RU2265442C1 - Biotransplant and method for treating the cases of osteoporosis - Google Patents
Biotransplant and method for treating the cases of osteoporosis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2265442C1 RU2265442C1 RU2004114503/15A RU2004114503A RU2265442C1 RU 2265442 C1 RU2265442 C1 RU 2265442C1 RU 2004114503/15 A RU2004114503/15 A RU 2004114503/15A RU 2004114503 A RU2004114503 A RU 2004114503A RU 2265442 C1 RU2265442 C1 RU 2265442C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- tissue
- osteoporosis
- bone marrow
- biograft
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение касается получения культуры генетически немодифицированных мезенхимальных стволовых клеток и метода лечения остеопороза.The invention relates to a culture of genetically unmodified mesenchymal stem cells and a method for treating osteoporosis.
Актуальность проблемы остеопороза подтверждена результатами широкомасштабных длительных эпидемиологических исследований, свидетельствующих о широкой распространенности остеопороза в популяции, существенном негативном влиянии этого заболевания на состояние здоровья и значительном экономическом ущербе.The relevance of the problem of osteoporosis is confirmed by the results of large-scale long-term epidemiological studies indicating the widespread prevalence of osteoporosis in the population, the significant negative impact of this disease on health and significant economic damage.
Остеопороз - это системное заболевание скелета, характеризующееся снижением костной плотности и нарушением трабекулярной микроархитектоники костной ткани. Постоянно увеличивающаяся хрупкость костей приводит к повышению риска переломов, который представляет собой один из наиболее значимых клинических аспектов заболевания.Osteoporosis is a systemic skeletal disease characterized by a decrease in bone density and a violation of the trabecular microarchitecture of bone tissue. The ever-increasing fragility of bones leads to an increased risk of fractures, which is one of the most significant clinical aspects of the disease.
Лечение остеопороза представляет собой непростую задачу, так как заболевание имеет гетерогенную природу и, как правило, диагностируется поздно, когда уже имеются переломы и необратимые изменения в костях. Оно протекает длительно, со спонтанными обострениями и периодами ремиссии, требует большого терпения и активного участия больного в лечебном процессе, поскольку эффект может проявиться после длительного периода времени. Целью лечения являются замедление или временное прекращение потери костной массы, предотвращение переломов костей, улучшение состояния больного, расширение его двигательной активности, максимально возможное восстановление трудоспособности, улучшение качества жизни.The treatment of osteoporosis is not an easy task, as the disease is heterogeneous in nature and, as a rule, is diagnosed late, when there are already fractures and irreversible changes in the bones. It proceeds for a long time, with spontaneous exacerbations and periods of remission, requires a lot of patience and active participation of the patient in the treatment process, since the effect can occur after a long period of time. The goal of treatment is to slow down or temporarily stop bone loss, prevent bone fractures, improve the patient's condition, expand his physical activity, maximize the restoration of working capacity, and improve the quality of life.
Лечение остеопороза основано на трех принципах: этиологическом, патогенетическом, симптоматическом. Этиологический принцип - лечение основного заболевания при вторичном остеопорозе. При этом требуется коррекция или отмена "ятрогенных" в отношении остеопении препаратов. Однако, поскольку заболевания, симптомом которых является остеопороз, чаще всего имеют хроническое течение, "ятрогенные" препараты оказываются в ряде случаев жизненно необходимыми. Поэтому этиологический принцип не всегда бывает радикальным. Патогенетический - основной принцип в лечении первичного и многих вариантов вторичного остеопороза. Он направлен на подавление повышенной костной резорбции, на стимуляцию костеобразования или на нормализацию обоих процессов костного ремоделирования. Симптоматический принцип включает применение сбалансированной по кальцию, фосфору и белкам диеты, назначение препаратов солей кальция, использование дозированных физических нагрузок и лечебной физкультуры, физиотерапевтических методов, ортопедического лечения, обезболивающих средств [Насонов Е.Л., 2000].The treatment of osteoporosis is based on three principles: etiological, pathogenetic, symptomatic. The etiological principle is the treatment of the underlying disease in secondary osteoporosis. This requires the correction or abolition of "iatrogenic" in relation to osteopenia drugs. However, since diseases, the symptom of which is osteoporosis, most often have a chronic course, "iatrogenic" drugs are in some cases vital. Therefore, the etiological principle is not always radical. Pathogenetic is the main principle in the treatment of primary and many variants of secondary osteoporosis. It is aimed at suppressing increased bone resorption, at stimulating bone formation, or at normalizing both processes of bone remodeling. The symptomatic principle includes the use of a diet balanced in calcium, phosphorus and proteins, the administration of calcium salt preparations, the use of dosed physical activity and physiotherapy, physiotherapeutic methods, orthopedic treatment, pain medications [Nasonov EL, 2000].
