RU2456024C2 - Cardioprotection technique - Google Patents

Cardioprotection technique

Info

Publication number
RU2456024C2
RU2456024C2 RU2010116541A RU2010116541A RU2456024C2 RU 2456024 C2 RU2456024 C2 RU 2456024C2 RU 2010116541 A RU2010116541 A RU 2010116541A RU 2010116541 A RU2010116541 A RU 2010116541A RU 2456024 C2 RU2456024 C2 RU 2456024C2
Authority
RU
Grant status
Grant
Patent type
Prior art keywords
drug
reperfusion
carrier
nanoparticles
ischemia
Prior art date
Application number
RU2010116541A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2010116541A (en )
Inventor
Михаил Михайлович Галагудза (RU)
Михаил Михайлович Галагудза
Дмитрий Владимирович Королев (RU)
Дмитрий Владимирович Королев
Александр Валерьевич Сыренский (RU)
Александр Валерьевич Сыренский
Дмитрий Леонидович Сонин (RU)
Дмитрий Леонидович Сонин
Илья Вадимович Александров (RU)
Илья Вадимович Александров
Саркис Минасович Минасян (RU)
Саркис Минасович Минасян
Виктор Николаевич Постнов (RU)
Виктор Николаевич Постнов
Елена Борисовна Кирпичёва (RU)
Елена Борисовна Кирпичёва
Original Assignee
Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр сердца, крови и эндокринологии имени В.А. Алмазова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи"
Общество с ограниченной ответственностью "Экспериментальный фармакологический центр кардиопротекции"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Grant date

Links

Images

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention refers to medicine, namely cardiology, and may be used for myocardium protection against ischemic and reperfusion injures. That is ensured by the target drug delivery to the ischemic-reperfused myocardium. Aminated silica nanoparticles of the diameter of 10 nm wherein a spacer is grafter are used as a drug carrier. A drug substance is immobilised on a functional group of the spacer by one of the following methods: covalent binding, coordination ion interaction, immobilisation by adsorption.
EFFECT: technique provides the selective accumulation of the drug substance within ischemia-reperfusion after the systemic introduction of the specified complex with the minimum effect of the preparation on intact organs and tissues and good biodegradability of the carrier; surface functionalisation of said nanoparticles also provides a binding ability of the drug substances of different chemical compositions in various proportions.
2 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для защиты миокарда от ишемического и реперфузионного повреждения у пациентов с ишемической болезнью сердца. The invention relates to medicine, namely to cardiology, and can be used to protect the myocardium from ischemia and reperfusion injury in patients with coronary heart disease.

Эффективность защиты миокарда от ишемического и реперфузионного повреждения может быть существенно повышена при обеспечении направленной доставки лекарственных препаратов с кардиопротективной активностью в ишемизированный миокард при помощи наноразмерных носителей. The effectiveness of protection of the myocardium from ischemic and reperfusion damage may be greatly increased by providing targeted delivery of pharmaceuticals with cardioprotective activity in ischemic myocardium using nanosized carriers. Направленная доставка лекарственных препаратов с использованием таких носителей решает несколько актуальных задач. Targeted delivery of drugs using such carriers solve some urgent problems. Она приводит к понижению токсичности, увеличению биодоступности, растворимости и стабильности препарата (Singh R., Lillard JW Jr. Nanoparticle-based targeted drug delivery. Exp Mol Pathol 2009; 86(3): 215-223). It leads to a lowering of toxicity, increasing bioavailability, solubility and stability of the drug (Singh R., Lillard JW Jr. Nanoparticle-based targeted drug delivery Exp Mol Pathol 2009; 86 (3). 215-223). Целый ряд препаратов с доказанной в эксперименте кардиопротективной активностью не нашел широкого применения в клинической практике вследствие наличия серьезных побочных эффектов, которые могут быть ослаблены или полностью устранены при направленной доставке. A number of drugs with proven experimentally cardioprotective activity has not found wide use in clinical practice due to the presence of serious side effects that may be reduced or completely eliminated by targeted delivery. Внутривенное введение таких ангиогенных факторов роста, как сосудистый эндотелиальный фактор роста и фактор роста фибробластов, сопряжено с развитием вазодилатации и артериальной гипотензии (Epstein S.Е., Kornowski R., Fuchs S., Dvorak HF Angiogenesis therapy: amidst the hype, the neglected potential for serious side effects. Circulation 2001; 104(1): 115-119). Intravenous administration of angiogenic growth factors such as vascular endothelial growth factor, fibroblast growth factor, is associated with the development of vasodilation and hypotension (Epstein S.E., Kornowski R., Fuchs S., Dvorak HF Angiogenesis therapy: amidst the hype, the neglected potential for serious side effects Circulation 2001; 104 (1). 115-119). Системное введение триггера прекондиционирования миокарда брадикинина сопровождается наступлением артериальной гипотензии и бронхоспазма (Cyr М., Eastlund Т., Blais С. Jr., Rouleau JL, Adam A. Bradykinin metabolism and hypotensive transfusion reactions. Transfusion 2001; 41(1): 136-150). Systemic administration of bradykinin myocardial preconditioning trigger onset accompanied by hypotension and bronchospasm (Cyr M., Eastlund T., Blais S. Jr., Rouleau JL, Adam A. Bradykinin metabolism and hypotensive transfusion reactions Transfusion 2001; 41 (1). 136- 150).

Среди различных наночастиц в качестве переносчиков лекарственных препаратов в настоящее время наиболее активно изучаются липосомы, фосфолипидные и полимерные мицеллы, наноэмульсии, полимерные биодеградируемые наночастицы, дендримеры и наночастицы кремнезема. Among various nanoparticles as carriers of drugs are currently the most actively studied liposomes, phospholipid and polymeric micelles, nano-emulsions, biodegradable polymeric nanoparticles, silica nanoparticles and dendrimers.

