RU2318529C1

RU2318529C1 - Means for preventing and correcting spermatogenesis disorders caused by cytostatic treatment

Info

Publication number: RU2318529C1
Application number: RU2006134077/15A
Authority: RU
Inventors: Евгений Данилович Гольдберг; Татьяна Геннадьевна Боровская; Юлия Александровна Щемерова; Евгения Анатольевна Тимина; Ангелина Владимировна Пахомова; Анна Владимировна Перова
Priority date: 2006-09-25
Filing date: 2006-09-25
Publication date: 2008-03-10

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: method involves administering Leuzea (Rhaponticum carthamoides) extract for treating spermatogenesis disorders.

EFFECT: enhanced effectiveness of treatment; low toxicity; reduced risk of adverse side effects.

3 dwg

Description

Изобретение относится к области экспериментальной медицины и касается средства профилактики и коррекции нарушений сперматогенеза, вызванного цитостатическим воздействием.The invention relates to the field of experimental medicine and relates to a means of preventing and correcting spermatogenesis disorders caused by cytostatic effects.

Цитостатические препараты независимо от механизма их противоопухолевого действия обладают выраженным токсическим действием на активно делящиеся нормальные (не поврежденные опухолью) ткани организма. К числу последних принадлежит сперматогенный эпителий семенников [2], в котором благодаря постоянным клеточным делениям происходит созревание мужских половых клеток - сперматогенез. Нарушение сперматогенеза, наблюдаемое на фоне цитостатического воздействия, по этиологии, патогенезу отличается от других видов патологических процессов, которые сопровождаются угнетением сперматогенеза (травмы, воспаление, эндокринные расстройства, генетические заболевания). В течение последних лет произошел значительный прогресс в цитостатическом лечении целого ряда злокачественных новообразований. Некоторые формы опухолей являются принципиально излечимыми [10]. Для мужчин с высокими показателями безрецидивной выживаемости актуальной становится проблема бесплодия как возможного последствия токсического действия цитостатической химиотерапии на сперматогенез [13]. Актуальной в связи с этим является также проблема защиты гонад от цитостатического воздействия [7]Cytotoxic drugs, regardless of the mechanism of their antitumor action, have a pronounced toxic effect on actively dividing normal (not damaged by a tumor) body tissues. The spermatogenous epithelium of the testes is among the latter [2], in which, thanks to constant cell divisions, male germ cells mature — spermatogenesis. The violation of spermatogenesis, observed against the background of cytostatic effects, differs in etiology and pathogenesis from other types of pathological processes that are accompanied by inhibition of spermatogenesis (trauma, inflammation, endocrine disorders, genetic diseases). In recent years, significant progress has been made in the cytostatic treatment of a number of malignant neoplasms. Some forms of tumors are fundamentally treatable [10]. For men with high rates of relapse-free survival, the problem of infertility as a possible consequence of the toxic effects of cytostatic chemotherapy on spermatogenesis is becoming relevant [13]. Also relevant in this regard is the problem of protecting the gonads from cytostatic effects [7]

Известен ряд лекарственных препаратов синтетического и природного происхождения, используемых в качестве средств, снижающих токсическое действие цитостатических препаратов на сперматогенез. К числу средств синтетического происхождения принадлежит фосфомицин. При сочетанном его введении с платиносодержащим цитостатическим препаратом цисплатином выявляется нормализация гистологического строения семенников крыс и восстановление сперматогенеза [15]. Фосфомицин снижает токсическое действие цисплатина на нормальные (не поврежденные опухолью) ткани организма, в том числе и на семенники, за счет нормализации функции почек.A number of drugs of synthetic and natural origin are known that are used as agents that reduce the toxic effect of cytostatic drugs on spermatogenesis. Among the synthetic products is fosfomycin. When combined with a platinum-containing cytostatic drug cisplatin, normalization of the histological structure of rat testes and restoration of spermatogenesis are detected [15]. Fosfomycin reduces the toxic effect of cisplatin on normal (not damaged by a tumor) body tissues, including the testes, due to the normalization of kidney function.

