RU2288007C2 - Способ изготовления ассоциированной инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота - Google Patents
Способ изготовления ассоциированной инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота Download PDFInfo
- Publication number
- RU2288007C2 RU2288007C2 RU2005104190/13A RU2005104190A RU2288007C2 RU 2288007 C2 RU2288007 C2 RU 2288007C2 RU 2005104190/13 A RU2005104190/13 A RU 2005104190/13A RU 2005104190 A RU2005104190 A RU 2005104190A RU 2288007 C2 RU2288007 C2 RU 2288007C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- strain
- vaccine
- irt
- inactivated
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной вирусологии. Целью изобретения является разработка эпизоотологически и экологически безопасной ассоциированной инактивированной вакцины, создающей напряженный иммунитет одновременно против ИРТ и ПГ-3 крупного рогатого скота. Способ включает культивирование вакцинных штаммов вирусов инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 в культуре клеток, сбор вируссодержащей культуральной жидкости, инактивацию вируса и добавление адъюванта. При этом в качестве вакцинных штаммов используют штамм ТК-А/К вируса инфекционного ринотрахеита, выращенный в перевиваемой культуре клеток МДВК, с активностью 7,5-8,0 lg ТЦД50/см3, и штамм ПГ/К-2002 вируса парагриппа-3, выращенный в перевиваемой культуре клеток ПС, с активностью 7,5-8,0 lg ТЦД50/см3. После сбора вируссодержащей культуральной жидкости проводят инактивацию вируса каждого штамма теотропином в течение 5-7 суток при температуре 36,5-37,5°С, рН 7,2-7,5. Причем к вируссодержащей жидкости каждого штамма добавляют теопропин в конечной концентрации 0,1%, а затем смешивают инактивированные вируссодержащие жидкости обоих штаммов в соотношении 1:1 и добавляют адъювант в количестве 20%, состоящий из 6%-ного геля гидроокиси алюминия и сапонина. Способ позволяет получить эпизоотологически и экологически безопасную вакцину, создающую напряженный иммунитет у привитых животных, стабильную при хранении. 1 табл.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной вирусологии и касается специфической профилактики инфекционного ринотрахеита (ИРТ) и парагриппа-3 (ПГ-3) крупного рогатого скота посредством вакцинации.
Эти болезни играют ведущую роль в этиологии респираторных болезней крупного рогатого скота, в особенности, в крупных хозяйствах и откормочных предприятиях.
Для профилактики ИРТ и ПГ-3 крупного рогатого скота используют моновалентные и ассоциированные вакцины [1].
Недостатком моновалентных вакцин является то, что они стимулируют образование иммунитета только к одной инфекции, возникает необходимость проведения профилактических обработок против каждой инфекции в отдельности с обязательным разрывом между вакцинациями, что увеличивает затраты труда и удлиняет сроки защиты животных, из-за стрессов и возможных осложнений снижается продуктивность скота.
Известна ассоциированная вакцина для профилактики респираторных болезней крупного рогатого скота, содержащая вирусвакцину против ИРТ JBR-JPV и вирусвакцину против ПГ-3 из аттенуированных штаммов [2].
Недостатком известной ассоциированной вакцины против ИРТ и ПГ-3 является то, что живые инфекционные патогены - аттенуированные штаммы способны вызывать осложнения, обусловленные рекомбинацией вакцинного вируса с полевым изолятом или его реактивацией с развитием секундарных инфекций.
Вторым недостатком использования живых аттенуированных штаммов-возбудителей ИРТ и ПГ-3 является их способность персистировать в организме в латентной форме, что существенным образом ограничивает возможности применения живых вакцин.
По ассоциированным инактивированным вакцинам против ИРТ и ПГ-3 в литературе имеются отдельные сообщения.
