RU2382050C1 - Method for preparing modified ascorbic acid of cross-linked hyaluronic acid salt and based bioactive composition - Google Patents
Method for preparing modified ascorbic acid of cross-linked hyaluronic acid salt and based bioactive composition Download PDFInfo
- Publication number
- RU2382050C1 RU2382050C1 RU2008122424/13A RU2008122424A RU2382050C1 RU 2382050 C1 RU2382050 C1 RU 2382050C1 RU 2008122424/13 A RU2008122424/13 A RU 2008122424/13A RU 2008122424 A RU2008122424 A RU 2008122424A RU 2382050 C1 RU2382050 C1 RU 2382050C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- salt
- ascorbic acid
- hyaluronic acid
- salts
- acid
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Изобретение относится к природным полимерам из класса полисахаридов, а именно к принципиально новому способу получения химически модифицированной аскорбиновой кислотой сшитой соли гиалуроновой кислоты. Изобретение относится также к биоактивной композиции на основе сшитых солей модифицированной гиалуроновой кислоты и может найти применение в различных областях медицины, в косметике, например, в эстетической дерматологии и пластической хирургии.The invention relates to natural polymers from the class of polysaccharides, namely to a fundamentally new method for producing a chemically modified ascorbic acid cross-linked salt of hyaluronic acid. The invention also relates to a bioactive composition based on crosslinked salts of modified hyaluronic acid and can find application in various fields of medicine, in cosmetics, for example, in aesthetic dermatology and plastic surgery.
Неизвестны способы получения сшитых солей гиалуроновой кислоты, химически модифицированной аскорбиновой кислотой.Unknown methods for producing cross-linked salts of hyaluronic acid, chemically modified ascorbic acid.
Известен ряд способов получения химически немодифицированных сшитых солей ГК путем взаимодействия солей ГК с различными сшивающими агентами в органической и (или) водной среде. Так, например, известен способ получения сшитых солей ГК, включающий предварительную стадию частичного деацетилирования солей ГК и последующего сшивания с помощью альдегидов и изоцианатов в водной среде [патент США, US 7125860, опубл. в 2006 г.]. В другом известном способе соли ГК предварительно подвергают взаимодействию с хлорангидридом коричной кислоты в среде диметилформамида и последующую стадию сшивания осуществляют под действием УФ-облучения [патент США, US 5462976, опубл. в 1995 г.]. Недостатками этих способов являются двухстадийность химических процессов, высокая токсичность органических реагентов и растворителей, трудоемкая очистка конечных продуктов.A number of methods are known for producing chemically unmodified crosslinked HA salts by reacting HA salts with various crosslinking agents in an organic and (or) aqueous medium. So, for example, there is a known method for producing crosslinked HA salts, comprising a preliminary stage of partial deacetylation of HA salts and subsequent crosslinking with aldehydes and isocyanates in an aqueous medium [US patent, US 7125860, publ. in 2006]. In another known method, HA salts are pre-reacted with cinnamic acid chloride in dimethylformamide medium and the subsequent crosslinking step is carried out under the influence of UV radiation [US Pat. No. 5,462,976, publ. in 1995]. The disadvantages of these methods are the two-stage chemical processes, the high toxicity of organic reagents and solvents, the time-consuming cleaning of the final products.
Известны способы получения сшитых солей ГК в одной химической стадии, например, включающий взаимодействие солей ГК с аминопроизводными бискарбодиимида и осаждение продуктов реакции с помощью этанола [патент США, US 6013679, опубл. в 2000 г., патент США, US 6537979, опубл. в 2003 г.], или способ получения сшитых солей ГК, включающий взаимодействие натриевой соли ГК с хлоридами железа, алюминия и хрома в водной среде [патент США, US 5532221, опубл. в 1996 г.], или способ получения сшитых солей ГК, включающий взаимодействие натриевой соли ГК с дивинилсульфоном в щелочной среде [патент США, US 4582865, опубл. в 1986 г.]. Недостатками вышеперечисленных одностадийных способов являются высокая токсичность сшивающих и прочих агентов, увеличение объемов реакционной системы и производственных помещений, а также большой расход воды.Known methods for producing crosslinked HA salts in one chemical stage, for example, comprising reacting HA salts with amine derivatives of biscarbodiimide and precipitating reaction products with ethanol [US Pat. No. 6,013,679, publ. in 2000, US patent, US 6537979, publ. in 2003], or a method for producing crosslinked HA salts, comprising reacting the HA sodium salt with iron, aluminum, and chromium chlorides in an aqueous medium [US patent, US 5532221, publ. in 1996], or a method for producing cross-linked HA salts, comprising reacting the sodium salt of HA with divinyl sulfone in an alkaline environment [US patent, US 4,582,865, publ. in 1986]. The disadvantages of the above single-stage methods are the high toxicity of crosslinking and other agents, an increase in the volume of the reaction system and production facilities, as well as high water consumption.
Известны способы получения сшитых солей ГК с использованием малотоксичных сшивающих агентов. К таким агентам относятся диглицидиловые эфиры алкандиолов, которые в результате взаимодействия с гидроксильными или карбоксильными группами ГК превращаются в нетоксичные продукты реакции. Например, известен способ получения сшитых солей ГК, включающий взаимодействие натриевой соли ГК с диглицидиловыми эфирами алкандиолов в сильно щелочной или кислой среде с последующим выделением и очисткой целевых продуктов [патент США, US 4716154, опубл. в 1987 г.; патент США, US 4716224, опубл. в 1987 г.; патент США, US 4963666, опубл. в 1990 г.]. Этот метод имеет следующие недостатки: применение большого избытка реагентов, сложные приемы очистки и выделения целевых продуктов (диализ, отмывание избыточных реагентов и др.), многостадийность процесса, увеличение объемов реакционной системы и производственных помещений, большой расход энергии и воды.Known methods for producing crosslinked salts of HA using low toxicity crosslinking agents. Such agents include diglycidyl ethers of alkanediols, which, as a result of interaction with hydroxyl or carboxyl groups of HA, turn into non-toxic reaction products. For example, there is a known method for producing crosslinked HA salts, comprising reacting the HA sodium salt with diglycidyl esters of alkanediols in a strongly alkaline or acidic medium, followed by isolation and purification of the desired products [US Pat. No. 4,716,154, publ. in 1987; U.S. Patent 4,716,224, publ. in 1987; U.S. Patent 4,963,666, publ. in 1990]. This method has the following disadvantages: the use of a large excess of reagents, complicated methods of purification and isolation of the target products (dialysis, washing off excess reagents, etc.), a multi-stage process, an increase in the volume of the reaction system and production facilities, and a large consumption of energy and water.
