-фенокси-пропил)-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-этил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- этилового эфира (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-уксусной кислоты
- (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-ацетата лития,
или их фармацевтически приемлемых солей, гидратов или гидратированных солей, или полиморфных кристаллических структур этих соединений, или их оптических изомеров, рацематов, диастереомеров или энантиомеров, или их региоизомеров, геометрических изомеров (Е и Z), или их смесей.
Как было указано в этом документе ранее и как будет указано ниже:
«Alk» представляет собой алкил, алкен или алкин.
«Алкил» означает алифатическую углеводородную группу, которая может быть линейной или разветвленной и иметь в цепи от 1 до 20 атомов углерода. Предпочтительные алкильные группы имеют в цепи от 1 до 12 атомов углерода. Термин «разветвленные» означает, что к линейной алкильной цепи присоединены одна или несколько низших алкильных групп, таких как метил, этил или пропил. Примеры алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, трет-бутил, н-пентил, 3-пентил, октил, нонил, децил.
Термин «алкен» означает алифатическую углеводородную группу, которая содержит двойную связь углерод-углерод и которая может быть линейной или разветвленной; имеющую в цепи от 2 до 15 атомов углерода. Предпочтительные алкенильные группы имеют в цепи от 2 до 12 атомов углерода и, более предпочтительно, примерно от 2 до 4 атомов углерода в цепи. Примеры алкенильных групп включают этенил, пропенил, н-бутенил, изо-бутенил, 3-метилбут-2-енил, н-пентенил, гептенил, октенил, ноненил, деценил.
Термин «алкин» означает алифатическую углеводородную группу, которая содержит тройную связь углерод-углерод и которая может быть линейной или разветвленной; имеющую в цепи от 2 до 15 атомов углерода. Предпочтительные алкинильные группы имеют в цепи от 2 до 12 атомов углерода и, более предпочтительно, от 2 до 4 атомов углерода в цепи. Примеры алкинильных групп включают этинил, пропилил, н-бутинил, 2-бутинил, 3-метилбутинил, н-пентинил, гептинил, октинил и децинил.
Термин «алкоксиалкил» означает группу алкил-O-алкил, в которой алкильные группы являются независимыми группами, определенными в этом документе ранее. Примером алкоксиалкила является метоксиэтил.
Термин «алкоксикарбонилалкил» означает группу алкил-O-СО-алкил-, в которой алкильные группы являются независимыми группами, определенными в этом документе ранее. Примеры алкоксикарбонилалкильных групп включают метокси- и этоксикарбонилметильные и карбонилэтильные группы.
Термин «атом галогена» относится к атомам фтора, хлора, брома или йода; предпочтительно к атомам фтора и хлора.
Термин «арил» означает ароматическое моноциклическую или полициклическую углеводородную кольцевую систему, состоящую из 6-14 атомов углерода, предпочтительно 6-10 атомов углерода. Примеры арильных групп включают фенил или нафтил.
Термин «арилалкил» означает группу арил-алкил-, в которой арильные и алкильные группы были определены в этом документе. Примером арилалкильных групп является бензил.
Термин «арилоксиалкил» означает группу арил-O-алкил-, в которой алкильные и арильные группы были определены в этом документе. Примером арилоксиалкильной группы является феноксипропил.
Используемые в этом документе термины «гетероцикл» или «гетероциклический» относятся к насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным неароматическим стабильным 3-14-, предпочтительно 5-10-членным моно-, би- или полициклическим кольцам, в которых, по меньшей мере, один атом кольца является гетероатомом. Обычно гетероатомы включают без ограничения атомы кислорода, азота, серы, селена и фосфора. Предпочтительные гетероатомы являются кислородом, азотом и серой.
Пригодные гетероциклы также раскрыты в книге The Handbook of Chemistry and Physics, 76th Edition, CRC Press, Inc., 1995-1996, p.2-25 to 2-26, содержание которой включено в этот документ путем отсылки.
Предпочтительные неароматические гетероциклические группы включают, но не ограничены только ими, пирролидинил, пиразолидинил, имидазолидинил, оксиранил, тетрагидрофуранил, диоксоланил, тетрагидропиранил, диоксанил, пиперидил, пиперазинил, морфолинил, пиранил, имидазолинил, пирролинил, пиразолинил, тиазолидинил, тетрагидротиопиранил, дитианил, тиоморфолинил, дигидропиранил, тетрагидропиранил, тетрагидропиридил, дигидропиридил, тетрагидропиримидинил, дигидротиопиранил, азепанил, а также конденсированные системы, образующиеся в результате конденсации с фенильной группой.
Используемый в этом документе термин «гетероарильные» или ароматические гетероциклы относится к 5-14-, предпочтительно 5-10-членному ароматическому моно-, би- или полициклическому гетероциклу. Примеры включают пирролил, пиридил, пиразолил, тиенил, пиримидинил, пиразинил, тетразолил, индолил, хинолинил, пуринил, имидазолил, тиенил, тиазолил, бензотиазолил, фуранил, бензофуранил, 1,2,4-тиадиазолил, изотиазолил, триазолил, тетразолил, изохинолил, бензотиенил, изобензофурил, карбазолил, бензимидозалил, изоксазолил, пиридил-N-оксид, а также конденсированные системы, образующиеся в результате конденсации с фенильной группой.
Термин «карбоксиалкил» означает группу НООС-алкил-, в которой алкильная группа была определена в этом документе. Предпочтительные группы включают карбоксиметил и карбоксиэтил.
Термины «алкил», «циклоалкил», «алкенил», «алкинил», «арил», «гетероарил», «гетероцикл» и т.п.также относятся к соответствующему «алкилену», «циклоалкилену», «алкенилену», «алкинилену», «арилену», «гетероарилену», «гетероциклену» и т.п., которые образованы путем удаления двух атомов водорода.
Используемый в этом документе термин «пациент» относится или к животному, такому как животное, полезное в целях разведения, объединения и защиты, или предпочтительно к человеку или ребенку, который поражен или рискует быть пораженным одной или несколькими болезнями и состояниями, описанными в этом документе.
Используемый в этом документе термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству соединения настоящего изобретения, которое эффективно для профилактики, уменьшения, устранения, лечения и контролирования симптомов описанных в этом документе заболеваний и состояний. Термин «контролирование» относится ко всем процессам, в которых может быть замедлено, прервано, подавлено или остановлено прогрессирование заболеваний и состояний, описанных в этом документе, но не указывает в обязательном порядке на полное прекращение всех симптомов заболевания и состояния, и включает профилактическое лечение.
Используемый в этом документе термин «фармацевтически приемлемый» относится к тем соединениям, материалам, эксципиентам, композициям или лекарственным формам, которые в рамках вынесенного медицинского заключения являются пригодными для контакта с тканями людей или животных и не вызывают избыточную токсичность, раздражение, аллергический ответ или другие проблемные осложнения, соизмеримые с допустимым соотношением польза/риск.
Используемый в этом документе термин «фармацевтически приемлемые соли» относится к производным раскрытых соединений, в которых исходное соединение модифицируют путем создания их солей с кислотой или основанием. Фармацевтически приемлемые соли включают общепринятые нетоксичные соли или четвертичные аммониевые соли исходного соединения, образуемые, например, из нетоксичных неорганических или органических кислот. Например, такие общепринятые нетоксичные соли включают соли неорганических кислот, таких как соляная, бромистоводородная, серная, сульфамовая, фосфорная, азотная кислота и т.п.; и соли, полученные из органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, янтарная, винная, лимонная, метансульфоновая, бензолсульфоновая, глюкуроновая, глутаминовая, бензойная, салициловая, толуолсульфоновая, щавелевая, фумаровая, малеиновая, молочная кислота и т.п. Кроме того, соли, полученные путем добавления кислот или оснований, включают соли аммония, такие как соли трометамина, меглумина, эполамина и т.п., соли металлов, таких как натрий, калий, кальций, цинк или магний.
Фармацевтически приемлемые соли настоящего изобретения можно синтезировать из исходного соединения, которое содержит основную или кислотную функциональную группу, с помощью традиционных химических методов. Обычно такие соли можно получать с помощью реакции свободных кислотных или основных форм этих соединений со стехиометрическим количеством подходящего основания или кислоты в водном или органическом растворителе или в смеси двух этих растворителей. Обычно предпочтительными являются неводные среды, например, диэтиловый эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил. Список пригодных солей представлен в справочнике Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, p.1418, содержание которого включено в этот документ путем отсыпки.
Соединения с общей формулой (I), имеющие геометрические изомеры, региоизомеры и стереоизомеры, также являются частью изобретения.
В соответствии со следующей целью настоящее изобретение также относится к способу получения соединений, имеющих формулу (I).
Соединения и способ настоящего изобретения могут быть выполнены различными путями, хорошо известными специалистам в этой области техники. Соединения могут быть синтезированы, например, путем применения или адаптирования методов, описанных ниже, или их вариаций, что очевидно для специалистов в этой области техники. Подходящие модификации и замещения очевидны и хорошо известны или их легко найти в научной литературе специалистам в этой области техники.
В частности, такие методы можно найти в книге R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, Wiley-VCH Publishers, 1999.
Следует понимать, что соединения настоящего изобретения могут содержать один или несколько ассиметрично замещенных атомов углерода и их можно получить в оптически активной форме или в форме рацематов. Таким образом, предположены все хиральные, диастереомерные, рацемические формы, изомерные формы структуры, если только специально не указана специфическая стереохимия или изомерная форма. В этой области техники хорошо известно, каким образом изготовить и получить в чистом виде такие оптически активные формы. Например, смеси стереоизомеров можно разделить с помощью стандартных методов, включающих, но не ограниченных только ими, разделение рацемических форм, обычную, обратнофазовую и хиральную хроматографию, образование предпочтительной соли, перекристаллизацию и т.п., или хиральный синтез как из хиральных исходных веществ, так и с помощью запланированного синтеза целевых хиральных центров.
