RU2275634C2

RU2275634C2 - Method for predicting clinical course of acute intestinal infections in children

Info

Publication number: RU2275634C2
Application number: RU2004122735/15A
Authority: RU
Inventors: Ас Степановна Кветна (RU); Ася Степановна Кветная; Людмила Ильинична Железова (RU); Людмила Ильинична Железова
Original assignee: Научно-исследовательский институт детских инфекций (НИИДИ)
Priority date: 2004-07-23
Filing date: 2004-07-23
Publication date: 2006-04-27
Also published as: RU2004122735A

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: method involves calculating coefficient describing ratio of polymorphous nuclear leukocyte number having single-stranded RNA to and polymorphous nuclear leukocyte number of double-helical DNA before (α^k) and after (α⁰) treatment with endotoxin in blood sample smears stained with acrydine orange. α^k to α⁰ correlation index is determined. The value being equal to or greater than 1, lingering clinical course of acute intestinal infection is to be predicted.

EFFECT: high prognosis accuracy.

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к инфекционным болезням, и может быть использовано для прогнозирования течения инфекционного процесса при острых кишечных инфекциях (ОКИ) у детей.The invention relates to medicine, in particular to infectious diseases, and can be used to predict the course of the infectious process in acute intestinal infections (acute intestinal infections) in children.

Проблема острых кишечных инфекций, обусловленных патогенными возбудителями (шигеллами, сальмонеллами, эшерихиозами), у детей по-прежнему является одной из наиболее актуальных в инфекционной патологии, поскольку уровень заболеваемости во многих странах мира, в том числе и в Российской Федерации, остается на достаточно высоких цифрах. Отмечен рост бактериальных диарей, вызванных условно-патогенными микроорганизмами (УПМ), что связано с экологическим неблагополучием и нерациональным использованием антибиотиков или других препаратов. В отличие от характера течения ОКИ прошлых лет, особенно у детей, наблюдаются существенные изменения клинического течения этих заболеваний. Увеличилась частота регистраций тяжелых с затяжным течением форм ОКИ с выраженными симптомами токсикоза.The problem of acute intestinal infections caused by pathogenic pathogens (Shigella, Salmonella, Escherichiosis) in children is still one of the most urgent in infectious pathology, since the incidence rate in many countries of the world, including the Russian Federation, remains quite high figures. The growth of bacterial diarrhea caused by opportunistic microorganisms (UPM) was noted, which is associated with environmental problems and the irrational use of antibiotics or other drugs. In contrast to the nature of the course of acute intestinal infections of previous years, especially in children, significant changes in the clinical course of these diseases are observed. The frequency of registration of severe forms with prolonged course of acute intestinal infections with severe symptoms of toxicosis has increased.

Степень интоксикации, тяжесть течения и исход ОКИ, в первую очередь, зависят от своевременного включения функционально-адаптационных систем макроорганизма и их активности. Оценка показателей, отражающих особенности взаимоотношений возбудителя и макроорганизма при инфекционных заболеваниях, как известно, позволяет объективно оценить характер и прогноз течения инфекционного процесса при ОКИ.The degree of intoxication, the severity of the course and the outcome of acute intestinal infections, primarily depend on the timely inclusion of the functional adaptive systems of the macroorganism and their activity. Evaluation of indicators reflecting the characteristics of the relationship between the pathogen and the macroorganism in infectious diseases, as you know, allows you to objectively assess the nature and prognosis of the course of the infectious process in acute intestinal infections.