Известна ассоциированная инактивированная вакцина для профилактики респираторных болезней крупного рогатого скота, содержащая антиген вируса ИРТ из штамма ТК-А (ВИЭВ) В2, антиген вируса диареи из штамма ВК-1 (В-1) №28, антиген хламидий, инактивированные формалином, и масляный адъювант [3].
Недостатком этой ассоциированной инактивированной вакцины является то, что при ее изготовлении не используют антиген против парагриппа-3, в результате чего данный препарат не создает иммунитет против указанной инфекции и требуется дополнительное применение моновакцин.
Наиболее близкой является ассоциированная инактивированная вакцина против ПГ-3 и ИРТ крупного рогатого скота производства ВНИИЗЖ. При ее изготовлении используется антиген вируса ИРТ из штамма ВНИИЗЖ, выращенного в монослое клеток МДВК и антиген вируса ПГ-3 из штамма ВГНК-4, выращенного в суспензии клеток ВНК-21, инактивированные аминоэтиленимином (АЭЭИ), в качестве адъюванта используют ГОА и сапонин [4]. Недостатком способа изготовления этой вакцины является то, что для получения вирусного сырья используют штаммы вирусов ИРТ и ПГ-3, которые репродуцируются в культурах клеток с относительно невысокой инфекционной активностью, в результате чего не обеспечивается необходимое количество в прививной дозе протективных антигенов против указанных болезней.
Целью изобретения является разработка эпизоотологически и экологически безопасной ассоциированной инактивированной вакцины, создающей напряженный иммунитет одновременно против ИРТ и ПГ-3 крупного рогатого скота.
Технический результат изобретения заключается в получении ассоциированной инактивированной вакцины против ИРТ и ПГ-3, обеспечивающей необходимое количество протективных антигенов в прививной дозе. Кроме того, для получения вируса ПГ-3 с высокой биологической активностью используется высокопродуктивная перевиваемая линия клеток почки сайги (ПС). Использование при инактивации вирусов щадящего в антигеном отношении препарата 1,8,3,6-диэндометилен-1,3,6,8-тетраазациклодекан (теотропин) обеспечивает безопасность и высокую эпизоотологическую (иммунологическую) эффективность вакцины.
Сущность изобретения заключается в следующем.
Способ изготовления ассоциированной инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота включает культивирование вакцинных штаммов вирусов инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 в культуре клеток, сбор вируссодержащей культуральной жидкости, инактивацию вируса и добавление адъюванта, при этом в качестве вакцинных штаммов используют штамм ТК-А/К вируса инфекционного ринотрахеита, выращенный в перевиваемой культуре клеток МДВК, с активностью 7,5-8,0 lg ТЦД50/см3, и штамм ПГ/К-2002 вируса парагриппа-3, выращенный в перевиваемой культуре клеток ПС, с активностью 7,5-8,0 lg ТЦД50/см3, после сбора вируссодержащей культуральной жидкости проводят инактивацию вируса каждого штамма теотропином в течение 5-7 суток при температуре 36,5-37,5°С, рН 7,2-7,5, причем к вируссодержащей жидкости каждого штамма добавляют теопропин в конечной концентрации 0,1%, а затем смешивают инактивированные вируссодержащие жидкости обоих штаммов в соотношении 1:1 и добавляют адъювант в количестве 20%, содержащий 19% 6%-ного геля гидроокиси алюминия и 1% 10%-ного раствора сапонина от всего объема вакцины.
Входящие в предлагаемую ассоциированную инактивированную вакцину против ИРТ и ПГ-3 указанные штаммы депонированы в ВГНКИ (№ТК-АК-А/К-ДЕП и №ПГ/К-2002-ДЕП), используются впервые и являются производственными при изготовлении моно- и бивалентной вакцины.