Кроме того, способ изобретения может приводить к образованию нескольких региоизомеров, все из которых включены в настоящее изобретение. Региоизомеры обычно получают в чистом виде с помощью хроматографии.
Соединения настоящего изобретения можно получать с помощью широкого спектра синтетических способов. Реагенты и исходные вещества доступны в продаже или могут быть легко синтезированы с помощью методов, хорошо известных специалистами среднего звена в этой области техники. Все заместители, если это не указано специальным образом, были определены в этом документе ранее.
В реакциях, описанных ниже, может возникнуть необходимость защитить реакционно-способные функциональные группы, например, гидрокси, амино, имино, тио или карбоксигруппы, если они необходимы в полученном продукте, чтобы предотвратить их нежелательное участие в реакциях. Можно использовать общепринятые защитные группы в соответствии со стандартной практикой, для примеров смотри T.W. Greene and Р. G. М. Wuts in Protective Группы in Organic Chemistry, 3rd ed., John Wiley and Sons, 1999; J. F. W. McOmie in Protective Группы in Organic Chemistry, Plenum Press, 1973.
Некоторые реакции можно проводить в присутствии основания. Не существует специального ограничения относительно природы основания, применяемого в этой реакции, и для этого можно использовать любое основание, обычно применяемое в реакциях этого типа, при условии, что оно не обладает неблагоприятным эффектом на другие части молекулы. Примеры пригодных оснований включают: гидроксид натрия, карбонат калия, триэтиламин, гидриды щелочных металлов, например, гидрид натрия и гидрид калия; алкиллитиевые соединения, например, метилпитий и бутиллитий; и алкокоиды щелочных металлов, например, метоксид натрия и этоксид натрия.
Обычно реакции проводят в подходящем растворителе. Можно использовать различные растворители, при условии, что они не обладают неблагоприятным эффектом на реакцию или участвующие реагенты. Примеры подходящих растворителей включают: углеводороды, которые могут быть ароматическими, алифатическими или циклоалифатическими углеводородами, такими как гексан, циклогексан, бензол, толуол и ксилол; амиды, такие как диметилформамид; спирты, такие как этанол и метанол, и простые эфиры, такие как диэтиловый эфир и тетрагидрофуран.
Реакции могут протекать в широком диапазоне температур. Обычно считают удобным проводить реакцию при температуре от 0°С до 150°С (более предпочтительно примерно от комнатной температуры до 100°С). Время, необходимое для реакции, также может широко меняться, в зависимости от многих факторов, в частности, от температуры реакции и природы реагентов. Однако если реакцию проводят в предпочтительных условиях, указанных выше, обычно будет достаточным время от 3 часов до 20 часов.
Полученное таким образом соединение можно извлечь из реакционной среды с помощью традиционных методов. Например, соединения можно извлечь с помощью отгонки растворителя из реакционной среды или, при необходимости, после отгонки растворителя из реакционной среды, поместив остаток в воду с последующей экстракцией с помощью органического растворителя, не смешивающегося с водой, и отгонки растворителя из экстракта. Кроме того, при желании продукт можно дополнительно очистить с помощью различных хорошо известных методов, таких как перекристаллизация, переосаждение или различные методы хроматографии, в частности, колоночная хроматография или препаративная тонкослойная хроматография.
Способ получения соединения изобретения, имеющего формулу (I), является следующей целью настоящего изобретения.
В соответствии с первым аспектом соединения изобретения формулы (I) можно получить путем взаимодействия соответствующих соединений, имеющих формулы (II) и (III):
где R3, R4, R5, R6, Т, U, V, W, X, Ru, Rv, Rw определяют таким же образом, что и в формуле (I).
Обычно реакцию проводят в органическом протонном растворителе, таком как спирт (предпочтительно в этаноле), в присутствии кислоты, такой как уксусная кислота.
Альтернативно и/или совокупно соединения формулы (I), можно получить из соответствующего соединения формулы (I'):
где R3, R4, R5, R6, Hetl, Т, U, V, W, X, Ru, Rv, Rw определяют таким же образом, что и в формуле (I),
где каждая из групп Ru', Rv', Rw' аналогична группам Ru, Rv, Rw или является предшествующей группой, соответствующей Ru, Rv, Rw, которая с помощью одной или нескольких стадий обеспечивает превращение предшествующей группы в желаемую группу Ru, Rv или Rw.
В соответствии с настоящим изобретением выражение «предшествующая группа» функциональной группы относится к любой группе, которая может с помощью одной или нескольких реакций привести к желаемой функциональной группе с помощью одного или нескольких подходящих реагентов. Такие реакции включают снятие защитных групп, а также обычное присоединение, замещение или реакции функционализации.
Соединения формулы (I') можно получить из соответствующих соединений, имеющих формулы (II) и (III), как было обсуждено выше.
Соединения формулы (I), могут, в частности, быть получены из соединений формулы (I'), раскрытых в ЕР 05292612.8.
Указанные выше реакции могут быть проведены специалистами путем применения или адаптирования способов, проиллюстрированных в примерах, приведенных ниже.
Кроме того, способ изобретения может также включать дополнительную стадию получения соединения формулы (I). Ее могут проводить специалисты в этой области техники с помощью любого из известных общепринятых методов, таких как способы извлечения, описанные выше.
Исходные продукты (II) и (III) доступны в продаже или могут быть получены путем применения или адаптирования известных методов или методов, описанных в примерах.
Синтез также можно проводить в одном сосуде в поликомпонентной реакции.
В соответствии со следующей целью настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, включающим соединение формулы (I), которое определено ниже:
где:
включающий от 1 до 5 гетероатомов, необязательно замещенных одним или несколькими заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из Н, CN, =O, Hal, Alk, OAlk, ОН, NRCN, C(CN)=C(OH)(OAlk), SR, NRR', C(O)NRR', гетероцикла, арила, гетероарила, где Alk, арил, гетероарил, гетероцикл необязательно замещены Hal, NRR', CN, ОН, CF3, арилом, гетероарилом, OAlk;
Y представляет собой N-OR1, NR'1, CR2R'2;
R1 представляет собой Н, алкил, алкенил, алкоксиалкил, арилоксиалкил, арилалкил, алкоксикарбонилалкил, карбоксиалкил;
R'1 представляет собой Н, алкил, арил или арилалкил;
Каждая из R2, R'2 является одной и той же или разными группами и их независимо выбирают из Н, алкила, арила или арилалкила;
Т, U, V, W, Х являются одинаковыми или разными и их выбирают из С, N, О, S.
Ru, Rv, Rw являются одинаковыми или разными и их выбирают из группы, состоящей из Н, CN, =O, Hal, Alk, OAlk, OH, NRCN, C(CN)=C(OH)(OAlk), SR, NRR', C(O)NRR', гетероцикла, арила, гетероарила, циклоалкила, где Alk, арил, гетероарил, гетероцикл, циклоалкил необязательно замещены Hal, NRR', CN, ОН, CF3, арилом, гетероарилом, OAlk.
Каждая из R3, R4, R5, R6 является одной и той же или разными группами и их независимо выбирают из группы, состоящей из Н, OAlk, Alk, Hal, NRR', CN, ОН, OCF3, CF3, арила, гетероарила;
Каждая из R и R' является одной и той же или разными группами и их независимо выбирают из группы, состоящей из Н, Alk, где Alk необязательно замещен Hal, NRR', CN, ОН, CF3, арилом, гетероарилом;
или к его фармацевтически приемлемым солям, гидратам или гидратированным солям, или к полиморфным кристаллическим структурам этих соединений, или к их оптическим изомерам, рацематам, диастереомерам или энантиомерам, или к их геометрическим изомерам (Е и Z), или к их смесям.
Предпочтительно Т, U, V, W, Х являются С или N.
Другие предпочтительные воплощения формулы (I) те же, что были определены выше относительно соединений изобретения.
Предпочтительные соединения для терапевтического применения в соответствии с изобретением выбирают из группы, состоящей из:
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1-метил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b] флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 3-бутил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1-бутил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b] флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b] флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-децил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(2-метокси-этил)-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b] флуорен-9-она О-(3-фенокси-пропил)-оксима
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-этил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-этил-оксима
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-бензил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-бензил-оксима
- [1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b] флуорен-9-илиден] -фенил-амина
- этилового эфира (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-уксусной кислоты
- (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-ацетата лития,
или их фармацевтически приемлемых солей, гидратов или гидратированных солей, или полиморфных кристаллических структур этих соединений или их оптических изомеров, рацематов, диастереомеров или энантиомеров, или их региоизомеров, геометрических изомеров (Е и Z), или их смесей.
Наиболее предпочтительные соединения для терапевтического применения в соответствии с изобретением, в частности, выбирают из группы, состоящей из:
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b] флуорен-9-она O-метил-оксима
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 3-бутил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-децил-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(2-метокси-этил)-оксима
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(3-фенокси-пропил)-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-этил-оксима
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима
- этилового эфира (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-уксусной кислоты
- (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-ацетата лития,
или их фармацевтически приемлемых солей, гидратов или гидратированных солей, или полиморфных кристаллических структур этих соединений или их оптических изомеров, рацематов, диастереомеров или энантиомеров, или их региоизомеров, геометрических изомеров (Е и Z), или их смесей.
В соответствии с еще одной целью настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I), как было определено выше в отношении фармацевтической композиции, для получения лекарственного средства для ингибирования цистеиновой протеазы.
Соединения изобретения полезны для ингибирования цистеиновых протеаз, в частности, ферментов деубиквитинилирования (таких как USPs и UCHs), каспаз, катепсинов (в частности, катепсинов В, D, K, S и т.п.), кальпаинов, а также вирусных, бактериальных или паразитарных цистеиновых протеаз, у пациентов, нуждающихся в этом.
