RU2371719C2 - Method of lambliasis invasion diagnostics - Google Patents
Method of lambliasis invasion diagnostics Download PDFInfo
- Publication number
- RU2371719C2 RU2371719C2 RU2007128793/15A RU2007128793A RU2371719C2 RU 2371719 C2 RU2371719 C2 RU 2371719C2 RU 2007128793/15 A RU2007128793/15 A RU 2007128793/15A RU 2007128793 A RU2007128793 A RU 2007128793A RU 2371719 C2 RU2371719 C2 RU 2371719C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cysts
- invasion
- floatation
- vegetative forms
- lambliasis
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической лабораторной диагностике при постановке диагноза лямблиоза и оценке степени инвазированности организма данным паразитом.The invention relates to medicine and can be used in clinical laboratory diagnostics for the diagnosis of giardiasis and assess the degree of invasion of the body by this parasite.
Лямблиоз - (синоним - жиардизм) (возбудитель Lamblia intestinalis (Lamble, 1859) (синонимы, используемые в иностранной литературе - Giardia lamblia, G. intestinalis, G. duodenalis).Giardiasis - (synonym - giardism) (pathogen Lamblia intestinalis (Lamble, 1859) (synonyms used in foreign literature - Giardia lamblia, G. intestinalis, G. duodenalis).
Одним из способов диагностики лямблиоза является исследование фекалий методом нативного мазка и микроскопическое исследование дуоденального содержимого (Паразитарные болезни человека (протозоозы и гельминтозы). Руководство для врачей. - под ред. Сергеева В.П., Лобзина Ю.В., Козлова С.С. // Санкт-Петербург, «Фолиант», 2006, С.128-129.). Указанные способы лабораторной диагностики лямблиоза обладают недостаточной чувствительностью, так как не являются методами обогащения и не позволяют оценить количественно степень инвазии по количеству цист в исследуемом материале.One of the ways to diagnose giardiasis is to study feces using the native smear method and microscopic examination of duodenal contents (Human parasitic diseases (protozoa and helminth infections). A guide for doctors. - Edited by Sergeev V.P., Lobzina Yu.V., Kozlova S.S. . // St. Petersburg, “Tome”, 2006, S.128-129.). The indicated methods for laboratory diagnosis of giardiasis have insufficient sensitivity, since they are not enrichment methods and do not allow quantifying the degree of invasion by the number of cysts in the test material.
Наиболее близким к нашему изобретению является комбинированный метод исследования фекалий человека с целью выявления цист лямблий, использующий в качестве флотационной жидкости 33%-ный раствор сульфата цинка (ZNSO4) (Генис Д.Е. Медицинская паразитология. - М., «Медицина», 1991, С.164).Closest to our invention is a combined method for the study of human feces with the aim of identifying lamblia cysts using a 33% solution of zinc sulfate (ZNSO 4 ) as flotation fluid (Genis D.E. Medical parasitology. - M., "Medicine", 1991, p. 164).
Существенными недостатками этого метода являются низкая диагностическая эффективность и невозможность количественного учета полученных результатов.Significant disadvantages of this method are the low diagnostic efficiency and the inability to quantify the results.
Целью изобретения является улучшение диагностики лямблиоза, осуществление количественной оценки степени инвазии.The aim of the invention is to improve the diagnosis of giardiasis, the quantification of the degree of invasion.
Способ осуществляется следующим образом: для приготовления флотационных смесей ингредиентами служат насыщенные водные растворы хлорида цинка (ZnCl2, ρ-1,82), хлорида натрия (NaCl, ρ-1,19) и глицерин (Ч). Удельный вес приготовленных флотационных растворов определяют с помощью денсиметра при t 25 С°. Используется трехингредиентный флотационный раствор, состоящий из хлористого цинка, глицерина и хлористого натрия в соотношении 1:1:1 (объем / объем / объем).The method is as follows: for the preparation of flotation mixtures, the ingredients are saturated aqueous solutions of zinc chloride (ZnCl 2 , ρ-1.82), sodium chloride (NaCl, ρ-1.19) and glycerin (H). The specific gravity of the prepared flotation solutions is determined using a densimeter at t 25 ° C. A tri-ingredient flotation solution is used, consisting of zinc chloride, glycerol and sodium chloride in a ratio of 1: 1: 1 (volume / volume / volume).
