RU2259845C1 - Inactivated fixed vaccine against infectious bird laryngotracheitis - Google Patents
Inactivated fixed vaccine against infectious bird laryngotracheitis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2259845C1 RU2259845C1 RU2003136943/13A RU2003136943A RU2259845C1 RU 2259845 C1 RU2259845 C1 RU 2259845C1 RU 2003136943/13 A RU2003136943/13 A RU 2003136943/13A RU 2003136943 A RU2003136943 A RU 2003136943A RU 2259845 C1 RU2259845 C1 RU 2259845C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- vaccine
- virus
- ilt
- adjuvant
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и может быть использовано при разработке и производстве средств специфической профилактики инфекционного ларинготрахеита (ИЛТ) птиц.The invention relates to the field of veterinary virology and biotechnology and can be used in the development and production of means of specific prophylaxis of infectious laryngotracheitis (ILT) of birds.
ИЛТ - острое контагиозное заболевание птиц, которое является причиной высокого процента смертности (обычная смертность составляет 10-20%, известны случаи высокой смертности, которая составляет 50-70%), у переболевших особей снижается суточный привес и яйценоскость. ИЛТ вызывается герпесвирусом. В комплексе мер борьбы с ИЛТ одним из основных средств является вакцинация с помощью живых и инактивированных вакцин.ILT is an acute contagious disease of birds, which causes a high percentage of mortality (usual mortality is 10-20%, there are cases of high mortality, which is 50-70%), in cases of ill individuals the daily gain and egg production are reduced. ILT is caused by herpes virus. One of the main means of combating ILT is vaccination with live and inactivated vaccines.
В мировой практике известно более 20 штаммов вируса ИЛТ, различающихся по своим антигенным свойствам и используемых при изготовлении вирусвакцин против ИЛТ птиц (1-7). В России при изготовлении вирусвакцин против ИЛТ нашли широкое применение штаммы «ВНИИБП» (8) и клон «НТ» штамма «ЦНИИПП» (9).In world practice, more than 20 strains of the ILT virus are known that differ in their antigenic properties and are used in the manufacture of virus vaccines against bird ILT (1-7). In Russia, the VNIIBP strains (8) and the NT clone of the TsNIIPP strain (9) were widely used in the manufacture of virus vaccines against ILT.
Хотя преимущество живых вакцин из-за технологичности производства и простоты применения не вызывает сомнения, однако иммунная реакция у птиц при их введении не всегда стабильна и в ряде случаев вызывает осложнения после вакцинации. Кроме того, при ИЛТ введение живых вакцин взрослой птице не формирует напряженный иммунитет.Although the advantage of live vaccines due to the technological effectiveness of production and ease of use is not in doubt, the immune response in birds when they are administered is not always stable and in some cases causes complications after vaccination. In addition, with ILT, the administration of live vaccines to an adult bird does not form a strained immunity.
Для профилактики ИЛТ птиц нашли также применение инактивированные эмульсионные вакцины, для изготовления которых используют вирулентные штаммы гомологичного вируса.Inactivated emulsion vaccines, for the manufacture of which virulent strains of the homologous virus have also been used, have also been used for the prevention of bird ILT.
Известна инактивированная эмульсионная вакцина против ИЛТ птиц, содержащая инактивированный этиленимином антигенный материал из штамма SZ-81-ILT гомологичного вируса, репродуцированного в 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур, и неполный адъювант Фрейнда при следующем соотношении ингредиентов, мас.%:Known inactivated emulsion vaccine against bird ILT containing ethyleneimine inactivated antigenic material from the SZ-81-ILT strain of a homologous virus reproduced in 9-11-day-old SPF chicken embryos and Freund's incomplete adjuvant in the following ratio of ingredients, wt.%:
В доступных источниках информации заявителем не обнаружено сведений об использовании для профилактики ИЛТ птиц инактивированных сорбированных вакцин.The applicant did not find information on the use of inactivated adsorbed vaccines for the prevention of IFI in birds in accessible sources of information.
По мнению заявителя, наиболее близкой предлагаемому изобретению по совокупности существенных признаков является инактивированная вакцина против ИЛТ птиц, содержащая авирулентный антигенный материал из штамма гомологичного вируса, репродуцированного в чувствительной биологической системе, и адъювант в эффективном соотношении (11).According to the applicant, the closest to the present invention in terms of essential features is an inactivated vaccine against bird ILT containing avirulent antigenic material from a strain of a homologous virus reproduced in a sensitive biological system and an adjuvant in an effective ratio (11).
Недостатки известных инактивированных вакцин против ИЛТ птиц, в том числе и вакцины-прототипа, состоят в том, что для приготовления антигенного материала используют вирулентные штаммы возбудителя инфекции, которые всегда создают проблемы при соблюдении ветеринарно-санитарной безопасности.The disadvantages of the known inactivated vaccines against ILT birds, including the vaccine prototype, are that for the preparation of antigenic material using virulent strains of the causative agent of the infection, which always create problems when observing veterinary and sanitary safety.
В связи с этим актуальной остается проблема создания инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц, обладающей одновременно высокой антигенной и иммуногенной активностью и безвредностью.In this regard, the problem of creating an inactivated sorbed vaccine against bird ILT, which has both high antigenic and immunogenic activity and is harmless, remains urgent.
В задачу создания настоящего изобретения входила разработка инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц на основе нового штамма гомологичного вируса, обладающего высокой биологической, антигенной и иммуногенной активностью как в нативном виде, так и после инактивации, и пригодного для изготовления высокоиммуногенной и безвредной инактивированной сорбированной вакцины.The objective of the present invention was to develop an inactivated sorbed vaccine against bird ILT based on a new strain of a homologous virus that has high biological, antigenic and immunogenic activity both natively and after inactivation, and is suitable for the manufacture of a highly immunogenic and harmless inactivated sorbed vaccine.
Технический результат от использования предлагаемого изобретения заключается в расширении арсенала инактивированных вакцин против ИЛТ птиц, обладающих высокой антигенной и иммуногенной активностью и безвредностью.The technical result from the use of the present invention is to expand the arsenal of inactivated vaccines against ILT birds with high antigenic and immunogenic activity and harmlessness.