В настоящий момент к основным группам препаратов для патогенетического лечения остеопороза относятся препараты, замедляющие костную резорбцию (эстрогены, селективные модуляторы эстрогенных рецепторов, кальцитонины, биофосфонаты, кальций; препараты, стимулирующие костеобразование (фториды, паратиреоидный гормон, гормон роста, анаболические стероиды, андрогены; препараты многопланового действия (активные метаболиты витамина D, оссеин-гидроксиапатитный комплекс, иприфлавон, вещества, содержащие фосфаты, стронций, кремний, алюминий, тиазиды) [Рожинская Л.Я., 2000].Currently, the main groups of drugs for the pathogenetic treatment of osteoporosis include drugs that slow down bone resorption (estrogens, selective modulators of estrogen receptors, calcitonins, biophosphonates, calcium; drugs that stimulate bone formation (fluorides, parathyroid hormone, growth hormone, anabolic steroids, androgens; multifaceted action (active metabolites of vitamin D, ossein-hydroxyapatite complex, ipriflavone, substances containing phosphates, strontium, silicon, aluminum, thia zides) [Rozhinskaya L.Ya., 2000].
Регенерация костной ткани при повреждении и системной резорбции происходит за счет мезенхимальных стволовых клеток (МСК), которые являются предшественниками остеобластов и способствуют формированию ремоделирующих единиц. В настоящее время использование МСК для системной и местной регенерации костной ткани находит все большее применение [Jorgensen С., et al, 2001].Bone tissue regeneration during damage and systemic resorption occurs due to mesenchymal stem cells (MSCs), which are the precursors of osteoblasts and contribute to the formation of remodeling units. Currently, the use of MSCs for systemic and local regeneration of bone tissue is increasingly used [Jorgensen C., et al, 2001].
Опубликованы результаты клинического исследования трансплантации мезенхимальных стволовых клеток костного мозга детям с нарушенным остеогенезом. У шести детей с наследственным дефектом развития скелета (osteogenesis imperfecta) было произведено по две инфузии аллогенных меченых мезенхимальных костномозговых клеток. У 5 пациентов клетки прижились в одном и более органов (кости, кожа, строма костного мозга). После лечения наблюдалось увеличение скорости роста пациентов в течение первых 6 месяцев после трансплантации. Сравнительно непродолжительный эффект и быструю потерю клеток исследователи объясняют иммунной реакцией реципиента, что является одним из основных недостатков использования взрослых неаутологичных клеток донорских мезенхимальных клеток [Smith R., 2001].The results of a clinical study of bone marrow mesenchymal stem cell transplantation in children with impaired osteogenesis have been published. Six infants with a hereditary skeletal defect (osteogenesis imperfecta) received two infusions of allogeneic labeled mesenchymal bone marrow cells. In 5 patients, cells took root in one or more organs (bones, skin, bone marrow stroma). After treatment, there was an increase in the growth rate of patients during the first 6 months after transplantation. The researchers explain the relatively short-term effect and rapid cell loss by the immune response of the recipient, which is one of the main disadvantages of using adult non-autologous cells of donor mesenchymal cells [Smith R., 2001].