Недостатком использования фосфомицина является ограниченность его использования. Его применение целесообразно преимущественно при терапии цитостатическими препаратами, характеризующимися выраженными нефротоксическими свойствами. Таковыми являются, в основном, платиносодержащие цитостатические препараты, в частности цисплатин [2, 3].The disadvantage of using fosfomycin is its limited use. Its use is advisable mainly in the treatment of cytotoxic drugs, characterized by pronounced nephrotoxic properties. These are mainly platinum-containing cytostatic drugs, in particular cisplatin [2, 3].

Недостатком этого корректора является также отсутствие данных о его влиянии на опухолевый рост, что является важным, так как он будет использоваться для онкологических больных.The disadvantage of this corrector is also the lack of data on its effect on tumor growth, which is important, since it will be used for cancer patients.

К числу средств природного происхождения принадлежит лекарственный препарат тестестерон. Имплантирование за 8-12 недель до введения цитостатического препарата (прокарбазина) содержащих тестестерон силиконовых трансплантатов оказывает защитное действие на сперматогенез [14]. Препарат природного происхождения тестестерон относится к патогенетически обоснованным специфическим стимуляторам сперматогенеза. Тестестерон является наиболее близким прототипом к заявляемому средству по природе происхождения, по достигаемому результату и выбран в качестве прототипа.Among the funds of natural origin belongs to the drug testosterone. Implantation 8-12 weeks before the administration of a cytotoxic drug (procarbazine) containing silicone testosterone transplants has a protective effect on spermatogenesis [14]. The drug of natural origin testosterone refers to pathogenetically substantiated specific stimulants of spermatogenesis. Testosterone is the closest prototype to the claimed tool by nature of origin, by the achieved result and is selected as a prototype.

Недостатком тестестерона является наличие целого ряда побочных эффектов. Он может вызывать отеки, гиперкальциемию, головокружение, гинекомастию, тошноту, тромбофлебит, холецистическую желтуху, повышение уровня аминотрансфераз и др. Его использование противопоказано при нарушениях функции печени, почек, при сердечной недостаточности, в пожилом возрасте у мужчин [1]. Кроме того, он показан для применения не всем онкологическим больным [1]. Одним из недостатков тестестерона является трудоемкость его использования: он трансплантируется подкожно в виде капсул. Его необходимо вводить задолго до введения цитостатического препарата. Последнее для онкологических больных не желательно, так как лечение опухоли должно проводиться как можно в более ранние сроки после ее выявления.The disadvantage of testosterone is the presence of a number of side effects. It can cause edema, hypercalcemia, dizziness, gynecomastia, nausea, thrombophlebitis, cholecystic jaundice, increased levels of aminotransferases, etc. Its use is contraindicated in cases of impaired liver, kidney, heart failure, and elderly men [1]. In addition, it is indicated for use not by all cancer patients [1]. One of the drawbacks of testosterone is the complexity of its use: it is transplanted subcutaneously in the form of capsules. It must be administered long before the administration of the cytostatic drug. The latter is not advisable for cancer patients, since the treatment of the tumor should be carried out as early as possible after its detection.

Задачей, решаемой данным изобретением, является расширение арсенала средств, используемых для профилактики и коррекции нарушения сперматогенеза, вызванного цитостатическим воздействием, сокращение побочных эффектов, расширение сферы использования, упрощение способа применения.The problem solved by this invention is to expand the arsenal of tools used for the prevention and correction of disorders of spermatogenesis caused by cytostatic effects, reducing side effects, expanding the scope of use, simplifying the method of application.

Поставленная задача решается путем применения в качестве средства для профилактики и коррекции нарушения сперматогенеза, вызванного цитостатическим воздействием, экстракта левзеи сафлоровидной (Rhaponticum carthamoides).The problem is solved by using as an agent for the prevention and correction of spermatogenesis disorders caused by cytostatic effects, safflower-like extract of Rhaponticum carthamoides.

Новым является то, что экстракт левзеи сафлоровидной используют в качестве средства профилактики и коррекции нарушения сперматогенеза, вызнанного цитостатическим воздействием.What is new is that safflower-like lewsee extract is used as a means of preventing and correcting spermatogenesis disorders caused by cytostatic effects.