Указанный технический результат достигнут созданием инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц, охарактеризованной следующей совокупностью признаков:The specified technical result was achieved by creating an inactivated sorbed vaccine against bird ILT, characterized by the following set of features:
1) инактивированная сорбированная вакцина против ИЛТ птиц;1) inactivated adsorbed vaccine against bird ILT;
2) авирулентный антигенный материал из штамма гомологичного вируса, репродуцированного в чувствительной биологической системе;2) avirulent antigenic material from a strain of a homologous virus reproduced in a sensitive biological system;
3) в качестве чувствительной биологической системы используют 9-11-суточные эмбрионы SPF-кур;3) 9-11-day-old SPF-chicken embryos are used as a sensitive biological system;
4) из вакцинных штаммов вакцина содержит штамм «О №112-ДЕП» вируса ИЛТ птиц;4) from vaccine strains, the vaccine contains the strain "About No. 112-DEPT" of the bird ILT virus;
5) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур с инфекционной активностью, по меньшей мере, 6,0 lg ЭИД50/см3;5) avirulent antigenic material from strain "About No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in 9-11-day-old embryos of SPF chickens with infectious activity of at least 6.0 lg EID 50 / cm 3 ;
6) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур с инфекционной активностью, по меньшей мере, 6,0 lg ЭИД50/см3, в количестве 13,6-15,2 мас.%;6) avirulent antigenic material from strain "About No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in 9-11-day-old embryos of SPF-chickens with infectious activity of at least 6.0 lg EID 50 / cm 3 , in an amount of 13, 6-15.2 wt.%;
7) инактивант;7) inactivant;
8) из инактивантов - димер этиленимина (ДЭИ);8) of inactivants - ethyleneimine dimer (DEI);
9) ДЭИ в концентрации 0,1%;9) DEI at a concentration of 0.1%;
10) по окончании инактивации ДЭИ нейтрализуют тиосульфатом натрия;10) upon completion of inactivation, the DEI is neutralized with sodium thiosulfate;
11) защитная среда;11) protective environment;
12) защитная среда, содержащая лактозу и/или сахарозу, и/или желатозу, в количестве 0,8-2,4 мас.%;12) a protective medium containing lactose and / or sucrose, and / or gelatose, in an amount of 0.8-2.4 wt.%;
13) адъювант;13) adjuvant;
14) адъювант содержит аэросил, сапонин, глицерин и ФБР в соотношении, мас.%:14) the adjuvant contains aerosil, saponin, glycerin and the FBI in the ratio, wt.%:
15) адъювант, содержащий аэросил, сапонин, глицерин и ФБР, в количестве 84,0 мас.%;15) an adjuvant containing aerosil, saponin, glycerin and the FBI, in the amount of 84.0 wt.%;
16) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур с инфекционной активностью, по меньшей мере, 6,0 lg ЭИД50/см3, защитная среда, содержащая лактозу и /или сахарозу, и/или желатозу, и адъювант, содержащий аэросил, сапонин, глицерин и ФБР, в соотношении, мас.%:16) avirulent antigenic material from strain "About No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in 9-11-day-old embryos of SPF-chickens with infectious activity of at least 6.0 lg EID 50 / cm 3 , a protective medium containing lactose and / or sucrose, and / or gelatose, and an adjuvant containing aerosil, saponin, glycerin and the FBI, in the ratio, wt.%:
Предлагаемое изобретение включает следующую совокупность существенных признаков, обеспечивающих получение технического результата во всех случаях, на которые испрашивается правовая охрана:The present invention includes the following set of essential features that provide a technical result in all cases for which legal protection is sought:
1) инактивированная сорбированная вакцина против ИЛТ птиц;1) inactivated adsorbed vaccine against bird ILT;
2) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в чувствительной биологической системе, в эффективном количестве;2) avirulent antigenic material from the strain "About No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in a sensitive biological system in an effective amount;
3) Защитная среда;3) Protective environment;
4) Адъювант.4) Adjuvant.
Предлагаемое изобретение характеризуется также другими признаками, выражающими конкретные формы его выполнения или особые условия использования:The present invention is also characterized by other features expressing specific forms of its implementation or special conditions of use:
1) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур с инфекционной активностью, по меньшей мере, 6,0 lg ЭИД50/см3;1) avirulent antigenic material from strain "About No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in 9-11-day-old embryos of SPF chickens with infectious activity of at least 6.0 lg EID 50 / cm 3 ;
2) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в 9-11 суточных эмбрионах SPF-кур с инфекционной активностью, по меньшей мере, 6,0 lg ЭИД50/см3, в количестве 13,6-15,2 мас.%;2) avirulent antigenic material from strain "About No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in 9-11 day old embryos of SPF chickens with infectious activity of at least 6.0 lg EID 50 / cm 3 , in the amount of 13.6 -15.2 wt.%;
3) защитная среда, содержащая лактозу и/или сахарозу, и/или желатозу, в количестве 0,8-2,4 мас.%;3) a protective medium containing lactose and / or sucrose, and / or gelatose, in an amount of 0.8-2.4 wt.%;
4) адъювант содержит аэросил, сапонин, глицерин и ФБР в соотношении, мас.%:4) the adjuvant contains aerosil, saponin, glycerin and the FBI in the ratio, wt.%:
5) адъювант, содержащий аэросил, сапонин, глицерин и ФБР, в количестве 84,0 мас.%;5) an adjuvant containing aerosil, saponin, glycerin and the FBI, in an amount of 84.0 wt.%;
6) авирулентный антигенный материал из штамма «О№112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур с инфекционной активностью, по меньшей мере, 6,0 lg ЭИД50/см3, защитная среда, содержащая лактозу и /или сахарозу, и/или желатозу, и адъювант, содержащий аэросил, сапонин, глицерин и ФБР, в соотношении, мас.%:6) avirulent antigenic material from strain "No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in 9-11-day-old embryos of SPF chickens with infectious activity of at least 6.0 lg EID 50 / cm 3 , a protective medium containing lactose and / or sucrose, and / or gelatose, and an adjuvant containing aerosil, saponin, glycerin and the FBI, in the ratio, wt.%:
Признаками изобретения, характеризующими предлагаемую вакцину и совпадающими с признаками прототипа, в том числе родовое понятие, отражающее назначение, являются:The signs of the invention, characterizing the proposed vaccine and coinciding with the signs of the prototype, including the generic concept, reflecting the purpose, are:
1) инактивированная сорбированная вакцина против ИЛТ птиц;1) inactivated adsorbed vaccine against bird ILT;
2) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в чувствительной биологической системе;2) avirulent antigenic material from strain "About No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in a sensitive biological system;
3) адъювант.3) adjuvant.
По сравнению с вакциной-прототипом существенными отличительными признаками изобретения являются:Compared with the prototype vaccine, the salient features of the invention are:
1) авирулентный антигенный материал из штамма гомологичного вируса ИЛТ птиц;1) avirulent antigenic material from a strain of homologous avian ILT virus;
2) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» вируса ИЛТ птиц в эффективном количестве.2) avirulent antigenic material from the strain "About No. 112-DEPT" of the bird ILT virus in an effective amount.
Предлагаемое изобретение характеризуется также другими отличительньми признаками, выражающими конкретные формы его выполнения или особые условия использования:The present invention is also characterized by other distinctive features expressing specific forms of its implementation or special conditions of use:
1) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур с инфекционной активностью, по меньшей мере, 6,0 lg ЭИД50/см3;1) avirulent antigenic material from strain "About No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in 9-11-day-old embryos of SPF chickens with infectious activity of at least 6.0 lg EID 50 / cm 3 ;
2) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур с инфекционной активностью, по меньшей мере, 6,0 lg ЭИД50/см3, в количестве 13,6-15,2 мас.%;2) avirulent antigenic material from strain "About No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in 9-11-day-old embryos of SPF chickens with infectious activity of at least 6.0 lg EID 50 / cm 3 , in an amount of 13, 6-15.2 wt.%;
3) защитная среда, содержащая лактозу и/или сахарозу, и/или желатозу, в количестве 0,8-2,4 мас.%;3) a protective medium containing lactose and / or sucrose, and / or gelatose, in an amount of 0.8-2.4 wt.%;
4) адъювант содержит аэросил, сапонин, глицерин и ФБР в соотношении, мас.%:4) the adjuvant contains aerosil, saponin, glycerin and the FBI in the ratio, wt.%:
5) адъвант, содеожащий аэросил, сапонин, глицерин и ФБР, в количестве 84,0 мас.%;5) the adjuvant containing aerosil, saponin, glycerin and the FBI, in the amount of 84.0 wt.%;
6) авирулентный антигенный материал из штамма «О №112-ДЕП» гомологичного вируса, репродуцированного в 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур с инфекционной активностью, по меньшей мере, 6,0 lg ЭИД50/см3, защитная среда, содержащая лактозу и/или сахарозу, и/или желатозу, и адъювант, содержащий аэросил, сапонин, глицерин и ФБР, в соотношении, мас.%:6) avirulent antigenic material from strain "About No. 112-DEPT" of a homologous virus reproduced in 9-11-day-old SPF chicken embryos with infectious activity of at least 6.0 lg EID 50 / cm 3 , a protective medium containing lactose and / or sucrose, and / or gelatose, and an adjuvant containing aerosil, saponin, glycerin and the FBI, in the ratio, wt.%:
Предлагаемая вакцина обладает высокой антигенной и иммуногенной активностью, является безвредной и расширяет арсенал инактивированных вакцин против ИЛТ птиц.The proposed vaccine has high antigenic and immunogenic activity, is harmless and expands the arsenal of inactivated vaccines against bird ILT.