Наиболее близким к способам получения сшитых солей ГК является способ, включающий стадию взаимодействия натриевой соли ГК с диглицидиловыми эфирами алкандиолов в кислой водной среде [патент США, US 4886787, опубл. в 1989 г.]. Этот метод не требует сложных приемов очистки и выделения целевых продуктов, однако имеет следующие недостатки: применение большого избытка сшивающих агентов, увеличение объемов реакционной системы и производственных помещений, большой расход воды, а также необходимость установки громоздких и дорогостоящих очистных сооружений, что связано с большими энерго-, материало- и трудозатратами. Кроме того, отсутствуют сведения о получении других сшитых солей ГК, кроме натриевой. Следует особо отметить, что в связи с тем, что взаимодействие исходных реагентов осуществляют в водной среде, данный метод не позволяет использовать в качестве исходных реагентов водонерастворимые соли ГК.Closest to methods for producing crosslinked HA salts is a method comprising the step of reacting the sodium salt of HA with diglycidyl esters of alkanediols in an acidic aqueous medium [US patent, US 4886787, publ. in 1989]. This method does not require complicated methods of purification and isolation of target products, however, it has the following disadvantages: the use of a large excess of cross-linking agents, an increase in the volume of the reaction system and production facilities, high water consumption, and the need to install bulky and expensive treatment facilities, which is associated with large energy -, material and labor costs. In addition, there is no information on the receipt of other cross-linked salts of HA, except for sodium. It should be specially noted that due to the fact that the interaction of the starting reagents is carried out in an aqueous medium, this method does not allow the use of water-insoluble salts of HA as starting reagents.
Не известны сшитые соли ГК, химически модифицированные аскорбиновой кислотой или ее производными и способы их получения, однако известен способ получения сшитых солей ГК, модифицированных антиоксидантами путем их химической прививки [Патент РФ №2174985, опубл. в 2001 г.]. При этом реакцию сшивания и прививки проводят с применением органических растворителей (гексан, толуол, метиленхлорид, N-метилпирролидон, ацетон и очень токсичный метанол). В качестве антиоксидантов применяют пространственно затрудненные фенолы (замещенные 3,5-ди-трет-бутилфенолы). Недостатками этого способа являются: многостадийность и большая продолжительность процесса (более суток), использование больших количеств токсичных органических растворителей и сложность очистки конечных продуктов. Кроме того, в качестве антиоксидантов не были использованы аскорбиновая кислота и ее производные.Crosslinked HA salts chemically modified with ascorbic acid or its derivatives and methods for their preparation are not known, however, a method for producing crosslinked HA salts modified with antioxidants by chemical inoculation is known [RF Patent No. 2174985, publ. in 2001]. The crosslinking and grafting reactions are carried out using organic solvents (hexane, toluene, methylene chloride, N-methylpyrrolidone, acetone and very toxic methanol). Spatially hindered phenols (substituted 3,5-di-tert-butylphenols) are used as antioxidants. The disadvantages of this method are: multi-stage and long duration of the process (more than a day), the use of large quantities of toxic organic solvents and the difficulty of cleaning the final products. In addition, ascorbic acid and its derivatives were not used as antioxidants.
Наиболее близкой по составу к заявляемой композиции на основе химически модифицированной аскорбиновой кислотой и/или ее производными сшитой соли ГК является композиция, включающая ГК, аскорбиновую кислоту (витамин С) или смесь аскорбиновой кислоты и ее натриевой соли, а также цистеин [Патент США US 4711780, опубл. в 1987 г.]. Эта композиция в виде водных растворов или гелей применяется в качестве антибактериального средства для лечения инфицированных кожных покровов. Предполагаемый механизм действия композиции заключается в блокировании токсинов, ингибировании коллагиназы (фермент, ускоряющий распад коллагена) и промотировании регенерации эпителиальных клеток поверхности кожи. Недостатками этой композиции являются: малая стабильность ГК, которая деструктируется в организме в течение суток, отсутствие у несшитой и немодифицированной ГК функций пролонгатора и поставщика лекарственных средств в организме.The closest in composition to the claimed composition based on chemically modified ascorbic acid and / or its derivatives of a crosslinked HA salt is a composition comprising HA, ascorbic acid (vitamin C) or a mixture of ascorbic acid and its sodium salt, as well as cysteine [US Patent US 4711780 publ. in 1987]. This composition in the form of aqueous solutions or gels is used as an antibacterial agent for the treatment of infected skin. The proposed mechanism of action of the composition is to block toxins, inhibit collagenase (an enzyme that accelerates the breakdown of collagen) and promote the regeneration of epithelial cells of the skin surface. The disadvantages of this composition are: low stability of HA, which is degraded in the body during the day, the absence of the functions of a prolongator and supplier of drugs in the body of an uncrosslinked and unmodified HA.
Задачей данного изобретения является создание экологически безопасного принципиально нового способа, позволяющего получать неизвестные ранее сшитые соли ГК, модифицированные аскорбиновой кислотой, в одностадийном технологическом режиме в отсутствие жидкой среды, без больших энерго-, трудо- и водозатрат, при этом получать целевые продукты с высоким выходом, а также использовать в качестве исходных реагентов самые разнообразные, в том числе водонерастворимые соли ГК.The objective of this invention is the creation of an environmentally friendly fundamentally new method that allows to obtain previously unknown cross-linked salts of HA modified with ascorbic acid, in a single-stage technological mode in the absence of a liquid medium, without large energy, labor and water costs, while obtaining the target products in high yield , and also to use as initial reagents the most diverse, including water-insoluble salts of HA.
Задачей является также создание широкого ассортимента для различных областей применения, композиций на основе более устойчивой сшитой ГК и одновременно модифицированной ГК, способной достаточно долго (больше месяца) находиться в организме без существенной деструкции и пролонгировать действие аскорбиновой кислоты за счет образования с ней прочной химической связи и дополнительного введения в качестве функциональной добавки различных антиоксидантов, которые очень быстро взаимодействуют с гидроксильными радикалами, ответственными за процессы деструкции.The task is also to create a wide assortment for various applications, compositions based on more stable cross-linked HA and at the same time modified HA, which can be in the body for a long time (more than a month) without significant destruction and prolong the action of ascorbic acid due to the formation of a strong chemical bond with it additional introduction as a functional additive of various antioxidants that interact very quickly with hydroxyl radicals responsible for and destruction processes.
Поставленная задача решается тем, что создан универсальный экологически безопасный способ получения способ получения сшитой соли гиалуроновой кислоты, модифицированной аскорбиновой кислотой и/или ее солями, заключающийся в том, что осуществляют химическое взаимодействие соли гиалуроновой кислоты, аскорбиновой кислоты и/или по крайней мере одной соли аскорбиновой кислоты вместе с по крайней мере одним сшивающим агентом, подвергая исходные реагенты одновременному воздействию давления в пределах от 5 до 1000 МПа и деформации сдвига в механохимическом реакторе при температуре от 20 до 50°С.The problem is solved in that a universal environmentally friendly way to obtain a method for producing a cross-linked salt of hyaluronic acid, modified with ascorbic acid and / or its salts, which consists in the fact that the chemical interaction of the salt of hyaluronic acid, ascorbic acid and / or at least one salt ascorbic acid together with at least one cross-linking agent, subjecting the starting reagents to simultaneous pressure in the range from 5 to 1000 MPa and shear strain in the fur nohimicheskom reactor at a temperature of from 20 to 50 ° C.