Соединения изобретения, в частности, полезны для лечения и/или профилактики рака и метастазирования, конкретнее, для лечения и/или профилактики рака простаты и/или колоректального рака, нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона, тугоухости, нарушений, связанных со старением, воспалительных нарушений, артрита, остеопороза, гепатита, печеночной недостаточности, ишемии сердца и сердечной недостаточности, инсульта, атеросклероза, почечной недостаточности, диабета, катаракты; острых и латентных вирусных инфекций вирусом простого герпеса 1, вирусом Энштейна-Барра, коронавирусом SARS, риновирусами, вирусом полиомиелита, вирусом гепатита А, вирусом гепатита С, аденовирусами и т.п.; бактериальных и грибковых инфекций патогенными агентами, принадлежащими к видам Streptococcus sp., Staphylococcus sp., Clostidium sp., Aspergillus sp. и т.п.; протозойных инфекций видами, принадлежащими Trypanosoma sp., Plasmodium sp., Leishmania sp., Trichomonas sp., Entamoeba sp., Giardia sp., Toxoplasma sp., Cryptosporidium sp. и т.п.; инфекций плоскими или круглыми червями, относящимися к видам Fasciola sp., Schistosoma sp., Onchocerca sp., Ascaris sp., Taenia sp., Caenorhabitis sp., Toxocara sp., Haemonchus sp., Ancylostoma sp., Trichuris sp., Trichinella sp., Strongyloides sp., Brugia sp. и т.п.; а также иммунологических, иммунорегуляторных нарушений или нарушений презентации антигенов.
Настоящее изобретение также относится к соответствующим способам лечения, включающим введение соединения изобретения вместе с фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом пациенту, который в этом нуждается.
Установление тех субъектов, которые нуждаются в лечении описанных в этом документе заболеваний и состояний, находится в компетенции и соответствует знаниям специалиста в этой области техники. Ветеринар и врач-терапевт, сведущие в этой области техники, могут легко установить, используя клинические тесты, медицинское обследование, медицинский/семейный анамнез или биологические и диагностические тесты, тех субъектов, которые нуждаются в таком лечении.
Терапевтически эффективное количество может быть легко определено лечащим диагностом, специализирующимся в этой области техники, путем использования общепринятых методов и изучения результатов, полученных в аналогичных условиях. При определении терапевтически эффективного количества лечащий диагност принимает во внимание несколько факторов, которые включают без ограничения: видовую принадлежность субъекта; его размер, возраст и общее состояние здоровья; имеющееся специфическое заболевание; степень поражения или тяжесть заболевания; реакцию индивидуума; вводимое специфическое соединение; способ введения; характеристику биологической усвояемости вводимого лекарственного препарата; выбранную схему дозирования; применение сопутствующего лечения и другие важные условия.
Количество соединения формулы (I), которое необходимо для того, чтобы достичь желаемого биологического эффекта, будет зависеть от множества факторов, включающих химические параметры (например, гидрофобность) применяемого соединения, эффективность соединения, тип заболевания, видовую принадлежность пациента, состояние заболевания у пациента, способ введения, биологическую усвояемость соединения при выбранном способе введения, все факторы, которые определяют требуемые дозировки, доставку и режим введения.
Термины "фармацевтически" или "фармацевтически приемлемые" относятся к молекулярным объектам и композициям, которые в соответствующих обстоятельствах не вызывают вредной, аллергической или другой неблагоприятной реакции при введении животному или человеку.
Используемый в этом документе термин "фармацевтически приемлемый эксципиент" включает любые носители, разбавители, вспомогательные вещества или среды, такие как консервирующие или антиоксидантные средства, наполнители, дезинтегрирующие средства, увлажняющие средства, эмульгирующие средства, суспендирующие средства, растворители, диспергент, оболочки, антибактериальные и противогрибковые средства, изотонические средства и средства, замедляющие поглощение и т.п. Применение такой среды и средств в качестве фармацевтически активных веществ хорошо известно в этой области техники. За исключением тех случаев, когда какая-либо общепринятая среда или средство несовместимо с активным ингредиентом, предполагают их применение в терапевтических композициях. Дополнительные активные ингредиенты также могут быть включены в композиции в качестве пригодных терапевтических комбинаций.
В контексте изобретения, используемые в этом документе термины "терапия" или "лечение" означают обратное развитие, облегчение, подавление прогрессирования или профилактику нарушения или состояния, по отношению к которому применяют этот термин, или одного или нескольких симптомов такого нарушения или состояния.
Термин "терапевтически эффективное количество" означает количество соединения/лекарственного средства в соответствии с настоящим изобретением, эффективное для профилактики или лечения патологического состояния, для которого необходимо ингибирование активной цистеиновой протеазы, вовлеченной в патогенез этого состояния.
В соответствии с изобретением термин "пациент" или "пациент, нуждающийся в нем" относится к животному или человеку, который поражен или вероятно будет поражен патологическим состоянием, в патогенез которого вовлечена активная цистеиновая протеаза. Предпочтительно пациентом является человек.
В общих чертах, соединения этого изобретения могут быть предоставлены в водных растворах физиологических буферов, содержащих от 0,1 до 10% масс/об соединения для парентерального введения. Обычная доза варьирует от 1 мкг/кг до 0,1 г/кг массы тела в день; предпочтительная доза варьирует от 0,01 мг/кг до 10 мг/кг массы тела в день или является эквивалентной дозой у детей. По-видимому, предпочтительная доза лекарственного средства для введения зависит от таких параметров, как тип и степень прогрессирования заболевания или нарушения, от общего состояния здоровья определенного пациента, относительной биологической эффективности выбранного соединения, композиции соединения, пути введения (внутривенный, внутримышечный путь или др.), фармакокинетических свойств соединения при выбранном пути доставки и скорости (болюс или непрерывная инфузия) и режим введения (число повторов за определенный промежуток времени).
Соединения настоящего изобретения также можно вводить в виде единичных лекарственных форм, где термин "единичная доза" означает одну единственную дозу, которую можно вводить пациенту и с которой можно легко манипулировать и которую можно легко упаковывать, сохраняя физически и химически стабильной единичную дозу, включающую или активное соединение само по себе, или фармацевтически приемлемую композицию, как описано далее. По существу, обычная общая дневная доза варьирует от 0,01 до 100 мг/кг массы тела. В качестве общего указания единичные дозы для людей варьируют от 1 мг до 3000 мг в день. Предпочтительно единичная доза варьирует от 1 до 500 мг, которые вводят от одного до шести раз в день и еще более предпочтительно от 10 мг до 500 мг, которые вводят один раз в день. Соединения, предоставляемые в этом документе, могут быть составлены в фармацевтические композиции путем смешивания с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами. Такие композиции с единичными дозами могут быть получены для применения с помощью перорального введения, в частности, в форме таблеток, простых капсул или мягких гелевых капсул; или с помощью интраназального введения, в частности в форме порошков, назальных капель или аэрозолей; или с помощью кожного введения, например, местно в виде мазей, кремов, лосьонов, гелей или аэрозолей или с помощью трансдермальных пластырей.
Композиции обычно можно вводить в виде единичной лекарственной формы и можно получать любым из методов, хорошо известных в области фармацевтики, например, как описано в справочнике Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th ed.; Gennaro, A. R., Ed.; Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2000.
Предпочтительные композиции включают фармацевтические композиции, в которых соединение настоящего изобретения составлено для перорального или парентерального введения.
Для перорального введения таблетки, пилюли, порошки, капсулы, пастилки и т.п. могут содержать один или несколько ингредиентов, представленных ниже, или соединений сходного типа: связующее средство, такое как микрокристаллическая целлюлоза или трагакант; разбавитель, такой как крахмал или лактоза; дезинтегрирующее средство, такое как крахмал или производные целлюлозы; смазывающее средство, такое как стеарат магния; скользящее средство, такое как коллоидный диоксид кремния; подсластитель, такой как сахароза или сахарин; или ароматизатор, такой как перечная мята или метилсалицилат. Капсулы могут быть в форме твердой капсулы или мягкой капсулы, которые в основном делают из смеси желатинов, необязательно смешанных с пластификаторами, а также в виде облатки. Кроме того, единичные лекарственные формы могут содержать различные другие вещества, которые модифицируют физическую форму дозировочной единицы, например, оболочку из сахара, шеллака или кишечнорастворимых веществ. Другие пероральные лекарственные формы, сироп или эликсир, могут содержать подсластители, консерванты, пигменты, окрашивающие средства и ароматизаторы. Кроме того, активные соединения могут быть включены в препараты и композиции с быстрым, модифицированным или замедленным высвобождением, и где такие композиции с замедленным высвобождением предпочтительно являются бимодальными. Предпочтительные таблетки содержат лактозу, кукурузный крахмал, силикат магния, кроскармелозу натрия, повидон, стеарат магния или тальк в любых комбинациях.
Жидкие препараты для парентерального введения включают стерильные водные и неводные растворы, суспензии и эмульсии. Жидкие композиции могут также включать связующие средства, буферы, консерванты, хелатирующие средства, подсластитель, ароматизирующие и окрашивающие средства и т.п. Неводные растворители включают спирты, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло, и сложные органические эфиры, такие как этилолеат. Водные носители включают смеси спиртов и воду, забуференные среды и солевой раствор. В частности, биосовместимый, биодеградируемый лактидный полимер, лактид/гликолидный сополимер или полиоксиэтилен-полиоксипропиленовые сополимеры могут быть полезными эксципиентами для контролирования высвобождения активных соединений. Внутривенные среды могут включать жидкие и питательные наполнители, электролитные наполнители, например, на основе декстрозы в растворе Рингера и т.п. Другие потенциально полезные парентеральные системы высвобождения для этих активных соединений включают частицы сополимера этилен-винилацетата, осмотические системы закачивания, имплантируемые системы инфузии и липосомы.
