RU2413564C2 - Способ очистки и фракционирования гуминовых кислот и гуминоподобных веществ - Google Patents
Способ очистки и фракционирования гуминовых кислот и гуминоподобных веществ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2413564C2 RU2413564C2 RU2009119797/05A RU2009119797A RU2413564C2 RU 2413564 C2 RU2413564 C2 RU 2413564C2 RU 2009119797/05 A RU2009119797/05 A RU 2009119797/05A RU 2009119797 A RU2009119797 A RU 2009119797A RU 2413564 C2 RU2413564 C2 RU 2413564C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- substances
- solution
- humic
- humin
- purification
- Prior art date
Links
Landscapes
- Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Abstract
Изобретение относится к очистке и фракционированию гуминовых кислот и гуминоподобных веществ, экстрагированных из природных объектов. Способ включает трехкратную экстрацию из природного объекта 0,1 М раствором гидроксида натрия в 10% диметилсульфоксиде, очистку экстракта вначале на хроматографической колонке с использованием сефадекса LH-20, после чего раствор, полученный при элюировании хроматографической колонки водой, подвергают контактированию с детонационными наноалмазами в качестве сорбента, десорбцию целевого вещества из наноалмазов буферным раствором и сушку целевого продукта при 35°С в тонком слое. Способ позволяет специфически выделять гуминовые кислоты или гуминоподобные вещества определенного размера и стандартизированные по степени очистки.
Description
Изобретение относится к фармации и химии природных соединений и может быть использовано как вариант для очистки и фракционирования гуминовых кислот и гуминоподобных веществ, выделенных из природных объектов и находящих медицинское применение для повышения их специфической биологической активности.
Описание изобретения
Изобретение относится к фармацевтической химии и химии природных соединений и может быть использовано как вариант для очистки и фракционирования гуминовых кислот и гуминоподобных веществ, находящих применение в медицине и стандартизированных по определенному размеру и степени очистки.
В настоящее время ГК рассматриваются как особый класс гетерополимеров (органоминеральных полимеров). Образованные в процессе гумификации ГВ представляют собой сложные ассоциаты различных компонентов (лигнинов, аминокислот, углеводов), связанных межмолекулярными связями и имеющих некоторое отличие в механизмах формирования в зависимости от географических, климатических, физических, биологических факторов. Главная особенность ГК - относительная независимость свойств от сравнительно небольших изменений состава, обусловленного особенностями формирования ГВ [1]. Гуминовые кислоты содержатся в таких природных объектах, как торф, лечебные грязи (донные отложения), уголь и др.
В широком смысле термин "гуминоподобные вещества" характеризует образованные в результате биосинтеза полимеры, например целлюлозу, лигнин, которые под действием биологических, физических или химических факторов подверглись деградации с образованием темно-окрашенных стабильных пигментов, по многим свойствам напоминающим свойства гуминовых кислот [2]. Гуминоподобные вещества характерны для таких природных объектов как чага, мумие, а также получатся искусственно например при гидролизе лигнина по определенной технологии. Накопившийся пласт исследований, сочетающих использование инструментальных и химических методов, позволяет убедительно говорить о присутствии в молекулах ГК и гуминоподобных веществах (ГПВ) характерных структурных фрагментов независимо от источника формирования.
Известен способ RU №2028149, С1 6 А61К 35/10 (дата публикации формулы изобретения 1995.02.09), где гуминовые кислоты, используемые для физиотерапии, экстрагируют из лечебной грязи. Для этого иловую сульфидную грязь предварительно подвергают декальцинированию и десульфированию раствором соляной кислоты. После этого экстрагирования щелочью, отстаивания щелочных экстрактов, осаждения при pH 1,0 и переосаждения, выделения целевого продукта и его высушивания используют низкоминерализованную грязь, декальцинирование, и десульфирование проводят последовательно трехкратной обработкой 2 М раствором в соотношении 1:5, 1:3 и 1:2 соответственно в течение 20 и 22 ч с последующим промыванием ее водой до отрицательной реакции Ca+2 и Fe+3, щелочное экстрагирование осуществляют двукратной обработкой в течение 20-22 ч 0,5%-ным раствором гидроокиси натрия в соотношении 1:3 и 1:2, отстаивают щелочные экстракты в течение 48 ч, осадок отделяют и фильтруют через рыхлый фильтр, осаждение целевого продукта из фильтрата осуществляют его подкислением 50%-ной серной кислотой, выдерживают осадок при 40-45°С, отфильтровывают, промывают водой, этанолом до обесцвечивания, растворяют его в минимальном объеме 0,02 н. гидроокиси натрия и переосаждение проводят также 50%-ной серной кислотой, а выделение целевого продукта осуществляют после растворения промытого осадка при переосаждении в минимальном объеме 0,02 М раствора гидроокиси натрия его пропусканием через катионит КУ-2 в H+-форме до постоянного значения pH и высушивают при 35-40°С в тонком слое с принудительной вентиляцией.