Экстракт левзеи сафлоровидной (Rhaponticum carthamoides) обладает широким спектром биологической активности. Экстракт левзеи является тонизирующим и стимулирующим средством при функциональных расстройствах ЦНС, умственном и физическом утомлении, импотенции и хроническом алкоголизме [12]. Установлено также, что препарат эффективен при сердечно-сосудистых патологиях [9]. В настоящее время показана возможность и целесообразность использования экстракта левзеи сафлоровидной в онкологической практике. Установлено, что он обладает умеренными противоопухолевым и антиметастатическим действием [5]. Препараты левзеи малотоксичны, хорошо переносятся больными. Противопоказаний к применению препаратов левзеи не выявлено [12]. Экстракт левзеи удобен для применения, так как используется перорально.Extract of safflower-like leuzea (Rhaponticum carthamoides) has a wide spectrum of biological activity. Leuzea extract is a tonic and stimulant for functional disorders of the central nervous system, mental and physical fatigue, impotence, and chronic alcoholism [12]. It was also established that the drug is effective in cardiovascular pathologies [9]. At present, the feasibility and feasibility of using safflower levzea extract in oncological practice has been shown. It has been established that it has moderate antitumor and antimetastatic effects [5]. Levzea preparations are low toxic, well tolerated by patients. There are no contraindications to the use of leuzea preparations [12]. Leuzea extract is convenient for use, as it is used orally.

В результате проведенных нами экспериментальных исследований обнаружено неизвестное до сих пор свойство экстракта левзеи сафлоровидной - оказывать профилактическое и коррегирующее действие на процесс сперматогенеза, нарушенный цитостатическим воздействием.As a result of our experimental studies, a property of the safflower-like Leuzea extract, hitherto unknown, has been discovered - to provide a preventive and corrective effect on the spermatogenesis process, impaired by cytostatic effects.

Новое свойство экстракта левзеи сафлоровидной является для специалиста фактом неочевидным и не вытекает из уровня техники, может быть использовано в медицинской практике в качестве средства для профилактики и коррекции нарушения сперматогенеза, вызванного цитостатическим воздействием. Таким образом, предлагаемое техническое решение соответствует критериям патентоспособности изобретения, а именно «новизна», «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».The new property of safflower-like leuzea extract is not obvious for a specialist and does not follow from the prior art; it can be used in medical practice as a means for the prevention and correction of spermatogenesis disorders caused by cytostatic effects. Thus, the proposed technical solution meets the criteria of patentability of the invention, namely, "novelty", "inventive step" and "industrial applicability".

Данное изобретение будет понятно из следующего описания и приложенных к нему чертежей.The invention will be apparent from the following description and the accompanying drawings.

На фиг.1 изображены данные подсчета канальцев со спущенным эпителием в семенниках крыс контрольной группы, а также на 16-й день после введения вепезида и сочетанного введения вепезида и экстракта левзеи сафлоровидной (

контроль,

вепезид,

вепезид + левзея; * - различия достоверны по сравнению с контролем, ** - различия достоверны по сравнению с вепезидом).Figure 1 shows the counting data of tubules with deflated epithelium in the testes of rats in the control group, as well as on the 16th day after the administration of vepezid and the combined administration of vepezid and safflower-like levzea extract (

the control,

vepezid

Vepeside + Leuzea; * - the differences are significant in comparison with the control, ** - the differences are significant in comparison with the vepezid).

На фиг.2 изображены данные подсчета общего количества сперматозоидов, приходящихся на придаток, у крыс контрольной группы, а также у животных, получавших один вепезид и вепезид на фоне введения экстракта левзеи сафлоровидной (

контроль,

вепезид,

вепезид + левзея. Белой стрелкой отмечены точки, имеющие достоверные различия по сравнению с контролем, черной - по сравнению с группой животных, получавших вепезид; при Р≤0,05).Figure 2 shows the counting data of the total number of sperm per appendage in rats of the control group, as well as in animals treated with one vepezid and vepezid against the background of the introduction of safflower-like levzea extract (

the control,

vepezid

Vepeside + Leuzea. The white arrow marks the points that have significant differences compared with the control, the black arrow - in comparison with the group of animals treated with vepezid; at P≤0.05).