Существуют два метода направленной доставки - пассивный и активный перенос. There are two methods for targeted delivery - passive and active transport. Активная доставка лекарственных препаратов в поврежденные ткани предполагает маркирование поверхности наночастиц антителами или иными распознающими элементами, которые обеспечивают высокоизбирательное связывание наночастиц с антигенами, экспрессирующимися на поверхности поврежденных клеток (McNeeley К.М., Karathanasis E., Annapragada AV, Bellamkonda RV Masking and triggered unmasking of targeting ligands on nanocarriers to improve drug delivery to brain tumors. Biomaterials 2009; 30(23-24): 3986-3995). Active delivery of drugs to damaged tissue involves labeling nanoparticle surface antibodies or other detection elements, which provide a highly selective nanoparticle binding to antigens expressed on the surface of the damaged cells (McNeeley KM, Karathanasis E., Annapragada AV, Bellamkonda RV Masking and triggered unmasking . of targeting ligands on nanocarriers to improve drug delivery to brain tumors Biomaterials 2009; 30 (23-24): 3986-3995).

Известен способ направленной активной доставки в поврежденный миокард упакованного в липосомы сосудистого эндотелиального фактора роста за счет присоединения к поверхности липосом моноклональных антител против Р-селектина (Scott R.С., Rosano J.М., Ivanov Z., Wang В., Chong PL, Issekutz А.С., Crabbe DL, Kiani М.F. Targeting VEGF-encapsulated immunoliposomes to MI heart improves vascularity and cardiac function. FASEB J 2009; 23(10): 3361-3367). A method is known active directional delivery into the injured myocardium packaged into liposomes vascular endothelial growth factor by attaching to the surface of liposomes monoclonal antibodies against P-selectin (Scott R.S., Rosano JM, Ivanov Z., Wang B., Chong PL , Issekutz A., Crabbe DL, Kiani M.F. Targeting VEGF-encapsulated immunoliposomes to MI heart improves vascularity and cardiac function FASEB J 2009; 23 (10):. 3361-3367). Описан способ активной направленной доставки АТФ в миокард с помощью липосом, имеющих на своей поверхности моноклональные антитела против миозина (Liang W., Levchenko Т., Khaw В.A., Torchilin V. ATP-containing immunoliposomes specific for cardiac myosin. Curr Drug Deliv 2004; 1(1): 1-7). Discloses a method for targeted delivery of the active ATP into the myocardium via liposomes having on its surface a monoclonal antibody against myosin (Liang W., Levchenko T., Khaw VA, Torchilin V. ATP-containing immunoliposomes specific for cardiac myosin. Curr Drug Deliv 2004; 1 (1): 1-7).

Недостатки этих способов следующие. The disadvantages of these methods are as follows.

1. Указанные способы кардиопротекции применялись только на модели перманентной окклюзии коронарной артерии, которая не соответствует современным стандартам лечения острого коронарного синдрома, предусматривающим скорейшее восстановление кровотока по инфаркт-зависимой артерии. 1. The methods of cardioprotection applied only on the model of permanent occlusion of the coronary artery, which does not meet modern standards, the treatment of acute coronary syndrome, providing for prompt restoration of blood flow in the infarct-related artery. Полученные результаты невозможно сравнивать с современными результатами лечения острого коронарного синдрома (Brodie В.R., Webb J., Сох DA, Qureshi М., Kalynych A., Turco М., Schultheiss HP, Dulas D., Rutherford В., Antoniucci D., Stuckey Т., Krucoff M., Gibbons R., Lansky A., Na Y., Mehran R., Stone GW, EMERALD Investigators. Impact of time to treatment on myocardial reperfusion and infarct size with primary percutaneous coronary intervention for acute myocardial infarction (from the EMERALD Trial). Am J Cardiol 2007; 99(12): 1680-1686). The results obtained can not be compared with the results of modern treatment of acute coronary syndrome (Brodie V.R., Webb J., Cox DA, Qureshi M., Kalynych A., Turco M., Schultheiss HP, Dulas D., Rutherford B., Antoniucci D ., Stuckey T., Krucoff M., Gibbons R., Lansky A., Na Y., Mehran R., Stone GW, EMERALD Investigators. Impact of time to treatment on myocardial reperfusion and infarct size with primary percutaneous coronary intervention for acute myocardial infarction (from the EMERALD Trial) Am J Cardiol 2007; 99 (12):. 1680-1686).

2. Положительный эффект заключается только в улучшении сократимости миокарда левого желудочка и уменьшении площади постинфарктного рубца, а не с прямым предотвращением гибели кардиомиоцитов в зоне ишемии (Scott R.С., Rosano J.М., Ivanov Z., Wang В., Chong PL, Issekutz А.С., Crabbe DL, Kiani М.F. Targeting VEGF-encapsulated immunoliposomes to MI heart improves vascularity and cardiac function. FASEB J 2009; 23(10): 3361-3367). 2. The positive effect is only to improve the left ventricular myocardial contractility and reduction of area postinfarction scar, but not with the direct prevention of cardiomyocyte death in ischemia zone (Scott R.S., Rosano JM, Ivanov Z., Wang B., Chong PL, Issekutz A., Crabbe DL, Kiani M.F. Targeting VEGF-encapsulated immunoliposomes to MI heart improves vascularity and cardiac function FASEB J 2009; 23 (10):. 3361-3367). Это связано с накоплением лекарственных наночастиц в периинфарктной зоне, а не в зоне ишемии. This is due to accumulation of drug nanoparticles in the peri-zone, rather than in the ischemic zone.

3. Использование моноклональных антител в качестве направляющих лигандов редко позволяет создать воспроизводимый результат. 3. The use of monoclonal antibodies as ligands guide rarely creates reproducible results. Это связано со специфичностью антител, существенно отличающейся от партии к партии (Fernandes D. Demonstrating comparability of antibody glycosylation during biomanufacturing. Eur Biopharm Rev 2005; 106-110). This is due to the specificity of antibodies significantly different from batch to batch (Fernandes D. Demonstrating comparability of antibody glycosylation during biomanufacturing Eur Biopharm Rev 2005;. 106-110).

4. Применение моноклональных антител в качестве направляющего лиганда существенно удорожает технологию производства описанных лекарственных форм. 4. The use of monoclonal antibodies as the guide ligand significantly increases the cost of production technology described dosage forms.

