RU2215033C2 - Способ получения концентрата микробных клеток в производстве чумных вакцин - Google Patents
Способ получения концентрата микробных клеток в производстве чумных вакцин Download PDFInfo
- Publication number
- RU2215033C2 RU2215033C2 RU2001117972A RU2001117972A RU2215033C2 RU 2215033 C2 RU2215033 C2 RU 2215033C2 RU 2001117972 A RU2001117972 A RU 2001117972A RU 2001117972 A RU2001117972 A RU 2001117972A RU 2215033 C2 RU2215033 C2 RU 2215033C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- concentrate
- microfiltration
- microbial
- production
- plague
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области иммунологии. Нативную культуру Y.pestis выращивают методом глубинного культивирования. Затем отбирают осадок и подвергают его микрофильтрации. Микрофильтрацию осуществляют с размером пор 0,2 мкм в режиме тангенциального потока жидкости при рабочем давлении 0,15-0,2 МПа и производительности его фильтрату 6-8 дм3•ч-1. Способ позволяет ускорить процесс получения концентрата микробных клеток и одновременно увеличить выход концентрата с единицы объема среды. 3 табл.
Description
Изобретение относится к технологии производства медицинских иммуно-биологических препаратов, а именно к способам получения концентрата микробных клеток в производстве чумной живой сухой вакцины.
Известен способ получения концентрата микробных клеток Y.pestis путем выращивания микробной массы на плотных питательных средах и смыва ее средой высушивания (Регламент производства 37-86 "Вакцина чумная живая сухая"). Общим с заявляемым способом является получение концентрата микробных клеток, пригодного для приготовления чумных вакцин.
К недостаткам данного способа следует отнести необходимость смыва микробной массы с плотной питательной среды, вследствие чего в микробную взвесь попадают остатки питательной среды и продукты метаболизма, что отрицательно сказывается на качестве вакцин.
Наиболее близким к заявляемому является способ получения концентрата микробных клеток в производстве вакцины чумной живой сухой (Регламент производства 377-97 "Вакцина чумная живая сухая"), предусматривающий выращивание нативной культуры чумного микроба, первичное осаждение микробной биомассы в аппарате-ферментере в течение 6 ч при температуре 18...20oС, отбор осадка в аппарат-осадитель или 20-литровые бутыли и концентрирование осаждением в течение 18...48 ч при температуре 4...8oС. Выход концентрата составляет 2...3% от объема среды. Общим с заявляемым способом является получение концентрата микробных клеток, пригодного для приготовления чумных вакцин.
К недостаткам данного способа следует отнести его продолжительность и относительно низкий выход концентрата с единицы объема среды.
Задачей изобретения является ускорение процесса получения концентрата микробных клеток с одновременным увеличением выхода концентрата с единицы объема среды.
Поставленная задача достигается тем, что концентрирование микробной массы осуществляют путем микрофильтрации культуры чумного микроба через мембраны с размером пор 0,2 мкм в режиме тангенциального потока жидкости.
Сравнение существенных признаков предлагаемого технического решения и прототипа показывает, что общим для них является процесс культивирования микробных клеток в жидкой питательной среде, а также процесс первичного осаждения биомассы непосредственно в аппарате-ферментере.
Отличием предлагаемого способа является то, что процеcc получения концентрата микробных клеток в производстве чумных вакцин осуществляют путем микрофильтрации культуры чумного микроба в режиме тангенциального потока жидкости через мембраны с размером пор 0,2 мкм.
Возможность использования микрофильтрационного концентрирования микробных клеток в производстве чумных вакцин установлена нами экспериментальным путем и неизвестна из доступных источников информации.
Сущность предложенного способа заключается в следующем. Нативную культуру вакцинного штамма чумного микроба после завершения процесса культивирования оставляют в аппарате-ферментере для первичного осаждения на 6 ч. Осаждение проходит при температуре 18...20oС. Далее отбирается образовавшийся осадок в 20-литровые бутыли и подвергается микрофильтрации на мембранах с размером пор 0,2 мкм при температуре 18...20oС, рабочем давлении 0,15...0,2 МПа, производительности по фильтрату 6...8 дм3ч-1.