Однако данный вариант обладает рядом недостатков: для повышения качества целевого продукта и максимальной очистки от примесных компонентов способ характеризуется многостадийностью и трудоемкостью. Длительность и многоэтапность процесса может являться фактором окислительных процессов и тем самым изменения нативных характеристик структур. Использование в процессе ионообменной смолы ограничивает возможности метода только для гуминовых кислот и исключает использование в качестве элюентов органических растворителей. При этом для достижения полного ионного обмена может потребоваться несколько процедур.
Задачей предлагаемого изобретения является усовершенствование известного способа выделения, очистки и фракционирования гуминовых кислот, а также возможность использования предлагаемого способа для гуминоподобных веществ, содержащихся в некоторых объектах природного происхождения и находящих медицинское применение.
Сущностью способа является специфическая возможность выделять с помощью детонационных наноалмазов гуминовые кислоты или гуминоподобные вещества определенного размера, а общий суммарный эффект всех стадий способа позволяет получать стандартизированные по степени очистки гуминовые кислоты или гуминоподобные вещества. Применяемые сорбенты позволяют использовать в качестве экстрагентов органические растворители. Так, согласно предлагаемому способу в качестве экстрагента используется 0,1 М раствор гидроксида натрия в 10% растворе диметилсульфоксида, что способствует более полному извлечению специфических веществ. Экстракт, полученный трехкратной обработкой природного источника гуминовых кислот (донные отложения, лечебные грязи, торф, уголь) или гуминоподобных веществ (чага, мумие и др.) раствором 0,1 М гидроксида натрия в 10% диметилсульфоксиде (ДМСО), подвергают предварительной очистке в режиме колоночной хроматографии с использованием в качестве сорбента сефадекс LH-20, а в качестве элюента дистиллированную воду. Очищенные с помощью гель-хроматографии гуминовые кислоты или гуминоподобные вещества выделяют из раствора сорбцией на детонационных наноалмазах, отмывают от несорбируемых фрагментов. Гуминовые кислоты или гуминоподобные вещества десорбируют с детонационных наноалмазов элюционным буфером или хелатором.
Пример 1.
250 г лечебной грязи трехкратно обрабатывают 200 мл раствора 0,1 М гидроксида натрия в 10% диметилсульфоксиде. Полученные извлечения объединяют, упаривают под вакуумом до объема 50 мл и центрифугируют при 5 тыс/об.мин. На хроматографическую колонку, заполненную сорбентом сефадекс LH-20 с объемом геля 200 мл, наносят 25 мл экстракта, элюцию проводят дистиллированной водой, сбор фракций по 5 мл, детекция спектрофотометрическая при λ=260 нм. Колонку отмывают и повторяют хроматографирование оставшегося объема. Собранный высокомолекулярный хроматографический пик объединяют и упаривают под вакуумом до объема 10 мл. В полученный раствор гуминовых кислот вносят 20 г детонационных наноалмазов марки RUDDM, смесь в течение 5 мин интенсивно перемешивают. Наночастицы собирают центрифугированием при 14500 об/мин в течение 3 мин. Отмытые частицы для десорбции целевого вещества обрабатывают фосфатным буферным раствором с рН 7,8 (состоящим из дигидрофосфата натрия и гидрофосфата натрия, см. Справочник биохимика Р.Досон, Д.Элиот. - М.: Мир. 1991). Десорбированную гуминовую кислоту сушат в вакуум-сушильном шкафу в тонком слое при температуре 35°C и остаточном давлении в рабочей камере около 1,3·103 Па. Выход целевого продукта составляет 4 г.
Пример 2.
Гриб Чага (Inonotus obliquus) 10 г трехкратно обрабатывают в 20 мл 0,1 М гидроксида натрия в 10% диметилсульфоксиде, полученный экстракт объединяют и упаривают под вакуумом до объема 30 мл. На хроматографическую колонку, заполненную сорбентом сефадекс LH-20 с объемом геля 200 мл, наносят экстракт, элюцию проводят дистиллированной водой, сбор фракций по 5 мл, детекция спектрофотометрическая при λ=260 нм. Собранный высокомолекулярный хроматографический пик объединяют и упаривают под вакуумом до объема 10 мл. В полученный раствор гуминовых кислот вносят 20 г детонационных наноалмазов марки RUDDM, смесь в течение 5 мин интенсивно перемешивали. Наночастицы собирают центрифугированием при 14500 об/мин в течение 3 мин. Отмытые частицы для десорбции вещества обрабатывают буферным раствором с рН 7,8 на основе системы бикарбонат натрия - 5% СО2 (см. Справочник биохимика Р.Досон, Д.Элиот. - М. Мир.: 1991). Десорбированые гуминоподобные вещества сушат в вакуум-сушильном шкафу в тонком слое при температуре 35°С и остаточном давлении в рабочей камере около 1,3·103 Па. Выход целевого продукта составляет около 5 г.
