RU2264222C2

RU2264222C2 - Method for obtaining preparation for increasing body resistance in animals

Info

Publication number: RU2264222C2
Application number: RU2003135681/15A
Authority: RU
Inventors: А.А. Евглевский (RU); А.А. Евглевский; А.Ф. Лебедев (RU); А.Ф. Лебедев; Е.П. Евглевска (RU); Е.П. Евглевская; С.М. Коломийцев (RU); С.М. Коломийцев; С.Ю. Панькова (RU); С.Ю. Панькова; Г.Ф. Рыжкова (RU); Г.Ф. Рыжкова; Н.М. Русакова (RU); Н.М. Русакова
Original assignee: Курская государственная сельскохозяйственная академия им. профессора И.И. Иванова
Priority date: 2003-12-08
Filing date: 2003-12-08
Publication date: 2005-11-20
Also published as: RU2003135681A

Abstract

FIELD: veterinary science.

SUBSTANCE: the present innovation deals with including acidic thermohydrolysis of bee bread: one part of bee bread together with honeycomb should be poured with 5-5.5 portions of succinic acid solution at pH being 3.5-4.5, the mixture obtained should achieve boiling to be kept at 95-100 C for 30 min, hot solution should be filtered through gauze filter, then pH should achieve 7.0 due to fractional addition of 4%-sodium hydroxide solution, then one should add distilled water so, that final product should contain 25.0±1.0 mg/ml dry matter. The innovation provides increased growth-stimulating and immunostimulating properties of the preparation suggested.

EFFECT: higher efficiency.

1 ex

Description

Изобретение относится к технологии получения биологически активных препаратов, в частности к средствам, повышающим резистентность организма животных.The invention relates to a technology for the production of biologically active preparations, in particular to agents that increase the resistance of the animal organism.

Известен способ получения средства стимуляции иммунной системы организма, включающий кислотный гидролиз пыльцы (Патент №2048120, МПК А 63 К 1/16, 1995).A known method of obtaining a means of stimulating the body's immune system, including acid pollen hydrolysis (Patent No. 2048120, IPC A 63 K 1/16, 1995).

Недостатком является то, что это средство, обладая повышенной кислотностью, изначально предназначено для перорального применения при кормлении животных, что не может быть признано рациональным, так как требует использования препарата в большом количестве (2-4%) от суточного потребления корма,The disadvantage is that this tool, having high acidity, was originally intended for oral use in animal feeding, which cannot be considered rational, since it requires the use of the drug in large quantities (2-4%) of the daily feed intake,

В качестве прототипа взят способ получения препарата, включающего щелочной термогидролиз пчелиной перги, проводимый при температуре 95-100°С 3-4% раствором гидроксида натрия (едкий натрий) в течение 30-45 минут (Патент №2889.1999. Республика Беларусь. Авт. Красочко П.А. и др.).As a prototype, a method for producing a preparation including alkaline thermohydrolysis of bee bread was carried out, carried out at a temperature of 95-100 ° C with 3-4% sodium hydroxide solution (sodium hydroxide) for 30-45 minutes (Patent No. 2889.1999. Republic of Belarus. Autor. Krasochko P.A. et al.).

Недостатком прототипа является то, что конечный продукт имеет щелочную реакцию, в то время как препараты, предназначенные для парентерального введения, должны иметь нейтральную реакцию (рН 7,0). Для устранения вышесказанных недостатков и для получения технического результата изобретения - повышения ростостимулирующих и иммуностимулирутощих свойств препарата - предлагается способ получения препарата, включающий кислотный гидролиз пчелиной перги и инактивацию повышенной кислотности в конечном продукте щелочью.The disadvantage of the prototype is that the final product has an alkaline reaction, while preparations intended for parenteral administration must have a neutral reaction (pH 7.0). To eliminate the above drawbacks and to obtain the technical result of the invention — to increase the growth-promoting and immunostimulating properties of the preparation — a method for producing the preparation is proposed, which includes acid hydrolysis of bee stew and inactivation of increased acidity in the final product with alkali.

Новым является то, что для проведения кислотного гидролиза используется раствор янтарной кислоты, при рН 3,5-4,5, а повышенная кислотность гидролизата инактивируется дробным добавлением 4% раствора едкого натрия.New is that succinic acid solution is used for acid hydrolysis at pH 3.5-4.5, and the increased acidity of the hydrolyzate is inactivated by the fractional addition of 4% sodium hydroxide solution.