Альтернативные способы введения включают композиции для ингаляции, которые включают такие средства, как сухой порошок, аэрозоль или капли. Они могут быть водными растворами, содержащими, например, полиоксиэтилен-9-лауриловый эфир, гликохолат и дезоксихолат, или масляными растворами для введения в форме назальных капель, или гелями для интраназального введения. Композиции для буккального введения включают, например, леденцы или пастилки, и могут также включать ароматизированную основу, такую как сахароза или акация, и другие эксципиенты, такие как гликохолат. Композиции, пригодные для ректального введения, предпочтительно существуют в виде суппозиториев для однократного применения, с носителем на твердой основе, таким как масло какао, и могут включать салицилат. Композиции для местного нанесения на кожу предпочтительно имеют форму мази, крема, лосьона, пасты, геля, распыляемого раствора, аэрозоля или масла. Носители, которые могут быть использованы, включают вазелин, ланолин, полиэтиленгликоли, спирты или их комбинации. Композиции, пригодные для трансдермального введения, могут находиться в виде пластырей, состоящих из разделяемых элементов, и могут быть липофильными эмульсиями или забуференными водными растворами, растворенными и/или диспергированными в полимере или связующем средстве.
Изобретение далее будет проиллюстрировано в примерах, приведенных ниже, которые не ограничивают раскрытие изобретения.
Типичные соединения изобретения суммированы в таблице, приведенной ниже:
Осуществление изобретения
Экспериментальная часть
Типичные соединения изобретения могут быть синтезированы в соответствии со следующими способами:
Основной способ А: синтез пентааза-циклопента|[b]флуорен-9-она:
Смесь R1-замещенного (1,2,4)-триазол-3,4-диамина (8,8 ммоль) и нингидрина (1,57 г, 8,8 ммоль) в EtOH (10 мл) и АсОН (1,5 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2-16 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток растворяли в EtOAc, промывали насыщенным K2CO3 и солевым раствором. Органическую фазу сушили над Na2SO4, фильтровали и растворители удаляли с помощью выпаривания при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью следующих стадий: флэш-хроматография на силикагеле (толуол/МеОН от 95:5 до 8:2 или CH2Cl2/EtOAc от 9:1 до 1:1) для очистки смеси региоизомеров, затем флэш-хроматография на нейтральной окиси алюминия (марка II) (CH2Cl2/EtOAc от 7:3 до CH2Cl2/MeOH 1:1+5% НСООН или АсОН) для разделения региоизомеров.
1-Метил-2,3,4,10,10a-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-он(1b/A)
Получен в соответствии с основным способом А с выходом 13% в виде твердого вещества желтого цвета.
1Н NMR (300 MHz, DMSO d6): β 8,23 (d, 1H), 8,02 (m, 2H), 7,89 (ddd, 1H), 2,72 (s, 3H). ESI+MS: рассчитано для C12H7N5O: 237,22; найдено: 238,2 (МН+).
3-Метил-1,2,3a,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-он(1b/В)
Получен в соответствии с основным способом А с выходом 30% в виде твердого вещества желтого цвета.
1Н NMR (300 MHz, DMSO d6): β 8,16 (d, 1H), 8,05-7,95 (m, 2H), 7,85 (ddd, 1H), 2,77 (s, 3H). ESI+MS: рассчитано для C12H7N5O: 237,22; найдено: 238,2 (МН+).
Основной способ B: синтез пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она
Получение диаминотриазолов происходит в соответствии с методом, описанным в Eur. J. Med. Chem.-Chim. Ther. 1986, 27, 235.
Смесь диаминогуанидина гидрохлорида (1 г, 8 ммоль) в избытке (10 г) подходящей карбоновой кислоты перемешивали и нагревали при 120-130°С в течение 12-24 часов. Раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли 37%-ную HCl (10 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2-3 часов и затем концентрировали досуха при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт промывали Et2O (×3) и использовали без дальнейшей очистки.
Для конденсации неочищенного продукта диаминотриазола и нингидрина смотри основной способ А.
1-Бутил-2,3,4,10,10a-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-он(1f/A)
Получен в соответствии с основным способом В с выходом 6% в виде твердого вещества желтого цвета.
1Н NMR (300 MHz, DMSO d6): β 8,23 (d, 1H), 8,02 (m, 2H), 7,89 (ddd, 1H), 3,10 (dd, 2H), 1,81 (m, 2H), 1,42 (m, 2H), 0,94 (t, 3H). ESI+MS: рассчитано для C15H13N5O: 279.30; найдено: 280.2 (МН+).
3-Бутил-1,2,3a,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-он(1f/B)
Получен в соответствии с основным способом В с выходом 10% в виде твердого вещества желтого цвета.
1H NMR (300 MHz, DMSO d6): β 8,16 (d, 1H), 7,99 (m, 2H), 7,85 (dd, 1H), 3,16 (dd, 2H), 1,87 (m, 2H), 1,44 (m, 2H), 0,96 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C15H13N5O: 279,30; найдено: 280,3 (МН+).
1-Этил-2,3,4,10,10a-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-он (1g/A)
Получен в соответствии с основным способом В с выходом 48% в виде твердого вещества желтого цвета.
1H NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,21 (d, 1H), 8,00 (d, 1H), 7,90 (ddd, 1H), 7,77 (ddd, 1H), 3,21 (q, 2H), 1,49 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C13H9N5O: 251,25; найдено: 252,1 (МН+).
3-Этил-1,2,3a,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-он (1g/B)
Получен в соответствии с основным способом В с выходом 32% в виде твердого вещества желтого цвета.
1Н NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,12 (d, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,88 (ddd, 1H), 7,75 (ddd, 1H), 3,25 (q, 2H), 1,53 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C13H9N5O: 251,25; найдено: 252,1 (МН+).
Суспензию 1 (1 ммоль), O-алкил-гидроксиламина гидрохлорида (3 ммоль) и молекулярного сита в пиридине (10 мл) нагревали до 60°С в течение 2-12 часов. Нерастворимый остаток фильтровали, растворитель выпаривали и неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (CH2Cl2/ацетон 85:15 или толуол/МеОН 9:1, или уайт-спирит/EtOAc 1:1).
3-Метил-1,2,3a,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксим(5a)
Получен в соответствии с основным способом Е из 1b/В с выходом 55% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 2:1. 1Н NMR (300 MHz, DMSO d6) (смесь изомеров): β 8,43 (m, 1Н), 8,16 (m, 1H), 7,81 (m, 2H), 4,34 (s, 3H), 2,75 (s, 3H), 8,05 (m, 1H), 7,92 (m, 1H), 7,72 (m, 2H), 4,30 (s, 3H), 2,75 (s, 3H), ESI+MS: рассчитано для C13H10N6O: 266,26; найдено: 267,1 (МН+).
3-Метил-1,2,3a,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксим(5b)
Получен в соответствии с основным способом Е из 1b/В с выходом 65% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 1:1. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3) (смесь изомеров): β 8,02 (d, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,75-7,56 (m, 2H), 6,26-6,08 (m, 1H), 5,50 (dd, 1H), 5,35 (d, 1H), 5,05 (d, 2H), 2,86 (s, 3H), 8,49 (m, 1H), 8,13 (m, 1H), 7,77-7,56 (m, 2H), 6,26-6,08 (m, 1H), 5,50 (dd, 1H), 5,39 (d, 1H), 5,12 (d, 2H), 2,86 (s, 3H), ESI+MS: рассчитано для C15H12N6O: 292,30; найдено: 293,1 (МН+).
1-Метил-1,2,3a,4,10,10a-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксим (5с)
Получен в соответствии с основным способом Е из 1b/А с выходом 76% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 7:3. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3) (смесь изомеров): β 8,16 (m, 1H), 7,95 (m, 1H), 7,77-7,60 (m, 2H), 6,26-6,08 (m, 1H), 5,54 (ddt, 1H), 5,37 (ddt, 1H), 5,04 (ddd, 2H), 2,84 (s, 3H), 8,49 (m, 1H), 8,26 (m, 1H), 7,77-7,60 (m, 2H), 6,26-6,08 (m, 1H), 5,49 (ddt, 1H), 5,40 (ddt, 1H), 5,09 (ddd, 2H), 2,88 (s, 3H), ESI+MS: рассчитано для C15H12N6O: 292,30; найдено: 293,1 (МН+).
3-Бутил-1,2,3a,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксим (5d)
Получен в соответствии с основным способом Е из 1f/B с выходом 93% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 6:4. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3) (смесь изомеров): β 8,42 (m, 1H), 8,06 (m, 1H), 7,64 (m, 2H), 6,19-6,00 (m, 1H), 5,41 (m, 1H), 5,31 (m, 1H), 5,03 (ddd, 2H), 3,17 (dd, 2H), 1,88 (m, 2H), 1,43 (m, 2H), 0,93 (t, 3H), 7,96 (m, 1H), 7,87 (m, 1H), 7,55 (m, 2H), 6,19-6,00 (m, 1H), 5,41 (m, 1H), 5,26 (m, 1H), 4,97 (ddd, 2H), 3,17 (dd, 2H), 1,88 (m, 2H), 1,43 (m, 2H), 0,93 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C18H18N6O: 334,38; найдено: 335,1 (МН+).
1-Бутил-1,2,3a,4,10,10a-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксим(5е)
Получен в соответствии с основным способом Е из 1f/A с выходом 95% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 1:1. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3) (смесь изомеров): β 8,45 (m, 1H), 8,22 (m, 1H), 7,69 (m, 2H), 6,22-6,02 (m, 1H), 5,45 (m, 1H), 5,35 (m, 1H), 5,05 (ddd, 2H), 3,21 (dd, 2H), 1,91 (m, 2H), 1,45 (m, 2H), 0,95 (t, 3H), 8,12 (m, 1H), 7,91 (m, 1H), 7,62 (m, 2H), 6,22-6,02 (m, 1H), 5,49 (m, 1H), 5,32 (m, 1H), 4,99 (ddd, 2H), 3,18 (dd, 2H), 1,91 (m, 2H), 1,45 (m, 2H), 0,95 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C18H18N6O: 334,38; найдено: 335,2 (МН+).
