RU2234087C2 - Способ определения степени стабильности клеточных мембран - Google Patents
Способ определения степени стабильности клеточных мембран Download PDFInfo
- Publication number
- RU2234087C2 RU2234087C2 RU2002116191/15A RU2002116191A RU2234087C2 RU 2234087 C2 RU2234087 C2 RU 2234087C2 RU 2002116191/15 A RU2002116191/15 A RU 2002116191/15A RU 2002116191 A RU2002116191 A RU 2002116191A RU 2234087 C2 RU2234087 C2 RU 2234087C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- retinol
- amount
- tryptophan
- membranes
- stability
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике. Способ предназначен для диагностики адаптации людей к экстремальным экологическим условиям. Определяют количества ретинола и триптофана в суспензии мембран эритроцитов. О стабильности судят по отклонению от нормы ретинол-показателя, представляющего собой отношение количества ретинола к количеству триптофана. Способ позволяет упростить диагностику.
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике клинической медицины. Может быть использован для диагностики и прогноза способов сохранения здоровья людей и их адаптации к экстремальным экологическим условиям.
Известен способ определения ретинола в клеточных мембранах, заключающийся в определении абсолютного количества ретинола [Спиричев В.В., Конь И.Я. Биологическая роль жирорастворимых витаминов (обзор литературы) // Итоги науки и техники. Серия физиология человека и животных - М., 1989. - Т.37. - 223 с.].
Известный способ не позволяет учитывать взаимосвязи ретинола и триптофанов. Это снижает достоверность характеристики структурного состоянии клеточной мембраны.
Задачей изобретения является повышение информативности и расширение функциональных возможностей диагностики клеточных мембран эритроцитов.
Задача решается тем, что в способе определения стабильности клеточных мембран эритроцитов, заключающемся в определении количества ретинола в суспензии мембран эритроцитов, согласно изобретению в суспензии дополнительно определяют количество триптофанов, а о стабильности клеточных мембран судят по отклонению от нормы ретинол-показателя, представляющего собой отношение количества ретинола к количеству триптофанов.
где РП - ретинол-показатель,
Р - количество ретинола (мкмоль/л),
Тр - количество триптофанов (мг/%).
Ретинол из кровяного русла к клеточным мембранам доставляется белками липопротеидной природы. В самой же клеточной мембране они связываются как с фосфолипидами, расположенными на поверхности мембран, так и с белковыми структурами, ретинолсвязывающими белками. При этом связанный с белковыми структурами ретинол приобретает иное свойство - становится более гидрофилен. В таком состоянии ретинол способен сохранять от окисления мембранные триптофаны, являющиеся частью интегральных транспортных белков. Отсутствие ретинолсвязывающих белков в клеточных мембранах способствует свободному поступлению ретинола в мембрану в большей степени, чем это необходимо. В большом количестве и в свободном состоянии ретинол агрессивен, в виду высокой степени ненасыщенности. В таком состоянии ретинол быстро становится субстратом окисления и может быть причиной лизиса клеточной мембраны и в конечном итоге гибели клетки.
Триптофан входит в структуру интегральных белков мембран эритроцитов, относится к незаменимым ароматическим аминокислотам. Количество триптофанов является показателем количества транспортных белков в эритроцитарных мембранах, поддерживающих стабильность мембраны и клетки в целом.
Ретинол-показатель, представляющий собой отношение количества ретинола к количеству триптофанов позволяет выявить оптимальное количество ретинола для стабильности мембран эритроцитов с определенным количеством триптофанов.
Способ осуществляют следующим образом по стандартной методике. Определяют количество триптофанов и ретинола при помощи спектрофлуориметра Hitachi.
Количество ретинола определяют следующим образом. Из венозной крови готовят суспензию эритроцитов в количестве 0,04 мл + 0,2 мл воды. Эту смесь встряхивают 30 минут. Затем в полученную жидкость добавляют 0,2 мл этанола и снова встряхивают 30 минут. После добавления 1,0 мл гексана встряхивают еще 40 минут. В заключении эту смесь центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10 минут. Измеряют интенсивность флуоресценции суспензии мембран эритроцитов и стандарта ретинола (2,5 мкмоль/л) при длине волны 460 нм и длине волны возбуждения флуоресценции - 335 нм.