На фиг.3 представлены результаты подсчета количества патологических форм сперматозоидов у крыс контрольной группы, животных, получавших вепезид и вепезид на фоне введения экстракта левзеи сафлоровидной (

контроль,

вепезид,

вепезид + левзея. Белой стрелкой отмечены точки, имеющие достоверные различия по сравнению с контролем при Р≤0,05, черной - по сравнению с группой животных, получавших вепезид; при Р≤0,05).Figure 3 presents the results of counting the number of pathological forms of sperm in rats of the control group, animals treated with vepezid and vepezid against the background of the introduction of safflower-like levzea extract (

the control,

vepezid

Vepeside + Leuzea. The white arrow marks the points that have significant differences compared with the control at P≤0.05, the black arrow - compared to the group of animals treated with vepezid; at P≤0.05).

Эксперименты проведены на 60 белых беспородных крысах-самцах, 20 из которых составили контрольную группу животных. В качестве модели цитостатического воздействия был выбран широко используемый в онкологической практике препарат, принадлежащий к группе ингибиторов топоизомеразной активности вепезид (этопозид, Тева, Израиль). Вепезид обладает выраженным токсическим действием на сперматогенез [4].The experiments were carried out on 60 white outbred male rats, 20 of which made up the control group of animals. A drug widely used in oncological practice, which belongs to the group of topeisomerase activity inhibitors vepezid (etoposide, Teva, Israel), was chosen as a model of cytostatic effects. Vepeside has a pronounced toxic effect on spermatogenesis [4].

Пример. Экспериментальные животные разделяются на 3 группы. Крысам первой группы вводим вепезид, однократно внутривенно в максимально переносимой дозе, равной 30 мг/кг, рассчитанной методом графического пробит анализа. Крысы второй группы получают экстракт левзеи сафлоровидной (Rhaponticum carthamoides) внутрижелудочно в дозе 1 мл/кг за 5 дней до и в течение 5 дней после введения вепезида. Крысы контрольной группы получают эквиобъемное количество растворителя. Состояние сперматогенеза оценивают по морфологической картине семенников, а также общему количеству мужских половых клеток и числу их патологических форм. С этой целью животных забивают (методом смещения шейных позвонков) на 2, 16, 30 и 90-е сут после введения вепезида (по 5 животных на каждый срок эксперимента). Длительность эксперимента определяют на основании продолжительности процесса созревания сперматозоидов у крыс и возможности фиксации обратимости выявленных изменений [9]. Для изучения морфологического состояния семенников их извлекают, фиксируют в жидкости Карнуа, готовят парафиновые срезы. Депарафинированные срезы толщиной 5 мкм окрашивают гематоксилин-эозином. При морфологическом анализе подсчитывают количество канальцев со спущенным эпителием (рассчет проводят на 100 канальцев) [11]. Для подсчета общего количества сперматозоидов, приходящихся на придаток, используют гомогенизированную клеточную взвесь эпидидимиса в дозированном количестве физиологического раствора с применением лейкоцитарного меланжера и камеры Горяева [11]. Второй придаток семенника разрезают на предметном стекле и делают мазок. Мазок фиксируют в метиловом спирте, окрашивают азур-эозином и подсчитывают процент патологических форм зрелых сперматозоидов [8]. Результаты исследований обрабатывают статистически с помощью критерия Вилкоксона-Манна-Уитни [6].Example. Experimental animals are divided into 3 groups. We administer vepezid to the rats of the first group, once intravenously at the maximum tolerated dose of 30 mg / kg, calculated by the graphic probit analysis. Rats of the second group receive extract of safflower-like leuzea (Rhaponticum carthamoides) intragastrically at a dose of 1 ml / kg 5 days before and within 5 days after the administration of vepezid. Rats in the control group receive an equivolume amount of solvent. The state of spermatogenesis is assessed by the morphological picture of the testes, as well as the total number of male germ cells and the number of their pathological forms. For this purpose, animals are killed (by the method of cervical vertebrae displacement) on the 2nd, 16th, 30th and 90th days after the administration of vepezid (5 animals for each duration of the experiment). The duration of the experiment is determined on the basis of the duration of the sperm maturation process in rats and the possibility of fixing the reversibility of the revealed changes [9]. To study the morphological state of the testes, they are removed, fixed in Carnoy fluid, and paraffin sections are prepared. 5 micron thick dewaxed sections were stained with hematoxylin-eosin. During morphological analysis, the number of tubules with a deflated epithelium is counted (calculation is performed for 100 tubules) [11]. To calculate the total number of sperm per appendage, a homogenized cell suspension of epididymis in a dosed amount of physiological saline using a leukocyte melanger and Goryaev’s chamber is used [11]. The second appendage of the testis is cut on a glass slide and a smear is done. The smear is fixed in methyl alcohol, stained with azure-eosin and the percentage of pathological forms of mature spermatozoa is counted [8]. The research results are processed statistically using the Wilcoxon-Mann-Whitney test [6].