В последние годы проблеме разработки методологических подходов к оценке прогноза течения инфекционных заболеваний уделяется большое внимание. Так, известен способ прогнозирования течения ОКИ, основанный на определении степени связывания эндотоксина грамотрицательными бактериями при помощи FC-зависимого механизма (В.Г.Лиходед, И.А.Аниховская и соавт. FC-зависимое связывание эндотоксинов грамотрицательных бактерий полиморфноядерными лейкоцитами крови человека //Журн.микробиол., 1996, №2, с.76-79), описаны способ определения биосинтетической активности лимфоцитов больных шигеллезом с помощью иммуноферментного анализа (М.З.Шахмарданов, В.И.Лучшев и соавт. Биосинтетическая активность лимфоцитов больных шигеллезом на фоне лечения эубиотиками //Журн.эпидем. и инфекц.болезни, 1997, №1, с.42-44) и способ, основанный на способности эозинофилов взаимодействовать с липополисахаридом (ЛПС) (М.Ю.Яковлев, А.А.Кубатиев, В.М.Бондаренко и соавт. Эозинофил- супераффинная клетка крови человека к эндотоксину //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1989, №6, с.765-766).In recent years, much attention has been paid to the development of methodological approaches to assessing the prognosis of the course of infectious diseases. So, there is a known method for predicting the course of OCI based on determining the degree of endotoxin binding by gram-negative bacteria using the FC-dependent mechanism (V.G. Likhoded, I.A. Anikhovskaya et al. FC-dependent binding of gram-negative bacteria endotoxins by human polymorphonuclear leukocytes // Zh. Microbiol., 1996, No. 2, pp. 76-79), a method for determining the biosynthetic activity of lymphocytes of patients with shigellosis using an enzyme-linked immunosorbent assay (MZ Shakhmardanov, V.I. Lyshev and co-authors. Biosynthetic activity l of Shigellosis patients' lymphocytes during treatment with eubiotics // Journal of Epidemics and Infectious Diseases, 1997, No. 1, pp. 42-44) and a method based on the ability of eosinophils to interact with lipopolysaccharide (LPS) (M.Yu. Yakovlev, A .A. Kubatiev, V. M. Bondarenko et al. Eosinophil-superaffin human blood cell to endotoxin // Bulletin of experimental biology and medicine, 1989, No. 6, pp. 765-766).

Несмотря на высокую степень технологии и чувствительности предложенных способов прогнозирования характера течения инфекционных заболеваний последние не лишены существенных недостатков. Они не обладают точностью, отличаются трудоемкостью и длительностью проведения исследования, для воспроизведения требуют дорогостоящего оборудования и препаратов, а также строгого соблюдения противоэпидемического режима в связи с работой живыми культурами возбудителей.Despite the high degree of technology and sensitivity of the proposed methods for predicting the nature of the course of infectious diseases, the latter are not without significant drawbacks. They do not have accuracy, they are laborious and time-consuming to conduct research; they require expensive equipment and preparations for reproduction, as well as strict adherence to the anti-epidemic regime in connection with the work of live cultures of pathogens.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению является способ прогнозирования характера течения ОКИ, основанный на оценке функциональной активности лимфоцитов крови с использованием флюоресцентного красителя акридинового оранжевого (Е.Г.Завгородняя, М.З. Шахмарданов и соавт. //Журн. Клинич.лаб.диагн., 1993, №2, с.75-76 ). Для исследования используются пробы крови из пальца в объеме 0,5 мл, которая отстаивается в термостате при температуре 37°С в течение 20-30 мин, затем разводится раствором питательной среды 199 (1:1). Из полученной смеси, взятой в объеме 0,02 мл, готовится тонкий мазок, который высушивается, фиксируется в смеси 96° этилового спирта с ацетоном (1:1) и затем окрашивается акридиновым оранжевым красителем в концентрации 1:25000 в течение 10 мин. Окрашенные мазки просматривают на микрофлюориметре «Люмам И-3» и учитывают интенсивность флюоресценции нуклеиновых кислот (РНК и ДНК) в лимфоцитах. В красной области спектра (640 нм) учитывается свечение однонитевых РНК. При исследовании в зеленой части спектра (530 нм) определяется свечение двуспиральной ДНК. Соотношение количества лимфоцитов с РНК свечением к количеству лимфоцитов с ДНК-свечением характеризует их биосинтетическую активность и определяется как коэффициент «», который у «условно» здоровых составляет 0,12±0,02, у больных ОКИ на начальном этапе заболевания коэффициент «» колеблется от 0,17±0,01 до 0,25±0,03.Closest to the proposed invention is a method for predicting the nature of the course of OCI, based on the assessment of the functional activity of blood lymphocytes using a fluorescent dye acridine orange (E.G. Zavgorodnaya, M.Z. Shakhmardanov et al. // Journal. Klinich.lab.diagn. , 1993, No. 2, pp. 75-76). For the study, blood samples from the finger are used in a volume of 0.5 ml, which settles in the thermostat at a temperature of 37 ° C for 20-30 minutes, then is diluted with a solution of nutrient medium 199 (1: 1). A thin smear is prepared from the resulting mixture, taken in a volume of 0.02 ml, which is dried, fixed in a mixture of 96 ° ethanol with acetone (1: 1), and then stained with acridine orange dye at a concentration of 1: 25000 for 10 minutes. Stained smears are viewed on a Lumam I-3 microfluorimeter and the fluorescence intensity of nucleic acids (RNA and DNA) in the lymphocytes is taken into account. In the red region of the spectrum (640 nm), the luminescence of single-stranded RNA is taken into account. When studying in the green part of the spectrum (530 nm), the luminescence of double-stranded DNA is determined. The ratio of the number of lymphocytes with RNA fluorescence to the number of lymphocytes with DNA fluorescence characterizes their biosynthetic activity and is defined as the coefficient “”, which is “0.12 ± 0.02 in“ conditionally healthy ”patients, and the coefficient“ ”in the case of OKI at the initial stage of the disease varies from 0.17 ± 0.01 to 0.25 ± 0.03.

