RU2317089C2 - Complex preparation-probiotic in immobilized and lyophilized form and method for its obtaining - Google Patents
Complex preparation-probiotic in immobilized and lyophilized form and method for its obtaining Download PDFInfo
- Publication number
- RU2317089C2 RU2317089C2 RU2006100740/15A RU2006100740A RU2317089C2 RU 2317089 C2 RU2317089 C2 RU 2317089C2 RU 2006100740/15 A RU2006100740/15 A RU 2006100740/15A RU 2006100740 A RU2006100740 A RU 2006100740A RU 2317089 C2 RU2317089 C2 RU 2317089C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- enterosorbent
- sums
- bifidobacteria
- ratio
- consortium
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к препаратам медицинского и ветеринарного назначения и способам их получения и может быть использовано в биотехнологии, медицине и сельском хозяйстве.The invention relates to drugs for medical and veterinary use and methods for their preparation and can be used in biotechnology, medicine and agriculture.
Для профилактики и лечения многих патологических состояний, обусловленных нарушением эндоэкологии, широкое распространение получили энтеросорбенты. Это различные типы активных углей, например карбактин, карболонг, микросорб, полифепан и т.д. (Сенов П.Л. Фармацевтическая химия. - М.: Медицина, 1978, с.132-133; патент РФ N2029546, МПК6 А61К 9/16, опубл. 27.02.95 г.), природные материалы и их аналоги (кристаллическая микроцеллюлоза, цеолиты, хитозаны, пектины и т.д.), синтетические минеральные сорбенты и другие материалы, которые используются для очищения организма от шлаков, радионуклидов, тяжелых металлов и токсинов. Энтеросорбенты снижают эффекты экзо- и эндотоксикозов.Enterosorbents are widely used for the prevention and treatment of many pathological conditions caused by a violation of endoecology. These are various types of activated carbons, for example carbactin, carbolong, microsorb, polyphepan, etc. (Senov P.L. Pharmaceutical chemistry. - M .: Medicine, 1978, p.132-133; RF patent N2029546, IPC 6 A61K 9/16, publ. 02.27.95), natural materials and their analogues (crystalline microcellulose, zeolites, chitosans, pectins, etc.), synthetic mineral sorbents and other materials that are used to cleanse the body of toxins, radionuclides, heavy metals and toxins. Enterosorbents reduce the effects of exo- and endotoxicoses.
Однако энтеросорбенты не устраняют причин, вызывающих эффекты экзо- и эндотоксикозов, как правило, они не селективны, работают в основном на избыток субстрата, могут оказывать негативное действие из-за сорбции нужных для организма метаболитов (витаминов, гормонов) и не обеспечивают активно нормализацию микробиоценоза.However, enterosorbents do not eliminate the causes of the effects of exo- and endotoxicosis, as a rule, they are not selective, work mainly on excess substrate, can have a negative effect due to sorption of metabolites (vitamins, hormones) necessary for the body and do not actively normalize microbiocenosis .
Функции нормальной микрофлоры в организме являются жизненно важными и очень обширными: синтезирующая, регуляторная, десенсибилизирующая, дезинтоксикационная, ферментативная, защитная и иммуностимулирующая. Для нормализации микробиоценоза широкое распространение получили препараты живых бактериальных клеток: бифидобактерий (межд. заявка (WO) № 85/03848), МКИ А23С 9/12, опубл. 12.09.85 г.), лактобактерий (заявка ЕПВ № 0154614, МКИ А23С 9/123, опубл. 11.09.85 г.), колибактерий и т.д.The functions of normal microflora in the body are vital and very extensive: synthesizing, regulatory, desensitizing, detoxifying, enzymatic, protective and immunostimulating. To normalize microbiocenosis, widespread preparations of live bacterial cells: bifidobacteria (international application (WO) No. 85/03848), MKI A23C 9/12, publ. 09/12/85), lactobacilli (application EPO No. 0154614, MKI A23C 9/123, publ. 09/11/85), colibacteria, etc.
Недостатками этих препаратов являются довольно короткие сроки их хранения, если они находятся в жидкой форме, или высокая стоимость, если они изготовлены в сухой форме, а также слабая устойчивость к инактивирующим факторам внешней среды и желудочно-кишечного тракта организма при применении.The disadvantages of these drugs are their rather short shelf life if they are in liquid form, or their high cost if they are made in dry form, as well as poor resistance to inactivating factors of the external environment and the gastrointestinal tract of the body when used.
Известен комплексный препарат, включающий пористый неорганический носитель и иммобилизованные на нем клетки микроорганизмов (заявка ФРГ №3410650, МКИ С12N 11/14, опубл. 03.10.85 г.). В качестве носителей применяют сталактитовые подложки с двойной структурой пор. Подложки имеют сквозные макропоры, которые делают возможным свободный обмен жидкости и газа из внутренней части носителя в окружающую среду. Размер макропор лежит в пределах величины клеток микроорганизмов.A complex preparation is known, including a porous inorganic carrier and microorganism cells immobilized on it (application of Germany No. 3410650, MKI C12N 11/14, publ. 03.10.85). As carriers, stalactite substrates with a double pore structure are used. The substrates have through macropores, which make possible the free exchange of liquid and gas from the inside of the carrier into the environment. The size of the macropores lies within the cell size of the microorganisms.
Недостатком данного препарата является то, что он не предназначен для использования в качестве медицинского или ветеринарного препарата в связи с отсутствием данных о влиянии сталактитового носителя с нанесенными на нем микроорганизмами на микробиоценоз желудочно-кишечного тракта организма человека или животного.The disadvantage of this drug is that it is not intended for use as a medical or veterinary drug due to the lack of data on the effect of a stalactite carrier with microorganisms deposited on it on the microbiocenosis of the gastrointestinal tract of a human or animal organism.
Известен комплексный фармацевтический препарат, включающий фармацевтически приемлемый носитель и иммобилизованные на нем микроорганизмы (межд. заявка (WO) №91/09608, МКИ А61К 35/74, опубл. 11.07.91 г.). Носитель не нарушает жизнеспособности микроорганизмов. В качестве микроорганизмов используют штамм L1a Streptococcus lactis. Препарат предназначен для борьбы с патогенной микрофлорой кишечника человека и животных, вызывающей диарею и другие желудочно-кишечные расстройства.A complex pharmaceutical preparation is known, including a pharmaceutically acceptable carrier and microorganisms immobilized on it (international application (WO) No. 91/09608, MKI AK61K 35/74, publ. 11.07.91). The carrier does not violate the viability of microorganisms. As microorganisms, the strain L1a Streptococcus lactis is used. The drug is intended to combat pathogenic microflora of the intestines of humans and animals, causing diarrhea and other gastrointestinal disorders.
Недостатком препарата является то, что используемый в нем штамм L1a Streptococcus lactis влияет в основном на патогенную микрофлору кишечника человека и животных, т.е. проявляет антагонистические свойства, но слабо участвует в восстановлении микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Кроме того, отсутствуют данные об антацидных свойствах носителя, что свидетельствует о слабой защите носителем иммобилизованных клеток Streptococcus lactis при действии внутренней среды организма с низкими значениями рН.The disadvantage of the drug is that the strain L1a Streptococcus lactis used in it mainly affects the pathogenic microflora of the intestines of humans and animals, i.e. exhibits antagonistic properties, but is poorly involved in the restoration of the microflora of the gastrointestinal tract. In addition, there is no data on the antacid properties of the carrier, which indicates a weak carrier protection of immobilized Streptococcus lactis cells under the action of the internal environment of the body with low pH values.
