RU2460279C1 - Способ регуляции транскрипции хлоропластных генов ячменя (hordeum vulgare) - Google Patents
Способ регуляции транскрипции хлоропластных генов ячменя (hordeum vulgare) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2460279C1 RU2460279C1 RU2011127798/10A RU2011127798A RU2460279C1 RU 2460279 C1 RU2460279 C1 RU 2460279C1 RU 2011127798/10 A RU2011127798/10 A RU 2011127798/10A RU 2011127798 A RU2011127798 A RU 2011127798A RU 2460279 C1 RU2460279 C1 RU 2460279C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- barley
- transcription
- genes
- plants
- chloroplast genes
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в сельском хозяйстве в области растениеводства на открытом грунте и в сооружениях защищенного грунта. Сущность изобретения состоит в активации прорастания семян ячменя и стимуляции транскрипции 12 хлоропластных генов растений путем обработки проростков ячменя 24-эпибрассинолидом. Предложенный способ способствует увеличению продуктивности выращиваемых растений и повышению экологической безопасности производимой продукции. 1 табл., 2 ил.
Description
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в сельском хозяйстве в области растениеводства как на открытом грунте, так и в сооружениях защищенного грунта.
Среди сельскохозяйственных культур, активно возделываемых на территории России, значительную долю занимает ячмень (второе место в структуре посевных площадей зерновых культур РФ, 21.4% на 2001 г.). Ячмень не только кормовая культура, он является основным сырьем для пивоваренной промышленности, широко используется для продовольственных и технических целей.
Известен способ активации фотосинтеза с помощью консорциума бактерий (патент РФ №2054403). Консорциум бактерий, выделенных с растений, образует молочную кислоту и цитокинины. Обработка растений полученной культуральной жидкостью и микроэлементами способствует повышению интенсивности фотосинтеза и урожая растений.
Недостатком известного является сложность получения и очистки целевого препарата. При этом экологическая безопасность данного препарата (комплекс культуральной жидкости и микроэлементов) не показана.
Наиболее близким к заявленному техническому решению является способ повышения транскрипции хлоропластных генов у растений ячменя с помощью некоторых фитогормонов (Zubo Y.O., Yamburenko M.V., Kusnetsov V.V., Börner Т. Methyl jasmonate, gibberellic acid, and auxin affect transcription and transcript accumulation of chloroplast genes in barley // J Plant Physiol. - 2011. doi: 10.1016/j.jplph. 2011.01.009). Среди веществ, снижающих транскрипцию генов фотосинтеза, показаны метил жасмонат, ауксин и гиббереллин. Единственный гормон, усиливающий транскрипцию некоторых генов ячменя, - фитогормон цитокинин (6-бензиламинопурин) (способ принят за прототип).
Среди недостатков способа-прототипа можно отметить то, что используемая концентрация гормона (цитокинина), повышающего активность фотосинтетических генов, очень высока (2,2·10-5 M), что экономически не выгодно. Эпибрассинолид в анализируемой авторами концентрации (10-7 M) заметного влияния на экспрессию генов не оказывает.
Задачей изобретения является разработка способа активации процесса фотосинтеза у растений ячменя hordeum vulgare путем регуляции транскрипции хлоропластных генов.
Поставленная задача решается тем, что в способе, включающем культивирование проростков ячменя в почвенной культуре и обработку фитогормонами, проростки ячменя на фазе формирования первого листа подвергают одноразовой обработке 24-эпибрассинолидом в концентрации 10-6 M. Этим увеличивают фотосинтетическую активность, что вносит существенный вклад в повышение продуктивного потенциала растений ячменя.
Таким образом, сущность изобретения состоит в регуляции транскрипции хлоропластных генов у растений ячменя экологически чистым фитогормоном - брассиностероидом, а именно 24-эпибрассинолидом.