Характеристика концентрата микробных клеток, полученного указанным способом, представлена в табл.1. В качестве образца сравнения дана характеристика осадка микробных клеток способа-прототипа по РП 377-97.
По результатам, представленным в табл.1, видно, что концентрат микробных клеток, полученный с использованием метода микрофильтрации, по своей характеристике не уступает приготовленному традиционным способом и соответствует требованиям НТД.
Наличие причинно-следственной связи между совокупностью существенных признаков заявляемого объекта и достигаемым техническим результатом, представлено в табл.2.
Изобретение позволяет получать концентрат микробных клеток, по своим физико-химическим и биологическим характеристикам пригодный для использования в производстве чумных вакцин.
Возможность осуществления заявляемого изобретения показана следующими примерами.
Пример 1. Получение концентрата микробных клеток.
Нативная культура Y.pestis штамма ЕВ, выращенная методом глубинного культивирования в аппарате-ферментере V=0,250 м3 в течение 27 ч при температуре 26. . .28oС, имеет следующие характеристики: рН=7,4 ед. рН, концентрация микробных клеток (по ОСО мутности ГИСК им. Л.А.Тарасовича) 40 млрд. кл. мл-1, ПМФ отсутствует. После завершения процесса культивирования микробную суспензию оставляют в аппарате-ферментере на 6 ч при температуре 18...20oС. Затем отбирают осадок в объеме 40 л в две 20-литровые бутыли и подвергают его микрофильтрации на ультра- микрофильтрационной установке "Сартокон-мини" через мембраны с размером пор 0,2 мкм при температуре 18...20oС, рабочем давлении 0,15. . . 0,2 МПа, производительности по фильтрату 6...8 дм3ч-1. В процессе фильтрации, после сокращения объема микробного осадка втрое, через каждые 10 мин отбирают стерильно пробы в объеме 5 мл для определения концентрации микробов по ОСО мутности ГИСК им. Л.А.Тарасовича. При достижении концентрации 150. . .170 млрд. кл. мл-1 процесс микрофильтрации прекращают. Общая продолжительность концентрирования двух 20-литровых бутылей составляет 12. . .18 ч. Выход концентрата микробных клеток 8...10 л (3,5...4% от объема среды).
Пример 2. Концентрирование выбракованного полуфабриката чумной вакцины (по концентрации микробных клеток).
Культивирование микробов Y. pestis проводится как указано в примере 1, однако вследствие ряда причин не удается вырастить нативную культуру с требуемой по регламенту концентрацией микробных клеток (по ОСО мутности ГИСК им. Л. А.Тарасовича), что приводит к выбраковке данной культуры. Применение метода микрофильтрации позволяет сконцентрировать нативную культуру с низким содержанием микробных клеток до микробной взвеси с требуемой концентрацией. Первичное осаждение и микрофильтрация проводятся, как указано в примере 1. Продолжительность процесса микрофильтрационного концентрирования составляет 10. . . 14 ч. Выход концентрата микробных клеток 4...5 л (1,5...2% от объема среды).
Пример 3. Концентрирование плохоосаждаемых (седиментационно-устойчивых) культур.
Культивирование микробов Y.pestis проводится, как указано в примере 1. Нативная культура по своим характеристикам соответствует требованиям регламента, но при осаждении в аппаратах-осадителях или 20-литровых бутылях по истечении 48 ч осадок не сформирован, что не позволяет получить микробную взвесь с требуемой концентрацией микробов. Весь объем неосаждаемой культуры подвергают микрофильтрации, как указано в примере 1, что позволяет получить микробную взвесь с требуемыми характеристиками. Выход концентрата микробных клеток составляет 8...10 л (3,5...4% от объема среды).
Пример 4. Характеристика вакцины чумной живой сухой, приготовленной с применением заявляемого способа получения концентрата микробных клеток и способа-прототипа.
Характеристика вакцины чумной живой сухой, приготовленной с применением заявляемого способа получения концентрата микробных клеток и способа-прототипа, дана в табл.3.