Известен комплексный бактериальный препарат, включающий носитель и иммобилизованные на нем микробные клетки в концентрации на 1 мм2 2,1×103-1,0×105 (патент РФ №2017486, МПК6 А61К 31/00, опубл. 15.08.94 г.). В качестве носителя используют активированный уголь в виде порошка с размером частиц менее 30 мкм, а в качестве микроорганизмов используют лактобактерии и кишечные палочки.A complex bacterial preparation is known, including a carrier and microbial cells immobilized on it in a concentration of 1 mm 2 2.1 × 10 3 -1.0 × 10 5 (RF patent No. 2017486, IPC 6 A61K 31/00, publ. 15.08.94 g.). Activated carbon in the form of a powder with a particle size of less than 30 microns is used as a carrier, and lactobacilli and Escherichia coli are used as microorganisms.
Недостатком такого препарата является то, что активированный уголь, используемый в качестве носителя, является тонкопористым сорбентом с преобладанием микропор и высокой удельной поверхностью. Вследствие этого микробные клетки расположены на поверхности частиц сорбента и недостаточно защищены при неблагоприятном воздействии окружающей среды. Активированные угли активно поглощают низкомолекулярные биологически активные вещества, витамины и газы кишечника, что ухудшает работу перистальтики. Они быстро забиваются и работают преимущественно в верхних отделах желудочно-кишечного тракта. Кроме того, угли не обладают антацидными свойствами, что не способствует выживаемости нанесенных на них клеток при действии сред с низкими значениями рН. Препарат не предусматривает использование одновременно нескольких штаммов микроорганизмов разных видов, например смеси бифидо- и лактобактерии, что значительно снижает эффективность действия препарата особенно при восстановлении микрофлоры желудочно-кишечного тракта.The disadvantage of this drug is that the activated carbon used as a carrier is a finely porous sorbent with a predominance of micropores and a high specific surface area. As a result, microbial cells are located on the surface of the sorbent particles and are not adequately protected under adverse environmental influences. Activated carbons actively absorb low molecular weight biologically active substances, vitamins and intestinal gases, which impairs peristalsis. They quickly become clogged and work mainly in the upper parts of the gastrointestinal tract. In addition, coals do not have antacid properties, which does not contribute to the survival of cells deposited on them under the influence of media with low pH values. The drug does not provide for the simultaneous use of several strains of microorganisms of different types, for example a mixture of bifidobacteria and lactobacilli, which significantly reduces the effectiveness of the drug, especially when restoring the microflora of the gastrointestinal tract.
Известен препарат-пробиотик в иммобилизованной форме, включающий носитель, представляющий собой сорбент, и клетки эубиотиков, иммобилизованные на указанном носителе, причем клетки эубиотиков используют совместно с питательной средой, а в качестве сорбента используют материал с антацидными свойствами, развитой мезо- и макропористой структурой и объемом макропор не менее 0,01 см3/г в виде порошка с размером частиц не более 0,1 мм, или в виде гранул размером (0,1-5,0) мм, или в виде таблеток при следующем количественном соотношении компонентов препарата, мас. %: клетки эубиотиков с питательной средой и титром 108-108 КОЕ/мл - 1,0-50,0; носитель-сорбент - остальное до 100%.A known probiotic preparation in immobilized form, comprising a carrier, which is a sorbent, and eubiotics cells immobilized on the carrier, the cells of eubiotics used in conjunction with a nutrient medium, and as a sorbent use a material with antacid properties, developed meso- and macroporous structure and macropore volume of at least 0.01 cm 3 / g in the form of powder with particle size of not more than 0.1 mm, or in the form of granules of (0.1-5.0) mm or as tablets with the following quantitative ratio of components etc. Paratov wt. %: cells of eubiotics with a nutrient medium and a titer of 10 8 -10 8 CFU / ml - 1.0-50.0; carrier sorbent - the rest is up to 100%.
В качестве сорбента используют пористый материал на основе оксида алюминия с гидрофильно-гидрофобной топохимией поверхности, например энтеросорбент типа СУМС-1, модифицированный углеродом, или энтеросорбент типа СИАЛ, модифицированный кремнийорганическим полимером. В качестве эубиотиков используют бифидо- или лактобактерии или их смесь (патент РФ №2118535, МПК6 А61К 35/74, опубл. 10.09.98 г.).As the sorbent, a porous alumina-based material with hydrophilic-hydrophobic surface topochemistry is used, for example, carbon-modified SUMS-1 enterosorbent or SIAL type modified with an organosilicon polymer type enterosorbent. As eubiotics, bifidobacteria or lactobacilli or a mixture thereof are used (RF patent No. 21118535, IPC 6 A61K 35/74, publ. 09/10/98).
Однако используемые в указанном препарате сорбенты обладают недостаточной эффективностью сорбции и десорбции бактерий-эубиотиков, а также имеет низкую колонизационную активность входящих в состав препарата бактерий-эубиотиков.However, the sorbents used in this preparation have insufficient efficiency of sorption and desorption of eubiotics bacteria, and also have low colonization activity of the eubiotics bacteria that are part of the preparation.
Известен способ получения комплексного препарата бактерий-эубиотиков (патент РФ №2067114, МПК А61К 35/74, опубл. 27.09.96 г.), включающий выращивание в условиях глубинного культивирования культуры штаммов бифидобактерий и стрептококка, смешивание биомассы с защитной средой следующего состава (мас.%): сахароза 25-30; желатин 2-3; сухое молоко 3-5; глутамат натрия 0,5-1 и контактно-сорбционное обезвоживание целевого продукта, которое проводят охлажденным до минус 8-10°С сорбентом, например окисью алюминия, с остаточной влажностью менее 1% при массовом соотношении 1:10-12, соответственно, а досушивание осуществляют в течение 18-20 часов при температуре 0-5°С в замкнутом объеме.A known method of obtaining a comprehensive preparation of bacteria-eubiotics (RF patent No. 2067114, IPC АКК 35/74, publ. 09/27/96), including growing in deep cultivation cultures of strains of bifidobacteria and streptococcus, mixing biomass with a protective medium of the following composition (wt. .%): sucrose 25-30; gelatin 2-3; milk powder 3-5; monosodium glutamate 0.5-1 and contact-sorption dehydration of the target product, which is carried out chilled to minus 8-10 ° C with a sorbent, for example aluminum oxide, with a residual moisture content of less than 1% at a mass ratio of 1: 10-12, respectively, and drying carried out for 18-20 hours at a temperature of 0-5 ° C in a closed volume.
Однако используемый в указанном способе сорбент обладает недостаточной эффективностью сорбции и десорбции бактерий-эубиотиков, а также имеет низкую колонизационную активность бактерий-эубиотиков.However, the sorbent used in this method has insufficient efficiency of sorption and desorption of eubiotics, and also has low colonization activity of eubiotics.