Большинство исследователей предпочитают аутогенные клетки (костный мозг, клетки периферической крови). Преимущества аутотрансплантатов не вызывают сомнений, однако имеется ряд ограничений по их применению. В частности, длительность выращивания клеточных культур - более 2 месяцев, может являться критической для ряда пациентов; клетки, полученные от пожилых и тяжелобольных людей обладают низкой способностью к пролиферации и самообновлению.Most researchers prefer autologous cells (bone marrow, peripheral blood cells). The advantages of autografts are not in doubt, but there are a number of restrictions on their use. In particular, the duration of cell culture growth - more than 2 months, may be critical for a number of patients; cells obtained from elderly and seriously ill people have a low ability to proliferate and self-renew.
В сравнении с аутологичным клеточным трансплантационным материалом донорские (в том числе фетальные) клетки обладают рядом преимуществ:In comparison with autologous cell transplantation material, donor (including fetal) cells have several advantages:
фетальные клетки имеют больший потенциал роста и пролиферации, выраженную способность к дифференцировке и функционально более активны, продуцируют факторы роста и регенерации;fetal cells have a greater growth and proliferation potential, a pronounced ability to differentiate and are functionally more active; they produce growth and regeneration factors;
пересаженные фетальные клетки стимулируют ангиогенез;transplanted fetal cells stimulate angiogenesis;
фетальные клетки и ткани лучше переносят гипоксию и холодовую консервацию;fetal cells and tissues better tolerate hypoxia and cold preservation;
культуры донорских клеток могут быть приготовлены заранее и использоваться по первому требованию.donor cell cultures can be prepared in advance and used on demand.
Наиболее выраженным терапевтическим потенциалом при патологиях костной ткани обладают мезенхимальные стволовые клетки, способные восполнять необходимое количество остеобластов и, соответственно, ремоделирующих единиц костной ткани. Являясь уникальной «фабрикой» цитокинов и факторов роста, донорские МСК обеспечивают активизацию собственных резервов организма. Мезенхимальные стволовые клетки в основном получают из донорского костного мозга, однако существуют и другие источники - скелетные мышцы, подкожная жировая ткань, фетальные органы гемопоэза (печень, тимус, селезенка). МСК из фетальных органов гемопоэза и методики их получения практически не изучены. Описанные методики выращивания МСК из костного мозга и липоаспиратов позволяют получить гетерогенные популяции клеток стромы, лишь небольшой процент которых являются стволовыми. Клетки зрелой стромы не обладают свойством дифференцироваться в различные клеточные линии и, таким образом, терапевтически неэффективны. После трансплантации стромальные клетки мигрируют преимущественно в соединительную ткань и там накапливаются. При стандартном пассировании в высоких посевных дозах доля зрелых стромальных клеток быстро увеличивается.The most pronounced therapeutic potential in bone pathologies is possessed by mesenchymal stem cells capable of replenishing the required number of osteoblasts and, accordingly, remodeling units of bone tissue. Being a unique “factory” of cytokines and growth factors, donor MSCs provide activation of the body's own reserves. Mesenchymal stem cells are mainly derived from donor bone marrow, but there are other sources - skeletal muscle, subcutaneous adipose tissue, fetal organs of hematopoiesis (liver, thymus, spleen). MSCs from fetal organs of hematopoiesis and methods for their preparation are practically not studied. The described methods for growing MSCs from bone marrow and lipoaspirates make it possible to obtain heterogeneous populations of stromal cells, only a small percentage of which are stem cells. The cells of the mature stroma do not possess the property of differentiating into different cell lines and, thus, are therapeutically ineffective. After transplantation, stromal cells migrate mainly to the connective tissue and accumulate there. With standard passage at high inoculum doses, the proportion of mature stromal cells increases rapidly.
Использование в качестве трансплантата гомогенной (не менее 80%) популяции плюрипотентных МСК позволяет повысить эффективность лечения, увеличить воспроизводимость результатов и избежать нежелательных эффектов.The use of a homogeneous (at least 80%) population of pluripotent MSCs as a transplant allows to increase the effectiveness of treatment, increase the reproducibility of the results and avoid undesirable effects.