Брассиностероиды (БС) фитогормоны нового поколения, обладающие высокой биологической активностью. Активное использование брассиностероидов в качестве принципиально новых препаратов сельскохозяйственного назначения обусловлено их экологической безопасностью и способностью снижать накопление нитратов, тяжелых металлов и радионуклидов. БС активируют синтез белков и нуклеиновых кислот, изменяют не только состав аминокислот и жирных кислот, но и соотношение эндогенных фитогормонов. Происходящие на клеточном уровне сдвиги отражаются на уровне целого растения не только усилением роста и урожайности сельскохозяйственных культур, но и повышением устойчивости растений к неблагоприятным факторам внешней среды (Khripach V.A. et al., 2003).
Уникальность брассиностероидов состоит и в том, что они могут «имитировать» регуляторную и фотосинтетическую активности света в темноте.
Регуляция активности транскрипции пластидных генов в первых листьях 6-дневных проростков hordeum vulgare согласно изобретению иллюстрируется рисунками.
На фиг.1 показана радиограмма радиоавтографа эксперимента с хлоропластами растений ячменя и схема нанесения ДНК-зондов исследованных генов на мембрану.
На фиг.2 показана гистограмма, полученная при обработке данных радиоавтографов.
Реализация способа иллюстрируется следующим примером.
Зерна ячменя или листья обрабатывали раствором эпибрассинолида (ЭБЛ) на фазе формирования первого листа в концентрации 10-6 M и проверяли способность фитогормона стимулировать прорастание семян и регулировать транскрипцию ключевых генов фотосинтеза.
Обработка ячменя раствором ЭБЛ способствует синхронизации и сокращению сроков прорастания. Несмотря на высокую скороспелость ячменя (от 55 дней), сроки его вегетации могут достигать 120 дней. Сокращение вегетационного периода позволит расширить ареал этой культуры, включая возможность ее возделывания у самых северных границ земледелия России.
С помощью известного run-on анализа была исследована скорость транскрипции ключевых фотосинтетических генов hordeum vulgare под действием экзогенного эпибрассинолида и воды (на фиг.2 - ЭБЛ и H2O, соответственно). Основой транскрипционной системы служили лизированные хлоропласты, выделенные из первых листьев 6-дневных растений ячменя. В ходе реакции транскрипции во вновь синтезированные молекулы РНК включался радиоактивно-меченый УТФ (α32Р-УТФ), что позволило в дальнейшем анализировать только вновь синтезированные транскрипты. Радиоавтографы типичного опыта, полученные в ходе run-on эксперимента с хлоропластами листьев ячменя, схема нанесения фрагментов выбранных генов на мембрану показаны на фиг.1.
Авторами проведен сравнительный анализ активности 12 хлоропластных генов, относящихся к функционально-различным группам генов пластома. Прежде всего, это гены, продукты которых выполняют первостепенную роль для реализации фотосинтеза - гены фотосистемы I - psa (psaA и psaB), фотосистемы II - psb (psbA, psbD и psbK), ген большой субъединицы РБФК (rbcL), АТФ синтетазного комплекса - atp (atpB) и субъединица F НАДФН пластохиноноксидоредуктазы - ndhF. Среди генов «домашнего хозяйства» была изучена транскрипция гена, кодирующего β субъединицу РНК-полимеразы бактериального типа (rpoB), гены 16S и 23S рибосомальной РНК (rrn16 и rrn23) и гены тРНК-Глу и тРНК-Тир (trnE-Y) (см. таблицу).