Наиболее близким техническим решением (прототипом) является препарат-пробиотик в иммобилизованной и лиофилизированной форме (патент РФ №2164801, МПК А61К 35/74, опубл. 10.04.01). Препарат включает носитель, представляющий собой сорбент, и клетки пробиотиков, иммобилизованные на указанном носителе, причем клетки пробиотиков используют совместно с питательной средой, а в качестве сорбента используют материал с антацидными свойствами, развитой мезо- и макропористой структурой и объемом макропор не менее 0,01 см3/г в виде порошка с размером частиц не более 0,1 мм, или в виде гранул размером (0,1-5,0) мм, или в виде таблеток, согласно изобретению препарат дополнительно содержит защитную среду, а клетки пробиотиков с питательной средой представляют собой сухой концентрат бифидобактерий на молочной основе с титром 108-1010 КОЕ/г и содержанием аминокислот (мг/100 г сухой биомассы): глутаминовая кислота - 15,0-68,0; глутамин - 8,0-20,0; лейцин - 10,0-50,0; аргинин - 20,0-30,0; цистеин - 50,0-80,0 при следующем соотношении компонентов препарата в сухом виде мас.%: клетки эубиотиков с питательной средой и титром 108-1010 КОЕ/г - 0,1-10,0; защитная среда - 0,1-10,0; носитель-сорбент - остальное до 100%. В качестве защитной среды используют желатин, сахарозу, аскорбиновую кислоту и хлористый натрий при следующем содержании компонентов, мас.%: желатин - 8,5-11,5; аскорбиновая кислота - 0,8-1,2; хлористый натрий - 1,7-3,0; сахароза - остальное до 100%. В качестве сорбента используют пористый материал на основе оксида алюминия с гидрофильно-гидрофобной топохимией поверхности, например энтеросорбент типа СУМС-1, модифицированный углеродом. Препарат в качестве бактерий-пробиотиков дополнительно содержит сухую закваску вязких штаммов ацидофильных бактерий Lactobacillus acidophilus типа АВ, соотношение которых с сухим концентратом бифидобактерий составляет 1:(8-9) соответственно. В качестве бифидобактерий в сухом концентрате используют бактерии Bifidum bifidum №1, или №791, или ЛВА-3, или Bifidobacterium longum 379, или Bifidobacterium adolescentis MC-42, или смесь бактериальных клеток указанных штаммов, взятых в равных весовых долях.The closest technical solution (prototype) is a probiotic preparation in an immobilized and lyophilized form (RF patent No. 2164801, IPC АКК 35/74, publ. 10.04.01). The preparation includes a carrier, which is a sorbent, and probiotic cells immobilized on the indicated carrier, the probiotic cells being used in conjunction with a nutrient medium, and a material with antacid properties, a developed meso- and macroporous structure and a macropore volume of at least 0.01, is used as a sorbent cm 3 / g in the form of a powder with a particle size of not more than 0.1 mm, or in the form of granules with a size of (0.1-5.0) mm, or in the form of tablets, according to the invention, the preparation additionally contains a protective medium, and the cells of probiotics with feeder second medium are dry concentrate of bifidobacteria based on milk with a titer of 10 8 to 10 10 CFU / g and the amino acid content (mg / 100 g dry biomass): glutamic acid - 15,0-68,0; glutamine - 8.0-20.0; leucine - 10.0-50.0; arginine - 20.0-30.0; cysteine - 50.0-80.0 in the following ratio of the components of the drug in dry form wt.%: cells of eubiotics with a nutrient medium and a titer of 10 8 -10 10 CFU / g - 0.1-10.0; protective environment - 0.1-10.0; carrier sorbent - the rest is up to 100%. Gelatin, sucrose, ascorbic acid and sodium chloride are used as a protective medium in the following components, wt.%: Gelatin - 8.5-11.5; ascorbic acid - 0.8-1.2; sodium chloride - 1.7-3.0; sucrose - the rest is up to 100%. As the sorbent, a porous alumina-based material with hydrophilic-hydrophobic topochemistry is used, for example, carbon-modified SUMS-1 enterosorbent. The drug as probiotic bacteria additionally contains dry sourdough of viscous strains of acidophilic bacteria Lactobacillus acidophilus type AB, the ratio of which with a dry concentrate of bifidobacteria is 1: (8-9), respectively. The bacteria Bifidum bifidum No. 1, or No. 791, or LVA-3, or Bifidobacterium longum 379, or Bifidobacterium adolescentis MC-42, or a mixture of bacterial cells of these strains taken in equal weight fractions are used as bifidobacteria in a dry concentrate.
Наиболее близким способом (прототипом) является способ получения комплексного препарата-пробиотика в иммобилизованной и лиофилизированной форме, приведенный в описании к патенту РФ №2164801, МПК А61К 35/74, опубл. 10.04.01, включающий отмывку и стерилизацию пористого энтеросорбента СУМС-1, модифицированного углеродом, и его охлаждение до комнатной температуры, смешивание энтеросорбента и бактерий-эубиотиков с питательной и защитной средами в соотношении не более 1:1 и выдерживание смеси в течение не менее 1 часа при перемешивании и температуре +4°С до полной иммобилизации бактериальных клеток на энтеросорбент, отмывку полученного комплексного препарата в изотоническом солевом растворе с последующим его замораживанием и лиофильной сушкой.The closest method (prototype) is the method of obtaining a complex preparation of probiotic in immobilized and lyophilized form, described in the description of the patent of the Russian Federation No. 2164801, IPC A61K 35/74, publ. 04/10/2011, including washing and sterilizing the porous carbon-modified SUMS-1 enterosorbent and cooling it to room temperature, mixing the enterosorbent and eubiotics with nutrient and protective media in a ratio of not more than 1: 1 and keeping the mixture for at least 1 hours with stirring and a temperature of + 4 ° C until the bacterial cells are completely immobilized onto enterosorbent, washing the resulting complex preparation in isotonic saline solution, followed by freezing and freeze drying.
Однако используемые в указанном препарате и способе его получения сорбенты также обладают недостаточной эффективностью сорбции и десорбции бактерий-эубиотиков. Кроме того, наблюдается низкая колонизационная активность входящих в состав препарата бактерий-эубиотиков.However, the sorbents used in the indicated preparation and the method for its preparation also have insufficient efficiency of sorption and desorption of eubiotics bacteria. In addition, there is a low colonization activity of the eubiotics bacteria that make up the preparation.
Техническим результатом заявляемых технических решений является создание такого комплексного препарата-пробиотика со способом его получения, который обеспечивал бы более высокую эффективность сорбции и десорбции клеток бактерий энтеросорбентом СУМС-1, определяющей его клиническую эффективность, и более высокую колонизационную активность бактерий-эубиотиков.The technical result of the claimed technical solutions is the creation of such a comprehensive probiotic preparation with a method for its preparation, which would provide higher efficiency of sorption and desorption of bacterial cells by the SUMS-1 enterosorbent, which determines its clinical effectiveness, and higher colonization activity of eubiotics.