Синтез 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима и/или его соответствующего региоизомерного тетразола (6):
Соединение было получено в соответствии с основным способом Е из смеси региоизомеров 6:4 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она (полученного из нингидрина и тетразол-1,5-диамина) с выходом 89% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z и региоизомеров. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3) (смесь изомеров): β 8,47 (m, 1Н), 8,22 (m, 1H), 7,84-7,58 (m, 2H), 6,23-6,03 (m, 1H), 5,46 (m, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,13 (ddd, 2H), 8,19 (m, 1H), 7,98 (m, 1H), 7,84-7,58 (m, 2H), 6,23-6,03 (m, 1H), 5,46 (m, 1H), 5,34 (m, 1H), 5,06 (m, 2H), ESI+MS: рассчитано для C13H9N7O: 279,26; найдено: 280,2 (МН+).
Синтез 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она оксима и/или его соответствующего региоизомерного тетразола (7):
Соединение было получено в соответствии с основным способом Е из смеси региоизомеров 6:4 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она (полученного из нингидрина и тетразол-1,5-диамина) с выходом 44% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z и региоизомеров. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3) (смесь изомеров): β 13,87 (bs, 1H), 8,59 (m, 1H), 8,14 (m, 1H), 7,78-7,52 (m, 2H), 13,69 (bs, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,78-7,52 (m, 2H), ESI+MS: рассчитано для C10H5N7O: 239,20; найдено: 240,1 (МН+).
Основной способ F: синтез О-алкилоксима гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она:
Смесь 7 (48 мг, 0,20 ммоль), алкилбромида (0,6 ммоль) и K2CO3 (55 мг, 0,4 ммоль) в DMF (2 мл) перемешивали при комнатой температуре в течение 16 часов, затем растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии (CH2Cl2 в различной смеси с МеОН или петролейным эфиром).
1,2,3a,4,10-Гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-децил-оксим и/или его соответствующий региоизомерный тетразол (8a)
Получен в соответствии с основным способом F с выходом 53% в виде твердого вещества желто-зеленого цвета как смесь E/Z и региоизомеров. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3) (смесь изомеров): β 8,39 (m, 1Н), 8,24 and 8,15 (m, 1H), 7,78-7,63 (m, 2H), 4,61-4,47 (m, 2H), 1,82 (m, 2H), 1,47-1,06 (m, 14H), 0,75 (m, 3H), ESI+MS: рассчитано для C20H25N7O: 379,47; найдено: 380,2 (МН+).
1,2,3,3a,4,10-Гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(2-метокси-этил)-оксим и/или его соответствующий региоизомерный тетразол_(8b)
Получен в соответствии с основным способом F с выходом 29% в виде твердого вещества светло-коричневого цвета как смесь E/Z и региоизомеров. 1Н NMR (300 MHz, DMSO d6) (смесь изомеров): β 8,49 (m, 1H), 8,27 (m, 1H), 7,83-7,66 (m, 2H), 4,73 (m, 2H), 3,82 (m, 2H), 3,40 (s, 3H), 8,49 (m, 1H), 8,19 (m, 1H), 7,83-7,66 (m, 2H), 4,73 (m, 2H), 3,82 (m, 2H), 3,41 (s, 3H), ESI+MS: рассчитано для C13H11N7O2: 297,28; найдено: 298,0 (МН+).
1,2,3,3a,4,10-Гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(3-фенокси-пропил)-оксим и/или его соответствующий региоизомерный тетразол (8c)
Получен в соответствии с основным способом F с выходом 42% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z и региоизомеров. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3) (смесь изомеров): β 8,41 (m, 1H), 8,15 (m, 1H), 7,76-7,58 (m, 2H), 7,18 (m, 2H), 6,83 (m, 3H), 4,87-4,70 (m, 2H), 4,18-4,07 (m, 2H), 2,42-2,27 (m, 2H), 8,26 (m, 1H), 7,89 (d, 1H), 7,76-7,58 (m, 2H), 7,18 (m, 2H), 6,83 (m, 3H), 4,87-4,70 (m, 2H), 4,18-4,07 (m, 2H), 2,42-2,27 (m, 2H), ESI+MS: рассчитано для C19H15N7O2: 373,38; найдено: 374,1 (МН+).
Основной способ K: синтез производных O-алкилоксима этилпентааза-циклопента[b]флуорен-9-она:
Суспензию 1g/А или 1g/B (1 ммоль), O-алкил-гидроксиламингидрохлорида (2 ммоль) и молекулярного сита в пиридине (10 мл) нагревали до 60°С в течение 2-3 часов. Нерастворимый остаток фильтровали, растворитель выпаривали и неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на силикагеле.
1-Этил-2,3,4,10,10a-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксим(10а)
Получен в соответствии с основным способом К (элюент: CH2Cl2/EtOAc/MeOH 80:17:3) из 1g/A с количественным выходом в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 7:3. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,47 (m, 1Н), 8,27 (m, 1H), 7,73 (m, 1H), 7,66 (m, 1H), 4,41 (s, 3H), 3,28 (q, 2H), 1,55 (t, 3H) and 8,17 (m, 1H), 7,96 (m, 1H), 7,73 (m, 1H), 7,63 (m, 1H), 4,37 (s, 3H), 3,25 (q, 2H), 1,55 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C14H12N6O: 280,29; найдено: 281,1 (МН+).
3-Этил-1,2,3a,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксим (10b) Получен в соответствии с основным способом К (элюент: CH2Cl2/EtOAc/MeOH 80:17:3) из 1g/B с количественным выходом в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 7:3. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,50 (m, 1H), 8,17 (m, 1H), 7,63 (m, 2H), 4,45 (s, 3H), 3,30 (q, 2H), 1,57 (t, 3H) and 8,07 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,68 (ddd, 1H), 7,64 (ddd, 1H), 4,41 (s, 3H), 3,29 (q, 2H), 1,59 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C14H12N6O: 280,29; найдено: 281,1 (МН+).
1-Этил-2,3,4,10,10a-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-этил-оксим (10c) Получен в соответствии с основным способом К (элюент: CH2Cl2/EtOAc/MeOH 70:25:5) из 1g/A с количественным выходом в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 6:4. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,17 (m, 1Н), 7,96 (m, 1H), 7,73 (m, 1H), 7,65 (ddd, 1H), 4,60 (q, 2H), 3,26 (q, 2H), 1,55 (t, 3H), 1,55 (t, 3H) and 8,47 (m, 1H), 8,27 (m, 1H); 7,72 (m, 1H), 7,63 (ddd, 1H), 4,66 (q, 2H), 3,30 (q, 2H), 1,54 (t, 3H), 1,51 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C15H14N6O: 294,32; найдено: 295,1 (МН+).
3-Этил-1,2,3a,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-этил-оксим (10d)
Получен в соответствии с основным способом К (элюент: CH2Cl2/EtOAc/MeOH 70:25:5) из 1g/B с количественным выходом в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 1:1. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,49 (m, 1H), 8,13 (m, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,62 (m, 1H), 4,69 (q, 2H), 3,27 (q, 2H), 1,58-1,48 (m, 6H), and 8,03 (m, 1H), 7,96 (m, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,62 (m, 1H), 4,62 (q, 2H), 3,27 (q, 2H), 1,58-1,48 (m, 6H), ESI+MS: рассчитано для C15H14N6O: 294,32; найдено: 295,1 (МН+).
1-Этил-2,3,4,10,10a-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-аллил-оксим (10e)
Получен в соответствии о основным способом К (элюент: CH2Cl2/EtOAc/MeOH 80:16:4) из 1g/A с количественным выходом в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 6:4. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,17 (d, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,65 (m, 2H), 6,26-6,07 (m, 1H), 5,54 (m, 1H), 5,37 (m, 1H), 5,04 (ddd, 2H), 3,26 (m, 2H), 1,54 (m, 3H) and 8,49 (d, 1H), 8,27 (d, 1H), 7,73 (m, 2H), 6,26-6,07 (m, 1H), 5,49 (m, 1H), 5,40 (m, 1H), 5,09 (ddd, 2H), 3,26 (m, 2H), 1,54 (m, 3H), ESI+MS: рассчитано для C16H14N6O: 306,33; найдено: 307,1 (МН+).
3-Этил-1,2,3a,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-аллил-оксим (10f)
Получен в соответствии с основным способом К (элюент: CH2Cl2/EtOAc/MeOH 80:17:3) из 1g/B с выходом 96% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 65:35. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,50 (m, 1H), 8,14 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,65 (m, 1H), 6,26-6,09 (m, 1H), 5,53 (m, 1H), 5,39 (m, 1H), 5,12 (ddd, 2H), 3,27 (q, 2H), 1,55 (t, 3H) and 8,04 (m, 1H), 7,95 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,61 (m, 1H), 6,26-6,09 (m, 1H), 5,47 (m, 1H), 5,36 (m, 1H), 5,106 (ddd, 2H), 3,27 (q, 2H), 1,56 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C16H14N6O: 306,33; найдено: 307,2 (МН+).
1-Этил-2,3,4,10,10a-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-бензил-оксим (10g) Получен в соответствии с основным способом К (элюент: CH2Cl2/EtOAc/MeOH 80:17:3) из 1g/A с выходом 86% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 65:35. 1Н NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,16 (m, 1H), 7,96 (m, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,41 (m, 3H), 5,58 (s, 2H), 3,21 (q, 2H), 1,49 (t, 3H) and 8,43 (m, 1H), 8,26 (m, 1Н), 7,70 (m, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,41 (m, 3H), H), 5,62 (s, 2H), 3,29 (q, 2H), 1,56 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C20H16N6O: 356,39; найдено: 357,1 (МН+).
3-Этил-1,2,3a,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-бензил-оксим (10h)
Получен в соответствии с основным способом К (элюент: CH2Cl2/EtOAc/MeOH 80:17:3) из 1g/B с выходом 99% в виде твердого вещества желтого цвета как смесь E/Z 6:4. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,44 (m, 1H), 8,13 (m, 1H), 7,67 (m, 1H), 7,61 (m, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,46-7,29 (m, 3H), 5,64 (s, 2H), 3,62 (q, 2H), 1,55 (t, 3H) and 8,01 (m, 1H), 7,92 (m, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,41 (m, 3H), 5,59 (s, 2H), 3,29 (q, 2H), 1,56 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C20H16N6O: 356,39; найдено: 357,1 (МН+).