Выбор в отношении раствора янтарной кислоты обусловлен тем, что она обладает уникальными фармакологическими свойствами, в частности способностью повышения иммунобиологической реактивности организма, стимуляции окислительно-восстановительных реакций, профилактировать постинтоксикационные расстройства, регуляции тканевого обмена веществ. В организме янтарная кислота полностью метаболизируется до воды и углекислого газа (Инструкция по применению препарата «Лимонтар» Утверждена Департаментом государственного контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств и медицинской техники 18.11.2000 г. Мин. Здравоохранения РФ).The choice of a solution of succinic acid is due to the fact that it has unique pharmacological properties, in particular, the ability to increase the immunobiological reactivity of the body, stimulate redox reactions, prevent post-toxic disorders, and regulate tissue metabolism. In the body, succinic acid is completely metabolized to water and carbon dioxide (Instructions for the use of the drug "Limontar" Approved by the Department of State Control of Quality, Efficiency, Safety of Medicines and Medical Equipment on November 18, 2000, Ministry of Health of the Russian Federation).

Инактивация повышенной кислотности достигается добавлением к кислотному гидролизату пчелиной перги 3-4% едкого натрия, что позволяет перевести янтарную кислоту (не изменял ее фармакодиагностику) в сукцинат натрия (соль янтарной кислоты).Inactivation of increased acidity is achieved by adding 3-4% sodium hydroxide to the acid hydrolyzate of bee pollen, which allows us to convert succinic acid (did not change its pharmacodiagnostics) to sodium succinate (succinic acid salt).

Опыты показали, что добавление к пчелиной перги раствора янтарной кислотой (рН 3,5-4,5) в соотношении, 1 часть перга и 5 частей раствора, обеспечивает тот же, что и в прототипе, выход конечного продукта при проведении термогидролиза.The experiments showed that the addition of succinic acid to a bee pollen solution (pH 3.5-4.5) in a ratio of 1 part of bee bread and 5 parts of solution provides the same yield as in the prototype of the final product during thermohydrolysis.

Дробное добавление к гидролизату 3-4% раствора едкого натрия позволило инактивировать в нем повышенную кислотность и довести реакцию до нейтральной (рН 7,0) При этом выпадения осадка не наблюдалось.Fractional addition of a 3-4% sodium hydroxide solution to the hydrolyzate made it possible to inactivate the increased acidity in it and bring the reaction to neutral (pH 7.0). No precipitation was observed.

Таким образом, янтарная кислота была переведена в ее соль - сукцинат натрия. Наличие в конечном продукте - гидролизате пчелиной перги - сукцината натрия, позволяет значительно повысить биологическую активность и, следовательно, иммуностимулирующие свойства препарата,Thus, succinic acid was converted into its salt - sodium succinate. The presence of sodium succinate in the final product - bee pollen hydrolyzate - can significantly increase the biological activity and, therefore, the immunostimulating properties of the drug,

Пример осуществления способа. Препарат готовили следующим образом. Исходный компонент (пчелиная перга вместе с сотами), одна часть, залили 5-5,5 частями дистиллированной воды. В которую предварительно добавили янтарную кислоту до рН 4,0.An example implementation of the method. The drug was prepared as follows. The initial component (bee pollen with honeycombs), one part, was flooded with 5-5.5 parts of distilled water. To which succinic acid was previously added to a pH of 4.0.

Указанную смесь довели до кипения и выдержали при температуре 95-100°С 30 минут. В горячем состоянии провели фильтрацию раствора через марлевый фильтр. Дробным добавлением 4% раствора едкого натрия довели рН до 7,0. После определения концентрации сухих веществ высчитали необходимое количество добавления дистиллированной воды с тем, чтобы конечный продукт содержал их не менее 25,0±1,0 мг/мл.The specified mixture was brought to a boil and kept at a temperature of 95-100 ° C for 30 minutes. In the hot state, the solution was filtered through a gauze filter. By fractional addition of a 4% sodium hydroxide solution, the pH was adjusted to 7.0. After determining the concentration of solids, the required amount of addition of distilled water was calculated so that the final product contained at least 25.0 ± 1.0 mg / ml.