В качестве соли гиалуроновой кислоты можно использовать соль, выбранную из ряда: тетраалкиламмониевая, литиевая, натриевая, калиевая, кальциевая, магниевая, бариевая, цинковая, алюминиевая, медная, золотая или смешанная соль гиалуроновой кислоты из вышеуказанного ряда, или гидросоль гиалуроновой кислоты.As the salt of hyaluronic acid, you can use a salt selected from the series: tetraalkylammonium, lithium, sodium, potassium, calcium, magnesium, barium, zinc, aluminum, copper, gold or a mixed salt of hyaluronic acid from the above series, or a hyaluronic acid hydrosalt.
В частности, солью гиалуроновой кислоты является натриевая соль.In particular, the salt of hyaluronic acid is the sodium salt.
Соль аскорбиновой кислоты может быть выбрана из ряда: соль щелочного металла аскорбиновой кислоты, соль щелочноземельного металла аскорбиновой кислоты, натриевая соль фосфорнокислого эфира аскорбиновой кислоты, магниевая соль фосфорнокислого эфира аскорбиновой кислоты, кальциевая соль фосфорнокислого эфира аскорбиновой кислоты.The ascorbic acid salt can be selected from the series: alkali metal salt of ascorbic acid, alkaline earth metal salt of ascorbic acid, sodium salt of ascorbic acid phosphate ester, magnesium salt of ascorbic acid phosphate ester, calcium salt of ascorbic acid ester.
В частности, солью аскорбиновой кислоты является магниевая соль фосфорнокислого эфира аскорбиновой кислоты.In particular, the salt of ascorbic acid is the magnesium salt of ascorbic acid phosphate ester.
Сшивающим агентом является по крайней мере один эфир из ряда: диглицидиловый эфир этиленгликоля, диглицидиловый эфир диэтиленгликоля, диглицидиловый эфир триэтиленгликоля, диглицидиловый эфир полиэтиленгликоля, диглицидиловый эфир пропиленгликоля, диглицидиловый эфир 1,4-бутандиола, диглицидиловый эфир 1,6-гександиола.The crosslinking agent is at least one of the following ethers: ethylene glycol diglycidyl ether, diethylene glycol diglycidyl ether, triethylene glycol diglycidyl ether, polyethylene glycol diglycidyl ether, propylene glycol diglycidyl ether, 1,4-butane diglycidyl ether and 1,4-butanediol ether.
Мольное соотношение: соль гиалуроновой кислоты или суммы ее солей к сшивающему агенту или к сумме сшивающих агентов составляет от 50:1 до 2,5:1.The molar ratio: the salt of hyaluronic acid or the sum of its salts to the crosslinking agent or to the sum of the crosslinking agents is from 50: 1 to 2.5: 1.
Мольное соотношение: соль гиалуроновой кислоты к аскорбиновой кислоте или к сумме аскорбиновой кислоты и по крайней мере одной из ее солей, или к сумме ее солей составляет от 100:1 до 5:1, а мольное соотношение: аскорбиновая кислота или сумма аскорбиновой кислоты и по крайней мере одной из ее солей или сумма ее солей к сшивающему агенту, или к сумме сшивающих агентов находится в пределах от 1:10 до 1:2.The molar ratio: the salt of hyaluronic acid to ascorbic acid or to the sum of ascorbic acid and at least one of its salts, or to the sum of its salts is from 100: 1 to 5: 1, and the molar ratio: ascorbic acid or the amount of ascorbic acid and at least one of its salts or the sum of its salts to the crosslinking agent, or to the sum of the crosslinking agents is in the range from 1:10 to 1: 2.
Продолжительность воздействия давления и деформации сдвига, в частности, находится в пределах от 0,1 до 10 минут.The duration of pressure and shear deformation, in particular, is in the range from 0.1 to 10 minutes.
В качестве механохимического реактора можно использовать, в частности, наковальни Бриджмена или аппарат шнекового типа.As a mechanochemical reactor, it is possible to use, in particular, Bridgman anvils or a screw type apparatus.
В случае осуществления процесса, где механохимическим реактором являются наковальни Бриджмена, реакционную смесь подвергают деформации сдвига путем изменения угла поворота нижней наковальни, в частности, в пределах от 50 до 350 градусов. При этом для лучшей реализации способа предпочтительно исходные реагенты предварительно гомогенизировать в смесителе при температуре от 20 до 50°С до получения однородной порошкообразной смеси. В данном случае можно использовать в качестве смесителя мельницу или смеситель шнекового типа, например двухшнековый экструдер.In the case of a process where the Bridgman anvils are the mechanochemical reactor, the reaction mixture is sheared by changing the angle of rotation of the lower anvil, in particular in the range of 50 to 350 degrees. Moreover, for a better implementation of the method, it is preferable to pre-homogenize the starting reagents in a mixer at a temperature of from 20 to 50 ° C until a homogeneous powder mixture is obtained. In this case, a mill or a screw type mixer, for example a twin screw extruder, can be used as a mixer.
В частности, механохимическим реактором является аппарат шнекового типа, например, выбранный из ряда: двухшнековый экструдер с однонаправленным вращением шнеков, двухшнековый экструдер с противоположно направленным вращением шнеков, двухшнековый экструдер с набором кулачков различного типа, например транспортные, запирающие, перетирающие.In particular, a mechanochemical reactor is a screw type apparatus, for example, selected from the series: twin-screw extruder with unidirectional rotation of screws, twin-screw extruder with oppositely directed rotation of screws, twin-screw extruder with a set of cams of various types, for example, transport, locking, grinding.
Способ может быть реализован, в частности, поэтапно, например - сначала осуществляют химическое взаимодействие соли гиалуроновой кислоты вместе со сшивающим агентом, после чего полученную сшитую соль гиалуроновой кислоты подвергают взаимодействию с аскорбиновой кислотой и/или ее солями вместе с дополнительно введенным в реакционную смесь сшивающим агентом. При этом мольное соотношение: соль гиалуроновой кислоты к сшивающему агенту или к сумме сшивающих агентов находится в пределах от 50:1 до 10:1, а соотношение аскорбиновой кислоты или суммы аскорбиновой кислоты и по крайней мере одной из ее солей или суммы ее солей к полученной сшитой соли гиалуроновой кислоты, в расчете на исходное количество гиалуроновой кислоты, и к дополнительно введенным в реакционную смесь по крайней мере одним сшивающим агентом или к сумме сшивающих агентов находится в пределах от 1:100 до 1:5 и от 1:10 до 1:2 соответственно.The method can be implemented, in particular, in stages, for example, first, the hyaluronic acid salt is chemically reacted together with a crosslinking agent, after which the resulting crosslinked hyaluronic acid salt is reacted with ascorbic acid and / or its salts together with a crosslinking agent added to the reaction mixture . The molar ratio: the salt of hyaluronic acid to the crosslinking agent or to the sum of the crosslinking agents is in the range from 50: 1 to 10: 1, and the ratio of ascorbic acid or the sum of ascorbic acid and at least one of its salts or the sum of its salts to the obtained a cross-linked salt of hyaluronic acid, based on the initial amount of hyaluronic acid, and to at least one additional cross-linking agent added to the reaction mixture or to the sum of the cross-linking agents is in the range from 1: 100 to 1: 5 and from 1:10 to 1: 2 respectively.