Основным недостатком вышеописанного способа оценки функциональной активности лимфоцитов крови с использованием акридинового оранжевого красителя является его ограниченная информация о прогнозе характера течения заболевания. Описанный способ не обеспечивает объективной сравнительной оценки функциональной активности лимфоцитов при дополнительной нагрузке липополисахарида (ЛПС).The main disadvantage of the above method for assessing the functional activity of blood lymphocytes using acridine orange dye is its limited information on the prognosis of the nature of the course of the disease. The described method does not provide an objective comparative assessment of the functional activity of lymphocytes with an additional load of lipopolysaccharide (LPS).

Между тем, известно, что уже на начальном этапе развития инфекционного процесса при ОКИ в толстой кишке, наряду с высокой колонизационной активностью возбудителя, регистрируется высокая колонизация и другими условно-патогенными (УПМ) грамотрицательными микроорганизмами, что сопровождается развитием декомпенсированных форм дисбактериоза кишечника и, следовательно, снижением антиинфекционной резистентности макроорганизма. Снижению антиинфекционной (колонизационной) резистентности слизистой толстой кишки при ОКИ у детей способствует поступление специфического ЛПС возбудителя в кровоток. Дозы ЛПС, превышающие функциональные возможности природных защитных (антиэндотоксиновых) систем организма, вызывают активацию мононуклеарных клеток с последующим истощением их функциональной активности, пролонгируя и утяжеляя таким образом течение инфекционного процесса.Meanwhile, it is known that already at the initial stage of the development of the infectious process with acute intestinal infections in the colon, along with high colonization activity of the pathogen, high colonization with other conditionally pathogenic (UPM) gram-negative microorganisms is recorded, which is accompanied by the development of decompensated forms of intestinal dysbiosis and, therefore , a decrease in the anti-infectious resistance of the macroorganism. The decrease in anti-infectious (colonization) resistance of the colon mucosa in children with acute intestinal infections is facilitated by the entry of a specific LPS pathogen into the bloodstream. Doses of LPS exceeding the functional capabilities of the body's natural protective (anti-endotoxin) systems cause activation of mononuclear cells with subsequent depletion of their functional activity, prolonging and thereby making the course of the infectious process worse.

Для устранения вышеуказанных недостатков авторы впервые предлагают способ прогнозирования характера течения ОКИ у детей путем оценки функционального состояния полиморфно-ядерных лейкоцитов (ПЯЛ) в мазках проб крови с гепарином, окрашенных акридиновым оранжевым красителем и просмотренных под люминесцентным микроскопом, отличающийся тем, что пробу крови распределяют в пробирки - «контроль» и «опыт», опытную пробу обрабатывают эндотоксином, подсчитывают в опытных и контрольных мазках ПЯЛ с однонитевой РНК, флюоресцирующей в красной области спектра и двуспиральной ДНК, флюоресцирующей в зеленой части спектра, рассчитывают коэффициент соотношения количества ПЯЛ с однонитевой РНК к числу ПЯЛ с двуспиральной ДНК и при сравнительной оценке этих коэффициентов устанавливают индекс, по которому судят об утрате или сохранении резервов связывания эндотоксина ПЯЛ. И прогнозируют (при индексе ≥1) затяжной или хронический характер течения инфекционного процесса.To eliminate the above drawbacks, the authors first proposed a method for predicting the nature of the course of acute intestinal infections in children by assessing the functional state of polymorphic nuclear leukocytes (PEL) in smears of blood samples with heparin stained with an acridine orange dye and viewed under a luminescent microscope, characterized in that the blood sample is distributed in test tubes - “control” and “experience”, the experimental sample is treated with endotoxin, counted in experimental and control smears of PNL with single-stranded RNA, fluorescent in red Asti spectrum and double-stranded DNA fluorescent in the green part of the spectrum coefficient is calculated from the ratio of PMNs single-stranded RNA to the number PMNs with double stranded DNA and the comparative evaluation of these coefficients is set index at which judge the loss or maintaining reserves endotoxin binding PMNs. And they predict (with an index ≥1) the protracted or chronic nature of the course of the infectious process.