Указанный технический результат достигается тем, что в комплексном препарате-пробиотике в иммобилизованной и лиофилизированной форме, включающем носитель, представляющий собой пористый энтеросорбент СУМС-1 на основе оксида алюминия, модифицированный углеродом с гидрофильно-гидрофобной топохимией поверхности, и клетки бактерий-эубиотиков с питательной и защитной средами, иммобилизованными на указанном носителе-энтеросорбенте, согласно изобретению клетки бактерий-эубиотиков с питательной средой представляют собой лиофилизированный концентрат консорциума бифидобактерий, или лактобактерий, или их смесь с титром 108-1010 КОЕ/г, а в качестве пористого модифицированного углеродом энтеросорбента СУМС-1 он содержит энтеросорбент СУМС-1, дополнительно обработанный раствором соли металла в соответствии со способом по п.п.5 и 6 формулы изобретения при следующем соотношении компонентов препарата в лиофилизированном виде, мас.%:The specified technical result is achieved in that in a complex probiotic preparation in an immobilized and lyophilized form, including a carrier, which is a porous enterosorbent SUMS-1 based on aluminum oxide, modified with carbon with hydrophilic-hydrophobic topochemistry of the surface, and cells of eubiotics bacteria with nutrient and protective medium immobilized on the specified carrier-enterosorbent, according to the invention, the cells of bacteria-eubiotics with a nutrient medium are lyophilized concentrate of a consortium of bifidobacteria, or lactobacilli, or a mixture thereof with a titer of 10 8 -10 10 CFU / g, and as a porous carbon-modified enterosorbent SUMS-1, it contains enterosorbent SUMS-1, additionally treated with a metal salt solution in accordance with the method according to .p.5 and 6 of the claims in the following ratio of the components of the drug in lyophilized form, wt.%:
Препарат с содержанием микробной биомассы менее 0,1 мас.% имеет низкий биотитр с преобладанием прочно связанных с сорбентом клеток, т.е. действует преимущественно как энтеросорбент. Количество микробных клеток, вводимых в препарат, не превышает 15 мас.%, вследствие чего вся биомасса бактерий препарата находится в защищенном состоянии. При этом энтеросорбент СУМС-1 в препарате сохраняет основные свои свойства, обеспечивающие связывание и выведение из кишечника токсинов, продуктов незавершенного метаболизма и патогенных микроорганизмов.A preparation with a microbial biomass content of less than 0.1 wt.% Has a low biotiter with a predominance of cells firmly bound to the sorbent, i.e. acts primarily as an enterosorbent. The number of microbial cells introduced into the preparation does not exceed 15 wt.%, As a result of which the entire biomass of the bacteria of the preparation is in a protected state. At the same time, the SUMS-1 enterosorbent in the preparation retains its basic properties, which ensure the binding and elimination of toxins, products of incomplete metabolism and pathogenic microorganisms from the intestine.
В качестве консорциума бифидобактерий он содержит штаммы бифидобактерий: Bifidobacterium bifidum 8-3, Bifidobacterium longum ДВА-13 и Bifidobacterium adolescentis ГО-13 в соотношении 8:1:1.As a consortium of bifidobacteria, it contains strains of bifidobacteria: Bifidobacterium bifidum 8-3, Bifidobacterium longum TWA-13 and Bifidobacterium adolescentis GO-13 in a ratio of 8: 1: 1.
В качестве консорциума лактобактерий он содержит штаммы лактобактерий Lactobacillus acidophilus 57S, Lactobacillus plantarum П-75, Lactobacillus casei С6 в соотношении 4:1,0:1,0.As a consortium of lactobacilli, it contains strains of lactobacilli Lactobacillus acidophilus 57S, Lactobacillus plantarum P-75, Lactobacillus casei C6 in a ratio of 4: 1.0: 1.0.
Смесь консорциумов бифидо- и лактобактерий имеет соотношение от 1:1 до 3:1.A mixture of consortia of bifidobacteria and lactobacilli has a ratio of 1: 1 to 3: 1.
Указанный технический результат достигается также тем, что в способе получения комплексного препарата-пробиотика в иммобилизованной и лиофилизированной форме, включающем отмывку и стерилизацию пористого энтеросорбента СУМС-1, модифицированного углеродом, и его охлаждение до комнатной температуры, смешивание энтеросорбента и бактерий-эубиотиков с питательной и защитной средами в соотношении не более 1:1 и выдерживание смеси в течение не менее 1 часа при перемешивании и температуре не выше +4°С до полной иммобилизации бактериальных клеток на энтеросорбент, отмывку полученного комплексного препарата в изотоническом солевом растворе с последующим его замораживанием и лиофильной сушкой, согласно изобретению перед стерилизацией энтеросорбент СУМС-1 обрабатывают раствором соли металла в объемном соотношении не более 1:1 и отмывают от реагента 2-3-кратным объемом дистиллированной воды, а в качестве бактерий-эубиотиков используют концентрат консорциума бифидобактерий, или лактобактерий, или их смесь с титром 108-1010 КОЕ/г.The specified technical result is also achieved by the fact that in the method for producing a complex probiotic preparation in an immobilized and lyophilized form, including washing and sterilizing the porous carbon-modified SUMS-1 enterosorbent and cooling it to room temperature, mixing the enterosorbent and eubiotics bacteria with nutrient and protective media in a ratio of not more than 1: 1 and maintaining the mixture for at least 1 hour with stirring and at a temperature not exceeding + 4 ° C until the bacterial cells are completely immobilized to enterosorbent, washing the resulting complex preparation in isotonic saline followed by freezing and freeze-drying, according to the invention, before sterilization, the SUMS-1 enterosorbent is treated with a metal salt solution in a volume ratio of no more than 1: 1 and washed with a 2-3-fold volume from the reagent distilled water, and as bacteria-eubiotics use a concentrate of a consortium of bifidobacteria, or lactobacilli, or a mixture of them with a titer of 10 8 -10 10 CFU / g
В качестве раствора соли металла используют 3%-ный раствор сульфата магния.As a solution of a metal salt using a 3% solution of magnesium sulfate.
В качестве консорциума бифидобактерий используют штаммы бифидобактерий: Bifidobacterium bifidum 8-3, Bifidobacterium longum ДВА-13, Bifidobacterium adolescentis ГО-13 в соотношении 8:1:1, а в качестве консорциума лактобактерий используют штаммы лактобактерий Lactobacillus acidophilus 57S, Lactobacillus plantarum П-75 и Lactobacillus casei С6 в соотношении 4:1,0:1,0. Смесь консорциумов бифидо- и лактобактерий имеет соотношение от 1:1 до 3:1.Strains of bifidobacteria are used as a consortium of bifidobacteria: Bifidobacterium bifidum 8-3, Bifidobacterium longum TWA-13, Bifidobacterium adolescentis GO-13 in a ratio of 8: 1: 1, and Lactobacus bacterium Lactobacillus bacteria Lactobacillus 57 and Lactobacillus casei C6 in a ratio of 4: 1.0: 1.0. A mixture of consortia of bifidobacteria and lactobacilli has a ratio of 1: 1 to 3: 1.
Штамм бифидобактерий: Bifidobacterium bifidum 8-3 депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 5799. Штамм Bifidobacterium longum ДВА-13 депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 5894. Штамм Bifidobacterium adolescentis ГО-13 депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под № В 2944.The strain of bifidobacteria: Bifidobacterium bifidum 8-3 was deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No. B 5799. The strain Bifidobacterium longum TWA-13 was deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at No. B 5894. The strain Bifidobacterium adolescentis no.
