RU2467334C2 - СПОСОБ ОЦЕНКИ МИКРОВЯЗКОСТИ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПУТЕМ ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЭФФИЦИЕНТА ЭКСИМЕРИЗАЦИИ ПИРЕНА Кэкс У БЕРЕМЕННЫХ, ПЕРЕНЕСШИХ ОБОСТРЕНИЕ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ТРЕТЬЕМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ, С УЧЕТОМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОЦЕНТНОГО СОДЕРЖАНИЯ ОЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ - Google Patents
СПОСОБ ОЦЕНКИ МИКРОВЯЗКОСТИ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПУТЕМ ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЭФФИЦИЕНТА ЭКСИМЕРИЗАЦИИ ПИРЕНА Кэкс У БЕРЕМЕННЫХ, ПЕРЕНЕСШИХ ОБОСТРЕНИЕ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ТРЕТЬЕМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ, С УЧЕТОМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОЦЕНТНОГО СОДЕРЖАНИЯ ОЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2467334C2 RU2467334C2 RU2010135468/15A RU2010135468A RU2467334C2 RU 2467334 C2 RU2467334 C2 RU 2467334C2 RU 2010135468/15 A RU2010135468/15 A RU 2010135468/15A RU 2010135468 A RU2010135468 A RU 2010135468A RU 2467334 C2 RU2467334 C2 RU 2467334C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oleic acid
- microviscosity
- erythrocyte
- pyrene
- coefficient
- Prior art date
Links
Abstract
Изобретение применяют для оценки микровязкости мембран эритроцитов. Данный способ включает вычисление коэффициента эксимеризации пирена Кэкс у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в третьем триместре гестации. Дополнительно определяют содержание олеиновой кислоты в мембранах эритроцитов. В случае, если при титре антител 1:12800 наблюдается снижение содержания олеиновой кислоты до 16,52±0,14%; снижение Кэкс в липидном бислое до 0,60±0,005; Кэкс в белок-липидных контактах до 0,79±0,004 - оценивают повышение микровязкости мембран эритроцитов.
Description
Цель исследования - показать повышение микровязкости мембран эритроцитов, находящейся в обратной зависимости от коэффициента эксимеризации пирена, исследуется путем определения коэффициента эксимеризации пирена, который равен отношению интенсивности флюоресценции эксимеров к интенсивности флюоресценции мономеров при одновременном включении методом газовой хроматографии содержания олеиновой кислоты на фоне обострения в организме герпес-вирусной инфекции.
Олеиновая кислота рассматривается в настоящее время как сильный эндогенный антиоксидант с наиболее высокой константой скорости реакции [5, 6]. В связи с этим, при изменении содержания олеиновой кислоты в мембранах эритроцитов при наличии в организме вирусных воспалительных процессов, это может тяжело отразиться на устойчивости мембран эритроцитов, приводя в конечном итоге к повышению их микровязкости.
Прототипом избран способ выявления нарушения микровязкости мембран эритроцитов в крови у онкологических больных [1, 2, 3, 4].
В вышеуказанных работах предполагают, что микровязкость зависит от белков, включенных в мембрану эритроцитов, или, как это следует из выводов Горошинской И.А., Глотиной Л.Ю. и др. [2], конкретный фактор, влияющий на изменение микровязкости, вовсе не исследован. Авторы ссылаются на то, что это явление наступает при онкологическом состоянии пациента: рак желудка, мочевого пузыря, яичников, не исследовав причинного компонента, влияющего на микровязкость.
С нашей точки зрения вышеприведенные данные имеют следующие недостатки:
1. Микровязкость мембран эритроцитов зависит не только от белкового состава, но также и от липидов, которые в мембране образуют липид-белковые комплексы.
2. Нет сведений о детализации, какая из жирных кислот оказывает влияние на микровязкость мембран эритроцитов.
3. Нет сведений, влияет ли на этот процесс обострение в организме герпес-вирусной инфекции.