Количество триптофанов определяют одним из известных физико-химических методов, например, спектрофлуориметрическим. [Добрецов Г.Е., Спирин М.М., Карякин А.В. Исследование с помощью индуктивно-резонансного переноса энергии пространственных взамоотношений между белками и липидами в мембранах микросом печени // Биохимия. - 1981. - Т.46, вып.3. - С.504-511]. Готовят суспензию мембран эритроцитов. К 50 мкл эритроцитарной массы прибавляют 1 мл физиологического раствора и 5 мл дистилированной воды. Центрифугируют 15 мин при скорости 8 тыс.об/мин. Сливают надосадочную жидкость, оставляя пятно на дне пробирки. Добавляют 1, 5 мл физиологического раствора. Гомогенизируют смесь при помощи ступки до получения суспензии. Помещают в кварцевую ультромикрокювету. Измеряют интенсивность флуфлуоресценции при помощи спектрофлуориметра Hitachi при длине волны 310 нм и длине волны возбуждения 284 нм. Затем по калибровочной таблице определяют количество триптофанов в мг/%.
где С пробы - концентрация пробы (мкмоль/л),
Фл.пробы - показатель флуоресценции пробы (фл.ед.),
Фл.ст - показатель флуоресценции стандарта (фл.ед.),
С ст - показатель концентрации стандартной пробы (мкмоль/л).
Ретинол-показатель рассчитывают по формуле:
и сравнивают его с нормальной, предварительно определенной по результатам обследования пациентов величиной, равной 1,00-1,60 отн.ед. Отклонение от нормы свидетельствует о нарушении соотношения ретинола и триптофанов, о снижении их биологической активности для нормального функционирования мембран.
Пример 1. Исследованы эритроцитарные мембраны у пациента N 1.
Вывод: отклонение от нормы составляет 0,93 отн.ед. Для повышения уровня здоровья необходимо употреблять пищу богатую жирорастворимыми витаминами и белками.
Пример 2. Исследованы эритроцитарные мембраны пациента № 2.
Вывод: эритроцитарные мембраны соответствуют норме. Можно думать о нормальном функционировании антиокислительной системы мембран эритроцитов, что способствует сохранению уровня здоровья.
Предлагаемый способ способствует повышению информативности и расширению функциональных возможностей диагностики стабильности клеточных мембран за счет определения ретинол-показателя.
Claims (1)
- Способ определения стабильности клеточных мембран эритроцитов, заключающийся в определении количества ретинола в суспензии мембран эритроцитов, отличающийся тем, что в суспензии дополнительно определяют количество триптофанов, а о стабильности судят по отклонению от нормы ретинол-показателя, представляющего собой отношение количества ретинола к количеству триптофанов.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2002116191/15A RU2234087C2 (ru) | 2002-06-19 | 2002-06-19 | Способ определения степени стабильности клеточных мембран |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2002116191/15A RU2234087C2 (ru) | 2002-06-19 | 2002-06-19 | Способ определения степени стабильности клеточных мембран |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2002116191A RU2002116191A (ru) | 2003-03-10 |
RU2234087C2 true RU2234087C2 (ru) | 2004-08-10 |
Family
ID=33412550
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2002116191/15A RU2234087C2 (ru) | 2002-06-19 | 2002-06-19 | Способ определения степени стабильности клеточных мембран |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2234087C2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2528909C1 (ru) * | 2013-06-18 | 2014-09-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НЦРВХ" СО РАМН) | Способ определения структурного состояния мембраны эритроцитов |
-
2002