Препарат расфасовали по флаконам емкостью 100,0 мл и провели стерилизацию автоклавированием в режиме 1,2-1,3 атмосферы в течение 30 минут.The drug was packaged in 100.0 ml vials and sterilized by autoclaving in a 1.2-1.3 atmosphere mode for 30 minutes.

Контроль препарата провели на стерильность, безвредность, рост и иммуностимулирующую активность.The control of the drug was carried out on sterility, safety, growth and immunostimulating activity.

При контрольном высеве препарата на питательные среды: МПА, МПБ и МПБ под вазелиновое масло и последующей их выдержке в термостате при 37°С в течение 10 дней роста посторонней микрофлоры не наблюдали.During the control sowing of the drug on nutrient media: MPA, MPB and MPB under vaseline oil and their subsequent exposure in an thermostat at 37 ° C for 10 days, the growth of extraneous microflora was not observed.

Безвредность препарата проверили на белых мышках массой 20,0±2,0 г. При однократном внутрибрюшинном введении мышам препарата в объеме 0,5 мл (25 мг/кг) гибели или ухудшения состояния их клинического статуса не отмечали (срок наблюдения 10 дней).The safety of the drug was tested on white mice weighing 20.0 ± 2.0 g. With a single intraperitoneal administration to mice of the drug in a volume of 0.5 ml (25 mg / kg), there was no death or worsening of their clinical status (observation period 10 days).

Ростостимулирующие свойства изучили на 2-х группах (п=5) месячного возраста морских свинках, которым внутримышечно однократно ввели препарат в дозе 12,5 мг/кг (1 группа) и 25 мг/кг (2 группа). По истечении 30 дней, средняя масса тела растущих морских свинок в 1-й группе была на 15 и во 2-й на 22% выше, чем у их сверстников из контрольной группы.The growth-promoting properties were studied in 2 groups (n = 5) of a month old guinea pigs, which were injected intramuscularly with a dose of 12.5 mg / kg (group 1) and 25 mg / kg (group 2). After 30 days, the average body weight of growing guinea pigs in the 1st group was 15 and in the 2nd 22% higher than their peers from the control group.

При изучении иммуностимулирующих свойств препарата установлено, что предварительно проведенная однократная иммунизация мышей со средней массой 20,0±2,0 г, в дозе 0,2 мл (1 группа) и двукратная, с интервалом в 10 дней, в дозе 0,2+0,2 мл (2-я группа), обеспечила защиту их организма при заражении культурой Echerihia coli в дозе 2 LD в 1-й группе у 4 из 7 особей (57,1%) и во 2-й у 5 из 7 особей (71,4%).When studying the immunostimulating properties of the drug, it was found that previously conducted a single immunization of mice with an average weight of 20.0 ± 2.0 g, at a dose of 0.2 ml (group 1) and twice, with an interval of 10 days, at a dose of 0.2+ 0.2 ml (2nd group), provided protection for their body when infected with Echerihia coli culture at a dose of 2 LD in the 1st group in 4 of 7 individuals (57.1%) and in the 2nd in 5 of 7 individuals (71.4%).

Таким образом, установлено, что полученный по новому способу препарат при парентеральном введении имел пониженную токсичность и в дозе 25 мг/кг (в прототипе не более 10 мг/кг) не вызывал ухудшения клинического статуса мышей; оказал положительное влияние на активацию роста морских свинок; повысил антиинфекционную резистентность организма мышек при заражении их смертельной дозой Echerihia coli до 57,1% при однократной иммунизации.Thus, it was found that the preparation obtained by the new method with parenteral administration had reduced toxicity and at a dose of 25 mg / kg (in the prototype no more than 10 mg / kg) did not cause a deterioration in the clinical status of mice; had a positive effect on the activation of growth of guinea pigs; increased the anti-infectious resistance of the body of the mouse when infected with a lethal dose of Echerihia coli to 57.1% with a single immunization.

Claims

A method of obtaining a drug that increases the resistance of animals, including thermohydrolysis of bee stew, characterized in that they carry out acid thermohydrolysis of bee stew: one part of bee stew with honeycombs is poured with 5-5.5 parts of succinic acid solution with a pH of 3.5-4.5, the mixture is brought to a boil and kept at a temperature of 95-100 ° C for 30 minutes, the hot solution is filtered through a gauze filter, then the pH is adjusted to 7.0 by fractional addition of a 4% sodium hydroxide solution, and then distilled water is added so that the finalRecreatives Products contained 25.0 ± 1.0 mg / mL of solids.