Инактивация раздельно вирусов ИРТ и ПГ-3 теотропином с последующим их смешиванием, добавление в качестве адьюванта 6%-ной гидроокиси алюминия в объеме 19% и 10%-ного раствора сапонина в объеме 1% от общего количества вакцины обеспечивают одновременно индукцию иммунитета против ИРТ и ПГ-3, повышение иммуногенности препарата, проявляющейся в увеличении напряженности и длительности иммунитета. Повышенный защитный эффект вакцины достигается за счет увеличения в 10-100 раз инфекционной активности вирусов ИРТ и ПГ-3 в вируссодержащем материале до инактивации и, соответственно, количества их антигенов в прививной дозе, а также щадящих в антигенном отношении условий инактивации биоматериалов. Результаты оценки инактивированной вакцины предложены в таблице.
Таблица Сравнительная характеристика эффективности прототипа и предложенного способа изготовления ассоциированной инактивированной вакцины против ИРТ и ПГ-3. |
|||||||||
Способ изготовления вакцины | Штаммы вирусов | Культуры клеток | Титр вирусного сырья(lg ТЦ50/см3) | Инактиватор | Продолжительность иммунитета (мес) | Примечание | |||
ИРТ | ПГ-3 | ИРТ | ПГ-3 | ИРТ | ПГ-3 | ||||
Предложенный | ТК-А/К | ГП/К-2002 | МДВК | ПС | 7,5-8,0 | 7,5-8,0 | Теотропин | 12 | Штаммы впервые использованы |
Прототип | ВНИИЗЖ | ВГНКИ-4 | МДВК | ВНК-21 | 6,88-7,33 | 7,33*-7,88 | Аминоэтиленимин | 6 | Вирус, выращенный методом суспензионного культивирования, в сравнении с монослойным способом обладает более низкой иммуногенностью. |
* Примечание: для получения необходимого количества антигена в прививной дозе требуется концентрирование вирусного сырья, полученного суспензионным методом |
Как видно из таблицы, более эффективной в иммунобиологическом отношении оказалась вакцина, полученная предложенным способом.
Пример №1: Производственный аттенуированный вакцинный штамм ТК-А/К вируса ИРТ размножают в перевиваемой культуре клеток почки теленка (МДВК). Культуру клеток заражают указанным вирусом в дозе 0,1-1,0 ТЦД50/клетка. Зараженные культуры в культуральных матрасах или во вращающихся сосудах инкубируют при 36,5-37,5°С в течение 48-72 часов до полного разрушения монослоя. Затем вируссодержащую культуральную жидкость собирают, определяют активность суспендированного в ней вируса и используют для изготовления ассоциированной инактивированной вакцины против ИРТ и ПГ-3. Вируссодержащую культуральную жидкость инактивируют теотропином в конечной концентрации 0,1% при 36,5-37,5°С, рН 7,2-7,5 в течение 5-7 суток, проверяют в 3 пассажах в культуре МДВК на полноту инактивации вируса.
Производственный вакцинный аттенуированный штамм ПГ/К-2002 вируса ПГ-3 размножают в монослое перевиваемой культуры клеток почки сайги (ПС). Культуру клеток заражают указанным вирусом в дозе 0,01-1,0 ТЦД50/клетка. Зараженные культуры в матрасах или во вращающихся сосудах инкубируют при 36,5-37,5°С в течение 96-120 часов, затем вируссодержащую культуральную жидкость собирают, определяют активность и используют для изготовления ассоциированной инактивированной вакцины против ИРТ и ПГ-3. Вируссодержащую культуральную жидкость инактивируют теотропином в конечной концентрации 0,1% при 36,5-37,5°С, рН 7,2-7,5 в течение 5-7 суток, проверяют в 3 пассажах в культуре ПС на полноту инактивации вируса. Для изготовления 1 литра вакцины используют сырье, содержащее вирус ИРТ - 400 мл, вирус ПГ-3 - 400 мл и 200 мл адъюванта, содержащего 19% 6%-ного геля гидроокиси алюминия (ГОА) и 1% 10%-ного раствора сапонина от всего объема вакцины, тщательно перемешивают полученную смесь компонентов в жидкости, расфасовывают во флаконы.