Исследование фекалий: свежую пробу фекалий массой 1 грамм суспендируют в 10 мл воды, фильтруют через металлический фильтр с величиной пор 0,5×0,5 мм. Полученный фильтрат центрифугировали при 1500 g в течение 5 мин. Затем полученный осадок суспендируют во флотационном растворе и центрифугируют при 1500 g в течение 5 мин. Всплывающие цисты, концентрирующиеся в поверхностной пленке раствора, снимают при помощи стандартной металлической петли и подсчитывают их количество в объеме 0,2 мл флотационной жидкости без покровного стекла при окуляре с увеличением, кратным ×8, и объективе с увеличением, кратным ×20.Study of feces: a fresh sample of feces weighing 1 gram is suspended in 10 ml of water, filtered through a metal filter with a pore size of 0.5 × 0.5 mm. The resulting filtrate was centrifuged at 1500 g for 5 minutes. Then, the precipitate obtained is suspended in a flotation solution and centrifuged at 1500 g for 5 minutes. Pop-up cysts concentrated in the surface film of the solution are removed using a standard metal loop and their amount is counted in a volume of 0.2 ml of flotation fluid without a cover glass with an eyepiece with a magnification of × 8 and a lens with a magnification of × 20.
Степень инвазии оценивают как низкую при обнаружении 1-2 цисты или вегетативные формы в поле зрения (1 степень); средняя - при обнаружении до 5 цист или вегетативных форм в поле зрения (2 степень); высокая - до 10 (3 степень); очень высокая более 10 цист или вегетативных форм в поле зрения (4 степень).The degree of invasion is evaluated as low upon detection of 1-2 cysts or vegetative forms in the field of view (1 degree); medium - when detecting up to 5 cysts or vegetative forms in the field of view (2 degree); high - up to 10 (3 degree); very high more than 10 cysts or vegetative forms in the field of view (4 degree).
Исследование дуоденального содержимого: пробу желчи порция А, В, С, (дуоденального содержимого) объемом в 1 мл суспендируют в 10 мл воды, фильтруют. Полученный фильтрат центрифугируют при 1500 g в течение 5 мин. Полученный осадок суспендируют во флотационном растворе и центрифугируют при 1500 g в течение 5 мин. Всплывающие цисты, концентрирующиеся в поверхностной пленке раствора, снимают при помощи стандартной металлической петли и подсчитывают в объеме 0,2 мл флотационной жидкости без покровного стекла при окуляре с увеличением, кратным ×8, и объективе ×20.Examination of duodenal contents: a sample of bile A, B, C portion (duodenal contents) in a volume of 1 ml is suspended in 10 ml of water, filtered. The resulting filtrate was centrifuged at 1500 g for 5 minutes. The resulting precipitate was suspended in a flotation solution and centrifuged at 1500 g for 5 minutes. Pop-up cysts concentrated in the surface film of the solution are removed using a standard metal loop and counted in a volume of 0.2 ml of flotation fluid without a coverslip with an eyepiece with a magnification of × 8 and a lens × 20.
Степень инвазии оценивают как низкую при обнаружении 1-2 цисты или вегетативные формы в поле зрения (1 степень); средняя - при обнаружении до 5 цист или вегетативных форм в поле зрения (2 степень); высокая - до 10 (3 степень); очень высокая более 10 цист или вегетативных форм в поле зрения (4 степень).The degree of invasion is evaluated as low upon detection of 1-2 cysts or vegetative forms in the field of view (1 degree); medium - when detecting up to 5 cysts or vegetative forms in the field of view (2 degree); high - up to 10 (3 degree); very high more than 10 cysts or vegetative forms in the field of view (4 degree).