Синтез [1-этил-2,3,4,10,10a-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-илиден]-фенил-амина(11):
К суспензии 1g/A (200 мг, 0,79 ммоль) и молекулярного сита в толуоле (4 мл) добавляли анилин (72 мкл, 0,79 ммоль). Смесь перемешивали при 130°С в течение 4 часов, затем растворитель выпаривали и неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии (CH2Cl2/EtOAc/MeOH 80:18:2), получая 11 (231 мг, 90%) в виде твердого вещества оранжевого цвета при соотношении диастереоизомеров 1:1.
1H NMR (300 MHz, CDCl3): β 8,28 (d, 1H), 7,70 (ddd, 1H), 7,56-7,26 (m, 6H), 6,91 (d, 1H), 3,34 (q, 2H), 1,58 (t, 3H) and 8,22 (m, 2H), 7,81 (m, 2H), 7,47 (m, 1H), 7,07 (m, 4H), 2,80 (q, 2H), 1,21 (t, 3H), ESI+MS: рассчитано для C19H14N6: 326,36; найдено: 327,2 (МН+).
Этиловый эфир (1,2,3a,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-уксусной кислоты и/или его соответствующей региозомерный тетразол (12)
Смесь оксима 7 (560 мг, 2,34 ммоль) и карбоната цезия (1,54 г, 4,68 ммоль) перемешивали в DMF (12 мл) в течение 5 минут. По каплям добавляли этилбромацетат (1,2 г, 7,02 ммоль) и после добавления сильно окрашенную смесь перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре. Растворитель выпаривали и неочищенный продукт растворяли в дихлорметане. После фильтрования через слой кремнезема, выпаривания, перекристаллизации с циклогексан/этилацетатом и измельчения в порошок с помощью циклогексана получили 717 мг (94%) соединения 12 в виде порошка зеленого цвета.
1H-NMR (400 MHz, d6-DMSO) (смесь изомеров): β(ppm) = 1,28 (m, 3Н); 4,21 (m, 2Н); 5,28 (m, 2Н); 7,70-8,60 (m, 4H), LC-MS (ES): m/z = 651 (2M+H+), 326 (M+H+).
(1,2,3,3a,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)ацетат лития и/или его соответствующий региоизомерный тетразол (13)
Раствор сложного эфира 12 (700 мг; 2,15 ммоль) и LiOH (451 мг, 10,75 ммоль) в 12 мл метанола перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Сильно окрашенную смесь охлаждали до -20°С и через 1 час полученный осадок фильтровали и промывали холодным метанолом, чтобы получить 380 мг (59%) соединения 13 в виде твердого вещества зеленого цвета. 1Н-NMR (400 MHz, D2O) (смесь изомеров): β(ppm) = 4,8 (s, 2Н); 7,40-8,40 (m, 4H), LC-MS (ES): m/z = 296 (M-H+).
Типичные цистеиновые протеазы
Анализ активности USP5
USP5 разводили в буфере USP (50 мМ Tris-HCl; 0,5 мМ EDTA; 5 мМ DTT; 0,01%-ный Triton X-100; бычий сывороточный альбумин 0,05 мг/мл рН 7,6). Запасные растворы соединений (100 мМ) хранили при -20°С в DMSO. Соединения анализировали при следующих конечных концентрациях: 100 мкМ; 33,3 мкМ; 11,1 мкМ; 3,7 мкМ; 1,23 мкМ; 412 нМ; 137 нМ; 45,7 нМ; 15,2 нМ; 5 нМ.
Реакции проводили в двух повторах в 96-луночных планшетах Black LJL (HE microplates; Molecular Devices; конечный объем реакции - 20 мкл). Концентрация субстрата для USP5 составляла 400 нМ Ub-AMC (Boston Biochem). Концентрации фермента (USP5) в анализах специфичности была равна 300 пМ. Концентрации устанавливали таким образом, чтобы проводить анализ специфичности, измеряя начальные скорости при фиксированных концентрации субстратов. Соединения проинкубировали с ферментами в течение 30 минут при 25°С. Реакции начинали добавлением субстрата в планшеты, содержащие ферменты (+/- соединения), разведенные в буфере для анализа. Реакционные смеси инкубировали в течение 60 минут при 37°С. Реакции останавливали добавлением уксусной кислоты (конечная концентрация - 100 мМ). Считывание показателей проводили на ридере Pherastar Fluorescent Reader (BMG). λ эмиссии - 380 нМ; λ, возбуждения - =460 нМ. Данные (средние значения +/- стандартное отклонение) анализировали как % от контроля (проба без соединения) и строили график зависимости процентной доли от логарифма концентрации соединения, используя программу GraphPad (Prism). Данные аппроксимировали к сигмоидальной модели (переменная крутизна).
Клонирование и очистка USP7
cDNA, кодирующую USP7, получали с помощью PCR-амплификации из плацентарной mRNA. cDNA USP7 субклонировали с помощью PCR в бакуловирусный экспрессионный вектор (pFastBac-HT; Invitrogen). cDNA, кодирующую мутированный USP7, создавали с помощью мутагенной PCR. Соответствующий белок кодирует замещение цистеина на аланин в положении 223. Последовательности устанавливали с помощью секвенирования полной открытой рамки считывания. Бакмиды, кодирующие USP7, создавали в результате транспозиции в DH10bac. Соответствующими бакмидами трансфицировали клетки насекомых (Sf9). Вирусы выделяли из супернатантов культур и дважды амплифицировали. Клетки насекомых (Sf9 или High Five; Invitrogen) инфицировали в течение 72 часов. Собирали суммарные лизаты клеток и лизировали их в буфере для лизиса (Tris-HCl 50 мМ рН 7,6; 0,75%-ный NP40; 500 мМ NaCl; 10%-ный глицерин; 1 мМ DTT; 10 мМ имидазол; смесь ингибиторов протеаз; AEBSF 20 мкг/мл; апротинин 10 мкг/мл). Белки подвергали аффинной очистке на металло-аффинных смолах (Talon Metal affinity resin; BD Biosciences). Связавшиеся материалы интенсивно промывали буфером для промывания (50 мМ натрия фосфат, рН 7,0; 300 мМ NaCl; 10 мМ имидазол; 0,5%-ный Triton Х-100; 10%-ный глицерин) и элюировали из смолы 250 мМ имидазолсодержащим буфером для промывания. Белки диализовали в буфере для диализа (20 мМ Tris-HCl, рН 7,6; NaCl 200 мМ; DTT 1 мМ; EDTA 1 мМ; 10%-ный глицерин). Очистку белков анализировали с помощью 4-12% NuPAGE (Invitrogen).
Анализ активности USP7
USP7 разводили в буфере USP (50 мМ Tris-HCl; 0,5 мМ EDTA; 5 мМ DTT; 0,01%-ный Triton Х-100; бычий сывороточный альбумин 0,05 мг/мл рН 7,6). Запасные растворы соединений (100 мМ) хранили при -20°С в DMSO. Соединения анализировали при следующих конечных концентрациях: 100 мкМ; 33,3 мкМ; 11,1 мкМ; 3,7 мкМ; 1,23 мкМ; 412 нМ; 137 нМ; 45,7 нМ; 15,2 нМ; 5 нМ.
Реакции проводили в двух повторах в 96-луночных планшетах Black LJL (НЕ microplates; Molecular Devices; конечный объем реакции - 20 мкл). Концентрация субстрата для USP7 составляла 400 нМ Ub-AMC (Chem. Biol., 2003, 10, р.837-846) (Boston Biochem). Концентрации фермента (USP7) в анализах специфичности была равна 152 пМ. Концентрации устанавливали таким образом, чтобы проводить анализ специфичности, измеряя начальные скорости при фиксированных концентрации субстратов. Соединения проинкубировали с ферментами в течение 30 минут при 25°С. Реакции начинали добавлением субстрата в планшеты, содержащие ферменты (+/- соединения), разведенные в буфере для анализа. Реакционные смеси инкубировали в течение 60 минут при 37°С. Реакции останавливали добавлением уксусной кислоты (конечная концентрация - 100 мМ). Считывание показателей проводили на ридере Pherastar Fluorescent Reader (BMG). λ эмиссии - 380 нМ; λ возбуждения - =460 нМ. Данные (средние значения +/- стандартное отклонение) анализировали как % от контроля (проба без соединения) и строили график зависимости процентной доли от логарифма концентрации соединения, используя программу GraphPad (Prism). Данные аппроксимировали к сигмоидальной модели (переменная крутизна).
Клонирование и очистка USP8
cDNA, кодирующую USP8, получали с помощью PCR-амплификации из плацентарной mRNA. cDNA USP8 субклонировали с помощью PCR в бакуловирусный экспрессионный вектор (pFastBac-HT; Invitrogen). cDNA, кодирующую мутированный USP8, создавали с помощью мутагенной PCR. Соответствующий белок кодирует замещение цистеина на аланин в положении 786. Последовательности устанавливали с помощью секвенирования полной открытой рамки считывания. Бакмиды, кодирующие USP7, создавали в результате транспозиции в DH10bac. Соответствующими бакмидами трансфицировали клетки насекомых (Sf9). Вирусы выделяли из супернатантов культур и дважды амплифицировали. Клетки насекомых (Sf9 или High Five; Invitrogen) инфицировали в течение 72 часов. Собирали суммарные лизаты клеток и лизировали их в буфере для лизиса (Tris-HCl 50 мМ рН 7,6; 0,75%-ный NP40; 500 мМ NaCl; 10%-ный глицерин; 1 мМ DTT; 10 мМ имидазол; смесь ингибиторов протеаз; AEBSF 20 мкг/мл; апротинин 10 мкг/мл). Белки подвергали аффинной очистке на металло-аффинных смолах (Talon Metal affinity resin; BD Biosciences). Связавшиеся материалы интенсивно промывали буфером для промывания (50 мМ натрия фосфат, рН 7,0; 300 мМ NaCl; 10 мМ имидазол; 0,5%-ный Triton X-100; 10%-ный глицерин) и элюировали из смолы 250 мМ имидазолсодержащим буфером для промывания. Белки диализовали в буфере для диализа (20 мМ Tris-HCl, pH 7,6; NaCl 200 мМ; DTT 1 мМ; EDTA 1 мМ; 10%-ный глицерин).