Заявленный способ имеет следующие приемы:
1. Измерение микровязкости мембран эритроцитов проводили методом латеральной диффузии гидрофобного флюоресцентного зонда пирена. Определение микровязкости основано на образовании эксимеров (активных димеров) пирена в липидном окружении [3, 4]. Флюоресценцию пирена измеряли спектрофлюорометрически на спектрофлюориметре «Hitachi» (Япония). Для определения микровязкости липидного бислоя находили интенсивность флюоресценции или свечение пирена при длине волны возбуждения 334 нм, длина волны мономеров - 395 нм, длина волны эксимеров - 470 нм. Для определения микровязкости зоны липид-белковых контактов длина волны возбуждения - 286 нм, длина волны мономеров - 395 нм, длина волны эксимеров - 470 нм. Оценка микровязкости основывается на вычислении коэффициента эксимеризации пирена (Кэкс=F470/F395), который равен отношению интенсивности флюоресценции эксимеров к интенсивности флюоресценции мономеров. Коэффициент эксимеризации находится в обратной зависимости от микровязкости и обозначается как Fэ/Fм.
2. Одновременно с помощью хроматографа «Кристалл 2000м», ЗАО СКВ «Хроматэк» (Россия) определяли жирные кислоты - в нашем случае олеиновую кислоту в мембранах эритроцитов.
Липиды экстрагировали по методу Фолча [7], метилирование жирных кислот осуществляли по методу J.Carren [8].
Компьютерным методом определяли процентное содержание олеиновой кислоты у здоровых беременных и беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции (титр антител 1:12800) на третьем триместре гестации.
3. Титр антител к вирусу простого герпеса определяли иммуноферментным методом на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (USA).
4. Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденные Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. №226.
В наших исследованиях при изучении изменения микровязкости мембран эритроцитов, мы исследовали процентное содержание в мембранах эритроцитов олеиновой кислоты, которая как эндогенный антиоксидант в норме поддерживает текучесть мембранного бислоя.
Однако при обострении герпес-вирусной инфекции у беременных в третьем триместре процентное содержание олеиновой кислоты в мембранах эритроцитов, выявленных методом газовой хроматографии, резко снижалось до 16,52±0,14% (контроль - 19,86±0,21%; p<0,001).
На этом фоне резко менялась и микровязкость мембран эритроцитов. Коэффициент эксимеризации пирена, определяющий микровязкость, составлял в липидном бислое 0,60±0,005 Fэ/Fм (контроль - 0,82±0,003 Fэ/Fм; р<0,001), а в белок-липидном бислое - 0,79±0,04 Fэ/Fм (контроль - 1,0±0,004 Fэ/Fм; p<0,001).
Таким образом, влияние герпеса (титр антител к вирусу герпеса - 1:12800 в третьем триместре гестации) конкретно снижает процентное содержание в мембранах эритроцитов олеиновой кислоты, поддерживающей как эндогенный антиоксидант, так и микровязкость мембран эритроцитов, повышая ее. Снижение олеиновой кислоты как антиоксиданта в мембранах эритроцитов грозит их разрушением в периферической крови.
ЛИТЕРАТУРА
1. Владимиров Ю.А., Арчаков P.M. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. - М.: Наука, 1972. - 252 с.
2. Горшинская И.А., Глотина Л.Ю., Горло Е.И., Рова Т.А., Бордюшков Ю.Н. Изменение микровязкости мембран лимфоцитов и эритроцитов крови у онкологических больных // Вопросы мед. химии. - 1999. - Т.45. - №1. - С.53-57.
3. Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липопротеинов. - М.: Наука, 1989. - 206 с.
4. Ишутина Н.А., Дорофиенко Н.Н., Андриевская И.А., Довжикова И.В., Болелова С.М. Изменение микровязкости мембран эритроцитов крови у беременных, инфицированных вирусом герпеса // Бюл. физиол. и патол. дыхания СО РАМН, Благовещенск, 2006. - Вып.23 (приложение). - С.16-18.
5. Титов В.Н. Атеросклероз как патология полиеновых жирных кислот. Биологические основы терапии атерогенеза. - М., 2002. - 201 с.
6. Титов В.Н. Олеиновая жирная кислота. Олеиновые, линолевые и линоленовые липопротеины низкой плотности // Клин. лабор. диагностика. - 2006. - №6. - С.3-13.
7. Carren J.P., Dubacy J.P-J. Adaptation of a micro-seale metod to the micro-seale for fatty acid methyl trausestenif: cation of biological lipid extracts // Chromatography, 1978. - Vol.151. - P.384-390.
