RU2414929C1 - Вакцина против пастереллеза животных - Google Patents
Вакцина против пастереллеза животных Download PDFInfo
- Publication number
- RU2414929C1 RU2414929C1 RU2009146106/15A RU2009146106A RU2414929C1 RU 2414929 C1 RU2414929 C1 RU 2414929C1 RU 2009146106/15 A RU2009146106/15 A RU 2009146106/15A RU 2009146106 A RU2009146106 A RU 2009146106A RU 2414929 C1 RU2414929 C1 RU 2414929C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- adjuvant
- multocida
- pasteurella
- vaccine
- serological
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии. Вакцина включает инактивированную баксуспензию Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D и адъювант. Вакцина дополнительно содержит инактивированную баксуспензию Pasteurella haemolytica с активностью растворимых поверхностных антигенов в реакции пассивной гемагглютинации 1:32-64, а в качестве адъюванта - адъювант ISA-70VG при следующем соотношении компонентов, мас.%: инактивированная баксуспензия Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D и инактивированная баксуспензия Pasteurella haemolytica, взятые в массовых соотношениях 1:(0,8-1,2):(0,8-1,2):(0,8-1,2)-45-55, адъювант ISA-70VG - остальное. Вакцина имеет высокую иммунологическую активность и длительный срок хранения.
Description
Изобретение относится к ветеринарной микробиологии и биотехнологии и может быть использовано при разработке средств специфической профилактики и, в частности, для получения вакцины против пастереллеза животных.
Известна вакцина против пастереллеза животных, включающая инактивированную баксуспензию Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D и адъювант (Патент РФ №2162339, «Способ изготовления эмульсионной противопастереллезной вакцины», Бюл. №3, 2001, МКИ А61К 39/102).
Недостатками известной вакцины является низкое качество целевого продукта, выявляемое низкой антигенной активностью при высоком содержании балластных веществ, реактогенностью, обуславливающей сенсибилизацию организма животных.
Известна также вакцина против пастереллеза животных, включающая инактивированную баксуспензию Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D и адъювант, причем в качестве P.multocida серологических вариантов А, В, D используют Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D с активностью растворимых поверхностных антигенов в реакции пассивной гемагглютинации как 1:256-4096, 1:512-8192, 1: 256-4096 соответственно, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D, | |
взятых в массовых соотношениях 1:(0,8-1,2):(0,8-1,2) | 45-55 |
Адъювант | Остальное |
Также вакцина против пастереллеза животных в качестве адъюванта содержит эмульгатор 139 и минеральное масло Маркол 52, взятые в массовом соотношении 1:10-12 (патент РФ №2311199, БИ №27, 2007.
Недостатками известной вакцины является низкое качество целевого продукта, выявляемое низкой антигенной активностью при высоком содержании балластных веществ, реактогенностью, обуславливающей сенсибилизацию организма животных.
Задачей заявленного технического решения является повышение качества целевого продукта.
Поставленная задача решается в вакцине против пастереллеза животных, включающей инактивированную баксуспензию Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D и адъювант, тем, что дополнительно содержит инактивированную баксуспензию Pasteurella haemolytica с активностью растворимых поверхностных антигенов в реакции пассивной гемагглютинации 1:32-64, а в качестве адъюванта - адъювант ISA-70VG, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D и | |
Pasteurella haemolytica, взятых в массовых соотношениях | |
1:(0,8-1,2):(0,8-1,2):(0,8-1,2) | 45-55 |
Адъювант ISA-70VG | Остальное |
В патентной и научно-технической литературе не известны технические решения, содержащие признаки, аналогичные заявляемым, т.е. предложение соответствует критерию «новизна».
Предложение осуществимо в лабораторных и промышленных условиях, направлено на решение реальной технической задачи, т.е. предложение «промышленно применимо».
Впервые предложена вакцина против пастереллеза животных, включающая инактивированную баксуспензию Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D, а также Pasteurella haemolytica при определенном соотношении компонентов, что позволяет получить неочевидный положительный эффект - повышение качества целевого продукта, т.е. предложение соответствует критериям «новизна» и «изобретательский уровень».