Гистологический анализ показал, что в семенниках крыс, получавших вепезид, на фоне отека интерстиция и гиперемии сосудов наблюдались выраженные деструктивные и дистрофические изменения эпителиоцитов. Часть извитых семенных канальцев атрофировалась, в просвете других нередко можно было наблюдать скопление погибших (спущенных) клеток. Наиболее значительное слущивание эпителиальных клеток выявлялось на 16-й день опыта. Из фиг.1 видно, что на 16-е сут опыта количество канальцев со спущенным эпителием в семенниках крыс, получавших вепезид, возрастало в 2 раза по сравнению с контролем и составило 4,6±0.6 (в контроле - 1,75±0,25; Р≤0,05). В семенниках крыс, получавших вепезид на фоне введения экстракта левзеи сафлоровидной, морфологические признаки повреждения были выражены в меньшей степени, чем на фоне введения одного цитостатического препарата. Менее выраженными были явления отека и деструктивные изменения эпителиоцитов. Количественным подтверждением меньшей выраженности деструктивных изменений является снижение количества канальцев со спущенным эпителием. Из фиг.1 видно, что этот показатель у крыс, получавших сочетанное введение препаратов, на 16-е сут опыта был достоверно снижен, чем при введении одного вепезида и составил 2,25±0,25, и оказался сходным с таковым в группе контрольных животных.Histological analysis showed that pronounced destructive and dystrophic changes in epithelial cells were observed in the testes of rats treated with vepezid, against the background of interstitial edema and vascular hyperemia. Part of the convoluted seminiferous tubules atrophied, in the lumen of others it was often possible to observe an accumulation of dead (deflated) cells. The most significant desquamation of epithelial cells was detected on the 16th day of the experiment. Figure 1 shows that on the 16th day of the experiment, the number of tubules with deflated epithelium in the testes of rats treated with Vepesid increased by 2 times compared to the control and amounted to 4.6 ± 0.6 (in the control - 1.75 ± 0, 25; P≤0.05). In the testes of rats treated with vepezid against the background of the introduction of safflower-like Leuzea extract, morphological signs of damage were less pronounced than with the administration of a single cytostatic drug. Less pronounced were the phenomena of edema and destructive changes in epithelial cells. Quantitative confirmation of the lesser severity of destructive changes is a decrease in the number of tubules with a deflated epithelium. From figure 1 it can be seen that this indicator in rats receiving combined administration of drugs on the 16th day of the experiment was significantly reduced than with the introduction of Vepeside and amounted to 2.25 ± 0.25, and was similar to that in the control group animals.

Из фиг.2 видно, что введение вепезида вызывает значительное снижение общего количества половых клеток, приходящихся на придаток, на 2, 16 и 30-е дни опыта по сравнению с контролем. Максимальное снижение этого показателя выявлялось на 30 сут опыта. При сочетанием введении препаратов общее количество половых клеток оказалось выше с 16 по 30-й день опыта на 40-50% по сравнению с таковым при введении одного вепезида.Figure 2 shows that the introduction of vepezid causes a significant decrease in the total number of germ cells per appendage on the 2nd, 16th and 30th days of the experiment compared with the control. The maximum decrease in this indicator was detected on the 30th day of the experiment. With the combination of drugs, the total number of germ cells was higher from 16 to 30 days of the experiment by 40-50% compared with that with the introduction of one vepezid.