Задачами настоящего изобретения являются получение биотрансплантата для комплексного, патогенетического метода лечения остепороза, эффективность которого подтверждается достоверным увеличением минеральной плотности костной ткани (МПКТ) или прекращением ее потери по данным денситометрии, динамикой основных биохимических показателей, позволяющих оценить костеобразование (щелочная фосфатаза, остеокальцин) или снижение костной резорбции (экскреция кальция, деоксипиридонолин), отсутствием новых переломов костей, улучшением общего состояния больного, уменьшением болей в костях, расширением двигательного режима, улучшением качества жизни пациента.The objectives of the present invention are to obtain a biograft for a complex, pathogenetic method for the treatment of osteoporosis, the effectiveness of which is confirmed by a reliable increase in bone mineral density (BMD) or by stopping its loss according to densitometry, the dynamics of the main biochemical parameters that allow us to evaluate bone formation (alkaline phosphatase, osteocalcin) or decrease bone resorption (calcium excretion, deoxypyridonoline), the absence of new bone fractures, an improvement in overall the patient’s standing, reducing bone pain, expanding the motor regime, improving the patient’s quality of life.
Для решения поставленной задачи предложена группа изобретений, объединенных общим изобретательским замыслом.To solve this problem, a group of inventions is proposed, united by a common inventive concept.
Биотрансплантат для лечения остеопороза содержит мезенхимальные стволовые клетки (МСК), полученные из фетального, донорского или аутологичного материала, при этом ткань дезагрегируют, полученную клеточную суспензию ресуспендируют и культивируют на ростовой среде, содержащей трансферин, инсулин, фактор роста фибробластов и гепарин до накопления в культуре клеток зрелой стромы.A biograft for the treatment of osteoporosis contains mesenchymal stem cells (MSCs) obtained from fetal, donor or autologous material, the tissue is disaggregated, the resulting cell suspension is resuspended and cultured on growth medium containing transferrin, insulin, fibroblast growth factor and heparin before accumulation in culture before accumulation mature stromal cells.
В качестве фетального материала используют ткани: костный мозг, тимус, печень, жировая ткань эмбрионов человека 1-го триместра беременности.The following tissues are used as fetal material: bone marrow, thymus, liver, adipose tissue of human embryos of the 1st trimester of pregnancy.
В качестве донорского материала используют ткани: костный мозг, тимус, печень, жировая ткань.The following tissues are used as donor material: bone marrow, thymus, liver, adipose tissue.
В качестве аутологичного материала используют ткани: костный мозг, жировая ткань.The following tissues are used as autologous material: bone marrow, adipose tissue.
Биотрансплантат предназначен для внутривенного введения. Предложен также способ лечения остеопороза, заключающийся в том, что пациенту внутривенно, капельно вводят биотрансплантат по п.1, включающий от 50 до 500 млн. мезенхимальных стволовых клеток.The biograft is intended for intravenous administration. A method for treating osteoporosis is also provided, which comprises administering to a patient an intravenous drip of a biograft according to claim 1, comprising from 50 to 500 million mesenchymal stem cells.
МСК с преимущественной способностью к остеогенной дифференцировке выделяют из фетальных (костный мозг, тимус, печень, жировая ткань) или донорских (костный мозг, жировая ткань, тимус) тканей или аутологичного материала (костный мозг, жировая ткань). Для выделения фетальных клеток используют абортивный материал, полученный при искусственном прерывании беременности у здоровых женщин, предварительно обследованных на наличие вирусных и бактериальных инфекций.MSCs with a primary ability for osteogenic differentiation are isolated from fetal (bone marrow, thymus, liver, adipose tissue) or donor (bone marrow, adipose tissue, thymus) tissues or autologous material (bone marrow, adipose tissue). To isolate fetal cells using abortive material obtained by artificial termination of pregnancy in healthy women, previously examined for the presence of viral and bacterial infections.