Пассивный перенос в настоящее время хорошо описан применительно к опухолям и происходит за счет преимущественного выхода лекарственных наночастиц в ткань опухоли вследствие локального повышения проницаемости опухолевых микрососудов (Matsumura Y., Maeda H. A new concept for macromolecular therapeutics in cancer chemotherapy: mechanism of tumoritropic accumulation of proteins and the antitumor agent smancs. Cancer Res 1986; 46: 6387-6392). Passive transfer is now well described in relation to tumors, and is due to preferential release drug nanoparticles in tumor tissue due to a local increase in the permeability of tumor microvessels (Matsumura Y., Maeda H. A new concept for macromolecular therapeutics in cancer chemotherapy: mechanism of tumoritropic accumulation of proteins and the antitumor agent smancs Cancer Res 1986; 46:. 6387-6392). Для дополнительного повышения проницаемости микрососудов в ткани-мишени могут применяться такие физические факторы, как ультразвук и гипертермия. To further increase the microvessels permeability in a target tissue can be used, such physical factors as ultrasound hyperthermia.

Известен способ получения наноразмерной системы доставки лекарственных средств с добавлением поверхностно активных веществ для создания медицинских и ветеринарных препаратов, используемых в качестве систем целевой доставки лекарственных средств и преодоления гематоэнцефалического барьера, отличающийся тем, что в качестве носителя используются наночастицы кремнезема (заявка на изобретение 2007136310). A method of producing the nano-sized drug delivery system with the addition of surfactants to create medical and veterinary preparations used as systems targeted drug delivery and blood-brain barrier, characterized in that the silica nanoparticles (application for invention 2,007,136,310) is used as a carrier. Однако эта система не позволяет достичь желаемого кардиопротективного эффекта, поскольку лекарственное вещество адсорбируется непосредственно на носителе, что может приводить к нежелательным побочным эффектам (Epstein S.Е., Kornowski R., Fuchs S., Dvorak HF Angiogenesis therapy: amidst the hype, the neglected potential for serious side effects. Circulation 2001; 104(1): 115-119) However, this system does not allow to achieve the desired cardioprotective effect as the drug is adsorbed directly on the carrier, which can lead to undesirable side effects (Epstein S.E., Kornowski R., Fuchs S., Dvorak HF Angiogenesis therapy: amidst the hype, the neglected potential for serious side effects Circulation 2001; 104 (1). 115-119)

Известен способ направленной доставки лекарственных препаратов в миокард, выбранный нами в качестве прототипа, основанный на использовании нагруженных аденозином липосом с диаметром 134 нм на модели ишемии-реперфузии миокарда у крысы (Takahama H., Minamino Т., Asanuma H. et al. Prolonged targeting of ischemic/reperfused myocardium by liposomal adenosine augments cardioprotection in rats. J Am Coll Cardiol 2009; 53(8): 709-717). Known is a method directed delivery of drugs to the myocardium, we chose as a prototype based on the use of adenosine-loaded liposomes having a diameter of 134 nm on a model of myocardial ischemia-reperfusion in the rat (Takahama H., Minamino T, Asanuma H. ​​et al. Prolonged targeting of ischemic / reperfused myocardium by liposomal adenosine augments cardioprotection in rats J Am Coll Cardiol 2009; 53 (8). 709-717). Суспензия нагруженных аденозином липосом в физиологическом растворе вводилась животным однократно внутривенно в дозах (в пересчете на аденозин) 50, 150 и 450 мкг/кг×мин в течение 10 минут, начиная с 25-й минуты ишемии. The suspension adenosine loaded liposomes in saline was administered once intravenously to animals at the doses (based on the adenosine) 50, 150 and 450 ug / kg × min for 10 minutes starting with 25-minute ischemia. Таким образом, инфузия продолжалась в течение последних 5 минут ишемии и первых 5 минут реперфузии миокарда. Thus, the infusion continued over the last 5 minutes of ischemia and first 5 minutes of reperfusion of the myocardium. Применение данного способа сопровождалось менее выраженными побочными гемодинамическими эффектами и более выраженным инфаркт-лимитирующим действием, чем использование эквивалентной дозы свободного аденозина. Application of the method was accompanied by a less pronounced adverse hemodynamic effects and more pronounced myocardial-limiting effect than the use of an equivalent dose of free adenosine.

Этот способ имеет ряд недостатков. This method has several disadvantages.

1. Быстрая элиминация наночастиц-носителей из кровотока элементами ретикуло-эндотелиальной системы, что связано с их диаметром, превышающим 100 нм (Wang AZ, Gu F., Zhang L. et al. Biofunctionalized targeted nanoparticles for therapeutic applications. Expert Opin Biol Ther. 2008; 8(8): 1063-1070). 1. Fast elimination of nanoparticles of carrier elements of the blood flow of the reticuloendothelial system, which is associated with their diameter exceeding 100 nm (Wang AZ, Gu F., Zhang L. et al. Biofunctionalized targeted nanoparticles for therapeutic applications. Expert Opin Biol Ther. 2008; 8 (8): 1063-1070).

2. Отсутствие возможности одновременной направленной доставки препаратов различного химического строения. 2. The absence of the possibility of simultaneous targeting of drugs of different chemical structure.

3. Высокая стоимость материала носителя. 3. The high cost of the carrier material.

4. Невысокий кардиопротективный эффект вследствие низкого высвобождения лекарственного препарата из материала носителя. 4. Low cardioprotective effect due to low drug release from the carrier material.

5. Невозможность управления процессом высвобождения лекарственного препарата из материала носителя за счет варьирования способа их связывания. 5. The inability to control the process of release of drug from the carrier material by varying the manner in which they bind.

Целью изобретения является повышение эффективности способа. The invention aims to improve the efficiency of the method.

Это достигается тем, что в качестве носителя берутся наночастицы аминированного кремнезема диаметром 10 нм, к которым прививаются молекулы-вставки (спейсеры). This is achieved in that the aminated silica nanoparticle diameter of 10 nm is taken as a carrier molecule to which are grafted paste (spacers). Лекарственный препарат иммобилизируется на спейсер. The drug is immobilized on the spacer. На каждую функциональную группу спейсера иммобилизируют молекулу лекарственного препарата. At each functional group of the spacer molecule is immobilized drug. Лекарственные препараты могут иметь разное химическое строение. Medications may have a different chemical structure. Скорость высвобождения препарата из поверхностного слоя носителя зависит от способа иммобилизации. The release rate of the drug from the surface layer of the carrier depends on the method of immobilization. Используются три варианта иммобилизации лекарственного препарата: ковалентное связывание, координационно-ионное взаимодействие, адсорбционная иммобилизация. There are three variants of the immobilization of the drug: the covalent binding, ionic interaction coordinatively, adsorptive immobilization. Комплекс «лекарственный препарат-носитель» вводят внутривенно непосредственно перед реперфузией. Complex "carrier drug" is administered intravenously immediately before the reperfusion.