В частности, в реакционную смесь дополнительно можно вводить, по крайней мере одну функциональную добавку, например антиоксидант, пищевую, стабилизирующую, модифицирующую, лекарственную.In particular, at least one functional additive, for example, an antioxidant, food, stabilizing, modifying, drug, can be added to the reaction mixture.
Решение поставленной задачи стало возможным благодаря тому, что процесс взаимодействия исходных реагентов осуществляют в отличие от известных способов получения сшитых солей ГК (патент США, US 4886787) и химически модифицированной соли ГК путем прививки (патент РФ №2174985) не в растворе, а путем взаимодействия исходных реагентов в твердом порошкообразном состоянии при одновременном воздействии давления и деформации сдвига. Это позволило достигнуть нового технического результата, заключающегося в создании универсального экологически безопасного способа, позволяющего получать целый ряд сшитых солей ГК, модифицированной аскорбиновой кислотой, в одностадийном технологическом режиме в отсутствии жидкой среды, с получением целевых продуктов с высоким выходом. Способ не требует больших энерго-, трудо- и водозатрат, позволяет использовать в качестве исходных реагентов самые разнообразные, в том числе водонерастворимые соли ГК.The solution to this problem became possible due to the fact that the reaction process of the starting reagents is carried out in contrast to the known methods for the preparation of crosslinked HA salts (US patent, US 4886787) and chemically modified HA salt by grafting (RF patent No. 2174985) not in solution, but by interaction starting reagents in solid powder state under the influence of pressure and shear strain. This allowed us to achieve a new technical result, which consists in creating a universal environmentally friendly method that allows you to get a number of crosslinked salts of HA, modified with ascorbic acid, in a single-stage technological mode in the absence of a liquid medium, with the target products in high yield. The method does not require large energy, labor and water costs, allows you to use as source reagents the most diverse, including water-insoluble salts of HA.
Задача решается также тем, что создана биоактивная композиция на основе модифицированной соли ГК, полученной вышеизложенным способом, включающая модифицированную соль ГК и по крайней мере одну функциональную добавку например антиоксидант, пищевую, стабилизирующую, модифицирующую, лекарственную при мольном соотношении компонентов: модифицированная соль ГК к функциональной добавке в пределах от 100:1 до 1:1.The problem is also solved by creating a bioactive composition based on a modified HA salt obtained by the above method, including a modified HA salt and at least one functional additive, for example, an antioxidant, a food, stabilizing, modifying, drug substance with a molar ratio of components: modified HA to functional salt additive in the range from 100: 1 to 1: 1.
В качестве функциональной добавки, в зависимости от желаемого результата и предназначения, можно использовать соединение из ряда: L-цистеин, D-цистеин, D,L-цистеин, цистин, метионин, глицин, L-глутамин, L-пролин, 3-гидроксипролин, 4-гидроксипролин, гепарин, 1-тиоглицерин, 2-меркаптоэтанол, 2-меркаптобензтиазол, тиомочевина, 1-додекантиол, рутин, кверцетин, дигидрокверцетин, рибоксин, янтарный ангидрид, малеиновый ангидрид, акриламид, никотинамид, мочевина, гуанидин, меламин, D-глюкоза, сахароза, сорбит, маннит, пектин, крахмал, целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, полиакриламид, поливиниловый спирт; кислота из ряда: гликолевая, молочная, винная, лимонная, яблочная, линолевая, линоленовая, олеиновая, пальмитиновая, миндальная, барбитуровая, янтарная, малеиновая, акриловая, салициловая, ацетилсалициловая, никотиновая, циануровая, тиогликолевая, 2,3-димеркаптоянтарная, глюкуроновая, галактуроновая; натриевая соль кислоты из вышеуказанного ряда.As a functional additive, depending on the desired result and purpose, you can use a compound from the series: L-cysteine, D-cysteine, D, L-cysteine, cystine, methionine, glycine, L-glutamine, L-proline, 3-hydroxyproline , 4-hydroxyproline, heparin, 1-thioglycerol, 2-mercaptoethanol, 2-mercaptobenzthiazole, thiourea, 1-dodecantiol, rutin, quercetin, dihydroquercetin, riboxin, succinic anhydride, maleic anhydride, nickel amide, acrylamide glucose, sucrose, sorbitol, mannitol, pectin, starch, cellulose, carboxymethy cellulose, polyacrylamide, polyvinyl alcohol; acid from the series: glycolic, lactic, tartaric, citric, malic, linoleic, linolenic, oleic, palmitic, almond, barbituric, succinic, maleic, acrylic, salicylic, acetylsalicylic, nicotinic, cyanuric, thioglycolic, 2,3-taric, dimercapto galacturonic; sodium salt of the acid from the above series.
В частности, функциональной добавкой является L-цистеин и возможно глицин или, в частности, дигидрокверцетин. При этом L-цистеин и дигидрокверцетин обладают выраженными антиоксидантными свойствами.In particular, the functional additive is L-cysteine and optionally glycine or, in particular, dihydroquercetin. Moreover, L-cysteine and dihydroquercetin have pronounced antioxidant properties.
Композиция может быть получена путем смешения компонентов обычными приемами.The composition can be obtained by mixing the components in the usual manner.
Композиция, в частности, может быть получена в условиях получения модифицированной соли гиалуроновой кислоты, то есть путем дополнительного введения в реакционную смесь желаемую функциональную добавку или смесь добавок.The composition, in particular, can be obtained under the conditions of obtaining a modified salt of hyaluronic acid, that is, by additionally introducing into the reaction mixture the desired functional additive or mixture of additives.
В отличие от известной композиции в новой композиции ГК находится в сшитом состоянии и, кроме того, модификатор - аскорбиновая кислота (и/или ее производные) химически связан со сшитой солью.In contrast to the known composition, in the new composition, HA is in a crosslinked state and, in addition, the modifier ascorbic acid (and / or its derivatives) is chemically bound to the crosslinked salt.
Это позволило получить новый технический результат - расширение ассортимента и областей применения, а также значительное увеличение эффективности действия композиции.This allowed us to obtain a new technical result - expanding the range and applications, as well as a significant increase in the effectiveness of the composition.