Из фиг.3 видно, что у животных, получавших вепезид, с 16-30 сут опыта отмечалось достоверное увеличение (более чем в 2 раза по сравнению с контролем) процента патологических форм сперматозоидов. При сочетанном введении препаратов процент патологических форм в эти дни опыта был достоверно снижен, чем при введении одного вепезида, и оказался практически на уровне контрольных значений.From figure 3 it is seen that in animals treated with Vepesid, from 16-30 days of the experiment there was a significant increase (more than 2 times compared with the control) of the percentage of pathological forms of sperm. With the combined administration of drugs, the percentage of pathological forms on these days of the experiment was significantly reduced than with the administration of Vepesid alone, and was almost at the level of control values.

Представленные данные свидетельствуют о том, что при применении экстракта левзеи сафлоровидной на фоне цитостатического воздействия менее выражено явление отека, сокращается количество погибших и патологически измененных сперматогенных клеток, происходит более быстрое восстановление общего количество половых клеток - показателя, характеризующего продуктивность сперматогенеза.The data presented indicate that when using the safflower-like leuzea extract against the background of cytostatic effects, the phenomenon of edema is less pronounced, the number of dead and pathologically altered spermatogenic cells is reduced, the total number of germ cells - an indicator characterizing the productivity of spermatogenesis - is restored more quickly.

Полученные данные свидетельствуют о способности экстракта левзеи сафлоровидной оказывать защитное и коррегирующее действие при нарушении сперматогенеза, вызванного введением цитостатического препарата. Предлагаемое средство так же, как и имеющийся прототип (тестестерон), оказывает защитное действие на сперматогенез на фоне цитостатического воздействия. По сравнению с тестестероном экстракт левзеи сафлоровидной имеет следующие преимущества: является малотоксичным лекарственным средством и не имеет противопоказаний; способ его применения более простой и удобный. Препарат в отличие от прототипа начинают вводить сразу перед началом лечения. Преимуществом экстракта левзеи являются его антиметастатические свойства, что очень важно при применении его у онкологических больных.The data obtained indicate the ability of safflower-like leuzea extract to exert a protective and corrective effect in violation of spermatogenesis caused by the administration of a cytostatic drug. The proposed tool, like the existing prototype (testosterone), has a protective effect on spermatogenesis against the background of cytostatic effects. Compared with testosterone, safflower-like levzea extract has the following advantages: it is a low-toxic drug and has no contraindications; its application is simpler and more convenient. The drug, in contrast to the prototype, begins to be administered immediately before treatment. The advantage of Leuzea extract is its antimetastatic properties, which is very important when used in cancer patients.

Список литературыBibliography

1. Видаль Специалист // Справочник "Онкология". - 2003. - С.3361. Vidal Specialist // Reference "Oncology". - 2003. - P.336

2. Гершанович М.Л. Осложнения при химио- и гормонотерапии злокачественных новообразований. - М.: Медицина. 1982. - С.51, 80.2. Gershanovich M.L. Complications of chemotherapy and hormone therapy for malignant neoplasms. - M.: Medicine. 1982. - S. 51, 80.

3. Гершанович М.Л., Филов В.А., Акимов М.А. Введение в фармакотерапию злокачественных опухолей. - СПб.: Сотис. - 1999. - С.152.3. Gershanovich M.L., Filov V.A., Akimov M.A. Introduction to the pharmacotherapy of malignant tumors. - SPb .: Sotis. - 1999. - p. 152.

4. Гольдберг Е.Д., Боровская Т.Г. Гонадотоксические эффекты противоопухолевых препаратов. - Томск: STT, 2000. - С.28.4. Goldberg E.D., Borovskaya T.G. Gonadotoxic effects of antitumor drugs. - Tomsk: STT, 2000. - P.28.