Положительный эффект от внедрения предлагаемого способа заключается в повышении кардиопротективного эффекта и снижении побочных эффектов комплекса «лекарственный препарат-носитель» на интактные органы и ткани. The positive effect of the introduction of the method is to improve the cardioprotective effect and reducing side effects of the complex "drug carrier" on intact organs and tissues. Способ позволяет управлять скоростью высвобождения лекарственного препарата из материала носителя, а также сочетать применение препаратов с различным механизмом действия. The process allows to control the release rate of the drug from the carrier material, and use of combination of drugs with different mechanisms of action. В клинической практике способ может применяться у пациентов с нестабильной стенокардией, а также у пациентов с острым коронарным синдромом в дополнение к проведению чрескожного коронарного вмешательства. In clinical practice, the method can be used in patients with unstable angina, and in patients with acute coronary syndrome in addition to percutaneous coronary intervention.

Способ осуществляется следующим образом. The process is carried out as follows.

Для достижения результата проводится модификация поверхности кремнезема аминогруппами по методу хемосорбции 3-аминопропилтриэтоксисилана из газовой фазы в проточном реакторе. To achieve the surface modification is carried out result amine silica by chemisorption method of 3-aminopropyltriethoxysilane from the gas phase in a flow reactor. Конструкция реактора обеспечивает испарение реагента при температуре 220°С, хемосорбцию, удаление избытка реагента и побочных продуктов реакции. The reactor design provides evaporation of the reagent at a temperature of 220 ° C, chemisorption, removal of excess reagent and reaction byproducts. Во избежание уноса кремнезема потоком газа-носителя, реакционная зона верхней части реактора ограничена пористым фильтром. To avoid entrainment of silica carrier gas flow, the upper reaction zone of the reactor is limited by the porous filter.

Методика синтеза включает удаление физически связанной воды с поверхности кремнезема при температуре 220°С в течение 2 часов, хемосорбцию 3-аминопропилтриэтоксисилана при температуре 220°С в течение 3 часов, удаление избытка реагентов и побочных продуктов реакции при той же температуре в течение 2 часов. synthesis technique includes removal of physically bound water from the surface of silica at a temperature of 220 ° C for 2 hours chemisorption of 3-aminopropyltriethoxysilane at a temperature of 220 ° C for 3 hours and removing the excess reagents and byproducts of the reaction at the same temperature for 2 hours.

Гидролиз непрореагировавших с поверхностью кремнезема алкоксигрупп проводится обработкой образца парами воды в течение часа при температуре 200°С. Hydrolysis of the alkoxy groups unreacted with the silica surface of the sample is carried out by treatment with water vapor for one hour at a temperature of 200 ° C.

Синтез спейсера проводится следующим образом. Synthesis of the spacer is conducted as follows. Навеска 100 мг аминированного кремнезема обрабатывается раствором симметричного ангидрида 3-(восамино)октановой кислоты в хлористом метилене. A charge of 100 mg of aminated silica solution is treated symmetrical anhydride of 3- (vosamino) octanoic acid in methylene chloride.

Симметричный ангидрид получается карбодиимидным методом по следующей методике. Symmetrical anhydride obtained carbodiimide method by the following procedure. Смешивается в эквимолярном соотношении дициклогексилкарбодиимид и 3-(восамино)октановая кислота, оставляется раствор на 10 минут, затем отфильтровывается осадок дициклогексилмочевины. Is mixed in an equimolar ratio and 3- dicyclohexylcarbodiimide (vosamino) octanoic acid, the solution was left for 10 minutes, then the precipitate of dicyclohexylurea is filtered out. В растворе получается симметричный ангидрид 3-(восамино)октановой кислоты. The solution obtained symmetrical anhydride of 3- (vosamino) octanoic acid.

При синтезе используется 10-ти кратный избыток ангидрида 3-(восамино)октановой кислоты по отношению к доступным аминогруппам. In the synthesis using 10-fold excess of anhydride is 3- (vosamino) octanoic acid relative to the available amino groups. Далее проводится деблокирование привитой аминокислоты в течение 1 часа с помощью муравьиной кислоты. Further deprotection is carried grafted amino acid for 1 hour with formic acid. Депротонирование осуществляется, используя 10% раствор триэтиламина в хлористом метилене. The deprotonation is carried out using a 10% solution of triethylamine in methylene chloride. На заключительной стадии образец сушится под вакуумом при температуре 60°С. In the final stage the sample is dried under vacuum at 60 ° C.

Затем проводится иммобилизация лекарственного препарата с помощью одного из трех методов: ковалентное связывание, координационно-ионное взаимодействие или адсорбция. Then, a drug immobilization using one of three methods: covalent bonding, coordination-ionic interaction or adsorption. В качестве модельного объекта был использован брадикинин, который ковалентно иммобилизировали на поверхности аминированного кремнезема с привитым спейсером карбодиимидным методом. As a model system was used bradykinin, which is covalently immobilized on the surface of the aminated grafted silica spacer carbodiimide method.

0,5 мг брадикинина заливается 1 мл янтарного ангидрида, отфильтровывается, полученный раствор помещается в пробирку, содержащую 50 мг аминированного кремнезема и оставляется на 2 часа для протекания реакции. 0.5 mg bradykinin filled with 1 ml of succinic anhydride, filtered and the resulting solution is placed in a vial containing 50 mg of aminated silica and left for 2 hours for reaction.

Суспензия препарата в гидрохлориде натрия готовится в концентрации 2 мг/мл. The suspension of the drug in preparing sodium hydroxide in a concentration of 2 mg / ml. Берется 20 мг препарата, помещается в стеклянный стаканчик и заливается 10 мл физиологического раствора. Take 20 mg, placed in a glass cup and poured 10 ml of saline. Полученная смесь взбалтывается и помещается в ультразвуковой диспергатор на 2 минуты. The resulting mixture was shaken and placed in an ultrasonic disperser for 2 minutes. Полученный раствор препарата хранится в холодильнике при температуре 4°С. The resulting product solution is stored in a refrigerator at 4 ° C. Раствор применяется для внутривенных инъекций. The solution was used for intravenous injection.