Достижение технического результата от использования предлагаемой вакцины объясняется использованием в ее составе авирулентного антигенного материала из штамма «О №112-ДЕП» вируса ИЛТ птиц, обладающего по сравнению со штаммом «ВНИИБП» и «ЦНИИПП» более высокой антигенной и иммуногенной активностью и безвредностью как в нативном виде, так и после инактивации.The achievement of the technical result from the use of the proposed vaccine is explained by the use of avirulent antigenic material from the strain “About No. 112-DEP” of the bird ILT virus, which has higher antigenic and immunogenic activity and harmlessness compared to the strain VNIIBP and TsNIIPP as in native form, and after inactivation.
Штамм «О №112-ДЕП» является новым, ранее неизвестным. Исходный вирус (авторское наименование штамм «О») для получения штамма «О №112-ДЕП» выделен из гортани и трахеи курицы с признаками латентной формы заболевания в Казахстане в 1992 году. Производственный штамм «О №112-ДЕП» получен путем последовательных многократных пассажей на 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур.Strain "About No. 112-DEPT" is a new, previously unknown. The original virus (the author’s name is strain “O”) for obtaining strain “About No. 112-DEPT” was isolated from the larynx and trachea of chicken with signs of a latent form of the disease in Kazakhstan in 1992. The production strain "About No. 112-DEPT" was obtained by successive repeated passages on 9-11-day-old embryos of SPF hens.
Полученный штамм депонирован во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве, Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ) 05.06.2000 г. под регистрационным наименованием «О №112-ДЕП».The resulting strain was deposited in the All-Russian state collection of strains of microorganisms used in veterinary medicine and animal husbandry, the All-Russian State Research Institute of Control, Standardization and Certification of Veterinary Medicines (VGNKI) 05.06.2000, under the registration name "About No. 112-DEPT".
Экспериментально подтверждена возможность его использования для изготовления инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц.The possibility of its use for the manufacture of an inactivated sorbed vaccine against bird ILT has been experimentally confirmed.
Штамм «О №112-ДЕП» вируса ИЛТ птиц характеризуется следующими признаками и свойствами.The strain "About No. 112-DEPT" virus ILT birds is characterized by the following features and properties.
Морфологические свойстваMorphological properties
Штамм «О №112-ДЕП» вируса ИЛТ относится к семейству Herpesviridae. При электронной микроскопии (инструментальное увеличение 4,5×105 и 5×105) в поле зрения микроскопа наблюдают хорошо различимые вирусные частицы ИЛТ со свойственной им морфологией. Вирионы имеют сферическую форму, их размеры варьируют от 200 до 250 нм (у некоторых до 330 нм). Вирионы ИЛТ состоят из сферического нуклеокапсида, окруженного суперкапсидной оболочкой сложной формы. Вирион обладает икосаэдрическим типом симметрии. Икосаэдрический капсид покрыт липопротеидной оболочкой, имеющей на своей поверхности морфологические единицы-пепломеры. Диаметр нуклеокапсида равен 113±2 нм, усредненный диаметр нуклеокапсидной оболочки около 350 нм.The strain "About No. 112-DEPT" of the ILT virus belongs to the family Herpesviridae. Electron microscopy (instrumental magnification of 4.5 × 10 5 and 5 × 10 5 ) in the field of view of the microscope shows clearly visible viral particles of ILT with their characteristic morphology. Virions have a spherical shape, their sizes vary from 200 to 250 nm (some up to 330 nm). ILT virions consist of a spherical nucleocapsid surrounded by a complex-shaped supercapsid membrane. Virion has an icosahedral type of symmetry. The icosahedral capsid is coated with a lipoprotein membrane, which has on its surface morphological units-peplomeres. The diameter of the nucleocapsid is 113 ± 2 nm, the average diameter of the nucleocapsid shell is about 350 nm.
Нуклеокапсиды размером 100-110 нм располагаются в вирусной частице, как правило, эксцентрично, реже - в центре частиц. Геном вируса ИЛТ имеет длину 155000 пар нуклеотидов и состоит из длинной уникальной последовательности UL, (120000 п.н.) и короткой уникальной последовательности US (17000 п.н.). Вирус содержит гликопротеины (205, 160, 115, 90, 85, 74, 60 и 50 кД). Гликопротеин В (gB) является первым структурным белком вируса ИЛТ.Nucleocapsids 100-110 nm in size are located in the viral particle, usually eccentric, less often in the center of the particles. The genome of the ILT virus has a length of 155,000 nucleotide pairs and consists of a long unique sequence U L (120,000 bp) and a short unique sequence U S (17,000 bp). The virus contains glycoproteins (205, 160, 115, 90, 85, 74, 60 and 50 kD). Glycoprotein B (gB) is the first structural protein of the ILT virus.
Антигенные свойстваAntigenic properties
Штамм «О№112-ДЕП» вируса ИЛТ стабильно нейтрализуется гомологичной сывороткой, идентифицируется в сыворотках крови кур, содержащих антитела к данному вирусу, в РДП, РН и ИФА. В РДП идентифицируется гомологичными гипериммунными сыворотками в титре 1:8. В РН индекс нейтрализации гомологичными гипериммунными сыворотками в разведениях 1:10 и 1:20 в среднем составляет 3,8 lg ЭИД50/см3 соответственно. В ИФА идентифицируется полевыми и лабораторными гипериммунными сыворотками в титре до 1:24579. Антигенные различия штамма «О №112-ДЕП» по отношению к другим штаммам вируса ИЛТ не установлены. Гемагглютинирующими свойствами штамм не обладает. Биотехнологические характеристикиThe strain "No. 112-DEPT" of the ILT virus is stably neutralized by homologous serum, is identified in the blood serum of chickens containing antibodies to this virus, in RDP, PH and ELISA. In RDP, it is identified by homologous hyperimmune sera in a titer of 1: 8. In pH, the neutralization index of homologous hyperimmune sera at dilutions of 1:10 and 1:20 averages 3.8 lg EID 50 / cm 3, respectively. In ELISA is identified by field and laboratory hyperimmune sera in the titer up to 1: 24579. Antigenic differences of the strain "About No. 112-DEPT" in relation to other strains of the ILT virus have not been established. The strain does not have hemagglutinating properties. Biotechnological characteristics
Штамм «О №112-ДЕП» проявляет высокую биологическую, иммуногенную и антигенную активность как в нативном виде, так и после инактивации. Штамм «О №112-ДЕП» используют для изготовления живой и инактивированной вакцин против ИЛТ птиц и диагностических препаратов. Вирус имеет выраженный тропизм к эпителиальным клеткам слизистой оболочки гортани, трахеи и клоаки птиц. Штамм культивируют в 9-11 суточных эмбрионах SPF-кур. Репродукция вируса происходит в ткани хориоаллантоисной оболочки (ХАО). Инфекционный титр вируса в 10-20% суспензии ХАО на 5 сутки культивирования при условии генерализованного распространения по всей оболочке составляет не менее 6,2 lg ЭИД50/см3.Strain "About No. 112-DEPT" shows high biological, immunogenic and antigenic activity both in the native form and after inactivation. Strain "About No. 112-DEPT" is used for the manufacture of live and inactivated vaccines against bird ILT and diagnostic preparations. The virus has a pronounced tropism to the epithelial cells of the mucous membrane of the larynx, trachea and cloaca of birds. The strain is cultured in 9-11 day old embryos of SPF hens. Reproduction of the virus occurs in the tissue of the chorioallantoic membrane (HAO). The infectious titer of the virus in a 10-20% suspension of HAO on the 5th day of cultivation under the condition of generalized distribution throughout the membrane is at least 6.2 lg EID 50 / cm 3 .
