RU2454660C1 - Способ количественного определения антиоксиданта коэнзима q10 в субстанции методом циклической вольтамперометрии - Google Patents
Способ количественного определения антиоксиданта коэнзима q10 в субстанции методом циклической вольтамперометрии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2454660C1 RU2454660C1 RU2010141679/15A RU2010141679A RU2454660C1 RU 2454660 C1 RU2454660 C1 RU 2454660C1 RU 2010141679/15 A RU2010141679/15 A RU 2010141679/15A RU 2010141679 A RU2010141679 A RU 2010141679A RU 2454660 C1 RU2454660 C1 RU 2454660C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- coenzyme
- mol
- substance
- determination
- potential
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармацевтической химии и может быть использовано для количественного определения антиоксиданта коэнзима Q10 в субстанции. Для этого вещество переводят из пробы в раствор и проводят вольтамперометрическое определение коэнзима Q10 с использованием стеклоуглеродного индикаторного электрода относительно насыщенного хлорид-серебряного электрода на фоне 0.025 моль/л фосфатного буфера pH 6.86. Регистрируют анодные пики при постоянно-токовой форме развертки потенциала со скоростью 0.04 В/с. Концентрацию коэнзима Q10 определяют по высоте анодного пика при потенциале +0.23 В методом градуировочного графика. Область определяемых содержаний коэнзима Q10 от 1·10-7 моль/л до 1·10-5 моль/л. Изобретение обеспечивает чувствительность и экспрессность количественного определения коэнзима Q10 в порошках, лекарственных формах, биологически активных добавках. 1 ил., 1 пр.
Description
Изобретение относится к области фармацевтической химии и касается способов количественного определения биологически активных веществ, в частности коэнзима Q10 - вещества с выраженными антиоксидантными свойствами.
Существует ряд способов определения коэнзима Q10 как в лекарственных формах, так и в биологических объектах. Но большинство из них содержат сочетания различных методов. Примером определения коэнзима Q10 с электрохимическим детектированием является работа (Y.Yamamoto, S.Yamashita. Plasma ratio of ubiquinol and ubiquinone as a marker of oxidative stress. 1997, V.18, №81, P.79-84).
Исследовано соотношение между убихинолом и убихиноном в качестве маркера интенсивности окислительного стресса в организме человека и предложена методика одновременного определения убихинола-10 и убихинона-10 в плазме крови человека. Плазму, содержащую гепарин, смешивали с 5 объемами метанола и 10 объемами гексана, энергично встряхивали и центрифугировали. Центрифугат (гексановую фазу) немедленно инжектировали в режиме online в систему обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с колонкой для восстановления и электрохимическим детектором для предотвращения окисления убихинола до убихинона.
Данный способ очень трудоемок, обладает плохой воспроизводимостью, имеет большую ошибку определения.
Для идентификации коэнзима Q10 в лекарственных формах используются методы жидкостной хроматографии и спектроскопии [И.С.Иванов. Связь структуры и токсичности в ряду производных изоборнилфенола // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической фармакологии: Матер. конф. / Под ред. В.В.Жданова. - Томск: Изд-во Том. ун-та, 2007, 106 с.). Эти методы имеют ряд недостатков: оборудование и растворители для высокоэффективной жидкостной хроматографии имеют высокую стоимость, а спектрофотометрия в некоторых случаях не обладает необходимой селективностью и чувствительностью.
Наиболее близким к предлагаемому решению прототипом является высокочувствительная методика определения коэнзима Q10 в этанол-гексановых экстрактах сыворотки крови человека, основанная на ВЭЖХ с 8 кулонометрическими детекторами, настроенными на различные фиксированные значения потенциалов (P.H.Gamache, I.N.Acworth. Simultaneous analysis of fat soluble carotenoids, retinoids, tocopherols, vitamin K and coenzyme Q10 in plasma // Northeast Regional Chromatography Discussion Group. 1998, Book of Abstr. - P.6). Нижняя граница определяемых содержаний <20 пг, а диапазон линейной зависимости составляет 3 порядка.
Недостатком способа является высокая себестоимость и уникальность оборудования, что затрудняет его использование в рутинных анализах, мешающее влияние ряда компонентов сыворотки крови.
Перспективно использование вольтамперометрии для количественного определения биологически активных веществ - простого, чувствительного и экспрессного метода.
Новая техническая задача - увеличение чувствительности и экспрессности, а также уменьшение себестоимости способа определения коэнзима Q10 в субстанции биологически активных добавок методом циклической вольтамперометрии.
Съемка вольтамперных кривых проводится при скорости развертки потенциала W 0.04 В/с в диапазоне потенциалов (Е) от -0.5 до +0.5 В. Фоновым электролитом служит 0.025 М фосфатный буфер pH 6.86. Для устранения мешающего влияния кислород из раствора удаляется продувкой фонового раствора азотом, подаваемым в ячейку под давлением.