Возможность использования биоматериала достигается на следующих сроках гестации: печень - 5-8 недель, тимус - 18-20 недель, костный мозг - 17-20 недель, подкожная жировая ткань - 17-19 недель. Если выделение клеток производится не из аспиратов (костный мозг, липоаспират), а из плотных тканей - например тимуса, орган предварительно измельчают и ферментативно дезагрегируют. Суспензию фильтруют через мелкоячеистое сито из нержавеющей стали. Клеточную суспензию (аспират) разводят 1:1 солевым раствором Хэнкса, центрифугируют в режиме 1,500×g, 10 минут и ресуспендируют в ростовой среде DMEM/F12, содержащей 15% эмбриональной телячьей сыворотки, селектированной для выращивания клеток в низкой плотности, 2 мМ глутамина. Суспензию клеток высевают на пластиковые чашки Петри с диаметром 100 мм. Плотность посева первичной клеточной суспензии составляет 1-20 миллионов мононуклеарных клеток на 1 см2 в зависимости от источника выделения. Через 1 сутки неприкрепившиеся клетки удаляют, ростовую среду заменяют. Культуры инкубируют при 37°С в атмосфере 5% CO2. Через 6 дней наблюдают рост гетерогенных клеточных популяций. По достижении культурой 50% конфлуентности монослой трипсинизируют и пересевают на новые чашки с плотностью 10-30 клеток на 1 см2 в ростовой среде, дополнительно содержащей 10 мкг\мл трансферрина, 1 мкг\мл инсулина, 10 нг\мл фактора роста фибробластов - 2 и 8 ЕД\мл гепарина. Через 7-10 дней отбирают плотные колонии мелких клеток (диаметром 7-10 мкм) с большим количеством митозов. Отобранные колонии рассевают в новые чашки с плотностью 20 клеток\см2 и выращивают до состояния преконфлуентности. Замену среды производят через каждые 2 дня. Последующие пассажи производят в том же режиме. Увеличение посевной дозы или изменение состава ростовой среды приводят к быстрому накоплению в культуре клеток зрелой стромы. Экспериментально подобранные условия, объединяющие критерии отбора исходного материала и режим культивирования, являются оптимальными для достижения следующих результатов.The possibility of using biomaterial is achieved at the following gestational periods: liver - 5-8 weeks, thymus - 18-20 weeks, bone marrow - 17-20 weeks, subcutaneous adipose tissue - 17-19 weeks. If the cells are not extracted from aspirates (bone marrow, lipoaspirate), but from dense tissues such as the thymus, the organ is preliminarily crushed and enzymatically disaggregated. The suspension is filtered through a fine mesh stainless steel sieve. The cell suspension (aspirate) is diluted 1: 1 with Hanks saline, centrifuged in 1,500 × g mode, 10 minutes and resuspended in DMEM / F12 growth medium containing 15% fetal calf serum, selected for cell growth in low density, 2 mm glutamine. A cell suspension is plated on plastic Petri dishes with a diameter of 100 mm. The seeding density of the primary cell suspension is 1-20 million mononuclear cells per 1 cm 2 depending on the source of excretion. After 1 day, non-adherent cells are removed, the growth medium is replaced. The cultures are incubated at 37 ° C in an atmosphere of 5% CO 2 . After 6 days, growth of heterogeneous cell populations is observed. Once the culture reaches 50% confluency, the monolayer is trypsinized and replanted into new plates with a density of 10-30 cells per 1 cm 2 in a growth medium additionally containing 10 μg / ml transferrin, 1 μg / ml insulin, 10 ng / ml fibroblast growth factor - 2 and 8 PIECES / ml of heparin. After 7-10 days, dense colonies of small cells (7-10 microns in diameter) with a large number of mitoses are selected. The selected colonies are seeded in new plates with a density of 20 cells / cm 2 and grown to a state of pre-confluency. The medium is replaced every 2 days. Subsequent passages are made in the same mode. An increase in the seeding dose or a change in the composition of the growth medium leads to the rapid accumulation of mature stroma cells in the culture. Experimentally selected conditions, combining the criteria for selecting the starting material and the cultivation mode, are optimal for achieving the following results.
Система отбора источников получения МСК позволяет получить культуры клеток с преимущественной способностью к остеогенной дифференцировке.The selection system for the sources of MSCs allows to obtain cell cultures with a primary ability for osteogenic differentiation.
Режим культивирования и селективные культуральные среды позволяют при многократном пассировании максимально наращивать гомогенную клеточную культуру недифференцированных клеток.The cultivation mode and selective culture media allow for repeated passage to maximize the homogeneous cell culture of undifferentiated cells.
Режим культивирования и селективные культуральные среды позволяют сохранить плюрипотентность клеточных культур.The cultivation mode and selective culture media allow to preserve the pluripotency of cell cultures.