Количественный характер выхода продуктов взаимодействия глицидиловых групп сшивающих агентов с гидроксильными группами солей ГК, аскорбиновой кислоты и солей аскорбиновой кислоты доказан с помощью ИК-Фурье спектрального анализа исходных реагентов и продуктов реакции. Установлено, что в спектрах этих продуктов полностью отсутствуют характеристические полосы глицидиловых групп сшивающих агентов (750-950 см-1) и присутствуют дополнительные полосы (1050-1150 см-1), характерные для эфирных групп, появившихся в результате взаимодействия глицидиловых групп сшивающих агентов с гидроксильными группами солей ГК, аскорбиновой кислоты и солей аскорбиновой кислоты. Выход солей модифицированной ГК определяли по результатам экстракции водой конечных продуктов реакции при 40°С. Выделенные из водных экстрактов продукты взаимодействия ДЭГ-1 и ДЭБД с аскорбиновой кислотой и ее производными, не вступившие в реакцию с солями ГК, составляли 1-5 мас.% от количества исходных компонентов, что соответстует 95-99%-ному выходу солей модифицированной ГК. Наличие аскорбиновой кислоты и ее производных определяли по характеристическим полосам (1610-1630 и 1720-1750 см -1) в ИК-спектрах конечных продуктов. Наличие функциональных добавок в биоактивных композициях определяли по следующим характеристическим полосам в ИК-спектрах: для L-цистеина 1580-1590, 1600-1610 и 3000-3020 см-1; для глицина 1570-1580, 1630-1640 и 3050-3100 см-1; для дигидрокверцетина 1630-1640 и 3430-3450 см-1. Степень набухания определяли по стандартной методике [Практикум по высокомолекулярным соединениям. - М.: Химия, 1985, с.111.]. Стойкость к деструкции в присутствии гидроксильных радикалов оценивалась по величине полупериода снижения вязкости гидрогелей конечных продуктов, как описано Wong et al. в Inorganic Biochemistry, В. 14, Р. 127 (1981) и в патенте РФ №2174985. Величина полупериода снижения вязкости 2%-ного гидрогеля исходной натриевой соли ГК составляла 1 час.The quantitative nature of the yield of the products of the interaction of glycidyl groups of crosslinking agents with the hydroxyl groups of HA salts, ascorbic acid and ascorbic acid salts was proved using FTIR spectral analysis of the starting reagents and reaction products. It has been established that the spectra of these products completely lack characteristic bands of glycidyl groups of crosslinking agents (750–950 cm –1 ) and that additional bands (1050–1150 cm –1 ) characteristic of ether groups resulting from the interaction of glycidyl groups of crosslinking agents with hydroxyl groups of salts of HA, ascorbic acid and salts of ascorbic acid. The yield of salts of modified HA was determined by the results of water extraction of the final reaction products at 40 ° C. The products of the interaction of DEG-1 and DEBD with ascorbic acid and its derivatives isolated from aqueous extracts, which did not react with HA salts, accounted for 1-5 wt.% Of the amount of initial components, which corresponds to a 95-99% yield of salts of modified HA . The presence of ascorbic acid and its derivatives was determined by the characteristic bands (1610-1630 and 1720-1750 cm -1 ) in the IR spectra of the final products. The presence of functional additives in bioactive compositions was determined by the following characteristic bands in the IR spectra: for L-cysteine 1580-1590, 1600-1610 and 3000-3020 cm -1 ; for glycine 1570-1580, 1630-1640 and 3050-3100 cm -1 ; for dihydroquercetin 1630-1640 and 3430-3450 cm -1 . The degree of swelling was determined according to the standard method [Workshop on macromolecular compounds. - M .: Chemistry, 1985, p.111.]. The resistance to degradation in the presence of hydroxyl radicals was evaluated by the half-life of the decrease in the viscosity of the hydrogels of the final products, as described by Wong et al. in Inorganic Biochemistry, B. 14, P. 127 (1981) and in the patent of the Russian Federation No. 2174985. The magnitude of the half-cycle of reducing the viscosity of a 2% hydrogel of the starting sodium salt of HA was 1 hour.
Изобретение может быть проиллюстрировано следующими примерами.The invention can be illustrated by the following examples.
Получение модифицированных сшитых солей ГКObtaining modified cross-linked salts of HA
Пример 1. 160,0 мг (4·10-4 моля) порошкообразной натриевой соли ГК, 7,0 мг (4·10-5 моля) аскорбиновой кислоты и 27,0 мг (8·10-5 моля) диглицидилового эфира диэтиленгликоля (ДЭГ-1) гомогенизируют в мельнице при 20°С в течение 10-15 мин. Затем однородную порошкообразную смесь помещают на нижнюю наковальню Бриджмена (диаметр рабочей поверхности =3 см), накрывают верхней наковальней, наковальни ставят под пресс и подвергают давлению 700 МПа при 20°С, при угле поворота нижней наковальни 250° в течение 1 мин. Далее снимают давление, вынимают наковальни из-под пресса. Выход модифицированной сшитой натриевой соли ГК составляет 192,0 мг (99,0%), степень набухания в воде достигает 8 мл/г. Из водного экстракта конечного продукта выделено 2 мг продуктов взаимодействия аскорбиновой кислоты и ДЭГ-1. Величина полупериода снижения вязкости гидрогеля конечного продукта составляет 8 часов.Example 1. 160.0 mg (4 · 10 -4 mol) of powdered sodium salt of HA, 7.0 mg (4 · 10 -5 mol) of ascorbic acid and 27.0 mg (8 · 10 -5 mol) of diethylene glycol diglycidyl ether (DEG-1) is homogenized in a mill at 20 ° C for 10-15 minutes. Then, a homogeneous powder mixture is placed on the Bridgman lower anvil (diameter of the working surface = 3 cm), covered with an upper anvil, put the anvils under a press and subjected to a pressure of 700 MPa at 20 ° C, with an angle of rotation of the lower anvil of 250 ° for 1 min. Then relieve pressure, remove the anvil from the press. The yield of modified crosslinked sodium salt of HA is 192.0 mg (99.0%), the degree of swelling in water reaches 8 ml / g. 2 mg of the reaction products of ascorbic acid and DEG-1 were isolated from the aqueous extract of the final product. The magnitude of the half-cycle of reducing the viscosity of the hydrogel of the final product is 8 hours.
Пример 2. 160,0 мг (4·10-4 моля) порошкообразной натриевой соли ГК, 22,0 мг (8·10-5 моля) магниевой соли фосфорнокислого эфира аскорбиновой кислоты и 34,0 мгExample 2. 160.0 mg (4 · 10 -4 mol) of powdered sodium salt of HA, 22.0 mg (8 · 10 -5 mol) of magnesium salt of ascorbic acid phosphate ester and 34.0 mg
(1,6·10-4 моля) диглицидилового эфира 1,4-бутандиола (ДЭБД) гомогенизируют в мельнице при 50°С в течение 10-15 мин. Затем однородную порошкообразную смесь помещают на нижнюю наковальню Бриджмена (диаметр рабочей поверхности =3 см), накрывают верхней наковальней, наковальни ставят под пресс и подвергают давлению 1000 МПа при 20°С, при угле поворота нижней наковальни 200° в течение 50 с. Далее снимают давление, вынимают наковальни из-под пресса. Выход модифицированной сшитой натриевой соли ГК составляет 212,0 мг (98,0%), степень набухания в воде достигает 7 мл/г. Из водного экстракта конечного продукта выделено 4 мг продуктов взаимодействия магниевой соли фосфорнокислого эфира аскорбиновой кислоты и ДЭБД. Величина полупериода снижения вязкости гидрогеля конечного продукта составляет 10 часов.(1.6 · 10 -4 mol) of 1,4-butanediol diglycidyl ether (DEBD) are homogenized in a mill at 50 ° C for 10-15 minutes. Then a homogeneous powder mixture is placed on the Bridgman lower anvil (diameter of the working surface = 3 cm), covered with an upper anvil, put the anvils under a press and subjected to a pressure of 1000 MPa at 20 ° C, with an angle of rotation of the lower anvil of 200 ° for 50 s. Then relieve pressure, remove the anvil from the press. The yield of modified crosslinked sodium salt of HA is 212.0 mg (98.0%), the degree of swelling in water reaches 7 ml / g. From the aqueous extract of the final product, 4 mg of the products of the interaction of the magnesium salt of ascorbic acid phosphate ester and DEBD were isolated. The magnitude of the half-cycle of reducing the hydrogel viscosity of the final product is 10 hours.