Регистрация вольтамперных кривых проводится в постоянно-токовом режиме развертки потенциала. В качестве индикаторного электрода используется стеклоуглеродный электрод (СУЭ), электродом сравнения и вспомогательным служили хлорид-серебряные электроды. В качестве оборудования для проведения анализа использовали вольтамперометрический анализатор «ТА-2» (производство «ООО Томьаналит», г.Томск).
В результате проведенных исследований были получены пики окисления-восстановления коэнзима Q10 при потенциалах Еа +0.23 В,
Ек-0.06 В (фиг.).
Фиг. Циклическая вольтамперограмма коэнзима Q10 в фосфатном буфере pH 6.86 на СУЭ при скорости развертки 40 мВ/с: 0.1×10-5 моль/л (2), 0.2×10-5 моль/л (3), 0.3×10-5 моль/л (4), (1) - фоновая линия
Аналитическим сигналом служит анодный ток окисления коэнзима Q10.
Градуировочная зависимость тока окисления коэнзима Q10 от его концентрации в фоновом растворе носит линейный характер в диапазоне концентраций 10-5-10-6 моль/л. Данный диапазон концентраций достаточен для определения коэнзима Q10 в биологически активных добавках.
Новым в способе является использование в качестве аналитического сигнала тока окисления коэнзима Q10 на стеклоуглеродном электроде при потенциале Е +0.23 В относительно хлорид-серебряного электрода сравнения в фосфатном буферном растворе с pH 6.86.
Пример 1. Определение коэнзима Q10 в субстанции методом циклической вольтамперометрии.
В кварцевый стаканчик вместимостью 20 мл вносят 10,0 мл раствора фонового электролита 0.025 моль/л фосфатного буфера pH 6.86 в водном растворе и помещают в электрохимическую ячейку вольтамперометрического анализатора. Опускают в раствор электроды: индикаторный - стеклоуглеродный, вспомогательный и электрод сравнения - насыщенные хлорид-серебряные. Перемешивают 10 с, успокаивают 20 с, затем фиксируют циклическую вольтамперограмму фонового раствора в диапазоне потенциалов от -0.5 до +0.5 В при скорости развертки потенциала 0.04 В/с. Отсутствие пиков свидетельствует о чистоте фона. Затем в стаканчик с фоновым раствором вносят аликвоту 1% раствора коэнзима Q10 в воде объемом 0.5 мл. Перемешивают раствор 10 с, успокаивают 20 с и вновь снимают вольтамперограмму в тех же условиях. Анодный пик регистрируют при потенциале +0.23 В. Концентрацию коэнзима Q10 по высоте анодного пика определяют методом градуировочного графика, построенного по стандартным растворам коэнзима Q10 с точно известными концентрациями.
Предложенный способ количественного определения коэнзима Q10 отличается простотой, не требует больших трудозатрат, значительного количества реактивов и отличается высокой селективностью, экспрессностью и чувствительностью.
Предложенный способ может быть использован для количественного определения коэнзима Q10 в порошке, его лекарственных формах, биологически активных добавках.
Метрологические характеристики данного способа: предел обнаружения составляет 1·10-7 моль/л. Относительная ошибка определения: 5%, область определяемых содержаний коэнзима Q10 от 1·10-7 моль/л до 1·10-5 моль/л.
Claims (1)
- Способ количественного определения антиоксиданта коэнзима Q10 в субстанции, включающий перевод вещества из пробы в раствор и вольтамперометрическое определение коэнзима Q10, отличающийся тем, что проводят вольтамперометрическое определение с использованием индикаторного стеклоуглеродного электрода относительно насыщенного хлорид-серебряного электрода на фоне 0,025 моль/л фосфатного буфера pH 6,86 с последующей регистрацией анодных пиков при постоянно-токовой форме развертки потенциала со скоростью 0,04 В/с, концентрацию коэнзима Q10 в субстанции определяют по высоте анодного пика при потенциале +0,23 В относительно насыщенного хлорид-серебряного электрода, область определяемых содержаний коэнзима Q10 от 1·10-7 моль/л до 1·10-5 моль/л.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010141679/15A RU2454660C1 (ru) | 2010-10-12 | 2010-10-12 | Способ количественного определения антиоксиданта коэнзима q10 в субстанции методом циклической вольтамперометрии |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010141679/15A RU2454660C1 (ru) | 2010-10-12 | 2010-10-12 | Способ количественного определения антиоксиданта коэнзима q10 в субстанции методом циклической вольтамперометрии |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2010141679A RU2010141679A (ru) | 2012-04-20 |
RU2454660C1 true RU2454660C1 (ru) | 2012-06-27 |
Family
ID=46032248
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2010141679/15A RU2454660C1 (ru) | 2010-10-12 | 2010-10-12 | Способ количественного определения антиоксиданта коэнзима q10 в субстанции методом циклической вольтамперометрии |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2454660C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2613897C1 (ru) * | 2015-12-21 | 2017-03-21 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Вольтамперометрический способ определения коэнзима q10 в кремах косметических |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2224997C1 (ru) * | 2002-06-06 | 2004-02-27 | Томский политехнический университет | Вольтамперометрический способ определения суммарной активности антиоксидантов |