Режим культивирования и селективные культуральные среды позволяют получить большое количество клеток для трансплантации (серию), что обеспечивает воспроизводимость результатов лечения.The cultivation mode and selective culture media allow to obtain a large number of cells for transplantation (series), which ensures reproducibility of treatment results.
Способ лечения базируется на экспериментально доказанном факте репаративного действия мезенхимальных стволовых клеток.The method of treatment is based on the experimentally proven fact of the reparative action of mesenchymal stem cells.
Трансплантацию осуществляют в условиях терапевтического или любого профильного отделения в присутствии врача-терапевта. Перед началом трансплантации осуществляют биологическую пробу. Раствор мезенхимальных стволовых клеток подключают к пациенту, струйно переливается 0,5 мл, после чего систему перекрывают. У реципиента выясняют жалобы на состояние, болевые ощущения, измеряют артериальное давление и подсчитывают пульс. Признаками биологической несовместимости являются появление болей в поясничной, эпигастральной областях, головных, загрудинных болей, чувства страха, наличие пота и отечности лица, снижение артериального давления, учащение пульса. Пробу повторяют три раза. При отрицательном результате приступают к трансплантации.The transplantation is carried out under the conditions of a therapeutic or any specialized department in the presence of a general practitioner. Before transplantation, a biological test is performed. A solution of mesenchymal stem cells is connected to the patient, 0.5 ml is poured jet, after which the system is closed. The recipient finds out complaints about the condition, pain, measure blood pressure and count the pulse. Signs of biological incompatibility are the appearance of pain in the lumbar, epigastric regions, headaches, chest pains, feelings of fear, the presence of sweat and swelling of the face, decreased blood pressure, increased heart rate. The sample is repeated three times. With a negative result, they begin transplantation.
Культура мезенхимальных стволовых клеток разводится в 50 мл физиологического раствора, тщательно перемешивается, вводится внутривенно капельно со скоростью 10 мл/мин.A culture of mesenchymal stem cells is diluted in 50 ml of physiological saline, mixed thoroughly, and administered intravenously at a rate of 10 ml / min.
В течение 24 часов после трансплантации за пациентом необходимо наблюдение в терапевтическом отделении.Within 24 hours after transplantation, the patient must be monitored in the therapeutic department.
Эффективность предложенного способа заключается в увеличении плотности костной ткани по данным денситометрии, динамике биохимических показателей и улучшении двигательной активности пациента.The effectiveness of the proposed method consists in increasing the density of bone tissue according to densitometry, the dynamics of biochemical parameters and improving the motor activity of the patient.
Обследовано 11 женщин, средний возраст которых составил 56,9±2,57 года. Давность менопаузы - от 1 года до 6 лет. Всем больным проводили клинико-лабораторное и инструментальное исследование, включавшее определение роста, массы тела, уровня кальция в сыворотке крови и его суточной экскреции с мочой, кислой и щелочной фосфатазы, суточной экскреции оксипролина с мочой. Выполняли рентгенографию грудного и поясничного отделов позвоночника в двух проекциях и ультразвуковую денситометрию. Всем больным провели трансплантацию мезенхимальных стволовых клеток по предложенному способу.11 women were examined, the average age of which was 56.9 ± 2.57 years. Menopause is from 1 year to 6 years. All patients underwent clinical, laboratory and instrumental studies, including determination of growth, body weight, serum calcium level and its daily excretion in urine, acid and alkaline phosphatase, and daily urinary oxyproline excretion. Radiography of the thoracic and lumbar spine in two projections and ultrasound densitometry were performed. All patients underwent transplantation of mesenchymal stem cells according to the proposed method.
При анализе данных субъективного исследования выявлено, что в обеих группах наиболее распространенными были жалобы на боль в спине, боль в конечностях. Общую слабость отмечали 5 из 11 пациенток.When analyzing data from a subjective study, it was found that in both groups the most common were complaints of back pain, pain in the limbs. General weakness was noted by 5 of 11 patients.