За счет использования комбинированного метода исследования фекалий с многокомпонентной флотационной системой удалось решить следующие задачи:Due to the use of a combined method for the study of feces with a multicomponent flotation system, the following problems were solved:
- увеличение времени кристаллизации (за счет глицерина), что позволяет при использовании насыщенных растворов увеличить время просмотра образцов;- increase in crystallization time (due to glycerol), which allows using saturated solutions to increase the viewing time of samples;
- подбора оптимальной для выявления цист лямблий и самих вегетативных форм удельной плотности флотационной жидкости за счет хлористого цинка;- selection of the optimum specific gravity of flotation fluid for detecting lamblia cysts and vegetative forms themselves due to zinc chloride;
- уменьшением себестоимости анализа за счет использования хлористого натрия и глицерина.- reducing the cost of analysis due to the use of sodium chloride and glycerol.
Заявленный способ позволяет обеспечить повышение выявляемости цист Lamblia intestinalis в фекалиях и дуоденальном содержимом человека и количественно оценить степень инвазии.The claimed method allows to increase the detection of cysts of Lamblia intestinalis in the feces and duodenal contents of a person and to quantify the degree of invasion.
В условиях клинической лаборатории поликлиники при ФГУН «КНИИЭМ» Роспотребнадзора нами при использовании этой методики удавалось обнаружить у 49% обследованных цисты или вегетативные формы лямблий. При параллельном исследовании общепринятым методом нативного мазка лямблиоз был диагностирован лишь у 39,7% обследованных. Следовательно, патентуемый нами копроскопический метод исследования фекалий позволил дополнительно выявить 9,3% лиц, инвазированных L. intestinalis. Это обусловлено использованием сочетания этапов седиментации и флотации в многокомпонентной флотационной системе, которая была положена в основу данного метода. Отдельно отметим, что компоненты предлагаемой нами флотационной системы не нарушают морфологию цист лямблий, не создают затруднений с морфологической идентификацией возбудителя и позволяют избирательно концентрировать цисты простейших. В предлагаемом методе в отличие от метода нативного мазка используется определенный объем каловых масс (1 г), что позволяет рассматривать его как полуколичественный. Таким образом, предлагаемый способ может использоваться в комплексной диагностике лямблиозной инвазии.In the conditions of the clinical laboratory of the polyclinic at the Federal State Institution of Scientific Research and Management for the Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare, using this technique, we were able to detect cysts or vegetative forms of giardia in 49% of the examined patients. In a parallel study using the conventional native smear method, giardiasis was diagnosed only in 39.7% of the examined. Therefore, the coproscopic method of feces research we patented made it possible to additionally identify 9.3% of individuals invaded by L. intestinalis. This is due to the use of a combination of the stages of sedimentation and flotation in a multicomponent flotation system, which was the basis of this method. We note separately that the components of our flotation system do not violate the morphology of Giardia cysts, do not create difficulties with the morphological identification of the pathogen, and allow selective concentration of protozoa cysts. In the proposed method, in contrast to the native smear method, a certain amount of feces (1 g) is used, which allows us to consider it as semi-quantitative. Thus, the proposed method can be used in the comprehensive diagnosis of giardiasis invasion.
Пример (лабораторный номер - №46) Ребенок 7 лет, с неотягощенной наследственностью, от 1-й беременности. С 4 лет сочетанно с желудочно-кишечными симптомами заметили появление приступов учащенного дыхания, стойкую субфебрильную температуру тела. По направлению участкового педиатра обратились в консультативно-диагностическую аллергологическую поликлинику ФГУН КНИЭМ Роспотребнадзора. Врач аллерголог назначил ребенку следующее обследование: OAK, обзорную рентгенограмму органов грудной клетки, исследование кала на простейших и яйца гельминтов, уровень общего и специфического IgE. При исследовании крови была обнаружена гипохромная анемия. На рентгенограмме грудной клетки определялась небольшая инфильтрация в прикорневых зонах легких. В анализах крови -эозинофилия до 10% и увеличение СОЭ (до 25 мм / ч). Содержание сывороточного IgE - 0,17 г /л; IgM - 0,73 г /л; IgG - 5,07 г /л. Уровень циркулирующих иммунных комплексов до 45 единиц.Example (laboratory number - No. 46) A child of 7 years old, with an unburdened heredity, from the 1st pregnancy. From the age of 4, combined with gastrointestinal symptoms, noticed the appearance of attacks of rapid breathing, persistent low-grade fever. In the direction of the local pediatrician, they turned to the consultative diagnostic allergology polyclinic of the Federal State Institution of Health Protection, KNIEM Rospotrebnadzor. An allergist doctor prescribed the following examination for the child: OAK, an X-ray of the chest organs, a study of feces on protozoa and helminth eggs, the level of general and specific IgE. A blood test revealed hypochromic anemia. On the chest x-ray, a small infiltration was determined in the basal zones of the lungs. In blood tests, eosinophilia is up to 10% and an increase in ESR (up to 25 mm / h). The content of serum IgE - 0.17 g / l; IgM - 0.73 g / l; IgG - 5.07 g / l. The level of circulating immune complexes is up to 45 units.