Хемо- и генотаксономическая характеристикаChemo- and genotaxonomic characterization
Штамм «О №112-ДЕП» является ДНК-содержащим вирусом.The strain "About No. 112-DEPT" is a DNA-containing virus.
Устойчивость к внешним факторамResistance to external factors
Вирус чувствителен к липолитическим агентам, теплу и различным дезинфектантам. Температура 55°С разрушает вирус в течение 10-15 минут, а 38°С - за 48 часов. В замороженных тушках больных и вынужденно убитых кур, хранившихся при температуре минус 10, 18 и 28°С, вирус оставался активным более 19 месяцев, на поверхности скорлупы в условиях термостата инактивируется через 12 часов, а в зараженных птичниках сохраняется не более 9 дней. Полностью инактивируется в 1% растворе креола в течение 30 секунд. Он длительно сохраняет свою активность в лиофилизованном состоянии или при минус 20-60°С. В лиофилизованном гомогенате ХАО вирус сохраняет инфекционность не менее 1,5 лет. В замороженной ткани ХАО инфекционность вируса сохраняется не менее 4 лет.The virus is sensitive to lipolytic agents, heat and various disinfectants. A temperature of 55 ° C destroys the virus within 10-15 minutes, and 38 ° C in 48 hours. The virus remained active for more than 19 months in the frozen carcasses of sick and forcibly killed chickens stored at minus 10, 18 and 28 ° C, on the surface of the shell in thermostat it is inactivated after 12 hours, and in infected poultry houses it lasts no more than 9 days. Completely inactivated in a 1% solution of creole for 30 seconds. It retains its activity for a long time in a lyophilized state or at minus 20-60 ° C. In the lyophilized HAO homogenate, the virus remains infectious for at least 1.5 years. In the frozen HAO tissue, the infectivity of the virus persists for at least 4 years.
Иммуногенность штаммаImmunogenicity of the strain
При вакцинации кур старше 15-дневного возраста окулярным способом в дозе 1000 ЭИД50 и оральным способом (выпойкой) в дозе 4000 ЭИД50 индуцирует выработку специфических антител и создает иммунитет против ИЛТ у 100% вакцинированных кур. В лиофилизованном гомогенате ХАО вирус сохраняет иммуногенность не менее 1,5 лет.When vaccinating chickens older than 15 days of age, the ocular method at a dose of 1000 EID 50 and the oral method (drink) at a dose of 4000 EID 50 induces the production of specific antibodies and creates immunity against ILT in 100% of vaccinated chickens. In the lyophilized HAO homogenate, the virus retains immunogenicity for at least 1.5 years.
Эпизоотичность штаммаEpizooticity of the strain
При совместном содержании вакцинированных и интактных птиц передача вакцинного вируса штамма «О №112-ДЕП» по контакту не установлена.When the vaccinated and intact birds are kept together, the transmission of the vaccine virus of strain “No. 112-DEPT” by contact has not been established.
Условия поддержания штаммаStrain Maintenance Conditions
Лиофилизованный материал из штамма «О №112-ДЕП» хранят при температуре 4°С, вируссодержащие ХАО - при температуре не выше минус 40°С. Для лиофилизации используют защитную среду «ВНИИЗЖ». Для ресуспендирования лиофилизованного вируса используют изотонический фосфатно-буферный раствор рН 7,4-7,6.Lyophilized material from strain "About No. 112-DEPT" is stored at a temperature of 4 ° C, virus-containing HAO - at a temperature not exceeding minus 40 ° C. For lyophilization use a protective environment "ARRIAH". For resuspension of the lyophilized virus, an isotonic phosphate-buffered solution of pH 7.4-7.6 is used.
Генетическая чистотаGenetic purity
После 20 пассажей на ХАО 9-11-суточных эмбрионах SPF-кур каких-либо изменений иммунобиологических свойств штамма «О №112-ДЕП» не установлено.After 20 passages on the Khao 9-11-day-old embryos of SPF-hens, no changes in the immunobiological properties of the strain "About No. 112-DEPT" were found.
Дополнительные признаки и свойстваAdditional features and properties
Реактогенность отсутствует, патогенность отсутствует, вирулентность отсутствует, онкогенность отсутствует, контагиозность отсутствует.There is no reactogenicity, no pathogenicity, no virulence, no oncogenicity, no contagiousness.
Стабильность аттенуации отмечена при проведении 4 пассажей на чувствительных цыплятах.The attenuation stability was observed during 4 passages on sensitive chickens.
На основании полученных данных можно утверждать, что штамм «О №112-ДЕП» вируса ИЛТ по антигенному и иммунологическому спектрам является оригинальным, в таксономическом отношении новым, ранее неизвестным вариантом вируса ИЛТ.Based on the data obtained, it can be argued that the strain "About No. 112-DEPT" of the ILT virus according to antigenic and immunological spectra is an original, taxonomically new, previously unknown variant of the ILT virus.
Проведенный заявителем анализ уровня техники, включающий поиск по патентным и научно-техническим источникам информации и выявление источников, содержащих сведения об аналогах предлагаемого изобретения, позволил установить, что заявитель не обнаружил источники, характеризующиеся признаками, тождественными (идентичными) всем существенным признакам предлагаемого изобретения. Определение из перечня выявленных аналогов прототипа, как наиболее близкого по совокупности существенных признаков аналога, позволило установить совокупность существенных по отношению к усматриваемому заявителем техническому результату отличительных признаков предлагаемой вакцины, приведенных в независимом пункте формулы изобретения.The analysis of the prior art by the applicant, including a search by patent and scientific and technical sources of information and identification of sources containing information about analogues of the invention, allowed to establish that the applicant did not find sources characterized by signs that are identical (identical) to all the essential features of the invention. The definition from the list of identified analogues of the prototype, as the closest in the set of essential features of the analogue, made it possible to establish a set of essential distinctive features of the proposed vaccine relative to the applicant’s technical result, which are listed in the independent claim.
Следовательно, предлагаемое изобретение соответствует условию патентоспособности «новизна».Therefore, the present invention meets the condition of patentability "novelty."
Для проверки соответствия предлагаемой вакцины условию патентоспособности «изобретательский уровень» проведен дополнительный поиск известных решений для выявления признаков, включенных в отличительную часть независимого пункта формулы изобретения. Результаты поиска показали, что предлагаемое решение не вытекает для специалиста явным образом из известного уровня техники, изложенного в соответствующем разделе описания (не выявлены решения, имеющие признаки, совпадающие с отличительными признаками предлагаемой вакцины), а также не выявлено влияние предусматриваемых существенными признаками предлагаемой вакцины преобразований для достижения технического результата.To verify the conformity of the proposed vaccine with the condition of patentability "inventive step", an additional search for known solutions was carried out to identify features included in the distinctive part of the independent claim. The search results showed that the proposed solution does not follow explicitly for the specialist from the prior art set forth in the corresponding section of the description (no solutions having signs matching the distinctive features of the proposed vaccine were identified), and the effect of the transformations provided for by the essential features of the proposed vaccine was not identified to achieve a technical result.