Пример №2: Полученную ассоциированную инактивированную вакцину против ИРТ и ПГ-3 применяют в неблагополучных по этим болезням хозяйствах и угрожаемых зонах для профилактики ИРТ и ПГ-3 крупного рогатого скота. В животноводческих комплексах откормочного типа клинически здоровых телят с месячного возраста вакцинируют в первые два дня после поступления в хозяйство по группам, обеспечив в последующем сохранение этих групп, разрешая перемещение животных не ранее чем через 2 недели со дня повторной вакцинации. В хозяйствах племенного и репродуктивного типа вакцинируют только клинически здоровых животных, в том числе находящихся под угрозой заражения. Перемещение животных разрешают не ранее чем через 2 недели со дня повторной вакцинации.
Вакцину вводят подкожно по 5 см3 в среднюю часть шеи двукратно с интервалом 14-28 дней. Иммунитет формируется через 2 недели после первой вакцинации и длится не менее 12 месяцев.
Вакцина апробирована на крупном рогатом скоте в условиях хозяйств различного направления, продуктивности и в разной эпизоотической ситуации на территории Орловской области. Эта апробация подтверждает безвредность препарата и его противоэпизоотическую эффективность, проявляемую в усилении иммунизирующей активности компонентов ассоциированной инактивированной вакцины. Защитный уровень ВН-антител у привитых животных данной вакцинной сохранялся 12 месяцев.
Применение ассоциированной культуральной инактивированной вакцины против ИРТ и ПГ-3 позволяет существенно снизить уровень респираторных и других патологий в стадах крупного рогатого скота.
Литература
1. Инфекционные болезни животных. Справочник. П/р Д.Ф. Осидзе. М.: Агропромиздат, 1987, с.19, 47, 99.
2. Патент СРР №58827, С 12 К 5/00, 1975.
3. А.с. СССР №178219, А 61 К 39/118, 1993.
4. Лисицин В.В., Ручнов Ю.Е. и др. Изучение биологических свойств вакцины сорбированной инактивированной против ПГ-3 и ИРТ производства ВНИИЗЖ / Актуальные проблемы патологии свиней, крупного и мелкого рогатого скота. Конф. молод. ученых 27-28 фев. 2002, Владимир, ФГУ ВНИИЗЖ, с.43-49.
Claims (1)
- Способ изготовления ассоциированной инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота, включающий культивирование вакцинных штаммов вирусов инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 в культуре клеток, сбор вируссодержащей культуральной жидкости, инактивацию вируса и добавление адъюванта, отличающийся тем, что в качестве вакцинных штаммов используют штамм ТК-А/К вируса инфекционного ринотрахеита, выращенный в перевиваемой культуре клеток МДВК, с активностью 7,5-8,0 lg ТЦД50/см 3, и штамм ПГ/К-2002 вируса парагриппа-3, выращенный в перевиваемой культуре клеток ПС, с активностью 7,5-8,0 lg ТЦД50/см 3, после сбора вируссодержащей культуральной жидкости проводят инактивацию вируса каждого штамма теотропином в течение 5-7 суток при температуре 36,5-37,5°С, рН 7,2-7,5, причем к вируссодержащей жидкости каждого штамма добавляют теопропин в конечной концентрации 0,1%, а затем смешивают инактивированные вируссодержащие жидкости обоих штаммов в соотношении 1:1 и добавляют адъювант в количестве 20%, состоящий из 6%-ного геля гидроокиси алюминия и сапонина.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2005104190/13A RU2288007C2 (ru) | 2005-02-17 | 2005-02-17 | Способ изготовления ассоциированной инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2005104190/13A RU2288007C2 (ru) | 2005-02-17 | 2005-02-17 | Способ изготовления ассоциированной инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2005104190A RU2005104190A (ru) | 2006-07-27 |
RU2288007C2 true RU2288007C2 (ru) | 2006-11-27 |
Family
ID=37057580
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2005104190/13A RU2288007C2 (ru) | 2005-02-17 | 2005-02-17 | Способ изготовления ассоциированной инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2288007C2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2506094C2 (ru) * | 2008-08-19 | 2014-02-10 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи | Иммунологическая композиция |