Технический результат изобретения заключается в повышении точности и экспрессности.The technical result of the invention is to improve the accuracy and rapidity.

С целью повышения точности способа авторы впервые предлагают проводить исследование проб крови от больных ОКИ одновременно в «опыте» и «контроле». В «контрольной» пробе авторы определяют «исходный» коэффициент (α^k), отражающий уровень функциональной активности лейкоцитов (ПЯЛ) на начальном этапе (в первые дни болезни) развития инфекционного процесса. В отличие от прототипного способа авторы впервые предлагают проводить повторное определение коэффициентов РНК/ДНК (α°) после обработки исследуемых клеток ПЯЛ эндотоксином. Для осуществления этого этапа исследования авторы используют дополнительную пробу крови («опыт»). Таким методологическим подходом авторы впервые моделируют процесс дополнительного поступления ЛПС в кровоток, обусловленный высокой колонизационной активностью грамотрицательной микрофлоры, которая имеет место при всех нозологических формах ОКИ. Следовательно, полученный коэффициент в опытной пробе объективно отражает функциональную активность лейкоцитов после дополнительной нагрузки, что отражает резервную возможность ПЯЛ нейтрализовать ЛПС.In order to improve the accuracy of the method, the authors first proposed to conduct a study of blood samples from patients with acute intestinal infections simultaneously in the "experience" and "control". In the “control” test, the authors determine the “initial” coefficient (α ^k ), which reflects the level of the functional activity of leukocytes (PNL) at the initial stage (in the first days of the disease) of the development of the infectious process. In contrast to the prototype method, the authors propose for the first time to re-determine the RNA / DNA coefficients (α °) after treatment of the studied cells of the PNL with endotoxin. To implement this stage of the study, the authors use an additional blood sample (“experience”). Using this methodological approach, the authors for the first time model the process of additional LPS entry into the bloodstream, due to the high colonization activity of gram-negative microflora, which occurs with all nosological forms of acute intestinal infections. Consequently, the obtained coefficient in the experimental sample objectively reflects the functional activity of leukocytes after an additional load, which reflects the reserve ability of the PNL to neutralize LPS.

Предлагаемый способ осуществляется следующим образом. Использованы малые объемы крови, взятые из пальца (0,5 мл), кровь с гепарином отстаивается в термостате при 37°С в течение 20-30 мин. Полученную плазму в соотношении 1:1 разводят раствором питательной среды 199 и распределяют в две пробирки («опыт» и «контроль»). В опытную пробирку вносят эндотоксин (50 мкг/мл), что и отличает это изобретение от вышеперечисленных методов. Из полученных растворов («опыта» и «контроля»), взятых в объеме 0,02 мл, готовят два тонких мазка. Высушенные мазки фиксируют 20 мин - смесью 96° этилового спирта и ацетона (1:1). Далее мазки промывают дистиллированной водой, погружают в цитратно-фосфатный буфер рН 4,2 на 4-5 мин. Обработанные таким образом мазки окрашивают акридиновым оранжевым красителем (1:25000) в течение 10 мин. Окрашенные мазки просматривают под люминесцентным микроскопом с использованием светофильтров СЗ С 24-4, ФС 1-2, ЖС 18, ЖС 19 и светоделительной пластинки («зеленая»). При исследовании клеток в красной области спектра (640 нм) учитывают свечение однонитевых РНК, при исследовании в зеленой части спектра (530 нм) - двуспиральных ДНК. В каждом мазке из 25 ПЯЛ подсчитывают клетки со свечением однонитевых РНК и двуспиральных ДНК, определяют соотношение РНК/ДНК - коэффициенты α° и α^k , затем рассчитывают индекс - частное от деления коэффициента α° к α^k. При индексе, равном или более 1 (≥1), судят об утрате резервов связывания эндотоксина ПЯЛ и прогнозируют затяжной или хронический характер течения инфекционного процесса.The proposed method is as follows. Small volumes of blood taken from a finger (0.5 ml) were used, blood with heparin settles in an thermostat at 37 ° C for 20-30 minutes. The resulting plasma in a ratio of 1: 1 is diluted with a solution of nutrient medium 199 and distributed into two test tubes ("experience" and "control"). Endotoxin (50 μg / ml) is added to the test tube, which distinguishes this invention from the above methods. From the obtained solutions (“experience” and “control”) taken in a volume of 0.02 ml, two thin smears are prepared. Dried smears are fixed for 20 minutes with a mixture of 96 ° ethyl alcohol and acetone (1: 1). Then the smears are washed with distilled water, immersed in a citrate-phosphate buffer pH 4.2 for 4-5 minutes. The smears thus treated are stained with acridine orange dye (1: 25000) for 10 minutes. Stained smears are examined under a fluorescence microscope using SZ C 24-4, FS 1-2, ZhS 18, ZhS 19, and beam splitting plates (green). When examining cells in the red region of the spectrum (640 nm), the luminescence of single-stranded RNA is taken into account, while research in the green part of the spectrum (530 nm) takes into account double-stranded DNA. In each smear of 25 PNPs, cells with luminescence of single-stranded RNA and double-stranded DNA are counted, the RNA / DNA ratio is determined - the coefficients α ° and α ^k , then the index is calculated - the quotient of the division of the coefficient α ° to α ^k . When the index is equal to or more than 1 (≥1), the loss of reserves of binding of the endotoxin of the PNL is judged and the protracted or chronic nature of the course of the infectious process is predicted.