Литература
1. Сухих А.С. Эпоксимодифицированные полисахаридные гели в химии гуминовых, гуминоподобных веществ и препаратов на их основе. Автореф. диссертации. - Тюмень, 2007. 21 с.
2. Елин Е.С. Фенольные соединения в биосфере / Е.С Елин. - Новосибирск: СО РАН, 2001.
3. Описание изобретения RU 2043107.
4. Справочник биохимика. Р.Досон, Д.Элиот, У.Элиот и др. М.: Мир. 1991. 544 с.
Claims (1)
- Способ очистки и фракционирования гуминовых кислот и гуминоподобных веществ, включающий их трехкратную экстрацию из природного объекта раствором, содержащим гидроксид натрия, очистку экстракта, сушку целевого продукта при 35° в тонком слое, отличающийся тем, что экстракцию осуществляют 0,1 М раствором гидроксида натрия в 10% диметилсульфоксиде, объединенные экстракты подвергают центрифугированию при 5 тыс. об. мин, очистку экстракта осуществляют вначале на хроматографической колонке с использованием сефадекса LH-20, после чего раствор, полученный при элюировании хроматографической колонки водой, подвергают контактированию с детонационными наноалмазами в качестве сорбента, проводят отделение и отмывку наноалмазов от примесей и несорбированных фрагментов и осуществляют десорбцию целевого вещества из наноалмазов буферным раствором.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2009119797/05A RU2413564C2 (ru) | 2009-05-25 | 2009-05-25 | Способ очистки и фракционирования гуминовых кислот и гуминоподобных веществ |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2009119797/05A RU2413564C2 (ru) | 2009-05-25 | 2009-05-25 | Способ очистки и фракционирования гуминовых кислот и гуминоподобных веществ |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2009119797A RU2009119797A (ru) | 2010-11-27 |
RU2413564C2 true RU2413564C2 (ru) | 2011-03-10 |
Family
ID=44057362
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009119797/05A RU2413564C2 (ru) | 2009-05-25 | 2009-05-25 | Способ очистки и фракционирования гуминовых кислот и гуминоподобных веществ |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2413564C2 (ru) |
-
2009
- 2009-05-25 RU RU2009119797/05A patent/RU2413564C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Долматов В.Ю. Ультрадисперсные алмазы детонационного синтеза: свойства и применение. Успехи химии, 70, (7), 2001, с.692-694. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2009119797A (ru) | 2010-11-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Helms et al. | Scytonemin A, a novel calcium antagonist from a blue-green alga | |
Milić et al. | Lucerne tannins. II. Isolation of tannins from lucerne, their nature and influence on the digestive enzymes in vitro | |
KR101638205B1 (ko) | 브로콜리 종자로부터 글루코시놀레이트를 추출하는 방법 | |
JPH0399090A (ja) | 植物またはその抽出物からアントシアノシド類を高純度で含有する抽出物の調製方法 | |
US9012687B2 (en) | Process for isolating kukoamine | |
CN113201081B (zh) | 具免疫活性的平卧菊三七多糖及其制备方法和应用 | |
CN105175566B (zh) | 聚酰胺柱和大孔树脂柱联柱法去除西洋参多糖提取物中蛋白质和色素的方法 | |
Połeć-Pawlak et al. | Investigation of Pb (II) binding to pectin in Arabidopsis thaliana | |
RU2435766C1 (ru) | Способ получения дигидрокверцетина | |
JP6703562B2 (ja) | バガスからのポリフェノール組成物の製造方法 | |
CN107936265B (zh) | 植物缩合单宁高聚体的提取方法 | |
CN1203057C (zh) | 从鲜蒜中提取蒜氨酸生产工艺 | |
RU2413564C2 (ru) | Способ очистки и фракционирования гуминовых кислот и гуминоподобных веществ | |
Jin et al. | Novel analysis procedure for red ginseng polysaccharides by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight/time-of-flight mass spectrometry | |
CN111747881A (zh) | 两种具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的异戊烯基取代吲哚生物碱及其制备方法和应用 | |
JP2005263632A (ja) | 高濃度クロロゲン酸類を含む組成物の製造方法 | |
CN1207310C (zh) | 一种半乳甘露聚糖肽的制取方法及产品 | |
RU2308267C1 (ru) | Способ выделения биологически активных изомеров дигидрокверцетина | |
CN1740192A (zh) | 眼镜蛇毒神经毒素和细胞毒素的分离纯化方法 | |
AU2018307222A1 (en) | Spent turmeric - methods and compositions thereof | |
WO2014081275A1 (en) | A method for isolating shikimic acid from oil palm waste | |
KR20150049865A (ko) | 봉독으로부터 멜리틴의 분리방법 | |
CN107641154B (zh) | 一种鱿鱼生物活性肽及其制备方法 | |
Sciuto et al. | Two new Dragendorff-positive compounds from marine algae | |
CN113651899B (zh) | 一种低色度高多糖含量灵芝提取物及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110526 |