При исследовании методом нативного мазка пробы фекалий данного пациента эмульгировали в капле раствора Люголя на предметном стекле.In a native smear test, the feces of a given patient were emulsified in a drop of Lugol's solution on a glass slide.
Нативный препарат рассматривали при окуляре с увеличением, кратным ×10, и объективе ×40. При этом цисты или вегетативные формы лямблий выявлены не были.The native preparation was examined with an eyepiece with a magnification that is a multiple of × 10 and a lens × 40. In this case, cysts or vegetative forms of giardia were not detected.
Далее был применен патентуемый нами метод. Пробу фекалий больного исследовали следующим образом: свежую пробу фекалий массой 1 грамм суспендировали в 10 мл воды, фильтровали через металлический фильтр с величиной пор 0,5×0,5 мм. Полученный фильтрат центрифугировали при 1500 g в течение 5 мин. Затем полученный осадок суспендировали во флотационном растворе и центрифугировали при 1500 g в течение 5 мин. Поверхностную пленку снимали при помощи стандартной металлической петли. Использовали окуляр с увеличением, кратным ×8, и объектив с увеличением, кратным ×20.Next, the method we patented was applied. The patient’s feces sample was examined as follows: a fresh 1 gram feces sample was suspended in 10 ml of water, filtered through a metal filter with a pore size of 0.5 × 0.5 mm. The resulting filtrate was centrifuged at 1500 g for 5 minutes. Then, the obtained precipitate was suspended in a flotation solution and centrifuged at 1500 g for 5 min. The surface film was removed using a standard metal loop. An eyepiece with a magnification that was a multiple of × 8 and a lens with a magnification that was a multiple of × 20 were used.
При помощи предлагаемого нами комбинированного метода исследования были выявлены 3-4 цисты Lamblia intestinalis в поле зрения (средняя степень инвазии), что было оценено врачом-лаборантом как лямблиоз кишечника, и проведена противопаразитарная терапия.Using our combined research method, 3-4 Lamblia intestinalis cysts were detected in the field of view (medium invasion), which was evaluated by a laboratory assistant as giardiasis and antiparasitic therapy was performed.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007128793/15A RU2371719C2 (en) | 2007-07-17 | 2007-07-17 | Method of lambliasis invasion diagnostics |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007128793/15A RU2371719C2 (en) | 2007-07-17 | 2007-07-17 | Method of lambliasis invasion diagnostics |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2007128793A RU2007128793A (en) | 2009-01-27 |
| RU2371719C2 true RU2371719C2 (en) | 2009-10-27 |
Family
ID=40543883
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007128793/15A RU2371719C2 (en) | 2007-07-17 | 2007-07-17 | Method of lambliasis invasion diagnostics |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2371719C2 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2472154C2 (en) * | 2010-12-27 | 2013-01-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины" (ФГБОУ ВПО СПГАВМ) | Liquid of diagnostics of coccidia oocysts, cysts of balantidium coli and giardia, helminth eggs of different classes, mites, insects, separate stages of their development |
| RU2508073C2 (en) * | 2012-05-30 | 2014-02-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана" | Method of diagnosing parasites of birds |
-
2007
- 2007-07-17 RU RU2007128793/15A patent/RU2371719C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ГАЛУШКИНА Т.П. и др. Диагностика лямблиоза у детей с помощью иммуноферментного анализа. "Новости "Вектор-Бест", №4 (30). Декабрь 2003 [Содержание]. Найдено в Интернет 12.12.2008. Медицинские и лабораторные технологии. Справочник. / Под общ. Ред. А.И.Карпищенко. - СПб.: Интермедика, 1998. - T.1 - c.342, 347-349. * |