Для подтверждения возможности получения технического результата заявленного способа были проведены эксперименты на модели ишемии-реперфузии миокарда с количественной оценкой биораспределения и биосовместимости наночастиц кремнезема. In order to confirm the possibility of obtaining the technical result of the claimed method, experiments were carried out on the model of ischemia-reperfusion of the myocardium with a quantitative assessment of biodistribution and biocompatibility of silica nanoparticles. Все эксперименты были проведены в соответствии с «Руководством по уходу и использованию лабораторных животных» (публикация Национального Института Здоровья, США №85-23). All experiments were performed in accordance with the "Guide for the Care and Use of Laboratory Animals" (publication of the National Institutes of Health, US №85-23).

Материал исследования. Subjects. Эксперименты выполнялись на крысах-самцах линии Wistar массой 220-300 г (питомник «Рапполово»), содержавшихся в условиях 12/12 часового светового режима и получавших стандартный корм и питьевую воду ad libitum. Experiments were carried out on Wistar male Wistar 220-300 g weight ( "Rappolovo" kennel) contained in a 12/12 hour light regime and fed standard feed and drinking water ad libitum.

Методика регионарной ишемии-реперфузии миокарда. Methods of regional myocardial ischemia-reperfusion. Для наркоза использовался хлоралгидрат в дозе 450 мг/кг внутрибрюшинно, с последующей поддерживающей внутривенной инфузией через катетер, помещенный в бедренную вену. For chloral hydrate anesthesia was used at a dose of 450 mg / kg i.p., followed by maintenance intravenous infusion via a catheter placed in the femoral vein. В ходе эксперимента проводилась искусственная вентиляция легких через трахеостому (частота дыхания - 50/мин, дыхательный объем - 3 мл/100 г массы тела) и измерение параметров системной гемодинамики (пульсовое артериальное давление (АД) и частота сердечных сокращений (ЧСС)) датчиком давления (Baxter, США) через катетер, введенный в аорту через общую сонную артерию, и регистрировали на компьютере с помощью программного обеспечения PhysExp Gold. The experiment was carried out artificial pulmonary ventilation through the tracheostoma (respiratory rate - 50 / min, tidal volume of - 3 ml / 100 g body weight) and the measurement parameters of systemic hemodynamics (pulse pressure (BP) and heart rate (HR)) of the pressure sensor (Baxter, USA) through a catheter inserted into the aorta via the common carotid artery and recorded on a computer using PhysExp Gold software. Доступ к сердцу производили путем торакотомии в четвертом межреберье слева. Access to the heart was performed through a thoracotomy in the fourth intercostal space to the left. Тупо вскрывали перикард, определяли локализацию общего ствола левой коронарной артерии (ЛКА), под который с помощью атравматической иглы (6-0) подводили тонкую полипропиленовую лигатуру. Bluntly dissected pericardium determined localization common trunk of the left coronary artery (LCA), under which using atraumatic needle (6-0) summed thin polypropylene ligature. Общий ствол ЛКА определяли, ориентируясь слева на ушко левого предсердия, а справа - на конус легочной артерии. The common trunk of the left main coronary determined, focusing on the left of the left atrial appendage and the right - on the cone of the pulmonary artery. Для создания обратимой ишемии миокарда формировали окклюдер. To create reversible myocardial ischemia shaped occluder.

Протокол экспериментов и измерения. Protocol of experiments and measurements. Животные были рандомизированы на три группы: Animals were randomized into three groups:

1. Первая группа животных (n=3) включала в себя крыс, подвергшихся изъятию органов (сердце и печень) без предварительного проведения хирургических манипуляций. 1. The first group of animals (n = 3) consisted of rats subjected to removal of organs (heart and liver) without surgical manipulations.

2. Животным из второй группы (n=5) также производилось вскрытие грудной клетки без подведения лигатуры. 2. Animals from the second group (n = 5) is also performed without opening the chest summing ligatures. На 25-й минуте торакотомии начинали внутривенную капельную инфузию суспензии наночастиц кремнезема в концентрации 2 мг/мл 0,9% раствора натрия хлорида, причем длительность инфузии составляла 10 минут. After 25 minutes thoracotomy started intravenous drip infusion of a suspension of silica nanoparticles in a concentration of 2 mg / ml 0.9% sodium chloride solution, the infusion duration was 10 minutes. Через 55 минут после окончания введения суспензии наночастиц производили забор органов - сердца и печени. After 55 minutes after the administration of the nanoparticle suspension produced fence bodies - heart and liver.

3. Третья группа животных (n=3) включала в себя крыс, которым осуществляли механическую окклюзию ЛКА с помощью подведенной полипропиленовой лигатуры. 3. A third group of animals (n = 3) consisted of rats which was performed mechanical occlusion of the left main coronary artery via Summing polypropylene ligature. Длительность ишемии составляла 30 минут. Duration of ischemia was 30 minutes. Затем лигатуру снимали для восстановления кровотока. ligature then removed to restore blood flow. Длительность периода реперфузии - 60 минут. Duration reperfusion period - 60 minutes. На 25-й минуте ишемии начинали внутривенное капельное введение раствора наночастиц той же концентрации, что и в группе 2, причем введение заканчивали на 5-й минуте реперфузии. After 25 minutes of ischemia began intravenous drip nanoparticle solution the same concentration as in group 2, wherein the introduction was terminated by 5 minutes of reperfusion. После окончания периода реперфузии затягивали лигатуру и внутривенно струйно вводили 5%-ный раствор синего Эванса в объеме 1 мл, далее производили забор органов - сердца и печени. After the period of ligature delayed reperfusion and was administered intravenously 5% Evans Blue solution in a volume of 1 ml, more bodies made fence - heart and liver.

Гемодинамические параметры регистрировали в исходном состоянии, после подведения лигатуры под ЛКА, через 30 минут после подведения лигатуры, а также через 30 и 60 минут после начала реперфузии. Haemodynamic parameters were recorded at baseline, after summing up the ligature under LCA, 30 minutes after the ligature summing and after 30 and 60 minutes after the start of reperfusion.