Следовательно, предлагаемая вакцина соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень».Therefore, the proposed vaccine meets the condition of patentability "inventive step".
Сущность предлагаемого изобретения пояснена примерами его исполнения, которые не ограничивают его объем.The essence of the invention is illustrated by examples of its implementation, which do not limit its scope.
Пример 1.Example 1
Инактивированную сорбированную вакцину против ИЛТ птиц получают следующим образом.An inactivated adsorbed vaccine against bird ILT is prepared as follows.
Матровым вирусом из штамма «О №112-ДЕП» заражают хорошо развитые 9-11-суточные эмбрионы SPF-кур. Для этого в скорлупе куриного эмбриона со стороны воздушной камеры образуют отверстие диаметром 8-10 мм. В подскорлупной оболочке и хориоаллантоисной оболочке (ХАО) инъекционной иглой производят четыре прокола в углы мнимого квадрата с диагональю около 5 мм. После этого на ХАО наносят вируссодержащий материал в объеме 0,1 см3. Отверстие в скорлупе заклеивают лейкопластырем. Инфицированные эмбрионы инкубируют в течение 3-6 суток при 37,7°С и влажности 60%. По результатам овоскопии и последующего вскрытия эмбрионов определяют наличие характерных для вируса ИЛТ поражений ХАО. Пораженные ХАО используют в качестве вируссодержащего материала. Из пораженных ХАО готовят 15-30-процентную суспензию, которую промораживают и освобождают от крупнодисперсных частиц низкоскоростным центрифугированием. Вируссодержащую надосадочную жидкость осторожно сливают в стерильных условиях в общую емкость и подвергают контролю на инфекционную активность. Для изготовления вакцины используют материал с титром инфекционной активности, по меньшей мере, 6,0 lg ЭИД50/см3. Затем полученный вирус подвергают инактивации. Для инактивации используют ДЭИ. В подогретую до 27°С вируссодержащую суспензию вносят 10% водный раствор ДЭИ до концентрации 0,1%. Смесь тщательно перемешивают и выдерживают при 27°С в течение 24 часов. По окончании инактивации ДЭИ нейтрализуют тиосульфатом натрия в течение 120 минут и антигенный материал охлаждают до температуры 2÷8°С. К полученному антигену добавляют защитную среду, в качестве которой можно использовать отдельно или в комбинации лактозу и/или сахарозу, и/или желатозу. Антиген и защитную среду смешивают в соотношении, мас.%: 95:5÷85:15. Полученную смесь расфасовывают во флаконы по 4 см3, промораживают при температуре минус 48÷50°С и подвергают лиофилизации. Продолжительность сушки 59-68 часов. Полученный полуфабрикат представляет собой однородную мелкопористую массу в виде таблетки цилиндрической формы бежевого цвета. Препарат хранится в лиофилизованном виде при температуре 2÷6°С до применения.Well-developed 9-11-day-old SPF-chicken embryos are infected with the mother virus from strain “About No. 112-DEPT”. For this, a hole with a diameter of 8-10 mm is formed in the shell of the chicken embryo from the side of the air chamber. Four punctures in the corners of the imaginary square with a diagonal of about 5 mm are made in the shell-shell and chorioallantoic membrane (CAO) with an injection needle. After that, virus-containing material in a volume of 0.1 cm 3 is applied to the HAO. The hole in the shell is sealed with adhesive tape. Infected embryos are incubated for 3-6 days at 37.7 ° C and a humidity of 60%. According to the results of ovoscopy and subsequent opening of the embryos, the presence of HAO lesions characteristic of the ILT virus is determined. Affected HAO is used as a virus-containing material. A 15-30% suspension is prepared from the affected HAO, which is frozen and freed from coarse particles by low-speed centrifugation. The virus-containing supernatant is carefully poured under sterile conditions into a common container and subjected to control for infectious activity. For the manufacture of the vaccine using material with a titer of infectious activity of at least 6.0 lg EID 50 / cm 3 . Then the resulting virus is subjected to inactivation. For inactivation using DEI. A 10% aqueous solution of DEI is added to a virus-containing suspension heated to 27 ° C to a concentration of 0.1%. The mixture is thoroughly mixed and kept at 27 ° C for 24 hours. At the end of the inactivation, the DEI is neutralized with sodium thiosulfate for 120 minutes and the antigenic material is cooled to a temperature of 2 ÷ 8 ° C. A protective medium is added to the resulting antigen, which can be used alone or in combination with lactose and / or sucrose and / or gelatose. The antigen and protective environment are mixed in the ratio, wt.%: 95: 5 ÷ 85: 15. The resulting mixture is packaged in bottles of 4 cm 3 , frozen at a temperature of minus 48 ÷ 50 ° C and subjected to lyophilization. The drying time is 59-68 hours. The resulting semi-finished product is a homogeneous finely porous mass in the form of a beige cylindrical tablet. The drug is stored in lyophilized form at a temperature of 2 ÷ 6 ° C until use.
Адъювант готовят путем смешивания аэросила, сапонина, глицерина и ФБР при следующем соотношении указанных ингредиентов, мас.%:An adjuvant is prepared by mixing Aerosil, saponin, glycerin and the FBI in the following ratio of these ingredients, wt.%:
Готовый адъювант имеет вид опалецирующей жидкости с рыхлым осадком белого цвета (около 1/5 объема). При встряхивании флакона образуется гомогенная взвесь с легким пенообразованием.Ready adjuvant has the form of an opalescent liquid with a loose precipitate of white color (about 1/5 of the volume). When the bottle is shaken, a homogeneous suspension is formed with slight foaming.
Для получения вакцины лиофилизованный полуфабрикат (первоначальный объем 4 см3) регидратируют в 25 см3 адъюванта. После смешивания с адъювантом вакцина приобретает розовый оттенок. Полученную вакцину контролируют на безвредность, антигенную и иммуногенную активность. Вакцину применяют клинически здоровой птице в возрасте 25-30 суток для создания высокого уровня иммунитета. Препарат в объеме 0,5 см3 вводят внутримышечно. Иммунитет у привитой птицы наступает на 14-21 сутки после вакцинации. Вакцина индуцирует высокий уровень антител против вирулентного вируса ИЛТ птиц.To obtain the vaccine, the lyophilized prefabricated product (initial volume of 4 cm 3 ) is rehydrated in 25 cm 3 of adjuvant. After mixing with adjuvant, the vaccine becomes pink. The resulting vaccine is monitored for safety, antigenic and immunogenic activity. The vaccine is used in clinically healthy birds aged 25-30 days to create a high level of immunity. The drug in a volume of 0.5 cm 3 is administered intramuscularly. Immunity in a vaccinated bird occurs on 14-21 days after vaccination. The vaccine induces a high level of antibodies against the virulent avian ILT virus.
Оптимальный компонентный состав полученной вакцины против ИЛТ птиц приведен в таблице 1.The optimal component composition of the obtained vaccine against bird ILT is shown in table 1.
Согласно таблице 1 содержание антигена в вакцине в указанных пределах является его эффективным количеством в препарате, обеспечивающим достижение технического результата.According to table 1, the antigen content in the vaccine within the specified limits is its effective amount in the drug, ensuring the achievement of a technical result.
