RU2272837C2 - Способ получения сухой лиофилизированной биомассы лакто- и бифидобактерий - Google Patents
Способ получения сухой лиофилизированной биомассы лакто- и бифидобактерий Download PDFInfo
- Publication number
- RU2272837C2 RU2272837C2 RU2004105687/13A RU2004105687A RU2272837C2 RU 2272837 C2 RU2272837 C2 RU 2272837C2 RU 2004105687/13 A RU2004105687/13 A RU 2004105687/13A RU 2004105687 A RU2004105687 A RU 2004105687A RU 2272837 C2 RU2272837 C2 RU 2272837C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- protective
- bacterial suspension
- preparing
- nutrient
- media
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Dairy Products (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в производстве пробиотических препаратов: лактобактерина, бифидумбактерина, ацилакта и др. Изобретение предусматривает комплексное использование нативного дрожжевого аутолизата в составе питательных и защитных сред для лиофилизации в количестве 5-25% от объема бактериальной суспензии. Защитная среда содержит обезжиренное молоко и нативный дрожжевой аутолизат, взятые в соотношении 1:(0,5-1). Изобретение обеспечивает унификацию сырья и процесса приготовления питательных и защитных сред, удешевление способа получения пробиотиков, повышает эффективность их производства. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.
Description
Изобретение относится к области микробиологии и медицинской промышленности и, в частности, может быть использовано в производстве пробиотических препаратов: лактобактерина, бифидумбактерина, ацилакта и др.
Известен способ получения сухой биомассы бактерийных культур с помощью лиофильного высушивания, применяемый в производстве пробиотиков и обеспечивающий сохранение их биологической активности на протяжении срока годности [Белоус A.M., Цветков Ц.Д. Научные основы технологии сублимационного консервирования. - Киев: Наукова думка, 1985. - 206 с]. Для защиты клеток от неблагоприятного воздействия замораживания и обезвоживания, а также для получения необходимой структуры сухой биомассы применяют различные защитные среды. Эти среды должны обеспечивать био- и структуропротективный эффект, позволяющий получать препараты в виде сухой биомассы во флаконах (ампулах), отвечающие регламентированным требованиям по биологическим и физическим свойствам [ФС 42-0054-00 "Лактобактерин сухой", ФС 42-3947-00 "Бифидумбактерин сухой"]. В производственной практике по выпуску пробиотиков для приготовления защитных сред используют обезжиренное молоко, желатин, крахмал, различные углеводы и ряд других компонентов [Белоус A.M., Цветков Ц.Д. Научные основы технологии сублимационного консервирования. - Киев: Наукова думка, 1985. - 206 с]. Наиболее распространенным вариантом защитной среды является сахарозо-желатозо-молочная среда, адаптированная к условиям массового производства пробиотиков и характеризующаяся универсальностью применения при изготовлении лакто- и бифидосодержащих препаратов [ФС 42-0054-00 "Лактобактерин сухой", ФС 42-3947-00 "Бифидумбактерин сухой"]. К недостаткам указанной среды следует отнести использование дорогостоящих компонентов: желатина, сахарозы.
Сущность изобретения заключатся в комплексном использовании дрожжевого аутолизата в составе питательных и защитных сред. При использовании казеиново-дрожжевых сред для накопления биомассы производственных штаммов бактерий основным компонентом питательной основы является дрожжевой аутолизат. Этот компонент получают путем автолиза дрожжей хлебопекарских (ТУ9182-007-00353595-2002 или ТУ 9182-005-00353595-2001) при температуре 60°С в течение 2-3 суток [Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. Под ред. М.И.Биргера. - М.: Медицина, 1982. - 464 с.]. Нативный дрожжевой аутолизат представляет собой вязкую жидкость коричневого цвета, которую разбавляют водой и сепарируют для отделения клеточной стромы (отход производства), а полученный продукт используют для приготовления питательных сред. Однако состав и физические свойства нативного дрожжевого аутолизата определяют возможность его применения в качестве протектора при лиофилизации бактерийных культур. Использование дрожжевого аутолизата в составе защитных сред позволяет исключить или снизить расход дорогостоящих компонентов (желатин, сахароза) при высушивании лакто- и бифидосодержащих препаратов. Варианты защитных сред на основе дрожжевого аутолизата не уступают по эффективности регламентированным сахарозо-желатозо-молочным средам (см. табл.).
Достигаемый технический результат заключается в унификации сырья и процесса приготовления питательных и защитных сред, в удешевлении способа получения пробиотиков, что позволяет повысить эффективность их производства.