Оценка биораспределения. Evaluation of biodistribution. После изъятия органов совершали их однократное промывание дистиллированной водой. After removal of organs made of a single washing with distilled water. В третьей группе животных образцы миокарда для последующего анализа выбирали с учетом окрашивания синим Эванса (вырезали участки миокарда, не окрашенные красителем, т.е. относящиеся к анатомической зоне риска). The third group of animals myocardial samples for analysis were selected based Evans blue dye (cut portions of the myocardium are not colored dye, i.e. related to anatomic risk zone). В первой и второй экспериментальных группах для дальнейших манипуляций выделяли весь объем левого желудочка. In the first and second experimental groups were isolated for further manipulation the entire volume of the left ventricle. Во всех экспериментах в качестве образцов печени выбирались аналогичные ее доли. In all experiments as liver samples were chosen similar in its share. После забора органов проводилось высушивание полученных тканей в термостате при температуре 90°С в течение 24 часов с доведением образцов до постоянной массы. After collection bodies carried drying the fabrics in a thermostat at 90 ° C for 24 hours with adjusting the samples to constant weight.

Следующим этапом был анализ содержания кремния в образцах с помощью метода атомно-абсорбционной спектроскопии, суть которого заключается в просвечивании атомизированной пробы монохромным светом с последующим разложением прошедшего через пробу света световым диспергатором и фиксацией спектра поглощения. The next step was analysis of the silicon content in the samples by atomic absorption spectroscopy, the essence of which lies in the atomized sample candling monochrome light followed by decomposition of the light passing through the sample and light disperser fixation absorption spectrum. Высушенный образец ткани взвешивался, далее проводилась его мокрая минерализация по одной из двух схем: The dried tissue sample was weighed, then wet performed its mineralization in one of two schemes:

1) Разложение концентрированной азотной кислотой под давлением во фторопластовом стакане (СВЧ-система «Минотавр»); 1) The decomposition of concentrated nitric acid under pressure in a glass polyacetal (microwave system "Minotaur");

2) Разложение в открытой системе смесью концентрированной азотной кислоты и перекиси водорода (1:1) в стеклоуглеродном тигле. 2) The decomposition in an open system with a mixture of concentrated nitric acid and hydrogen peroxide (1: 1) as a glassy crucible.

Полученный минерализат анализировали на атомно-абсорбционном спектрометре с электротермической атомизацией и Зеймановской коррекцией неселективного поглощения МГА-915 (лампа с полым катодом на кремний λ=251,6 нм; в качестве химического модификатора применяется концентрированный раствор аммиака). The resulting mineralizates analyzed for atomic-absorption spectrometer with electrothermal atomization and Zeymanovskoy correction nonselective absorption MHA-915 (with a hollow cathode lamp on the silicon λ = 251,6 nm; in concentrated ammonia solution is used as a chemical modifier). Далее концентрацию кремния, найденную в минерализате, пересчитывали на сухую массу пробы и выражали в мкг/г. Next, the silicon concentration found in mineralizates, counted on the dry weight of the sample and expressed as pg / g.

Гемодинамические данные, а также уровни содержания кремния в тканях представляли в виде «среднее ± стандартное отклонение». Hemodynamic data and silicon levels in tissues are presented as "mean ± standard deviation".

Гемодинамические показатели. Hemodynamic parameters. Исходное значение среднего артериального давления составило 113±11 мм рт. The initial value of the mean blood pressure was 113 ± 11 mm Hg. ст. Art. (таблица 1) в группе №2 и 120±8 мм рт. (Table 1) in the group №2 and 120 ± 8 mmHg. ст. Art. в группе №3. group №3. Достоверных различий в величине среднего артериального давления между двумя группами экспериментов не наблюдалось. No significant differences in the magnitude of the average blood pressure were observed between the two experimental groups. В ходе экспериментов в обеих группах отмечалось постепенное снижение величины артериального давления. During the experiments in the two groups was a gradual reduction in blood pressure. Введение наночастиц кремнезема не вызывало значимых изменений уровня артериального давления. The introduction of silica nanoparticles did not cause significant changes in blood pressure. Исходная величина частоты сердечных сокращений составляла 359±39 уд./мин. The initial value of the heart rate was 359 ± 39 bpm. / Min. (таблица 2) в группе №2 и 315±16 уд./мин. (Table 2) in the group №2 and 315 ± 16 bpm. / Min. в группе №3. group №3. Величины частоты сердечных сокращений достоверно не различались между группами в соответствующих точках. Heart rate values ​​did not differ significantly between the groups at appropriate points. Внутривенная инфузия суспензии наночастиц кремнезема не сопровождалась достоверными изменениями величины частоты сердечных сокращений. Intravenous infusion of a suspension of silica nanoparticles was not accompanied by significant changes in heart rate value.

Таблица 1 Table 1
Значения среднего артериального давления в экспериментах с введением наночастиц кремнезема (среднее значение ± стандартное отклонение) Values ​​of mean arterial pressure in the experiments with the introduction of silica nanoparticles (mean ± standard deviation)
Введение наночастиц кремнезема (n=5) Introduction of silica nanoparticles (n = 5) Ишемия-реперфузия + введение наночастиц кремнезема (n=3) Ischemia-reperfusion + administration silica nanoparticles (n = 3)
Среднее артериальное давление, мм рт. Mean arterial pressure, mm Hg. ст. Art.
Исходно initially 113±11 113 ± 11 120±8 120 ± 8
После подведения лигатуры/лигирования ЛКА After summing up the ligature / ligation of LCA 91±20 91 ± 20 104±11 104 ± 11
Через 30 минут после подведения лигатуры After 30 minutes, after summing ligatures 86±3 86 ± 3 99±7 99 ± 7
Через 60 минут после подведения лигатуры After 60 minutes, after summing ligatures 88±15 88 ± 15 96±2 96 ± 2
Через 90 минут после подведения лигатуры After 90 minutes, after summing ligatures 78±21 78 ± 21 78±13 78 ± 13