Пример 2.Example 2
Инактивированную сорбированную вакцину против ИЛТ птиц, изготовленную так, как описано в примере 1, и содержащую, мас.%:Inactivated sorbed vaccine against bird ILT, made as described in example 1, and containing, wt.%:
подвергли контролю на реактогенность. Для этого из 3 флаконов отобрали по 6 см3 вакцины, образуя общую пробу. Вакцину ввели 10 цыплятам внутримышечно в область груди по 1,5 см3. За птицей вели ежедневное наблюдение в течение 10 суток. Действие препарата не повлекло за собой падежа или возникновения клинических признаков заболевания ИЛТ. В период наблюдения (10 суток) какого-либо токсического действия или проявления клинических признаков заболевания ИЛТ не установлено.subjected to reactogenicity control. For this, 6 cm 3 vaccines were taken from 3 vials, forming a common sample. The vaccine was administered to 10 chickens intramuscularly in the chest area of 1.5 cm 3 . The bird was monitored daily for 10 days. The effect of the drug did not entail a death or clinical signs of ILT. During the observation period (10 days), no toxic effect or manifestation of clinical signs of the disease was detected.
Пример 3.Example 3
Инактивированную сорбированную вакцину против ИЛТ птиц, изготовленную так, как описано в примере 1, и содержащую, мас.%:Inactivated sorbed vaccine against bird ILT, made as described in example 1, and containing, wt.%:
подвергли контролю на антигенную и иммуногенную активность. Для этого из 3 флаконов вакцины, содержащей антигенный материал в концентрации 14,4%, отобрали по 6 см3 препарата, образуя единую пробу. Кроме того, были изготовлены пробы, включающие 1/4 и 1/16 вышеуказанной концентрации антигена. Пробы были обозначены: «Ц» - цельная, «1/4» - и «1/16» соответственно. Для испытания указанных препаратов сформировали 3 группы по 15 подопытных птиц. Вакцину вводили внутримышечно в область груди по 0,5 см3. Параллельно образовали контрольную группу, состоящую из 10 интактных птиц, которые в течение всего эксперимента содержались в условиях, аналогичных подопытной птице.subjected to control for antigenic and immunogenic activity. For this, from 6 vials of a vaccine containing antigenic material at a concentration of 14.4%, 6 cm 3 of the drug were taken, forming a single sample. In addition, samples were prepared comprising 1/4 and 1/16 of the above antigen concentration. Samples were indicated: "C" - whole, "1/4" - and "1/16", respectively. To test these drugs, 3 groups of 15 experimental birds were formed. The vaccine was administered intramuscularly into the chest area at 0.5 cm 3 . In parallel, a control group was formed, consisting of 10 intact birds, which were kept under conditions similar to the experimental bird during the entire experiment.
На 21 сутки после прививки у вакцинированных цыплят в ИФА исследовали сыворотки крови на присутствие антител к вирусу ИЛТ. Для постановки ИФА использовали диагностические наборы фирмы KPL (USA, Catalog №54-93-01; Serial №F 032). В соответствии с инструкцией по использованию наборов реакцию считали положительной, если величина титра антител была равной или превосходила значение 1:336.On the 21st day after vaccination in vaccinated chickens in ELISA, serum was examined for the presence of antibodies to the ILT virus. For ELISA, KPL diagnostic kits were used (USA, Catalog No. 54-93-01; Serial No. F 032). In accordance with the instructions for using the kits, the reaction was considered positive if the antibody titer was equal to or greater than 1: 336.
Через 21 сутки после вакцинации подопытных и контрольных птиц заражали патогенным штаммом «Богатищевский» вируса ИЛТ, который вводили интратрахеально в дозе 1000 ЭИД 50 в объеме 0,5 см3. В течение 10 суток за инфицированной птицей вели наблюдение. Выявляли клинические признаки ИЛТ. Проводили патологоанатомические исследования (устанавливали специфические для ИЛТ поражения: экссудативно-геморрагические воспаления слизистой трахеи и глотки, а также наличие фибринозных пробок в верхнем отделе трахеи). В подопытной и контрольной группах определяли долю заболевших и павших от ИЛТ птиц.21 days after vaccination, the experimental and control birds were infected with the pathogenic strain “Bogatishchevsky” of the ILT virus, which was administered intratracheally at a dose of 1000 EID 50 in a volume of 0.5 cm 3 . An infected bird was monitored for 10 days. Clinical signs of ILT were detected. Pathological studies were performed (specific lesions for ILT were established: exudative-hemorrhagic inflammation of the mucosa of the trachea and pharynx, as well as the presence of fibrinous plugs in the upper part of the trachea). In the experimental and control groups, the proportion of birds that fell and died from ILT was determined.
Результаты исследования антигенного и протективного действия сорбированной вакцины в виде показателей титра сывороточных антител, а также доли заболевших и павших птиц после заражения патогенным штаммом вируса ИЛТ, соответственно испытанным концентрациям антигена в препаратах, представлены в таблице 2.The results of the study of the antigenic and protective effect of the sorbed vaccine in the form of titer of serum antibodies, as well as the proportion of sick and dead birds after infection with a pathogenic strain of the ILT virus, respectively, the tested antigen concentrations in the preparations are presented in table 2.
Представленные в таблице 2 результаты позволяют считать, что сорбированная вакцина продемонстрировала выраженное антигенное и протективное действие, которое зависело от концентрации антигена в препарате.The results presented in table 2 suggest that the sorbed vaccine showed a pronounced antigenic and protective effect, which depended on the concentration of antigen in the drug.
Было установлено, что показатель заболеваемости вакцинированных птиц (С) при контрольном заражении патогенным штаммом вируса был устойчиво связан с долей положительно реагирующих сывороток в исследуемой группе. Величина коэффициента корреляции указанных переменных составила для сорбированной вакцины 0,908.It was found that the incidence rate of vaccinated birds (C) during control of infection with a pathogenic strain of the virus was stably associated with the proportion of positively reacting sera in the study group. The value of the correlation coefficient of these variables was 0.908 for the sorbed vaccine.
Анализ полученных результатов показал, что связь между оценками D и Т может быть описана эмпирическим уравнением, позволяющим определять ожидаемую величину титра антител (Т) для заданной концентрации антигена в вакцине. Уравнение для сорбированной вакцины имело вид:Analysis of the results showed that the relationship between the estimates of D and T can be described by an empirical equation that allows you to determine the expected value of antibody titer (T) for a given concentration of antigen in the vaccine. The equation for the sorbed vaccine was:
lgT'=3,584+(-0,722)×lg DlogT '= 3.584 + (- 0.722) × log D
Установленные значения эмпирических коэффициентов не имели статических различий. После применения сорбированной вакцины экспериментальные и ожидаемые величины титров антител были высокими.The established values of the empirical coefficients had no static differences. After using the sorbed vaccine, the experimental and expected antibody titers were high.
Оценкой протективного действия вакцин для заданной концентрации антигена считали показатель Р=1-С (долю не заболевших птиц). При этом, ориентируясь на получение более осторожных результирующих оценок, экспериментальные значения С=0 принимали, как С=0,01. Для описания связи между концентрацией антигена (D) и ожидаемым протективным действием вакцины установленные оценки Р выражали в виде соответствующих им нормальных эквивалентных отклонений (Y - табличное значение). Таким образом, было построено уравнение для сорбированной вакциныAn estimate of the protective effect of vaccines for a given antigen concentration was considered to be P = 1-C (the proportion of unwell birds). Moreover, focusing on obtaining more cautious resulting estimates, the experimental values of C = 0 were taken as C = 0.01. To describe the relationship between the concentration of antigen (D) and the expected protective effect of the vaccine, the established estimates of P were expressed as their corresponding normal equivalent deviations (Y is the tabular value). Thus, the equation for the sorbed vaccine was constructed
lgY'=2,192+(-2,146)×lgD,logY '= 2,192 + (- 2,146) × logD,
где Y' - прогнозируемая величина нормального эквивалентного отклонения доли не заболевших птиц для заданного значения D.where Y 'is the predicted value of the normal equivalent deviation of the proportion of unwell birds for a given value D.