Очистку белков анализировали с помощью 4-12% NuPAGE (Invitrogen).
Анализ активности USP8
USP8 разводили в буфере USP (50 мМ Tris-HCl; 0,5 мМ EDTA; 5 мМ DTT; 0,01%-ный Triton Х-100; бычий сывороточный альбумин 0,05 мг/мл pH 8,8). Запасные растворы соединений (100 мМ) хранили при -20°С в DMSO. Соединения анализировали при следующих конечных концентрациях: 100 мкМ; 33,3 мкМ; 11,1 мкМ; 3,7 мкМ; 1,23 мкМ; 412 нМ; 137 нМ; 45,7 нМ; 15,2 нМ; 5 нМ.
Реакции проводили в двух повторах в 96-луночных планшетах Black LJL (НЕ microplates; Molecular Devices; конечный объем реакции - 20 мкл). Концентрация субстрата для USP8 составляла 400 нМ Ub-AMC (Boston Biochem). Концентрации фермента (USP8) в анализах специфичности была равна 630 пМ. Концентрации устанавливали таким образом, чтобы проводить анализ специфичности, измеряя начальные скорости при фиксированных концентрации субстратов. Соединения проинкубировали с ферментами в течение 30 минут при 25°С. Реакции начинали добавлением субстрата в планшеты, содержащие ферменты (+/- соединения), разведенные в буфере для анализа. Реакционные смеси инкубировали в течение 60 минут при 37°С. Реакции останавливали добавлением уксусной кислоты (конечная концентрация - 100 мМ). Считывание показателей проводили на ридере Pherastar Fluorescent Reader (BMG). λ эмиссии - 380 нМ; λ возбуждения - =460 нМ. Данные (средние значения +/- стандартное отклонение) анализировали как % от контроля (проба без соединения) и строили график зависимости процентной доли от логарифма концентрации соединения, используя программу GraphPad (Prism). Данные аппроксимировали к сигмоидальной модели (переменная крутизна).
Анализ активности UCH-L3
Uch-L3 разводили в буфере USP (50 мМ Tris-HCl; 0,5 мМ EDTA; 5 мМ DTT; 0,01%-ный Triton Х-100; бычий сывороточный альбумин 0,05 мг/мл pH 7,6). Запасные растворы соединений (100 мМ) хранили при -20°С в DMSO. Соединения анализировали при следующих конечных концентрациях: 100 мкМ; 33,3 мкМ; 11,1 мкМ; 3,7 мкМ; 1,23 мкМ; 412 нМ; 137 нМ; 45,7 нМ; 15,2 нМ; 5 нМ.
Реакции проводили в двух повторах в 96-луночных планшетах Black LJL (НЕ microplates; Molecular Devices; конечный объем реакции - 20 мкл). Концентрация субстрата для Uch-L3 составляла 400 нМ Ub-AMC (Boston Biochem). Концентрации фермента (Uch-L3) в анализах специфичности была равна 13 пМ. Концентрации устанавливали таким образом, чтобы проводить анализ специфичности, измеряя начальные скорости при фиксированных концентрации субстратов. Соединения проинкубировали с ферментами в течение 30 минут при 25°С. Реакции начинали добавлением субстрата в планшеты, содержащие ферменты (+/- соединения), разведенные в буфере для анализа. Реакционные смеси инкубировали в течение 60 минут при 37°С. Реакции останавливали добавлением уксусной кислоты (конечная концентрация - 100 мМ). Считывание показателей проводили на ридере Pherastar Fluorescent Reader (BMG). λ эмиссии - 380 нМ; %, возбуждения - =460 нМ. Данные (средние значения +/- стандартное отклонение) анализировали как % от контроля (проба без соединения) и строили график зависимости процентной доли от логарифма концентрации соединения, используя программу GraphPad (Prism). Данные аппроксимировали к сигмоидальной модели (переменная крутизна).
Анализ активности каспазы 3
Каспазу 3 разводили в буфере для каспазы 3 (100 мМ Hepes pH 7,5; 10%-ная сахароза; 0.1%-ный CHAPS). Запасные растворы соединений (100 мМ) хранили при
-20°С в DMSO. Соединения анализировали при следующих конечных концентрациях: 100 мкМ; 33,3 мкМ; 11,1 мкМ; 3,7 мкМ; 1,23 мкМ; 412 нМ; 137 нМ; 45,7 нМ; 15,2 нМ; 5 нМ.
Реакции проводили в двух повторах в 96-луночных планшетах Black LJL (HE microplates; Molecular Devices; конечный объем реакции - 20 мкл). Концентрация субстрата для анализа специфичности каспазы 3 составляла 500 нМ (Ac-DEVD-AMC; Promega). Концентрации фермента (каспаза 3) в анализах специфичности была равна 3,2 нМ. Концентрации устанавливали таким образом, чтобы проводить анализ специфичности, измеряя начальные скорости при фиксированных концентрации субстратов. Соединения проинкубировали с ферментами в течение 30 минут при 25°С. Реакции начинали добавлением субстрата в планшеты, содержащие ферменты (+/-соединения), разведенные в буфере для анализа. Реакционные смеси инкубировали в течение 60 минут при 37°С. Реакции останавливали добавлением уксусной кислоты (конечная концентрация - 100 мМ). Считывание показателей проводили на ридере Pherastar Fluorescent Reader (BMG). δ эмиссии 380 нМ; δ возбуждения = 460 нМ. Данные (средние значения +/- стандартное отклонение) анализировали как % от контроля (проба без соединения) и строили график зависимости процентной доли от логарифма концентрации соединения, используя программу GraphPad (Prism). Данные аппроксимировали к сигмоидальной модели (переменная крутизна).
Анализ активности катепсина В
Катепсин В разводили в буфере для катепсина В (20 мМ Tris-HCl pH 6,8; 1 мМ EDTA; 1 мМ DTT). Запасные растворы соединений (100 мМ) хранили при -20°С в DMSO.
Соединения анализировали при следующих конечных концентрациях: 100 мкМ; 33,3 мкМ; 11,1 мкМ; 3,7 мкМ; 1,23 мкМ; 412 нМ; 137 нМ; 45,7 нМ; 15,2 нМ; 5 нМ. Реакции проводили в двух повторах в 96-луночных планшетах Black LJL (HE microplates; Molecular Devices; конечный объем реакции - 20 мкл). Концентрация субстрата для анализа специфичности катепсина В составляла 36 мкМ (z-RR-AMC; Calbiochem). Концентрации фермента (катепсина В) в анализах специфичности была равна 3,6 нМ. Концентрации устанавливали таким образом, чтобы проводить анализ специфичности, измеряя начальные скорости при фиксированных концентрации субстратов. Соединения проинкубировали с ферментами в течение 30 минут при 25°С. Реакции начинали добавлением субстрата в планшеты, содержащие ферменты (+/- соединения), разведенные в буфере для анализа. Реакционные смеси инкубировали в течение 60 минут при 37°С. Реакции останавливали добавлением уксусной кислоты (конечная концентрация - 100 мМ). Считывание показателей проводили на ридере Pherastar Fluorescent Reader (BMG). δ эмиссии 380 нМ; δ возбуждения = 460 нМ. Данные (средние значения +/- стандартное отклонение) анализировали как % от контроля (проба без соединения) и строили график зависимости процентной доли от логарифма концентрации соединения, используя программу GraphPad (Prism). Данные аппроксимировали к сигмоидальной модели (переменная крутизна).
Методы определения жизнеспособности и пролиферации клеток
Анализ жизнеспособности и пролиферации клеток НСТ116
Колоректальные опухолевые клетки НСТ116 получали из АТСС (American Type Culture Collection) и поддерживали в среде Me Coy's 5A, содержащей 10%-ную FBS, 3 мМ глутамин и 1%-ный пенициллин/стрептомицин. Клетки инкубировали при 37°С во влажной атмосфере с 5% CO2.
Жизнеспособность клеток анализировали с помощью метода MTS в 96-луночных планшетах для культур клеток (CellTiter 96® Aqueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay, Promega) в соответствии с инструкциями фирмы-производителя. MTS (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-сульфофенил)-2Н-тетразолий) представляет собой МТТ-производное тетразолия, которое восстанавливается в метаболически активных клетках в растворимый, проникающий в клетки формазан. Количество формазана, определяемое по его поглощению при 492 нм, пропорционально числу живых метаболически активных клеток.
Высевали 103 клеток НСТ116 на лунку. Через 24 часа среду заменяли и клетки обрабатывали в тройных повторах следующими концентрациями каждого соединения: 10 мкМ - 3,33 мкМ - 1,11 мкМ - 370 нМ - 123 нМ - 41 нМ - 14 нМ и 5 нМ. Соединения разводили в 100%-ном ДМСО, конечная концентрация которого в клетках поддерживалась на уровне 0,5%.
Клетки инкубировали с соединением в течение 72 часов, и их жизнеспособность затем анализировали после добавления MTS в течение 2 часов. Поглощение при 492 нм измеряли непосредственно в 96-луночных планшетах для культур клеток. Концентрации GJ50 (ингибирование роста на 50%) для каждого соединения рассчитывали с помощью сигмоидальной аппроксимации переменной крутизны (Prism 4.0, Graphpad Softwares). Значения представляют собой среднее из 3 независимых экспериментов.