Пример 3. Выполнен аналогично примеру 1, однако в отличие от него аскорбиновую кислоту берут в количестве 0,7 мг (4·10-6 моля), а ДЭГ-1 берут в количестве 13,5 мг (4·10-5 моля). Выход модифицированной сшитой натриевой соли ГК составляет 174 мг (100%), степень набухания в воде достигает 3 мл/г.Example 3. Performed similarly to example 1, however, in contrast to it, ascorbic acid is taken in an amount of 0.7 mg (4 · 10 -6 mol), and DEG-1 is taken in an amount of 13.5 mg (4 · 10 -5 mol) . The yield of modified crosslinked sodium salt of HA is 174 mg (100%); the degree of swelling in water reaches 3 ml / g.
Пример 4. Выполнен аналогично примеру 2, однако в отличие от него вместо натриевой соли ГК взята смешанная натриевая-кальциевая соль при мольном соотношении натрий:кальций =2:1. Выход модифицированной сшитой смешанной соли ГК составляет 212,0 мг (98,0%), степень набухания в воде достигает 7 мл/г.Example 4. Performed similarly to example 2, however, in contrast to it, instead of the sodium salt of HA, a mixed sodium-calcium salt was taken with a molar ratio of sodium: calcium = 2: 1. The yield of the modified crosslinked mixed HA salt is 212.0 mg (98.0%); the degree of swelling in water reaches 7 ml / g.
Пример 5. Выполнен аналогично примеру 1, однако в отличие от него вместо натриевой соли ГК взята смешанная натриевая-алюминиевая соль при мольном соотношении натрий:алюминий =3:1. Выход модифицированной сшитой смешанной соли ГК составляет 188,0 мг (98,0%), степень набухания в воде достигает 7 мл/г.Example 5. Performed similarly to example 1, however, in contrast to it, instead of the sodium salt of HA, a mixed sodium-aluminum salt was taken with a molar ratio of sodium: aluminum = 3: 1. The yield of the modified crosslinked mixed HA salt is 188.0 mg (98.0%); the degree of swelling in water reaches 7 ml / g.
Пример 6. Выполнен аналогично примеру 2, однако в отличие от него вместо натриевой соли ГК взята смешанная натриевая-цинковая соль при мольном соотношении натрий:цинк=2:1. Выход модифицированной сшитой смешанной соли ГК составляет 216,0 мг (97,0%), степень набухания в воде достигает 7 мл/г.Example 6. Performed similarly to example 2, however, in contrast to it, instead of the sodium salt of HA, a mixed sodium-zinc salt was taken with a molar ratio of sodium: zinc = 2: 1. The yield of the modified crosslinked mixed HA salt is 216.0 mg (97.0%); the degree of swelling in water reaches 7 ml / g.
Пример 7. Выполнен аналогично примеру 2, однако в отличие от него вместо натриевой соли ГК взята смешанная натриевая-медная соль при мольном соотношении натрий:медь =2:1. Выход модифицированной сшитой смешанной соли ГК составляет 214,0 мг (96,0%), степень набухания в воде достигает 6 мл/г.Example 7. Performed similarly to example 2, however, in contrast to it, instead of the sodium salt of HA, a mixed sodium-copper salt was taken with a molar ratio of sodium: copper = 2: 1. The yield of the modified crosslinked mixed HA salt is 214.0 mg (96.0%); the degree of swelling in water reaches 6 ml / g.
Пример 8. Выполнен аналогично примеру 2, однако в отличие от него вместо магниевой соли фосфорнокислого эфира аскорбиновой кислоты взята натриевая соль аскорбиновой кислоты. Угол поворота нижней наковальни составляет 350 градусов, а время воздействия - 1,4 мин. Выход модифицированной сшитой соли ГК составляет 207,0 мг (98,0%), степень набухания в воде достигает 6 мл/г.Example 8. Performed similarly to example 2, however, in contrast to it, the sodium salt of ascorbic acid was taken instead of the magnesium salt of the phosphoric ester of ascorbic acid. The angle of rotation of the lower anvil is 350 degrees, and the exposure time is 1.4 minutes. The yield of the modified crosslinked HA salt is 207.0 mg (98.0%); the degree of swelling in water reaches 6 ml / g.
Пример 9. Выполнен аналогично примеру 2, однако в отличие от него вместо натриевой соли ГК взята смешанная натриевая-золотая соль при мольном соотношении натрий:золото =3:1. Угол поворота нижней наковальни составляет 50 градусов, а время воздействия - 0,1 мин. Выход модифицированной сшитой смешанной соли ГК составляет 251,0 мг (98,0%), степень набухания в воде достигает 6 мл/г.Example 9. Performed similarly to example 2, however, in contrast to it, instead of the sodium salt of HA, a mixed sodium-gold salt was taken with a molar ratio of sodium: gold = 3: 1. The angle of rotation of the lower anvil is 50 degrees, and the exposure time is 0.1 min. The yield of the modified crosslinked mixed HA salt is 251.0 mg (98.0%); the degree of swelling in water reaches 6 ml / g.
Пример 10. Выполнен аналогично примеру 1, однако в отличие от него аскорбиновая кислота взята в количестве 0,7 мг (4·10-6 моля), а ДЭГ-1 взят в количестве 2,7 мг (8·10-6 моля). Выход модифицированной сшитой натриевой соли ГК составляет 163,0 мг (100%), степень набухания в воде достигает 10 мл/г.Example 10. Performed similarly to example 1, however, in contrast to it, ascorbic acid was taken in an amount of 0.7 mg (4 · 10 -6 mol), and DEG-1 was taken in an amount of 2.7 mg (8 · 10 -6 mol) . The yield of modified crosslinked sodium salt of HA is 163.0 mg (100%); the degree of swelling in water reaches 10 ml / g.
Пример 11. Выполнен аналогично примеру 2, однако в отличие от него вместо натриевой соли ГК взята гидронатриевая соль при мольном соотношении натрий: водород=1:1. Выход модифицированной сшитой гидросоли ГК составляет 208,0 мг (98,0%), степень набухания в воде достигает 5 мл/г.Example 11. Performed similarly to example 2, however, in contrast to it, instead of the sodium salt of HA, a sodium salt was taken with a molar ratio of sodium: hydrogen = 1: 1. The yield of modified crosslinked hydrosalt HA is 208.0 mg (98.0%), the degree of swelling in water reaches 5 ml / g.