Данное уравнение позволило определить, что для защиты 50% вакцинированного птицепоголовья ожидаемая концентрация антигена (величина разведения цельного препарата) должна составлять D'собр=10,76 в сорбированной вакцине. При этом для защиты 95% птиц эта величина составила D'95copб=1,82. Цельный препарат этой вакцины (D=1) имел ожидаемую оценку защиты около 99%.This equation made it possible to determine that, to protect 50% of the vaccinated poultry head, the expected antigen concentration (dilution value of the whole preparation) should be D ' sb = 10.76 in the sorbed vaccine. Moreover, for the protection of 95% of birds, this value was D ' 95copb = 1.82. The whole preparation of this vaccine (D = 1) had an expected protection rating of about 99%.
Таким образом, сорбированная вакцина продемонстрировала выраженное антигенное и протективное действие. Установлена и количественно оценена связь между концентрацией антигена и долей защищенных птиц, а также величиной среднего титра сывороточных антител. В эксперименте вакцина, содержащая цельный антиген, обусловила защиту 100% птиц. Значение средних титров антител в данных группах составило 1:3981 для сорбированной вакцины.Thus, the sorbed vaccine showed a pronounced antigenic and protective effect. The relationship between the concentration of antigen and the proportion of protected birds, as well as the average titer of serum antibodies, was established and quantified. In an experiment, a vaccine containing a whole antigen determined the protection of 100% of the birds. The mean antibody titers in these groups were 1: 3981 for the sorbed vaccine.
Пример 4.Example 4
Проведены исследования изменений мышечной ткани птицы на месте инъекции инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц из штамма «О №112-ДЕП» (в объеме иммунизирующей дозы) через 30, 40, 60 и 90 дней после прививки. Для этого из числа вакцинированных, но не заболевших после контрольного заражения птиц, была сформирована группа в количестве 32 голов. После прививки подопытной птице сорбированной вакцины в месте инъекции через 30 суток видимых изменений не обнаружили.Studies of changes in poultry muscle tissue at the injection site of an inactivated sorbed vaccine against bird ILT from strain O No. 112-DEPT (in the amount of the immunizing dose) 30, 40, 60 and 90 days after vaccination were studied. For this, a group of 32 animals was formed from the number of birds vaccinated but not sick after the control infection. After vaccination of an experimental vaccine in an experimental bird, no visible changes were detected at the injection site after 30 days.
Пример 5.Example 5
Проведены испытания иммуногенной активности инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц, изготовленной так, как описано в примере 1, и содержащей, мас.%:Tests of the immunogenic activity of an inactivated sorbed vaccine against bird ILT, made as described in example 1, and containing, wt.%:
Иммуногенную активность вакцины определяли на цыплятах 30-суточного возраста, свободных от антител к вирусу ИЛТ птиц. Вакцину вводили по 0,5 см3 в мышцу бедра. Через 21 день у птиц брали кровь, получали сыворотки и исследовали их в реакции ИФА. Результаты исследований представлены в таблице 3.The immunogenic activity of the vaccine was determined on chickens of 30 days of age, free of antibodies to the ILT virus of birds. The vaccine was administered at 0.5 cm 3 into the thigh muscle. After 21 days, the birds took blood, received serum and examined them in the ELISA. The research results are presented in table 3.
Результаты таблицы 3 свидетельствуют о высокой иммуногенной активности инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц, изготовленной из антигенного материала из штамма «О №112-ДЕП».The results of table 3 indicate the high immunogenic activity of the inactivated sorbed vaccine against bird ILT, made from antigenic material from strain "About No. 112-DEPT".
Пример 6.Example 6
Проведены испытания иммуногенной активности инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц, изготовленной так, как описано в примере 1, и содержащей, мас.%:Tests of the immunogenic activity of an inactivated sorbed vaccine against bird ILT, made as described in example 1, and containing, wt.%:
Иммуногенную активность вакцины определяли на цыплятах 25-30-суточного возраста, свободных от антител к вирусу ИЛТ птиц. Вакцину вводили по 0,5 см3 в мышцу бедра. Через 21 день после вакцинации у птиц отбирали кровь, получали сыворотки и исследовали их в ИФА на наличие антител. Результаты исследований представлены в таблице 4.The immunogenic activity of the vaccine was determined on chickens 25-30 days old, free of antibodies to the ILT virus of birds. The vaccine was administered at 0.5 cm 3 into the thigh muscle. 21 days after vaccination, blood was collected from birds, sera were obtained and examined in ELISA for the presence of antibodies. The research results are presented in table 4.
Пример 7.Example 7
Проведены испытания иммуногенной активности инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц, изготовленной так, как описано в примере 1, и содержащей, мас.%:Tests of the immunogenic activity of an inactivated sorbed vaccine against bird ILT, made as described in example 1, and containing, wt.%:
Иммуногенную активность вакцины определяли на цыплятах 25-30-суточного возраста, свободных от антител к вирусу ИЛТ птиц. Вакцину вводили по 0,5 см3 в мышцу бедра. Через 21 день после вакцинации у птиц отбирали кровь, получали сыворотки и исследовали их в ИФА на наличие антител. Результаты исследований представлены в таблице 5.The immunogenic activity of the vaccine was determined on chickens 25-30 days old, free of antibodies to the ILT virus of birds. The vaccine was administered at 0.5 cm 3 into the thigh muscle. 21 days after vaccination, blood was collected from birds, sera were obtained and examined in ELISA for the presence of antibodies. The research results are presented in table 5.
Результаты таблицы 5 свидетельствуют о высокой иммуногенной активности инактивированной сорбированной вакцины из штамма «О №112-ДЕП» вируса ИЛТ птиц.The results of table 5 indicate the high immunogenic activity of the inactivated sorbed vaccine from strain "About No. 112-DEPT" of the bird ILT virus.
Таким образом, приведенная выше информация свидетельствует о выполнении при использовании предлагаемого изобретения следующей совокупности условий:Thus, the above information indicates the fulfillment when using the invention of the following set of conditions:
- инактивированная сорбированная вакцина против ИЛТ птиц, воплощающая предлагаемое изобретение, предназначена для использования в сельском хозяйстве, а именно в ветеринарной вирусологии и биотехнологии;- inactivated sorbed vaccine against bird ILT, embodying the invention, is intended for use in agriculture, namely in veterinary virology and biotechnology;
- для предлагаемого изобретения в том виде, как оно охарактеризовано в независимом пункте формулы изобретения, подтверждена возможность его осуществления с помощью описанных в заявке или известных до даты приоритета средств и методов;- for the proposed invention in the form as described in the independent claim, the possibility of its implementation using the means and methods described in the application or known prior to the priority date is confirmed;
- инактивированная сорбированная вакцина против ИЛТ птиц, приготовленная из штамма «О №112-ДЕП» в соответствии с предлагаемым изобретением, обладает высокой антигенной и иммуногенной активностью и является безвредной.- inactivated sorbed vaccine against bird ILT, prepared from strain "About No. 112-DEPT" in accordance with the invention, has a high antigenic and immunogenic activity and is harmless.
Следовательно, предлагаемое изобретение соответствует условию патентоспособности «промышленная применимость».Therefore, the present invention meets the condition of patentability "industrial applicability".
Источники информацииSources of information
1. Пат. США №3331736; 167-78, 18.07.67.1. Pat. US No. 3331736; 167-78, 07/18/67.
2. Пат. США №3444293; 167-78, 13.05.69.2. Pat. U.S. No. 3,444,293; 167-78, 05/13/69.
3. Авт. свид. СССР №129791; 30,6; 1960.3. Auth. testimonial. USSR No. 129791; 30.6; 1960.