Таблица Характеристика генов |
||
Гены «домашнего хозяйства» | ||
Рибосома | 16S pPHK | rrn16 |
23S pPHK | rrn23 | |
тРНК | тРНК-Глу и тРНК-Тир | trnE/trnY |
Хлоропластная РНК-полимераза | β-субъединица РНК-полимеразы | rpoB |
Гены белков фотосинтетического аппарата | ||
Фотосистема I | А1 апопротеин ФСI | psaA |
А2 апопротеин ФСI | psaB | |
Фотосистема II | полипептид реакционного центра D1 | psbA |
47 кДа хлорофилл апопротеин | psbB | |
полипептид реакционного центра D2 | psbD | |
НАДН-пластохинон оксидоредуктаза | субъединица F | ndhF |
АТФ-синтаза | β-субъединица АТФ синтазы | atpB |
Большая субъединица РБФК | rbcL |
На фиг.2 показана интенсивность транскрипции, выраженная в условных единицах. Видно, что транскрипция ключевых фотосинтетических генов в первых листьях ячменя под действие экзогенного ЭБЛ значительно возрастает. Достоверными считали 2-кратные различия активности генов. Значительная активация транскрипции (27 раз) отмечена для генов одной из субъединиц (F субъединицы) НАДН-пластохиноноксидоредуктазы, участвующей в дыхательном обмене растений (ndhF). Высокая активность транскрипции получена для генов, кодирующих А2 апопротеин фотосистемы I (22 раза, psaB), рибосомный белок 16S (17 раз, rrn16) и большую субъединицу основного фермента фотосинтеза (12 раз, rbcL). Для большинства изученных генов экзогенный ЭБЛ способствовал увеличению транскрипционной активности в 5-7 раз (psaA, psbA, psbD, psbK и rrn23).
Таким образом, экспериментально доказано, что экзогенный эпибрассинолид не только сокращает время прорастания семян ячменя, но и повышает активность транскрипции хлоропластных генов. Изменение интенсивности транскрипции хлоропластных генов способствует изменению содержания хлорофилла, что напрямую связано с фотосинтетической активностью (Kravtsov et al., 2011).
Техническим результатом является повышение транскрипции хлоропластных генов hordeum vulgare, что способствует увеличению продуктивности ячменя и повышению экологической безопасности производимой продукции.
Использованные источники
1. Жученко А.А. Ресурсный потенциал производства зерна в России (теория и практика) - М: ООО «Издательство Агрорус», 2004. 1109 с.
2. Zubo Y.O., Yamburenko M.V., Kusnetsov V.V., Börner Т. Methyl jasmonate, gibberellic acid, and auxin affect transcription and transcript accumulation of chloroplast genes in barley // J Plant Physiol. - 2011. doi: 10.1016/j.jplph. 2011.01.009.
3. Khripach V.A., Zhabinskii V.N., Karnachuk R.A. // Chemical probes in biology / Science at the interface of brassinosteroids: a new role of steroids as biosignaling molecules. 2003. M.P.Schneider. Ed. Netherlands: Kluwer Academic Publishers. Vol.129. P.153-167. NATO Science Series. 391 p.
4. Kravtsov A.K., Zubo Y.O., Yamburenko M.V., Kulaeva O.N., Kusnetsov V.V. Cytokinin and abscisic acid control plastid gene transcription during barley seedling de-etiolation // Plant Growth Regulation. 2011. DOI 10.1007/s10725-010-9553-y.
5. Патент РФ №2054403. Консорциум бактерий (lactobacillus salivarius var salivarius, lactobacillus acidophilus, lactobacillus lactis) для активации фотосинтеза. Опубл. 1996.
Claims (1)
- Способ регуляции транскрипции хлоропластных генов ячменя (hordeum vulgare), включающий культивирование проростков в почвенной культуре и одноразовую обработку 24-эпибрассинолидом на фазе формирования первого листа, отличающийся тем, что одноразовой обработке 24-эпибрассинолидом в концентрации 10-6 М подвергают шестидневные растения ячменя (hordeum vulgare).
