RU2389021C2 - Способ оценки структурно-функционального состояния мембран эритроцитов периферической крови у беременных при обострении герпес-вирусной инфекции - Google Patents
Способ оценки структурно-функционального состояния мембран эритроцитов периферической крови у беременных при обострении герпес-вирусной инфекции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2389021C2 RU2389021C2 RU2008128642/15A RU2008128642A RU2389021C2 RU 2389021 C2 RU2389021 C2 RU 2389021C2 RU 2008128642/15 A RU2008128642/15 A RU 2008128642/15A RU 2008128642 A RU2008128642 A RU 2008128642A RU 2389021 C2 RU2389021 C2 RU 2389021C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus infection
- microviscosity
- erythrocyte membranes
- exacerbation
- peripheral blood
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике, точнее к биохимическим методам исследования крови. Предложен способ определения структурно-функционального состояния мембран эритроцитов периферической крови у беременных при обострении герпес-вирусной инфекции, который заключается в том, что при установлении в образце титра антител 1:12800 определяется белок гликофорин методом диск-электрофореза в ступенчатом градиентом полиакриламидном 10% геле с додецилсульфатом натрия, и при увеличении содержания гликофорина до 8,6±0,3 усл.ед относительно 6,55 усл.ед в контроле определяют увеличение микровязкости мембран эритроцитов. Изобретение обеспечивает оценку микровязкости мембран эритроцитов периферической крови у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в третьем триместре.
Description
Цель изобретения заключается в прогнозировании нарушения микровязкости мембран эритроцитов при увеличении содержания в них гликофорина при обострении герпес-вирусной инфекции в третьем триместре.
Прототипом избран способ выявления нарушения микровязкости мембран лимфоцитов и эритроцитов в крови у онкологических больных (Ю.А.Владимиров, Г.Е.Добрецов, 1980; И.А.Горошинская, Л.Ю.Голотина, Е.И.Горло, Т.А.Рова, Ю.Н.Бордюшков, 1999; Ю.Н.Бордюшков, И.А.Горошинская, Е.М.Францияну, Г.Н.Ткачева, Е.И.Горло, И.В.Нескубина, 2000). В вышеуказанных работах предполагают, что микровязкость вероятно зависит от белков, включенных в мембрану эритроцитов.
Существующие данные имеют следующие недостатки:
1. Известные способы оценки микровязкости мембран эритроцитов не детализируют, от каких именно белков меняется микровязкость.
2. Отсутствуют данные, позволяющие прогнозировать, какой из белков мембраны эритроцитов взаимодействует с липидами активнее при насыщении крови вирусным антигеном (вирус простого герпеса).
3. Не имеется сведений, как влияние вируса герпеса отражается на текучести мембран эритроцитов.
В отличие от описанного прототипа проводится подробный анализ изменения содержания белка гликофорина при герпес-вирусной инфекции (титр антител к вирусу герпеса 1:12800) и изменение на этом фоне микровязкости мембран эритроцитов.
Цель достигается тем, что оценка изменения микровязкости мембран эритроцитов исследуется путем определения коэффициента эксимеризации пирена, который равен отношению интенсивности флюоресценции эксимеров к интенсивности флюоресценции мономеров при одновременном включении методом гель-электрофореза содержания белка гликофорина с последующей обработкой методом дискриминантного анализа.
Заявленный способ имеет следующие приемы:
а) Изменение микровязкости мембран эритроцитов проводили методом латеральной диффузии гидрофобного флюоресцентного зонда пирена. Определение микровязкости основано на образовании эксимеров (активных димеров) пирена в липидном окружении (Г.Е.Добрецов, 1989). Флюоресценцию пирена измеряли на спектрофлюориметре «Hitachi». Для определения микровязкости липидного бислоя находили интенсивность флюоресценции или свечение пирена при длине волны возбуждения 334 нм, длина волны мономеров 395 нм, длина волны эксимеров 470 нм. Для определения микровязкости зоны белок-липидных контактов длина волны возбуждения 286 нм, длина волны мономеров 395 нм, длина волны эксимеров 470 нм. Оценка микровязкости основывается на вычислении коэффициента эксимеризации пирена (Кэкс.=F470/F395), который равен отношению интенсивности флюоресценции эксимеров к интенсивности флюоресценции мономеров. Коэффициент эксимеризации находится в обратной зависимости от микровязкости и обозначается как Fэ/Fм.
б) Одновременно в этой же порции крови в мембранах эритроцитов методом диск-электрофореза в ступенчатом градиентном полиакриламидном геле (10%) с додецилсульфатом натрия были выявлены следующие фракции: α-спектрин, β-спектрин, протеин полосы-3, гликофорин и анкирин.