Таблица 2 table 2
Значения частоты сердечных сокращений в экспериментах с введением наночастиц кремнезема (среднее значение ± стандартное отклонение) The values ​​of the heart rate in the experiments with the introduction of silica nanoparticles (mean ± standard deviation)
Введение наночастиц кремнезема (n=5) Introduction of silica nanoparticles (n = 5) Ишемия-реперфузия + введение наночастиц кремнезема (n=3) Ischemia-reperfusion + administration silica nanoparticles (n = 3)
Среднее значение частоты сердечных сокращений The average value of the heart rate
Исходно initially 359±39 359 ± 39 315±16 315 ± 16
После подведения лигатуры/лигирования ЛКА After summing up the ligature / ligation of LCA 313±30 313 ± 30 305±24 305 ± 24
Через 30 минут после подведения лигатуры After 30 minutes, after summing ligatures 284±60 284 ± 60 298±32 298 ± 32
Через 60 минут после подведения лигатуры After 60 minutes, after summing ligatures 278±53 278 ± 53 282±22 282 ± 22
Через 90 минут после подведения лигатуры After 90 minutes, after summing ligatures 303±59 303 ± 59 298±34 298 ± 34

Биораспределение. Biodistribution. На фиг. FIG. приведено содержание кремния в миокарде и печени животных различных экспериментальных групп по данным атомно-абсорбционной спектроскопии: 1 - фоновое содержание; shows the silicon content in the myocardium and liver of animals of different experimental groups according to the atomic-absorption spectroscopy: 1 - content background; 2 - введение наночастиц; 2 - Introduction of nanoparticles; 3 - введение наночастиц после ишемии-реперфузии. 3 - administration of nanoparticles after ischemia-reperfusion. Фоновое содержание кремния в печени составляло 3,8±2,25 мкг/г. Background silicon content in the liver was 3.8 ± 2.25 g / g. В экспериментах с внутривенной инфузией наночастиц кремнезема отмечалось резкое увеличение содержания кремния в печени, по уровню значительно превосходящее его содержание в сердце, что свидетельствует об активном захвате наночастиц элементами ретикуло-эндотелиальной системы печени, в частности, клетками Купфера. In the experiments with intravenous infusion silica nanoparticles was a sharp increase in the silicon content in the liver, the level significantly exceeding its content in the heart, indicating that the capture of the active nanoparticles elements of the reticuloendothelial system of the liver, in particular by Kupffer cells. Так, например, уровень кремния в печени в группе ложнооперированных животных составлял 229±80 мкг/г, а в группе с ишемией-реперфузией миокарда - 306±56 мкг/г. For example, the silicon level in the liver in the group of sham operated animals was 229 ± 80 mg / g, while in the group with ischaemia-reperfusion myocardial - 306 ± 56 mg / g. При этом разница между указанными группами была недостоверной. The difference between these groups was unreliable. С другой стороны, введение наночастиц кремнезема не сопровождалось достоверным увеличением содержания кремния в сердце по сравнению с фоновым значением у интактных животных (фиг.). On the other hand, the introduction of silica nanoparticles was not accompanied by a significant increase of the silicon content in the heart compared to the background value of intact animals (Fig.). Напротив, при этом отмечалась тенденция к уменьшению содержания кремния в ткани сердца. On the contrary, while there was a trend to a reduction in the silicon content in heart tissue. Введение наночастиц кремнезема на фоне ишемии-реперфузии миокарда приводило к значительному возрастанию содержания кремния в 2-х из 3-х экспериментов группы №3. Introduction silica nanoparticles background ischemia-reperfusion led to a considerable increase in the silicon content in 2 of 3 experiments, groups №3.

Выводы: Conclusions:

1. При внутривенном введении наночастиц кремнезема со средним диаметром 10 нм животным с ишемией-реперфузией миокарда наблюдается их преимущественное накопление в зоне повреждения, что обосновывает перспективы использования данного носителя для пассивной направленной доставки лекарственных средств в ишемизированный миокард. 1. When intravenously silica nanoparticles with a mean diameter of 10 nm to animals with ischemia-reperfusion myocardial observed their preferential accumulation in damaged zone, which justifies the use of the carrier prospects for passive targeting of drugs in ischemic myocardium.

2. Эффективность предложенного способа кардиопротекции существенно превосходит существующие, поскольку внутривенное введение системы направленной доставки животным с ишемией-реперфузией миокарда сопровождается увеличением содержания материала носителя в зоне ишемии-реперфузии более чем в 10 раз (фиг.), тогда как при использовании прототипа в зоне повреждения наблюдалось только 5-и кратное превышение содержания комплекса «препарат-носитель» над контролем. 2. The efficiency of the proposed method of cardioprotection significantly superior to existing because intravenous delivery system directed animals with ischemia-reperfusion myocardial accompanied by an increase of content of the carrier material in the area of ​​ischemia-reperfusion more than 10 times (Fig.), While using a prototype of damage area there was only a 5-fold excess of the content of the complex "drug-carrier" of control.

3. Предложенный носитель для направленной доставки лекарственных средств в ишемизированный миокард, а именно, наночастицы кремнезема диаметром 10 нм, обладает хорошей биосовместимостью и биодеградируемостью. 3. Proposed carrier for targeted delivery of drugs in ischemic myocardium, namely silica nanoparticles 10 nm in diameter, has good biocompatibility and biodegradability.

4. Использование различных способов химического связывания лекарственного средства с поверхностью наночастиц кремнезема дает возможность управлять процессом высвобождения лекарственного средства из поверхностного слоя носителя. 4. The use of different methods of chemical bonding of the drug to the surface of silica nanoparticles makes it possible to manage the process of drug release from the surface of the carrier layer.

5. Функционализация поверхности наночастиц кремнезема обеспечивает возможность присоединения лекарственных средств разного химического строения в различных соотношениях. 5. Functionalization of silica nanoparticles surface allows the attachment of drugs with different chemical structures in various proportions.