Предложенный способ апробирован на материале (пробах крови) от 25 больных ОКИ (шигеллезом, сальмонеллезом, эшерихиозом). Результаты изучения функциональной активности ПЯЛ, установленной в соответствии к предлагаемому способу, позволили установить, что при индексе ≥1 имела место утрата резервов связывания эндотоксина ПЯЛ, что коррелировало (r=0,78) с тяжестью и длительностью течения инфекционного процесса при этих заболеваниях. Клиническая картина у больных ОКИ с индексом ≥1 характеризовалась наличием выраженных симптомов интоксикации. У всех больных отмечались многократная рвота, резкая слабость, длительная лихорадка до 38,5°С. Частота жидкого стула доходила до 10 раз с примесью слизи и крови, схваткообразные боли в животе, болезненная сигмовидная кишка. При индексе < 1 клиническая картина характеризовалась умеренными признаками интоксикации и непродолжительной лихорадки. Ведущими клиническими проявлениями были жидкий стул до 5 раз в сутки. Тошноты и рвоты не регистрировались. У этой группы пациентов прогноз течения заболевания был благоприятный.The proposed method was tested on material (blood samples) from 25 patients with acute intestinal infections (shigellosis, salmonellosis, escherichiosis). The results of a study of the functional activity of PNLs established in accordance with the proposed method made it possible to establish that at an index of ≥1 there was a loss of reserves of binding of endotoxin of PNLs, which correlated (r = 0.78) with the severity and duration of the course of the infectious process in these diseases. The clinical picture in patients with acute intestinal infections with an index of ≥1 was characterized by the presence of severe symptoms of intoxication. All patients experienced repeated vomiting, severe weakness, prolonged fever up to 38.5 ° C. Frequency of loose stool reached 10 times with an admixture of mucus and blood, cramping abdominal pain, painful sigmoid colon. At an index <1, the clinical picture was characterized by moderate signs of intoxication and a short fever. The leading clinical manifestations were loose stools up to 5 times a day. Nausea and vomiting were not recorded. In this group of patients, the prognosis of the course of the disease was favorable.

Выявленная закономерность подтверждена следующими примерами.The revealed pattern is confirmed by the following examples.

Пример 1. Больной Максим Р., 2 года 3 мес. Диагноз: Острая дизентерия Флекснер 2а, тяжелая форма. Осложнение: Миокардиодистрофия острого периода дизентерии.Example 1. Patient Maxim R., 2 years 3 months. Diagnosis: Acute dysentery Flexner 2a, severe. Complication: Myocardial dystrophy of the acute period of dysentery.