Пример 12. Выполнен аналогично примеру 10, однако в отличие от него проведен без аскорбиновой кислоты. Выход сшитой натриевой соли ГК составляет 162,0 мг (100%), степень набухания в воде достигает 12 мл/г. Затем к полученной сшитой соли ГК добавляют аскорбиновую кислоту и ДЭГ-1 в количестве, как указано в примере 1, и далее прповодят синтез аналогично примеру 1. Выход модифицированной сшитой натриевой соли ГК составляет 194,0 мг (99,0%), степень набухания в воде достигает 7 мл/г. Из водного экстракта конечного продукта выделено 2 мг продуктов взаимодействия аскорбиновой кислоты и ДЭГ-1. Величина полупериода снижения вязкости гидрогеля конечного продукта составляет 9 часов.Example 12. Performed similarly to example 10, however, in contrast, it was carried out without ascorbic acid. The yield of crosslinked sodium salt of HA is 162.0 mg (100%); the degree of swelling in water reaches 12 ml / g. Then, ascorbic acid and DEG-1 are added to the obtained crosslinked HA salt in an amount as described in Example 1, and then the synthesis is carried out analogously to Example 1. The yield of the modified crosslinked HA salt is 194.0 mg (99.0%), the degree of swelling in water reaches 7 ml / g. 2 mg of the reaction products of ascorbic acid and DEG-1 were isolated from the aqueous extract of the final product. The magnitude of the half-cycle of reducing the hydrogel viscosity of the final product is 9 hours.
Пример 13. Смесь 400,0 г (1 моль) порошкообразной натриевой соли ГК, 55 г (0,2 моля) аскорбиновой кислоты и 84 г (0,4 моля) (ДЭБД) подвергают одновременному воздействию давления и деформации сдвига при 50°С и давлении 5 МПа в двухшнековом экструдере с однонаправленным вращением шнеков в течение 10 мин. Выход модифицированной сшитой натриевой соли ГК составляет 512 г (95,0%), степень набухания в воде достигает 8 мл/г. Из водного экстракта конечного продукта выделено 27 г продуктов взаимодействия аскорбиновой кислоты и ДЭГ-1. Величина полупериода снижения вязкости гидрогеля конечного продукта составляет 7 часов.Example 13. A mixture of 400.0 g (1 mol) of HA powdered sodium salt, 55 g (0.2 mol) of ascorbic acid and 84 g (0.4 mol) (DEBD) are subjected to simultaneous pressure and shear deformation at 50 ° C and a pressure of 5 MPa in a twin-screw extruder with unidirectional rotation of the screws for 10 minutes The yield of modified crosslinked sodium salt of HA is 512 g (95.0%), the degree of swelling in water reaches 8 ml / g. 27 g of the reaction products of ascorbic acid and DEG-1 were isolated from the aqueous extract of the final product. The magnitude of the half-cycle of reducing the viscosity of the hydrogel of the final product is 7 hours.
Получение композиции на основе модифицированной сшитой соли ГКObtaining a composition based on a modified crosslinked salt of HA
Пример 14. Выполнен аналогично примеру 2, однако в отличие от него в исходную реакционную смесь добавлено 48 мг (4·10-4 моля) L-цистеина. Выход 264 мг (100%) композиции, содержащей сшитую натриевую соль ГК, модифицированную магниевой солью фосфорного эфира аскорбиновой кислоты, и L-цистеин. Величина полупериода снижения вязкости гидрогеля конечного продукта составляет 57 часов.Example 14. Performed similarly to example 2, however, in contrast to it, 48 mg (4 · 10 -4 mol) of L-cysteine was added to the initial reaction mixture. Yield 264 mg (100%) of a composition containing a crosslinked sodium salt of HA modified with a magnesium salt of ascorbic acid phosphoric ester and L-cysteine. The magnitude of the half-cycle of reducing the viscosity of the hydrogel of the final product is 57 hours.
Пример 15. Выполнен аналогично примеру 1, однако в отличие от него в исходную реакционную смесь добавлено 1,2 мг (4·10-6 моля) дигидрокверцетина. Выход 195 мг (100%) композиции, содержащей сшитую натриевую соль ГК, модифицированную аскорбиновой кислотой, и дигидрокверцетин. Величина полупериода снижения вязкости гидрогеля конечного продукта составляет 17 часов.Example 15. Performed analogously to example 1, however, in contrast to it, 1.2 mg (4 · 10 -6 mol) of dihydroquercetin was added to the initial reaction mixture. Yield 195 mg (100%) of a composition containing a crosslinked sodium salt of HA modified with ascorbic acid and dihydroquercetin. The magnitude of the half-cycle of reducing the hydrogel viscosity of the final product is 17 hours.
Пример 16. Выполнен аналогично примеру 14, однако в отличие от него в исходную реакционную смесь добавлено 30 мг (4·10-4 моля) глицина.Example 16. Performed similarly to example 14, but in contrast to it, 30 mg (4 · 10 -4 mol) of glycine was added to the initial reaction mixture.
Выход 294 мг (100%) композиции, содержащей сшитую натриевую соль ГК, модифицированную магниевой солью фосфорного эфира аскорбиновой кислоты, L-цистеин и глицин. Величина полупериода снижения вязкости гидрогеля конечного продукта составляет 60 часов.Yield 294 mg (100%) of a composition containing a crosslinked sodium salt of HA modified with a magnesium salt of ascorbic acid phosphoric ester, L-cysteine and glycine. The magnitude of the half-cycle of reducing the hydrogel viscosity of the final product is 60 hours.
Пример 17. 5,39 г (0,01 моля) сшитой натриевой соли ГК, модифицированной аскорбиновой кислотой, полученной по примеру 13, и 1,21 г (0,01 моля) L-цистеина гомогенизируют в мельнице при 50°С в течение 10 мин. Выход композиции составляет 6,6 г (100%). Величина полупериода снижения вязкости гидрогеля конечного продукта составляет 50 часов.Example 17. 5.39 g (0.01 mol) of the crosslinked sodium salt of HA modified with ascorbic acid obtained in Example 13 and 1.21 g (0.01 mol) of L-cysteine are homogenized in a mill at 50 ° C. for 10 min. The yield of the composition is 6.6 g (100%). The magnitude of the half-cycle of reducing the viscosity of the hydrogel of the final product is 50 hours.
Приведенные примеры убедительно показывают, что создан универсальный экологически безопасный способ, позволяющий получать целый ряд сшитых солей ГК, модифицированной аскорбиновой кислотой, водностадийном технологическом режиме в отсутствии жидкой среды, с получением целевых продуктов с высоким выходом. Способ не требует больших энерго-, трудо- и водозатрат, позволяет использовать в качестве исходных реагентов самые разнообразные, в том числе водонерастворимые соли ГК. Также создана новая биоактивная композиция на основе модифицированной соли ГК, полученной вышеизложенным способом, включающая модифицированную соль ГК и, по крайней мере, одну функциональную добавку, например антиоксидант. Достигнуто значительное увеличение эффективности действия композиции, в частности, стойкость к деструкции в присутствии гидроксильных радикалов увеличена в 7-60 раз.The above examples convincingly show that a universal environmentally friendly method has been created that allows one to obtain a number of crosslinked salts of HA modified with ascorbic acid, a water-stage technological mode in the absence of a liquid medium, and to obtain target products in high yield. The method does not require large energy, labor and water costs, allows you to use as source reagents the most diverse, including water-insoluble salts of HA. Also created a new bioactive composition based on a modified HA salt obtained by the above method, including a modified HA salt and at least one functional additive, for example an antioxidant. A significant increase in the effectiveness of the composition was achieved, in particular, resistance to degradation in the presence of hydroxyl radicals increased by 7-60 times.