Штамм лактобактерий Lactobacillus acidophilus 57S депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 5863. Штамм Lactobacillus plantarum П-75 депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 3962. Штамм Lactobacillus casei С6 депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 5724.The strain of lactobacilli Lactobacillus acidophilus 57S was deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No. 5863. The strain Lactobacillus plantarum P-75 was deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at No. 3962. The strain Lactobacillus casei C6 was deposited at All-Russian Scientific Research Institute of Genetics at no.
Введение в препарат сухой микробной биомассы с биотитром 108-1010 КОЕ/г обеспечивает ему оптимальную биологическую активность. Если исходная микробная биомасса имеет титр меньше 108 КОЕ/г, то препарат обладает недостаточной биологической активностью и при введении в желудочно-кишечный тракт проявляет слабый лечебно-профилактический эффект. Титр сухой микробной биомассы более 1010 КОЕ/мл значительно увеличивает стоимость препарата без значительного увеличения лечебно-профилактического эффекта.Introduction to the preparation of dry microbial biomass with a biotiter of 10 8 -10 10 CFU / g provides him with optimal biological activity. If the initial microbial biomass has a titer of less than 10 8 CFU / g, the preparation has insufficient biological activity and, when introduced into the gastrointestinal tract, exhibits a weak therapeutic effect. A titer of dry microbial biomass of more than 10 10 CFU / ml significantly increases the cost of the drug without a significant increase in the therapeutic effect.
Основу жидкой бактериальной суспензии для сушки составляют клетки-эубиотики в молочной питательной среде с повышенным титром клеток (109-1010 КОЕ/мл) - жидкий концентрат бифидобактерий. Молочная питательная среда с клетками-эубиотиками содержит повышенное количество белка (не менее 12% СОМ - сухого остатка молока). Это позволяет увеличить антибиотические свойства бактерий-пробиотиков в препарате. Кроме того, повышенное количество белка увеличивает антацидные свойства препарата. Высокая концентрация клеток в жидкой бактериальной суспензии позволяет их использовать в препарате в сухом виде в концентрации 1,0-10,0% с титром 108-1010 КОЕ/мл.The basis of the liquid bacterial suspension for drying is eubiotics cells in a milk nutrient medium with an increased titer of cells (10 9 -10 10 CFU / ml) - a liquid concentrate of bifidobacteria. Milk culture medium with eubiotics cells contains an increased amount of protein (at least 12% COM - dry milk residue). This allows you to increase the antibiotic properties of probiotic bacteria in the drug. In addition, an increased amount of protein increases the antacid properties of the drug. A high concentration of cells in a liquid bacterial suspension allows their use in the preparation in a dry form at a concentration of 1.0-10.0% with a titer of 10 8 -10 10 CFU / ml.
Носитель-сорбент представляет собой механически прочные частицы порошка, или гранулы, или таблетки, выполненные из оксида алюминия, поверхность которых модифицирована углеродом при получении сорбента типа СУМС-1 черного цвета. Сорбенты имеют удельную поверхность до 300 м2/г и развитую структуру мезо- и макропор. Размеры макропор сорбента соизмеримы с размерами микробных клеток, что позволяет заполнять макропоры указанными клетками. Регулированием процентного содержания углерода в сорбенте с последующими окислительно-восстановительными его обработками обеспечивается получение носителя с заданными гидрофильно-гидрофобными и другими топохимическими характеристиками. Сорбенты типа СУМС-1 в меньшей степени, чем другие аналогичные материалы, извлекают витамины и гормоны из организма и не нарушают перистальтику, что делает возможным их применение длительными курсами. Наличие в сорбенте оксида алюминия придает его поверхности определенные буферные антацидные свойства, что способствует лучшему сохранению активности и выживанию иммобилизованных на нем микробных клеток, например, при прохождении препарата через желудок (устраняет отрицательное влияние желудочного сока на микробные клетки) или при других неблагоприятных условиях (низких рН).The sorbent carrier is mechanically strong powder particles, or granules, or tablets made of alumina, the surface of which is modified with carbon upon receipt of a black SUMS-1 sorbent. Sorbents have a specific surface area of up to 300 m 2 / g and a developed structure of meso and macropores. The sizes of the macropores of the sorbent are comparable with the sizes of microbial cells, which allows filling the macropores with the indicated cells. By controlling the percentage of carbon in the sorbent, followed by its redox treatments, a carrier is obtained with desired hydrophilic-hydrophobic and other topochemical characteristics. Sorbents of the SUMS-1 type, to a lesser extent than other similar materials, extract vitamins and hormones from the body and do not violate peristalsis, which makes them possible to use for long courses. The presence of alumina in the sorbent gives its surface certain buffered antacid properties, which contributes to better preservation of activity and survival of microbial cells immobilized on it, for example, when the drug passes through the stomach (eliminates the negative effect of gastric juice on microbial cells) or under other adverse conditions (low pH).
Макропористая структура носителя-сорбента, ячейки которого заполнены микробными клетками, также способствует защите этих иммобилизованных клеток от инактивирующих факторов внешней среды. Причем микробные клетки, находящиеся в порах, и клетки, находящиеся близко к внешней поверхности носителя-сорбента, отличаются по своим десорбционным способностям, и такая неоднородность свойств клеток обеспечивает пролонгированное действие препарата и способствует колонизации не только верхних, но и нижних отделов кишечника. Пористый носитель, являясь энтеросорбентом, снимает эффекты местного (а через него и общего) токсикоза, что способствует выживаемости бактерий препарата и микрофлоры кишечника, а также снижает нагрузку на органы детоксикации человека или животного. Кроме того, при использовании в препарате в качестве микробных клеток консорциума бифидобактерий, или консорциума лактобактерий, или смеси консорциумов бифидо- и лактобактерий обеспечивается не только вытеснение из желудочно-кишечного тракта патогенных микроорганизмов (за счет антагонистических свойств указанных бактерий), но и восстановление сильно сокращенной микрофлоры кишечника при дисбактериозе и других заболеваниях.The macroporous structure of the sorbent carrier, the cells of which are filled with microbial cells, also helps to protect these immobilized cells from inactivating environmental factors. Moreover, microbial cells located in the pores and cells located close to the outer surface of the sorbent carrier differ in their desorption abilities, and such heterogeneity of the cell properties ensures a prolonged action of the drug and promotes the colonization of not only the upper, but also the lower intestines. The porous carrier, as an enterosorbent, removes the effects of local (and through it general) toxicosis, which contributes to the survival of the drug bacteria and intestinal microflora, and also reduces the burden on the detoxification organs of a person or animal. In addition, when using a consortium of bifidobacteria or a consortium of lactobacilli, or a mixture of consortia of bifidobacteria and lactobacilli as microbial cells in the preparation, not only displacement of pathogenic microorganisms from the gastrointestinal tract is ensured (due to the antagonistic properties of these bacteria), but also the restoration of greatly reduced intestinal microflora with dysbiosis and other diseases.