Ребенок заболел остро. Отмечались выраженные симптомы интоксикации: бледность, повышение температуры до 38,4-39,5°С и многократная рвота, а также гемоколитный синдром. Симптомы интоксикации сохранялись до 18 дня болезни, боли в животе и тенезмы отмечались в течение 14 дней. Дисфункция кишечника регистрировалась до 26 дня болезни, гемоколит - до 12 дня, бактериовыделения - до 21 дня.The child fell ill acutely. Marked symptoms of intoxication were noted: pallor, fever up to 38.4-39.5 ° C and repeated vomiting, as well as hemocolitic syndrome. Symptoms of intoxication persisted until the 18th day of the disease, abdominal pain and tenesmus were noted for 14 days. Intestinal dysfunction was recorded until the 26th day of illness, hemocolitis - up to 12 days, bacterial excretion - up to 21 days.

У пациента коэффициент α^k равен 0,25±0,02, α° - 0,36±0,03, индекс (соотношение α° к α^k) составил >1.In a patient, the coefficient α ^k is 0.25 ± 0.02, α ° is 0.36 ± 0.03, and the index (ratio α ° to α ^k ) is> 1.

Пример 2. Больной Слава Т., 1 год 4 мес. Диагноз: Острая дизентерия Зонне, средне тяжелая форма.Example 2. Patient Slava T., 1 year 4 months. Diagnosis: Acute Sonne dysentery, medium severe.

Ребенок поступил в первые сутки заболевания, заболел остро с подъема температуры до 38,5°С . Отмечался 3-кратный жидкий стул со слизью. Явления гемоколита и болевой синдром носили кратковременный характер до 3-го дня болезни. Нормализация характера стула - на 5 сутки.The child was admitted on the first day of the disease, fell ill acutely from a rise in temperature to 38.5 ° C. 3-fold loose stool with mucus was noted. The phenomena of hemocolitis and pain were of a short-term nature until the 3rd day of illness. Normalization of the nature of the stool - on the 5th day.

Коэффициент α^k у пациента равен 0,20±0,02, α° - 0,16±0,03, индекс (соотношение α° к α^k) составил <1.The coefficient α ^k in the patient is 0.20 ± 0.02, α ° - 0.16 ± 0.03, the index (ratio α ° to α ^k ) was <1.

Таким образом, авторами впервые предложен способ прогнозирования течения ОКИ у детей. Учитывая доступность, высокую чувствительность и возможность получения результатов через 1,5-2 час после взятия материала, разработанный способ является перспективным и может быть применен при массовых скрининговых обследованиях детей при ОКИ для прогноза затяжного или хронического течения инфекционного процесса при ОКИ.Thus, the authors first proposed a method for predicting the course of ACI in children. Given the availability, high sensitivity and the possibility of obtaining results 1.5-2 hours after taking the material, the developed method is promising and can be used in mass screening of children with acute intestinal infections to predict a protracted or chronic course of the infectious process with acute intestinal infections.

Пример 3. Больной Владислав С., 3 года 2 мес. Диагноз: Острая дизентерия Флекснер 2а, тяжелая форма, затяжное течение. Ребенок заболел остро, с подъема температуры до фебрильных цифр (38,4-39,5°С), однократной рвоты, болей в животе и появлением жидкого стула со слизью и прожилками крови. При поступлении состояние мальчика тяжелое за счет выраженных симптомов интоксикации: вялость, адинамия, анорексия, бледность кожных покровов. На отделении проводилась дезинтоксикационная, антибактериальная (гентамицин с фуразолидоном и клафораном) и симптоматическая терапия. На фоне проводимого лечения состояние мальчика несколько улучшилось, однако симптомы интоксикации сохранялись до 18 дня заболевания, гипертермия - до 11 дня болезни. Боли в животе и тенезмы сохранялись в течение 14 дней. Дисфункция кишечника сохранялась до 26 дня болезни, явления гемоколита - до 12 дня заболевания. При обследовании в анализе крови был выявлен выраженный нейтрофильный лейкоцитоз, сдвиг лейкоцитарной формулы влево до юных форм, ускоренная СОЭ до 24 мм/час. В копрограмме выраженные ферментативные нарушения, большое количество лейкоцитов и слизи. Бактериовыделение шигелл Флекснера 2а продолжалось до 21 дня болезни. Индекс соотношения α° и α^k, интегрально отражающий функциональную активность ПЯЛ, был больше 1, то есть свидетельствовал об утрате резервов связывания эндотоксина ПЯЛ, что и определяло тяжесть и затяжное течение инфекционного процесса.Example 3. Patient Vladislav S., 3 years 2 months. Diagnosis: Acute dysentery Flexner 2a, severe, prolonged course. The child fell ill acutely, from a rise in temperature to febrile numbers (38.4-39.5 ° C), a single vomiting, abdominal pain and the appearance of loose stool with mucus and streaks of blood. At admission, the boy’s condition is serious due to severe symptoms of intoxication: lethargy, adynamia, anorexia, pallor of the skin. Detoxification, antibacterial (gentamicin with furazolidone and claforan) and symptomatic therapy were carried out at the department. Against the background of the treatment, the boy’s condition improved slightly, but the symptoms of intoxication persisted until the 18th day of the disease, hyperthermia - until the 11th day of the disease. Abdominal pain and tenesmus persisted for 14 days. Intestinal dysfunction persisted until the 26th day of the disease, hemocolitis - until the 12th day of the disease. An examination in a blood test revealed pronounced neutrophilic leukocytosis, a shift of the leukocyte formula to the left to young forms, accelerated ESR up to 24 mm / hour. In the coprogram, pronounced enzymatic disorders, a large number of leukocytes and mucus. Bacterial excretion of Shigella Flexner 2a lasted until 21 days of illness. The ratio index α ° and α ^k , which integrally reflects the functional activity of PNLs, was greater than 1, that is, testified to the loss of reserves of binding of endotoxin PNLs, which determined the severity and protracted course of the infectious process.