Claims (1)
- Способ получения концентрата микробных клеток в производстве чумных вакцин, предусматривающий осаждение биомассы в аппарате-ферментере и концентрирование, отличающийся тем, что концентрирование осуществляют микрофильтрацией через мембраны с размером пор 0,2 мкм в режиме тангенциального потока жидкости при рабочем давлении 0,15-0,2 МПа и производительности по фильтрату 6-8 дм3•ч-1.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2001117972A RU2215033C2 (ru) | 2001-06-27 | 2001-06-27 | Способ получения концентрата микробных клеток в производстве чумных вакцин |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2001117972A RU2215033C2 (ru) | 2001-06-27 | 2001-06-27 | Способ получения концентрата микробных клеток в производстве чумных вакцин |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2001117972A RU2001117972A (ru) | 2003-07-20 |
RU2215033C2 true RU2215033C2 (ru) | 2003-10-27 |
Family
ID=31988230
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2001117972A RU2215033C2 (ru) | 2001-06-27 | 2001-06-27 | Способ получения концентрата микробных клеток в производстве чумных вакцин |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2215033C2 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2493872C1 (ru) * | 2012-08-08 | 2013-09-27 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации ( ФГУП "НПО "Микроген" Минздрава России) | Способ очистки вируса гриппа |
WO2022036298A1 (en) * | 2020-08-14 | 2022-02-17 | Iliad Biotechnologies, Llc | Lyophilized live bordetella vaccines |
-
2001
- 2001-06-27 RU RU2001117972A patent/RU2215033C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Регламент производства №377-97. Вакцина чумная живая сухая, МЗ СССР, 23.04.1997. Регламент производства №37-86. Вакцина чумная живая сухая. МО РФ, 24.12.1986. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2493872C1 (ru) * | 2012-08-08 | 2013-09-27 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации ( ФГУП "НПО "Микроген" Минздрава России) | Способ очистки вируса гриппа |
WO2022036298A1 (en) * | 2020-08-14 | 2022-02-17 | Iliad Biotechnologies, Llc | Lyophilized live bordetella vaccines |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20220325708A1 (en) | Alternating tangential flow rapid harvesting | |
Paterna et al. | Isolation of extracellular vesicles from microalgae: a renewable and scalable bioprocess | |
CN103436480B (zh) | 一种稻曲病菌薄壁分生孢子的平板培养制备方法 | |
CN101372701A (zh) | 一种金针菇多糖的制备方法 | |
CN1309820C (zh) | 一种能够无光照异养生长小球藻的培养方法 | |
RU2215033C2 (ru) | Способ получения концентрата микробных клеток в производстве чумных вакцин | |
JP2018157827A (ja) | 細胞培養上清の濾過 | |
CN102634447B (zh) | 一种微阵列透析室及利用该透析室的富集培养方法 | |
JP2009118785A (ja) | 底生性微細藻類の培養方法およびこれに利用する培養装置 | |
RU2681281C1 (ru) | Штамм бактерии Komagataeibacter hansenii - продуцент бактериальной целлюлозы | |
RU2085212C1 (ru) | Способ изготовления единого бруцеллезного антигена для ра, рск и рдск | |
CN1244689C (zh) | 海绵组织离散细胞形成细胞团的方法 | |
US20240002770A1 (en) | Systems, apparatus, and methods for cell culture | |
JP7526384B2 (ja) | 細胞培養基材 | |
CN107090020B (zh) | 食用菌凝集素及其在抑制棕囊藻生长中的应用 | |
RU2340356C2 (ru) | Способ получения сибиреязвенного протективного антигена | |
US20060172376A1 (en) | Method and device for the continuous production of biomolecules | |
RU2142508C1 (ru) | Способ промышленного получения полипептида с биологической активностью лейкоцитарного интерферона альфа-2 человека | |
RU2627182C1 (ru) | Штамм Aneurinibacillus migulanus и его применение для получения грамицидина С | |
CN114032265A (zh) | 发酵法生产胸苷工艺 | |
RU2353649C2 (ru) | Способ культивирования лептоспир | |
RU2144083C1 (ru) | Способ промышленного получения рекомбинантного гранулоцит-макрофаг-колониестимулирующего фактора человека | |
CN116970494A (zh) | 一种枝孢属真菌原生质体的制备方法及遗传转化体系的构建方法 | |
CN112359075A (zh) | 岩藻黄质规模化生产方法 | |
Hurst | Novel method for sequential batch recovery of biomass from a helical photobioreactor |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20070628 |