Ниже приведены примеры составов предлагаемого комплексного препарата бактерий-эубиотиков в иммобилизованной и лиофилизированной форме.The following are examples of the compositions of the proposed complex preparation of eubiotics bacteria in immobilized and lyophilized form.
Пример 1. Препарат-пробиотик "Экофлор" в виде порошка с размером частиц (40-100) мкм (мас.%):Example 1. The probiotic preparation "Ecoflor" in the form of a powder with a particle size (40-100) microns (wt.%):
Пример 2. Препарат-пробиотик "Экофлор" в виде порошка с размером частиц (40-100) мкм (мас.%):Example 2. The probiotic preparation "Ecoflor" in the form of a powder with a particle size (40-100) microns (wt.%):
Пример 3. Препарат-пробиотик "Экофлор" в виде гранул размером (0,5-5,0) мм (мас.%):Example 3. The probiotic preparation "Ecoflor" in the form of granules with a size of (0.5-5.0) mm (wt.%):
Пример 4. Препарат-пробиотик "Экофлор" в виде гранул размером (0,5-5,0) мм (мас.%):Example 4. The probiotic preparation "Ecoflor" in the form of granules with a size of (0.5-5.0) mm (wt.%):
Пример 5. Технология получения готовых форм препарата "Экофлор".Example 5. The technology of obtaining the finished form of the drug "Ecoflor".
По специальной технологии готовят исходные сорбенты типа СУМС-1 (патент РФ №2026733), в котором оксид алюминия модифицирован углеродом, с требуемой пористой структурой, химической природой поверхности и размером частиц или гранул. Далее мерное количество энтеросорбента СУМС-1 засыпают в цилиндрическую емкость, заливают дистиллированной водой в объемном соотношении 1:1 и тщательно перемешивают. Отмывают не менее 3-х раз дистиллированной водой до полного исчезновения угольной пленки и взвеси. Далее энтеросорбент СУМС-1 обрабатывают раствором соли металла, а именно 3%-ным раствором сульфата магния в объемном соотношении 1:1. Отмывают от сульфат-ионов 2-3-кратным объемом дистиллированной воды. После обработки энтеросорбента СУМС-1 3%-ным раствором сульфата магния эффективность его биосорбции увеличивается в 1,4 раза, а эффективность биодесорбции, определяющая клинический эффект от действия препарата, равна 1.Using a special technology, initial SUMS-1 sorbents are prepared (RF patent No. 2026733), in which alumina is modified with carbon, with the required porous structure, chemical surface nature and particle or granule size. Next, a measured amount of SUMS-1 enterosorbent is poured into a cylindrical container, filled with distilled water in a volume ratio of 1: 1 and mixed thoroughly. Wash at least 3 times with distilled water until the carbon film and suspension disappear completely. Next, the SUMS-1 enterosorbent is treated with a solution of a metal salt, namely a 3% solution of magnesium sulfate in a volume ratio of 1: 1. Wash off sulfate ions with a 2-3-fold volume of distilled water. After treating the SUMS-1 enterosorbent with a 3% solution of magnesium sulfate, its biosorption efficiency increases by 1.4 times, and the biodesorption efficiency, which determines the clinical effect of the drug, is 1.
Стерилизацию СУМС-1 ведут сухим жаром в сушильном шкафу россыпью слоем не более 1,5-2,0 см при температуре (160±2)°С в течение 2 часов. Контроль стерильности СУМС-1 определяют микробиологически. Контроль процесса стерилизации СУМС-1 осуществляют с помощью химических тестов.Sterilization of SUMS-1 is carried out by dry heat in an oven in bulk with a layer of not more than 1.5-2.0 cm at a temperature of (160 ± 2) ° C for 2 hours. Sterility control SUMS-1 is determined microbiologically. The control of the sterilization process SUMS-1 is carried out using chemical tests.
Процесс иммобилизации СУМС-1 проводят в асептических условиях. Для иммобилизации берут равные по объему (1:1) количества энтеросорбента СУМС-1 и культуры консорциумов микроорганизмов. Для иммобилизации используют консорциум бифидобактерий (с титром не менее 1010 КОЕ/мл), или консорциум лактобактерий (с титром не менее 108 КОЕ/мл), или их смесь в объемном соотношении 9:1 соответственно в соответствии с примерами 1-3. Биомассу бактерий приготавливают на молочной питательной среде, содержащей повышенное количество белка (не менее 12% СОМ - сухого остатка молока) по стандартной технологии.The process of immobilization of SUMS-1 is carried out under aseptic conditions. For immobilization, take equal in volume (1: 1) amounts of SUMS-1 enterosorbent and culture of microorganism consortia. For immobilization use a consortium of bifidobacteria (with a titer of at least 10 10 CFU / ml), or a consortium of lactobacilli (with a titer of at least 10 8 CFU / ml), or their mixture in a volume ratio of 9: 1, respectively, in accordance with examples 1-3. Bacterial biomass is prepared on a milk nutrient medium containing an increased amount of protein (at least 12% COM - the dry residue of milk) according to standard technology.
Смесь энтеросорбента СУМС-1 с клетками бактерий-эубиотиков тщательно перемешивают в течение 5 мин и помещают на шейкер на 1 час при интенсивности 100 колебаний в минуту при температуре 6±2°С. Процесс иммобилизации возможно вести в стеклянной посуде на роллерной установке. Для определения качества иммобилизации из исходного титра бифидобактерий и лактобактерий в концентрате бифидо- и лактобактерий вычитают полученный результат биотитрования. Процесс считается завершенным, если в растворе осталось не более 50% от исходного количества бифидо- и лактобактерий.A mixture of SUMS-1 enterosorbent with cells of eubiotics bacteria is thoroughly mixed for 5 minutes and placed on a shaker for 1 hour at an intensity of 100 vibrations per minute at a temperature of 6 ± 2 ° С. The process of immobilization can be carried out in glassware on a roller installation. To determine the quality of immobilization from the initial titer of bifidobacteria and lactobacilli in the concentrate of bifidobacteria and lactobacilli, the obtained biotitration result is subtracted. The process is considered completed if no more than 50% of the initial amount of bifidobacteria and lactobacilli remains in the solution.
Далее продукт однократно промывают в изотоническом растворе NaCl. Мутный раствор стерильно сливают, отбирают пробы и проводят контроль полноты процесса иммобилизации по МУК 4.2.577-96 (Методы микробиологического контроля продуктов детского, лечебного питания и их компонентов", п.7.1 и п.7.10). Процесс считается завершенным, если в растворе осталось не более 50% от исходного количества бифидо- и лактобактерий.Next, the product is washed once in an isotonic NaCl solution. The turbid solution is sterilely drained, samples are taken and the completeness of the immobilization process is monitored in accordance with MUK 4.2.577-96 (Methods of microbiological control of baby food, therapeutic nutrition and their components ", clause 7.1 and clause 7.10). The process is considered complete if in solution no more than 50% of the initial amount of bifidobacteria and lactobacilli remained.