При лабораторном исследовании у пациенток выявлено повышение уровня кислой фосфатазы до 0,25+0,014 ммоль/ч/л и суточной экскреции оксипролина с мочой до 43,8±2,50 мг/сут, что свидетельствовало об активации процессов костной резорбции у этих больных. При рентгенологическом исследовании позвоночника у больных выявлен остеопороз. У 6 пациенток обнаружены переломы одного грудного или поясничного позвонка. При денситометрическом исследовании у всех больных наблюдалось снижение ШОУ более чем на 2,5 стандартных отклонения, что свидетельствует о наличии у них остеопороза.In a laboratory study, patients revealed an increase in the level of acid phosphatase to 0.25 + 0.014 mmol / h / l and daily excretion of oxyproline with urine up to 43.8 ± 2.50 mg / day, which indicated activation of bone resorption processes in these patients. An X-ray examination of the spine in patients revealed osteoporosis. In 6 patients, fractures of one thoracic or lumbar vertebra were found. A densitometric study showed a decrease in SHOW by more than 2.5 standard deviations in all patients, which indicates that they have osteoporosis.
По данным проведенного через 6 месяцев и через 1 год клинико-лабораторного и инструментального исследования отмечена положительная динамика субъективных и объективных показателей. Так, после лечения достоверно уменьшилось число больных, предъявлявших жалобы на боль в спине и нижних конечностях.According to the results of clinical, laboratory and instrumental studies conducted after 6 months and after 1 year, positive dynamics of subjective and objective indicators was noted. So, after treatment, the number of patients complaining of pain in the back and lower extremities significantly decreased.
При биохимическом исследовании выявлено достоверное снижение содержания кислой фосфатазы (с 0,25±0,014 до 0,20±0,015 ммоль/ч-л; р<0,01) и суточной экскреции с мочой оксипролина (с 43,8±2,5 до 29,7±2,4 мг/сут; р<0,05), снижение содержания остеокальцина (с 22,5±4,3 до 10,4±4,2 нг/мл; р<0,05), щелочной фосфатазы (с 1,44±0,09 до 1,19±0,08 ммоль/ч-л; р<0,05), суточной экскреции кальция с мочой (с 380±18,7 до 290±17,9 мг/сут; р<0,01) и оксипролина (с 52,1±2,6 до 31,2±2,4 мг/сут; р<0,05).A biochemical study revealed a significant decrease in the content of acid phosphatase (from 0.25 ± 0.014 to 0.20 ± 0.015 mmol / hr; p <0.01) and daily urinary excretion of oxyproline (from 43.8 ± 2.5 to 29.7 ± 2.4 mg / day; p <0.05), decrease in osteocalcin content (from 22.5 ± 4.3 to 10.4 ± 4.2 ng / ml; p <0.05), alkaline phosphatase (from 1.44 ± 0.09 to 1.19 ± 0.08 mmol / hr; p <0.05), daily urinary calcium excretion (from 380 ± 18.7 to 290 ± 17.9 mg / day; p <0.01) and oxyproline (from 52.1 ± 2.6 to 31.2 ± 2.4 mg / day; p <0.05).