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2011127798/10A RU2460279C1 (ru) | 2011-07-06 | 2011-07-06 | Способ регуляции транскрипции хлоропластных генов ячменя (hordeum vulgare) |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2011127798/10A RU2460279C1 (ru) | 2011-07-06 | 2011-07-06 | Способ регуляции транскрипции хлоропластных генов ячменя (hordeum vulgare) |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2460279C1 true RU2460279C1 (ru) | 2012-09-10 |
Family
ID=46938644
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011127798/10A RU2460279C1 (ru) | 2011-07-06 | 2011-07-06 | Способ регуляции транскрипции хлоропластных генов ячменя (hordeum vulgare) |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2460279C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2539802C1 (ru) * | 2013-12-27 | 2015-01-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Гелла-Фарма" | Способ выращивания ячменя |
-
2011
- 2011-07-06 RU RU2011127798/10A patent/RU2460279C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Zubo YO et al. Methyl jasmonate, gibberellic acid, and auxin affect transcription and transcript accumulation of chloroplast genes in barley. J Plant Physiol. 2011 Aug 15; 168(12):1335-44. Ямбуренко M.B. Роль фитогормонов и света в регуляции транскрипции хлоропластных генов в ячмене. Автореферат. - М., 2009. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2539802C1 (ru) * | 2013-12-27 | 2015-01-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Гелла-Фарма" | Способ выращивания ячменя |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109456394A (zh) | 番茄SlPIF4基因、蛋白及其在提高植物耐低温性中的应用 | |
Khokonova et al. | Photosynthetic activity of spring barley plants depending on moisture provision | |
Butenko et al. | Agrobiological and ecological bases of productivity increase and genetic potential implementation of new buckwheat cultivars in the conditions of the Northeastern Forest-Steppe of Ukraine | |
Balderas-Ruíz et al. | Bacillus velezensis 83 increases productivity and quality of tomato (Solanum lycopersicum L.): Pre and postharvest assessment | |
Paré et al. | Beneficial rhizobacteria induce plant growth: mapping signaling networks in Arabidopsis | |
RU2460279C1 (ru) | Способ регуляции транскрипции хлоропластных генов ячменя (hordeum vulgare) | |
RU2477942C2 (ru) | Способ предпосевной обработки семян нута | |
KR101830058B1 (ko) | 마이크로코커스 루테우스 pnl10-2 균주 및 이의 용도 | |
Yulia et al. | Effect of boron and zinc application on HXK1 and MAKR6 gene expression in strawberry. | |
RU2794153C9 (ru) | Способ повышения продуктивности кукурузы | |
RU2732627C1 (ru) | Средство для повышения холодоустойчивости и продуктивности растений | |
Krishnaveni et al. | Impact of foliar nutrition on the yield and economics of greengram (Vigna radiata) | |
CN103525825A (zh) | 一种植物耐锰毒害重要基因ShMDH1的克隆及其应用 | |
Fomicheva et al. | The effect of the biopreparation of LPB on the yield of vegetable crops | |
RU2794153C1 (ru) | Способ повышения продуктивности кукурузы | |
RU2514641C1 (ru) | Способ стабилизации транскрипции хлоропластных генов рапса в условиях хлоридного засоления | |
RU2808542C1 (ru) | Способ повышения урожайности подсолнечника | |
Melnik et al. | Symbiotic activity and productivity of soybean plants for treatments with growth regulators with anti-stress action | |
Andrii et al. | MANIFESTATION OF THE GENETIC POTENTIAL OF NEW VARIETIES OF BUCKWHEAT IN THE CONDITIONS OF THE NORTH-EASTERN FOREST-STEPPE OF UKRAINE | |
Demyanyuk et al. | Ecologically comparative effect of bacterial preparations on field germination of sugar beets | |
Vasin et al. | Yield structure of spring wheat when applying fertilizers and stimulating preparations | |
Chaika et al. | INFLUENCE OF GROWTH STIMULANTS ON THE ONTOGENESIS OF SPRING BARLEY (HORDEUM VULGARE L.) | |
Voronina et al. | The Effect of 24-Epibrassinolide and Its Products on the Content of Total, Protein, and Nitrate Nitrogen in Plants | |
Yakovleva | Application of biopreparations based on strains of nodule bacteria in the productivity of alfalfa in central yakutia. | |
Anatolyevich et al. | Efficacy of growth regulators in cover crops of amaranth sredneshirotnykh on irrigated lands of flat Dagestan |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180707 |