-
2005
- 2005-02-17 RU RU2005104190/13A patent/RU2288007C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Наставление по применению вакцины инактивированной комбинированной против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторно-синцитиальной, рото-, короновирусной болезни телят КОМБОВАК, №13-3-04/0703 от 20.03.2003. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2506094C2 (ru) * | 2008-08-19 | 2014-02-10 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи | Иммунологическая композиция |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2005104190A (ru) | 2006-07-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
BR112015012711B1 (pt) | Método para preparar uma composição imunogênica para o tratamento e/ou a profilaxia de infecções por mycoplasma | |
IE51389B1 (en) | Feline infectious peritonitis virus,its preparation and vaccines containing it | |
US3155589A (en) | Parenteral extravascular injectable vaccines for simultaneous immunization of canidae against rabies, canine distemper, and infectious canine hepatitis | |
CN101374547A (zh) | 卵内接种用疫苗 | |
KR100531491B1 (ko) | 백신으로서 소 호흡 코로나바이러스 | |
RU2288007C2 (ru) | Способ изготовления ассоциированной инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 крупного рогатого скота | |
CN102965344A (zh) | 用细胞系生产鸡传染性支气管炎病毒与疫苗 | |
RU2403061C1 (ru) | Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, респираторно-синцитиальной болезни, вирусной диареи и пастереллеза крупного рогатого скота | |
CN111686246B (zh) | 一种用于猪流行性腹泻病毒的抗原抗体复合物疫苗及其制备方法 | |
Chomiak et al. | Tissue culture and chicken embryo techniques for infectious laryngotracheitis virus studies | |
RU2329828C1 (ru) | Способ изготовления вакцины для профилактики и лечения некробактериоза животных, вакцина для профилактики и лечения некробактериоза животных и способ профилактики и лечения некробактериоза животных | |
KR20140112766A (ko) | 애완견의 바이러스성 전염병 예방 및 치료용 복합 난황 항체 조성물 및 그 제조방법 | |
RU2261111C1 (ru) | Инактивированная вакцина против вирусных пневмогастроэнтеритов крупного рогатого скота и телят и способ профилактики вирусных пневмогастроэнтеритов | |
RU2452512C2 (ru) | Вакцина ассоциированная против парвовирусной, реовирусной, герпесвирусной типа i инфекций и вирусной диареи - болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота инактивированная эмульсионная | |
CN104415330A (zh) | 一种疫苗组合物及其制备方法与应用 | |
RU2517733C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против аденовирусной, герпесвирусной инфекцией, парагриппа-3 и вирусной диареи-болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота инактивированная эмульсионная | |
RU2233174C2 (ru) | Вакцина культуральная инактивированная против хламидиоза крупного и мелкого рогатого скота | |
RU2111011C1 (ru) | Вакцина "тривак (виэв)" для профилактики инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 и вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота | |
RU2531054C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против псевдомоноза и вирусной геморрагической болезни кроликов | |
RU2162340C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против сальмонеллеза свиней | |
RU2286174C2 (ru) | Ассоциированная вакцина против сибирской язвы и некробактериоза животных | |
CN105749273A (zh) | 猪圆环病毒2型与猪细小病毒二联灭活疫苗及其制备方法 | |
RU2504400C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная | |
CN108624522A (zh) | 一种副鸡禽杆菌菌株及其应用 | |
RU2457859C1 (ru) | Вакцина против вирусной диареи крупного рогатого скота |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20070218 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090218 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20100610 |
|
RZ4A | Other changes in the information about an invention | ||
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130218 |