Анализ жизнеспособности и пролиферации клеток РС3
Опухолевые клетки простаты РС-3 получали из АТСС и поддерживали в среде F-12K, содержащей 7%-ную FBS и 1%-ный пенициллин/стрептомицин. Клетки инкубировали при 37°С во влажной атмосфере с 5% CO2.
Жизнеспособность клеток анализировали с помощью метода MTS в 96-луночных планшетах для культур клеток (CellTiter 96® Aqueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay, Promega) в соответствии с инструкциями фирмы-производителя. MTS (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-сульфофенил)-2Н-тетразолий) представляет собой МТТ-производное тетразолия, которое восстанавливается в метаболически активных клетках в растворимый, проникающий в клетки формазан. Количество формазана, определяемое по его поглощению при 492 нм, пропорционально числу живых метаболически активных клеток.
Высевали 2×103 клеток РС3 на лунку. Через 24 часа среду заменяли и клетки обрабатывали в тройных повторах следующими концентрациями каждого соединения: 10 мкМ - 3,33 мкМ - 1,11 мкМ - 370 нМ - 123 нМ - 41 нМ - 14 нМ и 5 нМ. Соединения разводили в 100%-ном ДМСО, конечная концентрация которого в клетках поддерживалась на уровне 0,5%.
Клетки инкубировали с соединением в течение 72 часов и их жизнеспособность затем анализировали после добавления MTS в течение 2 часов. Поглощение при 492 нм измеряли непосредственно в 96-луночных планшетах для культур клеток. Концентрации GI50 (ингибирование роста на 50%) для каждого соединения рассчитывали с помощью сигмоидальной аппроксимации переменной крутизны (Prism 4.0, Graphpad Softwares). Значения представляют собой среднее из 3 независимых экспериментов.
Claims (8)
1. Соединение формулы (I):
(I)
где
в зависимости от ситуации представляет собой или одинарную, или двойную связь;
в зависимости от ситуации обозначает или отсутствие связи, или одинарную связь;
представляет собой , или ,
где и конденсированы вместе с помощью Т и X, где Т и Х определены в вышеуказанных структурных фрагментах;
V представляет собой N;
U и W являются одинаковыми или разными и представляют собой С или N, причем один из них обязательно представляет собой N;
R3, R4, R5 и R6 представляют собой Н;
Rv отсутствует;
Ru и Rw отсутствуют или представляют собой (С1-12)алкил;
Y представляет собой N-OR1, NR'1, где
R1 представляет собой Н, (С1-12)алкил, (С2-12)алкенил, (С1-12)алкокси(С1-12)алкил, фенилокси(С1-12)алкил, фенил(С1-12)алкил, (C1-12)алкоксикарбонил(С1-12)алкил или карбокси(С1-12)алкил и
R'1 представляет собой фенил,
или его фармацевтически приемлемые соли, или их диастереомеры, или их региоизомеры, или их смеси.
(I)
где
в зависимости от ситуации представляет собой или одинарную, или двойную связь;
в зависимости от ситуации обозначает или отсутствие связи, или одинарную связь;
представляет собой , или ,
где и конденсированы вместе с помощью Т и X, где Т и Х определены в вышеуказанных структурных фрагментах;
V представляет собой N;
U и W являются одинаковыми или разными и представляют собой С или N, причем один из них обязательно представляет собой N;
R3, R4, R5 и R6 представляют собой Н;
Rv отсутствует;
Ru и Rw отсутствуют или представляют собой (С1-12)алкил;
Y представляет собой N-OR1, NR'1, где
R1 представляет собой Н, (С1-12)алкил, (С2-12)алкенил, (С1-12)алкокси(С1-12)алкил, фенилокси(С1-12)алкил, фенил(С1-12)алкил, (C1-12)алкоксикарбонил(С1-12)алкил или карбокси(С1-12)алкил и
R'1 представляет собой фенил,
или его фармацевтически приемлемые соли, или их диастереомеры, или их региоизомеры, или их смеси.
2. Соединение формулы (I) по п.1, где, по меньшей мере, одну из групп Ru, Rw выбирают из (C1-12)Alk.
4. Соединение по п.1, выбираемое из группы, состоящей из:
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима,
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 1-метил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 3-бутил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 1-бутил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-аллил-оксима,
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она оксима,
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-децил-оксима,
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(2-метокси-этил)-оксима,
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(3-фенокси-пропил)-оксима,
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима,
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-метил-оксима,
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-этил-оксима,
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-этил-оксима,
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-бензил-оксима,
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-бензил-оксима,
- [1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-илиден]-фенил-амина,
- этилового эфира (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-уксусной кислоты,
- (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-ацетата лития,
или их фармацевтически приемлемых солей, или их диастереомеров, или их региоизомеров, или их смесей.
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима,
- 3-метил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 1-метил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 3-бутил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 1-бутил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-аллил-оксима,
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она оксима,
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-децил-оксима,
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(2-метокси-этил)-оксима,
- 1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-(3-фенокси-пропил)-оксима,
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-метил-оксима,
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-метил-оксима,
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-этил-оксима,
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она О-этил-оксима,
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-аллил-оксима,
- 1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-бензил-оксима,
- 3-этил-1,2,3а,4,10-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-она O-бензил-оксима,
- [1-этил-2,3,4,10,10а-пентааза-циклопента[b]флуорен-9-илиден]-фенил-амина,
- этилового эфира (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-уксусной кислоты,
- (1,2,3,3а,4,10-гексааза-циклопента[b]флуорен-9-илиденаминоокси)-ацетата лития,
или их фармацевтически приемлемых солей, или их диастереомеров, или их региоизомеров, или их смесей.
6. Соединение формулы (I), как определено в п.5, для ингибирования одной или нескольких цистеиновых протеаз.
7. Соединение по п.6, где указанные цистеиновые протеазы принадлежат к одной или нескольким группам ферментов деубиквитинилирования, каспаз, катепсинов, кальпаинов, а также цистеиновых протеаз вирусов, бактерий, грибов или паразитов.
8. Соединение формулы (I), как определено в п.5, для лечения и/или профилактики рака и метастазирования, нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона, воспалительных нарушений, сердечно-сосудистых заболеваний, и/или инфекционности, и/или латентности, в частности, для вируса простого герпеса 1, вируса Эпштейна-Бара или коронавируса SARS, нейродегенеративных нарушений, предпочтительно поражения нервных клеток, вызываемого инсультом, повреждения печени и печеночной недостаточности, возникшей в результате острого или хронического инфекционного, ишемического или химического повреждения печени, повреждения почек и почечной недостаточности, возникшей в результате острого или хронического инфекционного, ишемического или химического повреждения почек, повреждения сердца и сердечной недостаточности, возникшей в результате острого или хронического инфекционного, ишемического или химического повреждения сердца, диабета, возникшего в результате острого или хронического аутоиммунного, химического, окислительного или метаболического повреждения инсулиновых бета-клеток панкреатических островков, иммунологических нарушений, заболеваний костей и суставов, остеопороза и артрита, нарушений, связанных со старением, диабета с поздним началом и катаракты, вирусных инфекций и заболеваний, включающих гепатит А, гепатит С, инфекцию и заболевание, вызываемые коронавирусом SARS, риновирусные инфекции и заболевания, аденовирусные инфекции и заболевания, полиомиелит; бактериальных инфекций и заболеваний, включающих стрептококковые инфекции и заболевания, инфекции и заболевания, вызываемые бактериями вида Clostridium sp., стафилококковые инфекции и заболевания; гингивита и периодонтальных заболеваний, грибковых инфекций и заболеваний, протозойных паразитарных инфекций и заболеваний, паразитарных инфекций и заболеваний, вызываемых плоскими червями, паразитарных инфекций и заболеваний, вызываемых круглыми червями.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US11/554,056 | 2006-10-30 | ||
EP06291686A EP1918292A1 (en) | 2006-10-30 | 2006-10-30 | Tetracyclic inhibitors of cysteine proteases, the pharmaceutical compositions thereof and their therapeutic applications |
US11/554,056 US7875613B2 (en) | 2006-10-30 | 2006-10-30 | Tetracyclic inhibitors of cysteine proteases, the pharmaceutical compositions thereof and their therapeutic applications |
EP06291686.1 | 2006-10-30 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2009120582A RU2009120582A (ru) | 2010-12-10 |
RU2481349C2 true RU2481349C2 (ru) | 2013-05-10 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP1749822B1 (en) | Novel cysteine protease inhibitors and their therapeutic applications | |
US7875613B2 (en) | Tetracyclic inhibitors of cysteine proteases, the pharmaceutical compositions thereof and their therapeutic applications | |
JP2013166798A (ja) | 新規システインプロテアーゼ阻害剤およびそれらの治療への応用 | |
CZ20031520A3 (cs) | Laktamové sloučeniny a jejich farmaceutické použití | |
US7462615B2 (en) | Inhibitors of cysteine proteases, the pharmaceutical compositions thereof and their therapeutic applications | |
EP2552915B1 (en) | Compounds for the treatment of hiv | |
EP1963328B1 (en) | Inhibitors of cysteine proteases, the pharmaceutical compositions thereof and their therapeutic applications | |
RU2481349C2 (ru) | Новые тетрациклические ингибиторы цистеиновых протеаз, их фармацевтические композиции и области их терапевтического применения | |
US20070032499A1 (en) | Novel cysteine protease inhibitors and their therapeutic applications | |
EP2084163B1 (en) | Tetracyclic inhibitors of cysteine proteases, the pharmaceutical compositions thereof and their therapeutic applications | |
EP1918292A1 (en) | Tetracyclic inhibitors of cysteine proteases, the pharmaceutical compositions thereof and their therapeutic applications | |
US20090181972A1 (en) | Novel Inhibitors of Cysteine Proteases, the Pharmaceutical Compositions Thereof and their Therapeutic Applications | |
MX2008001718A (en) | Novel cysteine protease inhibitors and their therapeutic applications |