Claims (25)
аскорбиновая кислота или сумма аскорбиновой кислоты и по крайней мере одной из ее солей или сумма ее солей к сшивающему агенту или к сумме сшивающих агентов находится в пределах от 1:10 до 1:2.9. The method according to claim 1, characterized in that the molar ratio:
ascorbic acid or the sum of ascorbic acid and at least one of its salts or the sum of its salts to the crosslinking agent or to the sum of the crosslinking agents is in the range from 1:10 to 1: 2.
двухшнековый экструдер с однонаправленным вращением шнеков, двухшнековый экструдер с противоположно направленным вращением шнеков, двухшнековый экструдер с набором кулачков различного типа, например, транспортные, запирающие, перетирающие.17. The method according to clause 16, wherein the apparatus is selected from among:
twin-screw extruder with unidirectional rotation of the screws, twin-screw extruder with oppositely directed rotation of the screws, twin-screw extruder with a set of cams of various types, for example, transport, locking, grinding.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008122424/13A RU2382050C1 (en) | 2008-06-05 | 2008-06-05 | Method for preparing modified ascorbic acid of cross-linked hyaluronic acid salt and based bioactive composition |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008122424/13A RU2382050C1 (en) | 2008-06-05 | 2008-06-05 | Method for preparing modified ascorbic acid of cross-linked hyaluronic acid salt and based bioactive composition |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008122424A RU2008122424A (en) | 2009-12-10 |
| RU2382050C1 true RU2382050C1 (en) | 2010-02-20 |
Family
ID=41489131
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008122424/13A RU2382050C1 (en) | 2008-06-05 | 2008-06-05 | Method for preparing modified ascorbic acid of cross-linked hyaluronic acid salt and based bioactive composition |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2382050C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014172784A1 (en) * | 2013-04-25 | 2014-10-30 | Aluron Biopharma Inc. | Crosslinked hyaluronic acid compositions |
| RU2745124C1 (en) * | 2020-07-02 | 2021-03-22 | Общество с ограниченной ответственностью "МедикалСайнс" | Bioactive composition based on a crosslinked hyaluronic acid salt containing resveratrol and a method of its preparation |
| RU2745123C1 (en) * | 2020-07-02 | 2021-03-22 | Общество с ограниченной ответственностью "МедикалСайнс" | Bioactive composition based on a cross-linked hyaluronic acid salt containing quercetin and a method for its preparation |
| RU2775654C1 (en) * | 2021-11-16 | 2022-07-06 | Общество с ограниченной ответственностью "МедикалСайнс" | Solid-phase method for obtaining phosphorylated hyaluronic acid for cosmetic purposes |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116410346A (en) * | 2021-12-31 | 2023-07-11 | 华熙生物科技股份有限公司 | Reductive hyaluronic acid ester and preparation method thereof |
-
2008
- 2008-06-05 RU RU2008122424/13A patent/RU2382050C1/en active IP Right Revival
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014172784A1 (en) * | 2013-04-25 | 2014-10-30 | Aluron Biopharma Inc. | Crosslinked hyaluronic acid compositions |
| RU2745124C1 (en) * | 2020-07-02 | 2021-03-22 | Общество с ограниченной ответственностью "МедикалСайнс" | Bioactive composition based on a crosslinked hyaluronic acid salt containing resveratrol and a method of its preparation |
| RU2745123C1 (en) * | 2020-07-02 | 2021-03-22 | Общество с ограниченной ответственностью "МедикалСайнс" | Bioactive composition based on a cross-linked hyaluronic acid salt containing quercetin and a method for its preparation |
| RU2775654C1 (en) * | 2021-11-16 | 2022-07-06 | Общество с ограниченной ответственностью "МедикалСайнс" | Solid-phase method for obtaining phosphorylated hyaluronic acid for cosmetic purposes |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2008122424A (en) | 2009-12-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhou et al. | Purification, characterisation and antioxidant activities of chondroitin sulphate extracted from Raja porosa cartilage | |
| RU2382050C1 (en) | Method for preparing modified ascorbic acid of cross-linked hyaluronic acid salt and based bioactive composition | |
| BR9609534B1 (en) | process for preparing a biocompatible cross-linked polysaccharide gel composition, and polysaccharide gel composition. | |
| CN107936272B (en) | Preparation method of 3D cross-linked hyaluronate gel for radiotherapy protection and product thereof | |
| Muslim et al. | Chitosan and carboxymethyl chitosan from fish scales of Labeo rohita | |
| RU2382052C1 (en) | Method of producing cross-linked salt of hyaluronic acid modified with tocopherol and bioactive composition based on said salt | |
| RU2387671C1 (en) | Method for synthesis of cross-linked salt of hyaluronic acid, modified with vitamines | |
| KR20090079413A (en) | The polynucleotide fragments complex separated from fish's semen and its separating process | |
| JP2001002703A (en) | Self-crosslinked alkylcellulose derivative, and its production | |
| JP2020507666A (en) | Decomposition method of polysaccharide using ozone | |
| RU2386640C2 (en) | Method for synthesis of cross-linked riboflavin-modified salt of hyaluronic acid | |
| KR101869988B1 (en) | A composition for preparation of viscoelastic crosslinked hyaluronic acid, and crosslinked hyaluronic acid obtained by using the same | |
| RU2386641C2 (en) | Method for synthesis of cross-linked retinol-modified salt of hyaluronic acid | |
| Milan et al. | Effects of mangosteen peel phenolic compounds on tilapia skin collagen-based mineralized scaffold properties | |
| KR20180010361A (en) | Hyaluronic acid hydrogel and method of forming the hyaluronic acid hydrogel | |
| EP1919959A1 (en) | A method for preparing polyanhydroglucuronic acid and/or salts thereof | |
| RU2387670C1 (en) | Method for synthesis of cross-linked hyaluronic acid salt modified with folic acid | |
| JP2023503894A (en) | Sulfhydryl-modified polymer compound, preparation method and use thereof | |
| Kumari et al. | Chemistry, biological activities, and uses of moringa gum | |
| RU2416389C1 (en) | Solid-phase method of producing bioactive nanocomposite | |
| RU2366665C1 (en) | Method for preparation of cured hyaluronic acid salts | |
| CA3145855A1 (en) | Methods for producing chitosan | |
| CN104292360A (en) | Preparation method of modified konjac glucomannan used for making sustained-release microcapsules | |
| Yang et al. | Controlled chitosan molecular weight reduction by mechanochemical and aging-based phosphoric acid hydrolysis | |
| EP3052529B1 (en) | Single-step functionalization and cross-linking of hyaluronic acid |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100606 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20120127 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180606 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20190605 |