в) Титр антител к вирусу герпеса определяли иммуноферментным методом на спектрофотометре «Stat Fax-2100» (USA).
г) Микровязкость мембран эритроцитов в зависимости от содержания в них гликофорина у беременных, испытавших обострение герпес-вирусной инфекции (титр антител 1:12800), решали путем составления дискриминантного уравнения, при выполнении которого было установлено, что наиболее реальным в этой ситуации изменение содержания в составе мембран белка гликофорина, содержание которого увеличивалось до 8,60±0,30 усл. ед. (контроль 6,55) (р<0,001). Это повлекло за собой увеличение микровязкости мембран эритроцитов (зона белок-липидных контактов) - 0,790±0,004 (контроль - 1,000±0,004) Fэ/Fм.
Остальные белки не оказывают при статистическом анализе достоверного влияния на микровязкость мембран эритроцитов при герпес-вирусной инфекции.
Создается угроза нарушения структурно-функционального состояния мембран эритроцитов и, прежде всего, увеличение их микровязкости.
D=-135,877·микровязкость мембран-(-0,353)·гликофорин.
D=-81,52-(-2,68)=-78,84.
Вычисленной путем статистического анализа дискриминантной функции (-78,84) соответствует граничное значение (-97,49). Поскольку дискриминантная функция (-78,84) больше граничного значения, прогнозируется увеличение микровязкости мембраны эритроцита в силу нарастания в ней содержания при герпес-вирусной инфекции белка гликофорина.
Полученные данные позволяют считать, что при дискриминантном показателе, меньшем (-78,84), увеличивается микровязкость клеточных мембран эритроцитов в силу повышения содержания в них белка гликофорина, что приводит к нарушению их морфофункционального состояния, которое, по-видимому, сопровождается изменением скелета мембран эритроцитов и их ферментативной активности.
Пример 1. Беременная Ф., 21 год, беременность 32 недели. Обострение герпес-вирусной инфекции на 30 неделе. Титр антител к вирусу герпеса 1:12800. До обострения герпес-вирусной инфекции в мембранах эритроцитов микровязкость (зона липид-белковых контактов) - 0,780±0,003 Fэ/Fм. После обострения герпес-вирусной инфекции - 0,990±0,002 Fэ/Fм.
Пример 2. Беременная Щ., 18 лет, беременность 33 недели. Обострение герпес-вирусной инфекции на 30 неделе. Титр антител к вирусу герпеса 1:12800. До обострения герпес-вирусной инфекции в мембранах эритроцитов микровязкость (зона липид-белковых контактов) - 0,840±0,004 Fэ/Fм. После обострения герпес-вирусной инфекции - 1,08±0,003 Fэ/Fм.
Литература
1. Бордюшков Ю.Н., Горошинская И.А., Франциянц Е.М., Ткачева Г.Н. Горло E.И., Нескубина И.В. Структурно-функциональные изменения мембран лимфоцитов и эритроцитов под воздействием переменного магнитного поля // Вопросы мед. химии, т.46, №1, с.72-80.
2. Владимиров Ю.А., Добрецов Г.Е. Флюоресцентные зонды в исследовании биологических мембран // М.: Наука.
3. Горошинская И.А., Голотина Л.Ю., Горло Е.И., Ровда Т.А., Бордюшков Ю.Н. Изменение микровязкости мембран лимфоцитов и эритроцитов крови онкологических больных // Вопросы мед. химии, 1999, т.45, №1, с.53-57.
4. Добрецов Г.Е. // Флюоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липипротеидов // М.: Наука, 1989. - с.191-206.