Способ иллюстрируется на следующих примерах.
Пример 1.
Для получения вакцины против пастереллеза животных отобраны три производственных штамма Pasteurella multocida /P.multocida/ серологических вариантов А, В, D №1231, 681, Т-80 и Pasteurella haemolitica, которые засевают в промышленный биореактор с производственной средой из расчета 10±2% к объему питательной среды и тщательно перемешивают в биореакторе объемом 300 литров с регулировкой температуры, рН, оборотов мешалки и аэрации. Для выращивания пастерелл используют питательные среды на основе перевара Хоттингера с рН 7,9-8,0 и содержанием аминного азота не менее 178-180 мг %. Культивирование проводят при температуре 37°С±1°С в течение 8 часов. Каждый штамм выращивают отдельно.
Оптическую концентрацию бактериальных клеток определяют фотометрическим методом КФК-2 по калибровочной кривой. На всех этапах технологического производства вакцины через каждые 1,5-2 часа определяют активность поверхностных растворимых антигенов в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) с антителами, полученными на поверхностные растворимые антигены пастерелл. Объектом исследования служит супернатант-культуральная жидкость, освобожденная от клеток двукратным центрифугированием при 14000 об/мин и фильтрованием через стерилизующие пластины. Культивирование проводят до максимального накопления поверхностных растворимых антигенов в среде роста, определяемый по уровню титров в РПГА, в частности, данный показатель уровня активности для Р.multocida серовариантов А, В, D и Pasteurella haemolitica через 8 часов культивирования был равен 1:256; 1:512; 1:256; 1:32 соответственно.
Полученную баксуспензию инактивируют формалином до конечной 0,3%-ной концентрации к общему объему в течение 24 часов при 37°С, периодически перемешивая каждые 4 часа.
По окончании инактивации берут по 1 кг бактериальной суспензии каждого штамма (всего 4 кг баксуспензии) и добавляют 4 кг адъюванта ISA-70VG, получая состав 1 при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Р. multocida серологических вариантов А, В, D и Pasteurella haemolytica, взятых в массовых соотношениях 1:1:1:1 | 50 |
Адъювант ISA-70VG | Остальное |
Пример 2.
Для получения вакцины против пастереллеза животных отобраны три производственных штамма P.multocida серологических вариантов А, В, D №1231, 681, Т-80 и Pasteurella haemolytica, которые засевают в промышленный биореактор с производственной средой из расчета 10±2% к объему питательной среды и тщательно перемешивают в биореакторе объемом 300 литров с регулировкой температуры, рН, оборотов мешалки и аэрации. Для выращивания пастерелл используют питательные среды на основе перевара Хоттингера с рН 7,9-8,0 и содержанием аминного азота не менее 178-180 мг%. Культивирование проводят при температуре 37°С±1°С в течение 10 часов. Каждый штамм выращивают отдельно.
Оптическую концентрацию бактериальных клеток определяют фотометрическим методом КФК-2 по калибровочной кривой. На всех этапах технологического производства вакцины через каждые 1,5-2 часа определяют активность поверхностных растворимых антигенов в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) с антителами, полученными на поверхностные растворимые антигены пастерелл. Объектом исследования служит супернатант - культуральная жидкость, освобожденная от клеток двукратным центрифугированием при 14000 об/мин и фильтрованием через стерилизующие пластины. Культивирование проводят до максимального накопления поверхностных растворимых антигенов в среде роста, определяемого по уровню титров в РПГА, в частности, данный показатель уровня активности для Р.multocida серовариантов А, В, D и Pasteurella haemolytica через 10 часов культивирования был равен 1:4096; 1:8192; 1:4096; 1:64 соответственно.
Полученную баксуспензию инактивируют формалином до конечной 0,35%-ной концентрации к общему объему в течение 18 часов при 38°С, периодически перемешивая каждые 4 часа.