WO2007040913A1 (en) * | 2005-09-30 | 2007-04-12 | Bayer Healthcare Llc | Gated voltammetry |
JP4426832B2 (ja) * | 2002-12-03 | 2010-03-03 | 株式会社分子生理化学研究所 | コエンザイムq−10及びその2電子還元体の分析方法 |
-
2010
- 2010-10-12 RU RU2010141679/15A patent/RU2454660C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2224997C1 (ru) * | 2002-06-06 | 2004-02-27 | Томский политехнический университет | Вольтамперометрический способ определения суммарной активности антиоксидантов |
JP4426832B2 (ja) * | 2002-12-03 | 2010-03-03 | 株式会社分子生理化学研究所 | コエンザイムq−10及びその2電子還元体の分析方法 |
WO2007040913A1 (en) * | 2005-09-30 | 2007-04-12 | Bayer Healthcare Llc | Gated voltammetry |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
CHEVION S. et al / The use of cyclic voltammetry for the evaluation of antioxidant capacity. // Free radical biology and medicine. 2000, v.28, №6, p.860-870. * |
GAMACHE P.H. et al. Simultaneous analysis of fat soluble carotenoids, retinoids, tocopherols, vitamin K and coenzyme Q10 in plasma // Northeast Regional Chromatography Discussion Group. 1998, Book of Abstr. p.6. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2613897C1 (ru) * | 2015-12-21 | 2017-03-21 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Вольтамперометрический способ определения коэнзима q10 в кремах косметических |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2010141679A (ru) | 2012-04-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Kappes et al. | Field-portable capillary electrophoresis instrument with potentiometric and amperometric detection | |
Kappes et al. | Portable capillary electrophoresis instrument with amperometric, potentiometric and conductometric detection | |
da Silva et al. | Batch injection analysis with amperometric detection: application for simultaneous analysis using a single working electrode | |
CN101320015A (zh) | 一种快速检测维生素e含量的方法 | |
Lourencao et al. | Simultaneous determination of antihypertensive drugs by flow injection analysis using multiple pulse amperometric detection with a cathodically pretreated boron-doped diamond electrode | |
Hu et al. | Separation and determination of three water-soluble vitamins in pharmaceutical preparations and food by micellar electrokinetic chromatography with amperometric electrochemical detection | |
CN102507686A (zh) | 电聚合磺基水杨酸修饰玻碳电极的制备方法及在测定色氨酸中的应用 | |
Araújo et al. | Potentiometric detection of citrate in beverages using a graphite carbon electrode | |
CN102520033B (zh) | 一种检测乳液或油脂氧化稳定性的方法 | |
Kasim et al. | Determination of verapamil by adsorptive stripping voltammetry in urine and pharmaceutical formulations | |
CN105223260B (zh) | 痕量快速检测对羟基苯甲酸丁酯的电化学传感器及其制备方法 | |
Ly et al. | Electrochemical detection of ascorbic acid (vitamin C) using a glassy carbon electrode | |
RU2454660C1 (ru) | Способ количественного определения антиоксиданта коэнзима q10 в субстанции методом циклической вольтамперометрии | |
Alarfaj | Square-wave adsorptive stripping voltammetric determination of antihypertensive agent telmisartan in tablets and its application to human plasma | |
CN110823970A (zh) | 一种快速测定酸性溶液中l-胱氨酸含量的电化学检测方法 | |
Wang et al. | Amperometric detection of three purine alkaloids following their separation by micellar electrokinetic capillary chromatography | |
Fan et al. | Enhanced oxidation and detection of toxic clenbuterol on the surface of acetylene black nanoparticle-modified electrode | |
Petrova et al. | Investigation of coenzyme Q10 by voltammetry | |
Coatanea et al. | Electroanalysis at ultramicroelectrodes of oils and fats: Application to the determination of Vitamin E | |
Norouzi et al. | Ultrasensitive flow-injection electrochemical method using fast fourier transform square-wave voltammetry for detection of vitamin B1 | |
CN103969319B (zh) | 一种水生生物金属硫蛋白的检测方法 | |
Pervaiz et al. | Development and validation of reverse phase high performance chromatography method for determination of olanzapine in microsample rat plasma: Application to preclinical pharmacokinetic study | |
Žabčíková et al. | Square wave voltammetry at carbon paste electrode modified with surfactant for alpha tocopheryl acetate determination in cosmetics | |
Farhadi et al. | Electrochemical determination of meloxicam in pharmaceutical preparation and biological fluids using oxidized glassy carbon electrodes | |
Chang et al. | Simultaneous voltammetric determination of ascorbic acid and its derivatives in cosmetics using epoxy-carbon composite electrodes |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20121013 |