Claims (1)

  1. Способ кардиопротекции путем направленной доставки в подвергшийся ишемии-реперфузии миокард лекарственного препарата, отличающийся тем, что в качестве носителя лекарственного вещества используют аминированные кремнеземные наночастицы диаметром 10 нм, к которым прививают спейсер, на каждую функциональную группу которого иммобилизируют лекарственный препарат одним из методов: ковалентное связывание, координационно-ионное взаимодействие, адсорбционная иммобилизация. A method of cardioprotection by directed delivery affected by ischemia-reperfusion myocardial medicament, characterized in that as a carrier of the drug substance used aminated silica nanoparticles 10 nm in diameter, to which is grafted a spacer, each functional group of which is immobilized a drug one of the methods: the covalent binding of , coordinatively ionic interaction, the adsorptive immobilization.
RU2010116541A 2010-04-26 2010-04-26 Cardioprotection technique RU2456024C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010116541A RU2456024C2 (en) 2010-04-26 2010-04-26 Cardioprotection technique

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010116541A RU2456024C2 (en) 2010-04-26 2010-04-26 Cardioprotection technique

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2010116541A true RU2010116541A (en) 2011-11-10
RU2456024C2 true RU2456024C2 (en) 2012-07-20

Family

ID=44996620

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010116541A RU2456024C2 (en) 2010-04-26 2010-04-26 Cardioprotection technique

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2456024C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2623727C1 (en) * 2016-05-26 2017-06-30 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт кардиологии" Method for simulation of increased stability of rat myocardium to ischemic-reperfusion damage

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2146933C1 (en) * 1999-07-01 2000-03-27 Санкт-Петербургская общественная организация "Институт биорегуляции и геронтологии" Method of prophylaxis and treatment of patient with myocardium ischemia in coronary-invasive operations
US20040229038A1 (en) * 2003-03-03 2004-11-18 Elan Pharma International Ltd. Nanoparticulate meloxicam formulations
RU2268718C1 (en) * 2004-11-09 2006-01-27 Казанский государственный медицинский университет Method for preventing the development of complications at experimental myocardial infarction in rats
RU2007136310A (en) * 2007-10-03 2009-04-10 Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство обороны Российской Федерации Федеральное государственное учреждение "27 A method for producing nano-sized drug delivery system based on silica
US7725178B2 (en) * 2004-06-30 2010-05-25 Cedars-Sinai Medical Center Method and system for the prediction of cardiac arrhythmias, myocardial ischemia, and other diseased condition of the heart associated with elevated sympathetic neural discharges

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2146933C1 (en) * 1999-07-01 2000-03-27 Санкт-Петербургская общественная организация "Институт биорегуляции и геронтологии" Method of prophylaxis and treatment of patient with myocardium ischemia in coronary-invasive operations
US20040229038A1 (en) * 2003-03-03 2004-11-18 Elan Pharma International Ltd. Nanoparticulate meloxicam formulations
US7725178B2 (en) * 2004-06-30 2010-05-25 Cedars-Sinai Medical Center Method and system for the prediction of cardiac arrhythmias, myocardial ischemia, and other diseased condition of the heart associated with elevated sympathetic neural discharges
RU2268718C1 (en) * 2004-11-09 2006-01-27 Казанский государственный медицинский университет Method for preventing the development of complications at experimental myocardial infarction in rats
RU2007136310A (en) * 2007-10-03 2009-04-10 Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство обороны Российской Федерации Федеральное государственное учреждение "27 A method for producing nano-sized drug delivery system based on silica

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ГАЛАГУДЗА М.М. и др. Направленная доставка лекарственных препаратов; итоги последних лет и перспективы. - Нанотехнологии. Экология. Производство, 2009, №2, с.87-92. АМИРШАХИ НИМА. Порфирин-фуллереновые наночастицы ([25-Mg2+])4PMC16 в коррекции митохондриальных дисфункций, индуцированных в клетках миокарда крыс 1-метилникотинамидом: Автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. фармац. наук, 2008, с.1-15. LANZA GM et al. Nanomedicine opportunities for cardiovascular disease with perfluorocarbon nanoparticles. Nanomedicine (Lond). 2006 Oct; 1(3): 321-9. *
ТАКАНАМА Н. et al., Prolonged targeting of ischemic/reperfused myocardium by liposomal adenosine augments cardioprotection in rats. J Am Coll Cardiol. 2009 Feb 24; 53(8): 709-17 и перспективы. - Нанотехнологии. Экология. Производство, 2009, №2, с.87-92. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2623727C1 (en) * 2016-05-26 2017-06-30 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт кардиологии" Method for simulation of increased stability of rat myocardium to ischemic-reperfusion damage

Also Published As

Publication number Publication date Type
RU2010116541A (en) 2011-11-10 application

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Xie et al. Transport of nerve growth factor encapsulated into liposomes across the blood–brain barrier: in vitro and in vivo studies
US5225212A (en) Microreservoir liposome composition and method
Park et al. PEGylated PLGA nanoparticles for the improved delivery of doxorubicin
Prades et al. Delivery of gold nanoparticles to the brain by conjugation with a peptide that recognizes the transferrin receptor
US5258499A (en) Liposome targeting using receptor specific ligands
US6592894B1 (en) Hydrogel-isolated cochleate formulations, process of preparation and their use for the delivery of biologically relevant molecules
Maruyama PEG-immunoliposome
US6576257B1 (en) Targeted drug activation
US20020041898A1 (en) Novel targeted delivery systems for bioactive agents
WO2007028341A1 (en) Nano anticancer micelles of vinca alkaloids entrapped in polyethylene glycolylated phospholipids
Shi et al. Organic nanoscale drug carriers coupled with ligands for targeted drug delivery in cancer
Sun et al. Rational design of cancer nanomedicine: nanoproperty integration and synchronization
WO1991005546A1 (en) Solid tumor treatment method and composition
Yang et al. Enhanced brain distribution and pharmacodynamics of rivastigmine by liposomes following intranasal administration
US20100196455A1 (en) Compositions of Multicationic Drugs for Reducing Interactions with Polyanionic Biomolecules and Methods of Use Thereof
WO1994007466A1 (en) Compositions for treatmewnt of inflamed tissues
Youngs et al. Nanoparticle encapsulated silver carbene complexes and their antimicrobial and anticancer properties: a perspective
Zhu et al. Applications of nanoparticles for anticancer drug delivery: a review
WO1991017751A1 (en) Orally administrable gallium compositions and methods of treatment therewith
Galagudza et al. Targeted drug delivery into reversibly injured myocardium with silica nanoparticles: surface functionalization, natural biodistribution, and acute toxicity
Li et al. Cancer cell membrane camouflaged cascade bioreactor for cancer targeted starvation and photodynamic therapy
Sanchez-Cano et al. Novel and emerging approaches for the delivery of metallo-drugs
US20050281890A1 (en) Methods and compositions for wound healing
Mozafari Bioactive entrapment and targeting using nanocarrier technologies: an introduction
WO1995027480A1 (en) Heme-bearing microparticles for targeted delivery of drugs

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20150427