По окончании инактивации берут 1 кг бактериальной суспензии, полученной смешиванием 1 кг P.multocida сероварианта А, 0,8 кг P.multocida сероварианта В, 0,8 кг P.multocida сероварианта D, 0,8 кг Pasteurella haemolytica и добавляют 4,15 кг адъюванта ISA-70VG, получая состав 2 при следующем соотношении компонентов, мас.%:
P.multocida серологических вариантов А, В, D и Pasteurella | |
haemolytica, взятых в массовых соотношениях 1:0,8:0,8:0,8 | 45 |
Адъювант ISA-70VG | Остальное |
Пример 3.
Для получения вакцины против пастереллеза животных отобраны три производственных штамма P.multocida серологических вариантов А, В, D №1231, 681, Т-80, которые засевают в промышленный биореактор с производственной средой из расчета 10±2% к объему питательной среды и тщательно перемешивают в биореакторе объемом 300 литров с регулировкой температуры, рН, оборотов мешалки и аэрации. Для выращивания пастерелл используют питательные среды на основе перевара Хоттингера с рН 7,9-8,0 и содержанием аминного азота не менее 178-180 мг %. Культивирование проводят при температуре 37°С±1°С в течение 9 часов. Каждый штамм выращивают отдельно.
Оптическую концентрацию бактериальных клеток определяют фотометрическим методом КФК-2 по калибровочной кривой. На всех этапах технологического производства вакцины через каждые 1,5-2 часа определяют активность поверхностных растворимых антигенов в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) с антителами, полученными на поверхностные растворимые антигены пастерелл. Объектом исследования служит супернатант - культуральная жидкость, освобожденная от клеток двукратным центрифугированием при 14000 об/мин и фильтрованием через стерилизующие пластины. Культивирование проводят до максимального накопления поверхностных растворимых антигенов в среде роста, определяемого по уровню титров в РПГА, в частности, данный показатель уровня активности для P.multocida серовариантов А, В, D и Pasteurella haemolytica через 9 часов культивирования был равен 1:2048; 1:4096; 1:2048; 1:64 соответственно.
Полученную баксуспензию инактивируют формалином до конечной 0,4%-ной концентрации к общему объему в течение 22 часов при 37,5°С, периодически перемешивая каждые 4 часа.
По окончании инактивации берут 1 кг бактериальной суспензии, полученной смешиванием 1 кг P.multocida сероварианта А, 1,2 кг P.multocida сероварианта В, 1,2 кг P.multocida сероварианта D, 1,2 кг Pasteurella haemolytica и добавляют 3,76 кг адъюванта ISA-70VG, получая состав 3 при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Р.multocida серологических вариантов А, В, D и Pasteurella | |
haemolytica, взятых в массовых соотношениях 1:1,2:1,2:1,2 | 55 |
Адъювант ISA-70VG | Остальное |
Иммунологическую активность полученных вакцин, согласно примерам 1-3, сравнивали с иммунологической активностью известного технического решения по результатам заражения мышей смертельной дозой смесью вирулентных штаммов P.multocida сероварианта A, P.multocida сероварианта В, P.multocida сероварианта D и Pasteurella haemolytica через 28 дней после двухкратной иммунизации мышей опытной вакциной и известной. Полученные опыты показали, что после заражения мышей смертельной дозой смесью вирулентных штаммов P.multocida сероварианта A, P.multocida сероварианта В, P.multocida сероварианта D и Pasteurella haemolytica через 28 дней после их двухкратной иммунизации в опытных группах в живых сохранилось 50-60% мышей, в то время как в контрольной группе мышей, вакцинированной известной вакциной, пало 100% животных.
Как показали результаты экспериментальных исследований, предлагаемая вакцина против пастереллеза животных позволяет повысить качество целевого продукта путем повышения его активности в 2 раза, а также в 1,5 раза увеличить сроки хранения целевого продукта.