Claims (1)
- Способ определения структурно-функционального состояния мембран эритроцитов периферической крови у беременных при обострении герпес-вирусной инфекции, характеризующийся тем, что при установлении в образце титра антител 1:12800 определяется белок гликофорин методом диск-электрофореза в ступенчатом градиентном полиакриламидном 10% геле с додецилсульфатом натрия, и при увеличении содержания гликофорина до (8,6±0,3) усл.ед. относительно 6,55 усл.ед. в контроле определяют увеличение микровязкости мембран эритроцитов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008128642/15A RU2389021C2 (ru) | 2008-07-14 | 2008-07-14 | Способ оценки структурно-функционального состояния мембран эритроцитов периферической крови у беременных при обострении герпес-вирусной инфекции |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008128642/15A RU2389021C2 (ru) | 2008-07-14 | 2008-07-14 | Способ оценки структурно-функционального состояния мембран эритроцитов периферической крови у беременных при обострении герпес-вирусной инфекции |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008128642A RU2008128642A (ru) | 2010-01-20 |
| RU2389021C2 true RU2389021C2 (ru) | 2010-05-10 |
Family
ID=42120356
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008128642/15A RU2389021C2 (ru) | 2008-07-14 | 2008-07-14 | Способ оценки структурно-функционального состояния мембран эритроцитов периферической крови у беременных при обострении герпес-вирусной инфекции |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2389021C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2456613C1 (ru) * | 2011-01-12 | 2012-07-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания" Сибирского отделения РАМН | Способ прогнозирования снижения транспортной функции белка полосы-3 мембраны эритроцитов новорожденного от матерей, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в третьем триместре беременности |
-
2008
- 2008-07-14 RU RU2008128642/15A patent/RU2389021C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| SHEN В.W. Ultrastructure of the intact skeleton of the human erythrocyte membrane, J. Cell. Biol., 1986, v.102, h.997-1006. * |
| ГОРОШИНСКАЯ И.А. и др. Изменение микровязкости мембран лимфоцитов и эритроцитов крови онкологических больных, Вопр. мед. химии, 1999, 45, №1, с.53-57. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2456613C1 (ru) * | 2011-01-12 | 2012-07-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания" Сибирского отделения РАМН | Способ прогнозирования снижения транспортной функции белка полосы-3 мембраны эритроцитов новорожденного от матерей, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в третьем триместре беременности |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2008128642A (ru) | 2010-01-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Garcia et al. | Early pregnancy immune biomarkers in peripheral blood may predict preeclampsia | |
| ES2634527T3 (es) | Método para predecir el éxito de implantación en fertilización asistida | |
| KR20080063326A (ko) | 아토피성 피부염 마커와 그의 이용기술 | |
| NL2019067B1 (en) | Markers and their ratio to determine the risk for early-onset preeclampsia | |
| Wang et al. | Reduced levels of cytosolic DNA sensor AIM2 are associated with impaired cytokine responses in healthy elderly | |
| US11726100B2 (en) | Method of treating large vessel occlusion stroke | |
| Beletić et al. | Systemic inflammatory response syndrome in dogs naturally infected with Babesia canis: Association with the parasite load and host factors | |
| Ribeiro et al. | Immunomodulatory effect of vitamin D on the STATs and transcription factors of CD4+ T cell subsets in pregnant women with preeclampsia | |
| KR20180063036A (ko) | 태아 알코올 증후군에 의해 야기되는 장애의 진단방법 | |
| US20220283157A1 (en) | Multiplexed assay kits for evaluation of systemic lupus erythematosus | |
| RU2389021C2 (ru) | Способ оценки структурно-функционального состояния мембран эритроцитов периферической крови у беременных при обострении герпес-вирусной инфекции | |
| Kim et al. | Calibration and standardization of extracellular vesicle measurements by flow cytometry for translational prostate cancer research | |
| KR101138343B1 (ko) | 알츠하이머 질병의 진단을 위한 신속한 시험법 | |
| Kumar et al. | Dynamic alteration in the vaginal secretory proteome across the early and mid-trimesters of pregnancy | |
| RU2459207C1 (ru) | Способ прогнозирования устойчивости мембран эритроцитов при нарастании в них перекисей жирных кислот и обострении во время гестации герпес-вирусной инфекции | |
| EP2163899A1 (en) | Sensitive fluorescence correlation measurements of soluble adhesion molecules | |
| RU2740531C1 (ru) | Способ прогнозирования послеродовых заболеваний у коров | |
| US10557849B2 (en) | Diagnostic of chronic myelomonocytic leukemia (CMML) by flow cytometry | |
| RU2344423C1 (ru) | Способ прогнозирования устойчивости мембран эритроцитов периферической крови при обострении герпесвирусной инфекции у беременных | |
| Omes et al. | Calprotectin as a novel diagnostic approach to screen male infertility risk: A pilot study | |
| Bautista‑Carbajal et al. | Extracellular heat shock protein 70 is a mortality predictor in patients with septic shock and is associated with the APACHE II and SOFA scores, and the pro‑inflammatory immune response | |
| Rad et al. | Comparison of albumin, total protein, globulin and enzyme activity Creatine Phospho Kinase (CPK) in the Gingival Crevicular Fluid of patients with chronic periodontitis before and after treatment | |
| RU2458348C1 (ru) | Способ оценки структуры мембран эритроцитов периферической крови беременных при обострении герпес-вирусной инфекции | |
| RU2415430C1 (ru) | Способ определения циркулирующих иммунных комплексов | |
| Akalan et al. | Alloreactive memory B cell detection by flow cytometric cross match using polyclonally activated memory B cell culture supernatants |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100715 |