- 2002-06-19 RU RU2002116191/15A patent/RU2234087C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
СПИРИВЕЧ В.В., КОНЬ И.Я. Биологическая роль жирорастворимых витаминов. ВИНИТИ. Итоги науки и техники. Серия "Физиология человека и животных". - М. 1989, т. 37. СМИРНОВА М.И. Витамины. - М.: Медицина, 1974. ДУШЕЙКО А.А. Витамин А. Обмен и функции. - Киев: Наукова думка, 1989. ХАЛМУРАТОВ А.Г. и др. Транспорт жирорастворимых витаминов. - Киев: Наукова думка, 1980, с.212. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2528909C1 (ru) * | 2013-06-18 | 2014-09-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НЦРВХ" СО РАМН) | Способ определения структурного состояния мембраны эритроцитов |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20200069737A1 (en) | Nanofraction immune modulators, preparations and compositions including the same, and associated methods | |
RU2310850C1 (ru) | Способ прогнозирования послеоперационного нагноения раны | |
WO2019153748A1 (zh) | 用于从生物体液中富集或检测星形胶质细胞来源的外泌体的方法 | |
US20120196935A1 (en) | Methods for detecting autodigestion | |
GB1560729A (en) | Counting of leucocytes | |
SU1767433A1 (ru) | Способ определени инсулинорезистентности имунного генеза у больных сахарным диабетом I типа | |
RU2234087C2 (ru) | Способ определения степени стабильности клеточных мембран | |
RU2459207C1 (ru) | Способ прогнозирования устойчивости мембран эритроцитов при нарастании в них перекисей жирных кислот и обострении во время гестации герпес-вирусной инфекции | |
EP2555790B1 (en) | THERAPEUTIC USE OF THE ß2-MICROGLOBULIN PROTEIN | |
RU2234088C2 (ru) | Способ определения стабильности клеточных мембран эритроцитов | |
RU2612010C1 (ru) | Способ определения угрозы формирования гемической анемии у беременных на третьем триместре гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции, подавляющей активность SH-групп в эритроцитах и приводящей к снижению оксигенации гемоглобина | |
Patriche et al. | Determination of some normal serum parameters in juvenile Sevruga sturgeons Acipenser stellatus (Pallas, 1771). | |
RU2523413C1 (ru) | СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РЕВМАТОИДНОГО АРТИРИТА ПО НАЛИЧИЮ АНТИТЕЛ К МОДИФИЦИРОВАННОМУ ЦИНТРУЛЛИНИРОВАННОМУ ВИМЕНТИНУ (Anti-MCV) В РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ | |
JPWO2020162388A1 (ja) | パーキンソン病と多系統萎縮症との判別方法および判別キット | |
JP3490705B2 (ja) | 骨吸収性マーカーのための臨床用コントロール材料 | |
JPH10267932A (ja) | 生物系による試験法 | |
Lamperez et al. | Normal C-reactive protein values for captive chimpanzees (Pan troglodytes) | |
Handayani | NOVEL METHOD THYROID HORMONE MEASUREMENT | |
RU2467334C2 (ru) | СПОСОБ ОЦЕНКИ МИКРОВЯЗКОСТИ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПУТЕМ ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЭФФИЦИЕНТА ЭКСИМЕРИЗАЦИИ ПИРЕНА Кэкс У БЕРЕМЕННЫХ, ПЕРЕНЕСШИХ ОБОСТРЕНИЕ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ТРЕТЬЕМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ, С УЧЕТОМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОЦЕНТНОГО СОДЕРЖАНИЯ ОЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ | |
CN209296429U (zh) | 适合基层医院使用的尿液外泌体富集系统 | |
RU2131217C1 (ru) | Способ диагностики гастроинтестинальной пищевой аллергии | |
RU2405153C2 (ru) | Способ приготовления проб крови с экстрактами пищевых продуктов | |
RU2008680C1 (ru) | Способ определения биологической активности вещества | |
RU2195666C2 (ru) | Способ комплексной диагностики аллергии у детей с инфекционной патологией | |
RU2056862C1 (ru) | Способ получения антигенного препарата для определения антикардиальных антител |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20040620 |