5. Гольдберг Е.Д., Амосова Е.Н., Зуева Е.П. и др. Влияние экстрактов из лекарственных растений на развитие метастатического процесса // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 2004. - №9. - С.324-332.5. Goldberg E.D., Amosova E.N., Zueva E.P. et al. Influence of extracts from medicinal plants on the development of the metastatic process // Bull. an experiment. biol. and honey. - 2004. - No. 9. - S. 324-332.

6. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавание патологических процессов. - Л.: Медицина, 1978. - С.72.6. Gubler EV Computational methods of analysis and recognition of pathological processes. - L .: Medicine, 1978. - P.72.

7. Зенкова Е.В. Состояние эндокринной системы при некоторых формах гемабластозов в динамике противоопухолевой терапии: Автореф. дис... к-та мед. наук. - Томск, 2004. - С.3.7. Zenkova E.V. The state of the endocrine system in some forms of hemablastoses in the dynamics of antitumor therapy: Abstract. dis ... to that honey. sciences. - Tomsk, 2004 .-- P.3.

8. Пашутин Г.В., Михайлов Н.Н., Козло Н.Е. Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных. - М.: Колос, 1976. - С.157.8. Pashutin G.V., Mikhailov N.N., Kozlo N.E. Artificial insemination of farm animals. - M.: Kolos, 1976. - P.157.

9. Плотников М.Б., Алиев О.И., Васильев А.С., Маслов М.Ю. и др. Влияние экстрактов левзеи на реологические показатели крови // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1999. - №1. - С.58-61.9. Plotnikov M.B., Aliev O.I., Vasiliev A.S., Maslov M.Yu. et al. Effect of Leuzea extracts on rheological blood parameters // Bull. an experiment. biol. and honey. - 1999. - No. 1. - S. 58-61.

10. Противоопухолевая химиотерапия / Под ред. Н.И.Переводчиковой. - М.: Медицина, 1993. - С.10.10. Antitumor chemotherapy / Ed. N.I. Perevodchikova. - M .: Medicine, 1993. - P.10.

11. Саноцкий И.В., Фоменко В.И. Отдаленные последствия влияния химических соединений на организм. - М.: Наука, 1979. - С.73, 78.11. Sanotsky I.V., Fomenko V.I. Long-term effects of the influence of chemical compounds on the body. - M .: Nauka, 1979. - P.73, 78.

12. Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям (Фитотерапия). 2-е изд. - М.: Медицина, 1988. - С.29.12. Sokolov S.Ya., Zamotaev I.P. Handbook of Medicinal Plants (Herbal Medicine). 2nd ed. - M .: Medicine, 1988. - P.29.

13. Clark S.T., Radford J.A., Crowther D. et al. Gonadal function following chemotherapy for Hodgkins disease: a comparative study of MHVV and a seven drug hybrid regimen // J. Clin Oncol. - 1995. - Vol.13, №1. - P.134.13. Clark S.T., Radford J.A., Crowther D. et al. Gonadal function following chemotherapy for Hodgkins disease: a comparative study of MHVV and a seven drug hybrid regimen // J. Clin Oncol. - 1995. - Vol.13, No. 1. - P.134.

14. Delic J., Harwood J., Stanly J. Time dependence for the protective effect of androgen from procarbazine - induced damage to rat spermatogenesis // Cancer. - 1987. - №5. - P.1344-1347.14. Delic J., Harwood J., Stanly J. Time dependence for the protective effect of androgen from procarbazine - induced damage to rat spermatogenesis // Cancer. - 1987. - No. 5. - P.1344-1347.

15. Yoshi S., Monabe F., Hiroshi T. et al. Huxon ragary pexo tarray dsasel // Chemotherapy. - 1990. - Vol.38, №7. - P.670-675.15. Yoshi S., Monabe F., Hiroshi T. et al. Huxon ragary pexo tarray dsasel // Chemotherapy. - 1990. - Vol. 38, No. 7. - P.670-675.

Claims

The use of safflower-like Leuzea extract (Rhaponticum carthamoides) as a means of preventing and correcting spermatogenesis disorders caused by cytostatic effects.