При осуществлении способа производства могут быть использованы обычные условия получения нативного дрожжевого аутолизата. Количество аутолизата, добавляемого в бактериальную взвесь, составляет (15±10)% от объема получаемой бактериальной суспензии и определяется наличием и количеством других применяемых компонентов комплексной защитной среды, а также видом бактерий и режимом лиофилизации. Добавление менее 5% аутолизата предполагает значительное увеличение количества других компонентов защитной среды. Добавление более 25% аутолизата аутолизата нерационально, т.к. не вызывает увеличения биопротективного и структурообразующего эффекта. Регламентированное количество защитной среды в бактериальных суспензиях составляет (25±15)%, что позволяет на фоне получаемого протективного эффекта избежать значительного снижения исходной концентрации жизнеспособных клеток до лиофилизации. В качестве универсального производственного варианта защитной среды на основе дрожжевого аутолизата может быть использован состав, содержащий обезжиренное молоко и дрожжевой аутолизат в соотношении 1:(1-0,5) и добавляемый в количестве (30±10)% от объема бактериальной суспензии.
Пример 1. Бактериальную взвесь штамма Lactobacillus plantarum 8Р-А3 получают путем культивирования в реакторе на казеиново-дрожжевой среде при температуре 37°С в течение (7±1) ч. К 10 л бактериальной взвеси, содержащей 1,2×1010 КОЕ/мл, добавляют 2,5 л нативного дрожжевого аутолизата и 2,5 л обезжиренного молока. Полученную бактериальную суспензию разливают по 3 мл во флаконы и замораживают при температуре -50°С в течение 24 ч. Сублимационное высушивание проводят по регламентированному режиму сушки лактобактерина. Общая продолжительность высушивания составляет 50 ч. Содержание живых клеток в регидратированной до исходного объема сухой биомассе составляет 5×109 КОЕ/мл. Количество образцов, имеющих дефект структуры сухой биомассы и не отвечающих требованиям к лактобактерину по физическим свойствам, составляет не более 8% от общего количества флаконов.
Пример 2. Бактериальную взвесь штамма Bifidobacterium bifidum №1 получают путем культивирования в реакторе с применением казеиново-дрожжевой среды при температуре 38°С в течение (18±2) ч. К 7 л бактериальной взвеси, содержащей 5×108 КОЕ/мл, добавляют 2 л обезжиренного молока и 1 л нативного дрожжевого аутолизата. Полученную бактериальную суспензию разливают по 2 мл во флаконы и замораживают при температуре -40°С в течение 16 ч. Сублимационное высушивание проводят по регламентированному режиму сушки бифидумбактерина. Общая продолжительность высушивания составляет 44 ч. Содержание живых клеток в регидратированной до исходного объема сухой биомассе составляет 2×108 КОЕ/мл. Количество образцов сухой биомассы во флаконах, имеющих дефекты структуры и не соответствующие требованиям к бифидумбактерину по физическим свойствам, составляет не более 4% от общего количества флаконов.
Предлагаемый способ получения сухой лиофилизированной биомассы лакто- и бифидобактерий обладает выраженными техническими и экономическими преимуществами, позволяющими снизить стоимость защитных сред, применяемых в производстве пробиотических препаратов, в 2-5 раз.
| Таблица Эффективность защитных сред для лиофилизации лакто- и бифидобактерий |
|||
| Наименование препарата | Виды защитных сред | Сохранение жизнеспособных клеток, % | Количество образцов, имеющих дефект структуры сухой биомассы, % |
| Лактобактерин | Регламентированная (сахарозо-желатозо-молочная) | 50±20 | 5±3 |
| Предлагаемая (молочно-дрожжевая) | 50±20 | 5±3 | |
| Бифидумбактерин | Регламентированная (сахарозо-желатозо-молочная) | 60±10 | 4±2 |
| Предлагаемая (молочно-дрожжевая) | 60±10 | 4±2 | |
Claims (2)
1. Способ получения сухой лиофилизированной биомассы лакто- или бифидобактерий, включающий глубинное культивирование производственных штаммов с использованием казеинодрожжевых сред, последующее смешивание бактериальной взвеси с защитной средой и лиофильное высушивание бактериальной суспензии, отличающийся тем, что в качестве компонента защитной среды используют нативный дрожжевой аутолизат в количестве (15±10)% от объема бактериальной суспензии.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве защитной среды используют обезжиренное молоко и нативный дрожжевой аутолизат, взятые в соотношении 1:(0,5-1), в количестве 20-40% от объема бактериальной суспензии.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004105687/13A RU2272837C2 (ru) | 2004-02-25 | 2004-02-25 | Способ получения сухой лиофилизированной биомассы лакто- и бифидобактерий |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004105687/13A RU2272837C2 (ru) | 2004-02-25 | 2004-02-25 | Способ получения сухой лиофилизированной биомассы лакто- и бифидобактерий |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2004105687A RU2004105687A (ru) | 2005-08-10 |