Пример 4. Больная Светлана Ж., 5 лет. Диагноз: Острая дизентерия Флекснер 2а, среднетяжелая форма. Девочка поступила в стационар на 3 сутки заболевания. При поступлении состояние средней тяжести, вялая, отмечались: 3-кратная рвота, боли в животе, снижение аппетита и жидкий стул с примесью слизи до 4-6 раз в день. На фоне проведения этиотропной (полимиксин с фуразолидоном) и симптоматической терапии интоксикационный синдром купировался только к 10-му дню, болевой синдром и явления метеоризма сохранялись до 9-го дня болезни. Нормализация характера стула отмечалась на 7-й день болезни. Возбудитель (культура шигелл Флекснер 2а) выделялся трехкратно, при первичном обследовании и повторно на фоне проводимой этиотропной терапии. В анализе крови - нейтрофильный лейкоцитоз, ускорение СОЭ до 17 мм/час. В копрограмме - большое количество слизи, лейкоцитов до 60-70 в поле зрения. Индекс соотношения α° и α^k, интегрально отражающий функциональную активность ПЯЛ, был равен 1, то есть свидетельствовал о снижении потенциальной активности ПЯЛ связывать эндотоксин возбудителя, что и определяло затяжное течение инфекционного процесса.Example 4. Patient Svetlana J., 5 years old. Diagnosis: Acute dysentery Flexner 2a, moderate form. The girl was admitted to the hospital on the 3rd day of illness. On admission, a moderate state, lethargic, was noted: 3-fold vomiting, abdominal pain, decreased appetite and loose stools with an admixture of mucus up to 4-6 times a day. Against the background of etiotropic (polymyxin with furazolidone) and symptomatic therapy, intoxication syndrome stopped only by the 10th day, pain and flatulence persisted until the 9th day of the disease. Normalization of the nature of the stool was noted on the 7th day of illness. The causative agent (Shigella Flexner 2a culture) was isolated three times, during the initial examination and again against the background of etiotropic therapy. In the analysis of blood - neutrophilic leukocytosis, acceleration of ESR up to 17 mm / hour. In the coprogram - a large amount of mucus, white blood cells up to 60-70 in the field of view. The ratio index α ° and α ^k , integrally reflecting the functional activity of the PNL, was equal to 1, that is, testified to a decrease in the potential activity of the PNL to bind the pathogen endotoxin, which determined the protracted course of the infectious process.

Claims

A method for predicting the course of acute intestinal infections in children by a blood test, characterized in that in the smears of blood samples stained with acridine orange, the ratio of the number of polymorphonuclear leukocytes with single-stranded RNA to the number of polymorphic-nuclear leukocytes with double-stranded DNA up to (α ^k ) is calculated and after (α °) treatment with endotoxin, the index of the ratio α ° to α ^k is determined and if it is greater than or equal to one, a prolonged course of acute intestinal infection is predicted.