| ГЕНИС Д.Е. Медицинская паразитология. - М.: Медицина, 1991, с.164. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2472154C2 (en) * | 2010-12-27 | 2013-01-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины" (ФГБОУ ВПО СПГАВМ) | Liquid of diagnostics of coccidia oocysts, cysts of balantidium coli and giardia, helminth eggs of different classes, mites, insects, separate stages of their development |
| RU2508073C2 (en) * | 2012-05-30 | 2014-02-27 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана" | Method of diagnosing parasites of birds |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2007128793A (en) | 2009-01-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ayele et al. | Evaluation of circulating cathodic antigen (CCA) strip for diagnosis of urinary schistosomiasis in Hassoba school children, Afar, Ethiopia | |
| Zeleke et al. | Evaluation of hookworm diagnosis techniques from patients in Debre Elias and Sanja Districts of the Amhara Region, Ethiopia | |
| Oguoma et al. | The need for a better method: comparison of direct smear and formol-ether concentration techniques in diagnosing intestinal parasites | |
| RU2371719C2 (en) | Method of lambliasis invasion diagnostics | |
| RU2525437C1 (en) | Method for determining oxidative protein modification in substance pool of average molecular weight in blood serum, plasma, erythrocyte, and in urine | |
| RU2368324C1 (en) | Method of diagnosing ascaridiasis in people | |
| Mohammed et al. | Prevalence of intestinal parasitic infections among patients attended to Alribat University hospital, Khartoum State, Sudan, 2017 | |
| Tuncer et al. | Urine Dataset having eight particles classes | |
| RU2683324C2 (en) | Kit for complex diagnostics of endoparazites of animals by coproscopy | |
| Nyeke et al. | Prevalence of intestinal amoebiasis in infant and junior school children in Degema General Hospital and Environs | |
| JP2553606B2 (en) | Method for separating and using density-specific blood cells | |
| RU2586291C1 (en) | Method for diagnosing severe psoriasis in adults | |
| Wood | Chemical and microscopical diagnosis | |
| Ashankyty | Practical Manual for Detection of Parasites in Feces, Blood and Urine Samples | |
| RU2800319C1 (en) | Method of identification of causative agents of intestinal parasitic diseases of dogs using artificial neural networks | |
| RU2440580C1 (en) | Method of determining kidney functional condition | |
| Elrayah et al. | Evaluation of serodiagnostic tests for Tb gambiense human African trypanosomiasis in southern Sudan | |
| Cooppan et al. | Urinalysis reagent strips in the screening of children for urinary schistosomiasis in the RSA | |
| RU2312606C1 (en) | Method for predicting body state | |
| Ekwebene et al. | Asymptomatic Bacteuria among Healthy Cohort Using Dipstick Urinalysis from a Tertiary Health Care Facility in South East Nigeria | |
| RU2353930C2 (en) | METHOD OF RAPID BLOOD SERUM ANALYSIS FOR b-LIPOPROTEIDS | |
| Faraj et al. | A Coprological Diagnostic Comparison Between Zinc Sulphate Floatation and Formalin: Ether Sedimentation with Two Natural Extracts (Pomegranate Molasses and Honey) | |
| CN117147243A (en) | Accuracy control substance for use in urine sediment analyzer | |
| Zeleke et al. | Evaluation of Hookworm Diagnosis Techniques from Patients in Amhara Region, Ethiopia: Cross sectional study | |
| Al-Omary et al. | Lymphocyte Apoptosis in Third Trimester of Pregnancy. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100718 |