| RU2272837C2 true RU2272837C2 (ru) | 2006-03-27 |
Family
ID=35844628
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004105687/13A RU2272837C2 (ru) | 2004-02-25 | 2004-02-25 | Способ получения сухой лиофилизированной биомассы лакто- и бифидобактерий |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2272837C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2822476C1 (ru) * | 2023-11-20 | 2024-07-05 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Центр стратегического планирования и управления медико-биологическими рисками здоровью" Федерального медико-биологического агентства | Способ длительного сохранения (консервирования) облигатно анаэробных бактерий высушиванием из замороженного состояния |
-
2004
- 2004-02-25 RU RU2004105687/13A patent/RU2272837C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Актуальные вопросы разработки, производства и применения иммунолобиологических и фармацевтических препаратов, Материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 95-летию Уфимского ГИВС им. И.И.Мечникова Государственного унитарного предприятия «Иммунопрепарат», ч.1, 5-7 июня 2000, Уфа, 2000, с.193-198. Лактобациллы в бактериологической диагностике и бактериотерапии вагинального лактодисбиоза, Учебно-методические рекомендации для врачей-бактериологов, Новокузнецк, 1999, с.62-75. Бифидобактерии и их использование в клинике, медицинской промышленности и сельском хозяйстве, Сборник научных трудов, М, 1986, с.76-82. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2822476C1 (ru) * | 2023-11-20 | 2024-07-05 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Центр стратегического планирования и управления медико-биологическими рисками здоровью" Федерального медико-биологического агентства | Способ длительного сохранения (консервирования) облигатно анаэробных бактерий высушиванием из замороженного состояния |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2004105687A (ru) | 2005-08-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zayed et al. | Influence of trehalose and moisture content on survival of Lactobacillus salivarius subjected to freeze-drying and storage | |
| Oluwatosin et al. | Sucrose, maltodextrin and inulin efficacy as cryoprotectant, preservative and prebiotic–towards a freeze dried Lactobacillus plantarum topical probiotic | |
| CN101848989B (zh) | 乳酸菌生存性提高剂及生存性提高方法,及食品组合物 | |
| Kotova et al. | Russian kefir grains microbial composition and its changes during production process | |
| CN107287121A (zh) | 一种乳酸菌冻干保护剂及其制备方法和使用方法 | |
| Dong et al. | The biofilm hypothesis: The formation mechanism of Tibetan kefir grains | |
| Chanyuan et al. | Optimizing the chemical compositions of protective agents for freeze-drying Bifidobacterium longum BIOMA 5920 | |
| CN110607255A (zh) | 一种德氏乳杆菌及直投式德氏乳杆菌发酵剂的制备方法和应用 | |
| CN113652359A (zh) | 一种乳酸菌冻干粉、制备方法及其冻干保护剂 | |
| Shu et al. | Optimization of cryoprotectants for Streptococcus thermophilus during freeze-drying using Box-Behnken experimental design of response surface methodology | |
| RU2272837C2 (ru) | Способ получения сухой лиофилизированной биомассы лакто- и бифидобактерий | |
| AU6000400A (en) | Storage of microorganisms, cells and tissue | |
| CN1793325A (zh) | 芳香型直投式酸奶发酵剂 | |
| Gujvinska et al. | Biotechnology production of medium for cultivation and lyophilization of lactic acid bacteria | |
| Urbański et al. | Influence of whey on viability of Lactobacillus gasseri during freeze-drying process | |
| RU2425576C1 (ru) | Сухой пробиотически активный биопрепарат и способ получения кисломолочного напитка на его основе | |
| CN107043715A (zh) | 一种活性益生菌冻干粉及其制备方法 | |
| CN109868246B (zh) | 一种林蛙油酶解液对罗伊氏乳杆菌冻干保护的方法 | |
| CN102757923B (zh) | 一种制备高活菌数两歧双歧杆菌菌粉的方法 | |
| RU2120762C1 (ru) | Способ получения жидкой или сухой бактериальной закваски для производства кисломолочных продуктов | |
| RU2607023C1 (ru) | Сухая бактериальная закваска для производства кисломолочных продуктов и способ ее получения | |
| Shu et al. | Statistical optimization of cultivation conditions for Saccharomyces boulardii via central composite design | |
| Ge et al. | Optimization of cryoprotectants for improving the freeze-dried survival rate of potential probiotic Lactococcus lactis ZFM559 and evaluation of its storage stability | |
| Wang et al. | Directed‐Vat‐Set starter producing ACE‐inhibitory peptides: Optimization and evaluation of stability | |
| RU2789036C2 (ru) | Способ получения бактериального концентрата на основе симбиоза пробиотических микроорганизмов |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080226 |