Отмытый продукт замораживают в низкотемпературном холодильнике типа "Кельвинатор" при температуре минус (40-45)°С в течение (24-48) часов. Кассеты с предварительно замороженным препаратом перегружают в сушильную камеру при достижении температуры плит минус (20-30)°С и камеру вакуумируют. Готовый препарат "Экофлор" в сухой иммобилизованной форме фасуют во флаконы и герметично закрывают пробками. Массовая доля влаги составляет не более 3,0 мас.%.The washed product is frozen in a Kelvinator type low-temperature refrigerator at a temperature of minus (40-45) ° С for (24-48) hours. Cassettes with pre-frozen preparation are loaded into the drying chamber when the temperature of the plates reaches minus (20-30) ° C and the chamber is evacuated. The finished preparation "Ecoflor" in dry immobilized form is Packed in bottles and hermetically closed with corks. Mass fraction of moisture is not more than 3.0 wt.%.
В таблице 1 приведены адсорбционные емкости СУМС-1 после модификации поверхности (измерялась по адсорбции метиленового синего согласно ФС 42-3283-96).Table 1 shows the adsorption capacities of SUMS-1 after surface modification (measured by adsorption of methylene blue according to FS 42-3283-96).
Данные по адсорбционной емкости энтеросорбента СУМС-1 после обработки солями металловTable 1
Data on the adsorption capacity of the SUMS-1 enterosorbent after treatment with metal salts
Обработанная поверхность СУМС-1 оценивалась в биологических тестах по:The treated surface of SUMS-1 was evaluated in biological tests by:
1) эффективности биосорбции (отношение количества сорбированных клеток к общему количеству бактерий в исходной суспензии),1) the effectiveness of biosorption (the ratio of the number of adsorbed cells to the total number of bacteria in the initial suspension),
2) эффекивности биодесорбции (отношение количества бактерий, десорбированных с поверхности СУМС-1, к количеству сорбированных бактерий).2) the effectiveness of biodesorption (the ratio of the number of bacteria desorbed from the surface of SUMS-1 to the number of sorbed bacteria).
Эффективность биодесорбции является важным показателем, во многом определяющим клиническую эффективность ИКЭ. Результаты биологических тестов приведены в табл. 2.The effectiveness of biodesorption is an important indicator that largely determines the clinical effectiveness of IKE. The results of biological tests are given in table. 2.
Данные биологического тестирования энтеросорбента СУМС после обработки солями металловtable 2
Biological testing data of SUMS enterosorbent after treatment with metal salts
Т1 (КОЕ/мл) - исходный титр биомассы бактерий;
Т2 (КОЕ/мл) - титр биомассы бактерий, оставшейся после иммобилизации на энтеросорбент;Note:
T1 (CFU / ml) is the initial titer of bacterial biomass;
T2 (CFU / ml) - titer of the biomass of bacteria remaining after immobilization on enterosorbent;
Т4 - титр (КОЕ/мл) бактериальных клеток после десорбции, определяющий клинический эффект от действия препаратаT3 = T1-T2 - titer (CFU / ml) of bacterial cells immobilized on a sorbent;
T4 - titer (CFU / ml) of bacterial cells after desorption, which determines the clinical effect of the drug
Таким образом, по результатам исследований обработанной поверхности СУМС-1 солями металлов вариант №6 (табл.1) обработки MgSO4·6H2О (3%) является наиболее оптимальным. После обработки энтеросорбента СУМС-1 3%-ным раствором сульфата магния эффективность его биосорбции увеличивается в 1,4 раза (отношение сорбированных клеток к общему количеству бактерий в исходной суспензии), а эффективность биодесорбции, определяющая клинический эффект от действия комплексного препарата (отношение количества бактерий, десорбированных с поверхности СУМС-1 к количеству сорбированных на нем бактерий), равна 1, что показывает о том, что практически все бактерии могут десорбироваться в желудочно-кишечном тракте.Thus, according to the results of studies of the treated surface of SUMS-1 with metal salts, option No. 6 (Table 1) of the treatment with MgSO 4 · 6H 2 O (3%) is the most optimal. After treatment of the SUMS-1 enterosorbent with a 3% solution of magnesium sulfate, its biosorption efficiency increases by 1.4 times (the ratio of sorbed cells to the total number of bacteria in the initial suspension), and the biodesorption efficiency, which determines the clinical effect of the action of the complex preparation (ratio of bacteria desorbed from the surface of SUMS-1 to the number of bacteria adsorbed on it) is 1, which indicates that almost all bacteria can be desorbed in the gastrointestinal tract.
Результаты доклинических исследованийPreclinical Studies
Проведенные исследования подтвердили, что комплексный препарат «Экофлор» нетоксичен для лабораторных животных, восстанавливает нормобиоценоз кишечника, элиминирует условно-патогенную и патогенную микрофлору, не вызывает побочных и непредвиденных нежелательных реакций, стимулирует процессы адаптации организма к неблагоприятным факторам внешней среды. Основные результаты исследования:Studies have confirmed that the complex preparation "Ecoflor" is non-toxic for laboratory animals, restores intestinal normobiocenosis, eliminates opportunistic and pathogenic microflora, does not cause adverse and unforeseen adverse reactions, stimulates the body's adaptation to adverse environmental factors. The main results of the study:
1) морфометрические показатели животных в экспериментальных группах нарастали в соответствии с популяционным стандартом;1) the morphometric indicators of animals in the experimental groups increased in accordance with the population standard;
2) лабораторные анализы крови оставались в пределах физиологической нормы;2) laboratory blood tests remained within the physiological norm;
3) гистологические исследования органов показали отсутствие токсического воздействия;3) histological examination of organs showed the absence of toxic effects;
4) подтверждено отсутствие повреждающего действия на структуру кишечного эпителия со стороны препарата;4) confirmed the absence of a damaging effect on the structure of intestinal epithelium from the side of the drug;
5) патолого-анатомическое вскрытие подтвердило состояние органов в норме. Полученные результаты свидетельствуют о том, что комплексный препарат «Экофлор» успешно прошел доклинические испытания.5) pathological anatomical autopsy confirmed the condition of the organs is normal. The results obtained indicate that the complex preparation "Ecoflor" successfully passed preclinical trials.
Результаты клинических исследований комплексного препарата «ЭКОФЛОР»The results of clinical trials of the complex drug "ECOFLOR"
Все пациенты (45 человек - экспериментальная группа и 25 человек - группа сравнения) имели хроническую патологию: атопический дерматит - в 44,4% случаев; острый аллергоз - в 11,1% случаев; вторичный хронический пиелонефрит - в 22,2% случаев; сахарный диабет - в 11,1% случаев; бронхиальная астма - в 11,1% случаев.All patients (45 people - the experimental group and 25 people - the comparison group) had a chronic pathology: atopic dermatitis - in 44.4% of cases; acute allergosis - in 11.1% of cases; secondary chronic pyelonephritis - in 22.2% of cases; diabetes mellitus - in 11.1% of cases; bronchial asthma - in 11.1% of cases.