8. Folch J., Lees М., Sloane G.H. A simple metod for the isolation and purification of total lipids from animals tissues // J. Biol. Chem., 1957. - Vol. 226. - P. 497-509.
Claims (1)
- Способ оценки микровязкости мембран эритроцитов, включающий вычисление коэффициента эксимеризации пирена Кэкс, отличающийся тем, что у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в третьем триместре гестации, дополнительно определяют содержание олеиновой кислоты в мембранах эритроцитов, и в случае, если при титре антител 1:12800 наблюдается снижение содержания олеиновой кислоты до 16,52±0,14%; снижение Кэкс в липидном бислое до 0,60±0,005; Кэкс в белок-липидных контактах до 0,79±0,004, то оценивают повышение микровязкости мембран эритроцитов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010135468/15A RU2467334C2 (ru) | 2010-08-24 | 2010-08-24 | СПОСОБ ОЦЕНКИ МИКРОВЯЗКОСТИ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПУТЕМ ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЭФФИЦИЕНТА ЭКСИМЕРИЗАЦИИ ПИРЕНА Кэкс У БЕРЕМЕННЫХ, ПЕРЕНЕСШИХ ОБОСТРЕНИЕ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ТРЕТЬЕМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ, С УЧЕТОМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОЦЕНТНОГО СОДЕРЖАНИЯ ОЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010135468/15A RU2467334C2 (ru) | 2010-08-24 | 2010-08-24 | СПОСОБ ОЦЕНКИ МИКРОВЯЗКОСТИ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПУТЕМ ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЭФФИЦИЕНТА ЭКСИМЕРИЗАЦИИ ПИРЕНА Кэкс У БЕРЕМЕННЫХ, ПЕРЕНЕСШИХ ОБОСТРЕНИЕ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ТРЕТЬЕМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ, С УЧЕТОМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОЦЕНТНОГО СОДЕРЖАНИЯ ОЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2010135468A RU2010135468A (ru) | 2012-02-27 |
| RU2467334C2 true RU2467334C2 (ru) | 2012-11-20 |
Family
ID=45851845
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010135468/15A RU2467334C2 (ru) | 2010-08-24 | 2010-08-24 | СПОСОБ ОЦЕНКИ МИКРОВЯЗКОСТИ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПУТЕМ ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЭФФИЦИЕНТА ЭКСИМЕРИЗАЦИИ ПИРЕНА Кэкс У БЕРЕМЕННЫХ, ПЕРЕНЕСШИХ ОБОСТРЕНИЕ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ТРЕТЬЕМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ, С УЧЕТОМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОЦЕНТНОГО СОДЕРЖАНИЯ ОЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2467334C2 (ru) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2362566C2 (ru) * | 2003-10-22 | 2009-07-27 | Энзимотек Лтд. | Липиды, содержащие жирные кислоты омега-3 и омега-6 |
-
2010
- 2010-08-24 RU RU2010135468/15A patent/RU2467334C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2362566C2 (ru) * | 2003-10-22 | 2009-07-27 | Энзимотек Лтд. | Липиды, содержащие жирные кислоты омега-3 и омега-6 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ГОРОШИНСКАЯ И.А. и др. Изменение микровязкости мембран лимфоцитов и эритроцитов крови у онкологических больных. - Вопросы медицинской химии, 1999, т.45, №1, с.53-57. ЛУЦЕНКО М.Т. и АНДРИЕВСКАЯ И.А. Способ прогнозирования устойчивости мембран эритроцитов при обострении герпес-вирусной инфекции у беременных. - Медицинская информатика, 2009, №1(19), с.27-30. РЯБОВА Е.А. и др. Характеристика мембран лимфоцитов периферической крови у больных туберкулезом легких. 05.08.2009. Найдено из Интернет, оn-line. Найдено 27.04.2011. http://tele-conf.ru/teoreticheskaya-i-prikladnaya-biologiya-i-meditsina/harakteristika-membran-limfotsitov-perifericheskoy-krovi-u-bolnyih-tuberkulezom-legkih.html. ГИДУЛЯНОВА К.В. и др. Жирнокислотный состав плазмы и мембран эритроцитов больных хроническим гломерулонефритом. Ученые записки Таврического национального университета им. В.И. Вернадского. Серия "Биология, химия". Том 19(58) 2006, №4, с.56-62. TRYBALA E ET AL. Herpes simplex virus type 1-induced hemagglutinati * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2010135468A (ru) | 2012-02-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Weel et al. | Increased expression of NLRP3 inflammasome in placentas from pregnant women with severe preeclampsia | |