4. Авт. свид. CCCH №1750683, А 61 К 39/245, 30.07.92.4. Auth. testimonial. CCCH No. 1750683, A 61 K 39/245, 07/30/92.
5. Пат. РФ №2138290, А 61 К 39/245, 39/265, 35/78; 27.09.99.5. Pat. RF №2138290, A 61 K 39/245, 39/265, 35/78; 09/27/99.
6. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я. и др. Вирусные болезни животных //М. - ВНИТИБП, - 1998. - С.672-683.6. Syurin V.N., Samuilenko A.Ya. and other viral diseases of animals // M. - VNITIBP, - 1998. - S.672-683.
7. Glissen J.R. Proceedings. - 1988. - 137.7. Glissen J.R. Proceedings. - 1988 .-- 137.
8. Малушко В.В., Соколов В.Д. и др. Опыт борьбы с инфекционным ларинготрахеитом //Птицеводство. - 1983. - 12. - С.21-23.8. Malushko V.V., Sokolov V.D. et al. Experience in combating infectious laryngotracheitis // Poultry farming. - 1983. - 12. - S.21-23.
9. Дутко Ю.С., Шевченко А.А. и др. Иммунологическая эффективность вирусвакцины против инфекционного ларинготрахеита кур //Ветеринария. - 1991. - 3. - С.32-34.9. Dutko Yu.S., Shevchenko A.A. and other Immunological efficacy of a vaccine against infectious laryngotracheitis of hens // Veterinary medicine. - 1991. - 3. - P.32-34.
10. Barhoom S., Forgacs A. and Solyom F. Development of an inactivated vaccine against infectious laryngotracheitis (ILT) - serological and protection studies //Avian Pathology. - 1986. - V.15, №2. - P.213-221.10. Barhoom S., Forgacs A. and Solyom F. Development of an inactivated vaccine against infectious laryngotracheitis (ILT) - serological and protection studies // Avian Pathology. - 1986. - V.15, No. 2. - P.213-221.
11. Бабкин В.Ф. Инфекционный ларинготрахеит птиц (Разработка инактивированных вакцин, методов диагностики и системы противоэпизоотических мероприятий): Автореф. дис. докт. вет. наук. - Харьков. - 1996. - 33 с.(на укр. языке) (прототип).11. Babkin V.F. Infectious laryngotracheitis of birds (Development of inactivated vaccines, diagnostic methods and systems of antiepizootic measures): Author. dis. Doct. vet. sciences. - Kharkiv. - 1996. - 33 pp. (In Ukrainian) (prototype).
Оптимальный компонентный состав инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц из штамма «О №112-ДЕП»Table 1
The optimal component composition of the inactivated sorbed vaccine against bird ILT from strain "About No. 112-DEPT"
Антигенное и протективное действие инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц из штамма «О №112-ДЕП», содержащей различные концентрации антигенаtable 2
Antigenic and protective effect of an inactivated sorbed vaccine against bird ILT from strain "No. 112-DEPT" containing various concentrations of antigen
Иммуногенность инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц из штамма «O №112-ДЕП»Table 3
Immunogenicity of inactivated sorbed vaccine against bird ILT from strain "O No. 112-DEPT"
Иммуногенная активность инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц из штамма «O №112-ДЕП»Table 4
Immunogenic activity of inactivated sorbed vaccine against bird ILT from strain "O No. 112-DEPT"
Иммуногенная активность инактивированной сорбированной вакцины против ИЛТ птиц из штамма «O №112-ДЕП»Table 5
Immunogenic activity of inactivated sorbed vaccine against bird ILT from strain "O No. 112-DEPT"
Claims (8)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003136943/13A RU2259845C1 (en) | 2003-12-24 | 2003-12-24 | Inactivated fixed vaccine against infectious bird laryngotracheitis |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003136943/13A RU2259845C1 (en) | 2003-12-24 | 2003-12-24 | Inactivated fixed vaccine against infectious bird laryngotracheitis |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2003136943A RU2003136943A (en) | 2005-08-10 |
RU2259845C1 true RU2259845C1 (en) | 2005-09-10 |
Family
ID=35844247
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2003136943/13A RU2259845C1 (en) | 2003-12-24 | 2003-12-24 | Inactivated fixed vaccine against infectious bird laryngotracheitis |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2259845C1 (en) |
-
2003
- 2003-12-24 RU RU2003136943/13A patent/RU2259845C1/en active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2003136943A (en) | 2005-08-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
IE53872B1 (en) | Infectious-bronchitis vaccines for poultry, combined infectious-bronchitis vaccines, process for preparing such vaccines, process for preventing infectious bronchitis and infectious-bronchitis virus strain | |
US20110189227A1 (en) | Porcine circovirus type 2 and use thereof | |
US4302444A (en) | Vaccines for immunizing egg-laying birds against Egg Drop disease, preparation of said vaccines, and method of use of said vaccines | |
RU2378014C2 (en) | Emulsion inactivated associated vaccine against cattle paragrippe-3, rednose and coronoviral infection | |
CA1159366A (en) | Vaccine against newcastle fowl disease and method for preparing same | |
Razmaraii et al. | Immunogenicity of commercial, formaldehyde and binary ethylenimine inactivated Newcastle disease virus vaccines in specific pathogen free chickens | |
RU2259845C1 (en) | Inactivated fixed vaccine against infectious bird laryngotracheitis | |
RU2403061C1 (en) | Inactivated combined vaccine against infectious rhinotracheitis, paraflu-3, respiratory syncytial disease, viral diarrhea and pasteurellosis of cattle | |
RU2378017C2 (en) | Emulsion inactivated associated vaccine against cattle rednose and coronoviral infection | |
HUT62200A (en) | Cell-free virus vaccine for marek disease | |
TW201731526A (en) | Hybrid core feline vaccines | |
RU2257225C1 (en) | Inactivated emulsion vaccine against infectious laryngotracheitis in poultry | |
RU2207372C1 (en) | Strain "o" of virus of poultry infectious laryngotracheitis for preparing diagnostic and vaccine preparations | |
RU2372938C1 (en) | Inactivated bivalent cattle virus diarrhoea and adenovirus infection vaccine and method for prevention of cattle virus diarrhoea and adenovirus infection | |
RU2452512C2 (en) | Inactivated emulsion associated vaccine for parvoviral, rheoviral, type i herpes-viral infections and viral diarrhoeia - cattle mucosal disease | |
RU2395298C1 (en) | Inactivated combined vaccine against cattle infectious rhinotracheitis, parainfluenza-3, virus diarrhoea, respiratory syncytial rota- and coronaviral disease | |
RU2246317C1 (en) | Method for manufacturing vaccine against infectious laryngotracheitis in poultry | |
RU2214277C1 (en) | Virus vaccine against infectious laryngotracheitis in poultry | |
RU2269361C2 (en) | Associated emulsion inactivated vaccine against porcine reproductive and respiratory syndrome (prrs) and porcine parvovirus infection (ppvi) | |
RU2812330C1 (en) | Associated vaccine against panleukopenia, calicivirus and feline viral rhinotracheitis | |
EP0861665A1 (en) | Infectious bursitis vaccine | |
RU2395299C1 (en) | Inactivated combined vaccine against cattle infectious rhinotracheitis, virus diarrhoea, rota-, coronavirus disease and leptospirosis | |
RU2283137C2 (en) | Inactivated emulsified vaccine against bird infectious bursal disease | |
RU2504400C1 (en) | Inactivated emulsion associated vaccine for cattle parainfluenza-3, infectious rhinotracheitis and viral diarrhoea | |
RU2301079C2 (en) | Inactivated adsorbed vaccine against cattle coronaviral infection |