После проведенного экспериментального курса лечения комплексным препаратом «Экофлор» были получены следующие результаты:After the experimental course of treatment with the complex drug Ecoflor, the following results were obtained:
1) препарат «Экофлор» способствует уменьшению абдоминального болевого синдрома, проявлений диспепсического синдрома, нормализации моторной функции кишечника, регрессу кожных высыпаний;1) the drug "Ecoflor" helps to reduce abdominal pain, manifestations of dyspeptic syndrome, normalization of intestinal motor function, regression of skin rashes;
2) применение «Экофлора» способствует уменьшению субъективных клинических (недомогание, слабость, нарушение аппетита) и объективных лабораторных критериев (нормализация лейкоцитарного индекса интоксикации и гематологического показателя интоксикации, купирование синдрома цитолиза и нормализация общего белка сыворотки крови, а также уменьшение выраженности мочевого синдрома), отражающих синдром эндогенной интоксикации;2) the use of "Ecoflora" helps to reduce subjective clinical (malaise, weakness, impaired appetite) and objective laboratory criteria (normalization of the leukocyte intoxication index and hematological intoxication index, relief of cytolysis syndrome and normalization of total serum protein, as well as a decrease in the severity of urinary syndrome), reflecting endogenous intoxication syndrome;
3) при использовании препарата «Экофлор» в 62,2% наблюдается полное восстановление функций переваривания и всасывания в кишечнике, у остальных больных - тенденция к нормализации показателей;3) when using the Ecoflor drug in 62.2%, a complete restoration of the functions of digestion and absorption in the intestine is observed, in other patients there is a tendency to normalization of indicators;
4) препарат «Эклофлор» способствует восстановлению кишечной микрофлоры: кишечной палочки, бифидофлоры; снижению кокковых форм, кишечной палочки со слабо выраженными ферментными свойствами, лактозонегативных энтеробактерий;4) the drug "Ecloflor" helps to restore intestinal microflora: E. coli, bifidoflora; decrease in coccal forms, E. coli with weak enzyme properties, lactose-negative enterobacteria;
5) при приеме препарата не выявлены побочные эффекты и осложнения.5) when taking the drug, no side effects and complications were detected.
Таким образом, препарат успешно прошел клинические испытания, является безвредным и высокоэффективным средством в отношении восстановления нормобиоценоза кишечника и купирования синдрома эндогенной интоксикации.Thus, the drug has successfully passed clinical trials, is a harmless and highly effective tool for restoring intestinal normobiocenosis and stopping endogenous intoxication syndrome.
Claims (9)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2006100740/15A RU2317089C2 (en) | 2006-01-10 | 2006-01-10 | Complex preparation-probiotic in immobilized and lyophilized form and method for its obtaining |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2006100740/15A RU2317089C2 (en) | 2006-01-10 | 2006-01-10 | Complex preparation-probiotic in immobilized and lyophilized form and method for its obtaining |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2006100740A RU2006100740A (en) | 2007-07-20 |
RU2317089C2 true RU2317089C2 (en) | 2008-02-20 |
Family
ID=38430842
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2006100740/15A RU2317089C2 (en) | 2006-01-10 | 2006-01-10 | Complex preparation-probiotic in immobilized and lyophilized form and method for its obtaining |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2317089C2 (en) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2530174C2 (en) * | 2012-09-14 | 2014-10-10 | Закрытое Акционерное Общество "Производственная Фармацевтическая Компания Обновление" | Bacterial system for normalising microbiocenosis of human and animal organism |
RU2740140C1 (en) * | 2020-07-13 | 2021-01-11 | Общество с ограниченной ответственностью "АВАН" | Method of producing and a composition for increasing the effectiveness of probiotic microorganisms |
RU2811096C1 (en) * | 2023-06-02 | 2024-01-11 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет" | Lyophilisate of immobilized multicomponent synbiotic and method of its preparation |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009051510A1 (en) * | 2007-10-15 | 2009-04-23 | Obschestvo S Ogranichennoy Otvetstvennostyu 'sibbiosan' | Immobilised and lyophilised complex probiotic preparation and a method for the production thereof |
-
2006
- 2006-01-10 RU RU2006100740/15A patent/RU2317089C2/en not_active IP Right Cessation
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2530174C2 (en) * | 2012-09-14 | 2014-10-10 | Закрытое Акционерное Общество "Производственная Фармацевтическая Компания Обновление" | Bacterial system for normalising microbiocenosis of human and animal organism |
RU2740140C1 (en) * | 2020-07-13 | 2021-01-11 | Общество с ограниченной ответственностью "АВАН" | Method of producing and a composition for increasing the effectiveness of probiotic microorganisms |
RU2811096C1 (en) * | 2023-06-02 | 2024-01-11 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет" | Lyophilisate of immobilized multicomponent synbiotic and method of its preparation |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2006100740A (en) | 2007-07-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6945607B2 (en) | Polymer usage | |
ES2245801T3 (en) | PHARMACEUTICAL PREPARATION UNDERSTANDING LACTOBACILLUS CASEI RHAMNOSUS. | |
CN109234182B (en) | Lactobacillus plantarum ZJUFT34 and application thereof | |
ES2545209T3 (en) | Method of obtaining a new strain of Bifidobacterium bifidum with activity against Helicobacter pylori infection | |
CN112746034B (en) | Lactobacillus rhamnosus LR863 and lactobacillus rhamnosus LR519 for synergistically inhibiting helicobacter pylori and application thereof | |
KR101839374B1 (en) | Bacillus subtilis SCGB 574 strain having antimicrobial activity and probiotics properties and uses thereof | |
ES2356325T3 (en) | SOLID COMPOSITION CONTAINING SPACES OF NON-PATHOGEN BACTERIA OF THE BACILLUS GENDER. | |
US6746672B2 (en) | Isolated bifidobacteria that produce siderophores which inhibit growth of lactococcus lactis | |
CN111849810A (en) | Lactobacillus ZJuuiss 03 for antagonizing helicobacter pylori and application thereof | |
WO2018183355A1 (en) | Prebiotic formulations | |
CN116024131B (en) | Lactobacillus plantarum strain GOLDGUT-LP101 and application thereof | |
IL263218B (en) | Composition and methods for microbiota therapy | |
CN114480231A (en) | Lactobacillus reuteri for resisting helicobacter pylori infection and application thereof | |
RU2317089C2 (en) | Complex preparation-probiotic in immobilized and lyophilized form and method for its obtaining | |
Painter | Concerning the wound-healing properties of Sphagnum holocellulose: the Maillard reaction in pharmacology | |
RU2287335C1 (en) | Preparation "bacstitatin" for treating diseases of gastrointestinal tract | |
Mansurov et al. | Nanostructured carbon materials for biomedical use | |
RU2371479C1 (en) | Complex probiotic medicine in immobilised and lyophilised form | |
KR101839371B1 (en) | Bacillus amyloliquefaciens SRCM 100731 strain having antimicrobial activity and probiotics properties and uses thereof | |
RU2164801C1 (en) | Preparation-probiotic as dry immobilized form | |
WO2009051510A1 (en) | Immobilised and lyophilised complex probiotic preparation and a method for the production thereof | |
Kiray et al. | Evaluation of vaginal lactobacilli with potential probiotic properties and biotherapeutic effects isolated from healthy Turkish women | |
KR101839375B1 (en) | Bacillus amyloliquefaciens SRCM 100730 strain having antimicrobial activity and probiotics properties and uses thereof | |
CN107603925A (en) | A kind of lactobacillus fermenti inm25 and its application with norcholesterol function | |
RU2118535C1 (en) | Complex bacterial preparation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090111 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20100927 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20120111 |