При рентгенологическом исследовании новых переломов грудных и поясничных позвонков за время лечения не выявлено. При денситометрическом исследовании у больных выявлено повышение ШОУ на 1,1%An X-ray examination revealed no new fractures of the thoracic and lumbar vertebrae during the treatment. Densitometric examination in patients revealed an increase in SHOW by 1.1%
Claims (6)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004114503/15A RU2265442C1 (en) | 2004-05-14 | 2004-05-14 | Biotransplant and method for treating the cases of osteoporosis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004114503/15A RU2265442C1 (en) | 2004-05-14 | 2004-05-14 | Biotransplant and method for treating the cases of osteoporosis |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2265442C1 true RU2265442C1 (en) | 2005-12-10 |
Family
ID=35868634
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004114503/15A RU2265442C1 (en) | 2004-05-14 | 2004-05-14 | Biotransplant and method for treating the cases of osteoporosis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2265442C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2659204C1 (en) * | 2017-02-03 | 2018-06-28 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Балтийский федеральный университет имени Иммануила Канта" (БФУ им. И. Канта) | Bio transplant for the joints dysplasia treatment and method of its preparation |
| RU2732150C1 (en) * | 2020-03-04 | 2020-09-11 | Общество с ограниченной ответственностью "Центр клеточных технологий" | Method for producing autologous thrombocyte lysate as a base for cellular biomedical preparations of veterinary medicine |
| RU2788112C2 (en) * | 2016-07-11 | 2023-01-16 | Бонус Терапьютикс Лтд. | Cell compositions for tissue regeneration |
-
2004
- 2004-05-14 RU RU2004114503/15A patent/RU2265442C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Smith R. BMG. 13.10.2001, vol.322, p.63-64. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2788112C2 (en) * | 2016-07-11 | 2023-01-16 | Бонус Терапьютикс Лтд. | Cell compositions for tissue regeneration |
| RU2659204C1 (en) * | 2017-02-03 | 2018-06-28 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Балтийский федеральный университет имени Иммануила Канта" (БФУ им. И. Канта) | Bio transplant for the joints dysplasia treatment and method of its preparation |
| RU2732150C1 (en) * | 2020-03-04 | 2020-09-11 | Общество с ограниченной ответственностью "Центр клеточных технологий" | Method for producing autologous thrombocyte lysate as a base for cellular biomedical preparations of veterinary medicine |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Toupadakis et al. | Comparison of the osteogenic potential of equine mesenchymal stem cells from bone marrow, adipose tissue, umbilical cord blood, and umbilical cord tissue | |
| US9439931B2 (en) | Administering umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells to treat nerve injury | |
| JP5775667B2 (en) | Methods of lithium stimulation of cord blood stem cell proliferation and growth factor production | |
| EP1999250B1 (en) | Method of cultivation of human mesenchymal stem cells, particularly for the treatment of non-healing fractures, and bioreactor for carrying out this cultivation method | |
| Liu et al. | Application of dental pulp stem cells in oral maxillofacial tissue engineering | |
| JP2012031127A (en) | Composition including umbilical cord matrix stromal cell | |
| CN106497872B (en) | Skeletal muscle stem Cells serum free medium and its preparation method and application | |
| CN112195151B (en) | Dental pulp mesenchymal stem cell recovery culture solution, preparation method and recovery culture method | |
| RU2265442C1 (en) | Biotransplant and method for treating the cases of osteoporosis | |
| CN115786247B (en) | Serum-free culture medium and application thereof in aspects of hair follicle activity maintenance and hair transplantation | |
| RU2418571C1 (en) | Biotransplant, method of its obtaining and method of treating periodontal diseases | |
| WO2022247848A1 (en) | Preparation method for and application of hair follicle mesenchymal stem cell | |
| JP2004129549A (en) | Selective growth method for mesenchymal stem cell from fat-derived cell group | |
| US20200030253A1 (en) | Methods and compositions for treatment of body conditions | |
| RU2298410C1 (en) | Biotransplant and method for treatment of rheumatic and autoimmune diseases | |
| WO2013187194A1 (en) | Pharmaceutical composition effective for treatment of bone diseases | |
| CN113713176A (en) | Hydrogel and preparation method and application thereof | |
| CA2278539A1 (en) | Bone regeneration in osteoporosis using human bone marrow mesenchymal cells | |
| RU2268062C1 (en) | Biotransplant, method for its obtaining (variants) and method for treating dilation cardiomyopathy | |
| CN110742906A (en) | Application of mesenchymal stem cell paracrine factor in preparation of pain medicine | |
| RU2268061C1 (en) | Biotransplant, method for its obtaining (variants) and method for treating ischemic cardiac disease | |
| RU2265443C1 (en) | Biotransplant and method for treating the cases of diabetes mellitus of type i and ii | |
| WO2014075634A1 (en) | Use of stromal vascular layer cell and mesenchymal progenitor cell for preventing or treating osteoarthritis | |
| RU2265445C1 (en) | Biotransplant, method for its obtaining (variants) and method for treating parodontium diseases | |
| AU2014211790B2 (en) | Use of allogeneic interstitial vessel-layer cell and allogeneic mesenchymal progenitor cell for preventing or treating osteoarthritis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150515 |