Claims (1)
- Вакцина против пастереллеза животных, включающая инактивированную баксуспензию Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D и адъювант, отличающаяся тем, что дополнительно содержит инактивированную баксуспензию Pasteurella haemolytica с активностью растворимых поверхностных антигенов в реакции пассивной гемагглютинации 1:32-64, а в качестве адъюванта - адъювант ISA-70VG при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Инактивированная баксуспензия Pasteurella multocida серологических вариантов А, В, D и инактивированная баксуспензия Pasteurella haemolytica, взятые в массовых соотношениях 1:(0,8-1,2):(0,8-1,2):(08-1,2) 45-55 Адъювант ISA-70VG остальное
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2009146106/15A RU2414929C1 (ru) | 2009-12-14 | 2009-12-14 | Вакцина против пастереллеза животных |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2009146106/15A RU2414929C1 (ru) | 2009-12-14 | 2009-12-14 | Вакцина против пастереллеза животных |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2414929C1 true RU2414929C1 (ru) | 2011-03-27 |
Family
ID=44052741
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009146106/15A RU2414929C1 (ru) | 2009-12-14 | 2009-12-14 | Вакцина против пастереллеза животных |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2414929C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112843228A (zh) * | 2021-04-10 | 2021-05-28 | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 | 一种兔巴氏杆菌病二价灭活疫苗及其制备方法 |
-
2009
- 2009-12-14 RU RU2009146106/15A patent/RU2414929C1/ru not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112843228A (zh) * | 2021-04-10 | 2021-05-28 | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 | 一种兔巴氏杆菌病二价灭活疫苗及其制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103074246B (zh) | 一种低血清高效培养鸡毒支原体弱毒株培养基及其制备方法 | |
Sizonenko et al. | The New Efficiency of the «SRMP»–Listerias Growth-Promoting Factor During Factory Cultivation | |
CN108865931B (zh) | 一株芽孢杆菌及其应用 | |
CN106434502A (zh) | 一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法和应用 | |
CN110643522A (zh) | 禽多杀性巴氏杆菌的培养基、培养方法及其应用 | |
CN113957012A (zh) | 一种鸡滑液囊支原体培养基及其制备方法 | |
RU2414929C1 (ru) | Вакцина против пастереллеза животных | |
RU2687488C1 (ru) | Формолвакцина полиштаммная против пневмоний телят стрептококковой этиологии | |
Rahman et al. | Development of experimental oil based inactivated HS vaccine from field Isolates of Pasteurella multocida from Cattle in Bangladesh | |
RU2649754C2 (ru) | Способ изготовления формолвакцины гидроокисьалюминиевой полиштаммной против стрептококковых заболеваний крупного рогатого скота | |
RU2723580C1 (ru) | Способ получения адсорбированной вакцины против вибриоза лососевых рыб | |
RU2311199C1 (ru) | Вакцина против пастереллеза животных | |
RU2388489C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий | |
CN113957007B (zh) | 一种鸡滑液囊支原体灭活疫苗 | |
RU2405567C1 (ru) | Способ получения вакцины против пастереллеза животных | |
RU2432174C1 (ru) | Способ получения эшерихиозного анатоксина | |
RU2309767C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против псевдомоноза свиней | |
CN108949606A (zh) | 一种鸡毒支原体高密度发酵培养工艺 | |
RU2325183C1 (ru) | Способ получения вакцины против эшерихиоза животных | |
RU2288002C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против энтерококковой инфекции нутрий | |
RU2803269C1 (ru) | Питательная среда для культивирования пастерелл в промышленных биореакторах | |
RU2723711C1 (ru) | Способ получения вакцины гидроокисьалюминиевой против мастита коров стрептококковой этиологии | |
RU2764118C1 (ru) | Вакцина поливалентная против сальмонеллеза продуктивных животных | |
RU2340357C2 (ru) | Вакцина против эшерихиоза животных | |
RU2541454C1 (ru) | Питательная среда для культивирования штамма возбудителя рожи свиней erysipelothrix rhuisipathie |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20111215 |