| Da Broi et al. | Increased concentration of 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine in follicular fluid of infertile women with endometriosis | |
| Mensah-Brown et al. | Streptozotocin-induced diabetic nephropathy in rats: the role of inflammatory cytokines | |
| Berger et al. | The lateral habenula directs coping styles under conditions of stress via recruitment of the endocannabinoid system | |
| Celec et al. | Salivary markers of kidney function—Potentials and limitations | |
| Liu et al. | Peripheral oxidative biomarkers constitute a valuable indicator of the severity of oxidative brain damage in acute cerebral infarction | |
| Lappas et al. | Advanced glycation endproducts mediate pro-inflammatory actions in human gestational tissues via nuclear factor-kB and extracellular signal-regulated kinase 1/2 | |
| Heidarpour et al. | Oxidant/antioxidant status in cattle with liver cystic echinococcosis | |
| RU2310850C1 (ru) | Способ прогнозирования послеоперационного нагноения раны | |
| Shukla et al. | Deletion of TLR-4 attenuates fetal alcohol exposure-induced gene expression and social interaction deficits | |
| Gómez et al. | Plasma and urinary glycosaminoglycans as evidence for endotheliopathy in a swine burn model | |
| Baldissarelli et al. | Increased cytokines production and oxidative stress are related with purinergic signaling and cell survival in post-thyroidectomy hypothyroidism | |
| Olsen et al. | NBCn1 increases NH4+ reabsorption across thick ascending limbs, the capacity for urinary NH4+ excretion, and early recovery from metabolic acidosis | |
| Almeida et al. | Renal developmental disturbances and their long-term consequences in female pups from vitamin D-deficient mothers: involved mechanisms | |
| RU2467334C2 (ru) | СПОСОБ ОЦЕНКИ МИКРОВЯЗКОСТИ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПУТЕМ ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЭФФИЦИЕНТА ЭКСИМЕРИЗАЦИИ ПИРЕНА Кэкс У БЕРЕМЕННЫХ, ПЕРЕНЕСШИХ ОБОСТРЕНИЕ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В ТРЕТЬЕМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ, С УЧЕТОМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОЦЕНТНОГО СОДЕРЖАНИЯ ОЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ | |
| RU2459207C1 (ru) | Способ прогнозирования устойчивости мембран эритроцитов при нарастании в них перекисей жирных кислот и обострении во время гестации герпес-вирусной инфекции | |
| A MohammedJumaah | Estimation of uric acid, urea, creatinine and creatinine clearance in the serum of preeclamptic women | |
| RU2540425C1 (ru) | Способ оценки нарушения оксигенации гемоглобина при снижении микровязкости мембран эритроцитов периферической крови беременных на третьем триместре гестации и обострении цитомегаловирусной инфекции | |
| Hryshko et al. | Circadian rhythm of metabolism indicators in healthy people according to saliva study findings | |
| RU2687971C1 (ru) | Способ оценки повреждающего действия цитомегаловирусной инфекции на содержание миристиновой кислоты в крови пуповины новорожденных от матерей, перенесших в третьем триместре реактивацию цитомегаловирусной инфекции | |
| Damle et al. | Postshock mesenteric lymph induces endothelial NF-κB activation | |
| JP4196265B2 (ja) | 炎症反応を含む疾患をインビトロ診断またはモニターするための方法およびキット | |
| RU2458348C1 (ru) | Способ оценки структуры мембран эритроцитов периферической крови беременных при обострении герпес-вирусной инфекции | |
| RU2454670C1 (ru) | Способ оценки влияния активности аргининдегидрогеназы на уровень гистамина в крови беременных, перенесших в третьем триместре гестации обострение герпес-вирусной инфекции с титром антител герпеса 1:12800 | |
| RU2497116C1 (ru) | Способ определения атерогенности крови человека |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20120918 |